Научная статья на тему 'Новая модель экспериментального амилоидоза'

Новая модель экспериментального амилоидоза Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
206
37
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
АМИЛОИДОЗ / ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ / НЕФРОПАТИЯ / AMYLOIDOSIS / EXPERIMENTAL MODEL / NEPHROPATIA

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Беликова А. Т., Брин В. Б., Козырев К. М.

Для создания модели экспериментального нефропатического типа генерализованного амилоидоза у сирийских хомяков использовался способ однократного подкожного введения нативной человеческой плазмы вместе с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях по 0,1 мл в 5 точек. Показали, что однократное введение вышеописанной смеси приводит к функционально и морфологически подтвержденному генерализованному амилоидозу нефропатического типа.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Беликова А. Т., Брин В. Б., Козырев К. М.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

A NEW MODEL OF EXPERIMENTAL AMYLOIDOSIS

To create the model of nephropatical type of experimental systemic amyloidosis in Syrian hamsters was used method of single subcutaneous introduction mixture native human plasma with Freund's adjuvant in equal proportions for 0,1 ml to 5 points. Showed, that a single injection of this mixture leads to functionally and morphological confirmed nephropatical type of systemic amyloidosis.

Текст научной работы на тему «Новая модель экспериментального амилоидоза»

УДК 616-003.812.001.6 Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011

осуществляется тогда, когда позволяют погодные условия. В теплые дни проводят занятия при открытых фрамугах. Рекреационные помещения проветриваются во время учебных занятий.

Все учебные помещения, оснащенные вытяжными шкафами, оборудованы исправно работающей механической вытяжной вентиляцией.

Во всех колледжах проводится работа по укомплектованию учебных помещений сплит-системами для оптимизации микроклимата в теплый период года. Так, в ККБМК сплит-системами оснащено более 20% всех учебных помещений.

4. Обследование МК выявило существенные дефекты организации питания студентов (объемно-планировочные решения буфетов-раздаточных не отвечают требованиям СанПиН 2.4.5.2409-08, питание неорганизованное, отсутствуют примерные меню-раскладки, горячие блюда, через свободную торговлю реализуются только мучные кондитерские и булочные изделия, ассортимент продуктов недостаточный и др.) и медицинского обслуживания (не достаточные по площади медпункты и их недоукомплектованность).

Учитывая, что в МК основным контингентом являются лица женского пола, как существенный недостаток необходимо отметить их низкую оснащенность кабинами личной гигиены для девочек (согласно СанПиН 2.4.2. 1178-02 «Гигиенические требования к условиям обучения в общеобразовательных учреждениях» они должны быть оборудованы из расчета 1 кабина на 70 человек площадью не менее 3 м2).

5. Комплексная оценка условий обучения в обследованных медицинских колледжах Краснодарского края показала, что все они относятся ко второй группе по санитарно-эпидемиологическому благополучию (табл. 2), при этом 1-й группе по санитарно-эпидемиологическому благополучию отвечает сумма баллов 100-96, 2-й группе -

сумма баллов 95-61 при условии, что нет случаев абсолютного невыполнения из критериев № 1-6, 3-й группе -при сумме баллов 60 и менее или при условии, что хотя бы один из критериев № 1-5 не выполняется полностью.

Таким образом, изучение условий обучения студентов МК выявило ряд отклонений от СанПиН 2.4.2. 1178-02 «Гигиенические требования к условиям обучения в общеобразовательных учреждениях», которые могут способствовать ухудшению здоровья учащихся.

ЛИТЕРАТУРА

1. Витте Н. К. Тепловой обмен человека и его гигиеническое значение. - Киев: Госкомиздат,1956. - 146 с.

2. Гигиенические аспекты качества воздуха помещений: отчеты и исследования // Евр. рег. бюро ВОЗ. - М., 1981. - № 21. - С. 42.

3. Курлыкина С. В. Адаптация подростков, обучающихся по различным программам в условиях гимназии // Материалы межрегион. науч.-практ. конфер. «Здоровье и образование в XXI веке. Здоровье населения - среда обитания». - Майкоп, 2006. - С. 113-115.

4. Кучма В. Р. Гигиена детей и подростков: Учебник для вузов. -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 480 с.

