Научно-практическая конференция по медицинской микологии (XIII Кашкинские чтения)
ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ*
- 62,3±8,3 пг/мл у больных при челюстно-лицевом актиномикозе превышало показатели контрольной группы - 41,9±9,0 пг/мл, р<0,05,
Вывод. Результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что состояние иммунной системы у больных с челюстно-лицевым актиномико-зом нуждается в соответствующей коррекции.
состояние иммунном реактивности организма при челюстно-лицевом актиномикозе Агаева Н.А.
Кафедра микробиологии и иммунологии Азербайджанского Медицинского Университета, Баку, Азербайджан
the immune reactivity of patients with the face-jaw actinomycosis Agayeva N.A.
Azerbaijan Medical University, Department of Microbiology and Immunology, Baku, Azerbaijan
Цель настоящей работы - изучение состояния иммунной реактивности организма при челюстно-лицевом актиномикозе.
Объекты и методы. Обследовано 14 больных в возрасте от 27 до 60 лет, проходивших клинико-лабораторное обследование и лечение в профильных медицинских учреждениях города Баку. Контрольную группу составили 40 практически здоровых лиц. Проводили микроскопические, бактериологические и иммунологические анализы патологических материалов.
Результаты. При оценке параметров клеточного звена иммунитета у больных было установлено снижение среднего количества зрелых Т-лимфоцитов CD3 клеток - 34,21%±6,5 (65,5%±15,9 - в контрольной группе, р<0,05), CD4 клеток - 27,0%±4,5 (38,5%±13,4 - в контрольной группе, р<0,05), CD8 клеток - 12,7%±4,0 (29,5%+12,5 - в контрольной группе, р<0,05), а также уровень В-лимфоцитов CD22 клеток - 3,0%±1,0 (12,8%±14, - в контрольной группе, р<0,05).
При анализе средних уровней иммуноглобулинов в сыворотке крови наблюдали снижение уровней IgA (0,68±0,07 мг/мл), IgG (3,57±0,08 мг/мл), а также отсутствие существенных различий в содержание IgM (0,95±0,01 мг/мл) по сравнению с нормой (IgA - 2,36±0,04 мг/мл; IgM - 1,76±0,05 мг/мл; IgG - 14,0±0,22 мг/мл, р<0,05). При исследовании содержания slgA в слюне (353±7,3 мг/мл) выявили, что, по сравнению с нормой, концентрация (151,05±19,5 мг/ мл, р<0,05) была снижена. Ключевыми факторами, влияющими на развитие воспалительного процесса, являются цитокины. Содержание провоспали-тельных цитокинов - TNFa - 58,7±7,3 пг/мл и ILlb
* За содержание тезисов ответственность несут авторы.
микробиота у больных с хроническими воспалительными заболеваниями пародонта Агаева Н.А.,АзизовР.Ф.
Кафедра микробиологии и иммунологии Азербайджанского Медицинского Университета, Баку, Азербайджан
microbiota in patients with chronic inflammatory diseases of parodontium Agayeva N.A., Azizov R.F.
Azerbaijan Medical University, Department of Microbiology and Immunology, Baku, Azerbaijan
Известно, что в развитии хронических воспалительных заболеваний пародонта (ХВЗП) важная роль принадлежит микробным агентам - возбудителям инфекции.
Цель работы - изучение количественного состава аэробной и анаэробной микробиоты, включая грибы рода Candida, у больных ХВЗП.
Объекты и методы. Обследовано 135 человек в возрасте от 36 до 65 лет, из которых 85 - больные ХВЗП с длительностью течения от 3 до 20 лет, 40
- пациенты со здоровым пародонтом (контроль). Материалом для микробиологического и микологического исследования служили мазки из патологических очагов, смывная жидкость ротовой полости, содержимое зубо-десновой бороздки и пародонталь-ных карманов.
Результаты. У всех больных ХВЗП отмечали возрастание численности микроорганизмов в смывной жидкости ротовой полости по сравнению с результатами, полученными от лиц контрольной группы
- 8,1±0,74106 КОЕ/мл против 2,0±0,22-104 КОЕ/мл в контроле. При этом численность анаэробной §Actinomyces spp., Fusobacterium, Bacteroides и др.) микробиоты в ротовой полости у лиц контрольной группы составляла 2,5±0,24106 КОЕ/мл, у больных ХВЗП
- 4,4±0,42 106 КОЕ/мл. Микробная обсемененность пародонтальных карманов также существенно возрастала с увеличением тяжести поражения, причем преимущественно за счет анаэробов: соотношение количества анаэробной к аэробной биоте (S. aureus, S. intermedis, S. pyogenes и др.) составляло 100-1000. Candida spp. в материале, полученном из пародон-
тальных карманов больных ХВЗП, обнаруживали, в среднем, в 14,7-31,2% случаев (4,5±1,93404 КОЕ/мл), в зависимости от тяжести заболевания.
У многих больных с пародонтитом имели место ассоциации пародонтопатогенных бактерий с Candida spp. У больных ХВЗП часто обнаруживали штаммы микроорганизмов - бактерий и грибов, устойчивые и умеренно чувствительные к антибактериальным и антифунгальным препаратам.
эндоскопическая диагностика кандидоза верхних отделов желудочно-кишечного тракта у больных пожилого и старческого возраста
Албегова Д.М., Шевяков М.А., Сайденова М.С., Иншаков Л.Н.
Больница №46 Святой Евгении, СП6МАП0, Санкт-Петербург, Россия
endoscopic diagnosis of candidosis of the upper gastrointestinal tract in patients of elderly and senile age
Albegova D.M., Shevyakov M.A., Saidenova M.S., inshakov L.N.
St. Eugene Hospital № 46, MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Цель исследования - определить частоту и особенности кандидоза слизистых оболочек верхних отделов желудочно-кишечного тракта у больных пожилого и старческого возраста.
Материал и методы. В течение двух лет (20082009 гг.) было выполнено 2045 фиброэзофагогастро-дуоденоскопий у 462 больных в возрасте от 60 до 92 лет. Также у всех пациентов была сделана щеточная или щипцовая биопсия из патологически измененной слизистой оболочки пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки в связи с подозрением на заболевание слизистой оболочки - злокачественную опухоль, язву, эрозии, полипоз и кандидоз. Диагноз кандидоза был установлен при наличии эндоскопических признаков в сочетании с обнаружением в препарате слизистой оболочки нитевидной формы грибов рода С,andida - псевдомицелия.
Результаты. При цитоморфологическом исследовании биоптатов слизистой оболочки псевдомицелий Candida был обнаружен у 25 больных из 462 (5,4%): в пищеводе - у 18, в желудке - у 5 (1%)? в двенадцатиперстной кишке - у 2 (0,4%). Кандидоз пищевода эндоскопически проявлялся гиперемией и кровоточивостью слизистой оболочки, фибринозными налетами и эрозиями. Факторами риска являлись: сахарный диабет, лечение кортикостероидными средствами, злокачественное новообразование пи-
щевода, активная фаза вирусного гепатита, панкреатит. У одного больного кандидоз пищевода осложнился язвой пищевода, у четверых - стриктурой. Кандидоз желудка обнаружили при исследовании биоптатов из краев язв, эрозий, полипов и злокачественной опухоли желудка, а в двенадцатиперстной кишке - из краев язв. Макроскопическими признаками кандидоза при обнаружении являлись большие размеры язвенного дефекта, наличие фибринозного налета и сопутствующего атрофического гастрита.
Выводы. При эндоскопическом исследовании кандидоз выявляют у 5,4% пациентов пожилого и старческого возраста, что подтверждает необходимость обязательного микологического обследования биоматериалов слизистых оболочек у данной категории больных.
микромицеты - источники аллергенов в жилых помещениях различных регионов
Антропова А.Б.1, Биланенко E.H.2, Мокеева В.Л.2, Чекунова Л.Н.2, Желтикова Т.М.1
'НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова РАМН, Москва, Россия, 2МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, Россия
micromycetes as the source of indoor allergens in different regions
Antropova A.B.1, Bylanenko E.N.2, Mokeeva V.L.2, Chekunova L.N.2, Zheltikova T.M.1
'Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera RAMS, Moscow, Russia, 2Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia
Присутствие микромицетов в непосредственном окружении человека и его регулярный контакт с этими организмами и их метаболитами может провоцировать развитие различных заболеваний: инфекционных и/или аллергических (Ross et al., 2000; Savilahti et al., 2001; Osborne et al., 2006 и др.). Структура экспозиции микогенных аллергенов определяется структурой микобиоты. Различными авторами, а также в наших работах показана взаимосвязь между количественным и качественным составом грибов в окружающей человека среде и сенсибилизацией к микогенным аллергенам.
Цель настоящей работы - изучение структуры микобиоты жилых помещений разных климатогео-графических регионов.
Объекты и методы. Обследовано более 400 жилых помещений как в городах России - Москве, Пензе, Иркутске, так и в зарубежье - Софии (Болгария). Пробы воздуха собирали методом седиментации и с помощью одноступенчатого пробоотборного устройства ПУ-1Б. Пробы домашней пыли собирали
с помощью бытовых пылесосов. Для выделения и идентификации микромицетов использовали среду Чапека и ксерофильную среду.
Результаты. В воздухе и домашней пыли выявлено 173 видов микромицетов из 45 родов. Ядро мико-биоты жилых помещений во всех обследованных городах формируют представители родов Aspergillus, Pénicillium, Cladosporium, встречаемость которых может достигать 95, 98 и 45%. соответственно, а удельное обилие может превышать 90% суммарного обилия всех микромицетов. Уровень численности микромицетов варьирует: в воздухе - от единичных пропагул до 8,5-103 КОЕ/м3 воздуха, в пыли - от 1,7103 до 8,5 106 КОЕ/г пыли. Микобиота жилых помещений в различных регионах представляет собой ксеротолерантное сообщество, что проявляется в большом видовом разнообразии (более 100 видов) и значительной доле (более 80% всех выявленных видов) ксеротолерантных и ксерофильных видов. Специфические черты заключаются во встречаемости и численности конкретных таксонов.
Вывод. Для микобиоты жилых помещений различных регионов характерны как общие, так и специфические черты структурной организации. Проведение микологического анализа в жилых помещениях позволит осуществлять дифференциальную диагностику микогенной сенсибилизации.
генетическая детерминация киалерной активности у MALASSEZIA spp.
Арзуманян В.ГЛОжован НМЛ Наумова Е.С.2, Наумов Г.И.2
Учреждение РАМН НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова, Москва; 2ГосНИИ генетики и селекции промышленных микроорганизмов, Москва, Россия
genetic determination of killer
activity in MALASSEZIA spp
Arzumanian V.G.', Ojovan 1.МЛ Naumova E.S.', Naumov G.I.2
'Mechnikov Research Institute for Vaccines and Sera RAMS, Moscow; 2State Institute for Genetics and Selection of Industrial Microogranisms, Moscow, Russia
Способность к образованию киллерных токсинов (микоцинов) широко распространена среди разных родов дрожжей; недавно стало известно об этом феномене у Malassezia spp. (Арзуманян В.Г. с соавт., 2003, 2009). У одних родов дрожжей киллерная активность связана с наличием плазмид, а у других -детерминирована хромосомными генами. Известно два типа киллерных плазмид, представленных дву-нитевыми ДНК или двунитевыми РНК. Так, у многих сахаромицетов генетические детерминанты кил-лерной активности локализованы в днРНК (Wickner R.B., 1996; Наумов Г.И., 2007); у Cryptococcus, Candida и Torulopsis - в хромосоме (Walker G.M„ 1995); у
Pichia spp. - в днДНК (Hayman G.T., 1991; Paluszynski J.P, 2007).
Цель настоящей работы - определение генетической детерминации микоцинообразования у Malassezia spp.
Объекты, методы и результаты. Объектами исследования служили 8 штаммов дрожжей М. sym-podialis, по одному штамму М. furfur и М. globosa из коллекции НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова. Для определения активности использовали количественный метод (Арзуманян В.Г. с соавт., 2005). Штаммы дрожжей засевали газоном (106 КОЕ) в чашки Петри (диаметр 4 см), содержащие модифицированный агар Диксона, и культивировали в течение 7 суток при 32 °С. Затем тонким металлическим шпателем агар переворачивали, и на обратную поверхность засевали свежую исследуемую культуру в дозе 50-150 КОЕ на чашку. В качестве контроля использовали чистый агар без первичного засева. Каждую культуру проверяли на активность против всех остальных культур. Установили, что все штаммы, кроме М. globosa, в той или иной степени обладали киллерной активностью. Отметим, что токсин штамма М. furfur действовал на максимальное количество исследованных штаммов.
Для выделения ДНК и днРНК использовали Зх-суточные культуры Malassezia, выращенные на модифицированном агаре Диксона при 32 °С. Изоляцию интактной ДНК дрожжей Malassezia проводили стандартным методом (Johnston J.R., 1986; Boekhout Т. et al, 1993). Присутствие хромосомной и плазмид-ной ДНК выявляли с помощью пульс-электрофореза в агарозном геле (Oakley-Gutowski et al., 1992). Плаз-мидную днРНК выделяли по методу (Fride Н. М., Fink G. R., 1978) в модификации (Наумов Г. И. соавт., 2005). Наблюдали отсутствие плазмидной днРНК у всех изученных штаммов дрожжей. В то же время обнаружили наличие ДНК плазмид у неактивного штамма М. globosa и наименее активного штамма М. sympodialis.
Вывод. На основании полученных данных заключаем, что киллерная активность у изученных штаммов Malassezia spp., очевидно, детерминирована хромосомными генами.
антагонистическая активность PSEUDOMONAS A UREO F A CIENS к плесневым грибам
Баранова Е.В., Полякова A.B.
Южный Федеральный университет, Ростов-на-Дону, Россия
antagonistic activity of PSEUDOMONAS AUREOFA CIENS to mould
Вага nova E.V., Polyakova A.V.
Southern Federal University, Rostov-on-Don, Russia
Цель исследования - изучение антагонистической активности Pseudomonas aureofaciens, выделенного из промышленной зоны города Ростова-на-Дону, к плесневым грибам.
Материалы и методы. Антагонистическую активность бактерий Я aureofaciens по отношению к плесневым грибам изучали в трехкратной повтор-ности на среде Чапека методом агаровых блоков. В качестве тест-объектов для определения спектра антагонистического действия псевдомонад служили следующие плесневые грибы: Aspergillus niger, Aspergillus amylovora, Pénicillium sp. (1), Pénicillium sp. (2), взятые из музея живых культур лаборатории микробиологии ЮФУ, и Cladosporium sp., выделенный с пораженных стеблей огурцов. Культуру P. aureofaciens выращивали в течение двух, трёх и пяти суток на таких агаризованных средах, как среда №1 для промышленного получения грамицидина, среда №2 для промышленного получения бацитрацина и на LB-агаре. Далее исследуемую культуру помещали в составе блока на среду Чапека, засеянную сплошным газоном суспензией спор плесневых грибов. Зоны подавления роста гриба от посевного блока до роста мицелия измеряли в миллиметрах через 5 суток инкубации при 28 °С.
