CC BY
13
44
Turczaninowia 2012, 15 (4) : 44-47
УДК.582.29 (571.54)
Т.М. Харпухаева1 T.M. Kharpukhaeva
В.А. Ханин2 V.A. Khanin
НОВЫЕ ДЛЯ РЕСПУБЛИКИ БУРЯТИЯ ВИДЫ РОДА LEPRARIA ПО ДАННЫМ HPLC
NEW FOR REPUBLIC OF BURYATIA SPECIES OF LEPRARIA IDENTIFIED BY HPLC
Аннотация. Обсуждается видовой состав рода Lepraria на территории Республики Бурятия. В аннотированных списках для республики приводилось 2 вида. Мы изучили состав вторичных метаболитов методом ВЭЖХ (HPLC) для достоверного определения видов рода Lepraria. Было выявлено 9 видов, из которых 7 -новые для Республики Бурятия, из них четыре новые для Южной и Центральной Сибири. Ключевые слова: Lepraria Ach., HPLC, Республика Бурятия (Россия).
Summary. Diversity of the genus Lepraria in the Republic of Buryatia (Russia), previously estimated as two species, is revised. We analysed the composition of secondary metabolites by HPLC method for the reliable species identification. As a result, the presence of nine Lepraria species in Buryatia was revealed, four of which are new for South and Central Siberia.
Key words: Lepraria Ach., HPLC, Republic of Buryatia (Russia).
Род Lepraria Ach. - группа накипных лишайников, для которой характерен таллом в виде поверхностной порошистой корки, состоящей из массы слабо или плотно связанных зерен, лишенной корового слоя (по: Макарова и др., 2006). К настоящему времени на территории России найдено 19 видов этого рода (Макарова, Гимельбрант, 2008), и большая часть видов приводится для европейской части России. Род Lepraria изучен столь неравномерно, поскольку хемотаксономические признаки имеют решающее значение в систематике этой стерильной группы. В талломах лишайников рода Lepraria обнаружено более 50 лишайниковых веществ. К числу наиболее значимых относятся алекто-риаловая, диварикатовая, стиктовая, паннаровая, порфириловая кислоты и их производные, а также ангардиановая, рокцелловая, рангиформовая, джекиевая и другие жирные кислоты.
В аннотированных списках лишайников Бурятии (Будаева, 1989, 2000, 2002; Урбанави-чене, Урбанавичюс, 1998, 1999; Урбанавичюс, Урбанавичене, 2004; Харпухаева, 2010) приведены 2 вида рода: Lepraria incana, L. membranacea. Под первым из двух видов, очевидно, скрывается комплекс видов, которые можно идентифицировать лишь при изучении состава вторичных ме-
таболитов, тогда как второй имеет характерную форму таллома, позволяющую без труда определить его.
Методы. Исследование лишайниковых метаболитов проводилось методами HPLC (high performance liquid chromatography - высокоэффективная жидкостная хроматография) на хроматографе Agilent 1200 c градиентным насосом, автоматическим пробоотборником, термостатом и диодно-матричным ультрафиолетовым детектором. Хроматографирование выполнено с рабочей колонкой ZORBAX Eclipse XDB-C18 (Agilent Technologies, USA), размеры 4,6х150 мм, сферический сорбент с зернением 5 цм. За основу метода хроматографирования были взяты данные G.B. Feige с соавторами (Feige et al., 1993) с некоторыми модификациями. Для исследования применяли 15-минутные экстракты лишайников в ацетоне. Условия элюирования: растворители -А = 1% раствор ортофосфорной кислоты (осч) в воде (осч); В = метанол (осч); - градиенты: на старте 30% В в А, затем линейный подъем до 70% В в А за 14 минут, далее линейный подъем до 90% В в А за 30 минут, далее подъем до 100% В за 18 минут и выдержка 10 минут. Температура колонки 26оС. Детектирование проведено на частоте 245 нм.
хИнститут общей и экспериментальной биологии СО РАН, лаборатория флористики и геоботаники, ул. Сахьяно-вой, д. 6; 670047, Улан-Удэ, Россия; e-mail: takhar@mail.ru
2Ботанический институт им. В.Л. Комарова РаАН, ул. Проф. Попова, 2; 197376, Санкт-Петербург, Россия; e-mail: vkhanin@mail.ru
1 Siberian Branch ofRussian Academy ofSciences, Institute of General and Experimental Biology, Laboratory ofFloristics and Geobotany, Sakhyanova str., 6; 670047, Ulan-Ude, Russia
2Russian Academy of Sciences, Komarov Botanical Institute, Prof. Popova, 2; 197376, St.-Petersburg, Russia
Поступило в редакцию 16.07.2012 г.
