Научная статья на тему 'Новые аспекты в патогенезе Лихорадки Q'

Новые аспекты в патогенезе Лихорадки Q Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
177
66
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
РИККЕТСИОЗ / АГРЕГАЦИЯ ТРОМБОЦИТОВ / ТРОМБОЦИТОПЕНИЯ / RICKETTSIOSIS / PLATELET AGGREGATION / THROMBOCYTOPENIA / COXIELLA BURNETII

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Лазарева Елена Николаевна, Малеев Виктор Васильевич, Галимзянов Халил Мингалиевич, Хок Марина Михайловна, Бабаева Марина Алексеевна

Состояние тромбоцитарного звена гемостаза свидетельствует об активном участии тромбоцитов в патогенезе Лихорадки Q как первичного барьера на пути внедрения Сoxiella burnetii в эндотелий микроциркуляторного русла. Результаты молекулярно-генетического анализа выделения возбудителя из тромбоцитов у больных данного риккетсиоза подтверждает этот взгляд.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Лазарева Елена Николаевна, Малеев Виктор Васильевич, Галимзянов Халил Мингалиевич, Хок Марина Михайловна, Бабаева Марина Алексеевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

New aspects of pathogenesis of Fever Q

The state of platelet hemostasis testifies to the active participation of platelets in the pathogenesis of Fever Q as the primary barrier to implement Сoxiella burnetii in the endothelium of the microvasculature. The results of molecular-genetic analysis of allocation of the pathogen of platelets in patients of this rickettsiosis confirms this view.

Текст научной работы на тему «Новые аспекты в патогенезе Лихорадки Q»

Секция 5. Медицина

Lazareva Elena Nikolaevna, clinical immunology laboratory NIIKIP Medical University AGMA Health Ministry of Russia, Astrakhan

PhD, Senior Researcher, Emal: elniklazareva@yandex.ru Maleev Viktor Vasilevich, Central Research Institute of Epidemiology FBUN Russian Scientific and Clinical Affairs, Moscow RAMS, MD, professor, deputy director Galimzyanov Khalil Mingalievich, Head of the Department of Infectious Diseases Medical University AGMA Health Ministry of Russia, Astrakhan MD, Professor, Rector Medical University AGMA Health Ministry of Russia, Khok Marina Mikhailovna, Clinical Infectious Diseases, Astrakhan Clinicalpharmacologist Regional Hospital, Babaeva Marina Alekseevna, Clinical Infectious Diseases, Astrakhan

Head of clinical laboratory Naetalieva Svetlana Zhanslykovna, Clinical Infectious Diseases Astrakhan

Leading specialist of clinical laboratory

New aspects of pathogenesis of Fever Q

Abstract: the state of platelet hemostasis testifies to the active participation of platelets in the pathogenesis ofFever Qas the primary barrier to implement Coxiella burnetii in the endothelium of the microvasculature. The results of molecular-genetic analysis of allocation of the pathogen of platelets in patients of this rickettsiosis confirms this view.

Keywords: rickettsiosis, platelet aggregation, thrombocytopenia, Coxiella burnetii.

Лазарева Елена Николаевна, клинико-иммунологическая лаборатория НИИКИП ГБОУ ВПО АГМА Минздрава России, г. Астрахань

к. м.н., старший научный сотрудник Emal: elniklazareva@yandex.ru Малеев Виктор Васильевич, ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора России, г. Москва заместитель директора по научной и клинической работе, акад. РАМН, д. м.н., профессор.