Результаты. По данным, полученным при снятии спектра антагонистической активности, выявили, что фунгицидная активность штамма P. aureofaciens в отношении почти всех исследуемых тест-грибов выше при выращивании его на среде №2. В данном случае зона отсутствия роста составила 15 мм. Из этого можно сделать вывод, что среда №2 является наиболее оптимальной для продукции вещества с фунгицидной активностью. Выявили, что Cladosporium sp. среди исследованных плесневых грибов для культуры-антагониста является наиболее чувствительным тест-объектом. Заметим, что Cladosporium sp. является фитопатогенным видом. Максимальное накопление антибиотических веществ для исследуемого штамма происходит к 48-72 часам культивиро-
вания, при этом наибольшие зоны задержки роста тест-культур составляли 10-15 мм.
Вывод. Штамм Р. аигео(ас1ет обладает явно выраженной антагонистической активностью к плесневым грибам и является перспективным для дальнейшего изучения с точки зрения применения его в качестве фунгицидного средства.
случай распространенного отрубевидного лишая у больного ко h гл о б at h ы m и акне и жирной густой себореей Батпенова Г.Р.Даркина Т.В., Котлярова Т.В. АО «Медицинский университет Астана», г. Астана, Республика Казахстан
the case of prevalence of pityriasis versicolor in patient with the acne conglobata and oily concrete seborrhea Batpenova G.R.,Tarkina T.V., Kotlyarova T.V. Joint-stock company «Médical University of Astana», Astana, Kazakhstan
Отрубевидный лишай - кератомикоз, вызываемый липофильным дрожжевым грибом Malassezia furfur, относящимся к резидентной кожной биоте. Заболевание закономерно может сочетаться с дерматозами, сопровождающимися гиперфункцией сальных желез и повреждением целостности эпидермиса.
Цель - описание клинического случая распространенного отрубевидного лишая у больного кон-глобатной формой акне и жирной густой себореей.
Объекты и методы. Больной А., 19 лет, болен в течение 2 лет, процесс локализован на лице, груди и большей части спины. Эффект от проводимой общей и местной терапии - временный. В последние несколько месяцев на боковых и нижних участках спины, на ягодицах появились новые нетипичные высыпания. Объективно: процесс хронический, распространенный, локализован на коже лица, шеи, груди, всей поверхности спины, на ягодицах, помимо типичных признаков жирной густой себореи, представлен единичными островоспалительными узлами. Основная масса высыпных элементов - в виде штампованных округлых рубцов и рубчиков в виде «осколков льда» разной давности, шелушения, на спине сдвоенные комедоны. В верхней части спины и на плечах элементы постакне располагаются очень густо, поэтому обильные округлые розово-бежевые пятна, склонные к слиянию с мало заметным шелушением, хорошо видны на боковой и нижней поверхности спины и на ягодицах. Йодная проба Бальцера положительна. Микроскопически обнаружили мицелий гриба. Больному назначили общее и местное противогрибковое лечение.
Вывод. Таким образом, фоновая жирная густая себорея и длительно существующий деструктивный процесс конглобатной формы акне могут выступать в качестве факторов, способствующих развитию от-рубевидного лишая и его распространению на большую площадь и в нетипичные места.
низкоинтенсивная лазерная терапия в лечении онихомикозов Бахметьев А.А.
ГОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко>>, Воронеж, Россия
low level l aser therapy in the treatment of onychomycoses Bakhmetiev A.A.
GOU VPO «Voronezh State Medical Academy them. NN Burdenko», Voronezh, Russia
Онихомикозы являются частым заболеванием в дерматологии. Существующие методы лечения они-хомикозов включают использование противогрибковых средств. Однако такое лечение не всегда дает полную клиническую и микологическую ремиссию. Недостаточная эффективность лекарственной терапии актуализирует поиск новых методов лечения онихомикозов. Одним из перспективных направлений в медицине является применение низкоинтенсивного лазерного излучения.
Цель исследования - оценить эффективность применения низкоинтенсивного лазерного излучения в комплексном лечении больных онихомикозами.
Объекты и методы. При комплексном лечении больных онихомикозами использовали лазерное облучение пораженных ногтевых пластин расфокусированным лучом (накожное облучение). Задача лазеротерапии: улучшить микроциркуляцию и трофику ткани, оказать противогрибковое действие. Лазерное облучение проводили полупроводниковым лазерным терапевтическим аппаратом «Мустанг» с длиной волны 0,87 мкм, излучающая головка - ЛО-4. Применяли дистантную (зазор между излучателем и ногтевой пластиной 0,5-1 см.) или контактную (через 1-2 слоя бинта) методики. Облучение проводили по полям в зависимости от количества ногтевых пластинок. Мощность лазерного излучения - 7 Вт, частота излучений - 80 Гц. Время воздействия на одну ногтевую пластину - 2 минуты. В сеанс воздействовали на 2-10 ногтевых пластин. Курс лечения состоял из 10 процедур при продолжительности сеанса 10 минут.
Под наблюдением находилось 19 больных онихомикозами (10 мужчин и 9 женщин) в возрасте от 29 до 58 лет с давностью заболевания от 2 месяцев до
3 лет. Клинический диагноз подтверждали лабораторными методами (микроскопией патологического материала, посевом на питательную среду). Дисталь-ный тип поражения наблюдали у 12 больных, тотальный - у 7. Гипертрофический вариант онихомикоза диагностировали у 16 больных, атрофический - у 3. Всем пациентам назначали местную терапию: мазь ногтевин, набор для ногтей микоспор, крем фунго-тербин, лак батрафен. 12 больных получали системное лечение (итразол).
Результаты. Эффективность терапии оценивали на 10-30-60-90 дни лечения; в итоге у 18 больных достигли клинико-этиологического излечения, у 1 - клинического улучшения. Побочных эффектов не было. При отдаленном наблюдении в течение 12 месяцев рецидивы отсутствовали.
Выводы. При применении наружной лазерной терапии в сочетании с системной терапией и наружными средствами при онихомикозах клиническое и микологическое излечение достигли у 94,7% пациентов.
мониторинг микробной колонизации содержимого пустул при акне Бисенова Н.М.Даркина Т.В., Куанова К.К.
РГП «ННМЦ», АО «МУА», РГП «Больница УДП РК», Астана, Казахстан
monitoring of microbial
colonization of the contents
of pustules in acne
Bisenova N.M.,Tarkina T.V., Kuanova K.K.
Republican State Enterprise «National Research Medical Center», Joint-stock company «Medical University of Astana», Republican State Enterprise «Medical Center of presidential property department of the Republic of Kazakhstan» Astana, Kazakhstan
Особенностью высыпаний при угревой болезни является их длительное существование, несмотря на интенсивное лечение. Это связано с присутствием стимуляторов воспаления, синтезируемых, в первую очередь, липофильными бактериями, колонизирующими дерму и сально-волосяной комплекс. Однако свой вклад в поддержание длительно существующего воспаления могут вносить и другие возбудители.
Цель исследования - качественный и количественный мониторинг микробиоты содержимого пустул при акне и определение ассоциаций бактерий с грибами рода Candida и клещом Demodex folliculo-rum.
Материалы и методы. Проводили количественное микроскопическое и микробиологическое исследование содержимого свежих пустул кожи лица у 74 больных в возрасте от 15 до 47 лет с юношескими и поздними акне средней и тяжелой степени тяжести.
Степень тяжести определяли по трехступенчатой классификации (согласительный документ, Париж 2002 г.).
Результаты. При микробиологическом исследовании показано, что в 56 случаях (75,6%) в содержимом пустул обнаруживали грамположительную биоту: Staphylococcus aureus - у 21 больных акне с тяжелой степенью тяжести (28,4%), Staphylococcus epidermidis - у 35 больных со среднетяжелой формой (47,3%). Бактериально-грибковую ассоциацию S. epidermidis и Candida spp. зафиксировали у 12 пациентов (16,2%), бактериально-клещевую ассоциацию S. aureus и D. folliculorum - в 6 случаях (8,1 %).
Вывод. Нами установлено, что S. aureus сочетался чаще с клещом D. folliculorum, a S. epidermidis - с Candida spp. Микст-обсеменение пустул кожи лица больных акне, возможно, является фактором, поддерживающим воспалительную реакцию кожи, и необходимо назначение адекватного комплексного лечения.
оптимизация методов выделения днк и количественного анализа днк-мишени ASPERGILLUS FUMIGATUS С использованием пцр в режиме «реального времени» Богданов К.В., Игнатьева С.М.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
optimization of dna extraction methods and am plification step to find dna-target of ASPERGILLUS FUMIGATUS using real-time q-pcr Bogdanov K.V., Igtatieva S.M.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEI ARE SPb MAPE, St. Petersburg, Russia
Диагностика инвазивного аспергиллеза остается проблематичной до настоящего времени. Традиционные культуральные методы исследования, микроскопирование гистологических образцов и иммунодиагностика являются длительными процедурами по времени, трудоемкими или обладают недостаточной чувствительностью. В настоящее время молекулярно-генетические методы анализа и, в частности, количественную оценку ДНК-мишени грибов рода Aspergillus с помощью ПЦР, рассматривают как альтернативные тесты благодаря высокой чувствительности и специфичности. Однако применение количественной оценки ДНК-мишени A.fumigaLus для диагностики аспергиллеза и мониторинга больных,
получающих химиотерапию, требует оптимизации процедуры выделения ДНК и последующей постановки количественной ПЦР (Q-PCR).
Цель исследования - подобрать оптимальные условия для проведения экстракции ДНК и постановки ПЦР в режиме «реального времени» для количественного определения специфического участка ДНК, кодирующего большую рибосомальную субъединицу 28S A.fumigatus.
Материалы и методы. Экстракцию ДНК из суспензии спор А. fumigatus штамм РКП1Т-1076 (Российская коллекция патогенных грибов НИИ медицинской микологии им. Кашкина), а также из биосубстратов больных аспергиллезом (цельная кровь, плазма, бронхоальвеолярный лаваж) проводили двумя способами. Первый способ включал применение отечественного набора реагентов для выделения ДНК на сорбенте («ДНК Сорб-В», ИнтерЛабСервис, Россия); во втором случае ДНК выделяли на колонках с использованием импортного набора реагентов (DNA minikit, Qiagen, Germany). Амплификацию ДНК-мишени A. fumigatus и ß-глобинового гена человека (внутренний контроль выделения геномной ДНК) в режиме «реального времени» с использованием реагентов фирмы «Applied Biosystems» (США) выполняли на термоциклере «Rotor-Gene 6000» (Corbett Research, Австралия). Для определения чувствительности Q-PCR проводили построение калибровочных кривых стандартов, приготовленных на основе разведений спор А. fumigatus (10®, 102, 103, 104, 105 клеток/мл) в донорской крови и плазме. Вычисление количества копий ДНК-мишени гриба в исследуемом клиническом образце проводили с помощью прилагаемого к термоциклеру программного обеспечения.
Результаты. Было показано, что ДНК, выделенная двумя вышеназванными способами, удовлетворяла требованиям, необходимым для выполнения Q-PCR и построения кривой стандартов на основе разведений спор А. fumigatus. Чувствительность метода составляла 10 копий ДНК-мишени на реакцию. При анализе результатов амплификации специфического участка ß-глобинового гена человека выявили, что выход геномной ДНК, выделенной на сорбенте, был немного выше выхода ДНК, выделенной на колонках. Также было обнаружено, что оба способа выделения ДНК в некоторых случаях приводили к низкому выходу ДНК, экстрагируемой из более плотных биосубстратов больных, например, из бронхо-альвеолярных лаважей (БАЛ). Это, в свою очередь, приводило к снижению чувствительности Q-PCR при выявлении ДНК-мишени А. fumigatus у больных аспергиллезом.
Выводы. Оптимизированный Q-PCR анализ для оценки количества копий ДНК-мишени А. fumigatus можно применять у больных аспергиллезом; чувствительность метода составляет 10 копий ДНК-мишени на реакцию. Способы выделения ДНК на сорбенте или на колонках из биосубстратов боль-
ных и суспензии спор гриба подходят для выполнения количественной ПЦР в режиме «реального времени». Для выделения ДНК из БАЛ больных, наряду со встряхиванием образца с бусинами «Баллотини» во время экстракции, требуется дополнительная механическая обработка образца, например, ультразвуковая гомогенизация, способствующая более глубокому лизису клеток, большему выходу ДНК и, в конечном итоге, повышению эффективности О-РСР,
исследование параметров клеток микромицетов с использованием флуоресцентного детектора субпопуляций клеток дскф 01
Богомолова Е.ВЛ Васильева Е.КЛ Гаврияов Ю.М.1, Панина Л.К.1, Чубинский-Надеждин И.В.2
1 Санкт-Петербургский государственный университет;^Институт аналитического приборостроения РАН, Санкт-Петербург, Россия
the study of micromycetes cells parameters by dskf-01 cells subpopulations fluorescent detector
Bogomolova E.V.',Vasilieva E.K.2,GavrilovYu.M.1, Panina L.K. 1,Chubinsky-Nadezhdin i.V.2
1 Saint-Petersburg State University;2 Institute for Analytical Instrumentation RAS, Saint-Petersburg, Russia
Цель работы - провести статистический анализ клеток дрожжевых грибов по значениям таких показателей, как диаметр, прозрачность, гранулярность и флуоресценция для выявления гетерогенности исследуемых популяций. Эта информация позволяет уточнить влияние условий культивирования на характер роста и поверхностные свойства клеток. Особое значение такие данные имеют при работе с диморфными видами, многие из которых известны как патогены человека, у которых переход между двумя ростовыми морфотипами обусловливает проявление вирулентных свойств.
Материалы и методы. В работе использовали дрожжевые грибы Saccharomyces cerevisiae, Sar-cinomyces petricola, Phaeococcomyces chersonesos. Грибы культивировали на жидкой среде Чапека в полипропиленовых пробирках. Морфометриче-ский анализ проводили в камерах Горяева с помощью анализатора клеток ДСКФ (ИАП РАН, Россия, http://213.170.69.26, http://www.iai.rssi.ru). Этот прибор позволяет визуализировать образец в режиме цифрового микроскопа с высоким разрешением и производить оценку частиц размером 2-30 мкм. Скорость анализа клеток составляет 100 кл./сек., что позволяет определять искомые параметры в реальном времени. Автоматизация статистической обработки
образцов значительно ускоряет получение данных, повышает репрезентативность выборки и расширяет границы применимости подхода.
