CC BY
70
К преимуществам нанокапсул относят низкую токсичность вследствие возможности использования природных компонентов жировой фазы, а также выход продукции с высокой степенью разделения за счет использования ряда технологических приемов (гомогенизация давлением) [9]. Однако осуществление контролируемого высвобождения ЛВ в случае нанокапсул затруднено из-за небольших размеров и жидкой составляющей структуры носителя. Пролонгированное высвобождение требует включения очень липофильных ЛВ: их индекс распределения в системе октанол: вода должен быть >1 000 000: 1.
2. Наночастицы
Эта подгруппа является более перспективной в плане достижения контролируемых параметров высвобождения вследствие снижения подвижности ЛВ за счет твердой структуры матрицы [8]. Это монолитные, обычно сферические образования, содержащие ЛВ или по всей массе наночастицы, или только на ее поверхности. Выделение ЛВ из наночастицы идет постепенно с контролируемой скоростью: только с поверхности; со всей массы наночастицы после ее распада или набухания. В зависимости от морфологических особенностей используемого для синтеза наночастиц материала можно выделить несколько наиболее распространенных групп носителей: термически или химически модифицированный сывороточный альбумин; химически модифицированные полисахариды (например, диальдегидкрахмал); нанокристаллы, состоящие только из ЛВ, подвергнутого измельчению, что позволяет им растворяться со скоростью, превышающей скорость растворения частиц более крупных размеров;
Нанокристаллы по сравнению с другими наносистемами имеют следующие преимущества: высокая (~100%) степень содержания ЛВ; простая и предсказуемая подача ЛВ (скорость высвобождения растворимого ЛВ зависит от скорости растворения нанокристаллов); распределение ЛВ в организме происходит как обычно; простой и эффективный способ производства
Добавляемые иногда биостабилизаторы не только стабилизируют нанокристаллы (например, от агрегации), но и дают возможность контролировать их распределение в организме, время транспорта через желудочно-кишечный тракт, а также биоадгезию, т. е. прилипание к стенкам кишечника в определенном месте (мишени). Уменьшается терапевтическая доза ЛВ. Актуально применение нанокристаллов для анальгетиков, когда подавление боли и уменьшение вариабельности концентрации ЛВ в плазме играют решающую роль. Дисперсия нанокристаллов напроксена через ~20 мин дает в 3-5 раз большую концентрацию ЛВ в плазме по сравнению с обычной суспензией или таблетками ЛВ и меньшую зависимость от содержимого желудка.
Нанокристаллы ЛВ включают в макрокапсулы, матричные таблетки и т. д. Добавление биоспецифических мукоадгезивов (веществ, склеивающихся со слизистой оболочкой) позволяет локализовать действие нанокристаллов ЛВ в определенной области ЖКТ. Для плохорастворимых ЛВ суспензия нанокристаллов ведет себя как раствор и использована в аэрозолях, например для дипропионата беклометазона. Инъекционное введение нанокристаллов дает более длительное удержание ЛВ в месте введения, позволяет контроль биораспределения ЛВ в организме и избежать поглощения ЛВ фагоцитирующими клетками. Применение нанокристаллов в диагностике включает лимфо-, ангиографию, диагностику печени и др. органов посредством рентгеновского анализа, компьютерной томографии и магнитнорезонансного исследования. Используются и биодеструктирую-щиеся нанокристаллы, т.е. распадающиеся постепенно в организме, полимеры и сополимеры (полиалкилцианоакрилаты, полиллактидгликолиды).
Наносистемы, созданные на основе полимерных носителей, вызывают возрастающий интерес в фармакологии, т.к. они представляют один из видов терапевтических систем и могут транспортировать ЛВ внутрь клеток. При циркуляции таких носителей содержащееся в них ЛВ защищено от инактивации, а его действие пролонгируется [10,15]. Наносистемы доставки ЛВ имеют преимущества: быстрое получение в больших количествах, возможность включения плохорастворимых в воде веществ, регулирование накопления препарата в различных органах и тканях организма в зависимости от размера частиц
Таким образом, рассматривая изложенные выше позиции, можно сделать вывод о том, что область создания наносомальных лекарственных форм является одной из составляющих в общем комплексе подходов к осуществлению направленной доставки
ЛВ. Исследования в данном направлении обладают высоким потенциалом и представляют собой основу будущего производства ЛВ с наносоставляющей компонентой системы доставки, которые войдут в медицинскую практику в ближайшие годы.