Галимзянов Халил Мингалиевич, ГБОУ ВПО АГМА Минздрава РФ, г. Астрахань, д. м.н., профессор, ректор ГБОУ ВПО АГМА Минздрава РФ, заведующий кафедрой инфекционных болезней

51

Section 5. Medical science

Хок Марина Михайловна, Областной инфекционной клинической больницы,

г. Астрахань клинический фармаколог

Бабаева Марина Алексеевна, Областной инфекционной клинической больницы, г. Астрахань Заведующая клинической лабораторией Неталиева Светлана Жанслыковна, Областной инфекционной клинической больницы, г. Астрахань, Ведущий специалист клинической лаборатории

Новые аспекты в патогенезе Лихорадки Q

Аннотация: состояние тромбоцитарного звена гемостаза свидетельствует об активном участии тромбоцитов в патогенезе Лихорадки 0_как первичного барьера на пути внедрения Coxiella burnetii в эндотелий микроциркуляторного русла. Результаты молекулярно-генетического анализа выделения возбудителя из тромбоцитов у больных данного риккетсиоза подтверждает этот взгляд.

Ключевые слова: риккетсиоз, агрегация тромбоцитов, тромбоцитопения, Coxiella burnetii.

Морфологические особенности Coxiella burnetii обусловливают повсеместное распространение Лихорадки 0_и полиморфизм ее клинических проявлений. Она отличается от других видов риккетсий минимальными размерами, наличием трехслойной мембраны с плотно прилегающим слоем гранулярной риккетсио-плазмы, которая ограниченна осмофильной плазматической мембраной. А так же под влиянием антибактериальных средств данная риккетсия способна трансформироваться в L-формы, что способствует формированию хронического течения данной инфекции [1, 679-688; 2, 297-309; 3, 219-26].

На экспериментальной модели Лихорадки 0_был доказан тропизм возбудителя к клеткам соединительной ткани и ретикулоэндотелиальной системы, а так же возможность его размножения в гистиоцитах сосудистых сплетений и адвентициальных клетках вен [4, 309-326; 5, 219-226; 6, 75-83; 7, 80-86.]. Особое внимание заслуживают сообщения о длительной циркуляции возбудителя в организме человека. В результате этого развиваются тромбофлебиты, аневризма аорты, миокардиты, эндокардиты, генез которых непосредственно связан с системой гемостаза [1, 679-688; 8, 382-387; 9, 635-640; 10, 505-514; 11, 350-356], что в свою очередь не исключает вероятность взаимодействия тромбоцитов с Coxiella burnetii

Цель исследования: определить связь нарушений в системе гемостаза с прямым влиянием Coxiella burnetii на тромбоциты как одного из ключевых механизмов патогенеза Лихорадки Q.

Материалы и методы. С 2009 по 2010 гг. на базе Астраханской государственной медицинской академии и Областной клинической инфекционной больницы

52

Секция 5. Медицина

г. Астрахани было проведено клинико-лабораторное обследование 41 больного в возрасте 39,90±0,75 лет с диагнозом Лихорадка Q подтвержденного выделением генома возбудителя методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) и в реакции иммуноферментного анализа (ИФА) с антигеном ^xiella burnetii.

Забор крови у пациентов осуществлялся на фоне лихорадки на второй день госпитализации в стационар, что в среднем совпадало с 5,70±0,38 днем болезни. Счет тромбоцитов в венозной крови, изучение их функциональной активности проводили с помощью программы AGGR (версия 2.53) на анализаторе агрегации НФП БИОЛА (модель 230LA). С использованием ПЦР геномную ДНК ^xiella burnetii выделяли из лейкоцитарного осадка, полученного согласно инструкции по применению тест-системы «АмплиСенс Coxiella burnetii-Fl» (ЦНИИ эпидемиологии, Москва), и осадка тромбоцитов, отмытых от лейкоцитов и эритроцитов. В основу выделения кровяных пластинок был положен метод A. Camilletii и соавт. (2001) с изменением некоторых этапов подготовки биологического материала [12, 382-386; 13, 45].