Submitted 16.07.2012
Харпухаева Т.М., Ханин В.А. Новые для Республики Бурятия виды рода Ьертапа по данным HPLC
45
Дополнительно для определения видов использованы УФ-кабинет 254/365 (длина волны 365 нм) и стандартные реактивы: 10% водный раствор КОН, насыщенный водный раствор CaCl2O2 и раствор парафенилендиамина [C6H4(NH2)2] в спирте.
Для идентификации видов использовали работы Макаровой, Гимельбранта (2008) и Saag с соавторами (Saag et al., 2009).
Конспект видов. При составлении конспекта использованы образцы, взятые из гербария UUH (ФГБУН ИОЭБ СО РАН1, г. Улан-Удэ) и идентифицированные с помощью HPLC. Изучен гербарий в количестве 60 образцов, собранных первым автором в 1998-2011 гг. в Баргузинс-ком, Баунтовском, Еравнинском, Курумканском, Окинском, Прибайкальском и Северобайкальском районах республики. Кроме этого, было исследовано 8 образцов, хранящихся в UUH, собранных С.Э. Будаевой в Баргузинском и Северобайкальском районах (в том числе на территории Забайкальского национального парка и Баргузинского государственного биосферного заповедника), а также 2 образца, предоставленных Д.Я. Тубановой.
В приводимом списке номенклатура видов дана по работе И.И. Макаровой и Д.Е. Гимельбранта (2008). Для каждого вида приведены субстратная приуроченность, местонахождение, состав основных вторичных метаболитов в исследованных образцах дан по убыванию их концентрации.
1. Lepraria alpina (Lesd.) Tretiach et Ba-ruffo - на мхах, почве и камнях.
Исследованные образцы. Северобайкальский р-н: окрестности п. Нижнеангарск, дол. р. Сухой Молокон, сосново-лиственничный лес, 55°48,039'с.ш., 109°33,045'в.д., № 01145, Харпухаева, 23.07.2005. Состав вторичных метаболитов: атранорин, коннорстиктовая, пор-фириловая (мало) кислоты. - Баунтовский р-н: на горном массиве Большой Хоптон (2281 м), 55°05,388'с.ш., 112°52,098'в.д., курум, № 01156, Харпухаева, 07.07.2009. Состав вторичных метаболитов: атранорин, стиктовая, констиктовая, порфириловая, паннаровая, алекториаловая, барбатоловая, норстиктовая кислоты. - Там же:
1 ФГБУН Институт общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской Академии наук.
дол. р. Верхняя Ципа, 1110 м, 55°56,398'с.ш., 112017,655'в.д., скалы у воды, № 01153, Харпухаева, 19.07.2009. Состав вторичных метаболитов: атранорин, коннорстиктовая, паннаровая, порфириловая кислоты.
2. Lepraria borealis Loht. et T0nsberg -на почве и мхах.
Исследованный образец. Прибайкальский р-н: дол. р. Мостовка, окрестности ст. Мостовой, в сосновом лесу, 52016,363'с.ш., 107°39,288'в.д., Будаева, 06.08.1999. Состав вторичных метаболитов: рангиформовая кислота, незначительное количество констиктовой, фумарпротоцетраро-вой кислот.
3. Lepraria ebúrnea J.R. Laundon - на мхах и на коре на основаниях стволов деревьев.
Исследованные образцы. Северобайкальский р-н: дол. р. Кичера, кедрово-еловый лес, 55059,298'с.ш., 110°09,708'в.д., № 00335, Харпухаева, 31.07.2005. Состав метаболитов: алек-ториаловая кислота (мало). - Окинский р-н: хр. Восточный Саян, Природный парк «Шумак», в лиственничном лесу на выходах карбонатных пород, 1529 м, 51058,187'с.ш., 101°52,168'в.д., № 01157, Харпухаева, 18.07.2011. Состав вторичных метаболитов: лепраровая, алекториаловая кислоты, неидентифицированное вещество.
4. Lepraria elobata T0nsberg - на мхах, почве и камнях.
Исследованные образцы. Курумканский р-н: Джергинский заповедник, верховья р. Би-ранкур, 55°01,288'с.ш., 111°62,755'в.д., № 01146, Тубанова, 07.2003. Состав вторичных метаболитов: атранорин, лепраровая кислота. - Там же: дол. р. Шергикан, курум, 55°01,385'с.ш., 111°61,859'в.д., № 187, Харпухаева, 06.07.2004. Состав метаболитов: атранорин, коннорстикто-вая, конпорфириловая кислоты.
