Некоторые механизмы нарушений структуры мембраны эритроцитов у рожениц при цитомегаловирусной инфекции

Ишутина Наталия Александровна; Дорофиенко Николай Николаевич

(Irkutsk). — 2013. — Vol.121. №6. — P. 40-42. (in Russian)

7. Korchazhkina N.B. The current state of the health resort service in the Russian Federation and the possible ways of development // Vestnik Vosstanovitelnoj Meditsiny. — 2013. — №5. — P. 14-21. (in Russian)

8. Razumov A.N. The strategic importance of the resorts in the preservation and restoration of health // Kurortnie Vedomosty. — 2014. — №2. — P. 11-19. (in Russian)

9. Sudakov K.V. Information aspects of the systemic organization of mental activity // Vestnik RAMN. — 2012. — №8. — P. 53-56. (in Russian)

10. Ushakov I.B., Bogomolov A.V. Computerization programs personalized adaptive medicine // Vestnik RAMN. — 2014. — №56. — P. 124-128. (in Russian)

11. Fedotchenko A.A. The modern view of the mechanism of action of physiotherapy // Sibirskij Medicinskij Zurnal (Irkutsk). — 2010. — Vol. 99. №8. — P. 178-179. (in Russian)

12. Yakovlev M.Y., Bobrovnitsky I.P., Lebedeva O.D. Use of diagnostic software module monitoring the functional reserves of the organism to assess the effectiveness of health-rehabilitation programs // Voprosy kurortologii, physiotherapii i lechebnoj fizkultury. — 2012. — №2. — P. 7-9. (in Russian)

Информация об авторах: Соловьева Татьяна Анатольевна — начальник отделения медико-психологической реабилитации санатория «Байкал», 664529 п. Листвянка Иркутской области, e-mail: [email protected]; Поспелова Ольга Валерьевна — медицинский психолог; Камека Денис Леонидович — начальник лечебно-диагностического отделения; Федотченко Александр Александрович — д.м.н., профессор кафедры физиотерапии и курортологии ИГМАПО, e-mail: prof. [email protected]

Information About the Authors: Solovieva Tatyana А. — chief of medical and psychological rehabilitation sanatorium

«Baikal», 664529 n. Listvyanka Irkutsk region, e-mail: [email protected]; Pospelovа Olga V. — clinical psychologist; Kameka Denis L. — chief of the medical-diagnostic department; Fedotchenko Alexander A. — MD, PhD, DSc, professor,

e-mail: prof. [email protected]

НЕКОТОРЫЕ МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЙ СТРУКТУРЫ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ У РОЖЕНИЦ

ПРИ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Наталия Александровна Ишутина, Николай Николаевич Дорофиенко (Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания, директор — член-корр. РАН, д.м.н., проф. В.П. Колосов, лаборатория механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при неспецифических заболеваниях лёгких, зав. — акад. РАН, д.м.н., проф. М.Т. Луценко)

Резюме. В работе изучено состояние процессов перекисного окисления липидов, состав фосфолипидов и содержание фосфолипазы А2 у рожениц с цитомегаловирусной инфекцией (титр антител IgG к цитомегаловирусу 1:1600). Установлено, что в основе механизмов нарушения структуры мембраны эритроцитов лежит активация процессов перекисного окисления липидов, которые приводят к повышенному образованию вторичных ТБК-активных продуктов (на 64%, p<0,001), гидролизу фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина (уменьшение концентрации на 19% и 18%, соответственно, p<0,001), в результате повышенного содержания фосфолипазы А2 (на 64%, p<0,001) и образованию большого количества лизофосфатилилхолина (на 84%, p<0,001, выше показателя контрольной группы). Выявленные изменения в мембране эритроцитов рожениц в условиях цитомегаловирусной инфекции характеризуют наличие деструктивного процесса и свидетельствуют о структурно-функциональной несостоятельности цитоплазматической мембраны, что может быть причиной возникновения гипоксии в организме развивающегося плода и новорожденного ребенка.

