Научная статья на тему 'НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ПРИМЕНЕНИЮ РОЗ БЕНГАЛ ПРОБЫ ПРИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА'

НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ПРИМЕНЕНИЮ РОЗ БЕНГАЛ ПРОБЫ ПРИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
269
36
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА / РА / РСК / РИД / РБП / DIAGNOSTICS OF BRUCELLOSIS / AT / CFT / IDR / RBT

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Новицкий А.А., Плешакова В.И., Лещёва Н.А., Лоренгель Т.И.

В настоящее время поствакцинальная диагностика бруцеллеза основана на двух серологических методах - РА и РСК. Слабые агглютиногенные свойства вакцины из штамма B. abortus 82 позволяют проводить диагностические исследования в стадах коров не ранее 6-месячного срока после иммунизации. Для уточнения эпизоотической ситуации при подозрении на бруцеллез применяется РИД с О-ПС антигеном. При подтверждении бруцеллеза возникает проблема, связанная с дифференциацией животных, реагирующих на вакцину или инфекцию. Учитывая простоту выполнения, высокую специфичность и чувствительность РБП, с нашим участием отработана возможность ее применения при оздоровлении стад крупного рогатого скота в короткие сроки после иммунизации. Исходя из наставления, показатели роз бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные», использовать ее в качестве дифференцирующего теста в стадах иммунного поголовья не представляется возможным. В то же время при учете результатов РБП мы обратили внимание на существующую параллель с пробирочной РА. Установлено, что показатели выраженности реакции, оцениваемой в крестах, полностью совпадают с показателями РА. Показатели РБП «+++» и «++++» соответствуют РА в титрах 200 МЕ и выше. Более того, высокие показатели РБП поглощают показатели РСК в разведении 1 : 20 и выше РИД. По полученным данным обоснована возможность использования РБП взамен РА и громоздкой РСК. Применение РБП оказалось наиболее эффективным при выявлении латентно больных животных с положительной реакцией после их провокации вакциной из штамма 82. Это позволило сделать вывод о возможности включения в систему оздоровительных мероприятий при бруцеллезе взамен РА, РСК высокочувствительной легко выполнимой роз бенгал пробы в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном как индикатором присутствия бруцеллеза в стаде.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Новицкий А.А., Плешакова В.И., Лещёва Н.А., Лоренгель Т.И.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

NEW APPROACHES TO THE APPLICATION OF THE ROSE BENGAL TEST IN POST-VACCINATION DIAGNOSTICS OF BRUCELLOSIS

Currently, post-vaccination diagnostics of brucellosis is based on two serological methods: Agglutination Test (AT) and Complement Fixation Test (CFT). The weak agglutinogenic properties of the B. abortus 82 vaccine allow carrying out diagnostic tests in the cattle no earlier than 6 months after immunization. The immunodiffusion reaction (IDR) with the O-polysaccharide antigen is used to clarify the epizootic situation in case of suspected brucellosis. If brucellosis is confirmed, a problem surfaces due to with the differentiation of animals and their reaction to the vaccine or infection. Taking into account the simple procedure, high specificity and sensitivity of RBT, we have considered the possibility of using it in the recovery of the cattle in a short period of time after immunization. According to the instruction, the indicators of the RBT test are taken into account only as “positive” and “negative”, so it is not possible to use it as a differentiating test in the immune cattle. At the same time, when taking into account the results of RBT, we paid attention to the correlation with in vitro AT. It has been established that the indicators of the reaction, assessed with crosses, correlate completely with the AT indicators. RBT indicators “+++” and “++++” correspond to AT indicators in levels of 200 IU and above. Moreover, high RBT indicators overlap the CFT indicators at a dilution of 1 : 20 and more IDR indicators. The data obtained substantiate the possibility of using RBT instead of AT and the complicated CFT. The use of RBT turned out to be the most effective in identifying latently sick cattle with positive reactions after they were provoked with a vaccine from strain 82. The data obtained allowed us to conclude that the highly sensitive and easily applied rose Bengal test can be included, instead of AT and CFT, in the system of recovery measures in case of brucellosis in combination with immunodiffusion reaction with O-polysaccharide antigen as an indicator of the presence of brucellosis in the cattle herd.

Текст научной работы на тему «НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ПРИМЕНЕНИЮ РОЗ БЕНГАЛ ПРОБЫ ПРИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА»

9. Сошникова О.В. Изучение химического состава и биологической активности растений рода крапива : диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук : специальность 15.00.02 / О.В. Сошникова. - Курск, 2006. -Текст : непосредственный.

10. Genevieve M. Spleen: Development, anatomy and reactive lymphoid proliferations / Genevieve M., Сгапе Yen-ChunLiu, Amy Chadburn // Seminars in Diagnostic Pathology. Available online 16 June 2020. -URL: https://doi.org/10.1053/j.semdp.2020.06.003. -ISSN 0740-2570.

