DOI 10.31588/2413-4201-1883-239-3-4-9 УДК 636.02
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ У ТЕЛЯТ В УСЛОВИЯХ МОЛОЧНОГО КОМПЛЕКСА НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ БАСУЛИФОРА
Алексеев И.А. - д.в.н. профессор, Егоров Р.А. - аспирант
ФГБОУ ВО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия»
Ключевые слова: телятник, кормовая добавка, Басулифор, иммуноглобулины, неспецифические факторы иммунитета, пробиотик
Key words: housing for calfes, feed additive, Basulifor, immunoglobulins, non-srecific immune factors, ргаЫойс
В последнее десятилетие во всем мире, включая Россию, значительно возросло внимание исследователей к поиску альтернативных путей замены антибиотиков. Одним из реальных направлений являются пробиотические препараты и про-биотические кормовые добавки, которые представляют собой биомассу бактерий в вегетативной или споровой форме. Они обладают с хорошо выраженной антагонистической актив-ностью к патогенной и условно-патогенной микрофлоре [1,3].
По данным Академии Микро-биологии (США) между микро-организмами, иммунитетом и болезнями, имеются доказательные перспективы их использования. Установлено, что применение пробиоти-ков может оказывать противоинфекцион-ное, имуномодуляторное воздействие на организм, повышать барьерные функции (физиологические механизмы, защищающие организм от воздействия окружающей среды, препятст-вующие проникновению в него бактерий, вирусов и вредных веществ), стимулировать моторику и экскреторную функции кишечника [6,7]. При этом вве-денные с препаратами пробиоти-ческие штаммы взаимодействуют с сообществом бактерий кишечника, выделяют метаболиты, влияющие на активность неспецифического иммунитета, гормональной и пищеварительной систем организма [8,9]. Среди других пробиотических препаратов и пробиотических кормовых добавок по данным создателя и производителя (ООО «НИИ Пробиотиков», г. Москва) по свой эффективности можно выде-
лить пробиотическую кормовую добавку «Басу-лифор».
Материал и методы исследований. Научно-производственный опыт по испытанию Басулифора был проведен в зимне-весенний период 2018 года, продолжительностью 60 суток в молочном комплексе АО «Акконд-Агро» Янти-ковского района Чувашской Республики. Объектами исследований для выполнения данной работы были здоровые, хорошо развитые, средней упитанности 2-5-суточного возраста, живой массой 31-32 кг 36 телят черно-пестрой породы, принадлежащие указанному хозяйству. Животные по методу групп-аналогов были разделены на три группы (контрольная и две опытные) по 12 голов в каждой.
Телятам первой опытной группы скармливали пробиотическую кормовую добавку «Басулифор» с молокам из расчета 0,3 г/л, второй опытной группы - по 0,4 г/л. Животные контрольной группы указанную добавку не получали.
При выполнении данной экспериментальной работы были использованы следующие методы исследований [12]:
- клинико-физиологические определяли у телят контрольной и опытных групп температуру тела, частоту пульса и частоту дыхания общепринятыми в ветеринарной медицине методами;
- гематологические - количество эритроцитов, лейкоцитов в крови животных подсчитывали в счетной камере Го-ряева, уровень гемоглобина определяли гемометром Сали;
- биохимические - содержание общего белка в сыворотке крови животных определяли рефрактометром ИРФ-454Б-2М, отдельные фракции белка (альбумины, альфа, бета и гамма - глобулины ) - турби-диметрическим методом;
- количественное определение им-муно-глобулинов ( Ig «A», Ig «M», Ig «G») в сыворотке крови телят поводили методом радиальной иммунодиффузии (ООО «Тиас Лотус», Чебоксары);
- статистическую обработку полученных данных выполнили по методу Ой-вина с использованием таблиц Стью-дента.