Литература
1. Аляутдин Р.Н. Биофармацевтические принципы направленного транспорта лекарственных веществ: Дис... докт. мед. наук.-M., 1999.
2. Голышевская В.И. //Проблемы туберкулеза и болезней легких.- 2006.- №8.- С.47-51.
3.Каплун А.П. и др. // Вопросы мед. химии.- 1999.- №1.-С.18-24.
4.Торчилин В.П., Трубецкой В.С.// Высокомолек. соединения.- 1994.- №36.- С. 1880-1893.
5.Chukwu K. и др. // Proced. Intern Symp. Control. Rel. Bioact. Mater.-1999.-Vol.26.- P. 1148-1149.
6.Colin-de-Verdiere A. et al. // Cancer Chemother Pharmacol.-Vol.1994, №33.-Р.504-508.
I.Drummond D.C. et al.// J Pharmacoll reviews.-Vol. 1999, № 51.- Р. 691-744.
8.Langer K. et al.!/ J Eur J Pharm Biopharm.- 2000.- Vol.49.-P.303-307.
9Moghimi SM. et al.// Pharmacol Reviews.-2001.-
Vol.53,№ 2.- P.283-318.
10.Pandey R. // J of Antimicrob Chemother.- 2003.-Vol.52.-P.981-986.
II.Salem I. // Methods Enzymol.-2005.-Vol.391.-P.261-291.
12.Tsapis N.// Proc Natl Acad Sci.-2002.-Vol.99.-P. 1200112005.
13. Wissing S.A. et al.// Adv Drug Deliv Rev.-2004.-Vol.56.-P. 1257-1272.
14.Vauthier C.// Adv Drug Deliv Rev.- 2003.-Vol.55.- P.519.
15. Uchegbu I. Polymers in Drug Delivery. - CRC Taylor & Francis Group, 2006.
THE NANO-DIMENTIONAL SYSTEMS OF TRANSPORTATION OF MEDICINAL PREPARATIONS
K.V.ALEKSEEV, R.N.ALYAUTDIN, E.V.BLYNSKAYA, B.T.KVINKH Summary
The basis groups of nano-dimentional system as transportagens of medicinal preparations are studied . The comparative analysis of Structure delivery unites by characteristic features used material and stability is carried out. The Possible features of its using in other systems of medicine are proposed
Key words: nano-dimentional system, transportagens
УДК 612.018
НЕЙРОАКТИВНЫЕ СТЕРОИДЫ МОЗГА И РАННИЕ ФОРМЫ ПОВЕДЕНИЯ У КРЫС
В.А. САШКОВ*, Н.Б. СЕЛЬВЕРОВА*, Т.И. ДЖАНДАРОВА**
Изучена динамика нейроактивных стероидов в мозге и осуществление элементарных поведенческих актов у крыс в неонатальном и раннем постнатальном периоде развития. Выявлена взаимосвязь поведения с содержанием кортикостерона, тестостерона и эстрадиола в гипоталамусе, гиппокампе, миндалине, поясной извилине, лобной коре у крыс обоего пола в возрасте 1, 7, 14 и 21 дня после рождения. Проведенный корреляционный анализ подтверждает представления об избирательном секс-диморфном вовлечении различных структур мозга и отдельных нейроактивных стероидов в развитии ранних форм поведения. Ключевые слова: нейроактивные стероиды, формы поведения
Роль нейроактивных стероидов и нейростероидов в осуществлении различных поведенческих реакций вызывает большой научный интерес. Данные литературы свидетельствуют о влиянии стероидных гормонов на морфо-функциональное созревание мозга [10, 15] и его половую дифференцировку [2]. Нейроактив-ные стероиды вовлекаются в формирование поведения и осуществление условно-рефлекторной деятельности [7]. Однако их специфическая роль в развитии отдельных ранних форм поведения практически не изучалась. Для выяснения значения нейроак-
* Институт возрастной физиологии РАО, 119121, г. Москва, ул. Погодин-
£*кая, д. 8, корп. 2, ИВФ РАО, [email protected] Ставропольский государственный университет, г. Ставрополь
тивных стероидов в процессах морфо-функционального созревания мозга необходимо изучение динамики их уровня и в крови, и в различных структурах мозга на ранних стадиях постнатального онтогенеза, когда происходит созревание функциональных систем мозга, обеспечивающих приспособительное поведение [4].
