CC BY
369
ОБЗОРЫ
УДК 615.273.52
НОВЫЕ АНТИАГРЕГАНТЫ - БЛОКАТОРЫ ТРОМБОЦИТАРНЫХ
Р2-РЕЦЕПТОРОВ
Айрат Усманович Зиганшин
Кафедра фармакологии фармацевтического факультета с курсом фармакогнозии и ботаники (зав. — проф. А.У. Зиганшин) Казанского государственного медицинского университета, e-mail airatziganshin@yahoo.co.uk
Реферат
Описано участие Р2-рецепторов в агрегации тромбоцитов как начального этапа артериального тромбоза. Даны фармакологические характеристики трех подтипов Р2-рецепторов, имеющихся в тромбоцитах, представлена их роль в агрегации тромбоцитов. Описаны достоинства и недостатки широко используемых в клинике тиенопиридиновых антиагрегантов (ти-клопидин, клопидогрел), оказывающих свой эффект за счет блокады тромбоцитарных P2Y12-рецепторов. Представлены характеристики новейших и перспективных антиагрегантов, влияющих на Р2-рецепторы тромбоцитов.
Ключевые слова: Р2-рецепторы, тромбоциты, анти-агреганты, антагонисты P2Y12-рецепторов, клопидог-рел.
Известно, что артериальный тромбоз как следствие атеросклеротического поражения коронарных сосудов служит основной причиной острого инфаркта миокарда. Поэтому лекарственные препараты, обладающие анти-тромботическим действием, являются в настоящее время важнейшими средствами профилактики инфаркта миокарда и ишемических инсультов. В отличие от венозного, артериальный тромбоз в своей основе обусловлен адгезией и агрегацией тромбоцитов [40]. Именно поэтому препараты, угнетающие способность тромбоцитов к агрегации (антиагреганты), весьма эффективны для снижения риска артериального тромбоза [8, 29, 38, 42]. Описано несколько групп лекарственных препаратов, обладающих антиагрегантным эффектом, из которых в первую очередь следует выделить ингибиторы синтеза тромбоксана А2 (аспирин, или ацетилсалициловая кислота), блокаторы гликопротеиновых (ГП) ПЬДШ рецепторов (абциксимаб) и антагонисты Р2 рецепторов (тиклопидин, клопидогрел) [31, 41].
Ацетилсалициловая кислота уже несколько десятилетий успешно применяется как антиагрегант, и в настоящее время она является эталонным препаратом сравнения при изучении антиагрегантного эффекта новых антитромботических препаратов [31]. Однако кроме хорошо известных побочных эффектов препарата (ульцерогенность, повышение кровоточивости), у значительного числа пациентов
регистрируется толерантность к аспирину, т. е. отсутствие антиагрегантного эффекта [37].
Абциксимаб относится к классу монокло-нальных антител к ГП ПЬДШ рецепторам и потому является наиболее эффективным средством предупреждения агрегации тромбоцитов, но необходимость внутривенного введения препарата и кратковременность действия существенно ограничивают его применение [15]. В настоящее время проводятся клинические испытания ряда пероральных блокаторов ГП ПЬДШ рецепторов, однако результаты не внушают большого оптимизма в связи с их низкой эффективностью и зарегистрированным повышением смертности больных [14].
Появившийся относительно недавно на фармацевтическом рынке новый класс ан-тиагрегантов — антагонистов Р2-рецепторов тромбоцитов — имеет хорошие перспективы и является серьезной альтернативой применения аспирина, особенно в тех случаях, когда оно невозможно в связи с имеющимися противопоказаниями. В этом обзоре приведены физиологические и фармакологические основы клинического использования антиагрегантов, влияющих на тромбоцитарные Р2-рецепторы, дана оценка их эффективности и безопасности, а также перспективы создания новых препаратов подобного механизма действия.
Аденозиндифосфат и агрегация тромбоцитов
Тромбоциты являются безъядерными клетками крови, имеют дискообразную форму и в покое не взаимодействуют ни с какими другими клетками крови или кровеносных сосудов. Однако при нарушении целостности кровеносного сосуда, в том числе при атеро-склеротическом повреждении интимы, обнажается субэндотелиальный слой, к молекулам которого (коллаген, фибронектин, ламинин) происходят адгезия тромбоцитов и их активация. Последнее ведет к увеличению объема тромбоцита, приобретению им сферообразной формы с многочисленными выростами (фи-лоподии), что значительно увеличивает площадь его поверхности. Одновременно с этим из тромбоцитов начинает высвобождаться
большое количество биологически активных веществ [тромбоксан А2 (ТХА2), аденозинди-фосфат (АДФ), серотонин], которые активируют другие тромбоциты, и начинается процесс их агрегации, т. е. слипания, что создает основу для формирования артериального тромба [1, 2, 8, 40].
