CC BY
36
УДК 618:612.1
НОВОЕ В СТРОЕНИИ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ГИПЕРТЕНЗИВНЫХ состояниях
НА ФОНЕ БЕРЕМЕННОСТИ
Т.В. ПАВЛОВА1, СЛ. СУМИН2, В.А. ПЕТРУХИН3, И.С. СЫРЦЕВА4, A.B. СЕЛИВАНОВА4
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
Нами было показано, что строение эритроцитов, изученных при помощи методов сканирующей микроскопии (электронная с применением микро- и макроэлементарного анализа и зондовая) при гипертензивных состояниях на фоне беременности, является четким диагностическим показателем тяжести гипертензивных состояний.
•> Курский государственный медицинский университет
з) Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии
Ключевые слова: эритроциты, сканирующая микроскопия, беременность.
■*> Перинатальный центр Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа
e-mail: pavlova@bsu.edu.ru
Введение. Гипертоническая болезнь (ГБ) наблюдается у 4-6% беременных. При этом преимущественно отмечается 1Б или IIA стадии заболевания. У многих беременных, страдающих ГБ, выражены признаки церебральной патологии и невроза, у половиныженщин имеются изменения сосудов глазного дна, чаще всего носящие характер гипертонической ангиопатии. Злокачественное течение ГБ наблюдается при симптоматической гипертонии у больных с нарушением проходимости почечных артерий, хроническом гломерулонефрите и хроническом пиелонефрите. ГБ является опасным преморбидным фоном для неблагополучного течения II и III триместров беременности. Установлена прямая корреляционная связь между сроком возникновения гестоза, степенью протеинурии и степенью повышения артериального давления у беременных с ГБ [1-4].
ГБ значительно отягощает течение родов. Так, самопроизвольное прерывание беременности в поздние сроки отмечается в среднем у 5,5% женщин, преждевременные роды - у 23% больных, преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты - у 5-10% беременных. Существует достаточно много вопросов, посвященных состоянию беременной женщины при течении беременности с ГБ на фоне гестозов. Тяжесть состояния и необходимость дополнительных методов для оценки заболевания диктуют поиск новых диагностических методов. Среди них можно выделить разработанные нами инновационные методы изучения эритроцитов [5-9].
В связи с этим, целью данного исследования явилось изучение эритроцитов с помощью методов сканирующей микроскопии при гипертензивных состояниях у беременных женщин.
Материалы и методы. Проведен анализ эритроцитов 20 беременных женщин с гестозом и 20 с гипертонической болезнью (при исключении иного генеза), осложненной гестозом. 10 женщин составили контрольную группу.
Для исследования методом световой микроскопии были изготовлены стандартные мазки крови с исследованием в световом микроскопе «Topic-T Ceti» при помощи цветной одноматричной видеокамеры «Baumer-i». Для растровой электронной микроскопии изучаемые эритроциты промывали при 37°С в 2-3 пробах свежеприготовленного изотонического раствора натрия хлорида. Пробы просматривали в растровом микроскопе «FEi Quanta 200 3D», а также «FEi Quanta 600 FEG». Элементный анализ был сделан с использованием детектора для регистрации спектров характеристического рентгеновского излучения фирмы ЕРАХ. Детекторы интегрированы с растровым электронным микроскопом «Quanta 600 FEG».
Для изучения образцов при помощи зондовой микроскопии выполнялся мазок на предметном стекле. После целевого просмотра проводилась съемка и морфометрический анализ. Зондовая сканирующая микроскопия проведена на сканирующем зондовом микроскопе «Ntegra-Aura».
Результаты и их обсуждение. Морфологическое исследование эритроцитов показало, что форма эритроцитов является пластичной характеристикой и находится в прямой зависимости от состояния беременных, длительности и тяжести заболевания, но вторая причина воздействует
более сильно. Так, в контрольных группах содержание нормоцитов в крови составляет соответственно 72,6±1,2%, при ГБ без гестоза - 66,з±1,4%, а при ГБ на фоне гестоза - 6о,2±1,з%. Прослеживается аналогичная тенденция к возрастанию числа макро- и микроцитов, более выраженная в отношении последних. О данном факте свидетельствует и уменьшение среднего объема эритроцитов в контрольных группах (Ю4,з8±2,б7; Ю0Д4±2,70 и 92,12±з,б4 мкмз соответственно). Наблюдаются единичные эхиноциты, деформированные и деструктивные формы эритроцитов.
