CC BY
33
УДК: 617-082:617.022
НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПРОФИЛАКТИКИ НОЗОКОМИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
А.М.ХАДЖИБАЕВ, К.Р.КАСЫМОВА, Н.Н.МУХАМЕДЖАНОВА
New possibilities of nosocomial infections prophylaxis A.M.KHADJIBAYEV, K.R.KASIMOVA, N.N.MUHAMEDJANOVA
Республиканский научный центр экстренной медицинской помощи
Изучение факторов адгезии у госпитальных штаммов микроорганизмов показало, что в порядке возрастания степени адгезивности микроорганизмы распределяются следующим образом: Exoli, C^lbicans, Staph.spp, Klebsiella pneumoniae, Ps^eruginosa. Установлено, что разные антисептики обладают различной степенью антиадгезивной активности по отношению к госпитальным штаммам патогенных микроорганизмов. Наибольшей антиадгезивной активностью по отношению к фурацилину, 0,1-1% спиртового раствора метиленового синего и 10% раствора хлорида натрия обладают 1% перекись водорода и 3% спиртовый раствор йода.
Ключевые слова: нозокомиальная инфекция, адгезивность, антиадгезивная активность, антисептики.
Mechanisms of bacterial pathogenesis have become an increasingly important subject as pathogens have become increasingly resistant to current antibiotics. The adhesion of microorganisms to the surface of host tissue is often a first step in pathogenesis and is a plausible target for new anti-infective agents. The microorganisms in order of adhesion increasing are distributed as follows: Escherichia coli, Candida albicans, Staphylococcus spp, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa. It was investigated that antisepsises possess the different anti-adhesive activity to pathogenic microorganisms. The most anti-adhesive activity possess 1% hydrogen peroxide and 3% alcohol solution of the iodine in comparison to furasilline, 0,1-1% alcohol solution of methylene blue and 10% solution of the chloride sodium.
Ключевые слова: nosocomial infection, adhesiveness, antiadhesive activity, antiseptics.
Госпитальная инфекция часто является причиной вторичного бактериального воспаления, которое существенно осложняет течение основного заболевания у пациентов, находящихся в отделениях интенсивной терапии (ОИТ), и является основной причиной летальных исходов [1,4]. Частота развития госпитальной инфекции в ОИТ колеблется от 7 до 32%, увеличиваясь до 48—79% у больных, находящихся на искусственной вентиляции легких. Число инфекционных осложнений существенно возрастает при увеличении сроков пребывания больного в ОИТ. Наиболее частыми и опасными среди них являются инфекции дыхательных путей, летальность при которых достигает в среднем 33% [5].
Необоснованное, бессистемное применение антибактериальных препаратов привело к селекции и распространению так называемых внутрибольничных, устойчивых штаммов микроорганизмов, в том числе штаммов, обладающих множественной устойчивостью (полирезистентностью) к традиционным антибактериальным средствам.
В этиологической структуре основных инфекций в ОИТ преобладают различные штаммы стафилококков (Staph.aureus — 30%, коагулазонегативные Staph.spp. — 19%) и P. aeruginosa (29%). Зачастую встречаются грамотрицательные бактерии Escherichia coli (13%), Acinetobacter spp. (9%), Klebsiella spp. (8%), Enterobacter spp. (7%), Proteus spp. (6%). Среди грамположи-тельных бактерий большое значение имеют Entero-coccus spp. (12%) и Streptococcus spp, характеризующиеся устойчивостью ко многим антибактериальным средствам. К детерминантам вирулентности патогенов относятся факторы адгезии, инвазии и цитоток-сичности [6].
Цель исследования — оценка факторов адгезии у госпитальных штаммов микроорганизмов и возможность снижения ее использованием различных антисептических препаратов.
Материал и методы
Исследования проведены в Бактериологической лаборатории РНЦМП на выделенных госпитальных штаммах микробов Staph.aureus , Staph.spp., Ps. aeru-ginosa, E.coli , Acinetobacter spp. , Klebsiella spp., Enter-obacter spp., Proteus spp.