Цель работы - выявление динамики уровня кортикостеро-на, тестостерона и эстрадиола в лимбических структурах мозга (гипоталамус, гиппокамп, миндалина, поясная извилина и лобная коры) у самцов и самок крыс в ходе становления врожденных поведенческих и рефлекторных реакций в неонатальном и раннем постнатальном периоде развития. Выбор структур мозга для биохимического анализа основан на том, что именно эти области мозга вовлечены в общий контроль регуляции поведения, эмоциональной реактивности, обучения и памяти [5].
Методика. Исследование выполнено на 120 белых лабораторных крысах Вистар, полученных из питомника «Столбовая». В опытах были использованы по 4 группы самцов и самок крыс (п = 12-15) в возрасте 1 (неонатальный период), 7 (1 неделя), 14 (2 недели) и 21 (3 недели) дня после рождения. При этом учитывались критические периоды развития [6]. При работе с крысами полностью соблюдали международные принципы Хельсинкской декларации о гуманном отношении к животным.
Поведение крыс было изучено с использованием поведенческих тестов [3], позволяющих оценить раннее соматическое, сенсорное и моторное обеспечение созревающих функциональных систем мозга. Шло тестирование различных врожденных поведенческих и рефлекторных актов, реализуемых в соответствующие периоды раннего постнатального онтогенеза (табл.).
Тесты № 1, 3-5, 7- 9 и 12 оценивались по латентному периоду проявления данной поведенческой или рефлекторной реакции (с); выполнение животным тестов № 2 и 11 оценивалось в 1 балл; его невыполнение в 0 баллов; тесты № 6, 10 оценивались по максимальному времени проявления данной поведенческой или рефлекторной реакции (с), а тест № 13 - по числу число полных оборотов, совершаемых животным вокруг своей оси.
Таблица
Батарея тестов для оценки поведения крыс в раннем постнатальном периоде развития
Название теста Период тестирования
Сгибание пальцев передних конечностей. 1 день и 1 неделя
Рутинг. 1 день
Переворачивание на горизонтальной плоскости. 1 день и 1 неделя
Избегание наклонной плоскости. 1-3 недели
Избегание края плоскости. 1 неделя
Разгибание задних конечностей. 1 неделя
Сгибание пальцев задних конечностей. 1-2 недели
Координация передних и задних конечностей. 2-3 недели
Вибриссный плейсинг. 2 неделя
Удерживание на канате с помощью передних и задних конечностей. 2-3 недели
Подъем и спуск по вертикальному канату. 3 неделя
Зрительный плейсинг. 3 неделя
Движение вокруг своей оси при удержании за хвост. 1-3 недели
Животные каждой группы подвергались поведенческому тестированию, после чего производили гильотинирование, забор стекающей крови и выделение вышеуказанных структур головного мозга на холоде. Ткани мозга подвергались гомогенизации. Затем пробы крови и мозга центрифугировали при 1000 об/мин в течение 10 мин. Супернатант замораживали и сохраняли при Ї = -30°С для последующего определения уровней кортикостерона, тестостерона и эстрадиола методом ИФА с использованием наборов фирмы ЭКО (США).
Полученные данные были обработаны с использованием статистической программы 8Р88 (13.00). Оценка достоверности различий осуществлялась с использованием 1-критерия Стьюден-та (р < 0,05). Для выявления зависимости между исследуемыми поведенческими и рефлекторными параметрами с уровнем кор-тикостерона, тестостерона и эстрадиола в крови и отдельных структурах мозга в различные периоды развития применялся корреляционный анализ по методу Пирсона.