Результаты. Существует мнение, что для Лихорадки Q не характерно развитие геморрагического синдрома, однако многие клиницисты в период разгара болезни отмечали тромбоцитопению, при этом более чем в 20% случаев регистрировали клинические проявления гемокоагуляционных нарушений в виде геморрагической сыпи и различных кровотечений [4, 309-326; 14, 2-10]. Среди наблюдаемых больных геморрагические явления были выявлены в 34,7% случаев и преимущественно в период сезонного подъема заболеваемости (апрель-июнь). Наиболее часто диагностировали гематомы (27,2%), возникающие на 7,91±0,86 день болезни в местах инъекций и давления мягких тканей. Момент их регрессии наступал в среднем через трое суток с полным разрешением к моменту выписки на 15,40±2,17 день болезни. Воспалительная реакция слизистой в виде отечности и гиперемии всегда предшествовала кровоточивости десен (2,4%). Преимущественно регистрировали не обильные и кратковременные носовые кровотечения (9,2%). Диспепсический синдром сопровождался наличием прожилок крови в рвотных массах (3,4%) или в виде мелены (4,5%). Изменения со стороны кожи были представлены появлением розеолезно-папулезных (22,1%) и геморрагических элементов (9,3%) сыпи в среднем на четвертый день болезни. У двух больных отмечалась трансформация розеол в петехии на пятые сутки заболевания, а у остальных одномоментное появление мелкоточечных геморрагий преимущественно на нижних конечностях и боковых поверхностях туловища.

Исследования состояния гемостаза выявили в основном изменения тром-боцитарного звена независимо от клинических проявлений геморрагического синдрома. Была отмечена тенденция к снижению количества тромбоцитов в период разгара (93х10 9/л±4,10), а в 27% случаев регистрировали тромбоцитопению

53

Section 5. Medical science

до 27х10 9/л. Степень агрегации, отражающая количество кровяных пластинок, участвующих в процессах агрегации, уменьшалась в четыре раза от контрольных значений (6,10%±0,81 и 24,30%±1,40 соответственно). Промежуток времени, за который тромбоциты сохраняли способность к процессам агрегации и дезагрегации сокращался (79"±1,40 и 241"±0,50 соответственно). Скорость агрегации была увеличена в 1,5 раза, при этом радиус агрегатов достоверно уменьшался до 4,81 ед. ± 0,30 при контрольных значениях 6,50 ед. ± 0,70.

Показатели коагуляционного звена гемостаза колебались в пределах контрольных значений. Только в 50% случаев было отмечено увеличение содержания фибриногена В, который в настоящее время рассматривают как показатель воспаления сосудистой стенки.

Таким образом, у наблюдаемых пациентов изменения в системе гемостаза были выявлены преимущественно в тромбоцитарном звене, что дает основания предполагать возможность прямого воздействия Coxiella burnetii на кровяные пластинки подобно как при вирусных и бактериальных инфекциях с вазотропным воздействием возбудителя [15, 103-108; 16, 1593-1595; 17, 727-755].

Данное предположение нашло отражение в результатах выделения ДНК Coxiella burnetii в осадке тромбоцитов методом ПЦР у всех наблюдаемых: у 22% - только из тромбоцитов и в 78% - как из лейкоцитов, так и тромбоцитов. Флуоресцентный сигнал в ПЦР в режиме реального времени детектировался раньше в кровяных пластинках, а именно в 54,8% случаев и только в 43% - в лейкоцитах.

а)

54

Секция 5. Медицина

Рисунок. Кривые флуоресцентного сигнала в режиме реального времени: а) внутреннего контроля (ВКО) больного Д; б) амплификации Coxiella burnetii раньше, чем в осадке лейкоцитов больного Д; в) внутреннего контроля (ВКО) больного К; г) амплификации Coxiella burnetii только в тромбоцитах больного К.