Результаты. Для каждого вида грибов удалось выделить несколько субпопуляций клеток на основе статистических распределений по индивидуальным параметрам в координатах: диаметр клеток как функция от прозрачности (или гранулярности) и от флуоресценции. Например, для Р. скегнопенон удалось выделить многочисленную субпопуляцию, представленную мелкими одиночными клетками, и вторую, представленную хламидоспорами. При анализе результатов по параметрам прозрачности и диаметра удалось четко отделить «сигнал» от «шума». Так, средний диаметр всех частиц при анализе пробы 5. сегеуЫае составил 7,5±3,8 мкм, тогда как после аналитической обработки собственно диаметр клеток 5. тгтМт составил 6,0± 1,0 мкм. В образце 5. ре1г1со1а на фоне основной группы клеток, составляющей 93% распознанных частиц (средний диаметр - 6,1 ±1,5 мкм, прозрачность - 26,6±8,1), удалось выделить небольшую популяцию клеток с большим диаметром -8,0±0,5 мкм и прозрачностью - 33,8±6,5. При анализе этой подвыборки в режиме микроскопа данная группа клеток четко отличалась от основной выборки наличием крупных светлых включений (возможно, липидных капель).
Заключение. Повышение информативности исследования достигалось способностью прибора различать как отдельные клетки, так и распознавать их в конгломератах и в составе псевдомицелия за счет разности оптической плотности внутри тел клеток и на границах, а также возможностью исключать явные артефакты из рассматриваемой выборки.
изменение характера роста диморфных черных дрожжей PHAEOCOCCOMYCES CHERSONESOS в условиях гипогео магнитного поля
Богомолова Е.В.1, ГавриловКШ.1, Дмитриев С.П. ', Доватор H.A. 2, Панина Л.К.1
Танкт-Петербургский государственный университет; Физико-технический институт им. А.Ф. Иоффе РАН, Санкт-Петербург, Россия
growth form changes in dimorphic black yeast PHAEOCOCCOMYCES CHERSONESOS under the action of hypogeomagnetic field
Bogomolova E.V.1, GavrilovYu.M.1, Dmitriev S.P.2, Dovator N.A.2, Panina L.K.1
'Saint-Petersburg State University; 2A.F.Ioffe Physico-Technical Institute RAS, Saint Petersburg, Russia
Цель исследования - изучение воздействия «магнитного вакуума», т.е. ослабленного в 450 раз магнитного поля Земли на морфофизиологические свойства диморфных микроскопических грибов Pha-eococcomyces chersonesos (штамм Ch 49).
Материалы и методы. Культивирование проводили в каплях агаризованной среды Чапека на предметных стеклах. Для микрофотосъемки использовали цветную цифровую камеру LEICA DC 300F (Leica, Germany), смонтированную на тринокулярном микроскопе Н605Т (WPI, USA) (объектив х25). Компьютерный анализ и обработку цифровых изображений проводили в ручном режиме с помощью программных средств ВидеоТест-Мастер-Морфология 4.0 (ООО «ВидеоТест», СПб, Россия). Культуры микромицетов экспонировали в магнитном поле 100 нТл на экранирующей постоянное и переменное магнитное поле установке (ФТИ им. А.Ф. Иоффе), представляющей собой пятислойный цилиндрический магнитный экран с внутренним соленоидом для создания сверхслабого однородного магнитного поля,
Результаты. Воздействие гипогеомагнитного поля приводило к изменению характера роста Р. chersonesos. В контрольных условиях (магнитное поле Земли) дрожжевые округлые клетки микромицета объединялись в небольшие группы или округлые конгломераты по несколько десятков или сотен либо располагались отдельно. В условиях гипогеомагнитного поля уменьшалось число свободно расположенных клеток, а у конгломератов образовывались отростки за счет появления клеток с усиленным полярным ростом, формирующих псевдогифы и дающих начало истинному мицелию, т.е. наблюдалась
тенденция диморфного перехода из дрожжевой формы роста в мицелиальную.
Ранее нами был обнаружен эффект воздействия сверхслабых магнитных полей на характер роста колоний гифомицетов, выражающийся в образовании спиралевидно закручивающихся гиф. Учитывая эти и полученные в настоящем исследовании данные, можно предположить, что геомагнитный фон влияет на процессы апикального роста микромицетов и на процесс митотического деления. Возможными мишенями могут являться митотические циклины Gl, участвующие в регулировании переключения характера роста (изодиаметральный/ псевдогифаль-ный рост), а также G2 циклины, активация которыми циклин-зависимой киназы Cdc28 приводит к изоди-аметральному росту. Ингибирование данной реакции, соответственно, пролонгирует апикальный рост и может вызывать псевдогифальный рост. В качестве альтернативных мишеней рассматриваются аналоги Swel - киназы Saccharomyces cerevisiae - ингибитора G2 циклинов, участвующей в процессе «морфо-генетической проверки», вызывая задержку митоза и переключение от полярного к изодиаметральному росту.
Изменение морфофизиологических свойств микроскопических грибов, а также управление процессами роста с помощью бесконтактных воздействий является перспективным направлением исследований. Тонкое регулирование процессов развития патогенных микромицетов с помощью изменения магнитных условий роста может найти свое применение, в том числе в терапии микозов.
ф
микромицеты в воздушной среде санкт-петербурга Богомолова Е.В., Кирцидели И.Ю.
Ботанический институт им. В. Л. Комарова РАН, Санкт-Петербург, Россия
airborne fungi in st. petersburg Bogomolova E.V., Kirtsideli I.Yu.
Komarov Botanical Institute RAS, St. Petersburg, Russia
Содержание условно-патогенных грибов в воздушной среде может являться одним из важнейших критериев при экологической оценке мегаполисов; сравнительным анализом аэромикоты различных районов города можно оценить потенциальную степень риска заболевания вторичными микозами и грибными аллергиями.
Материал и методы. Пробы воздуха отбирали в течение 2009 года в дни без существенных осадков, 1-2 раза в месяц в одной из парковых зон Приморского р-на и в Центральном районе СПб на площади Искусств при помощи микробиологического воздухозаборника для чашек Петри Burkard (Великобритания) на агаризованную среду Чапека и Мальт агар.
Результаты. В ходе годового мониторингового исследования микобиоты воздуха было выявлено 57 видов микромицетов, относящихся к 30 родам (без учета неспорулирующих культур) и 3 -к подотделам. Наибольшим числом видов были представлены роды: Aspergillus (6), Cladosporium (4), Fusarium (2), Paecilomyces (2), Pénicillium (11), Phoma (3). Число видов, выделяемых из единичного образца, составляло, как правило, 6-7 видов. В течение года по обилию доминировали Cladosporium cladosporioides, Pénicillium aurantiogriseum и стерильный белый мицелий, наибольшую временную встречаемость (в течение года) отмечали для тех же видов и микромицетов Alternaria altérnala. При сравнении видового состава аэро-микоты парковой и центральной зон города выявили умеренный уровень сходства (0,453 по Серенсену). Общий список видов содержит 93% потенциально-патогенных видов в соответствии с СП 1.3.2322-08.
Отмечали колебание численности микромицетов в течение года (от 50-100 до 2680 КОЕ/м3). При исследовании численности пропагул микроскопических грибов в воздухе в течение года наблюдали увеличение их численности в летний период с июня по сентябрь и резкое падение - во второй половине осени. В парковой зоне наибольшее увеличение численности микромицетов отмечали в июне-августе, а в Центральном районе наибольшие значения численности приходились на сентябрь месяц, что, возможно, объясняется сравнительно небольшим числом источников зеленых насаждений в центральном районе и, соответственно, низким источником контаминации.
этиология и лечение
грибковых кератитов
Богомолова Т.С.1, Беляева Т.Н.1, Пинегина О Н.', Скрябина Е.В.2
ЖИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Г0УДП0СГ16 МАП0; 2 Городская больница № 2, Санкт-Петербург, Россия
etiology and treatment of
mycotic keratitis
Bogomolova IS,', Belyaeva T.N.1, Pinegina O.N.1, Skryabina E.V.2
'Kashkin Research Institute of Medical Mycology SPbMAPS;2City Hospital N 2, Saint Petersburg, Russia
В качестве возбудителей микозов роговицы глаза (грибковых кератитов) описано более 100 различных видов грибов. В научной литературе описаны различия в спектрах возбудителей микотических кератитов в разных географических зонах. Практически отсутствуют данные о возбудителях этих заболеваний глаз в России. Без своевременной диагностики и антимикотической терапии микозы глаз приводят к тяжелым последствиям для больного, включая потерю органа зрения.
Цель работы - изучить этиологию грибковых кератитов у пациентов, обратившихся в НИИ медицин-
ской микологии им. П.Н. Кашкина, и представить результаты лечения больных в период с 2007 по 2010 гг.
Методы исследования. Соскобы с роговицы исследовали на наличие грибов при помощи световой и флуоресцентной микроскопии с калькофлюором белым, а также засевали патологический материал на агаризованную и жидкую среды Сабуро с левомице-тином. Посевы инкубировали при 35 и 28 °С в течение 3 недель. Проводили идентификацию выделенных культур микромицетов с помощью морфологических и биохимических методов по определителям грибов.
Результаты. Обследовано 23 человека с подозрением на микотический кератит. При микроскопии соскобов с роговицы глаза структуры грибов (мицелий, псевдомицелий или дрожжевые почкующиеся клетки) были обнаружены у 13 пациентов (57%). Рост микромицетов был получен в 70% случаев от числа положительных микроскопических находок. При посеве соскобов с роговицы были выделены следующие микромицеты: Candida parapsilosis - 2, Fusarium sp.
- 2, Acremonium kiliense - 1, Paecilomyces marquandii
- 1, Aspergillus flavus - 1, Pénicillium expansum + P. chrysogenum - 1, Cladosporium sphaerospermum - 1.
Среди факторов риска по развитию грибкового поражения роговицы глаза выявили: травму глаза, ношение контактных линз, герпес, демодекоз, хронический блефароконъюнктивит.
Проводили системную и местную антимикоти-ческую терапию с применением препаратов: вори-коназол, флюконазол, амфотерицин В в сочетании с хирургическими методами лечения. У всех больных наблюдали клиническое улучшение.
Выводы.
1. Среди возбудителей микотического кератита наибольшее значение имели гиалогифомицеты (67% случаев). Дрожжи Candida parapsilosis обнаружили в 22%, феогифомицеты - в 11% случаев.
2. Своевременное лечение антимикотиками приводит к клиническому улучшению состояния больных микотическим кератитом.
хронический инвазивный аспергиаез легких у гематологических больных в санкт-петербурге 1 Борзова Ю.В., 1Десятик Е.А., 'Хостелиди CH., 2Попова М.О.,'Чернопятова P.M.,'Богомолова Т.С.,'Игнатьева С.М., 1 Шурпицкая О.А., 3Колбин А.С., "Зюзгин И.С., 2Зу6аровская Н.И., -Климович А.В., 'Васильева Н.В.,'Климко Н.Н.
'НИИ медицинской микологии им. П. Н. Кашкина и кафедра клинической микологии, иммунологии и аллергологии ГОУ ДПО СПб МАПО; Институт детской гематологии и трансплантологии им. P.M. ГорбачевойСанкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И. П. Павлова; 3Детская городская больница №1; "•Ленинградская областная клиническая больница;5 Городская больница №31, Санкт-Петербург, Россия
chronic invasive pulmonary aspergillosis in hematologic patients in st. petersburg 1 Borzova Y.V.,1 Desyatik E.A.,1 Khostelidi S.N., 2Popova M.O., 1Chernopyatova R.M.,'Bogomolova T.S.,'Ignateva S.M., 'Shurpitskaya O.A., 'Kolbin A.S., "Zyuzgin I.S.,2Zubarovskaya N.I., 5Klimovich A.V., 'Vasilyeva N.V.,'KlimkoN.N. ' Kashkin Research Institute of Medical Mycology and Chair of Clinical Mycology, Immunology and Allergology SEI APE SPb MAPE; institute of Pediatric Hematology and Transplantation them. R.M. Gorbacheva of St. Petersburg I.P. Pavlov State Medical University; ^Children's Hospital № 1; Leningrad Regional Hospital;5 Hospital № 31, St. Petersburg, Russia
Инвазивный аспергиллез легких (ИАЛ) - распространенное осложнение у иммунокомпромети-рованных больных, которое отличается тяжестью клинических проявлений и высокой летальностью. В настоящее время хронические формы ИАЛ у гематологических больных изучены недостаточно.
Цель работы — изучить распространенность, факторы риска, этиологию, основные клинические признаки и результаты лечения хронического инва-зивного аспергиллеза легких (ХИАЛ) у гематологических больных в Санкт-Петербурге.
Методы. Многоцентровое ретроспективное исследование проводили в 14 многопрофильных стационарах Санкт-Петербурга в период с 1998 по 2009 гг.
ИАЛ классифицировали как доказанный, вероятный и возможный, используя критерии EORTC/ MSG, 2008 г. К ХИАЛ относили заболевания с длительностью более 3-х месяцев, а также случаи рецидива в течение 6 месяцев от начала заболевания (D. Denning, 2006).
Результаты. В период с 1998 по 2009 гг. выявили 251 случай инвазивного аспергиллеза у онкогемато-логических больных. Проследить течение заболевания и разделить ИАЛ на острый и хронический мы смогли у 208 пациентов, в том числе у 172 взрослых и у 36 детей (от 1 года до 18 лет).
ХИАЛ выявили у 62 (36%) взрослых больных и у 6 детей (17%) в возрасте от 1 до 18 лет. У больных ХИАЛ соотношение мужчин и женщин составило 1,4:1; медиана возраста - 40 лет, у взрослых больных острым инвазивным аспергиллезом легких (ОИАЛ) - 1,4:1; медиана возраста - 47 лет.
Основными фоновыми заболеваниями у больных ХИАЛ и ОИАЛ были злокачественные новообразования (острый миелобластный и лимфобластный лейкоз (59% vs 66%), лимфома Ходжкина и неход-жкинская лимфома (29% vs 21%) множественная ми-елома (4,5% vs 2%), миелодиспластический синдром (4,5% vs 1%), хронические миелопролиферативные заболевания (хронический миелолейкоз) (3% vs 8%), а также апластическая анемия (0% vs 2%).
Основными факторами риска у больных ХИАЛ и ОИАЛ были: нейтропения < 0,5-10" (95% vs 87,5%), лимфоцитопения < 1,0-Ю9 (88,5% vs 66,3% (р=0,0004), цитостатическая полихимиотерапия (95,5% vs 94,2%), системные глюкокортикостероиды (61,5% vs 62,5%), трансплантация кроветворных стволовых клеток (29% vs 30%), хирургические вмешательства (4,4%. vs 6,4%). Для ХИАЛ характерны более длительная терапия ГКС (среднее - 11,4 дня) и более длительная лимфоцитопения (среднее - 36 дней) по сравнению с ОИАЛ (8,3 дня и 26 дней соответственно). Кроме того, больные ХИАЛ получали достоверно больше курсов ПХТ по сравнению с больными ОИАЛ (среднее 6,25 vs 4,2) (р=0,003).
Возбудителями ХИАЛ и ОИАЛ были Aspergillus fumigatus (32% vs 25%), A. niger (45% vs35%), A. flavus (13% vs 15%), Aspergillus spp. (0% vs 20%), A. versicolor (5% vs 5%), A. ochraceus (5% vs 0%). Два и более возбудителя выделяли в 33% культурального подтверждения ХИЛА и в 9% случаев - ОИЛ (р<0,05).
