CC BY
333
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ЛЕЧЕНИЮ ГИМЕНОЛЕПИДОЗА*
БЕКИШ О.-Я.Л., СЕМЕНОВ В.М.. БЕКИШ В.Я..
БЕКИШ Л.Э.. БОНЧАК О.Е.
УО “Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский
университет”
Резюме. Лечение гименолепидоза на личиночной или имагинальной стадиях развития паразитов празиквантелем в сочетании с индометацином и комплексом витаминов антиоксидантного характера (А. С. Е и в-каротин) является эффективным способом защиты генома соматических и генеративных клеток хозяина. а также обеспечивает полную дегельминтизацию животных. Наиболее эффективным способом лечения гименолепидоза у детей (6-11 лет) является сочетанная терапия празиквантелем однократно из расчета 25 мг/кг массы тела с ибупрофеном 20 мг/кг массы тела и комплексом витаминов антиоксидантного характера (С. Е и в-каротин) с Se. Комплекс витаминов антиоксидантного характера (С. Е и в-каротин) с Se назначается совместно с ибупрофеном еще в течение 2 дней. Взрослым празиквантел вводится в той же дозировке с индомета-цином и комплексом витаминов антиоксидантного характера (С. Е и в-каротин) с Se по той же схеме.
Ключевые слова, карликовые цепни. повреждения генома. терапия гименолепидоза.
Abstract. The treatment of experimental hymenolepidosis on larval and im-aginal stages of parasite development by praziquentel in combination with indometacin or ibuprofen and complex of antioxidant vitamin C. E. в vitamins with selenium use is an effective way of protection of germ and somatic cells genome and full dehelmintization of a host. By the most effective way of hymenolepidosis treatment of children (6-11 years) are combined therapy praziquentel unitary at the rate of 25 mg/kg on body weight with ibuprofen at the rate of 20 mg/kg on body weight and complex of antioxidant vitamin C. E. в vitamins with selenium within 2 days use. By the adult the combined treatment is a praziquentel in the same dose with indometacin and complex of antioxidant vitamin C. E. в vitamins with selenium under the same circuit use.
Адрес для корреспонденции: 210023.
г.Витебск. пр.Фрунзе. 27. Витебский государственный медицинский университет. кафедра медицинской биологии и общей генетики - Бекиш В.Я.
* Работа выполнена по теме задания ГКНТ 03.05 «Изучить эпидемиологическую ситуацию по цестодозам в отдельных регионах Беларуси. предложить способы их профилактики и лечения».
При изучении патогенеза гименолепидоза с применением методов ДНК-комет. учета микроядер. активности сперматогенеза установлено. что инвазия карликовыми цепнями сопровождается генотоксическими и цитотоксическими эффектами в соматических и генеративных клетках хозяина [1]. Повреждения генома хозяина обуславливают необходимость разработки новых подходов к лечению гименолепидоза опирающихся на применении не только специфической. но и патогенетической с антиоксидантной терапией.
В “Протоколах (стандартах) обследования и лечения больных инфекционными и паразитарными заболеваниями в амбулаторно-поликлинических и стационарных условиях (взрослое население)”. изданных Министерством Здравоохранения Республики Беларусь. не указаны препараты. рекомендуемые для лечения. их дозировки. схемы лечения больных гименолепидозом. В графе “Лечение необходимое. средняя длительность” указано только “Лечение в специализированном стационаре”.
Цель исследования - обосновать новый способ лечения гименолепидоза. направленный на защиту генома и достижение полного выздоровления больного от инвазии.
Методы
Материалом для экспериментальных исследования были мыши-самцы линии СВА 4-5 месячного возраста массой 18-20 г в количестве 175 особей. Клиническое обоснование комбинированной терапии гименолепидоза проводилось на базе Витебской областной инфекционной больницы.
Проведены 2 серии исследований. 1-я - на подопытных животных и 2-я -с привлечением больных гименолепидозом и доноров крови.