10. Genevieve M. Spleen: Development, anatomy and reactive lymphoid proliferations / Genevieve M., Crane Yen-ChunLiu, Amy Chadburn // Seminars in Diagnostic Pathology. Available online 16 June 2020. -URL: https://doi.org/10.1053/j.semdp.2020.06.003. -ISSN 0740-2570.

Веретенникова Валентина Сергеевна, аспирант, Омский ГАУ, vs.vodolaga36.06.01@om-gau.org; Бойко Татьяна Владимировна, д-р вет. наук, доцент, Омский ГАУ, tv.boyko@omgau.org; Гонохова Марина Николаевна, канд. вет. наук, доцент, Омский ГАУ, mn.gonokhova@omgau.org.

Veretennikova Valentina Sergeevna, Postgraduate Student, Omsk SAU, vs.vodola-ga36.06.01@omgau.org; Bojko Tatyana Vladimi-rovna, Dr. Vet. Sci., Ass. Prof., Omsk SAU, tv.boyko@omgau.org; Gonokhova Marina Niko-laevna, Cand. Vet. Sci., Ass. Prof., Omsk SAU, mn. gonokhova@omgau. org.

УДК 619:616.98.42-071

А.А. НОВИЦКИЙ, В.И. ПЛЕШАКОВА, НА. ЛЕЩЁВА, Т.И. ЛОРЕНГЕЛЬ

Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина, Омск

НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ПРИМЕНЕНИЮ РОЗ БЕНГАЛ ПРОБЫ ПРИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА

В настоящее время поствакцинальная диагностика бруцеллеза основана на двух серологических методах - РА и РСК. Слабые агглютиногенные свойства вакцины из штамма B. abortus 82 позволяют проводить диагностические исследования в стадах коров не ранее 6-месячного срока после иммунизации. Для уточнения эпизоотической ситуации при подозрении на бруцеллез применяется РИД с О-ПС антигеном. При подтверждении бруцеллеза возникает проблема, связанная с дифференциацией животных, реагирующих на вакцину или инфекцию. Учитывая простоту выполнения, высокую специфичность и чувствительность РБП, с нашим участием отработана возможность ее применения при оздоровлении стад крупного рогатого скота в короткие сроки после иммунизации. Исходя из наставления, показатели роз бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные», использовать ее в качестве дифференцирующего теста в стадах иммунного поголовья не представляется возможным. В то же время при учете результатов РБП мы обратили внимание на существующую параллель с пробирочной РА. Установлено, что показатели выраженности реакции, оцениваемой в крестах, полностью совпадают с показателями РА. Показатели РБП «+++» и «++++» соответствуют РА в титрах 200 МЕ и выше. Более того, высокие показатели РБП поглощают показатели РСК в разведении 1 : 20 и выше РИД. По полученным данным обоснована возможность использования РБП взамен РА и громоздкой РСК. Применение РБП оказалось наиболее эффективным при выявлении латентно больных животных с положительной реакцией после их провокации вакциной из штамма 82. Это позволило сделать вывод о возможности включения в систему оздоровительных мероприятий при бруцеллезе взамен РА, РСК высокочувствительной легко выполнимой роз бенгал пробы в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном как индикатором присутствия бруцеллеза в стаде.

Ключевые слова: диагностика бруцеллеза, РА, РСК, РИД, РБП.

© Новицкий А.А., Плешакова В.И., Лещёва Н.А., Лоренгель Т.И., 2020

Введение

Длительное применение противобруцеллезной вакцины из штамма B. abortus 82 позволило в достаточной мере изучить характер поствакцинального иммунного ответа с применением официальных серологических методов исследования крови РА (реакция агглютинации), РСК (реакция связывании комплемента). В действующих нормативных документах, касающихся диагностики бруцеллеза вакцинированных животных, четко определен порядок использования и учета этих реакций [1; 2].

Однако до сего времени остается неясным вопрос о диагностической эффективности другого официального метода - пластинчатой реакции агглютинации с роз бен-гал антигеном - роз бенгал пробы (РБП). Основные преимущества РБП: простая техника постановки, быстрое получение результата, высокая специфичность и чувствитель-носта [3-7]. Постановка РБП отличается от пробирочной РА: ее ставят не в пробирке, а на пластине. Специфичность реакции придает кислый забуференный антиген, окрашенный бенгальским розовым, поскольку в кислой среде при наличии в сыворотке неспецифических агглютининов происходит торможение пластинчатой реакции агглютинации.

В ветеринарно-санитарных правилах [2] и других нормативных документах РБП упоминается лишь в качестве официального метода диагностики бруцеллеза и не более того. В соответствии с наставлением реакцию с бенгальским розовым применяют как рекогносцировочный тест в хозяйствах, где животные не подвергались иммунизации. Если говорить об использовании этой реакции в стадах иммунного скота, совершенно не прописаны условия ее наиболее оптимального применения. Относительно оценки этой пробы в литературе имеются работы противоречивого характера [8].