Весьма интересную и ценную информацию о состоянии цитолемм эритроцитов дает метод сканирующей (СЭМ) электронной микроскопии. Как показали исследования с использованием метода СЭМ, в условиях воздействия серосодержащих поллютантов прослеживается два пути деградации нормоцитов. На поверхности изолированного нормоцита появляется вырост или выросты. Они увеличиваются в числе и размерах, приобретают коническую форму с остроконечной вершиной. Эритроцит преобразуется в шиловидный нормоцит или эхиноцит. В дальнейшем происходит еще большее нарушение структуры мембраны такого эритроцита, он переходит в деструктивную форму, а затем разрушается. Помимо этого, что больше характерно для беременности, осложненной гесто-зом, на начальных этапах деградации на первое место выходят процессы агрегации нормоцитов и образования между ними цитоплазматических мостиков. По мере углубления патологического процесса связь между эритроцитами становится все плотнее, они теряют правильную форму. В терминальной стадии размеры эритроцитов в конгломератах резко различны, некоторые из них превращаются в дегенеративные формы и разрушаются. В этом случае весьма часто наблюдается резкая деформация эритроцита.
Рис. 1. Эритроциты при гипертонической болезни, осложненной гестозом (гестоз средней степени тяжести). Неизмененный дискоцит, дискоциты с выростами. РЭМ. Ув. 20000
Помимо этого, могут наблюдаться дискоциты, то есть эритроциты округлой формы с двояковогнутыми поверхностями. Эхиноциты - эритроциты с короткими зубцами, расположенными через равные промежутки на неизмененной поверхности. Этот тип изменений включает формы от разрушенного дискоцита (эхиноцит) до разрушенного сфероцита. Онулоциты, то есть плоские эритроциты с плотной мембраной. Клетки-«тени» («тени» эритроцитов) - эритроциты с плоской мембраной, лишенные гемоглобина. Шизоциты - расщепленные эритроциты в форме полудиска с 2-3 заостренными краями (могут быть представлены мелкими неровными фрагментами). Стоматоциты
- эритроциты шарообразной формы с единственной вогнутой поверхностью. Кодоциты - эритроциты в форме колокола. Книзоциты - эритроциты с тремя вогнутыми поверхностями. Окантоциты
- эритроциты кольцевидной формы с одним или более пузырьковыми выпячиваниями различной формы и размеров (рис. 1).
Микроэлементный анализ показал достоверную разницу в содержании кислорода, хлора, серы и натрия (см. табл.).
Таблица
Распределение макро- и микроэлементов в эритроцитах контрольной группы и при гипертензивных состояниях на фоне беременности, %
Макро- и микроэлементы (96) Контрольная группа Гестоз Гипертоническая болезнь, осложненная гестозом
С 57,52±2,31 58,5б±1,51 58,21±1,50
N 15,42±1,01 1б,07±1,10 17,10±1,10
О 19,07±0,55 17,78±1,б1* 1б,78±1,б1*
Ыа 3,92±0,02 4,71±0,10* 4,91±0,10*
в 0, 29±0,01 0,б1±0,01* 0,68±0,01*
С1 3,73±0,03 1,70±0,01* 1,75±0,01*
Примечание "ф>0,0,5-
Так, содержание кислорода в эритроцитах контрольной группы составило 19,07±0,55, в группе, в которой беременность протекала с гестозом - 17,78±1,б1, а при ГБ на фоне гестоза 1б,78±1,б1, при этом содержание кислорода в эритроцитах как при гестозе, так и при ГБ на фоне гестоза достоверно ниже относительно контрольной группы. Нахождение натрия в эритроцитах в контрольной группе достоверно ниже (з,92±0,02), нежели при гестозе (4,71±0,ю) и при ГБ на фоне гестоза (4,91±0,ю); содержание серы в контрольной группе составило о, 29±0,01, что также достоверно ниже показателей при гестозе - 0,б1±0,01 и при ГБ на фоне гестоза - 0,68±0,01. Количество хлора 1 в контрольной группе составило 3,73 ±0,03, что достоверно выше, нежели при гестозе -1,70±0,01 и при ГБ на фоне гестоза - 1,75±0,01.
