CC BY
4
органических веществ, в особенности белкового характера. Этот эффект проявляется в ослаблении действия дезинфектанта в присутствии указанных веществ. Естественно было предположить, что в на-• шем случае тоже имеет место защитное действие органических примесей. В справедливости такого предположения можно убедиться, познакомившись с данными табл. 1 и 3. Рассматривая их, можно видеть, что бактерицидное число импульсов изменяется почти так же, как окисляе-мость. Характер изменения этого показателя в пробах воды, искусственно обогащенных органическим субстратом — высушенной торфяной землей, хорошо согласуется с изменениями, наблюдающимися при обеззараживании проб натуральной воды. Следовательно, можно считать установленным, что увеличение затрат энергии, наблюдающееся при обеззараживании таких природных вод, как озерные и болотные, по сравнению с затратами на обеззараживание водопроводной воды, обусловлено присутствием в при-ф родных водах органических веществ.
При искровом пробое воды часть энергии, выделившейся в канале искры, превращается в тепло. В процентном отношении это небольшая доля, но в абсолютном выражении прирост температуры может быть существенным. По нашим наблюдениям, такой прирост температуры при затратах на обеззараживание 11—22 дж/мл достигает 2,6±0,24°, а при 44 дж/мл — 5,8±0,17°.
Высокий обеззараживающий эффект ИЭР, распространяющийся на природные воды с большим содержанием органических веществ, и чрезвычайно быстрое его наступление, повышение температуры воды в процессе обработки на 3—6° наряду с такими достоинствами этого метода, как отсутствие надобности в реагентах, простота конструкции, небольшая стоимость установки и работ по подключению ее к водопроводной сети — все это позволяет считать целесообразным проведение дальнейших комплекс-4 ных исследований гигиенистов и инженеров с целью разработки полупро-
изводственной установки и технологии обеззараживания питьевой воды ИЭР в отдаленных северных районах страны.
ЛИТЕРАТУРА. БагдасаровН. В. В кн.: Водоснабжение и канализация населенных мест в районах Восточной Сибири и Крайнего Севера. Л., 1966. — Ж у к Е. Г. Ж- микробиол., 1971, № 1, с. 99. — 3 е и г е р H. Н. Особенности устройства водопроводов в условиях вечной мерзлоты (опыт Норильска). М., 1963. — И з ъ ю р о-в а А. И., О в ч и н к и н И. П. Гиг. и сан., 1947, № 3, с. 1. — Ф р ю н г е л ь Ф. Импульсная техника. М. — Л., 1965. — Ю т к и и Л. А. Электрогидравлическнн эффект. М. — Л., 1955.
Поступила 16/Х 1972 г.
WATER DECONTAMINATION IN REMOTE NORTHERN REGIONS BY MEANS OF IMPULSE ELECTRIC CHARGES
E. G. Zhuk
Il The paper presents data on the expediency of performing complex investigations in order
to elaborate a semi-industrial installation for water decontamination in Siberia and the Extreme North by means of impulse electric charges. This new agent has a high and quick disinfecting action.
УДК 628.162.8:576.858.23.095.87
Канд. мед. наук Е. JI. Ловцевич
НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ПРОЦЕССА ИНАКТИВАЦИИ ЭНТЕРОВИРУСОВ
ХЛОРОМ
Институт обшей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Результаты вирусологических исследований воды при последовательной обработке ее на современных водопроводных станциях указывают на t полное отсутствие цитопатогенных кишечных вирусов в ней, если она
проходит все этапы очистки и двойное обеззараживание (Е. Л. Ловцевич и соавт.; Conlon и Netter). Наряду с этим некоторым исследователям в нашей стране и за рубежом иногда удавалось выделить кишечные вирусы из воды водопроводной сети крупных городов (А. М. Ошерович и Г. С. Часов-ннкова; Coin и соавт., 1965).
В связи с этим возникла необходимость в более детальном изучении и оценке процесса инактивации энтеровирусов хлором при тех режимах, которые распространены в водопроводной практике.