В связи с этим была обозначена цель - испытать эффективность роз бенгал пробы в поствакцинальной диагностике бруцеллеза в комплексе с РА, РСК, РИД с О-ПС антигеном и предложить наиболее эффективную методику ее применения.

Материалы и методы исследования

Изучали диагностическую значимость роз бенгал пробы (РБП) на крупном рогатом скоте с разным иммунологическим и эпизоотологическим фоном по бруцеллезу. Выраженность РБП оценивали в крестах: «+», «++», «+++», «++++». Показатели реакции сравнивали с показателями классических РА, РСК и РИД с О-ПС антигеном.

Вначале был прослежен иммунный ответ здоровых коров благополучной фермы на трехкратную иммунизацию противобруцеллезной вакциной из шт. B. abortus 82 по четырем схемам (табл. 1).

Таблица 1

Схемы иммунизации коров

Группа/кол-во голов Схема вакцинации (возраст, доза, штаммы вакцины)

3-6 мес. 18-20 мес. После 1-го отела

1-я/49 82 п.д. 82 п.д. 82 п.д.

2-я/50 82 п.д. 82 п.д. 82 м.д.

3-я/50 19 п.д. 82 п.д. 82 п.д.

4-я/49 19 п.д. 82 п.д. 82 м.д.

Примечание. П.д. - полная доза; м.д. - малая доза.

Динамику поствакцинальных реакций изучали в сроки 14, 33, 60 и 270 дней.

Прежде чем приступить к изучению диагностической значимости РБП, провели экспериментальные исследования по определению чувствительности РА, РСК, РБП у 10 интактных и 20 иммунизированных коров после искусственного заражения: на 7, 14, 28, 39-е сут после заражения вирулентной культурой бруцелл. Диагностическая ценность РБП в сравнении с другими методами изучена при купировании очага бруцеллеза на животноводческой ферме одного из хозяйств Северо-Казахстанской области.

Результаты исследований

Приступая к проведению исследований, мы располагали достаточным экспериментальным и производственным материалом, свидетельствующим о возможности объективно оценивать эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу в поствакцинальный период по уровню антител в сыворотке крови, улавливаемых РА, РСК [9]. Исходя из наставления, показатели роз бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные», использовать ее в качестве дифференцирующего теста в стадах иммунного поголовья не представляется возможным. В то же время при учете результатов РБП мы обратили внимание на существующую параллель с пробирочной РА, при которой выраженность агглютинации при каждом разведении сыворотки крови оценивается в крестах - от одного до четырех. Некоторое подобие мы установили при оценке показателей РБП. Просматривая визуально выраженность данной реакции, мы также оценивали ее в крестах по четырем показателям:

+ (один крест) - мелкий агглютинат в малом количестве; ++ (два креста) - мелкий или средний агглютинат в среднем количестве; +++ (три креста) - средний в большом количестве или крупный агглютинат в среднем количестве;

++++ (четыре креста) - крупный агглютинат (хлопья) в большом количестве. Сопоставляя выраженность показателей РБП с титрами РА, обнаружили тесную взаимосвязь. Один крест РБП соответствовал РА 50 МЕ, два креста - 100 МЕ, три креста - 200 МЕ, четыре креста - 400 МЕ. Такой подход в оценке показателей РБП дал возможность ее использования взамен РА при выяснении эпизоотической ситуации в поствакцинальный период. Дальнейшие исследования подтвердили эффективность РБП не только в качестве легко выполнимого оценочного теста, но и как дополнительного метода диагностики при оздоровлении стад от бруцеллеза.

Вначале поставили задачу - проследить за иммунным ответом здоровых коров благополучной фермы на трехкратную иммунизацию противобруцеллезной вакциной из штамма B. abortus 82 по четырем схемам (табл. 2).

Таблица 2

Динамика образования антител, улавливаемых РА, РСК, РБП, у коров, реиммунизированных вакциной из штамма B. abortus 82 в разных дозах

Схема иммунизации Срок исследования, сут Реагировало, %

Кол-во РА МЕ РСК положительно РБП совпало

животных 100 и выше 50 МЕ РБП РА РСК

14 73,5 26,5 10,0 46,9 100,0 21,7

№ 1 49 33 60 - 2,0 - - - -

270 - - - - - -

14 34,0 66,0 12,0 26,0 100,0 7,8

№ 2 50 33 60 - - - - - -

270 - - - - - -

14 74,0 16,0 68,0 60,0 100,0 -

№ 3 50 33 60 18,0 30,0 8,0 40,0 30,0 100,0 66,6

270 - - - - - -

14 42,2 48,9 42,8 53,6 100,0 38,4

№ 4 49 33 60 270 2,0 10,2 - - - -

Оценивая данные таблицы, обратили внимание на кратковременный иммунный ответ в тех группах коров, где использовали только вакцину из штамма 82. В группах животных, привитых по схеме, включающей прививку телят агглютиногенной вакциной из штамма 19, иммунный ответ был несколько более выраженным и длительным. В структуре поствакцинальных антител подавляющее преимущество было за агглютининами, улавливаемыми РА. Из 772 исследованных проб крови реагировали в РА - 29,9%, в РСК - 11,8%, РБП - 14,0%. Показатели РА полностью поглощали показатели РБП, в то время как показатели РСК лишь частично совпадали с показателями РБП. При дальнейшем анализе установлено, что в большинстве случаев положительная РБП совпадала с РА в титрах 200-400 МЕ и РСК в разведении 1 : 20-1 : 40.