АДФ—один из основных эндогенных участников как гемостаза, так и тромбоза. При этом сам по себе АДФ является слабым стимулятором этих процессов в сравнении с мощными эффектами тромбина и коллагена. Однако высокое содержание АДФ в тромбоцитах и соответственно высокая локальная концентрация его при активации тромбоцитов обеспечивают ему важную роль вторичного усилителя ответа тромбоцитов и стабилизатора образующегося тромба. Именно АДФ приводит к изменению формы тромбоцитов при активации и усиливает процессы агрегации [5].
Агрегантные эффекты АДФ опосредуются специфическими рецепторами, относящимися к классу Р2 (нуклеотидных) рецепторов, находящихся на поверхности тромбоцитов [17, 20, 32]. Р2-рецепторы — мембранные рецепторы и по механизму передачи сигнала делятся на два семейства: Р2Х-рецепторы, являющиеся лиганд-оперирующими ионными каналами, и Р2У-рецепторы, относящиеся к группе О-про-теин-опосредованных рецепторов. В настоящее время в номенклатуру рецепторов внесено 7 подтипов Р2Х-рецепторов и 8 подтипов Р2У-рецепторов [3, 10, 11]. В тромбоцитах установлено наличие трех подтипов Р2-рецепторов — Р2У1, Р2У12 и Р2Х1, каждый из которых играет специфическую функциональную роль в процессе агрегации тромбоцитов [29].
Р2-рецепторы тромбоцитов
Наиболее клинически значимыми из всех тромбоцитарных Р2-рецепторов являются Р2У12-рецепторы, поскольку именно на их блокаде основано действие широко используемых в клинике теинопиридиновых антиагрегантов [6, 42]. Стимуляция Р2У12-рецепторов адено-зиндифосфатом ведет к потенцированию агрегации тромбоцитов, вызванной как самим АДФ, так и другими индукторами агрегации — коллагеном, тромбином, ТХА2, серотонином эпинефрином. Кроме того, стимуляция Р2У12-рецепторов повышает секрецию тромбоцитов и прокоагулянтную активность факторов свертывания [20, 29]. У мышей, генетически дефицитных по Р2У12-рецепторам, значительно снижена способность тромбоцитов к агрегации независимо от индуктора агрегации и существенно удлинено время кровотечения из раны [19]. Описано несколько пациентов с подобным генетическим дефицитом, у которых 74
имеются аналогичные симптомы [13].
Р2У1-рецепторы широко представлены в тканях человека и животных [12], однако в тромбоцитах их плотность не очень велика и составляет примерно одну десятую от плотности тромбиновых РЛЯ-1 рецепторов [7]. В результате стимуляции Р2У1-рецепторов аде-нозиндифосфатом из внутриклеточных депо мобилизуются ионы кальция, что приводит к изменению формы тромбоцита и запускает фазу слабой обратимой агрегации тромбоцитов [22]. Важно отметить, что наличие Р2У1-рецепторов абсолютно обязательно для реализации АДФ-индуцируемой агрегации тромбоцитов, поскольку их фармакологическая блокада полностью предупреждает данный процесс [24]. Это же подтверждается и на генетически-дефицитных по названному рецептору мышах, у которых обычные концентрации АДФ не способны запустить агрегацию тромбоцитов; для инициирования агрегации у подобных животных требуются очень высокие концентрации АДФ, в которых этот агонист начинает стимулировать Р2У12-рецепторы [18]. Установлено, что Р2У1-рецепторы участвуют также в коллаген-индуцируемом изменении формы тромбоцитов в условиях угнетения образования ТХА2 аспирином [16].
Р2У1- и Р2У12-рецепторы функционируют в тесном содружестве в реализации ответа тромбоцитов на АДФ; Р2У1-рецепторы обеспечивают изменение формы тромбоцита и начальную обратимую микроагрегацию, а Р2У12-рецепторы потенцируют макроагрегацию и стабилизируют образование тромба [29, 40]. Поэтому фармакологически перспективными являются средства, влияющие как на один, так и на другой подтип рецепторов.