5. Кучма В. Р. Подходы к оценке уровня санитарно-эпидемиологического благополучия образовательных учреждений для детей и подростков / В. Р. Кучма, О. Ю. Милушкина // Гиг. и сан. -2004. - № 3. - С. 47-50.

6. Мерков А. Н. Санитарная статистика / А. Н. Мерков, Л. Е. Поляков. - Л.: Медицина, Ленинградское отделение, 1974. - 384 с.

7. Севрюкова Г. А. Адаптивные изменения функционального состояния и работоспособности в процессе обучения // Гиг. и сан. -2006. - № 1. - С. 72-74.

8. Степанова М. И. Трудность школьных учебных предметов как гигиеническая проблема / М. И. Степанова, И. Э. Александрова, А. С. Седова // Здоровье и образование в XXI веке: Материалы межрегион. науч.-практ. конф. - Майкоп, 2005. - С. 18-24.

Поступила 06.12.2010

А. Т. БЕЛИКОВА, В. Б. БРИН, К. М. КОЗЫРЕВ

НОВАЯ МОДЕЛЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО АМИЛОИДОЗА

Кафедры нормальной физиологии и патологической анатомии ГОУ ВПО СОГМА Росздрава, Россия, 362019, РСО — Алания, г. Владикавказ, ул. Пушкинская, 40, тел. 8672534617.

E-mail: nosma@dol.ru

Для создания модели экспериментального нефропатического типа генерализованного амилоидоза у сирийских хомяков использовался способ однократного подкожного введения нативной человеческой плазмы вместе с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях по 0,1 мл в 5 точек. Показали, что однократное введение вышеописанной смеси приводит к функционально и морфологически подтвержденному генерализованному амилоидозу нефропатического типа.

Ключевые слова: амилоидоз, экспериментальная модель, нефропатия.

A. T. BELIKOVA, V. B. BRIN, K. M. KOZYREV A NEW MODEL OF EXPERIMENTAL AMYLOIDOSIS

Departments of normal physiology and pathological anatomy SEIHPE NOSMA Roszdrava,

Russia, 362019, RNO - Alania, Vladikavkaz, Pushkinskaya street, 40, tel. 8672534617. E-mail: nosma@dol.ru

To create the model of nephropatical type of experimental systemic amyloidosis in Syrian hamsters was used method of single subcutaneous introduction mixture native human plasma with Freund’s adjuvant in equal proportions for 0,1 ml to 5 points. Showed, that a single injection of this mixture leads to functionally and morphological confirmed nephropatical type of systemic amyloidosis.

Key words: amyloidosis, experimental model, nephropatia.

Конформационные заболевания - это группа страданий, при которой нарушение нормальных физиологических и появление аномальных свойств белков связаны с изменением их пространственной структуры [5]. Значительная часть конформационных болезней представляет собой различные типы ами-лоидозов.

Амилоид - сложный гликопротеид, состоящий из фибриллярных и глобулярных белков и полисахаридов, фибриллы которого имеют специфическую Р-складчатую конфигурацию. Амилоид обладает характерным свойством конгофилии и двойного лучепреломления в поляризованном свете, что отличает его от других фибриллярных белков. В зависимости от специфичности основного белка амилоида выделяют несколько форм амилоидоза: А (амилоидный А-проте-ин), 1_ (легкие цепи иммуноглобулинов), ЇЇК (трансти-ретин), Р2М (Р2-микроглобулин), В (В-протеин), JAPP (островковый амилоидный полипептид) [2].

Обладая химической инертностью и иммунологической толерантностью, амилоид безудержно накапливается в органах и тканях, становясь морфологическим субстратом многих заболеваний человека и животных, проявляющихся атрофией и склерозом органов и развитием их функциональной недостаточности.

При изучении амилоидоза важное значение придается экспериментальному моделированию [1, 3]. Для воспроизведения амилоидоза большинство исследователей использует многократное введение животным биологических или химических агентов раздельно и в различных их сочетаниях с целью образования амилоидных фибрилл путем запуска иммунопатобиохимических механизмов [3, 4]. Последние, вероятно, могут быть активированы с помощью применения адъюванта Фрейнда - известного стимулятора иммунных процессов.

Цель работы - создание модели экспериментального нефропатического типа генерализованного ами-лоидоза у сирийских хомяков способом однократного подкожного введения нативной человеческой плазмы вместе с адъювантом Фрейнда и изучение органоспецифических функциональных и структурных характеристик создаваемой нефропатии.

