8. Нормы и рационы кормления с.-х. животных. / Справочное пособие. Издание переработанное и дополненное. Под ред. Калашникова А.П. Фисинина В.И., Щеглова В.В. и др. Москва, 2003. 456с.
9. Кондрахин И.П., Архипов A.B., Левченко В.И. и др. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: Справочник / Под ред. И.П. Кондрахина. М.: Ко-лосС., 2004. 250с.
10. Плохинский, H.A. Биометрия. Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. 362 с.
11. Чумаченко В.Е., Высоцкий A.M., Сердюк H.A., Чумаченко В.В. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных. Киев: Урожай, 1990. 136с.
12. Скопичев В.Г., Шумилов Б.В. Морфологии и физиология животных. Учебное пособие." СПб.: Издательство «Лань», 2004. 416с.
13. Исследование системы крови в клинической практике. / Под ред. Г.И. Козинца и В.А. Макарова.М: триада-Х, 1998.480 с.
14. Кудрявцев, A.A., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974. 399 с.
15. Мышкин К.И. Базофильные лейкоциты. Саратов, 1979. 125 с.
16. Назаренко Г.И., Кишкун A.A. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М.: Медицина, 2002. 544 с.
УДК 636.4:611.3:636.424
НОВОЕ В МЕТОДИКЕ ИССЛЕДОВАНИЯ СЕЛЕЗЕНКИ СВИНЬИ КРУПНОЙ БЕЛОЙ ПОРОДЫ
С.И. Башина, кандидат биологических наук, доцент ФГБОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия»
В результате нового методического подхода дифференцировки лимфоидных структур селезенки, была полностью установлена физиологическая и возрастная норма морфологии органа.
Ключевые слова: свинья, селезенка, морфология, лимфатические фолликулы, методика.
Введение. Организация и интеграция научных исследований на факультете ветеринарной медицины и биотехнологии, занимает особое положение по степени значимости в развитии отраслей животноводства. Приоритетными направлениями научных исследований в животноводстве является проблема коррекции иммунобиологического статуса.
Новым направлением в биологических и ветеринарных науках, являются разработка новых методов исследования органов иммунной защиты в целом.
Цель работы: проследить возрастные изменения анатомо-гистологического строения селезенки свиньи крупной белой породы в постнатальном онтогенезе.
Селезенка-полифункциональный орган, выполняющий в организме многочисленные функции, является центральным органом иммунной защиты участвует в иммунных
As a result of a new methodological approach of differentiation of splenic lymphoid structures physiological and age limit of morphology of the spleen was established.
Keywords: pig, spleen, morphology, lymph follicles, methods.
реакциях гуморального типа, так как в ней содержатся Т- и В-лимфоциты и плазматические клетки, синтезирующие иммунноглобулины, обеспечивающие иммунный контроль крови и оказывающий и оказывающихся в ней генетически чужеродных частиц.
Селезенка свиней крупной белой породы представляет собой плоскоудлиненый орган малиново-красного цвета, плотной
консистенции. На ней различают париетальную и висцеральную поверхности округленные концы, дорсальный и вентральный.
Расположена она на большой кривизне желудка и крепится на желудочно-селезе ночной связке. На висцеральной поверхности имеются ворота, через которые проходят лимфатические узлы.
Для выполнения были поставлены следующие задачи: проследить возрастные этапы изменения стромально-паренхиматозных
структур органа, при помощи комплексного подхода с использованием анатомических, гистологических, морфометрических и статистических методов исследования.
Материалы и методы. Материалом для выполнения работы послужили 35 органов от клинически здоровых свиней крупной белой породы, семи возрастных групп: новорожден-ности (1-2 суток), неонатальный (30 суток), ювенальный (60 суток), полового созревания (6 мес.),морфофункциональной зрелости (8 мес.), продуктивной зрелости (10 мес.), геронтологи-ческий (2,5-3 года).
При подборе возрастных групп, учитывались критические фазы их жизни, которые характеризуются морфологическими, функциональными и метаболическими изменениями в организме животных.