Исследования проводили со свежеавтоклавированной водопроводной водой. Моделью энтеровирусов служили: аттенуированный вакцинный (LS с2ав) и вирулентный (Mahoney) штаммы вируса полиомиелита типа I, а также бактериофаг Tj кишечной палочки. Биологическую активность вируса полиомиелита определяли путем подсчета бляшек (БОЕ), образовавшихся на монослое клеток почек обезьян (в 100 мл флаконах), зараженном исследуемым материалом. Количественный анализ фага (в бляшках) проводили методом агаровых слоев. РНК из вируса выделена феноль-ным методом в холодовой камере (Alexander и соавт.) на базе лаборатории физиологии вирусов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов. Биологическую активность РНК, находящуюся в буферном растворе (0,25 М NaCl на 0,05 М Tris, pH 7,2—7,4), устанавливали количественным путем в БОЕ. Рибонуклеазой в концентрации 0,5 мкг/мл или Ю-4 мг/л в 0,02 М фосфатном буфере нейтрализовали РНК вируса полиомиелита в соотношении 1 : 5 в течение 30 мин. при 24°. Реакцию останавливали добавлением равного количества 2 М MgS04, pH 7,2 (Holland и соавт.). Пробы воды объемом 50 мл обрабатывали ультразвуком в открытых стаканчиках в ультразвуковом дезинтеграторе фирмы MSE. Воду хлорировали хлорной водой (растворенным в воде газообразным хлором). Действие хлора прекращали путем добавления гипосульфита натрия. Общее количество остаточного хлора в воде анализировали йодометрическим способом, а свободную форму остаточного хлора — по методу С. В, Ягового.
В связи с практической направленностью настоящей работы представлялось целесообразным провести опыты по реактивации вирусов в воде лишь в условиях, которые могут встретиться на водопроводной станции или в разводящей сети. Исходя из этих соображений, мы подвергали пробы воды, содержащие вирус, обеззараживанию хлором в различной степени, а затем хранили в темноте 48 часов, т. е. в течение срока, равного средней продолжительности нахождения воды в резервуарах и разводящей сети.
Опыт ставили следующим образом. В автоклавированную водопроводную воду, содержащую аттенуированный штамм (LS с2ав) вируса полиомиелита, вводили хлорную воду и ставили в темное место на 40 мин. В течение этого срока отбирали пробы (А, Б, В и Г последовательно через 5, 10, 30 и 40 мин.) и нейтрализовали их гипосульфитом натрия. По 2 мл из каждой пробы сразу замораживали и хранили (при —17°) до проведения вирусологического исследования, а остальной объем (98 мл в закрытой посуде) ставили в темное место при 16—18°, последовательно отбирали из него пробы (через 2, 4, 24 и 48 часов) и замораживали их. Содержание вируса в пробах, взятых после разных сроков контакта их с хлором, а также отобранных через дополнительные сроки хранения в темноте, практически не изменилось. Не отмечено никакой тенденции к увеличению количества вируса в воде, хранившейся в темноте 48 часов. В пробе Г, не содержащей активного вируса через 40 мин. контакта с хлором, при повторных исследованиях, поставленных через 2, 4, 24 и 48 часов хранения, также не обнаружено вируса. При постановке такого опыта с фагом Esch. Coli Tj получены аналогичные результаты. Они указывают на отсутствие реактивации у вируса, подвергшегося действию хлора в воде.
В развитие опыта были изучены сроки выживания аттенуированного вируса полиомиелита типа I в водопроводной воде при содержании в ней
остаточного хлора в пределах 0,5 мг/г. Целью исследования было установить влияние остаточного содержания хлора в воде водопроводной сети на активность вирусной флоры, внесенной в нее в результате вторичного загрязнения. Опыты ставили в зимне-весенний период непосредственно с водой, забранной из водопроводной сети, которую искусственно заражали вирусом: рН воды составляла 7,2—7,4 и 8,2. Остаточный хлор в водопроводной воде был в связанной форме на уровнях 0,3—0,5 мг/л. Содержание следов свободного хлора в водопроводной воде установлено путем дополнительного введения в нее хлорной воды. Пробы на вирусологическое исследование отбирали через 3, 24 и 48 часов. На длительность выживаемости вируса влияли исходное содержание его в воде, рН воды и уровень остаточного хлора. Чем выше были исходное содержание вируса в воде и ее рН, а также чем ниже было содержание остаточного хлора, тем дольше был срок выживания в ней вируса (более 48 часов). Через 3 часа вирус не выделяли из воды лишь в тех случаях, когда исходное содержание вируса было низким (5—10 БОЕ), а остаточного хлора было не менее 0,5 мг/л. При относительно высоком содержании вируса (50—100 БОЕ) вода полностью обеззараживалась за 3 часа контакта лишь при содержании общего хлора, равного 0,5 мг/л и свободного остаточного хлора, равном 0,1—0,2 мг/л. Следовательно, количество остаточного хлора (хлора-минов), который чащо всего встречается в воде водопроводной сети, не может гарантировать полной и достаточно быстрой инактивации вирусов, попавших в нее вследствие вторичного загрязнения.
При обеззараживании воды хлором инактивация вирусов не находится в экспоненциальной зависимости от срока его действия. Кривые инактивации нескольких видов и штаммов энтеровирусов как свободным, так и связанным хлором в пробах воды с разными уровнями рН и температуры не носят прямолинейного характера, а имеют изогнутую форму с пологим «хвостом» за счет более медленной инактивации на втором этапе процесса (Kelley и Sanderson; Weidenkopf). При этом небольшая часть (0,5—1 %) вирусной популяции инактивируется очень медленно. Однако, судя по 1 длительности выживания, именно устойчивость этого небольшого количества вирусных частиц определяет устойчивость того или иного штамма.