Басулифор - представляет собой комплексную кормовую добавку, содержащую микробную массу живых природных штаммов микроорганизмов Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis в оптимальном соотношении, не мене 5 х 109 КОЕ (колониеобразующих единиц), продуцирующих пищеварительные ферменты, аминокислоты и витамины группы В. Данную кормовую добавку применяют для улучшения усвояемости кормов, повышение неспецифической резистентности сельскохозяйственных животных и непродуктивных животных, птицы, рыб и пушных зверей. Добавка не теряет своих полезных качеств при экспандировании, экструдировании и гранулировании кормов. Споры этих бактерий обладают высокой жизнеспособностью, они устой-чивы к химическим препаратам, высокой и низкой температуре, давлению и другим условиям среды. Сохраняют свою жизнеспособность в кислой среде желудка и при применении ряда антибиотиков. Указанные бактерии обладают антагонистической активностью по отношению к Escherichia coli, Salmonella, Tiphimurium, Enteritidis, Staphilococcus aureus, Shigella sp. и др. Коме того, эти спорообразующие бактерии продуцируют эндогенный инте-реферон, пищеварительные ферменты (амилаза, липаза, протеаза, пектиназа, эн-доглюконаза и др.), рибофлавин, незаменимых аминокислот, синтезируют биологически активные вещества, стимулирующих развитие целлюло-литических руми-нококков, лактобацилл, обладают иммуно-
модулирующим действием. Они обладают высокой антагонис-тической активностью и эффективностью в отношении 90% условно-патогенных кишечных бактерий и грибков. По данным авторов, создателей кормовой добавки, применение ее в хозяйствах позволяет существенно повысить неспецифическую резис-тентность организма животных, сохранить на высоком уровне иммунный статус и снизить риск возникновения инфек-ционных заболеваний. Важным является применение кормовой добавки в первые часы жизни телят. Это связано с тем, что в этот момент происходит активная колонизация кишечной микрофлоры, и от состава этой микрофлоры будет зависеть благополучие не только отдельных животных, но всего поголовья
[5].
В доступной литературе мы не обнаружили работ, посвященных изуче-нию влияния указанной пробиотической кормовой добавки на организм телят. Целью работы, по просьбе создателя добавки, явилось определение зоотехни-ческой и ветеринарной целесообразности применения ее при выращивании телят. В этой связи, была поставлена задача - изучить влияние пробиотической кормо-вой добавки «Басулифор» на морфо-логический, биохимический статус и показатели неспецифической резистент-ности организма телят.
Результаты исследований. Исследования показали, что испытываемая кормовая добавка оказала определенное влияние на физиологические показатели у опытных телят. Так, в опытных группах животных, где использовали Басулифор, по сравнению с контрольными аналогами, в 15, 30, 60-суточном возрасте температура тела оказалась выше на 0,1- 0,2°С, частота пульса - на 5,75-6,36, частота дыхательных движений - на 7,12-7,54 в минуту. При биометрической обработке цифровых величин эти данные оказались статистически не достоверными. Как известно, основными показателями, характеризующими неспецифическую резистентность молодняка животных являются высокие физиологические данные, морфологические, биохимические пока-затели
крови, уровни гамма -глобулинов и иммуноглобулинов классов ^ «Л», Ig «M», Ig «G». Содержание количества эритроцитов в крови опытных телят первой группы, по сравнению с контрольными аналогами, на 15 сутки опыта в результате применения пробио-тической кормовой добавки достоверно повышалось на 3,80%( Р<0,05), на 30 сутки - на 4,12% (Р<0,05), на 60 сутки опыта - на 4,54% (Р<0,05). Во второй опытной группе животных рост этих показателей в отмеченные сроки прове-дения опыта составил 4,22, 4,46, 4,68 % (Р<0,05). В отмеченные сроки проведения научно-хозяйственного опыта количество лейкоцитов в крови опытных телят, по сравнению с контролем увеличилось в пределах до 1,60-1,75%, однако без статистической достоверности. Примерно аналогичная картина наблюдалась и со стороны гемоглобина, величина которого у опытных телят, по сравнению с интактными животными, изменялась в сторону повышения, в
зависимости от возрастных циклов на 6,40-6,90% (Р<0,01). Следует отметить, что изменение физиологических и гематологических показателей на фоне использования Басулифора у опытных животных не выходили за пределы существующих нормативов. Активизация сердечной деятельности, дыхательных движений, гематологических показателей и уровня гемоглобина по данным исследователей, связано со стимулирующим действием биологически активных веществ, продуцируемых бактериями, входящими в состав кормовой добавки В. БивйНБ и В. НсЬешГогтв. Эти биологически активные вещества стимулируют функции красного костного мозга и центральных органов иммунной системы [10].