В первой серии исследований выясняли влияние терапии гименолепидоза празиквантелем. фенасалом. альбендазолом. индометацином. ибупрофеном и комплексом витаминов (С. Е. ß-каротин) с селеном и их сочетаниями на изменения показателей щелочного гель-элетрофореза отдельных клеток по N.P. Singh et al. [4] в модификации B. Hellman et al. [3] и нашими изменениями [2]. а также интенсивность инвазии на имагинальной стадии развития карликовых цепней. В качестве основного международно-принятого показателя генотоксического воздействия факторов среды при проведении метода ДНК-комет использовали “момент хвоста”. вычисленный из “длины хвоста”. умноженной на процент ДНК в “хвосте”. Для оценки цитотоксического воздействия в 100 случайно выбранных клетках определяли процент апоптотических. изображения которых характеризуют минимальные размеры ядра и большой хвост. разбросанный во все стороны.
При проведении терапии экспериментального гименолепидоза нами были использованы празиквантел в таблетках по 600 мг. фенасал (96% субстанция). альбендазол в таблетках по 400 мг. индометацин в таблетках по 25 мг; ибупро-фен в 2% суспензии. витаминный антиоксидантный комплекс “АОК-Se” фирмы “Малкут” (Беларусь). в каждой таблетке которого содержалось 200 мг витамина С. 50 мг витамина Е. 16 мг ß-каротина и 20 мкг селена. витаминный антиоксидантный комплекс “Антиоксикапс с селеном” УП “Минскинтеркапс” (Бела-
русь). в каждой таблетке которого содержалось 100 мг витамина С. 30 мг витамина E. б мг ß-каротина и 30 мкг селена.
При проведении сочетанной терапии использовались следующие дозировки препаратов: празиквантел - однократно в дозе 25 мг/кг. фенасал - однократно в дозе 29 мг/кг; альбендазол - однократно в дозе 15 мг/кг; индометацин - трёхкратно в дозе 2.14 мг/кг; ибупрофен - трехкратно в дозе 30 мг/кг; витамины трехкратно в дозировках ß-каротина - б мг/кг. токоферола ацетата - 80 мг/кг. аскорбиновой кислоты - 200 мг/кг. Se - 20 мкг/кг. Все препараты разводились до требуемых концентраций 2 % раствором крахмального геля и вводились животным внутрижелудочно.
Опыты проведены на 175 мышах. которые были разделены на две группы. Первая группа включала 75 мышей и была контролем на введение препаратов. Она состояла из пятнадцати подгрупп по 5 животных в каждой. которые были выделены в зависимости от вводимых препаратов и их комбинаций. Первая подгруппа служила интактным контролем и получала однократно внутрижелудочно 2% крахмальный гель в объёме 0.2 мл. Мышам второй. третьей и четвертой подгрупп однократно вводили празиквантел. фенасал или альбендазол. Пятая. шестая и седьмая группы получали трехкратно индометацин. ибупрофен или комплекс витаминов. Восьмой и девятой группам животных вводили трехкратно индометацин или ибупрофен с комплексом витаминов. Десятая и одиннадцатая группы получали однократно празиквантел и трехкратно индометацин или ибупрофен с комплексом витаминов. Животным двенадцатой и тринадцатой групп вводили однократно фенасал. трехкратно индометацин или ибупрофен с комплексом витаминов. Четырнадцатая и пятнадцатая группы получали однократно альбендазол и трехкратно индометацин или ибупрофен с комплексом витаминов. Животных умерщвляли на 4-й день от начала введения препаратов.
Вторая группа включала 100 мышей. заражённых инвазионными яйцами карликовых цепней в дозе 20 яиц/г и пролеченных на имагинальной стадии инвазии с 11-го по 13-й дни от заражения. Инвазированные животные были разбиты на десять подгрупп по 5 мышей в каждой: интактный контроль. чистая инвазия. лечение инвазии празиквантелем. фенасалом. альбендазолом. празик-вантелем с индометацином. празиквантелем с ибупрофеном. празиквантелем с комплексом витаминов. фенасалом с индометацином. фенасалом с ибупрофеном. фенасалом с комплексом витаминов. альбендазолом с индометацином. альбендазолом с ибупрофеном. альбендазолом с комплексом витаминов. празиквантелем с индометацином и комплексом витаминов. празиквантелем с ибупрофеном и комплексом витаминов. фенасалом с индометацином и комплексом витаминов. фенасалом с ибупрофеном и комплексом витаминов. альбендазолом с индометацином и комплексом витаминов. альбендазолом с ибупрофеном и комплексом витаминов.