Результаты. Нейроактивные стероиды в мозге. Результаты исследований свидетельствуют, что уровень кортикостерона у крыс у самцов крыс на протяжении первых двух недель постна-тального онтогенеза закономерно снижается в гипоталамусе, гиппокампе и плазме крови (рис. 1). К 21 дню его содержание в этих структурах мозга статистически значимо повышается. Одновременно отмечено его снижение в плазме крови. В миндалине, поясной извилине и лобной коре уровень кортикостерона достигает максимума в первые дни жизни, падает к концу второй
недели после рождения и растет у 3-недельных животных. У крыс, наиболее высокий уровень кортикостерона во всех возрастных группах выявлен в гипоталамусе, миндалине и плазме крови. В течение первых 2 недель жизни уровень кортикостерона в миндалине и поясной извилине снижается и начинает повышаться только в возрасте 3 недель. В гиппокампе самок выявлено достоверное повышение уровня кортикостерона на первой неделе жизни. К концу второй недели постнатального онтогенеза его содержание в гиппокампе падает и практически не изменяется у животных до 21 дня. В гипоталамусе и лобной коре самок уровень кортикостерона достигает максимальных значений в течение первой недели жизни, снижается в возрасте 2 недель после рождения и закономерно повышается у 3-недельных животных.
Содержание тестостерона имеет наиболее высокие значения во всех отделах мозга, а также в плазме крови у самцов крыс сразу после рождения. На протяжении первых двух недель жизни уровень тестостерона в мозге закономерно снижается, а затем повышается к 3-недельному возрасту в гипоталамусе, миндалине, поясной извилине и лобной коре. У новорожденных самок уровень тестостерона в гипоталамусе, гиппокампе, поясной извилине, лобной коре и плазме крови значительно ниже, чем у самцов. В первые дни после рождения содержание тестостерона в этих структурах мозга снижается и не испытывает существенных колебаний до конца 3 недели постнатального онтогенеза.
Уровень эстрадиола у крыс обоего пола имеет наиболее высокие значения во всех изученных структурах мозга, а также в плазме крови сразу после рождения. При этом у самок содержание эстрадиола в плазме крови, гиппокампе и поясной извилине достоверно выше, чем у самцов. В течение первой неделе жизни уровень эстрадиола в мозге снижается и остается низким в последующие периоды жизни. Однако его содержание в отдельных структурах мозга, так же как и в плазме крови снижается сразу после рождения, прогрессивно повышаясь у 2- и 3-недельных животных.
Ранние формы поведения. Изучение ранних форм поведения выявило, что новорожденные самки имеют достоверно более высокие значения рутинга (поведение, имитирующее поиск матери в ответ на поглаживание мордочки), уменьшение латентных периодов сгибания пальцев передних конечностей и переворачивания на горизонтальной поверхности по сравнению с самцами (рис.). В возрасте 7 дней после рождения величина латентного периода сгибания пальцев передних конечностей и переворачивания на горизонтальной поверхности значительно уменьшается у крыс обоего пола. При этом самки крыс в этом возрасте превосходят самцов по числу движений вокруг своей оси при удержании за хвост (это позволяет судить о двигательной активности), однако уступают им в выполнении теста на разгибание задних конечностей при потере контакта с поверхностью (рис.).
На второй неделе постнатальной жизни количество совершаемых движений при удержании за хвост у самок и самцов крыс достоверно уменьшается, но направленность полового диморфизма при выполнении этого поведенческого теста остается прежней (рис.). В тесте избегания наклонной плоскости время разворота животного достоверно уменьшается у крыс обоего пола по сравнению с недельными животными. Двухнедельные самки крыс имеют достоверно более низкие значения латентных периодов сгибания пальцев задних конечностей, уменьшение времени проявления вибриссного плейсинга (захват и удержание конечностями предмета, которого касается вибриссами крысенок, поднятый над поверхностью) по сравнению с самцами (рис.). Самцы крыс в возрасте 2 недель после рождения, напротив, превосходят самок при выполнении теста с удержанием на канате с помощью конечностей.
К 3-й неделе после рождения у крысят выявлено достоверное уменьшение латентных периодов избегания наклонной плоскости, координации конечностей, увеличение времени удержания на канате с помощью конечностей и числа движений вокруг своей оси по сравнению с 2-недельными особями (рис.). Самки превосходят самцов при выполнении теста с избеганием наклонной плоскости, во времени удержания на канате с помощью конечностей и числе движений вокруг своей оси при удержании за хвост (рис.). Но самцы превосходят самок при подъеме и спуске на канате и уступают им в проявлении времени зрительного плейсинга (захват и удержание передними лапами предмета, который находится в поле зрения крысенка) (рис).