55

Section 5. Medical science

Кривые флуоресцентного сигнала в режиме реального времени на рисунке в вариантах «а» и «б», свидетельствуют о том, что в среде с тромбоцитами детекция генома Coxiella burnetii происходит раньше (Tr- 17,39 у. е.), чем в осадке лейкоцитов (Le-23,2 у. е.). А в вариантах «в» и «г» сигнал был зафиксирован только в среде с тромбоцитами (Tr- 26,36 у. е.). В некоторых ситуациях это могло бы повлиять на правильность клинического диагноза и тактики терапии больных. В данном исследовании в четырех случаях диагноз Лихорадка Q не был поставлен в виду того, что результаты выделения генома ПЦР из лейкоцитарного осадка были отрицательными, а из-за ранней выписки больных из стационара отсутствовала возможность проведения серологической верификации.

Обсуждение и выводы. Результаты научных изысканий последних лет с помощью методов проточной цитометрии, агрегатометрии и генодиагностики инфекционных болезней позволили определить тромбоциты как первый барьер защиты организма от инфекционного агента. В настоящее время раскрыты механизмы взаимодействия кровяных пластинок с некоторыми видами вирусов и бактерий как in vivo, так и in vitro [15, 103-108; 16, 1593-1595; 17, 727-755;]. По данным T. Youssefian и соавт. [18,4021-4029] тромбоциты активно фагоцитируют золотистый стафилококк благодаря гидролитическим ферментам, накопленных в лизосомальных гранулах, и NO, который при экстремальных состояниях в них синтезируется в десятки раз больше, чем в нейтрофилах [19;28-32].

Исследования I. N. Gavrilovskaya и соавт. (2010) свидетельствуют о том, что клетками мишенями для хантавирусов являются не только эндотелиальные клетки, но и тромбоциты. [20,4832-4839;21, 1163-1168]. Обнаружение аденовирусов и вирусов Коксаки в тромбоцитах позволяет утверждать, что вирусы способны оказывать прямое воздействие на функциональную активность кровяных пластинок и тем самым вызывать нарушения в системе гемостаза, которые значительно влияют на тяжесть течения и исход инфекционных заолеваний [22,4866-4871;23,456-461].

Результаты данного исследования выявили участие тромбоцитов в патогенезе Лихорадки Q Подтверждение молекулярно-генетическим анализом с выделением возбудителя из тромбоцитов позволяет рассматривать в период разгара заболевания тромбоцитопению со снижением агрегационной активности кровяных пластинок как факт взаимодействия их с Coxiella burnetii, при этом они выступают первичный барьером на пути внедрения Coxiella burnetii в эндотелий микроциркуляторного русла. Механизмы их взаимодействия требуют дальнейшего изучения, однако при клиническом наблюдении за больными при данном риккетсиозе необходимо оценивать состояние тромбоцитарного звена для определения тактики фармакотерапии.

56

Секция 5. Медицина

Список литературы:

1. Parker N.R, Barralet J.H, Bell AM Qfever.-Lancet. 2006

2. Angelakis E, Raoult D Qfever. -Vet Microbiol. 2010

3. Raoult, D., Marrie T., Mege J. Natural history and pathophysiology of Qfever.-Lancet Infect Dis. 2005.

4. Лобан, К. М. Важнейшие риккетсиозы человека. - Л.: Медицина., 1980;

5. Raoult, D., Marrie T., Mege J. Natural history and pathophysiology of Qfever. -Lancet Infect Dis. 2005; 5.

6. Хавкин, Т. Н. Патологоанатомическое и экспериментальное изучение морфологии Ку-риккетсиоза. Архив патологии. -1977; Т. 39, № 2:

7. Балаева, Н. М. Взаимодействие риккетсий с клетками — эукариота-ми/ЖМЭИ. -1990; 2.

8. Delsing, C. E., Kullberg B. J., Bleeker-Rovers C. P. Qfever in the Netherlands from 2007 to 2010.Neth J Med. -2010; 68.

9. Botelho-Nevers, E., Fournier P. E., Richet H. et al. Coxiella burnetii infection of aortic aneurysms or vascular grafts: report of 30 new cases and evaluation of outcome./Eur J Clin Microbiol Infect Dis.- 2007; 26.