Вторая серия исследований была посвящена разработке способа терапии гименолепидоза человека празиквантелем с индометацином или ибупрофеном
и витаминным антиоксидантным комплексом. содержащем витамины С. E. ß-каротин с селеном.
Для лечения гименолепидоза были использованы празиквантел в таблетках по б00 мг. индометацин в таблетках по 25 мг для взрослых. ибупрофен в 2 % суспензии или ибупрофен в таблетках по 200 мг. поскольку индометацин противопоказан для детей в возрасте до 14 лет. витаминный антиоксидантный комплекс ‘ADK - Se” фирмы “Малкут” (Беларусь). в каждой таблетке которого содержалось 200 мг витамина С. 50 мг витамина E. 1б мг ß-каротина и 20 мкг селена. витаминный антиоксидантный комплекс “Aнтиоксикапс с селеном” УП “Минскинтеркапс” (Беларусь). в каждой таблетке которого содержалось 100 мг витамина С. 30 мг витамина E. б мг ß-каротина и 30 мкг селена.
Kлинические испытания проводились на 1б больных гименолепидозом. из которых 10 (первая группа) в возрасте от б до 11 лет (б мальчиков и 4 девочек) и б (вторая группа) в возрасте от 25 до 3б лет (4 мужчины и 2 женщины). Для оценки эффективности лечения учитывался регресс основных проявлений заболевания (боли в животе. диспепсические расстройства) и исчезновение яиц карликовых цепней в фекалиях. Определяли уровни одноцепочечных разрывов. щелочно-лабильных сайтов и апоптотических клеток лимфоцитов периферической крови больных до лечения и через 3 дня после лечения. В качестве негативного контроля при проведении цитогенетических анализов использовались данные лимфоцитов 10 доноров крови.
Первая группа была разделена на две подгруппы по 5 человек. Первая подгруппа получала только празиквантел из расчета 25 мг/кг массы тела в три приема с интервалом в б часов (курс лечения - 1 день). вторая - сочетанную терапию празиквантелем (однократно из расчета 25 мг/кг массы тела в три приема с интервалом в б часов) с ибупрофеном 20 мг/кг массы тела (в три приёма для возрастной группы 3-7 лет) или 1/2 таблетки 4 раза в день для возрастной группы 8-11 лет в течение 3 дней и витаминным антиоксидантным комплексом «AOK-Se» (1/4 таблетки для возрастных групп 3-7. 8-12). «AOK-Se» назначали совместно с ибупрофеном в течение 3 дней.
Вторая группа в возрасте от 25 до 3б лет была разделена на две подгруппы по 3 человека. Первая подгруппа получала только празиквантел из расчета 25 мг/кг массы тела в три приема с интервалом в б часов (курс лечения - 1 день). вторая - сочетанную терапию празиквантелем (однократно из расчета 25 мг/кг массы тела в три приема с интервалом в б часов. курс лечения - 1 день) с индометацином (25 мг 3 раза в день) и витаминным антиоксидантным комплексом “Aнтиоксикапс с селеном” (1 капсула в день). “Aнтиоксикапс с селеном” назначали совместно с индометацином в течение 3 дней.
Результаты и их обсуждение
Изучено влияние сочетанной специфической (празиквантел. фенасал. альбендазол). патогенетической (индометацин. ибупрофен). антиоксидантной (витамины С. E и ß-каротин с селеном) терапии на состояние генома хозяина и интенсивность инвазии при гименолепидозе у мышей. зараженных в дозе 20 яиц/г массы тела на имагинальной стадии развития (с 11-х по 13-е сутки) кар-
ликовых цепней. Введение животным контрольных подгрупп всех препаратов и их комбинаций не приводило к достоверному росту “момента хвоста” клеток костного мозга и апоптотических клеток по сравнению с данными интактного контроля. за исключением введения отдельно фенасала. Фенасал обладал генотоксическим воздействием и повышал “момент хвоста” в 3.бб раза по сравнению с данными интактного контроля.