Для изучения бактериальной адгезии готовят бактериальную взвесь изучаемого микроорганизма в концентрации 1 млрд/мл и взвесь эритроцитов в концентрации 1 млн/мл. Равные объемы указанных взвесей сливают в пробирки и перемешивают при 37°С в течение 30 минут. Готовят мазки крови на предметных (для световой микроскопии) стеклах. Для этого на обезжиренное предметное стекло наносят небольшую каплю крови, затем шлифованным стеклом легким и быстрым движением равномерно распределяют кровь по предметному стеклу. Готовый, правильно приготовленный мазок имеет желтоватый цвет. Покровные стекла фиксируют в 96° спирте, а затем окрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 30 минут. После обработки эритроциты и бактерии окрашиваются в светло-коричневый цвет. Готовые препараты получаются контрастными, артефактов не наблюдается, сохраняется архитектоника взаимодействия бактерий и эритроцитов. Для подсчета степени адгезии изучаемых микроорганизмов препараты исследуют под световым микроскопом. Адгезивные свойства оценивают по индексу адгезивности микроорганизмов (ИАМ) — по среднему числу адгезированных микробов на одном участвующем в адгезивном процессе эритроците или эпителиоците. Микроорганизмы считают неадге-зированным при ИАМ < 1,75, низкоадгезированными — при ИАМ от 1,76 до 2,5, среднеадгезированными — при ИАМ от 2,51 до 4,0, высокоадгезированными при ИАМ выше 4,0 [2,3]. Существенными считают различия между показателями ИАМ в контроле (с добавлением изотонического раствора хлорида натрия) и
А.М.Хаджибаев, К.Р.Касымова, Н.Н.Мухамеджанова
опыте (с добавлением одного из антисептиков), которые отличались на 20% и более.
Исследования выполняли с антисептиками фура-цилином, 3% спиртовым раствором йода, 1% раствором перекиси водорода, 0,1-1% спиртовым раствором метиленового синего, 10% раствором хлорида натрия.
Результаты и обсуждение
Исследования показали, что адгезия микроорганизмов связана с их вирулентностью и может варьировать в зависимости от выделенного штамма (табл. 1). В порядке возрастания степени адгезивности микроорганизмы распределяются следующим образом: Escherichia coli, Candida albicans, Staph.spp, Klebsiella pneumoniae, Ps.aeruginosa (рис. 1-4).
Установлено, что изученные антисептические средства при экспозиции менее 5 мин не обладают 100% эффективностью в отношении патогенных микроорганизмов, что подтверждаются данные других исследователей. Так, в растворе фурацилина Ps. aeruginosa сохраняется в количестве 106 КОЕ/мл [1]. Исследование влияния антисептиков на адгезивность микроорганизмов (табл. 2) показало, что исследуемые антисептики влияют на адгезивную способность микроорганизмов в различной степени.
Чаще всего ингибирующий адгезию эффект в отношении изучаемых видов микроорганизмов наблюдался при воздействии перекиси водорода (с частотой встречаемости признака p от 0,67 до 0,87) и спиртового раствора йода (p от 0,67 до 0,80). Метиленовый синий подавлял адгезию менее, чем половины изученных штаммов C.albicans и менее половины штам-
мов Staphylococcus и Klebsiella, но значительно большую часть штаммов кишечной палочки (p от 0,33 до 0,60). Наименьшей антиадгезивной активностью обладает гипертонический раствор хлорида натрия: инги-бирование адгезии имело место только у 1/4 всех штаммов E. rali. Препарат снижал адгезивность E. rali, C.albicans с частотой от 0,27 до 0,53. Высокий антиадгезивный эффект отмечался только в отношении E. mli (р от 0,43 до 0,53).
Более выраженный антиадгезивный эффект антисептиков в отношении изучаемых микроорганизмов, возможно, связан с механизмом действия этих антисептиков - непосредственно на структуры клеточной мембраны микробов, что приводит к ее деформации и изменению физико-химических свойств.
Выводы:
Госпитальные штаммы патогенных микроорганизмов обладают повышенной адгезивной способностью.
Разные антисептики обладают различной степенью антиадгезивной активности в отношении госпитальных штаммов патогенных микроорганизмов.
Наибольшую антиадгезивную активность по отношению к фурацилину, 0,1-1% спиртового раствора метиленового синего и 10% раствора хлорида натрия, обнаруживают 1% перекись водорода и 3% спиртовый раствор йода.
Фурацилин обладает максимальной антиадгезивной активностью в отношении большинства штаммов E.Coli, Candida, Klebsiella, Staphylococcus.