10. Tissot-Dupont, H., Raoult D. Qfever./Infect Dis Clin North Am. -2008; 22.

11. Frankel, D., Richet H., Renvoise A., Raoult D. Q fever in France, 1985-2009.-Emerg Infect Dis.- 2011; 17.

12. Camilletti, A., Moretti N., Giacchetti G. et al. Decreased nitric oxide levels and increased calcium content in platelets of hypertensive patients. Am J Hypertens. - 2001, Vol. 14.

13. Лазарева Е. Н., Неталиева С. Ж. Способ подготовки биологического материала для выделения ДНК Coxiella burnetii.- Патент на изобретение № 2475741, Бюл. - 2013, № 5.

14. Пашанина, Т. П., Рыбкина Р. А., Смелянский В. П. Ку-лихорадка: Этиология, эпидемиология, клиника, лабораторная диагностика, лечение: Методические рекомендации. -Волгоград: Изд-во ВолГу 2004.

15. Czuprynski, C.J., Balish E. Interaction of rat platelets with Listeria monocytogenes.-Infect Immun. -1981, 33.

16. Nicolau, D. P., Freeman C. D., Nightingale C. H., et al. Reduction of bacterial titers by low-dose aspirin in experimental aortic valve endocarditis.- Infect Immun.- 1993; 61.

17. Yeaman, M. R., Bayer A. S. Platelets in antimicrobial host defense. In: Michelson A, editor. Platelets. 2. - New York: Academic., 2006.

18. Youssefian, T., Drouin A., Masse J. M., et al. Host defense role of platelets: engulfment of HIV and Staphylococcus aureus occurs in a specific subcellular compartment and is enhanced by platelet activation.- Blood. 2002; 99.

57

Section 5. Medical science

19. Голиков, П. П., Леменев В. Л., Николаева Н. Ю. Продукция оксида азота лейкоцитами и тромбоцитами периферической крови человека в норме и при сосудистой патологии.- Гематол. и трансфузиол. 2003;48 (2)

20. Gavrilovskaya, I. N., Gorbunova E. E., Mackow E. R. Pathogenic Hantaviruses Direct the Adherence of Quiescent Platelets to Infected Endothelial Cells.-J Virol. 2010; 84 (9).

21. Raymond, T., Gorbunova E., Gavrilovskaya I. N.et al. Pathogenic hantaviruses bind plexin-semaphorin-integrin domains present at the apex of inactive, bent alphavbeta3 integrin conformers.- Proc.Natl.Acad.Sci. U.S. A. 2005; 102

22. Stone, D., Liu Y., Shayakhmetov D., et al. Adenovirus-platelet interaction in blood causes virus sequestration to the reticuloendothelial system of the liver. J Virol. 2007; 81: 4866-4871.

23. Gupalo, E., Buriachkovskaia L., Othman M. Human platelets express CAR with localization at the sites of intercellular interaction. -Virol J. 2011; 8

Maltseva Alla Nikolaevna, Kursk State Medical University Assistant, Department of obstetrics and gynecology FPO

E-mail: egip5@mail.ru

Treatment and prevention of wound infection after episiotomy

Abstract: Whatever the effective measures of a General effect on the organism, to localize the infection, wound dictates the need for local, not less than effective treatment [2]. The combination of neomycin and bacitracin (baneuoqin), with a wide antibacterial spectrum of action on aerobic and anaerobic flora, contributed to the study of the effectiveness of treatment and prevention ofwound infection after episiotomy.

Key words: wound infection pussy, episiotomy, baneuoqin.

Мальцева Алла Николаевна, Курский Государственный Медицинский Университет Ассистент, кафедра акушерства и гинекологии ФПО

Е-mail: egip5@mail.ru

Лечение и профилактика раневой инфекции после эпизиотомии

Аннотация: Какими бы ни были эффективными меры общего воздействия на организм, чтобы локализовать инфекцию, рана диктует необходимость мест-

58

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.