Согласно наставлению по диагностике бруцеллеза поствакцинальные исследования коров с применением РА и РСК проводят не ранее 6 мес после реиммунизации вакциной из штамма 82. Такой регламент диагностики в определенной степени оправдан, если реиммунизации подвергались животные благополучного стада. При ревакцинации на неблагоприятном эпизоотологическом фоне за период 6-месячного «мертвого сезона» возникала опасность перезаражения животных, не имеющих достаточного иммунитета. В этом случае применение РИД с О-полисахаридным антигеном в более ранний поствакцинальный период (2,5 мес.) в некоторой степени позволяло контролировать эпизоотическую ситуацию за счет удаления зараженных животных. Однако эта мера оказалась явно недостаточной из-за низкой чувствительности РИД.

Полученными нами данными о способности РБП с выраженностью «+++», «++++» поглощать показатели РА в титре 200-400 МЕ и РСК в разведении 1 : 20-1 : 40 обосновано включение данного теста в комплексе с РИД в поствакцинальную диагностику бруцеллеза взамен РА и РСК. В данном случае реакция иммунодиффузии служила индикатором наличия бруцеллеза в стаде. Наличие позитивных показателей этой реакции давало основание к проведению оздоровительной работы.

Прежде чем приступить к изучению диагностической значимости РБП в производственных условиях, провели экспериментальные исследования по определению иммунного ответа коров после искусственного заражения (табл. 3).

Таблица 3

Чувствительность РА, РСК, РБП у интактных и иммунизированных коров после искусственного заражения

Характеристика группы Сроки исследования, сут Реагировало (гол./%)

РА МЕ РСК РБП

50-100 200-400

Контроль 10 голов без иммунного фона 7 14 28 39 7/70,0 4/20,0 6/60,0 2/20,0 3/30,0 6/60,0 5/50,0 8/80,0 1/10,0 8/80,0 10/100,0 8/80,0 1/10,0 10/100,0 8/80,0 10/100,0

7 6/30,0 14/70,0 14/70,0 14/70,0

Опыт 20 голов 14 1/5,0 19/95,0 15/75,0 19/95,0

на иммунном фоне 28 2/10,0 18/90,0 20/100,0 18/90,0

39 6/30,0 14/70.0 1470,0 14/70,0

Данные таблицы свидетельствуют о высокой чувствительности РБП, не уступающей показателям РА и РСК. Более того, как в контрольной, так и в опытной группе, показатели РБП во все сроки исследования полностью поглощали показатели РА в титрах 200-400 МЕ и РСК в разведении 1 : 20-1 : 40, это важно не только при оценке эпи-

зоотологической ситуации по бруцеллезу, но и для проведения оздоровительной работы с использованием данного диагностического теста взамен РА, РСК. Дальнейшие исследования в производственных условиях подтвердили диагностическую значимость роз бенгал пробы.

В процессе проведения противобруцеллезных мероприятий убедились в невозможности успешного оздоровления стада без удаления латентно больных животных. Решить эту проблему позволило использование феномена провокации. В качестве провоцирующего средства использовали вакцину из штамма 82, ее введение у скрытых бруцеллоносителей стимулировало выработку антител, регистрируемых в короткий срок после ревакцинации [10; 11].

Изучив динамику иммунного ответа, определяемого РА, РСК, РБП у здоровых животных на введение вакцины и на искусственное заражение, приступили к определению диагностической значимости серологических методов в очаге бруцеллеза. Исследования проведены на ферме одного из хозяйств Северо-Казахстанской области, где среди крупного рогатого скота с неизвестными сроками иммунизации произошла вспышка бруцеллеза с клиническим проявлением инфекции. При серологическом исследовании в РА реагировали 16,6%, в РСК - 14,4%, в РБП - 24,5%. После удаления абортировавших и положительно реагирующих животных в целях купирования очага инфекции была проведена реиммунизация коров вакциной из штамма 82. Через 1,5, 3 и 4 мес. после ревакцинации провели серологическое исследование с применением РА, РСК, РБП и РИД с О-полисахаридным антигеном (табл. 4). Обосновано включение в комплекс диагностики РИД тем, что этот метод, уступая по чувствительности другим серологическим реакциям, - индикатор наличия бруцеллеза в стаде, позволяющий дифференцировать животных, реагирующих на вакцину или инфекцию.