Основными клиническими проявлениями ХИАЛ и ОИАЛ были: повышение температуры тела (92% vs 88%), одышка (45% vs. 56%), кашель (30% vs 68%) (р<0,05), кровохарканье (9,6% vs 12%), бронхооб-структивный синдром (8% vs 6,4%), боли в грудной клетке (15% vs 18,6%).
Для ХИАЛ характерно более распространенное и тяжелое поражение легких по данным КТ: двустороннее (86%), диффузное (56%) поражение и симптом «полумесяца» (19%) при ХИАЛ были зарегистрированы чаще, чем при ОИАЛ (66,6%, 46% и 11% соответственно).
Галакгоманнан в сыворотке крови больных ХИАЛ обнаруживали в 55% случаев, ОИАЛ - в 59% случаев.
Микробиологическое подтверждение диагноза было получено у 30% при ХИАЛ и у 20% больных -при ОИАЛ. Мицелий гриба при прямом микроскопическом исследовании биосубстратов (мокроты и/или БАЛ) был выявлен у 19% больных ХИАЛ и у 11% больных ОИАЛ. Возбудитель был выделен при ХИАЛ в 22%, при ОИАЛ - в 15% случаев.
По классификации EORTC/MSG 2008 г., диагноз ХИАЛ и ОИАЛ был доказанным у 7% и 1,5% больных, вероятным - у 59% и 58%, возможным - у 34% и
40,5% соответственно.
Большинство больных получало 2 и более анти-микотических препарата. Наиболее часто при ХИАА и ОИАЛ применяли амфотерицин В (71% vs 62%), итраконазол (69% vs 47%) и вориконазол (60% vs 24%).
Общая выживаемость в течение года при ХИАА и ОИАЛ составила 42% и 18% (р=0,003).
Выводы. Хроническое течение инвазивного аспергиллеза легких выявили у 36% взрослых и у 17% детей. Основные возбудители хронического инвазивного аспергиллеза легких - A.fumigatus и A. niger. Факторами риска хронического течения инвазивного аспергиллеза легких являются длительная терапия глюкокортиокстероидами и выраженная продолжительная лимфоцитопия. Для хронического инвазивного аспергиллеза легких характерно двустороннее распространенное поражение легких, симптом «полумесяца». При проведении лечения общая выживаемость больных хроническим инвазивным аспергил-
лезом в течение 12 месяцев составила 42%.
ф
антибиотикорезистентность CANDIDA spp из диагностически значимых локусов у детей с о н ко тем at ол о г и ч е с к и м и и соматическими заболеваниями Воронина J1.IV2, Блинова С.М.1,2, Лавриненко Е.В.1,2 Уральская государственная медицинская академия, 20бластная детская клиническая больница №1, Екатеринбург, Россия
antibiotic resistance of CANDIDA spp. obtained from diagnostic significant loci at children with oncogf.matological and somatic diseases Boronina L.G.1'2, Blinova S.M.1,2, Lavrinenko E.V.1,2 1 Ural State Medical Academy,2 Regional children's clinical hospital №1, Yekaterinburg, Russia
Быстро увеличивающийся спектр возбудителей микозов, многие из которых резистентны к применяемым антифунгальным препаратам, требует своевременного выявления грибковой инфекции и идентификации возбудителя, а также мониторинга микобиоты различных локализаций для адекватного назначения противогрибковой терапии, что является обязательным условием успешного лечения.
Цель - провести анализ антибиотикорезистент-ности Candida spp. Из диагностически значимых ло-кусов у детей с онкогематологическими и соматическими заболеваниями.
Методы и средства. Провели изучение 168 ан-тибиотикограмм штаммов: С. albicans (п=78), С.
parapsilosis (п=17), С. kefyr (п=4), С. guilliermondii (п=8), С. lusitaniae (п=2), С. norvegensis (п=2), С. krusei (п=10), С. glabrata (п=12), С. tropicalis (n=14), Candida spp. (п=21), выделенных из крови, ликвора, мочи, мокроты, БАЛ, трахеи, катетеров, отделяемого уха, желудочного содержимого, слизистой оболочки зева от 48 пациентов с онкогематологическими и от 125 детей с соматическими заболеваниями, находившихся на лечении в ОД КБ №1 в течение 2005-2009 гг. Тестирование на чувствительность к антимикотикам проводили с помощью тест-систем АТВ FUNGUS 2 и 3 (АТВ Expression).
Результаты. По данным антибиотикограмм, к амфотерицину В оказались чувствительны 98,2% штаммов, нечувствительны - 1,8% (резистентны: 1 штамм С. krusei и 1 штамм С. guilliermondii, умеренно-резистентен - 1 штамм С. krusei)-, к флу-цитозину чувствительны 95,2% штаммов, нечувствительны - 4,8% (резистентен - 1 штамм С. tropicalis, умеренно-резистентны: 1 штамм Candida sp., 5 -С. krusei, 1 - С. glabrata); к флуконазолу чувствительны 79,2% штаммов, нечувствительны - 20,8% (резистентны: 7 штаммов С. albicans, 1 -Candida sp., 5 - С. tropicalis, 10 - С. krusei, 2 - С. guilliermondii,
9 - С. glabrata, умеренно-резистентен - 1 штамм С. albicans); к итраконазолу чувствительны 77% штаммов, нечувствительны - 23% (резистентны: 8 штаммов С. albicans, 1 - Candida sp., 4 - С. tropicalis,
10 - С. krusei, 2 - С. guilliermondii, 6 - С. glabrata, умеренно-резистентны: 3 штамма С. albicans, 1 -С. parapsilosis, 3 - С. glabrata). Тестирование к вори-коназолу проводили в 2008-09 гг. (26 штаммов): чувствительны - 96,2%, резистентен - 1 штамм Candida sp. Интересным является появление резистентных и умеренно-резистентного к амфотерицину В штаммов С. krusei и С. guilliermondii (2005 и 2007 гг.) у больных с онкогематологической патологией; такие штаммы также описаны в мировой литературе.
линия «скин-кап» в терапии
себорейного дерматита
Буравкова А.Г., Новикова Л.А., Демьянова О.Б., Полуэктова Т.Е.
Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко,Россия
«scin-кар» line in the sf.borrhoic
dermatitis therapy
Buravkova A.G., Novikova L.A., Demyanova O.B., Poluektova Т.Е.
Voronezh State Medical Academy, Russia
Себорейный дерматит связан с патологическим изменением секреции и состава секрета сальных желез. Этиопатогенез себорейного дерматита ассоциируется с активизацией симбиотной микробной биоты устьев сальных желез (стафилококки, кори-
небактерии акне, липофильные дрожжи рода Ма1-ашгШ% Наиболее часто возникает необходимость в комплексной терапии, включающей системные и топические средства воздействия на патологический процесс. Топическая терапия направлена на подавление признаков воспаления, устранение сухости или жирности кожи, профилактику вторичного инфицирования пораженных участков, восстановление структуры эпидермиса и его барьерных функций. Этим требованиям отвечают препараты линии «Скин-кап» (крем, аэрозоль, шампунь).
Цель исследования - оценить эффективность, безопасность и переносимость препаратов линии «Скин-кап» в лечении себорейного дерматита.
Объекты и методы. Под нашим наблюдением находилось 46 пациентов с себорейным дерматитом в возрасте от 5 до 55 лет (18 женщин, 28 мужчин). Пациенты были разделены на две группы по 23 человека. На фоне комплексной терапии первой группе пациентов назначали традиционные наружные препараты, содержащие серу, салициловую кислоту, кортикостероиды, антимикотики. Больные второй группы получали препараты линии «Скин-кап». Аэрозоль и крем наносили 2 раза в день до полного регресса высыпаний. Длительность лечения определяли клинической картиной и распространенностью очагов поражения, которая составила от 2 до 5 недель. При поражении волосистой части головы у пациентов старше 12 лет применяли шампунь «Скин-кап» 2 раза в неделю в течение месяца, а затем 1 раз: в неделю 2-3 месяца. До лечения и после его окончания проводили динамическое наблюдение за показателями общих анализов крови и мочи, основных биохимических тестов.
Результаты. Клиническую эффективность оценивали через 3, 5 и далее каждые 7 дней до окончания лечения. У 10 пациентов первой группы и у 15 - второй на 7-10 день лечения значительно уменьшились эритема, отечность, шелушение. К концу третьей недели наступило клиническое выздоровление у 10 пациентов первой группы и у 16 - второй. Дальнейшее лечение в течение 1-2 недель привело к полному регрессу высыпаний у 5 и значительному улучшению - у 8 пациентов первой группы, и 3 и 4, соответственно, второй. Побочные явления в виде усиления эритемы, жжения наблюдали у 9 пациентов первой группы, получавших серосодержащие топические препараты, при этом в 7 случаях потребовалось сменить наружное средство. Во второй группе аналогичные эффекты наблюдали у 11 пациентов, но разрешились самостоятельно в течение 3-7 дней применения линии «Скин-кап», по мере адаптации кожи к препарату. Ни в одном из случаев отмены препаратов не потребовалось. Все пациенты отметили приятные органолептические свойства применяемых средств линии «Скин-кап».
Патологических отклонений в показателях биохимического анализа крови, общего анализа крови и мочи не выявили.
Вывод. Высокая эффективность, безопасность, удобство применения (наличие трех лекарственных форм), приятные органолептические свойства позволяют рекомендовать применение препаратов линии «Скин-кап» в лечении себорейного дерматита у взрослых и детей старше 1 года.
санитарно-микологическое исследование
биоповреждений помещений Васильев О.Д., Рябинин И.А.
Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
s anitary- mycolog 1с al investigation of biodamages in offices Vasilyev O.D., Ryabinin I.A.
Saint-Petersburg State Médical Academy named after 1.1. Mechnikov, Saint Petersburg, Russia
Цель - определить плесневую и бактериальную контаминацию материалов внутренней отделки и воздуха в офисных помещениях промышленного предприятия, подвергшихся протечкам весной 2010 года.
Материалы и методы. В 9 помещениях взяты пробы строительно-отделочных материалов из участков, имеющих визуальные признаки повреждения водой и пробы воздуха пробоотборником ПУ-1Б. Материалы и воздух исследовали на плесневую и бактериальную контаминацию в соответствии с существующими нормативно-техническими документами. Посевы на питательный агар инкубировали 24 часа при 37 °С и до 7 суток - при 22-25 °С с регистрацией и определением группы бактерий и родовой идентификацией плесневых грибов.
Результаты. В штукатурке и отделочных материалах, подвергшихся протечкам, найдено от 3,9-104 (наименьшая контаминация) до 4,ОТО6 КОЕ микроорганизмов в 1 г. Плесневые грибы присутствовали в количестве от 5-8-102 до 1,9-3,2-Ю4 КОЕ/г. В отделочных материалах всех помещений преобладающей группой плесневых грибов (73-100 96) были Pénicillium spp., реже и в отдельных помещениях найдены Aspergillus spp. и Stemphylium spp. Бактерии принадлежали к родам Bacillus, Micrococcus, Staphylococcus.
В воздухе помещений с протечками обнаружили от 760 до 6800 КОЕ микроорганизмов в 1 м3. Концентрация плесневых грибов - от 400 до 5560 КОЕ/м3. Преобладали грибы Pénicillium spp. (85 96), реже выявляли Aspergillus spp. (14 %) и Stemphylium spp. (1 96).
Установлена корреляция между биоповреждениями отделочных материалов, подвергшихся протечкам, количеством и группами грибов и бактерий,
присутствующих в воздухе рабочей зоны. Рекомендована обработка материалов и воздуха эффективными биоцидами.
ДЕЙСТВИЕ МИКРОБНЫХ МЕТАБОЛИТОВ НА МОРФОЛОГИЮ SCOPULARIOPSIS BRE VI CA UL IS Васильев О,Д., Рябинин И.А.
СПбГМА им. И.И. Мечникова, кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии, Санкт-Петербург, Россия
EFFECTS OF MICROBIAL METABOLITES ON THE MORPHOLOGY OF SCOPULARIOPSIS BREVICAULIS Vasilyev O.D., Ryabinin I.A.
SPbSMA named after I.I. Mechnikov, Chair of Microbiology, Virology and Immunology, Saint-Petersburg, Russia
P) настоящем исследовании предпринята попытка выявить морфологические особенности роста гриба-биодеструктора Scopulariopsis brevicaulis при действии метаболитов ряда бактерий и Candida albicans с целью выяснения характера микроэкологических отношений между этими видами.
Материалы и методы. В работе использовали штаммы: Staphylococcus aureus АТСС 2923, Proteus vulgaris 304, Klebsiella sp. 668, С. albicans 361 (последние 3 - из коллекции кафедры микробиологии СПбГМА), а также «дикий» изолят S. brevicaulis. Споры S. brevicaulis и исследуемые культуры засевали на противоположные грани агаровых блоков (30x8x2 мм, агар с дрожжевым экстрактом и мальтозой). Блоки накрывали покровными стеклами, герметизировали парафином и инкубировали при 37 °С в течение 24 часов для проращивания бактерий, Candida и насыщения агара их метаболитами, затем - при 20 °С для проращивания S. brevicaulis. Блоки исследовали микроскопически.
Результаты. В контрольных посевах наблюдали рост S. brevicaulis в виде вала, покрытого конидие-носцами. В конидиеносцах - нити спор, каждая из которых содержит, в среднем, по 10-12 спор, расходятся на 2/3 длины от конца. В блоках, засеянных S. aureus, наблюдали увеличение количества конидие-носцев на единицу площади колонии S. brevicaulis, конидиеносцы диаметром в 3-4 раза больше, чем в контроле, нити спор плотно прилегают друг к другу по всей длине (в нити до 25 спор). В блоках с Klebsiella sp. выявили обильный рост, но с преимущественным распространением мицелия на поверхности предметного стекла, что указывает на улучшение адгезивных свойств. В конидиеносцах нити спор извитые, расходятся от основания, в нитях начитывается от 25 до 30 спор. При действии метаболитов Proteus vulgaris характер роста мицелия меняется слабо, од-
нако в конидиеносцах резко сокращается количество спор (по 5-6 в нити). В блоках с культурой С. albicans рост мицелия скудный: выявили отдельные микроколонии, расположенные близко друг к другу; гифы короткие, карликовые конидиеносцы встречались редко, на некоторых блоках наблюдали феномен «mycelium sterilis».
Вывод. Показано модулирующее влияние микробных метаболитов на рост мицелия и интенсивность споруляции у S. brevicaulis s, что может найти применение в комплексной оценке риска биодеградации и сенсибилизации к аллергенам спор данного микромицета.
СЕЗОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В
МИКРОБНЫХ СООБЩЕСТВАХ НА
РАЗРУШАЮЩЕМСЯ БЕТОНЕ
Власов А.Д., Дмитриева Е.Ю., Ростова Н.С., Власов Д.Ю.
Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
SEASON CHANGES OF MICROBIAL COMMUNITIES ON THE DAMAGED CONCRETE
Vlasov A.D., Dmitrieva E.Yu., Rostova N.S.,Vlasov D.Yu.
Saint Petersburg State University, Saint Petersburg, Russia
Бетонные конструкции, широко используемые в городском строительстве, подвергаются процессам биологической коррозии. Микроорганизмы поселяются на поверхности и проникают в толщу материала. В микробных сообществах преобладают бактерии и микроскопические грибы. Состав таких сообществ может изменяться под влиянием внешних факторов.
Цель работы - анализ изменений разнообразия и численности микроорганизмов на разрушающемся бетоне в летне-осенний период 2009 года.
Объекты и методы. Объектом микробиологического изучения выбрано бетонное сооружение в центральной части Санкт-Петербурга на территории Александро-Невской Лавры. Отбор проб материала для микробиологического анализа производили на участках с типовыми формами деструкции бетона. В день отбора проб подготовленный материал высевали на среды для грибов и дрожжей, олиготрофных бактерий, а также тионовых бактерий и актиноми-цетов. Идентификацию грибов и бактерий осуществляли общепринятыми методами. По количеству формирующихся колоний рассчитывали число коло-ниеобразующих единиц (КОЕ) в 1 грамме материала.
Результаты. Микроскопические грибы выявили во всех пробах поврежденного бетона в летний и осенний периоды наблюдений (всего 15 видов). В летних пробах видовое разнообразие микромице-тов на бетоне оказалось довольно низким. В мате-
риале присутствовали практически исключительно виды рода Pénicillium. При атом их численность была весьма высокой и достигала 4,7±0,38404KDE в 1 грамме поврежденного бетона. В осенних пробах разнообразие грибов выросло почти в 2 раза, однако их численность снизилась. Численность бактерий в осенних пробах, наоборот, возросла в несколько раз. При этом доминировали грамположительные неправильные палочки и актиномицеты. Применением факторного анализа данных установили, что изменения численности грибов и бактерий характеризуются отрицательной связью. При этом соотношение деструкторов бетона в летне-осенний период изменяется незначительно, а в большей степени зависит от типа повреждения материала. В то же время, численность микроорганизмов на разрушающемся бетоне достоверно зависит от сезона, т.е. определяется изменением внешних условий.
микромицеты на зоогенных и антропогенных субстратах в районе антарктической полярной станции
«беллинзгаузен»
Власов Д.Ю., Зеленская М.С., Сафронова Е.В., Крыленков В.А.
Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
micromycetes on the zoogenic and anthropogenic substrates on the «bellinzhauzen» antarctic polar station area Vlasov D.Yu., Zelenskaya M.S., Safronova E.V., Krylenkov V.A. Saint Petersburg State University, Saint Petersburg, Russia
Цель работы - изучение состава сообществ ми-кромицетов на зоогенных (останки животных, перья, кости и др.) и искусственных (антропогенных) субстратах в окрестностях российской Антарктической станции «Беллинзгаузен». Одной из задач работы было выявление условно-патогенных грибов, которые способны накапливаться в зонах антропогенного влияния, а также в местах скопления животных (морских млекопитающих и птиц) в береговой Антарктике.
Объекты и методы. В ходе микологических обследований территорий, свободных от снега и льда, отбирали образцы, представляющие интерес в микологическом и микробиологическом отношении. Отбор проб производили на разном удалении от станции.
Для первичной изоляции, поддержания в культуре и идентификации микромицетов использовали следующие питательные среды: картофельно-глюкозный агар, агар Сабуро, сусло-агар, агаризован-
ную среду Чапека. Выделение грибов в культуру из образцов производили путем рассева крошек и мелких фрагментов субстрата на поверхность питательной среды; методом смыва с поверхности субстрата; методом селективной изоляции грибов с поверхности субстрата на питательную среду с помощью инъекционной иглы.
Результаты. Микромицеты обнаружили в пробах разнообразных антропогенных субстратов (бумага, древесина, металл, краска, пенопласт, строительные материалы и др.). Всего на этих субстратах выявили 46 видов грибов, а также неспорулирующие светло- и темно окрашенные формы. Большинство выявленных микромицетов достаточно обычны для антропогенных местообитаний и рассматриваются как условно-патогенные грибы. Доминирующими здесь оказались виды рода Pénicillium, а также Cladospo-rium sphaerospermum. На зоогенных субстратах (костях и перьях птиц, костях морских млекопитающих и др.) выявили 13 видов, а также светлоокрашенные неспорулирующие формы грибов. Доминирующими здесь оказались Geomyces раппогит и Thelebolus sp. В нескольких пробах обнаружен гриб Antarctomyces psychrotrophicus, который встречается также в малоразвитых антарктических почвах. Общими для антропогенных и зоогенных субстратов оказались всего 4 вида грибов. Работа поддержана РФФИ (проект № 10-04-01181-а).
микромицеты во внутренней среде петербургских дворцов
Власов Д.Ю.1, Зеленская М.С.1, Сафронова Е.В.1, Старцев С.А.2, Рябушева Ю.В'.
1 Санкт-Петербургский государственный университет,г Санкт-Петербургский государственный политехнический университет, Санкт-Петербург, Россия
micromycetes in the indoor environment of petersburg's palaces
Vlasov D.Yu.1,Zelenskaya M.S.1, Safronova E.V.1, Startsev S.A.2, Ryabusheva Yu.V1
1 Saint Petersburg State University,2 Saint Petersburg State Polytechnic University, Saint Petersburg, Russia
Микроскопические грибы обладают способностью колонизировать и последовательно разрушать практически все известные строительные материалы в разнообразных экологических условиях. Биодеструкции подвергаются многие исторические объекты Санкт-Петербурга. В связи с этим в последние годы проведены микологические обследования ряда архитектурных памятников Санкт-Петербурга (Юсуповский дворец, Елагин дворец, Шуваловский дворец, дача Половцева, дом Шене, дом Лаваля, особняк Мельцера и другие).
Цель исследования - в выявлении разнообразия грибов, способных поселяться на строительных и отделочных материалах в исторических зданиях Санкт-Петербурга и вызывать их повреждения.
Материалы и методы. Выделение грибов из поврежденных материалов осуществляли на 4 питательные среды: агар Сабуро, агаризованную среду Чапека, картофельно-глюкозный агар и сусло-агар. Пробы воздушной среды отбирали пробоотборником ПУ-1Б. Микологический анализ производили на базе лаборатории микологии СПбГУ.
Результаты. При исследовании во внутреннем пространстве дворцовых зданий было выявлено 112 видов микромицетов, а также неспороносящие светло- и темно окрашенные формы грибов. Наибольшее количество видов микромицетов обнаружили в помещениях Юсуповского (64) и Шувалов-ского (53) дворцов (до реставрации). Зафиксировали абсолютное доминирование на строительных и отделочных материалах дворцовых зданий грибов из рода Pénicillium (40 видов), за которым следуют Aspergillus (15 видов), Cladosporium (4 вида), Мисог (5 видов), Paecilomyces (4 вида), Ulocladium (4 вида). Комплекс типичных видов микромицетов сформирован активными биодеструкторами, известными также как условно-патогенные грибы. Очаги биопоражения строительных и отделочных материалов формируются, главным образом, в местах повышенного увлажнения. Во многих случаях нарушение режимов Эксплуатации зданий привело к накоплению высокого потенциала биодеструкторов, что требует принятия необходимых мер по ликвидации очагов и профилактике биоповреждений исторических объектов.
мониторинг
чувствительности
возбудителей кандидоза к
флуконазолу
Выборнова И.В., Васильева Н.В., Босак И.А.
НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО,
Санкт-Петербург, Россия
MONITORING OF CANDIDA SPP
susceptibility to fluconazole
Vybornova I.V., Vasilyeva N.V., Bosak I.A.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SPbMAPE Saint Petersburg, Russia
коназолу изолятов Candida spp., выделенных от больных в Санкт-Петербурге в период с 2005 по 2009 год.
Материалы и методы. Изучено 2168 штаммов Candida spp., в том числе Candida albicans - 1580 (72,9%). Чувствительность дрожжей к флуконазолу определяли диско-диффузионным методом по протоколу CLSI (Clinical Laboratory Standards Institute; Институт по клиническим и лабораторным стандартам, США) М44А.
Результаты. Данные о доле штаммов, чувствительных к флуконазолу, среди изолятов С. albicans и нe-albicans видов Candida в различные годы изучения представлены в таблице.
Таблица
Чувствительность возбудителей кандидоза
к флуконазолу
Год Количество чувствительных штаммов (%)
наблюдения Candida albiœns нe-albicans виды Candida
2005 97,9 67,9
2006 100 68,6
2007 98,5 66,2
2008 98,5 70
2009 98,7 56,7
Статистически достоверных различий между результатами определения доли чувствительных к флуконазолу штаммов, полученных в разные годы наблюдения, не выявили ни в группе изолятов С. albicans, ни среди группы изолятов нe-albicans видов Candida. Отметим тенденцию к уменьшению доли чувствительных к флуконазолу штаммов среди изолятов нe-albicans видов Candida в период с 2008 по 2009 г. (р = 0,058). В то же время, при анализе результатов определения чувствительности к флуконазолу для всех возбудителей кандидоза в целом (Candida spp.) выявили достоверное уменьшение доли чувствительных к флуконазолу штаммов в 2009 г. (87,2%) по сравнению с 2005 г. (91,8%) (р = 0,04). Это можно объяснить тенденцией к снижению доли штаммов С. albicans в общей структуре возбудителей кандидоза. В 2005 г. изоляты С. albicans составляли 78,5% всех изученных возбудителей Candida spp., тогда как в 2009 г. - 72,6% (р = 0,052).
Выводы.
1. Чувствительными к флуконазолу были 97,9 -100% изолятов С. albicans и 56,7 -70% штаммов не-albicans видов Candida.
2. Доля чувствительных к флуконазолу штаммов Candida spp., выделенных от больных в 2009 г., была достоверно ниже, чем в 2005 г.
Изменение эпидемиологии инвазивного и поверхностного кандидоза и широкое применение флу-коназола для профилактики и лечения больных диктуют необходимость проведения мониторинга чувствительности возбудителей к этому антимикотику.
Цель работы - изучить чувствительность к флу-
обнаружение днк HISTOPLASMA CAPSULATUM в биологическом материале методом пцр
Вьючнова Н.В., Ткаченко Г.А., Гришина М.А., Савченко С.С., Антонов В.А., Липницкий А.В.
ФГУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора, Волгоград, Россия
detection of dna HISTOPLASMA CAPSULATUM in biological mate ri al в y pcr
Vyuchnova N.V., Tkachenko G.A., Grishina M.A., Savchenko S.S., AntonovV.A., Lipnitsky A.V.
Research Institute for Plague Control, Volgograd, Russia
Цель работы - оценить возможность применения полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения возбудителя гистоплазмоза в биологическом материале.
Объекты и методы. Объектами исследования служили пробы органов белых мышей, искусственно контаминированные H. capsulatum var. capsulatum В-580. Штамм предоставлен Коллекционным центром Волгоградского научно-исследовательского противочумного института. Кусочки органов растирали до гомогенной суспензии, для выделения ДНК брали 50 мкл. Клетки дрожжевой фазы H. capsulatum добавляли в концентрациях от 1Т0: до 1-Ю6 клеток в пробе. Реакцию амплификации проводили с разработанными нами праймерами на основе фрагмента гена, кодирующего белок H. capsulatum, экспрессия которого происходит в мицелиальной фазе - MS8 (mold-specific MS8 protein). В исследовании сравнивали 2 метода выделения ДНК H. capsulatum. В первом случае использовали метод гуанидинтиоцианат-фенол-хлороформной депротеинизации с последующей очисткой ДНК с помощью нуклеосорбции. Чувствительность ПЦР составила 1405-1406 клеток в пробе.
Так как H. capsulatum находится в макроорганизме преимущественно внутриклеточно, во втором случае, к исследуемому образцу для лизиса тканей органа добавляли 50 mM NaOH. Пробы инкубировали 10 мин при 95 °С, после чего нейтрализовали равным объемом 1 M Трис, рН 7,0. Центрифугировали 5 мин при 6 тыс. об./мин., удаляли верхнюю фазу. Затем для расщепления клеточной стенки гриба к осадку клеток добавляли 100 мкл 50 шМ фосфатного буфера и фермент хитиназу, в конечной концентрации 0,2 мг/мл, и инкубировали при 37 °С в течение 1 часа. Дальнейшее выделение ДНК проводили согласно методике (Ткаченко Г.А. с соавт., 2007).
Результаты. Установили, что с помощью щелочного лизиса и воздействия хитиназы при выделении
ДНК Н. capsulatum из биологического материала удается повысить чувствительность ПЦР до 14031-104 клеток в пробе. Полученные результаты служат основанием для рекомендации использования прай-меров, комплементарных фрагментам гена MS8, при исследовании проб биологического материала на наличие возбудителя гистоплазмоза.
ассоциация CANDIDA sr с
HELICOBACTER PYLORI У больных
с гастроинтестинальной
патологией
Гаджиева C.B., Мура дова С.А., ГурбановА.И.
Кафедра микробиологии и иммунологии Азербайджанского
Медицинского Университета, Баку, Азербайджан
CANDIDA-HELICOBACTER PYLORI
association in patient with
gastrointestinal pathology
Hajieva S.V., Muradova S.A.,QurbanovA.I.
Azerbaijan Medical University, Department ofmicrobiology and immunology, Baku, Azerbaijan
Гастроинтестинальная патология, вызванная H. pylori, остается актуальной проблемой современной медицины. В последнее время внимание исследователей привлекает микробная ассоциация, обнаруженная вместе с Н. pylori. При этом обсуждают возможное взаимоотношение микроорганизмов в составе микробной ассоциации.
Цель настоящего исследования - изучение микробной ассоциации при гастроинтестинальных патологиях, вызванных Н, pylori.
Объекты и методы. Исследовали 116 больных с гастроинтестинальной патологией: хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и 12-перстной кишки, раком желудка. Проводили микробиологическое исследование желудочного сока и биопсийного материала.
Результаты. От 116 больных выделили 44 культуры (37,9%) Н. pylori, в виде монокультуры - 4,5%? в составе микробной ассоциации из двух, трех и более компонентов - в 95,5% случаев. Причем в 35 из 44 случаев (79,5%) обнаружили ассоциацию грибов рода Candida. При этом ассоциацию Candida с Н. pylori выявили при хронических гастритах - в 5,7% случаев, язве желудка и 12-перстной кишки - в 42,8%, раке желудка - в 8,6%.
По полученным результатам Candida - H .pylori чаще всего обнаруживали при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки. Причем, если ассоциацию Candida с Н. pylori при язве желудка выявили в 33,3% случаев, то ассоциацию микроорганизмов из трех и более компонентов - в 66,7% случаев. Из них в 53,3% случаев Candida- H. pylori обнаруживали вме-
сте с кишечной палочкой, в остальных случаях (6,7%) - Candida-H. pylori с Proteus, Candida-H. pylori со Staphylococcus и Candida-H, pylori с микрококками. При язве 12-перстной кишки ассоциацию Candida с Н. pylori выявляли в 46,7% случаях, Candida-H. pylori с кишечной палочкой - в 33,3%.
