Новые производные трииндолилметилия со сниженной токсичностью Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 55

(0,001—1 мг/мл в течение 24 ч) в тесте с трипановым синим ность супероксиддисмутазы определяли по ингибирова-и изучение его влияния на кинетику клеточной пролифе- нию фотохимического восстановления нитросинего тетра-рации иммуноцитохимическим методом с использованием золия. Метод определения активности каталазы основан маркера клеточного деления — белка Ki-67. Доля апопто- на образовании формальдегида из метилового спирта тических клеток оценивалась с помощью ДНК-связываю- в присутствии пероксида водорода с последующим окра-щего флуоресцентного красителя YO-PRO. шиванием продукта реакции красителем пурпалд. Концент-результаты. Установлено, что аурумакрил на 70—90 % рацию восстановленного глутатиона определяли, используя ингибирует развитие солидных опухолей мышей и вызы- качественную реакцию с 5,5-дитио-бис-(2-нитробензой-вает гибель 70 % клеток MCF-7 (1 мг/мл, инкубация 24 ч). ной) кислотой, в результате которой образуется окрашен-Запуск раннего апоптоза в опухолевых клетках наблюдает- ный в желтый цвет тионитрофенильный анион. Экспрес-ся через 1 ч после воздействия препарата (1 мг/мл). Кине- сию генов в клетках определяли методом ПЦР в режиме тика пролиферации выжившей фракции опухолевых кле- реального времени с использованием интеркалирующего ток под влиянием аурумакрила претерпевает значительные красителя SYBR Green I. изменения, выражающиеся в преимущественном накопле- результаты. Показано, что все исследованные штаммы нии клеток (93 %) в фазе пролиферативного покоя G0 существенно не различались по активности супероксид-и в значительном уменьшении (7 %) доли делящихся кле- дисмутазы и каталазы. Введение животным с ЛУ штам-ток, что свидетельствует об утрате клетками выжившей мами препаратов, к которым резистентны опухолевые фракции репродуктивной способности. клетки, не вызывало значительных изменений в активно-Заключение. Значительная ростингибирующая актив- сти ферментов АОС. Введение животным со штаммом ность аурумакрила на моделях солидных опухолей живот- P-388/cPt терапевтической дозы доксорубицина индуци-ных in vivo и высокий цитотоксический эффект препарата ровало снижение активности каталазы и супероксиддис-в отношении клеток опухоли человека in vitro свидетельст- мутазы по сравнению с контролем. Аналогичный результат вуют о целесообразности углубленного доклинического получен на штамме Р-388/руб при введении терапевтиче-изучения противоопухолевых свойств и механизма дейст- ских доз циклофосфана. Выявлено, что штаммы, устойчи-вия полиакрилата золота. вые к цисплатину и циклофосфану, существенно отличались от исходного штамма по содержанию восстановленного В.С. Павлов1-2, А.А. Балакина2, В.А. Мумятова2. глутатиона. Показано, что концентрация восстановленного Т.А. Раевская2, С.А. Гончарова2, А.