Показатели белкового спектра сыворотки крови телят на фоне использования кормовой добавки на 30 сутки опыта представлены в таблице.
Таблица 1 - Динамика применении пробиотической
общего белка и белковых фракций сыворотки крови телят при кормовой добавки «Басулифор»
Показатель Группа телят
Контрольная 1 опытная 2 опытная
Общий белок, г/л 65,82±0,78 67,98±0,82 * 68,00±0,86 *
Альбумины, г/л 27,78±0,39 28,53±0,41 * 28,36±0,42 *
Глобулины, г/л 38,04±0,44 39,45±0,46,* 39,64±0,48*
в т.ч. альфа - глобулины, % 12,62±0,22 11,16±0,20 11,24±0,21
бета - глобулины, % 7,46±0,18 8,10±0,19 8,12±0,20
гамма - глобулины, % 17,96±0,24 20,19±0,26 ** 20,28±0,25 *8
Иммуноглобулины ^ «А» 0,19±0,01 0,21±0,02** 0,22±0,02**
Иммуноглобулины ^ «М» 2,48±0,10 2,59±0,11* 2,62±0,12*
Иммуноглобулины ^ 19,32±0,26 20,16±0,30 * 20,22±0,33 *
Примечание: * Р<0,05; ** Р<0,01.
Цифровые данные таблицы показывают, что уровень общего белка в сыворотке крови у опытных животных первой группы, по сравнению с контроль-ными аналогами, под влиянием пробио-тической кормовой добавки «Басулифор» незначительно, но достоверно повышался на 30 сутки опыта, в среднем на 3,28% (Р<0,05), во второй опытной группе животных - на 3,31% (Р<0,05). Рост уровня общего белка в сыворотке крови опытных животных в основном проис-ходил за счет альбуминов,
рост которых составил 2,69 и 2,08% и глобулинов, особенно гамма-глобулиновой фракции. На фоне использования кормовой добавки, достоверное увеличение данного показа-теля в сыворотке крови у телят первой опытной группы, по отношению к интактной группе животных составило 12,29% (Р<0,01), в во второй опытной группе животных - 12,79% (Р<0,01).
Дальнейшие исследования показали, что в сыворотке крови у опытных телят на фоне использования пробиоти-
ческой кормовой добавки «Басулифор», по сравнению с контрольными аналогами, иммуноглобулины класса А A) значительно повышались. Так, этот показатель в сыворотке крови у телят первой опытной группы, по отношению к контролю, был достоверно выше в среднем на 10,52% (Р<0,01), во второй опытной группе животных на 15,78% (Р<0,01). Как известно, кроме сыворотки крови, иммуноглобулины класса А встречаются в секретах на поверхности слизистых оболочек и синтезируются в плазма-тических клетках селезенки, лимфати-ческих узлов и слизистых оболочек. Секреторные ^ A играют существенную роль в местном иммунитете, поскольку препятствуют адгезии микроорганизмов на эпителиальных клетках слизистых оболо-чек рта, кишечника, респираторных и мочевыводящих путей. Вместе с тем, этот иммуноглобулин агрегированной форме активирует комплемент по альтер-нативному пути, что приводит к стиму-ляции местной фагоцитарной защиты [11].
При применении пробиотической кормовой добавки «Басулифор рост иммуноглобулинов класса М (^ M) в сыворотке крови у опытных телят первой группы, по сравнению с таковыми интактной группы, характеризовался в среднем 4,43% (Р<0,05), во второй опытной группе животных - 5,64% (Р<0,01). Исследователями установлено, что иммуноглобулины класса М (^ M) начинают синтезироваться в организме плода и первыми появляются в сыворотке крови после иммунизации животных большинством антигенов. Этим иммуно-глобулинам принадлежит большая часть нормальных антител изогемагглюти-нинов, которые присутствуют в сыворотке крови животных принадлежностью к оп-реде-ленным группам крови [2]. Введение в основной рацион испытываемой кормовой добавки оказало аналогичное позитивное влияние и на уровень иммуноглобулинов класса G (Ig G) в сыворотке крови опытных телят. Так, увеличение данного показателя в сыворотке крови у опытных телят первой группы, по отношению к контролю, характеризовалось в среднем
4,34% (Р<0,05), во второй опытной группе животных - 4,65% (Р<0,05).