Ключевые слова: цитомегаловирусная инфекция, роженицы, мембрана эритроцита, фосфолипиды, фосфоли-паза А2, перекисное окисление липидов.

SOME MECHANISMS OF VIOLATIONS OF STRUCTURE OF ERYTHROCYTE MEMBRANES IN OBSTETRIC PATIENTS

WITH CYTOMEGALOVIRUS INFECTION

N.A. Ishutina, N.N. Dorofienko (Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration, Russia)

Summary. The paper studied the state of lipid peroxidation, the phospholipids and the content of phospholipase A2 in women with cytomegalovirus infection (titer of IgG antibodies to cytomegalovirus 1:1600). It was found that the basis of structural failure mechanisms is the activation of erythrocyte membrane lipid peroxidation, which leads to increased formation of secondary TBA-active products (64%, p<0,001), the hydrolysis of phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine (reducing the concentration by 19% and 18%, respectively, p<0,001), resulting in increased content of phospholipase A2 (64%) and significant amounts of lizofosfatililholina (84%, p<0,001, higher than in the control group). The revealed changes in the membrane of red blood cells in a maternal CMV infection is characterized by the presence of a destructive process and show the structural and functional failure of the cytoplasmic membrane, which may be the cause of hypoxia in the body of the developing fetus and newborn child.

Key words: cytomegalovirus infection, mothers, erythrocyte membrane phospholipids, phospholipase A2 , lipid peroxidation.

С позиции современной мембранологии патогенез многих заболеваний связан с изменением структуры и функций биомембран, в формировании которых важная роль принадлежит фосфолипидам (ФЛ) [1, 3]. ФЛ определяют гомеостаз клеточных мембран, и любые сдвиги в их морфофункциональном состоянии приводят к изменению проницаемости и текучести клеточных

структур, нарушению регенерации, развитию патологических процессов в различных системах человека [6].

Обмен ФЛ одно из звеньев сложной системы метаболических взаимоотношений между организмом матери и плода [9]. С дефицитом у плода ФЛ, составляющих основу сурфактанта, связывают развитие асфиксии и смерти новорожденных, гипоксических поражений

ЦНС у выживших детей. Указанные вещества опосредуют действие гормонов, биологически активных веществ и некоторых лекарственных препаратов на миометрий [2]. В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось выяснение некоторых патогенетических механизмов нарушения структуры мембраны эритроцитов у рожениц с цитомегаловирусной инфекцией (ЦМВИ) путем исследования фосфолипидного состава, интенсивности процессов перекисного окисления ли-пидов (ПОЛ) и содержания фосфолипазы А2

Материалы и методы

Фосфолипидный состав и активность процессов ПОЛ изучали в мембране эритроцитов 35 рожениц, перенесших в период гестации реактивацию ЦМВИ (титр антител IgG к цитомегаловирусу (ЦМВ) 1:1600), составивших основную группу. В группу контроля вошли 35 практически здоровых рожениц.

Клинический диагноз — обострение ЦМВИ — устанавливался при исследовании периферической крови на наличие IgM или 4-х кратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также ДНК ЦМВ. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами иммуноферментного анализа (ИФА). Выявление ДНК ЦМВ методами ПЦР с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

Изучение ФЛ осуществляли методом тонкослойной хроматографии [5]. Липиды экстрагировали по Фолчу [10]. Оценку активности реакций ПОЛ проводили по уровню ТБК-активных продуктов (ТБК-АП) [4]. Содержание фосфолипазы А2 в плазме периферической крови рожениц определяли методом ИФА с помощью реактивов фирмы «Cayman chemical» (США).

Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2008г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Минздрава России от 19.06.2003г. № 226.