А. Терентьев1-2-3 глутатиона в клетках штамма Р388/цф значительно умень-иЗУчЕниЕ Функционирования шается при введении терапевтического препарата. В клет-АнтиокСидАнтной системы в клетках ках штамма, устойчивого к циклофосфану, выявлен зна-лЕкАрСТвЕННо-УСТОйчивыХ ШтАммов чительно более высокий уровень экспрессии ряда генов лЕйкоЗА P-388 мЫШЕй глутатионовой АОС по сравнению с исходным штаммом. МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; Заключение. Использование на ЛУ штаммах соедине-2ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область, ний, к которым выработана устойчивость, не оказывало Россия; значительного влияния на АОС клеток. Применение сое-3МГОУ, Москва, Россия динений, не являющихся индукторами ЛУ, сопровожда-введение. Одной из проблем в терапии онкологиче- лось снижением активности ферментов АОС. Выявленное ских заболеваний является развитие лекарственной устой- снижение активности ферментов при действии противоо-чивости (ЛУ) и множественной лекарственной устойчивости пухолевых препаратов может приводить к накоплению (МЛУ) опухолей. Механизмы возникновения ЛУ, а также активных форм кислорода в опухолевых клетках и окисли-подходы к ее преодолению могут быть связаны с измене- тельному стрессу. ЛУ штамма Р388/цф может быть обу-нием регуляции антиоксидантной системы. Изучение словлена высоким уровнем активности глутатионовой функционирования антиоксидантной системы (АОС) опу- АОС в клетках. холевых клеток и ее роли в механизмах развития резистентности к противоопухолевым агентам — важная актуальная А.А. Панов, А.Ю. Симонов, С.Н. Лавренов, А.С. Тренин задача как для создания новых лекарственных препаратов, новые производные трииндолилмЕтилия так и для подбора наиболее эффективных терапевтических Со СНиЖЕННой ТОкСичНоСТЬЮ режимов лечения онкологических заболеваний. ФГБНУ НИИНА, Москва, Россия Цель исследования. Изучить активность ферментов введение. Производные трииндолилметилия известны супероксиддисмутазы и каталазы, концентрацию восста- своей антибактериальной, противогрибковой и противоо-новленного глутатиона и экспрессию генов ферментов пухолевой активностью. Ранее изучавшиеся соединения глутатионовой АОС в клетках ЛУ штаммов лейкоза Р-388 отличались малой селективностью действия и высокой мышей в норме и при действии противоопухолевых соеди- токсичностью. нений. Цель исследования. С целью изучения связи структу-материалы и методы. Исследование проводилось на ра—активность нами были синтезированы и протестиро-ряде ЛУ штаммов лейкоза Р-388 мышей: Р-388/руб, ваны на биологическую активность >35 новых производных, Р-388/цф, P-388/cPt, резистентных к рубомицину, цикло- содержащих в своей структуре малеимидный фрагмент. фосфану и цисплатину соответственно, при этом штамм Среди производных малеимида имеются активные инги-Р-388/руб обладал генотипом и фенотипом МЛУ. Актив- биторы протеинкиназ (например, ребеккамицин), которые