Выяснение природы этой более устойчивой части вирусной популяции явилось целью наших последующих исследований. В первую очередь была сделана попытка установить, не состоит ли изучаемая часть вирусной популяции из гетерогенных вирусных частиц, принадлежащих к самостоятельным штаммам, которые генетически отличаются от основного штамма более высокой устойчивостью. Для этого проведено сравнительное изучение динамики инактивации хлором аттенуированного штамма (LS с2ав) вируса полиомиелита типа I и 4 штаммов, выделенных из бляшек, полученных от вирусных частиц, оказавшихся более устойчивыми к действию хлора. Новые штаммы выделены из бляшек вирусных частиц, сохранивших активность через разные сроки экспозиции к действию хлора: штамм I выделен через 10 мин.; II — через 20 мин.; III —через 30 мин. и IV — через 40 мин. В результате 3 пассажей получены штаммы с достаточно высоким титром, с которыми и были поставлены опыты по обеззараживанию воды хлором. При этом форма кривых инактивации вновь выделенных штаммов ничем существенно не отличалась от формы кривой инактивации основного штамма. Следовательно, более устойчивая часть вирусной популяции не состоит из частиц, генетически гетерогенных от основного штамма. Исключается возможность селекции более хлорустой-чивых штаммов энтеровирусов в случае недостаточно полного обеззараживания воды хлором.
В свое время рядом авторов (Dimmock; Norman, и др.) было установлено, что отношение РНК вирусов к инактивирующему действию УФ-лу-чей, термической обработки и других факторов резко отличается от отношения цельных вирусов. Мы провели сравнительное изучение динамики
инактивации хлором как цельного вируса, так и РНК аттенуированного и вирулентного штаммов вируса полиомиелита типа I.
Аттенуированный штамм вируса полиомиелита оказался устойчивее к действию хлора, чем вирулентный. Однако, судя по срокам выживаемости, РНК аттенуированного и вирулентного штаммов ничем не отличались друг от друга по отношению к действию хлора. Сравнивать устойчивость к хлору цельных вирусов и их РНК было нельзя, так как исходное содержание в воде последних было на 2 порядка ниже содержания вирусов. Тем не менее можно предположить, что инактивация РНК исследованных штаммов и инактивация цельных вирусов на первой стадии (первые 2х/о мин.) проходила с единой скоростью. Судя по литературным данным и результатам настоящих исследований, устойчивость вируса к хлору можно скорее всего связать с какими-то специфическими свойствами белковой оболочки. Учитывая возможность разрушающего действия хлора в первую очередь на белковую оболочку вируса, мы предположили, что пологий «хвост» кривой инактивации аттенуированного штамма вируса полиамиелита может быть обусловлен вирусом, частично лишенным белковой оболочки, т. е. РНК. Для уточнения этого часть вирусной популяции, сохранившей свою активность через 10 мин. контакта с хлором, была подвергнута действию рибонуклеазы. При этом никакого снижения цитопатической активности (в БОЕ) не наступило. Отсюда можно заключить, что часть вирусной популяции, сохранившая свою активность, состоит из цельных вирусных частиц, а не из РНК.
В последние годы некоторые исследователи (Berg и соавт.; Clark и Niehaus) склонны считать, что более резистентная часть вирусной популяции состоит из конгломератов вирусных частиц, чем и объясняется их большая устойчивость к действию физических и химических факторов. Нахождение вирусов в виде конгломератов нескольких частиц было доказано путем составления математических моделей процесса инактивации вирусов, а также объективными данными исследований вирусных популяций под электронным микроскопом.
Нам представлялось интересным попытаться рассеять конгломераты вирусных частиц при помощи ультразвуковых волн. На ультразвуковом дезинтеграторе мы обработали вирус полиомиелита I типа, находящийся в культуральной жидкости, в разведении в воде, а также подвергнутый действию хлора в течение 10 мин. Полученные результаты указывают на возможность существования вируса полиомиелита в конгломератах, в особенности при его содержании в жидкости с органическими соединениями.
Выводы
1. Вирус полиомиелита, инактивнрованный в процессе хлорирования воды, не реактивируется.
2. Количество остаточного хлора (sg0,5 мг/л), находящееся в воде водопроводной сети, не может обеспечить инактивации вируса, попавшего в сеть вследствие вторичного загрязнения.
3. Процесс инактивации вируса хлором не находится в экспоненциальной зависимости от срока действия хлора. Более хлорустойчивая часть (0,5—1 %) вирусной популяции не является генетически гетерогенной от основной части, не состоит из активной РНК, а, вероятнее всего, представляет собой конгломераты вирусных частиц.