Статистическая обработка и анализ данных осуществлялась с использованием стандартного пакета прикладных программ Statistica 6,1 Stat-Soft Jnc, США. Анализируемые в работе количественные данные имели нормальное распределение, поэтому рассчитывалась статистическая значимость различий величин по Стьюденту (вычисление средней арифметической (М), средней ошибки (m)). Для оценки тесноты связи признаков применяли корреляционный анализ с расчетом коэффициента корреляции Пирсона (r). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы p принимался равным 0,05.

Результаты и обсуждения

Как указывают результаты проведенных исследований, реактивация ЦМВИ у рожениц характеризовалась нарушением спектра мембранных ФЛ, приводящим к изменениям ФЛ-ФЛ соотношениям. Так, в основной группе женщин в ФЛ составе мембраны эритроцитов, относительно контрольных значений, наблюдалось снижение содержания фосфатидилхолина (ФХ) на 19%, (p<0,001) и увеличение фракции лизофосфатидилхоли-на (ЛФХ) на 84% (p<0,001), (табл. 1). При этом коэффициент соотношения ЛФХ/ФХ в мембране эритроцитов рожениц основной группы повышался более чем в 2 раза (p<0,001), что свидетельствует об интенсификации процессов расщепления мембранных ФЛ и массивном выбросе в кровь цитотоксических продуктов деградации этих соединений в кровь.

Таблица 1

Состав ФЛ, концентрация ТБК-АП в мембране эритроцитов и содержание фосфолипазы А2 в плазме крови рожениц с ЦМВИ (М±т)

Показатель Контрольная группа (n=35) Основная группа (n=35) P

ФА, % 2б,5б±0,1б 21,87±0,30 <0,001

ФХ, % 31,4б±0,42 25,45±0,19 <0,001

ЛФХ, % б,20±0,12 11,39±0,39 <0,001

СФМ, % 18,04±0,21 23,51±0,18 <0,001

ФИ, % 8,94±0,13 7,01±0,20 <0,001

ФС,% 8,71±0,20 10,80±0,41 <0,001

ТБК-АП, ммоль/л 11,20±0,12 18,32±0,18 <0,001

Фосфолипаза А2, нг/мл 0,50±0,07 0,82±0,0б <0,001

Примечание: р — значимость различий с контрольной группой.

Уменьшение ФХ в мембране эритроцитов свидетельствует об уменьшении его ресинтеза, что приводит к снижению антиокислительной роли ФХ в клеточной структуре и детергентному воздействию на клеточные мембраны продуктов ПОЛ [8].

Следует отметить, что концентрация фосфатидилэ-таноламина (ФЭА) в мембране эритроцитов рожениц основной группы снижалась на 18%, (р<0,001), а содержание фосфатидилсерина (ФС) повышалось на 24% (р<0,001), по сравнению с показателем контрольной группы (табл. 1). Одной из вероятных причин изменения количества ФЭА является усиления его гидролиза фосфолипазой А2.

У рожениц ос2новной группы содержание сфингоми-елина (СФМ) в мембране эритроцитов повышалась на 30%, (р<0,001), при одновременном снижении концентрации фосфатидилинозитола (ФИ), (р<0,001), по сравнению с показателями контрольной группы (табл. 1). В силу высокой насыщенности СФМ, в кластеры, которые образует данный ФЛ в мембране, встраивается большое количество холестерина, что влечет за собой уменьшение проницаемости клеточной мембраны, нарушение процессов активного транспорта, переноса веществ [7]. Выявленная модификация ФЛ матрикса характеризует наличие деструктивного процесса и свидетельствует о структурно-функциональной несостоятельности мембраны эритроцитов в условиях ЦМВИ.

Среди основных механизмов, деструктивно влияющих на целостность биологической мембраны клеток, выделяют процессы ПОЛ и активацию фосфолипа-зы А2. По нашим данным, уровень ТБК-АП в мембране эритроцитов рожениц и содержание фосфолипазы А2 основной группы повышались на 64% (р<0,001), по ср2авнению с показателем группы контроля (табл. 1). При анализе взаимосвязи соотношения концентрации ЛФХ с соотношением концентрации ТБК-АП и содержанием фосфолипазы А2 отмечалась прямая связь между данными показателя2ми, коэффициент корреляции г, соответственно, составил 0,75 и 0,78; р<0,01. Полученные данные еще раз доказывают, что в нарушении структуры мембраны эритроцитов у рожениц с ЦМВИ важную роль играет активация процессов ПОЛ и активность фосфолипазы А2.