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

56 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

используются в качестве противоопухолевых препаратов. результаты. На всем протяжении эксперимента гибели Полученные таким образом гибридные антибиотики могут животных не наблюдалось, отклонений в состоянии и по-значительно отличаться от исходных соединений по био- ведении не отмечалось. Гематологические показатели у всех доступности или токсичности. подопытных животных не отличались от контроля. На материалы и методы. Полученные соединения тести- 1-е сутки после окончания курса введений препарата в вы-ровались на токсичность в отношении здоровых клеточных сокой дозе и у самцов, и у самок выявлено повышение ак-линий HEK293, а также контролировалась антибактери- тивности аспарагиновой трансаминазы (АСТ) и щелочной альная и противогрибковая активность. В настоящее время фосфатазы (ЩФ), уровня общего билирубина (Б), креати-проводится изучение цитотоксичности новых соединений нина (К) и мочевины (М). Применение препарата в низкой в отношении культур опухолевых клеток HCT-116 и K562. дозе приводило к повышению активности АСТ, содержа-результаты. Тестирование in vitro показало, что введе- ния М и К. У животных, получавших препарат в высокой ние малеимидного фрагмента значительно снижает ток- дозе, повышенный уровень АСТ и М сохранялся до 30 сут сичность производных трииндолилметилия, причем анти- после окончания курса введений. У животных, получавших бактериальная и противогрибковая активность снижается препарат в МПД, все биохимические показатели к концу в меньшей степени. наблюдения не отличались от контроля. При исследовании Заключение. С помощью модификации структуры ра- мочи на 1-е сутки после окончания курса введений отмечено нее изученных соединений, имеющих противоопухолевую появление белка и уробилиногена, увеличение удельного активность, получена серия новых веществ, обладающих веса. На 30-е сутки после отмены препарата у кроликов, различной биологической активностью, — новых потенци- получавших препарат в ЛД50, сохранялось повышенное альных цитотоксических препаратов. содержание уробилиногена. Показатели клинического Исследование выполнено анализа мочи у животных, получавших препарат в МПД, при поддержке гранта РНФ на 30-е сутки после курса не отличались от контроля. Па-(проект № 16-15-10300). томорфологическое исследование показало, что при ежедневном внутривенном введении в течение 15 дней в обе-Э.Р. Переверзева, В.А. Голибродо, М.И. Трещалин, их изученных дозах оливамид оказывает повреждающее А.Н. Тевяшова, И.Д. Трещалин действие на структуру печени и почек кроликов, которое изучение ХроничЕСкой токСичноСти выражается как в дистрофических, так и в деструктивных ПрЕПАрАтА оливАмид нА кроликАХ изменениях клеток паренхимы органов. В печени прео-ФГБНУНИИНА, Москва, Россия бладают явления вакуольной дистрофии, в почках — невведение. Блокирование низкомолекулярными инги- кротические процессы. Степень выраженности патоло-биторами мишеней, жизненно важных для опухолевого гических изменений зависит от величины примененной роста, является на сегодня самым рациональным подходом дозы. к химиотерапии онкологических заболеваний. Белок Sp1 — Заключение. Выявленные клинико-лабораторными широко известный транскрипционный фактор, влияющий и патоморфологическими методами признаки гепато-на клеточный рост, дифференциацию и апоптоз, — играет и нефротоксичности зависят от величины примененной критическую роль в пролиферации клеток и метастазиро- дозы препарата и являются обратимыми. Это позволяет вании различных видов опухолей. В ФГБНУ «НИИНА» заключить, что препарат может быть передан на дальней-разработан оригинальный противоопухолевый препарат шие этапы доклинического изучения. оливамид — производное антибиотика группы ауреоловой кислоты, ингибитор транскрипционного фактора Sp1. Э.Р. Переверзева, М.И. Трещалин, А.Н. Тевяшова, Цель исследования. Оценка токсических свойств пре- В.А. Голибродо, И.Д. Трещалин парата оливамид в хроническом эксперименте на кро- иЗУчЕниЕ ТОкСичЕСкоГО дЕйСтвия ликах. препарата оливАмид в хроническом материалы и методы. В эксперименте использовано Эксперименте на крыСАХ 36 кроликов породы «Советская шиншилла», самцов и са- ФГБНУ НИИНА, Москва, Россия мок. Для исследования в качестве суммарных доз были вы- введение. Эффективность лечения злокачественных браны дозы 0,28 мг/кг (однократная МПД для кроликов) опухолей во многом зависит от развития современной фар-и 0,63 мг/кг (однократная ЛД50 для кроликов), пересчитан- мацевтики, позволяющей использовать новые технологи-ные с учетом коэффициента кумуляции препарата. МПД ческие подходы: к созданию препаратов. В ФГБНУ «НИИНА» и ЛД50 для кроликов были получены путем пересчета разработан оригинальный метод химической трансформа-с МПД и ЛД50 для крыс с учетом коэффициента поверх- ции оливомицина и получен новый полусинтетический ности тела. Препарат в лекарственной форме вводили вну- противоопухолевый препарат оливамид с улучшенными тривенно ежедневно в течение 15 дней. Токсические реак- химиотерапевтическими свойствами. ции оценивали во время введения препарата и в течение 30 Цель исследования. Изучение хронической токсично-дней после курса. Параметры исследования: изменение сти препарата оливамид на крысах. массы тела, массовые коэффициенты внутренних органов, материалы и методы. Исследование проведено на ЭКГ, клинический и биохимический анализ крови, клини- 60 крысах Wistar, самцах и самках. Препарат вводили вну-ческий анализ мочи, патоморфологическое исследование трибрюшинно ежедневно в течение 15 дней с интервалом органов и тканей. 24 ч в разовых дозах 0,037 и 0,08 мг/кг, суммарно

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