Р2Х1-рецепторы особенно плотно представлены в гладкомышечных органах (мочевой пузырь, семявыносящий проток, кровеносные сосуды), где они опосредуют быстрый сократительный ответ ткани [12]. Основным физиологическим агонистом Р2Х1-рецепторов является АТФ, а АДФ практически неэффективен. Считается, что роль Р2Х1-рецепторов в процессе агрегации тромбоцитов не столь значима, как первых двух описанных Р2-рецепторов. Стимуляция Р2Х1-рецепторов ведет к тромбообра-зованию [35], однако при фармакологической блокаде Р2У1- и Р2У12-рецепторов стимуляция Р2Х1-рецепторов приводит лишь к мобилизации внутриклеточного кальция и изменению формы тромбоцитов, но не способна запустить агрегацию [39]. Предполагается, что в физиологических условиях Р2Х1-рецепторы имеют минимальное значение в агрегации тромбоцитов, которое ограничивается участием в изменении формы тромбоцита при его активации, что подтверждается и на генетически дефицит-
Таблииа 1
Расшифровка аббревиатур клинических испытаний, упомянутых в обзоре
Исследование Расшифровка Перевод
CAPRIE Clopidogrel versus Aspirin in Patients at Risk of Ischaemic Events Клопидогрел в сравнении с аспирином у пациентов с риском ишемических событий
CHAMPION PCI A Randomized Trial Comparing a New ADP Antagonist, Intravenous Cangrelor, with Clopidogrel in Patients Undergoing Percutaneous Coronary Intervention Рандомизированное испытание, сравнивающее новый антагонист АДФ кангрелор внутривенно с клопидогрелом у пациентов, перенесших чрескожную коронаропластику
CHAMPION PLATFORM A Clinical Trial Comparing Treatment with Cangrelor (in combination with usual care) to Usual Care, in Subjects Who Require Percutaneous Coronary Intervention Клиническое испытание, сравнивающее лечение кангрелором (в комбинации с обычной терапией) со стандартной терапией у лиц, нуждающихся в чрескожной корона-ропластике
CHARISMA Clopidogrel for High Atherothrombotic Risk and Ischemic Stabilization, Management, and Avoidance Клопидогрел при высоком атеротромботи-ческом риске и ишемическая стабилизация, ведение и предотвращение
CLASSICS clopidogrel aspirin stent international cooperative study Клопидогрел аспирин стент — международное совместное исследование
CREDO Clopidogrel for the Reduction of Events During Observation Клопидогрел для снижения (частоты сердечно-сосудистых) событий во время наблюдения
CURE Clopidogrel in Unstable angina to prevent Recurrent ischemic Events Клопидогрел при нестабильной стенокардии для предупреждения рецидивов ишемичес-ких событий
CURRENT Clopidogrel optimal loading dose Usage to Reduce Recurrent EveNTs Использование оптимальной насыщающей дозы клопидогрела для снижения (частоты) рецидивов сердечно-сосудистых событий
DISPERSE The Dose сonfirmation Study assessing anti-Platelet Effects of AZD 6140 vs Clopidogrel in non-ST-elevation MI Исследование уточнения дозы антитромбо-тического эффекта AZD 6140 в сравнении с клопидогрелом при инфаркте миокарда без подъема интервала ST
ERASE-MI Safety and Efficacy Study of Adjunctive Antiplatelet Therapy Prior to Primary PCI in Patients With STEMI Исследование безопасности и эффективности дополнительной антитромбоцитар-ной терапии до первичной чрескожной коронаропластики у больных инфарктом миокарда с подъемом интервала ST
INNOVATE-PCI A Phase 2 Safety and Efficacy Study of PRT060128, a Novel Intravenous and Oral P2Y12 Inhibitor, in Non-Urgent PCI II фаза исследования безопасности и эффективности РКТ060128 - нового внутривенного перорального ингибитора Р2У12 (рецепторов) при неэкстренной чрескожной корона-ропластике
JUMBO-TIMI Joint Utilization of Medications to Block platelets Optimally - Thrombolysis In Myocardial Infarction Совместное применение лекарств для оптимального блокирования тромбоцитов -тромболизис при инфаркте миокарда
MATCH Management of AtheroThrombosis with Clopidogrel in High-risk patients with recent transient ischemic attack or ischemic stroke Регулирование атеротромбоза клопидогрелом у пациентов высокого риска, перенесших недавно преходящую ишемическую атаку (на сердце) или ишемический инсульт
PLATO A study of Platelet inhibition and patient Outcomes Исследование угнетения тромбоцитов и исходов у пациентов
PRINCIPLE-TIMI Prasugrel in ramparison to Clopidogrel for Inhibition of Platelet activation and aggregation -Thrombolysis In Myocardial Infarction Празугрел в сравнении с клопидогрелом для угнетения активации тромбоцитов и агрегации - тромболизис при инфаркте миокарда
TRITON-TIMI TRial to assess Improvement in Therapeutic Outcomes by optimizing platelet inhibitioN with prasugrel -Thrombolysis In Myocardial Infarction Испытание для оценки улучшений терапевтических исходов в результате оптимизации угнетения тромбоцитов празугрелом - тром-болизис при инфаркте миокарда
ных по Р2Х1-рецепторам мышах, у которых не выявляется никаких признаков нарушения гемостаза [25].