Корреляционные связи уровня нейроактивных стероидов в мозге с осуществлением ранних форм поведения. Изучение взаимосвязи ряда составляющих поведения с содержанием
стероидных гормонов в мозге и плазме крови выявило широкий спектр статистически значимых корреляций между рассматриваемыми поведенческими и биохимическими параметрами у самцов и самок крыс в неонатальном и раннем постнатальном периоде развития. У новорожденных самцов обнаружены статистически значимые корреляции рутинга с уровнем кортикостеро-на в гиппокампе (r=0,72) и периода переворачивания на горизонтальной плоскости с его значением в гипоталамусе (r=-0,7). К недельному возрасту у крыс выявлены связи поведенческих и рефлекторных актов с уровнем кортикостерона, тестостерона и эстрадиола в миндалине и гиппокампе. У 2-недельных самцов портрет корреляционных взаимосвязей между поведенческими и биохимическими признаками перестраивается: появляется взаимосвязь уровня кортикостерона, тестостерона и эстрадиола гипоталамусе, поясной извилине и лобной коре с проявлением ранних форм поведения. К 21-му дню после рождения самцы имеют больше значимых корреляционных связей содержания нейроак-тивных стероидов в мозге и плазме крови с составляющими поведения и по сравнению с 2-недельными животными.
У самок крыс в процессе развития набор корреляционных связей между отдельными составляющими поведения и уровнем стероидных гормонов в мозге и в плазме крови отличается по сравнению с самцами. У новорожденных самок выявлены статистически значимые корреляции латентного периода сгибания пальцев передних конечностей с содержанием тестостерона в гипоталамусе (r=-0,62) и поясной извилине (r=-0,62), а времени переворачивания на горизонтальной плоскости - с уровнем кортикостерона в гипоталамусе (r=-0,62), гиппокампе (r=-0,73) и миндалине (r=0,59). В возрасте 1 недели после рождения самки имеют взаимосвязь кортикостерона, тестостерона и эстрадиола в структурах мозга с возможностью осуществления поведенческих актов. К 2-недельному возрасту число этих связей уменьшается по сравнению с предыдущим периодом онтогенеза. Выявлены корреляции ряда ранних форм поведения с содержанием корти-костерона в гипоталамусе (r=0,54), гиппокампе (r=0,72), лобной коре (r=0,64) и тестостерона в гипоталамусе (r=-0,54). В 3недельном возрасте у самок появляется больше корреляционных связей между уровнем кортикостерона, тестостерона и эстрадио-ла в отделах мозга с составляющими ранних форм поведения.
Проведенный корреляционный анализ свидетельствует о возрастно-половой организации взаимосвязей содержания нейро-активных стероидов в различных структурах мозга с осуществлением ранних форм поведения у крыс. У новорожденных самцов обнаружены 2 значимые корреляции, а у самок этого возраста -
5. Больше всего с отдельными составляющими поведения связаны концентрации кортикостерона в гипоталамусе и гиппокампе. У недельных крыс, по сравнению с новорожденными, паттерны корреляционных связей существенным образом перестраивается. На это указывает существование 13 значимых корреляций поведенческих и рефлекторных реакций с концентрацией нейроак-тивных стероидов в мозге у самцов и 17 зависимостей у самок, и в первую очередь, с уровнем кортикостерона в гиппокампе и миндалине, а также со значениями тестостерона и эстрадиола в миндалине. Двухнедельные самцы крыс имеют 12 значимых корреляций, а самки этого возраста - 5. Наиболее сильно у самцов в этом возрасте с поведением связаны уровни тестостерона в миндалине и эстрадиола в гипоталамусе и миндалине. У трехнедельных самцов крыс обнаружено 19 значимых корреляционных связей изученных поведенческих и нейрохимических признаков, а у самок - 9. Наибольшее участие в формировании поведенческих и рефлекторных реакций самцов этого возраста принимает кортикостерон поясной извилины, тестостерон гипоталамуса и эстрадиол миндалины, а у самок - эстрадиол гипоталамуса.
Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что самки крыс превосходят самцов в выполнении большинства разви-тийных поведенческих тестов как в неонатальном, так и в раннем постнатальном периоде развития. Это указывает на более быстрые темпы созревания функциональных систем мозга в первые дни после рождения у самок крыс по сравнению с самцами. Нейрохимической основой полового диморфизма в реализации поведенческих реакций у крыс могут являться многочисленные влияния андрогенов, эстрогенов и кортикостероидов на развивающийся мозг в эмбриональном и постнатальном периоде развития [1, 14].
Доказательством этого являются высокие величины стероидных гормонов в мозге и в плазме крови у новорожденных крыс обоего пола. По-видимому, они создают нейрохимическую среду,
необходимую для роста и развития нейронов, формирования медиаторных систем мозга и, как следствие, являются одними из определяющих звеньев в осуществлении поведения и полового диморфизма в его реализации. Выявленный высокий уровень нейроактивных стероидов в исследованных структурах мозга, сопоставимый с их концентрацией в плазме крови у новорожденных самцов и самок крыс может быть связан с повышением плотности рецепторов для кортикостероидов, эстрогенов и андрогенов в нейронах и глиальных клетках мозга [8, 9, 11-13].
Начиная с первых дней жизни и до конца третьей недели по-стнатального онтогенеза содержание половых стероидов во всех исследованных структурах мозга у крыс обоего пола закономерно снижается. Вероятно, это может являться также следствием дезактивации и ферментативного расщепления материнских гормонов, проникших в организм плода через плацентарный барьер. При этом самцы крыс имеют достоверно более высокий уровень тестостерона в, гиппокампе, поясной извилине и лобной коре сразу после рождения по сравнению с самками, а содержание эстрадиола у самок выше, чем у самцов в поясной извилине. Уровень кортико-стерона, так же как и содержание половых стероидов, закономерно снижается от момента рождения до конца третьей недели жизни у самцов крыс в плазме крови, гипоталамусе, гиппокампе и миндалине, а у самок - в миндалине и поясной извилине. Параллельно выявлено достоверное повышение содержания кортикостерона у 7 дневных самцов крыс в поясной извилине и лобной коре, а у самок этого возраста - в гипоталамусе, гиппокампе и лобной коре. Высокие значения кортикостерона в мозге у крыс обоего пола сразу после рождения можно рассматривать как следствие родового стресса, нивелируемое в возрасте 2-3 недель постнатальной жизни.
1 день
1
2 недели
4
З недели
Рис. Половые особенности поведения крысят в раннем постнатальном онтогенезе (1-21 дни после рождения)
Примечание: Сплошной линией обозначены показатели самцов крыс, пунктиром - самок. Пояснение в табл.
Описанные выше изменения уровня стероидных гормонов в мозге и в плазме крови у самцов и самок крыс в неонатальном и раннем постнатальном периоде развития достоверно связаны с выполнением поведенческих тестов. При этом спектр корреляционных взаимоотношений рассматриваемых поведенческих параметров с биохимическими признаками организма имеет секс-диморфную организацию и существенно перестраивается с 1 по 3 недели постнатальной жизни, подтверждая гипотезу избирательного вовлечения различных структур мозга и отдельных нейроак-тивных стероидов в реализацию ранних форм поведения.
Выводы. Наиболее высокий уровень кортикостерона, тестостерона и эстрадиола в лимбических отделах мозга выявлен у новорожденных самцов и самок крыс. В последующий период постнатального развития (до 21 дня) концентрация этих гормонов в крови и мозге значительно снижается. Установлено, что для самок характерны опережающие темпы формирования ряда изученных врожденных поведенческих и рефлекторных реакций в первые дни после рождения по сравнению с самцами. Получены новые данные, свидетельствующие о существовании некоторых корреляционных связей между содержанием изученных нейроактивных стероидов (кортикостерон, тестостерон, эстради-ол) в лимбических структурах мозга и плазме крови с результатами неврологического тестирования в ранние периоды постна-тальной жизни. Паттерны наблюдавшихся корреляций имеют
12
секс-диморфную организацию и существенно перестраиваются в первые недели после рождения.