Таблица 4

Показатели серологических реакций коров, реиммунизированных вакциной из штамма B. abortus 82 в очаге бруцеллеза

Кол-во, гол Срок после вакцинации Реагировало РБП гол./% РИД гол./%

РА (1 : 50-1 : 400) гол./% РСК (1 : 5-1 : 320), гол./%

Перед вакцинацией

312 - 52/16,6 45/14,4 57/17,9 14/4,5

После вакцинации

319 1,5 мес 67/20,7 51/15,8 79/24,5 18/5,6

300 3 мес 63/21,0 51/17,0 84/28,0 20/6,6

317 4 мес 54/17,3 46/14,7 40/12,8 5/1,6

По данным таблицы следует, что после реиммунизации произошло некоторое увеличение реагирующих животных, связать его можно с провоцирующими свойствами вакцины.

Анализируя структуру иммунологических реакций, обратили внимание, что положительные показатели РБП с выраженностью «+++» и «++++» полностью поглощали положительные показатели РИД, показатели РА в титрах 200-400 МЕ и РСК в разведении 1 : 20 и выше.

Полученные данные позволили сделать вывод о возможности включения в систему оздоровительных мероприятий при бруцеллезе взамен РА, РСК высокочувствительной, легко выполнимой роз бенгал пробы в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном как индикатором присутствия бруцеллеза в стаде [12-

15]. Данная технология оздоровления с успехом апробирована ветеринарной службой в одной из неблагополучных ферм в Северно-Казахстанской области (табл. 5).

Таблица 5

Динамика поствакцинальных реакций коров в оздоравливаемом стаде после применения малой дозы вакцины из штамма B. abortus 82 (ферма «Черный стан»)

Срок исследования Кол-во проб Результаты исследований

РА МЕ РСК в разведении РБП РИД

50-100 200-400 5-10 20-40 + ++ +++ ++++

Перед вакцинацией

312 38 14 25 20 30 6 8 12 42

После вакцинации

1 мес 330 249 - 89 41 99 85 16 25 11

3 мес 239 43 3 1 2 29 20 2 3 5

5 мес 202 114 4 1 3 2 4 2 2 1

7 мес 198 64 0 2 0 1 3 0 0 0

Примечание. Животные с показателями РБП «+++», «++++» удалялись.

Указанное в таблице примечание об удалении животных, реагирующих РБП с оценкой «+++», «++++», предусматривает одновременное удаление реагирующих РА в титрах 200 МЕ и выше, РСК в разведении 1 : 20 и выше и положительно РИД, поскольку эти показатели в 100% случаев перекрывались показателями РБП.

Заключение

Включение в поствакцинальную диагностику бруцеллеза в качестве основного диагностического теста роз бенгал пробы позволяет упростить и одновременно повысить ее эффективность. Прежде всего это касается эпизоотологической оценки по бруцеллезу стад в короткие сроки после иммунизации вакциной из штамма 82, которую невозможно было провести в соответствии с наставлением по его диагностике. Прекращение исследований в течение шестимесячного срока из-за сохранения поствакцинальных реакций несло угрозу перезаражения животных с ослабленным иммунитетом. Использование в системе поствакцинальной диагностики РИД с О-полисахаридным антигеном дает возможность оценивать эпизоотическую ситуацию в более короткие сроки после иммунизации, но не более того. Применение РИД в процессе оздоровительных мероприятий не дает желаемого эффекта из-за ее низкой чувствительности.

Всестороннее изучение пластинчатой реакции с бенгальским розовым антигеном (РБП) позволило рекомендовать ее в качестве основного диагностического теста при оздоровлении стад крупного рогатого скота в короткие сроки после вакцинации. Успешному применению РБП способствовала оценка ее выраженности в крестах, коррелирующих с титрами РА. Показатели РБП с оценкой «+++», «++++» соответствовали показателям РА в титре 200 МЕ и выше, более того поглощали показатели РСК в разведении 1 : 20 и выше. Эти данные свидетельствуют о возможности использования РБП взамен РА и громоздкой РСК в короткие сроки после иммунизации вакциной из штамма 82, провоцирующей иммунный ответ у скрытых бруцеллоносителей. Результаты оздоровления стада со сложной эпизоотической ситуацией в течение 7 месяцев - наглядное подтверждение целесообразности такой методики оздоровления.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

A.A. Novitskij, V.I. Pleshakova, N.A. Leshcheva, T.I. Lorengel' Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin, Omsk

New approaches to the application of the rose bengal test in post-vaccination diagnostics of brucellosis