Применение комбинированной терапии экспериментального гименолепи-доза средней тяжести показало. что однократное применение празиквантеля. фенасала или альбендазола на имагинальной стадии развития паразитов не может полностью защитить геном клеток хозяина от генотоксического и цитоток-сического воздействия секреторно-экскреторно-соматических продуктов карликовых цепней. Это подтверждалось сохранением высоких уровней “момента хвоста” клеток костного мозга. а также сохранением половозрелых паразитов в тонком кишечнике зараженных животных. Гименее эффективным оказалось применение альбендазола. который достоверно не снижал число паразитов в кишечниках инвазированных животных по сравнению с данными чистой инвазии и при его применении не снижалось число апоптотических клеток до уровня интактного контроля.
^мбинированная терапия празиквантелем. фенасалом или альбендазолом с индометацином. ибупрофеном или комплексом витаминов с Se более значительно снижала генотоксические и цитотоксические воздействия инвазии карликовыми цепнями. чем назначение только одного антигельминтика. Однако абсолютные величины “момента хвоста” клеток костного мозга и процент апоптотических клеток превышали показатели интактного контроля. При комбинированной терапии фенасалом или альбендазолом с индометацином или ибупрофеном и комплексом витаминов с Se процент апоптотических клеток достигал уровня негативного контроля. но “момент хвоста” клеток костного мозга был выше показателя интактных животных. В кишечнике этих животных сохранялось незначительное количество паразитов. Означение празиквантеля с индометацином или ибупрофеном в комбинации с комплексом витаминов с Se на имагинальной стадии развития паразитов оказалось более эффективным способом защиты генома хозяина. чем применение других комбинаций препаратов. Означение празиквантеля с индометацином в комбинации с комплексом витаминов с Se приводила к более интенсивному снижению “момента хвоста”. процента апоптотических клеток до показателей интактного контроля. ^оме того. у зараженных животных. получавших эту комбинацию препаратов. было отмечено максимальное снижение числа паразитов в кишечнике по сравнению с инвазированными нелеченными животными. Этот эффект был обусловлен более сильным антигельминтным действием празиквантеля по сравнению с фе-насалом и альбендазолом.
Лечение гименолепидоза человека празиквантелем (Бильтрицид) с индометацином или ибупрофеном и витаминным антиоксидантным комплексом. содержащем витамины С. E. ß-каротин с селеном проводилось по схеме в зависи-
мости от возраста пациента и переносимости антипаразитарных препаратов (табл. 1).
Таблица 1
Схема лечения больных гименолепидозом
Возрас- тная группа Препарат Дозировка препарата Время приема Длительность курса
3-7 лет Празиквантел (Бильтрицид) в табл. по б00 мг 25 мг/кг в три приема через 6 часов в течение суток Внутрь после еды Одни сутки
Ибупрофен в 2% суспензии или в табл. по 200 мг 20 мг/кг массы тела в 3 приема в день Внутрь после еды 3 дня
Витаминный комплекс Vit. C - 50 мг, Vit. E - 12,5 мг, в-каротин - 1,5 мг, Se - 5 мкг Внутрь после еды 3 дня
Фестал в табл. По 1 табл. 2 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
Лллохол в табл. По 1 табл. 3 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
8-14 лет Празиквантел (Бильтрицид) в табл. по б00 мг 25 мг/кг в три приема через 6 часов в течение суток Внутрь после еды Одни сутки
Ибупрофен в табл. по 200 мг 1/2 таблетки 4 раза в день Внутрь после еды 3 дня
Витаминный комплекс Vit. C - 50 мг, Vit. E - 12,5 мг, в-каротин - 1,5 мг, Se - 5 мкг Внутрь после еды 3 дня
Фестал По 1 табл. 3 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
Aллохол в табл. По 2 табл. 3 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
Старше 15 лет Празиквантел (Бильтрицид) в табл. по б00 мг 25 мг/кг в три приема через 6 часов в течение суток Внутрь после еды Одни сутки
Индометацин в табл. по 25 мг 25 мг 3 раза в день Внутрь после еды 3 дня
б
Возрас- тная группа Препарат Дозировка препарата Время приема Длительность курса
Витаминный комплекс Vit. C - 100 мг, Vit. E - 25 мг, в-каротин - 3 мг, Se - 10 мкг Внутрь после еды 3 дня
Фестал По 2 табл. 3 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
Aллохол в табл. По 2 табл. 3 раза в сутки Внутрь после еды 3 дня
После лечения детей только празиквантелем у двух из пяти на 10-12 сутки сохранялись жалобы на боли в животе. а также обнаруживались яйца гиме-нолеписов в фекалиях. “Момент хвоста” лимфоцитов периферической крови был ниже в 1.94 раза. чем до лечения. однако в 7.75 раза превышал контрольный показатель. Уровень апоптотических клеток не превышал этот показатель до лечения. а также контрольной группы.