Блокаторы Р2У12-рецепторов
Принципиальная возможность фармакологического угнетения агрегации тромбоцитов посредством блокады тромбоцитарных Р2-рецепторов была высказана еще в 80-е годы прошлого столетия, и уже в 90-е годы появились лекарственные препараты подобного действия [33]. Первыми препаратами в этой новой группе лекарственных средств стали тиенопиридиновые производные тиклопидин и клопидогрел. Они являются про-лекарства-ми, из которых в организме в результате метаболизма образуются активные метаболиты — антагонисты Р2У12-рецепторов [20].
Тиклопидин исторически появился первым на фармацевтическом рынке, однако довольно быстро у него обнаружились проблемы в отношении как безопасности, так и фармакологической эффективности. В частности, применение тиклопедина повышало риск развития нейтропении, тромбоцитопе-нии, вызывало кожный зуд и диспептические расстройства [9]. При этом антиагрегантный эффект препарата развивался медленно — стабильный эффект устанавливается примерно через 5 дней постоянного приема. Поэтому в настоящее время клопидогрел, появившийся чуть позже, но имеющий лучший по сравнению с тиклопидином профиль безопасности, стал препаратом выбора из этой группы ан-тиагрегантов [9]. Кроме того, было установлено, что клопидогрел может быть применен в нагрузочной дозе, позволяющей получить эффект в течение нескольких часов с момента приема препарата [34].
Клопидогрел хорошо всасывается в желудочно-кишечном тракте и быстро метаболизи-руется, исчезая из периферической крови в течение 2 часов с момента приема. В результате метаболизма с участием изофермента CYP3A4 в печени образуется активный метаболит, который не выявляется в свободном виде в периферической крови и, видимо, необратимо связывается с Р2Y12-рецепторами тромбоцитов уже в печеночном кровотоке [4, 31]. Образование активного метаболита клопидогрела и соответственно антиагрегантную активность препарата повышают индукторы микросо-мальных ферментов печени [31].
Эффективность и безопасность тиенопи-ридинов была оценена в большом количестве клинических испытаний (CAPRIE, CURE, CREDO, MATCH, CLASSICS и др., табл. 1.), дизайн и результаты которых подробно изложены в обзорах [5, 23, 28, 38, 42]. В большинст-76
ве случаев эффективность клопидогрела сопоставима с таковой аспирина или даже выше, притом что клопидогрел, как правило, имеет лучший профиль безопасности. Однако обнаружились и некоторые специфические проблемы. Одной из таковых стало выявление так называемых резистентных к клопи-догрелу пациентов, число которых достигает 31% [4, 32]. Причинами резистентности могут быть неприменение назначенного препарата (плохой комплайенс, т. е. приверженность к приему препарата), недостаточная дозировка, плохая абсорбция в кишечнике, нарушение метаболизма в печени и др. Кроме того, на проявление резистентности могут оказать влияние генетические особенности пациента, прием других лекарств, курение, гиперхолес-теринемия. Есть свидетельства, что использование новых схем лечения с назначением высоких насыщающих доз препарата до 600— 900 мг/сут в значительном проценте случаев позволяет преодолеть резистентность, однако не исключает ее полностью [34]. Еще одним недостатком клопидогрела считаются необратимость его действия и длительное последействие (5—7 дней, длительность жизни тромбоцитов), что повышает риск кровотечений у больных, нуждающихся в оперативном лечении и не прекративших своевременно прием препарата до операции [31].
В настоящее время на фармацевтическом рынке США и Европы появился третий тие-нопиридиновый препарат — празугрел. Как и другие тиенопиридины, он требует метаболической активации в организме, однако в этом случае более быстрой — процесс угнетения тромбоцитарных Р2У12-рецепторов на 70% происходит уже в течение одного часа с момента приема препарата [6]. Снижение агрегации тромбоцитов начинается в течение 30 минут после его приема и длится до 72 часов. Недавно завершившиеся клинические испытания празугрела (ШМВО-Т1М1, PRINCIPLE-TIMI, TRITON-TIMI и др.) выявили его большую эффективность и лучшую безопасность по сравнению с клопидогрелом [6, 32]. Истинные же клинические достоинства и недостатки пра-зугрела будут очевидны лишь через некоторое время после начала его широкого клинического применения.