5. Lepraria incana (L.) Ach. - на мхах.
Исследованный образец. Окинский р-н:
хр. Восточный Саян, Природный парк «Шумак», в лиственнично-лишайниковом лесу на выходах карбонатных пород, 1529 м, 51°58,187'с.ш., 101°52,168'в.д., № 01140, Харпухаева, 18.07.2011. Состав вторичных метаболитов: диварикатовая (мало), барбатоловая, лепраровая, паннаровая кислоты, атранорин, алекториаловая, порфири-ловая кислоты.
6. Lepraria lobificans Nyl. - на мхах, почве и камнях.
Исследованные образцы. Курумканский р-н: Джергинский заповедник, в долинах рек Баргузин и Джирга, 55°59,413'с.ш., 111°69,727'в.д.,
46
Харпухаева Т.М., Ханин В.А. Новые для Республики Бурятия виды рода Lepraria по данным HPLC
54015,215'с.ш., Ш055,222'в.д., №№ 01160, 01082, Харпухаева, 09.07.2004, 09.07.2003. Состав вторичных метаболитов: атранорин, конс-тиктовая, стиктовая кислоты.
7. Lepraria membranacea (Dicks.) Vain. - на мхах, почве и карбонатных породах.
Исследованные образцы. Курумканс-кий р-н: Джергинский заповедник, на замшелых скалах в долинах рек Баргузин и Ковыли, 55059,413'с.ш., Ш069,727'в.д.; 55018,365'с.ш., 111°51,731в.д., №№ 58, 01138, Харпухаева, 09.07.2002, 09.07.2004. Состав метаболитов: лепраровая, стиктовая, паннаровая, констикто-вая кислоты.
8. Lepraria neglecta (Nyl.) Erichsen -на мхах, почве, камнях и на коре на основаниях стволов деревьев.
Исследованные образцы. Северобайкальский р-н: дол. р. Грамна, пойменный еловый лес, основание ствола тополя душистого, 54°45,970'с.ш., 109°11,630'в.д., № 00336, Хар-пухаева, 27.07.2005. Состав вторичных метаболитов: атранорин, следы алекториаловой кислоты. - Там же: Баргузинский заповедник, дол. р. Давше, кедрово-лиственничный лес, на стволе березы, 54058,959'с.ш., 109°83,792'в.д., № 01154, Будаева, 13.07.1971. Состав вторичных метаболитов: атранорин, алекториаловая, протоцетра-ровая, констиктовая кислоты. - Баргузинский р-н: Забайкальский национальный парк, окрестности с. Монахово, сосново-лиственничный лес, на основании ствола лиственницы, 53011,131'с.ш., 109°19,966'в.д., № 01149, Будаева, 08.10.1997. Состав вторичных метаболитов: атранорин, норстиктовая, лепраровая, алекториаловая, порфириловая кислоты. - Курумканский р-н, Джергинский заповедник: дол. р. Шергикан, 55°01,385'с.ш., 111°61,859 в.д., № 01162, Харпухаева, 17.07.2004, курум. Состав вторичных метаболитов: криптостиктовая кислота, атра-норин. - Окинский р-н: хр. Восточный Саян, дол. р. Сорок, 1692 м, 52°34'с.ш., 100°07'в.д., кустарниково-осоково-моховое болото, на камне, № 01159, Тубанова, 11.07.2008. Состав вторичных метаболитов: лепраровая, коннорстик-товая, стиктовая, леканоровая, алекториаловая, паннаровая кислоты. - Хр. Восточный Саян, Природный парк «Шумак», в лиственнично-лишайниковом лесу, на выходах карбонатных пород, 1529 м, 51°58,187'с.ш., 101°52,168'в.д., № 01166, Харпухаева, 18.07.2011. Состав вторичных метаболитов: атранорин, алекториа-
ловая, конпорфириловая, констиктовая кислоты. - Там же, на выходах карбонатных пород около впадения р. Громатухи в Шумак, 1602 м, 51057'48"с.ш., 101о52'20"в.д., № 01158, Харпухаева, 19.07.2011. Состав вторичных метаболитов: порфириловая, алекториаловая, леканоро-вая кислоты, атранорин.