У детей. пролеченных празиквантелем в сочетании с ибупрофеном и комплексом витаминов-антиоксидантов. на 10-12 сутки яйца гельминтов в фекалиях не обнаруживались. Самочувствие детей было хорошее. жалоб не предъявляли. ^мбинированная терапия гименолепидоза у детей характеризовалась снижением “момента хвоста” лимфоцитов периферической крови в 4.89 раза по сравнению с данными до лечения и этот показатель не превышал контрольный уровень. Уровень апоптотических клеток не отличался от контрольного показателя и данных. полученных до лечения.
При лечении гименолепидоза у взрослых пациентов. которые получали только празиквантел. положительный результат отмечался в двух из трех случаев. У них “момент хвоста” лимфоцитов периферической крови был ниже в 1.б5 раза. чем до лечения. однако в 3.58 раза превышал контрольный показатель. Уровень апоптотических клеток не изменялся.
У пациентов. получавших празиквантел. индометацин и комплекс витаминов-антиоксидантов. происходила полная дегельминтизация и нормализация цитогенетических повреждений. Отмечалось снижение “момента хвоста” лимфоцитов периферической крови в 5.07 раза по сравнению с данными до лечения и этот показатель не превышал контрольный уровень. Уровень апоптотических клеток не изменялся.
Таким образом. лечение гименолепидоза у детей празиквантелем. ибу-профеном с витаминным антиоксидантным комплексом и у взрослых пациентов - празиквантелем с индометацином и витаминами С. E. ß-каротином является оптимальным. H основании проведенных экспериментальных и клинических исследований разработана инструкция “Способ лечения гименолепидоза. включающего специфическую. патогенетическую и антиоксидантную терапию” и протокол обследования и лечения больных гименолепидозом.
Заключение
1. Терапия экспериментального гименолепидоза на имагинальной стадии развития паразитов празиквантелем в сочетании с индометацином или ибупрофеном и комплексом витаминов антиоксидантного характера (С. E и ß-каротин) с Se является эффективным способом защиты генома соматических клеток хозяина. Этот способ снижает генотоксические и цитотоксические эффекты гиме-нолепидозной инвазии в клетках костного мозга у зараженных карликовыми цепнями мышей до показателей интактного контроля. а также обеспечивает полную дегельминтизацию животных.
2. Эффективным способом лечения гименолепидоза у детей (б-ll лет) является сочетанная терапия празиквантелем однократно из расчета 25 мг/кг массы тела с ибупрофеном 20 мг/кг массы тела и комплексом витаминов антиоксидантного характера (С. E и ß-каротин) с Se. ^мплекс витаминов антиоксидантного характера (С. E и ß-каротин) с Se назначается совместно с ибупрофеном еще в течение 2 дней. Взрослым празиквантел вводится в той же дозировке с индометацином и комплексом витаминов антиоксидантного характера (С. E и ß-каротин) с Se по той же схеме.
Литература
1. Бекиш. В. Я. Состояние генома хозяина при гельминтозах /
В. Я. Бекиш. О.-Я. Л. Бекиш. - Витебск: Изд-во ВГМУ. - 2004. - 218 с.
2. Применение метода щелочного гель-электрофореза изолированных клеток для оценки генотоксических свойств природных и синтетических соединений методические рекомендации / A. Д. Дурнев [и др.]; РAMH и PAGH. -М.. 200б. - 27 с.
3. Alkaline single cell gel electrophoresis of DNA fragments in biomonitoring
for genotoxicity: an introductory study on healthy human volunteers / B. Hellman [et
al.] // Int. Arch. Occup. Environ. Health. - 1997. - Vol. б9. - P. 185-192.
4. A Simple Technique for quantification of low levels of DNA damage in individual cells / N. Singh [et al.] // Exp. Cell Research. - 1988. - Vol. 175. - P.184-191.