Литература
1Ахмадеев А.В. // Мат-лы ХХ съезда физиол. общества им. И.П. Павлова М.2007. C. 131.
2.Вольф Н.В. Половые различия в функциональной организации процессов полушарной обработки речевой информа-ции.Ростов на Дону: Изд-во ООО УВВ. 2000.
3.Зарайская И.Ю. и др. Поведенческие равитийные тесты. // Мат-лы отдела системогенеза НИИ им. П.К. Анохина РАМН.2000.
4.Раевский В.В. Онтогенез медиаторных систем мозга: Ав-тореф... д-ра биол. наук.М.1988. 35 с.
5Хамильтон Л.У. Основы анатомии лимбической системы крысы. М.: Изд-во МГУ, 1984. 184 с.
6.Ямщикова Н.Н. Хроническая изоляция медиобазального гипоталамуса и становление реакции избегания у крыс: Авто-реф. канд. биол. наук. М.,1979.17 с.
7.Janowsky J.S. // Neuroscience. 2006.Vol. 138, № 3. P. 10151020.
8MacLusky N.J. et al. // BrainRes.1979. Vol.178,№1. P. 143.
9.MacLusky N.J. et al. // Brain Res.1979.Vol. 178, №. 1. P. 129142.
10Matsumoto A. // Psychoneuroendocrinology. 1991. Vol. 16, № 1-3. P. 25-40.
11McEwen B.S. // Biology of reproduction. 1980.Vol. 22. P. 43-48.
12McEwen B.S. // Environmental Health Perspec-tives.1987.Vol. 74.P. 177-184.
13McEwen B.S., Alves S.E. // Endocrine Reviews.1999.Vol. 20, № 3.P. 279-307.
14.Parducz A. et al. // Neuroscience. 2006. Vol. 138, № 3. P. 977-985.
15.Rupprecht R. // Psychoneuroendocrinology. 2003.-Vol. 28, № 2.-P. 139-168.
THE NEUROACTIVE STEROIDS OF THE BRAIN AND EARLY FORM OF THE BEHAVIOR IN RATS
V.A. SASHKOV, N.B. SELVEROVA, T.I. DZHANDAROVA Summary
Dynamics of the neuroactive steroids in the brain and elementary behavioral acts were studied in the male and female rats in the neonatal and early postnatal time of germination. There was a correlation identified between the behavior and the level of corticosterone, testosterone and estradiol in the hypothalamus, hippocampus, amygdala, cingulated gyrus and frontal cortex in the male and female rats at the age of 1, 7, 14 and 21 days after the birth. Correlation analysis carried out for the above purpose confirms perception of selective sex-dimorphous use of different brain structures and of separate the neuroactive steroids in the development of the early form behavior.
Key words: neuroactive steroids, corticosterone, estradiol
УДК 616.153.915: 612.57]-092.9
СИСТЕМНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПАРАМЕТРОВ ОБМЕНА ЛИПИДОВ В ПЛАЗМЕ И КРОВИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ МОДЕЛИРОВАНИИ ОБЩЕЙ УПРАВЛЯЕМОЙ ГИПЕРТЕРМИИ
С.А. ЗАЙЦЕВ, Ю.В. ПАХОМОВА, К.К. ДМИТРИЕВА,
К.А. АСТАФЬЕВА, В.С. САЗОНОВ*
Практическая медицина нуждается в теоретических обоснованиях патогенетических механизмов экстремальных состояний. При воздействии неблагоприятных факторов на организм в одних случаях происходит их кумуляция с развитием синдрома взаимного отягощения, в других - их компенсация и адаптация к ним. Это позволяет выдерживать экстремальные воздействия без отрицательных для здоровья последствий.