Материалы и методы исследования

Объектом исследования служили 30 сирийских хомяков - самцов массой 100-150 г. У интактных и опытных животных (по 15 особей в группе) исследовали 6-часовой спонтанный диурез. Клубочковую фильтрацию определяли по клиренсу эндогенного креатинина, рассчи-

тывали канальцевую реабсорбцию воды. Содержание натрия и калия в моче определяли методом пламенной фотометрии, содержание кальция - спектрофотометрически. Опытным животным в качестве белкового препарата однократно вводили нативную человеческую плазму, смешанную в одном шприце с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях в симметричные подмышечные и паховые области и внутрибрюшинно из расчета 0,1 мл в каждую из 5 точек, однократно. Основные процессы мо-чеобразования и экскреция электролитов определялись по истечении 1 и 2 месяцев.

Спустя 2 месяца эксперимента животных забивали наркотизацией тиопенталом натрия в дозе 6 мг/200 г массы животного внутрибрюшинно. Морфологическому изучению подвергали почки, печень, селезенку. Материал фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, заливали в парафин по общепринятой методике, изучали срезы почек и других органов толщиной 5-6 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином, конго красным. Изучение срезов проводили в проходящем свете при помощи микроскопа «Микмед-1» под увеличением х80, х200, х400, х600.

Цифровые данные обрабатывали на ПЭВМ «Репйит-3» методом вариационной статистики с применением критерия 1 Стьюдента, используя программу «Рг^та 2,04».

Результаты и их обсуждение

Исследования показали, что в условиях спонтанного диуреза на фоне подкожного введения вышеописанной смеси отмечается увеличение объема спонтанного диуреза к концу первого месяца, а в конце второго месяца, наоборот, объем диуреза начинает снижаться. Увеличение диуреза было обусловлено повышением скорости клубочковой фильтрации (СКФ) и снижением канальцевой реабсорбции воды. В течение второго месяца эксперимента спонтанный диурез снижается из-за почти 2-кратного уменьшения СКФ, несмотря на продолжающееся значительное снижение канальцевой реабсорбции воды (таблица).

Экскреция натрия под влиянием амилоидогена в условиях спонтанного 6-часового диуреза постепенно снижается на протяжении обоих месяцев. Экскреция калия и кальция по истечении двух месяцев под влиянием вышеописанной смеси в качестве амилои-догена в условиях спонтанного диуреза также снижается (рис. 1). Под влиянием введения нативной человеческой плазмы с адъювантом Фрейнда отмечалось

Изменения объема спонтанного диуреза и основных процессов мочеобразования при формировании амилоидной нефропатии

Условия опыта Статистич. показатель Процессы мочеобразования Содержание белка, мг/мл

Диурез, мл/час/100 СКФ, м/час/100 Реабсорбция, %

Интактные животные (фон) М±т 0,13±0,004 21,00±0,220 99,39±0,016 0,98±0,030

1 мес. эксперимента М±т 0,16±0,004 22,06±0,304 99,28±0,013 1,71±0,079

2 мес. эксперимента М±т 0,12±0,003* 12,48±0,389* 99,07±0,013* 2,62±0,043*

Примечание: * - достоверное отличие относительно фона.

13

Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011

Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011

10

5

0,50

0,25

0,00

фон

1 мес.

2 мес.

N8 К Са

Рис. 1. Изменения экскреции электролитов (мкмоль/час/100 г) при формировании амилоидной нефропатии

Рис. 2. Амилоидоз почек. Отложение амилоида в структурах канальцев и клубочках почек. Выраженная паренхиматозная дистрофия канальцев. Окраска конго красным. х600

Рис. 3. Отложение амилоида в стенках сосудов, в основном в интиме и мышечном слое. Утолщение и разрыхление стенок сосудов. Окраска конго красным. х400

прогрессивное увеличение протеинурии более чем в 2 раза на протяжении двух месяцев эксперимента (таблица).

Макроскопически (под лупой) при экспериментальном нефропатическом типе генерализованного ами-лоидоза почки были увеличены в объеме, на разрезе граница между корковым и мозговым слоями была нечеткая, отмечалось выраженное полнокровие обоих слоев, преимущественно мозгового.