Иммуноглобулины класса G (^ G) являются единственным классом антител, проникающим через плаценту в организм плода. Через некоторое время после рождения плода содержание его в сыворотке крови падает и достигает минимальной концентрации к 3 - 4 мес., после чего начинает возрастать за счет накопления собственных ^ G [4].
Заключение. Таким образом, анализ полученных данных показал, что использование новой кормовой добавки «Басулифор», содержащей споро-образющих пробиотических микробов B. subtilis и B. licheniformis, оказало благоприятное влияние на организм телят опытных групп. Наиболее эффективной дозой Басулифора оказалась 0,4 г/кг корма. При этом характерным является увеличение в крови опытных животных, по сравнению с контрольными аналогами, количества эритроцитов на 4,68% (Р<0,05), гемоглобина - на 6,90 (Р<0,01), гамма -глобулинов - на 12,79% (Р<0,01), иммуноглобулинов класса А (^ A) - 10,52% (Р<0,01), иммуноглобулинов классов М и G (^ М, Ig G) - 5,54 и 4,65% (Р<0,05). Проведенный научно-произ-водственный опыт и полученные при этом позитивные результаты позволяют констатировать о том, что новая пробио-тическая кормовая добавка «Басулифор» в условиях крупного молочного комплекса способствует повышению неспеци-фического иммунитета в организме молодняка крупного рогатого скота.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Алексеев, И.А. Влияние биологически активной кормовой добавки на естественную резистентность организма телят / И.А. Алексеев, С.Г. Петрова // Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию А.П. Айдака, Чебоксары. - 2017. - С. 195-200.
2. Алексеев, И.А. Опыт выращивания телят с применением пробиотика Споро-бактерина / И.А. Алексеев, А.М. Волков // Аграрный вестник Урала. - 2015. - №2. - С. 12-15.
3. Бакулина, Л.Ф. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использование в ветеринарии / Л.Ф. Бакулина // Биотехнология. - 2002. -№2.- С. 48-52.
4. Бессарабов, Б. Пробиотики эффективны и безвредны / Б. Бессарабов, А. Крыканов // Животноводство России. -2006.- №5. - С. 28-29.
5. Временное наставление по применению пробиотической кормовой добавки «Басулифор» // ООО «НИИ Пробиоти-ков».- М.: 2011.- 2с.
6. Грачева, Н.М. Эффективность нового пробиотического препарата при лечении кишечных инфекций / Н.М. Грачева // Микробиология. - 2006. - №4. - С. 77-78.
7. Зинченко, Е.В. Иммунобиотики в ветеринарной практике: о механизме действия пробиотиков и иммунопрофи-лактических препаратов и использовании их в ветеринарии / Е.В. Зинченко, А.П. Пронин. - М., 2006. - 163 с.
8. Каширская, Н.Ю. Значение пробио-тиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры / Н.Ю. Каширская // Русский медицинский журнал. - 2000. -163с.
9. Корсаков, В.М. Использование про-биотиков при выращивании телят профилактического возраста / В.М. Корсаков, Л.А. Литвина // Труды Курганской ГСХА, Курган. - 2014. - С.143-145.
10. Литвинов, О.Б. Решение проблемы защиты новорожденных телят от инфекционной диареи смешанной этиологии / О.Б. Литвинов, Х.З. Гафаров // Ветеринарный врач. - 2015. - №3. - С.29.
11. Ноздрин, Г.А. Пробиотики на основе Bacillus subtilis и их роль в поддержании здоровья животных разных видов / Г.А. Ноздрин, А.Б. Иванова // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки.- 2006. -№7.- С.63-66.
12. Чумаченко, В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у с/х животных / В.Е. Чумаченко // Киев: Урожай.-1990.- С.62-76.
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ У ТЕЛЯТ В УСЛОВИЯХ МОЛОЧНОГО КОМПЛЕКСА НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ БАСУЛФОРА
Алексеев И.А., Егоров Р.А.