Требуются дальнейшие исследования по изучению ассоциации Candida с Н. pylori с целью выяснения характера взаимоотношений данных микроорганизмов в патогенезе гастроинтестинальных заболеваний.
состояние некоторых показателей колонизационной резистентности полости рта у подростков с рекуррентными орз Генералова Е.В., Пикуза О.И,, Мороз Т.Б. ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет», г. Казань, Россия
status of some colonization resistance characteristics of oral cavity in adolescence with recurrent respiratory diseases Generalova E.V., Pikuza 0.1.. Moroz T.B. Kazan State Médical University, Kazan, Russia
Цель работы - определение состояния некоторых показателей колонизационной резистентности полости рта как индикатора мукозальной защиты у подростков с рекуррентными ОРЗ.
Объекты и методы. Обследовано 113 подростков в возрасте от 13 до 18 лет, перенесших не менее 4-х острых респираторных инфекций за 12 месяцев, предшествовавших обследованию. В группу контроля вошли 25 условно-здоровых^ эпизодически болеющих подростков. Характеристика колонизационной резистентности полости рта включала определение показателя искусственной колонизации буккального эпителия по методу D. Goldman и Е. Goetzl в модификации А. Н. Маянского. Суть метода заключается в подсчете микробных клеток, адгезировавшихся на одном буккальном эпителиоците. Кроме того, определяли антиадгезивную активность слюны (ААС) по методу J. Ofek и Е. Beachey в модификации И. В. Ма-янской с соавт. (1987). Принцип методики состоит в оценке способности слюны больного предотвращать адгезию микробных клеток на буккальные эпителио-циты донора. Для постановки реакций использовали штамм Candida albicans «4» из коллекции Казанского НИИ эпидемиологии и микробиологии.
Результаты. У всех пациентов с рекуррентными ОРЗ отмечали усиленную адгезию С. albicans на бук-кальных эпителиоцитах. Показатель искусственной
колонизации в основной группе составил 13,95±0,46 и почти в два раза превышал контрольные значения - 6,34±0,67, (р<0,001). При изучении антиадгезивной активности слюны было выявлено ее значительное снижение в основной группе — до 0,36±0,03 у.е. (в контрольной группе - 0,69±0,05 у.е., р<0,001). При сравнительном анализе полученных данных у пациентов с различной частотой респираторной патологии показано, что показатели ААС были минимальными в группе подростков с высокой кратностью ОРЗ (8 раз в год и более) - 0,27±0,05 у.е.
Выводы. У подростков с рекуррентными респираторными заболеваниями имеется повышенная готовность слизистых оболочек к адгезии условно-патогенной и патогенной микробиоты.
анализ заболеваемости дерматомикозами у кадровых офицеров за последние 10 лет в 9-й консультативно-диагностической поликлинике мво Герасимчук Е.В., Гладько В.В., Герасимчук М.Ю. 9-я консультативно-диагностическая поликлиника МВО, Государственный институт усовершенствования врачей МО РФ, г. Москва, Россия
mycoses morbidity analysis for the last ten years in 9™ consul! ive-diagnostic polyclinic of the moscow military district in regular officers
Gerasimchuk E.V., Gladko V.V., Gerasimchuk MJ.
9th consultative-diagnostic polyclinics of the Moscow Military District, The State Institute of Improvement of Doctors, Ministry of Education of the Russian Federation, Moscow, Russia
Цель - определить актуальность наличия ми-котической инфекции у пациентов прикрепленного офицерского корпуса на основе анализа ежегодной заболеваемости по кожно-венерологическому отделению 9 КДП за последние 10 лет (с 1999 по 2009 гг.) с учетом структуры впервые выявленных заболеваний.
Описание методов и средств: номерные амбулаторные медицинские карты кадровых офицеров, отчеты ежеквартальные, полугодовые, годовые по кожно -венерологическому отделению.
Результаты. В структуре посещений кадровые офицеры составляли 28,9% в 1999 году, с дальнейшим уменьшением посещаемости ввиду оргштатных мероприятий в Минобороне России до 8,2% в 2009 году. За исследуемый период заболеваемость среди
офицеров кадра такими впервые выявленными дерматозами, как онихомикоз, дерматомикоз на амбулаторном приеме кожно-венерологического отделения составили: 26,3% от общего количества впервые выявленных больных - офицеров кадра в 1999 году, 18,2% - в 2000 г., 9,6% - в 2001 г., 20% - в 2002 г., 15,1%
- в 2003 г., 16,7% - в 2004 г., 17,7% - в 2005 г., 26,7%
- в 2006 г., 21,8% - в 2007 г., 25% - в 2008 г., 22,5% - в 2009 г.
Согласно клинической классификации микозов (по Сергееву А.Ю., Сергееву Ю.В., 2006 г.), такие малассезиозы кожи, как разноцветный лишай и ШШЯЖШЯ'-фолликулит были зафиксировны соответственно: 5,8% - в 2001 г.; 1,1% - в 2002 г.; 6,8% - в
2003 г.; 3% и 1,5% - в 2004 г.; 9,7% и 4,8% - в 2005г.; 2,7% и 2,7% - 2006 г.; 1,4% и 2,9% - в 2007 г.; 5,8% и 3,3% - в 2008 г.; 5,1% - 2009 г. Согласно Методическим указаниям ГВМУ МО РФ «Организация работы военной поликлиники», в 2005 году в структуру грибковых заболеваний входил и розовый лишай, который был выявлен: 9,1% - 2000 г.; 3,9 % - 2001 г.; 4,5%
- 2004 г.; 3,7% - 2005 г.; 4% - 2006 г.; 4,2% - 2008 г. Общая грибковая заболеваемость кадровых офицеров на 1000 человек исследуемого контингента за 20032009 гг. в промилле составила: 21,9%о - 2003 г.; 24,2%о
- 2004 г.; 30,6%а - 2005 г.; 33,3%о - 2006 г.; 23,2%о -2007 г.; 35%о - 2008 г.; 27,6%о -2009 г; заболеваемость онихомикозом и микозом стоп: 5,8%о - 2003 г.; 6%о -
2004 г.; 6,1%о -2005 г.; 11,4%о - 2006 г.; 9,6%о - 2007 г.; 22,5%о - 2008 г.; 16,5%о - 2009 г.
ассоциации актиномицетов и грибов при поражениях кожи лица
1 Глушко Н.И., 'Досовская С.А., 'Халдеева Е.В., 1Сайфиева О.В., 2Усманова С.Р.
казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии, Казань, 2КВД № 3, г. Казань, Россия
associations of actynomyces and fungi at the diseases of face skin
1Glushko N.I., 1Lisovskaya S.A.,1 Khaldeeva E.V., 'Sajfieva O.V., 2Usmanova S.R.
1 Kazan research institute of epidemiology and microbiology; 2Skin-Venereal Dispensary №2, Kazan, Russia
Актиномикоз является одной из причин тяжелых поражений кожи челюстно-лицевой и шейно-лицевой областей. Пациенты, страдающие этим заболеванием, редко обращаются к врачу на ранних стадиях, обычно занимаясь самолечением, что, нередко, приводит к еще большему осложнению процесса, присоединению вторичной грибковой инфек-
ции, что значительно затрудняет диагностику и лечение заболевания.
Цель работы - изучение ассоциаций актиномице-тов с мицелиальными и дрожжеподобными грибами у пациентов с поражениями кожи лица.
Материалы и методы. Обследовано 12 больных с актиномикозом кожи лица в возрасте от 18 до 58 лет, в том числе 6 женщин и 6 мужчин. У всех больных на момент микологического обследования отмечали выраженный воспалительный процесс, наличие инфильтаратов, у 9 больных - гнойные очаги и полости, у 3- множественные свищи.
Посев проводили на тиогликолевую среду (высокий столбик) для выявления факультативно-анаэробной микробиоты (37 °С, 5-7 суток) и обогащенную среду Сабуро с антибиотиками - для грибов (30 °С, 7 суток). Идентификацию грибов и бактерий проводили общепринятыми морфологическими и биохимическими методами.
Результаты. При культуральном обследовании очагов выявили актиномицеты (75%) и родственные микроорганизмы, в том числе Nocardia spp.(25%), Propionibacterium acnes (8,3%) и Corynebacterium spp. (8,3%). Наиболее часто обнаруживали Actinomyces israelii (50%), еще в 3 случаях (25%) видовая идентификация актиномицета была затруднена вследствие скудного роста. В одном случае выявили совместно Actinomyces israelii и Nocardia asteroides. Во всех случаях течение актиномикоза осложнялось грибковой инфекцией, при этом наиболее часто выявляли ассоциации с дрожжеподобными грибами: Candida albicans (50%), С. tropicalis, C.parapsilosis, Rhodotorula mucilaginosa (rubra), Malassezia spp. - по 1 случаю. Следует отметить, что С. albicans не встречалась в ассоциациях с Nocardia spp. и Corynebacterium spp., а наиболее интенсивный рост отмечали совместно с Propionibacterium acnes (10вКОЕ/тампон). Реже выявляли ассоциации с плесневыми грибами (41,7%): Fusarium spp., Scopulariopsis brevicaulis, Aspergillus niger, A. terreus, Paecilomyces varioti. При этом в 2 случаях ассоциации состояли из плесневых и дрожжеподоб-ных грибов. Наблюдали единичный случай ассоциации A. israelii и Trichophyton mentagrophytes.
Вывод. При тяжелых поражениях кожи лица необходимо проведение углубленной диагностики для учета возможных ассоциаций и проведения комплексной терапии.
клинический случай
диссеминированного
споротриксоза
1 Глушко Н.И., Миговская С.А., 'Халдеева Е.В., ^сманова С.Р.
казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии, Казань, 2КВД № 3, г. Казань, Россия
clinical case of disseminated sporgtrixosis
1GlushkoN.I.,1Lisovskaya S.A.,'Khaldeeva E.V.,2Usmanova S.R.
1 Kazan research institute of epidemiology and microbiology; 2Skin-Venereal Dispensary №2, Kazan, Russia
Споротриксоз, обусловленный диморфным грибом Sporothrix shenckii, относят к группе подкожных микозов, однако он может поражать и внутренние органы, в том числе, суставы. Обычно диссеминирован-ная костно-суставная форма споротриксоза поражает крупные суставы - коленный, локтевой, запястье, однако в нашей практике отмечен случай локализации в области суставов пальцев кисти. Природным источником возбудителя инфекции являются почва и растения, преимущественно в странах с теплым климатом, а внедрение возбудителя происходит по механизму травматической имплантации. В связи с этим, наиболее часто заболевание поражает лиц, работающих с природными материалами: флористов, садоводов, огородников. В нашей климатической зоне это заболевание, особенно - в диссеминирован-ной форме, встречается редко, причем диагностика споротриксоза без проведения культурального микологического исследования весьма затруднена.
Объекты и методы. Больная П., 25 лет, на протяжении 10 лет лечилась у дерматолога по поводу болей, отечности суставов 4 и 5 пальцев правой руки, гиперемии кожи, изменения ногтей, при этом заболевание развивалось очень медленно. Длительное время ей ставили диагноз «экзема» и назначали соответствующее лечение, которое практически не влияло на клинические проявления. Поводом для направления на микологическое обследование стало образование свищевого хода на одном из пальцев и распространение отека на 3 палец правой руки. Со слов больной, в период, предшествующий началу заболевания, она участвовала в разборе старого дома, при этом неоднократно травмировала кожу рук.
Посев проводили на агаризованную обогащенную среду Сабуро с добавлением антибиотика (стрептомицин 70 ед/мл). Грибы выращивали при 28-30 °С в течение 7 суток.
Результаты. При культуральном исследовании выявили наличие S. shenckii как в дрожжевой, так и в мицелиальной форме, в количестве Ю4КОЕ/тампон, а также Ю3КОЕ/тампон Aspergillus niger.
По результатам микологического исследования лечащим врачом был назначен итраконазол по 400 мг/сутки. Спустя 6 месяцев клинические проявления значительно уменьшились, однако при повторном микологическом обследовании вновь выявили наличие 5. ¿кеткШ и продолжили лечение итраконазо-лом.
Заключение. Микологическое культуральное исследование является необходимым при кожных и подкожных патологиях неясной этиологии, позволяя провести дифференциальную диагностику и выбрать рациональную терапию.
изучение адгезивного потенциала CANDIDA ALBICANS, выделенных от пациентов с воспалительными заболеваниями дыхательных путей
Годовалое А.П.1,2, Быкова Л.ПЛМоргуненкоА.И.1
пермская Государственная Медицинская Академия им. ак. Е.А. Вагнера, Пермь; 2Медико-Санитарная Часть ГУВД по Пермскому краю, Пермь, Россия
studying adhesion capacity of
CANDIDA ALBICANS isolated from
patients with inflammatory
respiratory diseases
GodovalovA.P.12, Bykova LP.', Morgunenko A.I.1
^erm State Medical Academy, Perm;2Medical Unit of Municipal Department
of Internal Affairs on Perm region, Perm, Russia
Известно, что Candida albicans использует различные механизмы для колонизации клеток человека: коадгезию с бактериями нормальной микробио-ты, влияние продуктов метаболизма на процесс прикрепления через модификацию адгезивных молекул. Однако прочность адгезии С. albicans к соматическим клеткам изучена недостаточно.
Цель исследования - изучение адгезивного потенциала 50 штаммов С. albicans, выделенных от пациентов с воспалительными заболеваниями дыхательных путей.
Материалы и методы. Для изучения адгезивных свойств эритроциты I (0) группы крови смешивали с одномиллиардной суспензией С. albicans и инкубировали при температуре 37 °С. В мазке, окрашенном по Романовскому-Гимзе, подсчитывали количество адгезированных микроорганизмов. Прочность адгезии С. albicans изучали после центрифугирования взвеси микробных клеток и эритроцитов при 1500 об./мин. в течение 10 мин.
Результаты. Показано, что клетки С. albicans имеют адгезивные свойства средней силы, их индекс адгезивности 3,26±0,12, а средний показатель адге-
зии - 1,63±0,03. После центрифугирования взвеси С. albicans и эритроцитов индекс адгезивности статистически значимо снизился до 2,75±0,09 (/><0,05), а средний показатель адгезии - до 1,41±0,05 (/.><0,05). Несмотря на снижение изучаемых показателей, после центрифугирования штаммы остались среднеад-гезивными. После центрифугирования количество не участвующих в адгезии эритроцитов статистически значимо не изменилось (р>0,05), количество эритроцитов, адгезировавших одну дрожжевую клетку, статистически значимо увеличилось (р<0,05); количество эритроцитов, к которым прикрепилось 4 и более дрожжевые клетки статистически значимо снизилось (р><0,05).