Перед убоем животных взвешивали по одиночке, умерщвление проводили на убойной площадке. После обескровливания вскрывали брюшную полость и извлекали селезенку.
При изучении строения органа применен комплексный метод исследования с использованием анатомических, гистологических, морфометрических, экспериментальных и статистических методик. Определяли ее цвет, консистенцию, абсолютную и относительную массу к массе животного, длину, ширину (вентрального и дорсального концов), толщину, обхват, объем, площадь. Площадь органа (см2) рассчитывали путем наложения ее париетальной поверхностью на миллиметровую бумагу. Индекс селезенки рассчитывали путем деления ширины на длину, что позволяет судить о форме органа (удлиненная, промежуточная, округлая).
Массу органа определяли на электронных весах с точностью до 0,01 г, линейные промеры при помощи циркуля и линейки с ценой деления 1 мм.
Всего изучено 11 макро-микрометрических промеров селезенки. Для гистологических исследований кусочки органа брали в строго определенных местах вентрального и дорсального юнцов размером 1x1 см. Материал фиксировали в 12% растворе формалина. После промывали кусочки в проточной дистилированой воде и готовили срезы на микротоме-криостате МК-25 с последующим окрашиваем гематоксилин-эозином.
На гистологических препаратах определялась толщина капсулы, толщина серозной оболочки, ширина трабекул, толщина стенки центральной артерии.
Было подсчитано количество фолликулов, измерен диаметр. Впервые была разработана методика дифференцировки лимфатических фолликулов, в зависимости от величины и сроков появления: малые до 0,60 мкм, средние-0,60-1,20 мкм и большие 1,20 мкм и больше.
Что позволяет судить и динамике роста лимфоцитов и повышении резистентности животных.
На основании этих промеров были определены площадь фолликулов, диаметр и площадь герминативных центров, толщина и площадь маргинальной зоны.
Измерение соединительных оболочек и диаметра фолликулов производили окуляр-микрометром МВОТ-15х и при помощи микроскопа МБИ-1 при объективе №20. Количество фолликулов определяли в поле зрения микроскопа МБИ-1, при увеличении 20x7.
Результаты и их обсуждение. В результате обработки цифрового материала были получены следующие результаты:
- на этапе новорожденности все структурно-функциональные компоненты селезенки на органном и тканевом уровнях сформированы, дифференцированы и специализированы: стомально-трабекулярный аппарат развит, паренхима имеет однородный и клеточный состав без подразделения на красную и белую пульпу. В постнатальном онтогенезе (от этапа новорожденности до геронтологического возраста) отмечается естественный рост ее компонентов, наблюдаются индивидуальные изменения стромально-паренхиматозных структур органа;
- в возрастном аспекте отмечается увеличение органометрических показателей селезенки: абсолютной массы в 168,5 раз, длины в 33,0 раза, ширины в 2,1 раза, обхвата в 4,4 раза и снижение абсолютной массы органа в 1,08 раз. Индекс селезенки свидетельствует о том, что она имеет удлиненную форму. Наивысший рост органа наблюдается на этапе полового созревания организма;
- капулярно-трубекулярные структуры селезенки, представленные висцеральным листком брюшины, соединительно-тканной капсулой и трабекулами, характеризуются равномерным ростом от этапа новорожденности до геронтологического этапа жизни;
- к 30-суточному возрасту постнатального онтогенеза паренхима селезенки дифференцируется на белую и красную пульпу, обнаруживаются лимфоидные фолликулы со всеми их составляющими.
- центральная артериола в лимфатических фолликулах селезенки расположена эксцентрично. В 20% случаев она представлена одним в 40% двумя и в 40% случаев тремя сосудами. Толщина ее стенки от этапа новорожденности по геронтологический период жизни увеличивается в 3,25 раза.
Выводы. Данная методика представляет практический интерес среди морфологов, гистологов и может быть использована по изучению лимфоидных структур. Результат нового методического подхода дифференцировки лимфоидных структур иммунокомпетентных органов позволил полностью установить их возрастную норму и функциональное развитие.