ЛИТЕРАТУРА. ЛовцевичЕ. Л., РябченкоВ. А., Мельникова А. И. и др. В кн.: Гигиена воды и санитарной охраны водоемов. М., 1972, с. 19. — О ш е р о в и ч А. М., ЧасовниковаГ. С. В кг.: Энтеровирусные инфекции. М., 1970, т. 14, с. 119. — Я г о в о й П. Н. Гиг. и сан., 1958, № 11, с. 80. — Alexander Н. Е., К о с h G., Mountain I. М. et al. Virology, 1958, v. 5, p. 172. —JB e r g G., С 1 а г k R. M., В e г m a n D. et al. В кн.: Transmission of Viruses by the Water Route. New York, 1967, p. 235. -Clark R. M., NiehausJ.F.
Ibid., p. 241. — Coin L., M e n e t i e г M. L., L a b о n d e J. et al. В кн.: Advances in Water Pollution Research. Tokyo, 1965, v. 1, p. 1. —Co u 1 о n G., Netter R., Bull. Inst. nat. Sante, 1967, v. 22, p. 941. - Dimmock N. J., Virology, 1967, v. 31, p. 338. — H о 1 1 a n d J. J., Ноуег В. H., McLaren L. C. et al. J. exp. « Med., 1960, v. 112, p. 821. — Ke 1 1 у S., Sanderson W., Am. J. publ. Hlth,
1958, v. 48, p. 1323. —Norman A., Virology, 1960, v. 10, p. 384. — W e i d e n -ко p f S. J. Ibid., 1958, v. 5, p. 56.
Поступила 10/IV ;I973 r.
CERTAIN ASPECTS OF THE PROCESS OF ENTEROVIRUS INACTIVATION WITH
CHLORINE
E. L. Lovtsevich
An experimental study of the inactivation of poliomyelitis virus in the course of a water chlorination process showed, that chlorine inactivated virus can not be reactivated; the amount of residual chlorine present in water of water-pipes can not provide virus inactivation introduced into water as a result of secondary contamination; the process of virus inactivation « with chlorine is not in exponential dependence on the time of chlorine action; the part of virus
~ population (0.5-1%), that is more resistant to chlorine, is not genetically heterogenic from the
main part of virus population, it does not consist of biologically active RNA and, most probably, is formed by aggregations of virus particles.
УДК 613.632.4:547.655.11:613.1S5.3
JI. В. Пятницкая, В. А. Володченко, H. M. Василенко, В. В. Манфа-новский, Ю. В. Прилипский
МАТЕРИАЛЫ К ОБОСНОВАНИЮ ПРЕДЕЛ ЬНО ДОПУСТИМОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕТА-НАФТОЛА В ВОЗДУХЕ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ ПОМЕЩЕНИЙ
Научно-исследовательский институт гигиены труда и профзаболеваний, Харьков
Бета-нафтол (БН) относится к числу углеводородов нафталинового % ряда и используется в анилино-красочной промышленности для синтеза
азокрасителей, в текстильной для холодного крашения тканей, как полупродукт в производстве неозона Д, в сельском хозяйстве в качестве фунгицидов.
Получают БН по единому принципу путем сульфирования нафталина. При этом большинство технологических операций сопровождается поступлением БН в зону дыхания работающих, которые предъявляют ряд однотипных жалоб, зависящих от стажа работы в производстве. В основном это жалобы на частое болезненное мочеиспускание, головную боль, повышенную утомляемость, раздражительность, потливость, частые колющие боли в области сердца, диспепсические явления, сухость в носу, периодические носовые кровотечения, снижение обоняния, боли и першение в горле, осиплость голоса, зуд и покраснение открытых участков кожи при попадании на нее БН.
При объективном обследовании рабочих на первый план выступает ^ поражение органов мочевыделения в виде хронического цистита и дизурии.
У многих обследованных отмечаются хронические гастриты и гепатиты, нарушения функционального состояния нервной системы, чаще по типу нейроциркуляторной дистонии с сосудистыми асимметриями. Частые заболевания слизистой оболочки верхних дыхательных путей, преимущественно в виде ее субатрофических и атрофических изменений, позволяют полагать, что БН обладает раздражающими свойствами. Об этом свидетельствуют и случаи профессиональных дерматитов.
Все изложенное выше обосновало необходимость регламентации содержания БН в воздухе рабочей зоны.
В соответствии с параметрами острой токсичности БН может быть отнесен к малсггоксичным химическим соединениям (С. Д. Заугольников и соавт.), практически неопасным при однократном воздействии (И. П. Уланова). Так, в эксперименте на крысах не удалось воспроизвести гибели ^ 50% животных при ингаляционном воздействии и установить CL50, хотя