Новое поколение блокаторов тромбоцитар-ных Р2У12-рецепторов открывают препараты тикагрелор и кангрелор, не относящиеся к ти-енопиридиновым производным [6]. Они интересны тем, что не требуют метаболической активации в организме и являются обратимыми конкурентными блокаторами Р2У12-рецеп-торов. Тикагрелор имеет относительно короткий период полужизни, применяется внутрь два раза в день. Клинические испытания
(DISPERSE 2 и PLATO) установили сопоставимую эффективность препарата в сравнении с клопидогрелом при несколько худшем профиле безопасности. Кангрелор является препаратом быстрого, но очень короткого действия. При внутривенном болюсном введении кангрелора угнетение агрегации тромбоцитов происходит практически сразу и длится примерно 20 минут. Поэтому препарат имеет очевидное преимущество при необходимости получения экстренного антиагрегантного эффекта с возможностью быстрой отмены эффекта, что актуально, например, у кардиохирурги-ческих пациентов. Клинические испытания (CHAMPION-PCI и CHAMPION-PLATFORM) должны оценить значение этого препарата в лечении подобных пациентов [6, 32].
Элиногрел (PRT060128) — другой препарат этого класса, структуру которого создатели препарата не раскрывают. Он успешно прошел предклинические и первую фазу клинических испытаний и в настоящее время находится на второй фазе клинических испытаний (ERASE-MI, INNOVATE-PCI). Очевидным достоинством препарата является возможность его применения как внутрь, так и внутривенно [21]. Перспективность препарата демонстрирует тот факт, что компания "Novartis" намерена выкупить все права на него у разработчика препарата компании "Portola Pharmaceuticals".
Хорошие перспективы имеют два других антиагреганта — ВХ667 и его активный метаболит ВХ048, которые в экспериментальных условиях превосходят по эффективности кло-пидогрел [43]. Вскоре должны начаться запланированные клинические испытания этих веществ, в ходе которых станет ясно, оправдывают ли они высокие надежды, возложенные на них разработчиками.
Блокаторы Р2У1-и Р2Х1-рецепторов
Несмотря на то что Р2У1-рецепторы тромбоцитов совершенно определенно могут являться мишенью для фармакологического воздействия, создание препаратов, блокирующих тромбоцитарные Р2У1-рецепторы, заметно отстает от разработки антагонистов Р2У12-рецепторов. В экспериментах на мышах установлено, что введение селективного антагониста Р2У1-рецепторов MRS2179 достоверно повышает устойчивость животных к тромбозу, вызванного различными индукторами свертывания крови, лишь умеренно увеличивая время кровотечения [30]. Совместное применение клопидогрела с MRS2179 или с его аналогом MRS2500 существенно повышает антиагрегантный эффект каждого из них по отдельности [27].
Было уже отмечено, что генетически дефицитные по Р2Х1-рецепторам мыши не имеют видимых проблем с точки зрения физиологического гемостаза, однако эти мыши проявляют устойчивость к системному тромбозу, вызываемому смесью коллагена и адреналина [25]. Кроме того, мыши с генетически увеличенным содержанием Р2Х1-рецепторов по сравнению с обычными особями более склонны к системному тромбозу [36], что может быть связано с повышенной чувствительностью Р2Х1-рецепторов к высокой скорости кровотока в суженных сосудах. В экспериментальных условиях селективный антагонист Р2Х1-рецеп-торов NF449 угнетал активацию тромбоцитов и замедлял тромбообразование in vivo [26]. Все это свидетельствует о том, что потенциально блокаторы Р2У1-рецепторов и Р2Х1-рецепторов достойны внимания разработчиков новых ан-тиагрегантов.
Таким образом, средства, проявляющие антиагрегантный эффект в результате антагонизма с Р2-рецепторами, имеют хорошую клиническую перспективу. Клопидогрел и ти-клопидин уже составляют в настоящее время серьезную конкуренцию аспирину в качестве антиагрегантов и весьма успешно применяются для профилактики инсульта и инфаркта миокарда [20, 32], а появление новых препаратов этого ряда следует ожидать в самом ближайшем будущем. Очевидно, что пополнение класса антиагрегантов в ближайшее время будет происходить за счет появления новых блокаторов Р2У12-рецепторов, однако хочется верить, что при поиске и создании новых лекарственных препаратов не будут проигнорированы и блокаторы Р2У1-, и Р2Х1-рецепторов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Литвинов Р.И. Современные ингибиторы функции тромбоцитов // Казанский мед. ж. — 2004. — Т. 85, № 2. — С. 125—134.