Вывод. Штаммы С. albicans, выделенные при воспалительных заболеваниях дыхательных путей, обладают среднеадгезивными свойствами, а дополнительное исследование позволяет выявить истинные адгезивные свойства и исключить случайную адсорбцию.
аденовирусы и CANDIDA sr у детей раннего возраста при дисбиозе кишечника Голошва Е.В., Алешукина А.В.
ФГУН РостовНИИ микробиологии и паразитологии, г.Ростов-на-Дону, Россия.
adenoviruses and CANDIDA sr at children of early age in intestine's disbiosis Goloshva E.V., Aleshukina A.V.
FGUN Rostov Research institute of Microbiology and Parasitology, Rostov-on-Don, Russia
Цель - изучить вирусо-бактериально-грибковые ассоциации при кандидозных дисбиозах у детей раннего возраста
Объекты и методы. Обследовано 110 детей раннего возраста по схеме изучения дисбиоза кишечника согласно ОСТ 2003, и параллельно изучали содержание в копрофильтратах аденовирусов («Адено-тест» ФГУН РостовНИИМП Роспотребнадзора).
Дети были рандомизированы на возрастные группы: 0-3 мес. - 23,7+4,1%; 3-6 мес. - 29,1±4,3%; 6-12 мес. - 16,4±3,5% и старше 1 года - 30,9±4,4%.
Среди обследованного контингента кандидозный дисбиоз был зафиксирован в 28,2±4,3% случаев. При этом по возрастным группам показатели распределились следующим образом: 0-3 мес. - 11,5±3,0%,* 3-6 мес, - 37,5±4,6%; 6-12 мес. - 43,8+4,2% и старше 1 года -26,5±4,2%.
Candida sp. в сочетании со Staphylococcus aureus (48,4±4,8%.) и Proteus sp.(19,4±3,8%) в 100% случаев были обнаружены у детей старше 3 мес.; Candida sp,
в моноварианте встречались во всех возрастных категориях и составляли 32,2±4,5%.
В моноварианте в 80±% случаев были определены Candida albicans. В ассоциациях выявляли в 17,4±3,6% С. albicans и в 82,6±3,6% - нe-albicans виды Candida. Причем, С.albicans в 100% случаев были ассоциированы со S. aureus.
Аденовирусы в сочетании с Candida sp. у обследованного контингента были обнаружены в 76,9±4,0%. Основные ассоциации были 3-компонентные -аденовирусы+ Candida sp.+ S. aureus (42,3+4,7%), преимущественно выявляемые у детей старше 6 мес. и старше 1 года (100%), и 2-компонентные -аденовирусы+Candida sp.(34,6±4,5%), преимущественно обнаруживаемые у детей до 3 мес. (15±3,4%) и старше 6 мес. (26.9±4,2%). В моноварианте Candida sp. встречались в 23Д±4,0% случаев.
Вывод. В результате проведенных исследований установили, что чаще всего кандидозный дисбиоз имел место у детей в возрасте старше 3 мес. При этом у этого контингента в 100% наблюдали ассоциированный дисбиоз с доминирующими ассоциантами - S. aureus и Proteus sp. Преимущественно выявляли нe-albicans виды Candida. Обнаружение аденовирусов у детей при обследовании на дисбиоз кишечника помогло уточнить диагноз в 76,9±4,0% случаев и позволило назначить адекватную схему лечения.
новые микоциногенные штаммы, активные против
CR YP ТО СО С С US NEOFORMANS Голубев В.И.
Всероссийская коллекция микроорганизмов, Пущино, Россия
new mycocinogenic strains with the а n тi - CR YP ТО СО CCUS NEOFORMANS activity GolubevW.I.
The Russia Collection of Microorganisms, Pushchino, Russia
Кнастоящемувремениизвестнымикоциногенные штаммы видов криптококков тремеллового аффинитета - Cryptococcus laurentii и С. podzolicus, микоци-ны которых активны против возбудителя криптокок-коза - С. neoformans (Голубев с соавт., Ж. «Проблемы мед. Микологии»,- 2000. - Т.2, № 3. - С. 39-43). В последние годы в научной литературе описано немало новых видов данного рода, и штаммы некоторых из них были обследованы на наличие микоциногенной активности. В этих анализах использовали глюкозо-пептонный агар с глицерином и цитрат-фосфатным буфером, а тестирование осуществляли методом «культура против культуры». Антифунгальную активность обнаружили у четырех штаммов видов С. nemorosus, С. perniciosus и С. pinus, филогенетиче-
ски принадлежащих, как и С. neoformans, к порядку Tremellales. Эта активность проявляется лишь в диапазоне значений pH среды от 3,5 до 6,5 и максимальна при pH 4,5. Секретируемые найденными активными штаммами фунгицидные вещества с молекулярной массой около 15 кДа термолабильны. Синтез их детерминирован, по-видимому, хромосомными генами, поскольку активность культур сохраняется после обработки их факторами, способствующими элиминации внехромосомных элементов. Эти соединения действуют только против таксономически родственных продуцентам организмов, а именно - членов порядков Filobasidiales и Tremellales. Представители других порядков, классов базидиомицетов к ним нечувствительны, редко - слабо чувствительны, а все проверенные виды аскомицетов оказались устойчивы. Указанные характеристики антифунгальных веществ, секретируемые исследованными штаммами трех видов криптококков, и, прежде всего, таксономическая специфичность чувствительности к ним, позволяет отнести эти внеклеточные соединения к микоцинам (киллер-токсинам). Микоцин С. петого-sus слабо активен против С. neoformans (Filobasidiella neoformans) по сравнению с микоцинами С. perniciosus и С. pinus. В отличие от большинства известных, микоцин последнего вида устойчив к протеолизу, вероятно, вследствие высококомпактной молекулярной структуры.
образование биопленок в популяции CANDIDA ALBICANS под влиянием аутоиндукторов анабиоза
Гордеева С.В., Перунова Н.Б., Иванова Е.В.
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, г. Оренбург, Россия
biofilms formation in CANDIDA ALBICANS population under the autoinducf.r influence of anabiosis
Gordeeva S.V., Perunova N.B., Ivanova E.V.
The Institute for Cellular and Intracellular Symbiosis, OSC, Ural Department of RAS, Orenburg, Russia
Цель работы - изучение популяционной структуры С. albicans по способности формировать биопленки под влиянием аутоиндукторов анабиоза.
Материалы и методы. Материалом для данной работы послужил штамм С. albicans №17, обладающий средними значениями пленкообразования (ПО) (0,124-0,157 ед. ПО), изолированный из фекалий пациента при обследовании на дисбиоз кишечника общепринятыми методами и идентифицированный с использованием тест-систем API20CAUX
(«Biomeriux», Франция). В экспериментах использовали химические аналоги из группы алкилокибен-золов: С7-АОБ и С12-АОБ в концентрациях 0,1; 1,0; 10 мкг/мл. Выделение клонов осуществляли путем рассева суточной бульонной культуры на плотную питательную среду в соответствии с указаниями Дж. Миллера (1976). Образование биопленок исследовали с помощью определения способности штамма дрожжевого гриба к адгезии на поверхности 96-лу-ночной полистероловой планшеты (O'Toole G., 2002). Измерения оптической плотности производили на фотометре ELx808 (BioTek, США).
Результаты. Аутондукторы анабиоза из группы алкилоксибензолов, являясь медиаторами «quorom sensing» бактерий, оказывают влияние на образование биопленок Candida spp. Установлено, что действие С7-АОБ и С12-АОБ на пленкообразование дрожжевых грибов различалось. С7-АОБ оказывал стимулирующие действие на ПО при концентрации 10 мкг/мл: увеличение интенсивности ПО С. albicans наблюдали у 63% клонов в популяции, в среднем, на 71% от исходного уровня оптической плотности. Под действием С7-АОБ в концентрации 0,1 мкг/мл и 1,0 мкг/мл отмечали снижение биопленкообразования у всех клонов С. albicans, в среднем, на 56-62%, соответственно, от исходного уровня ОП. В отличие от С7-АОБ, С12-АОБ в концентрации 0,1 мкг/мл оказывал стимулирующее действие на образование биопленок С. albicans, что проявлялось возрастанием оптической плотности у всех клонов, в среднем, в 1,5-2 раза. Присутствие в среде С12-АОБ в концентрациях 1,0 и 10,0 мкг/мл оказывало незначительный стимулирующий эффект, находящийся в пределах физиологического колебания свойств.
использование особенностей грибкового поражения жилых помещений для решения задач судебной экспертизы Градусова О.Б.\ Ивакушкина Н.Е.2, Кочкина Г.А.2 1 Российский федеральный центр судебной экспертизы при Минюсте России, Москва; Учреждение РАН Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К.Скрябина, Пущино, Россия
use of features fungal contamination of inhabited rooms for the decision of tasks of forensic science Gradusova 0.ВЛ Ivanushkina N.E.2, Kochkina G.A.2 Russian Federal Center of Forensic Science, Moscow; Academician G. K. Skryabin Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms, Pushchino, Russia
В настоящее время при производстве судебных экспертиз и экспертных исследований, связанных с
грибковым поражением жилых помещений, на разрешение эксперта-миколога, помимо прочих, задают вопрос о том, не является ли причиной грибкового поражения «залив» квартиры.
Экспертная практика показывает^ что в московском регионе основными источниками повышенной влажности в жилых помещениях являются: 1) образование конденсата вследствие недостаточного воздухообмена, а также перепада температур, возникающего при низких температурах ограждающих конструкций и наличии «мостиков холода»; 2) протечки водопроводных, канализационных коммуникаций и сетей отопления. Таким образом, для решения задачи по установлению факта грибкового поражения жилого помещения в результате залива водой необходимо, по характеру развития грибов, различить указанные источники увлажнения.
Экспертной практикой показано, что при образовании конденсата увлажнение материалов происходит с поверхности и также - с поверхности в глубину - распространяется грибковое поражение. Состав микромицетов характеризуется наличием преимущественно представителей родов Pénicillium, Cladosporium, Aspergillus.
В случае протечек, после ликвидации их источника, поверхность отделочных материалов высыхает, но влага сохраняется достаточно продолжительное время в подповерхностном пространстве (обычно между обоями и штукатурным покрытием). В этом случае развиваются не только вышеуказанные ми-кромицеты, но и зигомицеты (Mucor spp.), а также образующие плодовые тела базидиомицеты (Copri-nus spp.). Эти грибы обычно колонизируют богатые органическими веществами субстраты
Возможно, выявленные особенности связаны не только с порядком намокания-высыхания материалов, но и с различиями в составе воды. Выпадающий из паров конденсат представляет собой практически дистиллированную воду, в то время как просачивающаяся через перекрытия вода (не говоря уже о канализационных стоках) не может быть чистой.
Перечисленные особенности позволяют установить причины грибковых поражений жилых помещений.
GEO TRI СHUM CANDIDUM В МИКРОБИОТЕ КИШЕЧНИКА Гранстрем Л.Б., Васильев О.Д.
Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
GEO TRI С II UM CANDIDUM IN THE INTESTINAL MICROBIOTA Granstrem L.B.,VasilyevO.D.
Saint-Petersburg State Medical Academy named after LI. Mechnikov, Saint Petersburg, Russia
Geotrichum candidum - широко распространенный природный сапротроф, который может быть комменсалом в составе микробных ассоциаций слизистых оболочек полости рта, ЖКТ, верхних дыхательных путей, мочеполового тракта. Зарегистрированы случаи диссеминированного геотрихоза со смертельным исходом при лейкозах и иммунодефи-цитах, сопровождающихся выраженной нейтропени-ей.
Цель работы - подтвердить циркуляцию G. candidum среди населения, описать выделенный штамм и способы идентификации и подтверждения этиологической роли гриба.
Материалы и методы. Больная N. с жалобами на диспепсические явления и диагнозом «энтероколит» была обследована стандартными микробиологическими методами.
Результаты. У пациентки выявили нормальную микробиоту кишечника со следующими показателями: Е. coli - 107 КОЕ/г, энтерококки - 106 КОЕ/г, бифи-добактерии - 109 КОЕ/г, лактобактерии - 108 КОЕ/г. Патогенные и условно-патогенные бактерии не обнаружены. На среде Сабуро из испражнений выделены гладкие, восковидные, радиально-исчерченные быстрорастущие колонии, на 3-4 день покрывающиеся воздушным мицелием. При микроскопии колоний видны гифы мицелия, распадающиеся на крупные артроспоры (3-4 х 10-15 мкм) с прямоугольными концами. Бластоспоры не образует, сахара пёстрого ряда не ферментирует, уреаза отрицательна. Гриб идентифицирован как G. candidum. При количественном посеве испражнений клетки G. candidum выделяли до разведения 10~3.
Учитывая морфологическое сходство G. candidum и Trichosporon beigelii, для дифференциации этих видов следует использовать такой признак, как отсутствие бластоспор и уреазы у G. candidum. Подтверждение этиологической роли G. candidum возможно при его повторных высевах из испражнений в концентрации более 103 КОЕ/г при наличии клинических симптомов. В данном случае выделение G. candidum мы рассматриваем как носительство, тре-
бующее контроля. Для лечения локализованных случаев геотрихоза рекомендуют применять нистатин, а при генерализованных формах препаратами выбора являются амфотерицин В и триазолы (итраконазол, вориконазол). До назначения лечения следует определять чувствительность выделенного штамма к ан-тифунгальным препаратам.
сенсибилизация к ASPERGILLUS NIGER при рецидивирующем бронхите у детей
Турина О.П., Блинов А.Е., Варламова О.Н., Дементьева Е.А., Тимохина В.И.
Государственная педиатрическая медицинская академия, Санкт-Петербург, Россия
the specific sensibility of children with recurrent bronchitis to ASPERGILLUS NIGER
Gurina O.P., BlinovA.E., Varlamova O.N., Dementeva E.A., Timochina V.I.
Pediatric Medical Academy, Saint-Petersburg, Russia
Рецидивирующий бронхит - одно из самых распространенных заболеваний органов дыхания в детском возрасте. Длительная экспозиция спор плесневых грибов может приводить к сенсибилизации организма, которая сказывается на состоянии иммунного статуса и может влиять на течение бронхита.
Цель работы - выявление специфической сенсибилизации к Aspergillus niger при рецидивирующем бронхите у детей, изучение особенностей иммунного реагирования.
Материалы и методы. Аллергодиагностика (ИФА): 79 детей в возрасте от 5 месяцев до 17 лет, страдающих рецидивирующим бронхитом. Исследование иммунного статуса: иммунологические тесты I уровня. Полученные данные обрабатывали статистически (программа Microsoft Excel).