Currently, post-vaccination diagnostics of brucellosis is based on two serological methods: Agglutination Test (AT) and Complement Fixation Test (CFT). The weak agglutinogenic properties of the B. abortus 82 vaccine allow carrying out diagnostic tests in the cattle no earlier than 6 months after immunization. The immunodiffusion reaction (IDR) with the O-polysaccharide antigen is used to clarify the epizootic situation in case of suspected brucellosis. If brucellosis is confirmed, a problem surfaces due to with the differentiation of animals and their reaction to the vaccine or infection. Taking into account the simple procedure, high specificity and sensitivity of RBT, we have considered the possibility of using it in the recovery of the cattle in a short period of time after immunization. According to the instruction, the indicators of the RBT test are taken into account only as "positive" and "negative", so it is not possible to use it as a differentiating test in the immune cattle. At the same time, when taking into account the results of RBT, we paid attention to the correlation with in vitro AT. It has been established that the indicators of the reaction, assessed with crosses, correlate completely with the AT indicators. RBT indicators "+++" and "++++" correspond to AT indicators in levels of 200 IU and above. Moreover, high RBT indicators overlap the CFT indicators at a dilution of 1 : 20 and more IDR indicators. The data obtained substantiate the possibility of using RBT instead of AT and the complicated CFT. The use of RBT turned out to be the most effective in identifying latently sick cattle with positive reactions after they were provoked with a vaccine from strain 82. The data obtained allowed us to conclude that the highly sensitive and easily applied rose Bengal test can be included, instead of AT and CFT, in the system of recovery measures in case of brucellosis in combination with immunodiffusion reaction with O-polysaccharide antigen as an indicator of the presence of brucellosis in the cattle herd.

Keywords: diagnostics of brucellosis, AT, CFT, IDR, RBT.

Список литературы

1. Наставление по применению вакцины сухой живой из штамма 82 бруцелла абортус против бруцеллеза крупного рогатого скота : официальный текст : [принят Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации 26.02.1996]. -Москва, 1996. - 5 с. - Текст : непосредственный.

2. Санитарные правила СП 3.1.085-96. Ветеринарные правила ВП 13.3.1302-96. Профилактика инфекционных болезней. Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. 2. Бруцеллез. Санитарные правила. Ветеринарные правила : официальный текст : [принят Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации 18.06.1996]. - Москва, 1996. - 30 с. -Текст : непосредственный.

3. Эффективность диагностических методов исследования бруцеллеза животных / А.И. Федоров, М.И. Искандаров, С.С. Искандарова [и др.]. -Текст : непосредственный // Ветеринария и кормление. - 2020. - № 1. - С. 21-23.

4. Подкуйко А.А. Показатели серологических реакций у коров в короткие сроки после вакцинации при оздоровлении неблагополучного стада с применением химической противобруцеллез-ной вакцины НАК-1 / А.А. Подкуйко, Т.В. Гусько-

References

1. Nastavlenie po primeneniyu vakciny suhoj zhivoj iz shtamma 82 brucella abortus protiv brucelle-za krupnogo rogatogo skota : oficial'nyj tekst : [pri-nyat Departamentom veterinarii Ministerstva sel'skogo hozyajstva i prodovol'stviya Rossijskoj Federacii 26.02.1996]. - Moskva, 1996. - 5 s. - Tekst : nepo-sredstvennyj.

2. Sanitarnye pravila SP 3.1.085-96. Veteri-narnye pravila VP 13.3.1302-96. Profilaktika infek-cionnyh boleznej. Profilaktika i bor'ba s zaraznymi boleznyami, obshchimi dlya cheloveka i zhivotnyh. 2. Brucellez. Sanitarnye pravila. Veterinarnye pravila : oficial'nyj tekst : [prinyat Departamentom veterinarii Ministerstva sel'skogo hozyajstva i prodovol'stviya Rossijskoj Federacii 18.06.1996]. - Moskva, 1996. -30 s. - Tekst : neposredstvennyj.

3. Effektivnost' diagnosticheskih metodov is-sledovaniya brucelleza zhivotnyh / A.I. Fedorov, M.I. Iskandarov, S.S. Iskandarova [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya i kormlenie. - 2020. -№ 1. - S. 21-23.

4. Podkujko A.A. Pokazateli serologicheskih reakcij u korov v korotkie sroki posle vakcinacii pri ozdorovlenii neblagopoluchnogo stada s primeneniem himicheskoj protivobrucelleznoj vakciny NAK-1 / A.A. Podkujko, T.V. Gus'kova, T.G. Popova, V.S. Bronnikov. - Tekst : neposredstvennyj // Materia-

ва, Т.Г. Попова, В.С. Бронников. - Текст : непосредственный // Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию Сибирского отделения РАСХН «Эпизоотология, патология и ветеринарно-санитарные мероприятия при инфекционных болезнях животных» / СО РАСХН. ВНИИБТЖ. - Омск, 2004. -С. 131-137.

5. Диагностическая ценность современных и традиционных методов исследований при бруцеллезе мелкого рогатого скота / С.А. Расулов, Д.М. Мирзоев, М.И. Искандаров [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария и кормление. -2017. - № 2. - С. 45-51.

6. Дифференциальная серологическая диагностика бруцеллеза у крупного рогатого скота, привитого вакциной из штамма 82, и ее значение в общей системе мер борьбы с данным заболеванием / М.А. Косарев, А.М. Фомин, Г.М. Сафина [и др.]. -Текст : непосредственный // Ветеринарный врач. -2019. - № 5. - С. 23-28.