2. Муляр А.Г., Гасанов М.Т., Ющук Е.Н. и др. Рецеп-торная регуляция активности тромбоцитов // Эксп. клин. фармакол. — 2004. — Т. 67, № 1. — С. 61—68.
3. Alexander S.P.H., Mathie A, Peters J.A. Guide to Receptors and Channels (GRAC), 3rd edition // Br. J. Pharmacol. — 2008. — Vol. 153, Suppl. 2. — P. S1. — S209.
4. Alqahtani A.A.R., Moe G. Clopidogrel resistance // Cardiol. Round. — 2008. — Vol. 13. — P. 1—6.
5. Angiolillo D.J. ADP receptor antagonism. What's in the pipeline? // Am. J. Cardiovasc. Drugs. — 2007. — Vol. 7. — P. 423—432.
6. Angiolillo D.J, Capranzano P. Pharmacology of emerging novel platelet inhibitors // Am. Heart J. — 2008. — Vol. 156 (2 Suppl). — P. S10—S15.
7. Baurand A., Raboisson P., Freund M. et al. Inhibition of platelet function by administration of MRS2179, a P2Y1 receptor antagonist // Eur. J. Pharmacol. — 2001. — V. 412. — P. 213—221.
8. Belcher P.R., Drake-Holland A.J., Noble M.I.M. The antiplatelet drug target in atherosclerotic diseases // Cardiovasc. Hematol. Disord. Drug Targ. — 2006. — Vol. 6. — P. 43—55.
9. Bertrand M.E, Rupprecht H.J., Urban P. Double-blind of the safety of clopidogrel with and without a loading dose in combination with aspirin compared with ticlopidine in combination with aspirin after coronary stenting: the Clopidogrel Aspirin Stent International Co-operative Study (CLASSICS) // Circulation. — 2000. — Vol. 102. — P.624—629.
10. Burnstock G. Pathophysiology and therapeutic potential of purinergic signalling. // Pharmacol. Rev. — 2006. — Vol. 58. — P. 58—86.
11. Burnstock G. Physiology and pathophysiology of purinergic neurotransmission // Physiol. Rev. — 2007. — Vol. 87. — P. 669—797.
12. Burnstock G. Purinergic signalling and disorders of the central nervous system. // Nature Rev. Drug Discov. — 2008. — Vol. 7. — P. 575—590.
13. Cattaneo M. P2 receptors and congenital platelet function defects. // Semin. Thromb. Hemost. — 2005. — Vol. 31. — P. 168—173.
14. Chew D.P., Bhatt D.L., Sapp S. et al. Increased mortality with oral platelet glycoprotein IIb/IIIa antagonists: a meta-analysis of phase III multicenter randomized trials // Circulation. — 2001. — Vol. 103. — P. 201—206.
15. Coller B.S. Anti-GPIIb/IIIa drugs: current strategies and future directions // Thromb. Haemost. — 2001. — Vol. 86. — P. 427—443.
16. Dangelmaier C., Jin J., Daniel J.L. et al. The P2Yt receptor mediates ADP-induced p38 kinase-activating factor generation in human platelets // Eur. J. Biochem. — 2000. — Vol. 267. — P. 2283—2289.
17. Dorsam R.T., Kunapuli S.P. Central role of P2Y12 receptor in platelet activation. — J. Clin. Invest. — 2004. — Vol. 113. — P. 340—345.
18. Fabre J.E., Nguyen M., Latour A. et al. Decreased platelet aggregation, increased bleeding time and resistance to thromboembolism in P2Yt-deficient mice // Nature Med. — 1999. — Vol. 5. — P. 1199—1202.
19. Foster C.J., Prosser D.M., Agans J.M. et al. Molecular identification and characterization of the platelet ADP receptor targeted by thienopyridine antithrombotic drugs // J. Clin. Invest. — 2001. — Vol. 107. — P. 1591—1598.
20. Gachet C. P2 receptors, platelet function and pharmacological implications. — Thromb. Haemost. — 2008. — Vol. 99. — P. 466—472.
21. Gretler D.D., Conley P.B., Andre P. et al. "First in human" experience with PRT060128, a new direct-acting, reversible, P2Y12 inhibitor for IV and oral use. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2007. — Vol. 49[9 (suppl 2)]. — P. 326A.
22. Jin J., Daniel J.L., Kunapuli S.P. Molecular basis for ADP-induced platelet activation. II. The P2Y1 receptor mediates ADP-induced intracellular calcium mobilization and shape change in platelets // J. Biol. Chem. — 1998. — Vol. 273. — P. 2030—2034.