Ключевые слова: патогенетические механизмы экстремальных состояний
В связи этим [2] актуальность принимает изучение системных нарушений метаболизма при общей управляемой гипертермии (ОУГ). Особого внимания заслуживает оценка роли лимфатической системы в пато- и саногенетических реакциях организма при действии экстремально высоких температур, поскольку
* Новосибирская ГМА
транскапиллярный обмен макромолекул в организме, осуществляемый по схеме «кровь - интерстиций - лимфа - кровь», является приоритетным [12]. Оценка гемолимфатических соотношений позволяет адекватно оценить характер обменных нарушений, поскольку его информативные возможности выше, нежели общепринятая оценка только плазменных параметров. На современном этапе аспекты метаболических нарушений липидного обмена в патогенезе общей управляемой гипертермии еще не достаточно хорошо изучены, что не позволяет составить интегральное представление о роли лимфатической системы в их компенсации.
Цель работы — изучение показателей липидного обмена в плазме и лимфе крыс при общей управляемой гипертермии.
Материалы и методы. Исследования проведены на 140 кры-сах-самцах линии Wistar (возраст 2,5 мес.), полученных в Центральной научно-исследовательской лаборатории ГОУ ВПО НГМУ Росздрава. Экспериментальные животные были разделены на 7 групп: 1 группа - контроль (п =20); 2 группа - 5 часов с момента перегревания (п =20); 3 группа - 1-е сутки с момента перегревания (п =20); 4 группа - 3-и сутки с момента перегревания (п =20); 5 группа - 7-е сутки с момента перегревания (п =20); 6 группа - 14-е сутки с момента перегревания (п =20); 7 группа -21-е сутки с момента перегревания (п =20). Разогревание крыс производилось в полном соответствии со «Способом экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных» [9]. Предлагаемый способ моделирования ОУГ у мелких лабораторных животных предполагает нагрев объекта исследования в резервуаре стандартной термобани ТБ-110 при погружении в горячую воду до уровня шеи, конструкция которой предусматривает автоматическое поддержание температуры воды и перемешивание ее слоев, что позволяет считать в эксперименте температуру теплоносителя величиной постоянной. Преимущество моделирования ОУГ в водной среде, по отношению к воздушной, заключается в том, что осуществляется равномерное, глубокое и быстрое нагревание организма животного. Температурный режим нагрева горячей воды-теплоносителя подбирался экспериментально и составил 45 °С. Данную температуру можно считать оптимальной при моделировании ОУГ, так как более высокие значения плохо переносятся животными и ведут к их гибели. Уровень ОУГ, при котором прекращали нагрев, определялся ректальной температурой 43,5 °С (стадия теплового удара). При более высокой температуре следовала гибель животных в момент ОУГ или в ранние сроки постгипер-термического периодам. Измерение ректальной температуры проводилось до начала опыта, в течение всего периода разогревания и в постгипертермическом периоде в течение 30 минут.
Термометрия осуществлялась с помощью дифференциальной термопары (медь-константан), подключенной к высокочувствительному микровольтметру-микроамперметру постоянного тока типа Ф 116/2, что позволяло с высокой точностью измерять даже небольшие перепады температур. Для снижения погрешности измерения, обусловленной высокой теплоемкостью и теплопроводностью дифференциальной термопары, использованы константановый и медный проводники одинакового сечения - 0,1 мм, концы которых спаяны между собой. Точность измерения достигалась использованием двух отрезков термопары (медь-константан), термоэлектродвижущая сила (Тэдс) которых направлена встречно. Медные концы дифференциальной термопары подключали к измерительному прибору, при этом, если спаи термопар находились при одинаковой температуре, то Тэдс равнялась 0° С. Проверка и градуировка дифференциальной термопары осуществлялись путем погружения одного из ее спаев в тающий лед (сосуд Дьюара), где температура составляла 0°С, а другой — в горячую воду определенной температуры, значение которой фиксировали точным ртутным термометром. При этом измеряли Тэдс на выходе дифференциальной термопары. При измерении ректальной температуры нагреваемых животных один из спаев дифференциальной термопары вводили в прямую кишку на глубину 3-4 см, а второй опускали в тающий лед (сосуд Дьюара). Таким образом, температурная разница между 0°С и ректальной температурой выражалась в микровольтах на шкале микровольтметра-микроамперметра. Таблица, составленная в ходе градуировки, позволяла точно сопоставить показания прибора (микровольты) и значение температуры в прямой кишке (градусы). Непрерывное в ходе всего опыта и точное (до десятых долей градуса) измерение ректальной температуры позволяло извлекать животных из термобани в критический момент - на высоте раз-