Микроскопически при окраске срезов красным конго (рис. 2) отмечались отложение конгофильных структур в клубочковых капиллярах, капсуле Боумена-Шумлянс-кого, стенках сосудов почечного интерстиция и базальных мембранах канальцев, гиперемия медуллы, плазматическое пропитывание и отек интерстиция обоих слоев почки (рис. 3). Отмечалась выраженная паренхиматозная дистрофия нефротелия.

В печени выявлялись очаговая конгофилия мембранных структур гепатоцитов, гиперемия, плазматическое пропитывание стенок сосудов всех калибров, отек ткани с резко выраженным расширением пространств Диссе. Отложение амилоида в печени отмечалось преимущественно в стенках сосудов системы микроциркуляции и базальных мембран портальных триад (артерия, вена, желчный проток), центральных сегментах печеночных долек и портальном интерс-тиции.

Отложение амилоида имело место и в лимфоидных фолликулах селезенки, преимущественно в стенке их центральной артерии, а также в строме и сосудах системы микрогемоциркуляции органа.

Таким образом, подкожное однократное введение нативной человеческой плазмы, смешанной в одном шприце с адъювантом Фрейнда в равных пропорциях, в симметричные подмышечные и паховые области и внутрибрюшинно приводит к развитию нефропатичес-кого типа генерализованного амилоидоза. Формирование морфологических признаков модели амилоидоза сопровождается выраженной протеинурией, нарушениями электролито- и водовыделительной функции почек.

ЛИТЕРАТУРА

1. Заалишвили Т. В., Брин В. Б., Козырев К. М. Способы моделирования амилоидоза у экспериментальных животных // Успехи современного естествознания. - М.: изд-во Акад. естествознания, 2005. - № 2. - С. 78-79.

2. Любченко П. Н., Широкова Е. Б., Гуревич Л. Е., Кабанова Т. Г. Осложнение силикотуберкулеза амилоидозом внутренних органов // Пульмонология. - 2008. - № 4. - С. 113.

3. Cui D., Kawano H., Takahashi M. et al. Acceleration of murine AA amyloi- dosis by oral administration of amyloid fibrils extracted from different species // Pathol Int.- 2002. - Vol. 52. № 1. - P. 40-45.

4. Garcia-Garcia M., Mourad G., Durfort M., Garcia-Valero J., Argiles A. Vascular involvement and cell damage in experimental AA and clinical beta(2)-microglobulin amyloidosis // Nephrol. dial. transplant. - 2002. - Vol. 17. № 8. - P. 1450-1456.

5. Merlini G., Bellotti V. Molecular mechanisms of amyloidosis // N. engl. j. med. - 2003. - Vol. 349. - P. 583-596.

Поступила 10.01.2011

И. С. ВАРТАНОВА

ОЦЕНКА РЕГУЛЯТОРНО-АДАПТИВНОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2-го ТИПА ПОСЛЕ КОРРЕКЦИИ ГИПЕРГЛИКЕМИИ

Кафедра нормальной физиологии Кубанского государственного медицинского университета, Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. 8 (861) 26-85-502

Оцениваемые параметрами сердечно-дыхательного синхронизма регуляторно-адаптивные возможности организма у больных сахарным диабетом 2-го типа после коррекции гипергликемии выше, чем у больных сахарным диабетом 2-го типа до лечения. Между уровнем глюкозы крови и индексом регуляторно-адаптивного статуса прослеживается обратная сильная корреляционная связь.

Ключевые слова: сердечно-дыхательный синхронизм, сахарный диабет 2-го типа, регуляторно-адаптивные возможности.

I. S. VARTANOVA

ESTIMATION OF THE REGULATIVE ADAPTIVE ABILITIES OF PATIENTS 2 TYPE DIABETES

AFTER CORRECTION HYPERGLYCEMIA

Normal physiology department of Kuban state medical university,

Russia, 350063, Krasnodar, Sedina st.,4, tel. 8 (861) 26-85-502

Regulative adaptive abilities of patients 2 type diabetes, which were appraised in accordance with cardiorespiratory synchronism parameters was high, after correction hyperglycemia, then patients 2 type diabetes before treatment. There is a strong reverse correlation between blood glucose level and index of regulatory and adaptive state.

Key words: cardiorespiratory synchronism, 2 type diabetes, regulative adaptive abilities.

Кубанский научный медицинский вестник № 2 (125) 2011 УДК 612172.2+612.216]:616.379-008.64

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.