23. Hankey G.J., Sudlow C.L.M., Dunbabin D.W. Thienopyridine derivatives (ticlopidine, clopidogrel) versus aspirin for preventing stroke and other serious vascular events in high vascular risk patients // Cochr. Database System. Rev. — 2000. — Iss. 1. — Art. No CD001246.
24. Hechler B., Léon C., Vial C. et al. The P2Yt receptor
is necessary for adenosine 5'-triphosphate-induced platelet aggregation // Blood. —1998. — Vol.92. — P.152—159.
25. Hechler B., Lenain N., Marchese P. et al. A role of the fast ATP-gated P2Xtcation channel in thrombosis of small arteries in vivo // J. Exp. Med. — 2003. — Vol. 198. — P. 661—667.
26. Hechler B., Mangenat S., Zighetti M.L. et al. Inhibition of platelet functions and thrombosis through selective or nonselective inhibition of the platelet P2 receptors with increasing doses of NF449 [4,4',4'',4'''-(carbonylbis(imino-5,1,3-benzenetriylbis-(carbonylimino))) tetrakis-benzene-1,3-disulfonic acid octasodium salt] // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 2005. — Vol. 314. — P. 232—243.
27. Hechler B, Nonne C, Roh E.J. et al. MRS2500 [2-iodo-N6-methyl-(N)-methanocarba-2'-deoxyadenosine-3',5'-bisphosphate], a potent, selective, and stable antagonist of the platelet P2Y1 receptor with strong antithrombotic activity in mice // J. Pharmacol. Exp. Ther. — 2006. — Vol. 316. — P. 556—563.
28. Keller T.T., Squizzato A., Middeldorp S. Clopidogrel plus aspirin versus aspirin alone for preventing cardiovascular disease // Cochr. Database System. Rev. — 2007. — Iss. 3. — Art. No CD005158.
29. Kunapuli S.P., Ding Z., Dorsam R.T. et al. ADP receptors — targets for developing antithrombotic agents. — Curr. Pharmaceut. Design. — 2003. — Vol. 9. — P. 2303— 2316.
30. Lenain N., Freund M., Léon C. et al. Inhibition of localized thrombosis in P2Y1-deficient mice and rodents treated with MRS2179, a P2Y1 receptor antagonist // J. Thromb. Haemost. — 2003. — Vol. 1. — P. 1144—1149.
31. Manolis A.S., Tzeis S., Andrikopoulus G. et al. Aspirin and clopidogrel: a sweeping combination in cardiology. — Curr. Med. Chem. Cardiovasc. Hematol. Agents. — 2005. — Vol. 3. — P. 203—219.
32. Michelson A.D. P2Y12 antagonism. Promises and challenges. — Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. — Vol. 28. — P. 33—38.
33. Mills D.C.B. ADP receptor in platelets // Thromb. Haemost. — 1996. — Vol. 76. — P. 835—856.
34. Montalescot G., Sideris G., Meuleman C. et al. A randomized comparison of high clopidogrel loading doses in patients with non-ST-segment elevation acute coronary syndromes: the ALBION (Assessment of the Best Loading Dose of Clopidogrel to Blunt Platelet Activation, Inflammation and Ongoing Necrosis) trial // J. Am. Coll. Cardiol. — 2006. — Vol. 48. — P. 931—938.
35. Oury C., Toth-Zsamboki E, Thys C. et al. The ATP-gated P2X1 ion channel acts as a positive regulator of platelet responses to collagen // Thromb. Haemost. — 2001. — Vol. 86. — P. 1264—1271.
36. Oury C., Kuijpers M.J., Toth-Zsamboki E. et al. Overexpression of the platelet P2X1 ion channel in transgenic mice generates a novel prothrombotic phenotype // Blood. — 2003. — Vol. 101. — P. 3969—3976.
37. Patrono C., Rocca B. Aspirin: promise and resistance in the new millennium // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. — 2008. — Vol. 28. — P. 25—32.
38. Raju N.C., Eikelboom J.W., Hirsh J. Platelet ADP-receptor antagonists for cardiovascular disease: past, present and future. — Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. — 2008. — Vol. 5. — P. 766—780.
39. Rolf M.G., Mahaut-Smith M.P. Effects of enhanced
P2Xt receptor Ca2+ signals on functional responses in human platelets // Thromb. Haemost. — 2002. — Vol. 88. — P. 495—50 2.
40. Savage B, Cattaneo M, Ruggeri Z.M. Mechanism of platelet aggregation// Curr. Op. Hematol. — 2001. — Vol. 8. — P. 270—276.