Резюме
Изучено влияние новой пробиотичской кормововй добавки «Басулифор», содержащей пробиотических спорообразующих микроорганизмов Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis на морфологический, биохимический статус организма и на показатели неспецифического иммунитета у телят в условиях молочного комплекса. Установлено, что испытываемая кормовая добавка способствует повышению в крови телят количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, а в сыворотке крови - уровня общего белка, альбуминов, гамма-глобулинов -носителей иммунных тел. Содержащиеся в составе пробиотической кормовой добавке «Ба-сулифор» указанные спорообразующие бактерии стимулируют синтез в организме опытных животных иммуноглобулинов классов А, М, G ( Ig «A», Ig «М», Ig «G»), которые способствую укреплению здоровья и повышению неспецифического иммунитета у молодняка крупного рогатого скота.
NONSPECIFIC IMMUNITY IN CALVES UNDER CONDITIONS OF DAIRY COMPLEX AGAINST THE PACKGROUND OF THE USE OF BASSULIFOR
Alekseev I.A., Egorov R.A.
Summary
The influence of a new probiotik fodder additive «Bassulifor» containing probiotic spore - forming microorganisms Bacillus subtillis and Bacillus licheniformis on the morphological, biochemical status of the organism and indicators of nonspecific immunitiy in calves in a diary
8
complex condition. It is determined, that the tested fodder additive promotes to raise eritrosyte,leucocyte, hemoglobin in calves blood and to increase the level of protein, albumin, gamma globulin- immune body carriers in the blood serum. Contained in the probiotik fodder additive «Bassulifor » the said spore -forming bacteria stimulate the synthesis in the body of experimental animals of immunoglobulins classes of A,M,G,(Ig A, Ig M, Ig G.), that promote health and increase nonspecific immunitiy in young catle.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-239-3-9-14
УДК 616-092.19:612.821.1:636
ИЗУЧЕНИЕ ПОВЕДЕНИЯ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ НОРМОБАРИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ И ПУТИ ЕГО КОРРЕКЦИИ
Алистратова Ф.И. - аспирант, Скопичев В.Г. - д.б.н.
ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»
Ключевые слова: антигипоксанты, хроническая нормобарическая гипоксия, «открытое поле», «приподнятый крестообразный лабиринт»
Keywords: antihypoxants, chronic normobaric hypoxia, Open field test, Elevated plus-maze
test
Ведущую роль в развертывании адаптационного ответа организма играет состояние ЦНС животного. Для нормального функционирования головному мозгу необходим значительно больший объем энергии нежели другим системам органов организма организма [1]. В связи с изменяющимися условиями внешней среды, энергетический обмен в нервных волокнах всецело зависит от степени завершения митохондриальных энергетических процессов, а также допустимости их поддержания. В связи с чем актуальным является подбор новых методов и совокупности их комбинаций, которые оптимизируют функциональное состояние нервной системы при воздействии гипоксического фактора [5,7]. Известно несколько способов повышения адаптационных ресурсов индивидуума к гипоксическому воздействию: безлекарственный и с использованием фармакокоррекции. Медикаментозный путь предполагает применение лекарственного соединения. Исполь-зование препаратов действует комплексно: смягчает процессы адаптации у животных при дефиците кислорода или ликвидирует его наступление, а также стимулирует метаболические реакции в центральной нервной системе [6,8,10]. Безлекарственные пути профилактики и лечения недостаточности кислорода воздуха основаны на использо-
вании кратных, повторяющихся экспозициях гипоксического воздействия (вдыхание смесей с уменьшенным уровнем О2, использование разреженного воздуха в барокамерах, и т. п.), отличающееся по времени и степени понижения кислородного напряжения. Цель работы: рассмотреть влияние хронического гипоксического воздействия на динамику показателей, характеризующих состояние нервной системы. Посредством поведенческих тестов «открытое поле», «приподнятый крестообразный лабиринт», по истечении курса воздействия нормобарической гипоксии, коррекции обнаруженных нарушений посредством использования препарата ци-тофлавин.
Материал и методы исследований. Проводилось исследование на 30 крысах-самцах массой 183-210 г, разделенных на две равные группы (п=15). Крысы находились в стандартных условиях вивария, с обычным пищевым рационом. Опыты были проведены согласно Национальным стандартам Российской Федерации ГОСТ 33044-2014 Принципы надлежащей лабораторной практики, Приказ Минздрава России от 01 апреля 2016 г. № 199н «Об утверждении правил надлежащей лабораторной практики», по утвержденному письменному протоколу. Исследуемый препарат цитофлавин вводили