9. Lepraria vouauxii (Hue) R.C. Harris -на мхах, почве и камнях.
Исследованные образцы. Северобайкальский р-н: окрестности п. Нижнеангарск, дол. р. Душкачан, склон северо-западной экспозиции, выходы горных пород, 55052,235'с.ш., 109°40,131'в.д., № 01139, Харпухаева, 27.07.2005. Состав вторичных метаболитов: протоцетраро-вая, криптостиктовая, порфириловая, лепраро-вая кислоты. - Курумканский р-н, Джергинский заповедник: дол. р. Баргузин, выходы карбонатных пород, № 01150, Харпухаева, 07.07.2004, курум. Состав вторичных метаболитов: атрано-рин, констиктовая, порфириловая, алекториало-вая кислоты. - Баунтовский р-н: на горном массиве Большой Хоптон (2000 м), 55°05,388'с.ш., 112°52,098'в.д., курум, № 01156, Харпухаева, 07.07.2009. Состав вторичных метаболитов: атранорин, стиктовая, констиктовая, порфири-ловая, паннаровая, алекториаловая, барбатоло-вая, норстиктовая кислоты. - Дол. р. Верхняя Ципа, 1110 м, 55056,398'с.ш., 112017,655'в.д., скалы у воды, № 01151, Харпухаева, 19.07.2009. Состав вторичных метаболитов: атранорин, ле-каноровая, порфириловая кислоты. - Окинский р-н: хр. Восточный Саян, Природный парк «Шумак», на выходах карбонатных пород около впадения р. Громатухи в Шумак, 1602 м, 51057'48"с.ш., 101°52'20"в.д., № 01141, Харпухаева, 19.07.2011.
Заключение. На основе изучения состава вторичных метаболитов выявлено 9 видов рода Lepraria: L. incana, L. membranacea, L. alpina, L. borealis, L. eburnea, L. elobata, L. lobificans, L. neglecta, L. vouauxii. Среди них последние 7 приведены впервые для Республики Бурятия. Кроме того, 4 вида приведены впервые для Южной и Центральной Сибири - L. borealis, L. eburnea, L. elobata, L. vouauxii.
Исследования выполнены при поддержке гранта РФФИ 11-04-90764 моб_ст.
Гербарные образцы переданы в Гербарий
ALTB.
Turczaninowia 2012, 15 (4) : 44-47
47
ЛИТЕРАТУРА
Будаева С.Э. Лишайники лесов Забайкалья. - Новосибирск: Наука. Сиб. отд-е, 1989. - 104 с.
Будаева С.Э. Лишайники Бурятии. - Улан-Удэ: Изд-во Бурятск. госун-та, 2000. - 144 с.
Будаева С.Э. Материалы к флоре лишайников Забайкальского природного национального парка // Бот. журн., 2002. - Т. 87, № 5. - С. 55-62.
Макарова И.И., Гимельбрант Д.Е., Шапиро И.А. Ключ для определения видов рода Lepraria Ach. России // Новости сист. низш. раст., 2006. - Т. 40. - С. 258-273.
Макарова И.И., Гимельбрант Д.Е. Семейство Stereocaulaceae. Lepraria // Определитель лишайников России. - Вып. 10. - СПб.: Наука, 2008. - С. 443-462.
Урбанавичене И.Н., Урбанавичюс Г.П. Лишайники Байкальского заповедника (аннотированный список видов) // Флора и фауна заповедников. - Вып. 68. - М., 1998. - 55 с.
Урбанавичене И.Н., Урбанавичюс Г.П. К флоре лишайников хребта Хамар-Дабан (Южное Прибайкалье) // Новости сист. низш. раст., 1999. - Т. 33. - С. 161-171.
Урбанавичюс Г.П., Урбанавичене И.Н. Лишайники заповедников России // Современное состояние биологического разнообразия на заповедных территориях. - Вып. 2. Лишайники и мохообразные. - М., 2004. -С. 24-216.
Харпухаева Т.М. Лишайники Джергинского государственного природного заповедника. - Улан-Удэ: БНЦ СО РАН, 2010. - 156 с.
Feige G.B., Lumbsch H.T., Huneck S., Elix J.A. Identification of lichen substances by a standardized highperformance liquid chromatographic method // Journal of Chromatography A, 1993. - Vol. 646, Issue 2-3. - P. 417-427.
Saag L., Saag S., Randlane T. World survey of the genus Lepraria (Stereocaulaceae, lichenized Ascomy-cota) // The Lichenologist, 2009. - Vol. 41 (1). - P. 25-60.