Наименьшей антиадгезивной микробной активностью обладает гипертонический раствор хлорида
Таблица 1. Распределение штаммов микроорганизмов по степени адгезивности
Микроорганизмы
Низкоадгезивные
Среднеадгезивные
Высокоадгезивные
абс. р абс. р абс. р
2 0,20 4 0,40 4 0,40
3 0,30 5 0,50 2 0,20
- - 2 0,20 8 0,80
1 0,10 3 0,30 6 0,60
4 0,40 5 0,50 1 0,10
Staph. spp, n=10 Candida albicans, n=10 Pseudomonas aeruginosa, n=10 Klebsiella pneumoniae, n=10 Escherichia coli, n=10
Таблица 2. Влияние антисептиков на показатели адгезивности
Антисептик
C.albicans, n=15 E.coli, n=15
K.pneumoniae, Ps.aeruginosa,
n=15
n=15
Staph.spp., n=15
n р n р n р n р n р
Метиленовый синий 0,1-1% спиртовой раствор 7 0,47 9 0,60 6 0,40 5 0,33 7 0,47
Фурацилин 10 0,67 13 0,87 12 0,80 8 0,53 12 0,80
Перекись водорода 1% 13 0,87 13 0,87 11 0,73 10 0,67 13 0,87
Гипертонический раствор хлорида натрия 10% раствор 5 0,33 8 0,53 5 0,33 4 0,27 5 0,33
Спиртовой раствор йода 3 % раствор 12 0,80 13 0,87 10 0,67 10 0,67 12 0,80
Примечание. n — число штаммов, р — частота встречаемости признака.
www.sta.uz
Shoshilinch tibbiyot axborotnomasi, 2011, № 3
79
Новые возможности профилактики нозокомиальных инфекций
Рис. 1. Klebsiella Pneumoniae (коэф. 4.3 — высокоадгезивные).
Рис. 3. Staph.spp
(коэф.-4.2 -высокоадгезивные микроорганизмы).
натрия.
Литература
1. Белозер А.А., Смирнов О.А., Петкова В.А. Инфекционный контроль за внутрибольничными инфекциями в стационаре скорой медицинской помощи. Современные проблемы эпидемиологии, диагностики и профилактики внутрибольничных инфекций. СПб 2003; 75-77.
2. Брилис В.И., Брилене Т.А., Ленцнер X.n., Ленцнер А.А. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов. Лаб. дело 1986; 4: 210-212.
3. Брилис B.K, Брилене Т.А., Левков Л.А. и др. Некоторые аспекты влияния антибиотиков на адгезивные свойства микроорганизмов и доступная модель его изучения. Антибиотики и химиотер. 1986; 5: 353-357.
4. Лоде Х. Катетер-ассоциированные инфекции в ОИТ. Нозокомиальные инфекции в отделениях интенсивной терапии Материалы Международной конференции М 1998; 15-16.
5. Новикова Н.Ф., Мордовцев В.Н., Паренькова Т.В. Новые возможности лечения трофических язв, ран кожи и мягких тканей, пролежней и свищей. Consilium provisorum 2001; 1 (4): 30.
Рис. 2. Ps.aeruginosa
(коэф.-4.4 — высокоадгезивные микроорганизмы).
Рис. 4. Candida albicans
(коэф. -4.0- высокоадгезивные микроорганизмы).
6. Оганесян Е.А., Павлов С.И., Петкова В.А. Эпидемиологический надзор за внутрибольничными инфекциями в Калужской области. Современные проблемы эпидемиологии, диагностики и профилактики внутри больничных инфекций. СПб 2003; 61-63.
НОЗОКОМИАЛ ИНФЕКЦИЯЛАР ПРОФИЛАКТИКАСИНИНГ ЯНГИ ИМКОНИЯТЛАРИ
А.М.Хаджибаев, К.Р.Касимова, Н.Н.Мухамеджанова Республика шошилинч тиббий ёрдам илмий маркази
Мацолада микроорганизмлар госпитал штаммлари-нинг адгезиясини урганилган. Адгезиянинг кучи купайиши буйича патоген микроорганизмлар куйидагича тацсимланганлар: Escherichia Coli, Candida Albicans, Staphylococcus Spp, Klebsiella Pneumoniae, Pseudomonas Aeruginosa. Антисептиклардан 1% водород перекиси ва 3% спиртли йод аралашмаси энг кучли антиадгезив таъсирига эгалиги анщланди.
Контакт: Хаджибаев Абдухаким Муминович. 100107, Ташкент, ул. Фархадская, 2. Тел.: +99871-1504600.