Рис. 2. Эритроциты при гипертонической болезни, осложненной гестозом (гестоз средней степени тяжести). Неизмененные дискоциты, дискоциты с выростами. Атомносиловая лаборатория
5,0 о
Рис. 3. Эритроциты при гипертонической болезни, осложненной гестозом (гестоз средней степени тяжести). Изменение поверхностной мембраны эритроцитов. Атомносиловая лаборатория Содержание углерода в контрольной группе составило 57,52±2,31, при гестозе - 58,5б±1,51, а при ГБ на фоне гестоза - 5 8,21±1,50, содержание N в контрольной группе составило 15,42±1,01, при
гестозе - 1б,07±1,ю, а при ГБ на фоне гестоза -17,ю±1ДО. Таким образом, достоверных различий содержания углерода и азота в эритроцитах между группами не выявлено. В контрольной группе наблюдались преимущественно неизмененные дискоциты. При этом нами выявлено, что если в контрольной группе поверхность эритроцитов имеет равномерно расположенные, сходные по размеру поры, то при патологии беременности они различного диаметра и неправильной формы (рис. 2, з). При гестозе 35% - это измененные дискоциты. Они распределялись следующим образом. Порядка 5% эритроцитов приходилось на сфероциты с шипиками на поверхности, столько же (5%) эритроцитов было в виде «спущенного мяча» и дегенеративно измененных эритроцитов. Оставшиеся 25% были представлены куполообразными эритроцитами (стоматоциты) и сфероцитами с гладкой поверхностью. При этом наблюдались как микроциты (5,49 им), так и макроциты (8,36 им), что свидетельствовало о пойкилоцитозе.
Заключение. Таким образом, нами было показано, что строение эритроцитов, изученных при помощи методов сканирующей микроскопии (электронная с применением микро- и макроэле-менртного анализа и зондовая), является четким диагностическим показателем при определении тяжести гипертензивных состояний.
Литература
1. Павлова, Т.В. Маточно-плацентарная дисфункция при гипертонической болезни у беременных, осложненной гестозом / Т.В. Павлова, Л.В. Селиванова // Успехи современного естествознания. - М., 2008. - № 10. - С.33-40.
2. Селиванова, А.В. Особенности течения беременности и родов у женщин с артериальной гипертензи-ей / А.В. Селиванова, Т.В. Павлова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. -2008 - № 6(46), вып. 5. - С. 64-66 (перечень ВАК).
3. Pavlova, T.V. Development of endothelial dysfunction in system mother-placenta-fetus at hypertensive disease in gravidae / T.V. Pavlova, AV. Selivanova // European journal of natural history. - 2008. - № 4. - P. 52.
4. Нарушение маточно-плацентарного кровотока при гипертонической болезни у беременных / Т.В. Павлова, А.В. Селиванова, АН. Семыкин, В.А. Петрухин // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2008. - Т. VII, № 4. - С. 1057-1060 (перечень ВАК РФ).
5. Морфологические особенности маточно-плацентарного кровотока при гестозе / Т.В. Павлова, А.В. Селиванова, АН. Семыкин, В.А. Петрухин // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2009. - Т. 9, № 5. - С. 15-19 (перечень ВАК РФ).
6. Павлова, Т.В. Терапия тяжелых гестозов при недоношенной беременности / Т.В. Павлова, АН. Семыкин, В.А. Петрухин // Общая реаниматология. - 2010. - Т. VI, № 5. - С. 29-32 (перечень ВАК РФ).
7. Влияние 696 ГЭК Стабизола на клинические особенности материнско-плодовых взаимоотношений при недоношенной беременности на фоне тяжелого гестоза / Т.В. Павлова, А.В. Нестеров, В.А. Петрухин, А.Н. Семыкин // Новости анестезиологии и реаниматологии. - 2011. - № 3. - С. 64.
8. Павлова, Т.В. Роль Стабизола® ГЭК 696 в системе мать-плацента-плод при гестозе : метод, рекомендации / Т.В. Павлова, АН. Семыкин, В А. Петрухин. - М.: МедЭкспертПресс, 2011. - 18 с.
9. Павлова, Т.В. Влияние Стабизола® ГЭК 696 на стабилизацию маточно-плацентарного кровообращения при тяжелом гестозе : метод, рекомендации / Т.В. Павлова, АН. Семыкин, В.А. Петрухин. - М.: ООО «МедЭкспертПресс», 2011. - 32 с.
NEW IN STRUCTURES UF ERYTHROCYTES AT HYPERTENSIV CONDITIONS
IN STATE OF PREGNANCY
T.V. PAVLOVA1, S.A.SUMIN2 VA PETRUHIN3,1.S. SIRTSEVA4 A.V. SELIVANOVA4
Belgorod National Research University
"Kursk State Medical University
3) Moscow regional research institute of obstetrics and gynecology,
■*> St. Ioasafs Belgorod Regional Hospital
e-mail: pavlova@bsu.edu.ru
We proved that the erythrocytes condition studied by means of scanning microscopy methods (electronic with application of the micro and makroelement analysis and by means of a zond) at hyper-tensiv conditions in state of pregnancy is an exact diagnostic indicator for determination of hypertensiv condition severity.
Keywords: the erythrocytes, scanning microscopy, pregnancy.