7. Изучение диагностической значимости РБП с сывороткой крови крупного рогатого скота, привитого противобруцеллезной вакциной из шт. B. abortus 82, в стадах, имеющих различную эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу / Т.Г. Попова, В.Г. Ощепков, А.А. Подкуйко [и др.]. -Текст : непосредственный // Материалы Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных» (16-17 мая 2006 г.). - Москва : ИзографЪ, 2006. - С. 343-347.

8. Изучение диагностической ценности R-бру-целлезного диагностикума в условиях производства / Н.Н. Новикова, Т.А. Янченко, А.А. Кожахметова, С.А. Имерякова. - Текст : электронный // Электронный научно-методический журнал Омского ГАУ. - 2019. - № 1(16). - С. 3. - URL: http:// e-journal.omgau.ru/images/issues/2019/1/00692.pdf (дата обращения: 22 сентября 2020 г.).

9. Быстрый способ купирования бруцеллеза / Т.Г. Попова, В.С. Бронников, В.Г. Ощепков [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы 4-й Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения заслуженного ветеринарного врача РФ И.В. Окунцова «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (17-18 марта 2005 г.) / СО РАСХН, ВНИИБТЖ [и др.]. - Санкт-Петербург : Амфора, 2005. - С. 197-201.

10. Новицкий А.А. Использование провоцирующих свойств химической вакцины для выявления латентных форм бруцеллеза / А.А. Новицкий. -Текст : непосредственный // Материалы Международной научно-практической конференции «Современные проблемы и научное обеспечение развития животноводства» (20 апреля 2016 г.) / ФГБОУ ВПО Омский ГАУ. - Омск : Литера, 2016. -С. 153-159. - ISBN 978-5-906666-84-0.

ly Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferen-cii, posvyashchennoj 35-letiyu Sibirskogo otdeleniya RASHN "Epizootologiya, patologiya i veterinarno-sanitarnye meropriyatiya pri infekcionnyh boleznyah zhivotnyh" / SO RASHN. VNIIBTZh. - Omsk, 2004. -S. 131-137.

5. Diagnosticheskaya cennost' sovremennyh i tradicionnyh metodov issledovanij pri brucelleze mel-kogo rogatogo skota / S.A. Rasulov, D.M. Mirzoev, M.I. Iskandarov [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya i kormlenie. - 2017. - № 2. - S. 45-51.

6. Differencial'naya serologicheskaya diag-nostika brucelleza u krupnogo rogatogo skota, privito-go vakcinoj iz shtamma 82, i ee znachenie v obshchej sisteme mer bor'by s dannym zabolevaniem / M.A. Ko-sarev, A.M. Fomin, G.M. Safina [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinarnyj vrach. - 2019. - № 5. -S. 23-28.

7. Izuchenie diagnosticheskoj znachimosti RBP s syvorotkoj krovi krupnogo rogatogo skota, pri-vitogo protivobrucelleznoj vakcinoj iz sht. B. abortus 82, v stadah, imeyushchih razlichnuyu epizooti-cheskuyu situaciyu po brucellezu / T.G. Popova, V.G. Oshchepkov, A.A. Podkujko [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Materialy Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii "Aktual'nye prob-lemy infekcionnoj patologii i immunologii zhivotnyh" (16-17 maya 2006 g.). - Moskva : Izograf'', 2006. -S. 343-347.

8. Izuchenie diagnosticheskoj cennosti R-bru-celleznogo diagnostikuma v usloviyah proizvodstva / N.N. Novikova, T.A. Yanchenko, A.A. Kozhahmeto-va, S.A. Imeryakova. - Tekst : elektronnyj // Elektron-nyj nauchno-metodicheskij zhurnal Omskogo GAU. -2019. - № 1(16). - S. 3. - URL: http:// e-journal.omgau.ru/images/issues/2019/1/00692.pdf (data obrashcheniya: 22 sentyabrya 2020 g.).

9. Bystryj sposob kupirovaniya brucelleza / T.G. Popova, V.S. Bronnikov, V.G. Oshchepkov [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Materialy 4-j Me-zhregional'noj nauchno-prakticheskoj konferencii, posvyashchennoj 100-letiyu so dnya rozhdeniya za-sluzhennogo veterinarnogo vracha RF I.V. Okuncova "Aktual'nye problemy veterinarnoj mediciny" (1718 marta 2005 g.) / SO RASHN, VNIIBTZh [i dr.]. -Sankt-Peterburg : Amfora, 2005. - S. 197-201.

10. Novickij A.A. Ispol'zovanie provoci-ruyushchih svojstv himicheskoj vakciny dlya vyyavle-niya latentnyh form brucelleza / A.A. Novickij. -Tekst : neposredstvennyj // Materialy Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii "Sovremennye problemy i nauchnoe obespechenie razvitiya zhivotno-vodstva" (20 aprelya 2016 g.) / FGBOU VPO Omskij GAU. - Omsk : Litera, 2016. - S. 153-159. - ISBN 978-5-906666-84-0.