41. Smyth S.S., Woulfe D.S., Weitz J.I. et al. G-protein-coupled receptors as signaling targets for antiplatelet therapy// Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. — 2009. — Vol. 29. — P. 449—457.
42. Solet D.J, Zacharski L.R., Plehn J.F. The role of adenosine 5'-diphosphate receptor blockade in patients with cardiovascular disease// Am. J. Med. — 2001. — Vol. 111. — P. 45—53.
43. Wang Y.X., Vincelette J., da Cunha V. et al. A novel P2Y12 adenosine diphosphate receptor antagonist that inhibits platelet aggregation and thrombus formation in rat and dog models // Thromb. Haemost. — 2007. — Vol. 97. — P. 847—855.
Поступила 21.09.09.
NEW ANTIAGGREGANTS - BLOCKERS OF PLATELET P2 RECEPTORS
A.U. Ziganshin
Summary
Described was the participation of P2 receptors in platelet aggregation as the initial stage of arterial thrombosis. Given was the pharmacological characteristic of three subtypes of P2 receptors which are presented on platelets, provided was their role in platelet aggregation. Described were the advantages and disadvantages of widely used in clinical practice tienopyridine antiplatelet drugs (ticlopidine, clopidogrel), which are antagonists of platelet P2Y12-receptors. Presented were the characteristics of the newest and perspective antiplatelet drugs acting on platelet P2-receptors.
Key words: P2-receptors, platelets, antiplatelet drugs, P2Y12-antagonists, clopidogrel
УДК 616.98:578.828.6-092
РОЛЬ ВИЧ-1 БЕЛКА NEF В ПАТОГЕНЕЗЕ ВИЧ-1 ИНФЕКЦИИ
Анна Викторовна Иванкова1, Сергей Васильевич Бойчук1, Ильшат Ганиевич Мустафин2,
Маргарита Владимировна Макарова3
1 Кафедра патологической физиологии (зав. — проф. М.М. Миннибаев),2кафедра биохимии (зав. — докт. мед. наук И.Г. Мустафин) Казанского государственного медицинского университета, 3кафедра клинической лабораторной диагностики (зав. — проф. А.П. Цибулькин) Казанской государственной медицинской академии последипломного образования
Реферат
Представлены сведения об участии ВИЧ-1 белка Nef в патогенезе ВИЧ-1 инфекции, его роли в репликации ВИЧ-1 и процессах гибели CD4+ Т-лимфоцитов, а также активации инфицированных Т-лимфоцитов.
Ключевые слова: вирусный белок Nef, репликация ВИЧ-1, ВИЧ-1 инфекция, апоптоз, CD4+ Т-лимфоциты.
ВИЧ-1 белок Nef первоначально был назван негативным регуляторным фактором, так как имелись сведения о его отрицательном влиянии на вирусную репликацию путем подавления транскрипции от длинных терминальных повторов (LTR) [30]. Однако появление сведений о том, что Nef необходим для поддержания высокой вирусной нагрузки у инфицированных вирусом иммунодефицита обезьян (ВИО) макак [5], дало основание предположить, что этот белок положительно влияет на репликацию вируса иммунодефицита человека ( ВИЧ). Кроме того, данная концепция основывается на большом количестве сведений, подтверждающих положительную роль вирусного белка Nef в отношении вирусной репликации in vivo [3]. Важная роль белка Nef в прогрессировании заболевания и обеспечении высокого уровня вирусной нагрузки in
vivo была установлена несколькими группами исследователей, убедительно показавших низкий уровень виремии и нормальные значения CD4-H^ у больных, инфицированных ВИЧ-1 с делецией гена nef [22, 23]. Тем не менее до настоящего времени ВИЧ-1 белок Nef по-прежнему остаётся самым загадочным генным продуктом вирусов иммунной недостаточности приматов.
Структура и основные функции ВИЧ-1 белка Nef
Nef является регуляторным эндоплазма-тическим белком, состоящим из 206—210 аминокислотных остатков общей молекулярной массой 27 кДа. Структура вирусного белка Nef была определена с помощью рентгеноструктур-ного анализа. Вторичная структура Nef включает 6 a-спиралей и 4 Р-слоя. Соединение Nef с мембраной осуществляется за счет наличия в структуре белка двух групп кластеров основных аминокислот в N-терминальной области, представленных двумя лизинами в позиции 4 и 7 и 4 аргининами в пределах области от аминокислоты 17 к аминокислоте 22 [5]. Ген вирусного белка Nef присутствует только у лен-
79