Результаты исследования свидетельствуют о том, что в основе механизмов нарушения структуры мембраны эритроцитов у рожениц с ЦМВИ лежит активация процессов ПОЛ, которые приводят к повышенному образованию вторичных ТБК-АП, гидролизу ФХ и ФЭА, в результате высокой активности фосфолипазы А2 и образованию большого количества ЛФХ. Выявленные2 изменения в мембране эритроцитов рожениц в условиях цитомегаловирусной инфекции характеризуют наличие деструктивного процесса и свидетельствуют о структурно-функциональной несостоятельности цито-плазматической мембраны, что может быть причиной возникновения гипоксии в организме развивающегося плода и новорожденного ребенка.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.

Декларация о финансовых и иных взаимодействиях. Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.

Работа поступила в редакцию: 25.05.2015 г.

ЛИТЕРАТУРА

1. Абрамян К.Э., Окоев Г.Г., Казарян П.А., Саакян Л.С. О механизмах нарушения состояния биомембран у женщин пе-рименопаузального возраста с миомой матки // Медицинская наука Армении. — 2008. — Т. 48. № 1. — С. 79-84.

2. Ванько Л.В., Сафронова В.Г., Матвеева Н.К., Сухих Г.Т. Оксидативный стресс в генезе акушерских осложнений. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. — 264 с.

3. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Сороссовский образовательный журнал. — 2000. — Т. 6. № 12. — С. 13-19.

4. Гаврилов В.Г., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов ПОЛ в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой // Вопросы медицинской химии. — 1987. — №1. — С. 118-121.

5. Кирхер Ю. Тонкослойная хроматография — М.: Мир,1981. — С. 52-115.

6. Луценко М.Т., Андриевская И.А., Ишутина Н.А. Изменение микровязкости мембран эритроцитов пе-

риферической крови при герпес-вирусной инфекции // Информатика и системы управления. — 2010. — №2. — С. 98-100.

7. Титов В.Н. Атеросклероз как патология полиеновых жирных кислот. Биологические основы теории атерогенеза. — М.: Фонд «Клиника XXI века», 2002. — 495 с.

8. Токтоматова А.Н., Атыканов А.О. Фосфолипидная структура клеточных мембран при привычном невынашивании беременности у женщин // Вестник Кыргызско-Российского славянского университета. — 2013. — Т. 13. № 11. — С. 156-158.

9. Ширковец А.В., Ишпахтин Ю.И., Щербаковская Э.А., Свистельник М.Н. Особенности фосфолипидного и ферментного спектра у женщин при невынашивании // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. — 2012. — № 2 (84). — С. 71-74.

10. Folch J., Lees M., Sloane G.H. A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biology Chemistry. — 1957. — № 226. — P. 497-509.

REFERENCES

1. Abramyan K.E., Okoev G.G., Kazaryan P.A., Saakyan L.S. On the mechanisms of state violations of biomembranes in perimenopausal women with uterine myoma // Meditsinskaya nauka Apmenii. — 2008. — Vol. 48. №1. — P. 79-84. (in Russian)

2. Van'ko L.V., Safronova V.G., Matveeva N.K., Sukhikh G.T. Oxidative stress in the genesis of obstetric complications. — Moscow, 2011 — 264 p. (in Russian)

3. Vladimirov Yu.A. Free Radicals in Biological Systems // Sorosovskiy obrazovatel'nyy zhurnal. — 2000. — Vol. 6 (12). — P. 13-19. (in Russian)