11. Novickij A.A. Ispol'zovanie provoci-ruyushchih svojstv brucelleznogo immunomodulyatora dlya vyyavleniya latentnyh form brucelleza /

11. Новицкий А.А. Использование провоцирующих свойств бруцеллезного иммуномодулято-ра для выявления латентных форм бруцеллеза / А.А. Новицкий, А.П. Красиков, М.В. Заболотных. -Текст : непосредственный // Московский экономический журнал. - 2015. - № 3. - С. 9.

12. Диагностическая ценность РИД с разными О-ПС антигенами при бруцеллезе крупного рогатого скота / П.К. Аракелян, Г.В. Разницына, Т.А. Янченко [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2016. - № 7. - С. 25-29.

13. Дифференциация вакцинированных и больных бруцеллезом животных / В.М. Чекишев, Ш.Р. Файзрахманов, Б.А. Киселев [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1993. - № 8. -С. 25-32.

14. Radial immunodifusion test with a Brucella polysaccharide antigen for differentiating infected from vaccinated cattle / R. Diaz, P. Garatea, L.M. Jones, J. Moriyon. - Текст : непосредственный // J. Clin. Microbiol. - 1979. - V. 10. - P. 37-41.

15. Cherwonogrodzky J.W. Brucella abortus 1119-3 O-chain polysaccharide to differentiate sera from B. abortus S-19 - Vaccinated and fieldstrain infected cattle by agar gel immunodiffusion / J.W. Cherwonogrodzky, K.H. Nielsen. - Текст : непосредственный // J. Clin. Microb. - 1988. - V. 26, № 6. - P. 11201123.

A.A. Novickij, A.P. Krasikov, M.V. Zabolotnyh. -Tekst : neposredstvennyj // Moskovskij ekonomi-cheskij zhurnal. - 2015. - № 3. - S. 9.

12. Diagnosticheskaya cennost' RID s razny-mi O-PS antigenami pri brucelleze krupnogo rogatogo skota / P.K. Arakelyan, G.V. Raznicyna, T.A. Yan-chenko [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterina-riya. - 2016. - № 7. - S. 25-29.

13. Differenciaciya vakcinirovannyh i bol' nyh brucellezom zhivotnyh / V.M. Chekishev, Sh.R. Fajz-rahmanov, B.A. Kiselev [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya. - 1993. - № 8. -S. 25-32.

14. Radial immunodifusion test with a Brucella polysaccharide antigen for differentiating infected from vaccinated cattle / R. Diaz, P. Garatea, L.M. Jones, J. Moriyon. - Tekst : neposredstvennyj // J. Clin. Microbiol. - 1979. - V. 10. - P. 37-41.

15. Cherwonogrodzky J.W. Brucella abortus 1119-3 O-chain polysaccharide to differentiate sera from B. abortus S-19 - Vaccinated and fieldstrain infected cattle by agar gel immunodiffusion / J.W. Cherwonogrodzky, K.H. Nielsen. - Tekst : neposredstvennyj // J. Clin. Microb. - 1988. - V. 26, № 6. -P. 1120-1123.

Новицкий Алексей Алексеевич, д-р вет. наук, проф., Омский ГАУ, novitomic@yandex.ru; Плешакова Валентина Ивановна, д-р вет. наук, проф., Омский ГАУ, vi.pleshakova@omgau.org; Лещёва Надежда Алексеевна, канд. вет. наук, доц., Омский ГАУ, na.lescheva@omgau.org; Лорен-гель Татьяна Иосифовна, канд. вет. наук, Омский ГАУ, ti.lorengel@omgau.org.

Novitskij Aleksej Alekseevich, Doc. Vet. Sci., Prof., Omsk SAU, novitomic@yandex.ru; Pleshakova Valentina Ivanovna, Doc. Vet. Sci., Prof., Omsk SAU, vi.pleshakova@omgau.org; Leshcheva Na-dezhda Alekseevna, Cand. Vet. Sci., Ass. Prof., Omsk SAU, na.lescheva@omgau.org; Lorengel' Tat'yana Iosifovna, Cand. Vet. Sci., Omsk SAU, ti.loren-gel@omgau.org.

УДК 619:615.371

В.И. ПЛЕШАКОВА, А.В. КОНЕВ, ИГ. ТРОФИМОВ

Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина, Омск

СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННОЙ БУРСАЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ КУР НА ПРОМЫШЛЕННОЙ ПТИЦЕФАБРИКЕ

Инфекционная бурсальная болезнь (ИББ) кур в настоящее время зарегистрирована во всех странах мира. В связи с высоким экономическим ущербом от падежа - летальность в среднем составляет 40-80% в стадах молодняка яичных пород и 30-40% в стадах бройлеров - имеет место значительная проблема для промышленного птицеводства. Наиболее эффективным способом борьбы с ИББ является специфическая профилактика с использованием живых вирусвакцин. Целью исследования являлось изучение влия-

© Плешакова В.И., Конев А.В., Трофимов И.Г., 2020

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.