CC BY
13
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
К.А. Сычевская, С.К. Кравченко, Б.В. Бидерман, Е.Е. Никулина, А.Е. Мисюрина, Н.В. Рисинская, А.Б. Судариков
НЕСТАБИЛЬНОСТЬ МИКРОСАТЕЛЛИТОВ И МУТАЦИИ ГЕНОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В ДЕБЮТЕ И РЕЦИДИВЕ/ПРОГРЕССИИ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ
ЛИМФОМЫ
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Введение. Эффективные протоколы лечения пациентов с резистентным течением фолликулярной лимфомы (ФЛ) на настоящий момент не разработаны. Возможность создания новых лекарственных препаратов зависит от прогресса в понимании патогенеза опухоли. Поэтому изучение закономерностей опухолевой эволюции представляется актуальной задачей. Генетические аберрации, определяющие опухолевую резистентность, могут возникать вследствие различных процессов, изменяющих исходную структуру ДНК. Система репарации неспаренных нуклеотидов представляет собой одно из ключевых звеньев генетического гомеостаза. Известно, что дефект этой системы выражается в микросателлитной нестабильности (MSI -microsatellite instability). В-клеточные лимфомы центра фолликула характеризуются высокой вероятностью соматического мутагенеза генов иммуноглобулинов. Возникновение точечных соматических мутаций в области других генов-мишеней может провоцировать опухолевую прогрессию.
Цель. Изучение роли аберраций микросателлитных повторов и мутаций генов иммуноглобулинов у пациентов с резистентным течением ФЛ.
Материалы и методы. В исследование было включено 19 пациентов с ФЛ. Парные биопсии были выполнены у 10 пациентов в дебюте и рецидиве, у 6 пациентов - в дебюте и прогрессии во время химиотерапии, у 3 пациентов - в дебюте и прогрессии после периода наблюдения без лечения. Все пациенты дали добровольное согласие на участие в исследовании. Исследование микросателлитного профиля выполняли с использованием диагностической панели COrDIS Plus (ООО Гордиз, Россия) в материале опухолевой ткани и клетках периферической крови в качестве контрольного образца. Амплификацию, фрагментный анализ и секвенирование по Сэнгеру генов тяжелых цепей иммуноглобулинов (IGH) проводили на автоматическом термо-циклере DNAEngine (BioRad, США) и генетическом анализаторе Нанофор-05 (ООО Синтол, Россия), соответственно.
Результаты. Выявленные изменения микросателлитного профиля были классифицированы следующим образом: EMAST (elevated microsatellite alterations at selected tetranucleotide repeats) - появление нового аллеля тетрануклеотидного локу-са; LOH (loss of heterozygosity) - аллельный дисбаланс. Принято
считать EMAST частным вариантом MSI. В целом, при ФЛ наблюдается тенденция к увеличению числа генетических событий в материале повторных биопсий. В случае LOH различия между группами дебюта и рецидива/прогрессии были статистически значимы в тесте х2 (p<0,05). Зависимости динамики накопления аберраций микросателлитного профиля от морфологического типа ФЛ, варианта клинического течения заболевания (рецидив VS прогрессия +/- терапия) в данной когорте больных прослежено не было. У большинства пациентов отмечалось появление новых локусов LOH и EMAST дополнительно к существующим в дебюте аберрациям. Однако, в 3 случаях локусы LOH в дебюте и рецидиве/прогрессии не совпадали. У 7 пациентов технически оказалось возможным провести секвенирова-ние генов IGH. В 4 случаях нуклеотидные последовательности в парных образцах были идентичны. У 2 пациентов в прогрессии заболевания появились единичные новые точечные мутации, и в одном случае последовательности генов дебюта/рецидива существенно различались по нуклеотидным заменам в 41 позиции. Поскольку вероятность "потери" клоном рецидива целого ряда генетических аберраций, существующих в дебюте заболевания, низка, представляется более вероятным предположить на основании приведенных примеров, что в ряде случаев опухолевая популяция при возврате заболевания может не быть дочерней по отношению к клону дебюта и происходит из стволовой клетки опухоли независимо.
Выводы. Для ФЛ показано увеличение степени нестабильности микросателлитных повторов и появление новых соматических мутаций по мере прогрессирования опухоли. Доказана возможность развития опухолевых клонов дебюта и возврата заболевания из более ранней опухолевой клетки-предшественницы. Поскольку возникновение новых генетических нарушений было отмечено, в том числе, у пациентов, у которых обе биопсии были выполнены до начала терапии, эволюция опухолевого клона может происходить без лекарственного цито-токсического давления. При сопоставлении изменений микро-сателлитного профиля и соматических мутаций генов IGH не отмечено взаимосвязи между процессами появления и накопления локусов MSI и соматического мутагенеза что может быть связано с недостаточным объемом выборки.
С.А. Треглазова, Е.Е. Никулина, Т.В. Макарик, А.О. Абдуллаев, И.Н. Суборцева, А.Л. Меликян, А.Б. Судариков
ДИНАМИКА МУТАЦИИ CALR У РОССИИСКИХ ПАЦИЕНТОВ С PH-НЕГАТИВНЫМИ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ НА ТЕРАПИИ
ИНТЕРФЕРОНОМ-АЛЬФА
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Введение. Мутации 9 экзона в гене CALR наряду с мутациями гена JAK2 и/или MPL являются рутинными диагностическими маркерами при Р^негативных миелопролиферативных новообразованиях (МПН). Хотя молекулярный мониторинг минимальной остаточной болезни не входит в общепринятые протоколы лечения МПН, многочисленные научные исследования мутационной нагрузки JAK2 (V617F) показали, что терапия интерфероном-а (ИФН) часто индуцирует как гематологические, так и молекулярные ремиссии. В то же время, значение
мониторинга мутационной нагрузки CALR до сих пор остается спорным.
Цель. Оценить клиренс клонов с мутациями гена CALR у российских пациентов с Ph - негативными МПН, получавших ИФН.
Материалы и методы. В исследование были включены пациенты, с установленными диагнозами в соответствии с классификацией ВОЗ (2017) и получавшие терапию ИФН в амбулаторном отделении НМИц гематологии с 2015 по 2020 год