4. Gavrilov V.G., Gavrilova A.R., Mazhul L.M. Analysis methods for the determination of lipid peroxidation products in the blood serum of the test with thiobarbituric acid // Voprosy medizinskoy khimii. — 1987. — № 1. — P. 118-121. (in Russian)

5. Kirkhner Yu. Thin-layer chromatography. — Moscow: Mir, 1981. — P. 52-115. (in Russian)

6. Lutsenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A. Change

microviscosity erythrocyte membrane peripheral blood herpes viral infections // Informatika i sistema upravleniya. — 2010. — № 2. — P. 98-100. (in Russian)

7. Titov V.N. Atherosclerosis as pathology of polyene fatty acids. Biological basis of the theory of atherogenesis. — Moscow, Foundation «Hospital of the XXI century», 2002. — 495 p. (in Russian).

8. Toktomatova A.N., Atykanov A.O. The phospholipid structure of cell membranes in the habitual miscarriage in women // Vestnik Kyrgyzsko-Rossiyskogo slavyanskogo universiteta. — 2013. — Vol. 13(11). — P. 156-158. (in Russian)

9. Shirkovets A.V., Ishpakhtin Yu.I., Scherbakovskaya Y.A., Svistelnik M.N. Features and phospholipid spectrum enzyme in women with miscarriage // Bulleten VSNC SO RAMN. — 2012. — № 2(84). — P. 71-74. (in Russian)

10. Folch J., Lees M., Sloane G.H. A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // Biology Chemistry. — 1957. — № 226. — P. 497-509.

Информация об авторах: Ишутина Наталия Александровна — ведущий научный сотрудник, д.б.н., 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22, ФГБНУ «ДНЦ ФПД», лаборатория механизмов этиопатогенеза и

восстановительных процессов дыхательной системы при неспецифических заболеваниях лёгких, тел./факс (4162) 772816,e-mail: [email protected]; Дорофиенко Николай Николаевич — старший научный

сотрудник, к.м.н., e-mail: [email protected]

Information About of Authors: Ishutina Nataliya A. — leading researcher, PhD, DSc, 675000, Blagoveshchensk, Kalinina str., 22, FGBNI "DNZ FPD", Laboratory etiopathogenesis mechanisms and recovery processes of the respiratory system, tel./fax: (4162) 772816, e-mail:[email protected];_Dorofienko Nikolai N. — Senior Researcher, PhD,

e-mail: [email protected]

ЭФФЕКТИВНОСТЬ КРАНИОПУНКТУРЫ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ОСТРЫХ НАРУШЕНИЙ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ ПО ИШЕМИЧЕСКОМУ ТИПУ В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ

Рашидов Антон Юлдашевич1, Оксана Юрьевна Киргизова2, Наталья Анатольевна Бедарева1 ('Больница скорой медицинской помощи, Ангарск, гл. врач — Б.Г. Басманов; 2Иркутская государственная медицинская академия последипломного образования, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра рефлексотерапии и косметологии, зав. — д.м.н. О.Ю. Киргизова)

Резюме. В статье представлен анализ историй болезней 1016 пациентов с острым нарушением мозгового кровообращения, показано, что наиболее распространенной формой заболевания является ишемический инсульт (78,6%). Проведена сравнительная оценка результатов медикаментозной терапии и комплексной медикаментозной терапии в сочетании с краниопунктурой. Было сформировано 2 группы больных (по 30 человек) в возрасте 51 год

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Ишутина Наталия Александровна, Дорофиенко Николай Николаевич

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Ишутина Наталия Александровна, Дорофиенко Николай Николаевич

SOME MECHANISMS OF VIOLATIONS OF STRUCTURE OF ERYTHROCYTE MEMBRANES IN OBSTETRIC PATIENTS WITH CYTOMEGALOVIRUS INFECTION

Текст научной работы на тему «Некоторые механизмы нарушений структуры мембраны эритроцитов у рожениц при цитомегаловирусной инфекции»