Результаты. Аллергизацию к A. niger выявили у 92,4% детей, из них низкий уровень сенсибилизации - у 58,9%, умеренный - у 34,2%, высокий - у 6,85%. Концентрация общего IgE в сыворотке крови повышена в 63,3% случаев. Обнаружили умеренную корреляцию (г=0,4) у детей в возрасте 6-9 лет между уровнем общего IgE и степенью сенсибилизации к A. niger. В гуморальном иммунном ответе у 27,9% обследованных детей отмечали дисиммуноглобули-немию. Уровень сывороточного IgA понижен у 16,4% пациентов, повышен - у 19,7%. При этом у детей старше 9 лет сенсибилизация к Л. niger коррелирует с концентрацией IgA (г=0,7). Гипериммуноглобулине-мию М отмечается у 68,9% пациентов и коррелирует с аллергизацией к грибку у детей в возрасте 2-3 лет (г=-0,5) и старше 9 лет (г=0,6). Гипоиммуноглобули-
немию С выявили у 11,5% обследованных. Гиперим-муноглобулинемию С отмечается у 27,9% пациентов и коррелирует с аллергизацией к А. niger у детей старше 9 лет (г=0,9). Патология клеточного иммунного ответа представлена дисбалансом лимфоцитов, нарушением фагоцитоза (дисфункция фагоцитов, незавершенный фагоцитоз). Сенсибилизация к А. niger коррелирует с В-лимфоцитопенией у детей 2-3 лет и Т-лимфоцитопенией у детей старше 9 лет.
Вывод. Сенсибилизацию к А. niger чаще выявляли у детей 2-3 лет с иммунологической предрасположенностью к ОРВИ и сглаженной клинической картиной острой фазы бронхита, а у детей старше 9 лет - при длительном, хроническом течении бронхита с ярко выраженным острым периодом заболевания.
гранулемогенез при экспериментальном кандидозном энцефалите и при применении композиции амфотерицина в с окисленным декстраном
Гусева Е.В.1, Надеев А.ПД Потапова О.В.', Шкурупий B.Â.1
1 ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН,2 ГОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск, Россия
g r а n u l о m о g е n е sis in experimental CANDIDA-encephalitis and its treatment with a composition of amphoteric1n в and oxygenated dextran
Guseva E.V.', Nadeev A.P.2, Potapova O.V.1, Shkurupy V.A.1
1 Scietific centre of clinical and experimental medicine SD RAMS,2 Novosibirsk state médical university, Novosibirsk, Russia
Кандидозное поражение ЦНС характеризуется тяжелым течением и высокой летальностью больных, а их лечение затруднено в связи с ограниченным проникновением лекарственных препаратов через гематоэнцефалический барьер. Для эффективного лечения глубокого кандидоза был предложена композиция из противогрибкового препарата амфоте-рицина В (АВ) и окисленного декстрана, обладающего лизосомотропностью (Шкурупий В.А. и др., 2008).
Цель исследования - изучение особенностей гра-нулематозного воспаления в головном мозге (ГМ) при экспериментальном гематогенном инфицировании мышей клетками С. albicans и при лечении композицией амфотерицина В с окисленным декстраном (КАД).
Материалы и методы. На мышах-самцах линии СВА моделировали генерализованный канди-
доз внутривенным введением С. albicans (штамм РКПГУ-1129/13). Животные были разделены на 4 группы. Мыши 1 группы лечения не получали. Мышам 2 группы внутрибрюшинно на следующий день вводили АВ в дозе 250 ЕД/кг, мышам 3 группы - 0,2 мл окисленного декстрана, мышам 4 группы - КАД в одинаковой с АВ дозе. Забор образцов ГМ проводили на 1, 3, 7, 10, 28 сутки после инфицирования.
Результаты. У мышей 1 группы на 1-е сутки в головном мозге наблюдали гранулемы, состоящие из нейтрофилов с примесью лимфоцитов и моноцитов, в центре - мицелий грибов. Численная плотность гранулем на всех сроках наблюдения была значительно выше, чем в других группах, и к 10 суткам уменьшалась в 46 раз, к 28 суткам все животные погибали. У мышей 2 группы от 3 суток к 10 суткам количество гранулем уменьшалась в 12,5 раз, исчезая к 28 суткам. При введении окисленного декстрана (3 группа) и КАД (4 группа) на 3-е сутки количество гранулем было меньшим в 6 раз и 2 раза, соответственно, в сравнении с аналогичным показателем в тот же период наблюдения у мышей 1-й группы, и полностью исчезали к 28 суткам.
Вывод. Согласно полученным результатам выявили большую эффективность КАД и окисленного декстрана при лечении экспериментального грану-лематозного кандидозного энцефалита у мышей в сравнении со свободным АВ.
эффективность использования активированного цинка пиритион в виде шампуня «скин-кап» в лечении себорейного дерматита и себорейной алопеции Джетписбаева З.С.
Кафедра дерматовенерологии АО «МУА» Астана, Казахстан
effective use of activated zinc pyrithione as a shampoo «skin-сар» in the treatment of seborrheic dermatitis and seborrheic alopeci a Dzhetpisbaeva Z.S.
Chair of dermatovenerology A0"MUA", Astana, Kazakhstan
Проблеме себорейного дерматита и себорейной алопеции посвящено много исследований, доказана роль малассезиозной инфекции в патогенезе этих дерматозов, о чем свидетельствуют данные о положительном лечебном эффекте различных антими-котиков. Активированный пиритион цинка имеет несколько взаимодополняющих фармакодинами-
ческих эффектов, обусловливающих его эффективность при различных дерматозах, ассоциированных микробной и микотической инфекцией.
Объекты и методы. В группу пациентов с диагнозом «себорейный дерматит» и «себорейная алопеция» включили 33 человек (19 женщин и 14 мужчин) в возрасте от 15 до 52 лет. Больные были разделены на две подгруппы: первая - пациенты, получавшие монотерапию шампунем «Скин-кап»; вторая - пациенты, получавшие комплексное лечение с включением актовегина и шампуня «Скин-кап»,
Результаты. Под влиянием лечения на 5-е сутки зуд прекратился у 22,6% больных, шелушение - у 58,1%. К концу 2-й недели у 45,2% больных приостановилось выпадение волос, к концу 4-й недели клиническое выздоровление наблюдали у всех больных.
Вывод. Применение пиритиона цинка при алопеции и себорейном дерматите позволило добиться эффекта как в комплексной терапии, так и в монотерапии.
роль грибковой патологии в развитии ониходистрофии при гнезд ной алопеции Джетписбаева З.С., Батпенова Г.Р.
Кафедра дерматовенерологии АО «МУА» Астана, Казахстан
role of fungal diseases in the onihodistrofy development w1th alopecia arfata Jetpisbaeva Z.S., Batpenova G.R.
Chair of dermatovenerology JSCo" MUA", Astana, Kazakhstan
У больных с заболеваниями волос, а именно с гнездной алопецией, достаточно часто встречаются ониходистрофии, которые порой определяют тяжесть течения процесса. С целью исключения грибковой ассоциации целесообразно проведение микроскопических исследований ногтевых пластин.
Объекты и методы. Обследовали 35 больных с гнездной алопецией в возрасте от 11 до 47 лет, из которых у 11 был диагностирован офиаз, у 24 - субтотальная форма.
Результаты. У обследованных пациентов в 11,3% случаев выявили трахионихию кистей и стоп, в 50,9% (у лиц в возрасте от 14-21 лет) - продольные борозды; в 15,7% - онихорексис ногтевых пластин пальцев кистей, а в 8,7% - кистей и стоп; в 13,4% - точечную истыканность ногтей. Из 35 больных у 4 (11%) выявили грибковую инфекцию: в 3 случаях обнаружили Candida sp., в 1 случае - Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale.
Вывод. Таким образом, ониходистрофии чаще имеют место при тяжелых формах гнездной алопеции. Микроскопическое исследование для исклю-
чения грибковой патологии является обязательным компонентом диагностики.
МЕХАНИЗМ АН1ИФУ НГААЬНОГО
ДЕЙСТВИЯ ПРОИЗВОДНОГО
АДАМАНТАНА ЮК-23
Дудикова Д.М.1, Врынчану H.A.1, Короткий Ю.В.2
ТУ «Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины», г. Киев, Украина,2 Институт органической химии HAH Украины, г. Киев, Украина
THE MECHANISM OF THE
ANTIFUNGAL ACTION OF THE
ADAMANTANE DERIVATIVE UK-23
Dudykova D.M.\Vrynchanu N.A.', KorotkiY.V.'
4SI «Institute of Pharmacology and toxicology IJAMS», Kiev, Ukraine, 2lnsitute of Organic Chemistry UNAS, Kiev, Ukraine
Широкое применение в клинической практике противогрибковых препаратов способствует появлению резистентных к их действию видов грибов. В связи с этим, поиск веществ с выраженной антифун-гальной активностью является актуальной задачей фармакологии. В этом отношении особого внимания заслуживают производные адамантана. Адамантан-содержащие вещества проявляют широкий спектр биологической активности, в том числе - антимикробные свойства. Так, выраженные антифунгаль-ные свойства обнаружили у соединения ЮК-23. К нему чувствительны дрожжеподобные, плесневые грибы и дерматомицеты. Минимальная подавляющая концентрация (МПК) по отношению к Candida spp. (С. albicans, С. tropicalis, С. glabrata, С. parapsilo-sis) составляет 0,07-0,6 мкг/мл в зависимости от вида грибов. Механизм ингибирующего действия адаман-тансодержащих веществ в настоящее время не установлен.
Цель работы - изучить влияние ЮК-23 на синтез эргостерина грибов С. albicans.
Методы исследования. Эксперименты проводили по отношению к С. albicans NCTC 885/653. Уровень эргостерина в гептановых экстрактах клеток С. albicans определяли спектрофотометрически (Крей-ер и др., 1993) в диапазоне волн 200-300 нм (262, 271, 282, 293 нм) через 24 ч после добавления изучаемого соединения. Концентрация соединения ЮК-23 составила 5,0 МПК (0,35 мкг/мл), плотность инокулята - 104 грибных элементов на 1 мл питательной среды.
Результаты. При действии соединения ЮК-23 в концентрации 5,0 МПК регистрировали уменьшение биомассы С. albicans по сравнению с контролем на 98%, При спектрофотометрическом анализе гептановых экстрактов показано, что содержание эргостерина увеличивается в 48 раз (в пересчете на биомассу) по сравнению с контролем.
Выводы. Адамантансодержащее соединение ЮК-
23 стимулирует образование эргостерина у С. albicans, как и полиеновые антибиотики В дальнейшем необходимо изучить возможность химического взаимодействия ЮК-23 с эргостерином.
ВИДОВАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ НОВОРОЖДЕННЫХ В Г. РЯЗАНИ
Евдокимова О.В., Коноплева В J„ Бирюков В.В., Карпова Т.И., Люлина Е.В., Федотова Г.Н., Родионова Е.А.,Ульшина И.А., Бобылева Н.В.
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии МУЗ городская больница №5 «Консультативно-диагностический центр», Рязань, Россия
SPECIES CHARACTERISTIC OF М ICR О ORGANISM S ISOLATED FROM CLINICAL MATERIAL FROM NEWBORNS IN RYAZAN
Evdokimova O.V., Konoplyeva V.l., BiryukovV.V., Karpova T.I., Lyulina E.V., FedotovG.N. Rodionova E.A., Ulshina I.A., Bobyleva N.V.
Department of Microbiology, Virology and Immunology, MUZ City Hospital № 5 «Consultative and Diagnostic Center», Ryazan, Russia
Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний разной локализации у новорожденных чаще всего являются условно-патогенные микроорганизмы (УПМ). Педиатры активно используют микробиологические исследования для установления этиологической роли УПМ.
Материалы и методы. Исследовали смывы со слизистых оболочек носа, зева, гнойное отделяемое из глаз, ушей, пупочной ранки от 4210 новорожденных. Ежегодно в лабораторию «Консультативно-диагностического центра» направляют более 150 тыс. проб. Выделение или отсутствие роста условно-патогенных микроорганизмов в клиническом материале не является решающим при постановке диагноза, но в отдельных случаях оказывает неоценимую помощь лечащему врачу при выборе препаратов для этиотропной терапии. Уровень бактериологически подтвержденных диагнозов сравнительно высок и составляет до 60,6%.
Анализ обширного материала по результатам проведенных микробиологических исследований позволяет проводить мониторинг видового состава основных патогенов в регионе, их чувствительность к используемым антибактериальным препаратам.
Результаты. Среди выделенных микроорганизмов из материалов, взятых из различных биотопов, в последние два года преобладали стафилококки -33,5%. (SI aureus, S. epidermidis, S. gallinarum, S. hae-molyticus). Все большее значение приобретают энте-
рококки (E.faecalis, E.faecium): с 8,9% - в 2005 году до 18,2% - в 2006 году. Третье место занимают Candida spp. - 14,7%, затем следуют энтеробактерии, стрептококки и прочие условно-патогенные микроорганизмы. Среди выделенных возбудителей, относящихся к семейству Enterobacteriaceae, лидируют Escherichia spp. (35,1-40%), Kluyvera (23,1-16,1%), Enterobacter (14,7-15,25), Klebsiella (9,3-11,1%).
В патологии новорожденных наибольшее этиологическое значение имеют стафилококки (54,4%), энтерококки (22,6%), энтеробактерии (12,9%), Candida spp. (2,95), Pseudomonas aeruginosa (1,4%); доля других условно-патогенных микроорганизмов незначительна - до 0,6%. Чаще всего от новорожденных детей при нагноительных заболеваниях выделяют микробные ассоциации двух и трехкомпонентные. Ассоциации представлены сочетанием: стафилококк и энтеробактерии - 43,9%, стафилококк и энтерококк - 12,9%, стафилококк и грибы -12,2%. Известно, что в ассоциации микроорганизмы усиливают свои вирулентные свойства, устойчивость к противобак-териальным препаратам.
В клиническом материале при воспалительных заболеваниях женских половых органов чаще всего обнаруживали Candida spp. - 25,3%, на втором месте энтеробактерии -20,7%, затем энтерококки - 14,3% и стафилококки - 6,9%,
Заключение. Проблема гнойной инфекции в хирургии остается актуальной. В спектре возбудителей лидируют стафилококк - 39,5% и энтеробактерии -39,0%. Доля других возбудителей, таких как Pseudomonas aeruginosa, Candida spp., Acinetobacter spp. не превышает 3,5%.
Спектр возбудителей при острых и хронических воспалительных заболеваниях дыхательных путей имеет особенности:
♦ острая пневмония - возбудителей обнаружили в 34,1% случаев (S. pneumoniae, Enterobacter, Е. coli, Klebsiella, S. aureus и др. в порядке убывания);
♦ хроническая пневмония - положительные находки составили только 8% (Candida spp.);
♦ хронический бронхит - положительными были 36,6% (S. pneumoniae, Candida spp., Enterobacter sp., S. aureus);
♦ острый бронхит и бронхиальная астма, соответственно: анализов - 25,5% и мокроты - 34,8% {S. pneumoniae, Candida spp., S.aureus);
♦ эмпиема легкого - 33,3% (Candida spp., S. pneumoniae);
♦ абсцесс легкого, бронхопневмония и плеврит соответственно: в 24,5%, 37,7% и 28,5% исследований были выделены возбудители; наиболее часто причиной заболеваний были S. pneumoniae, Candida spp.
новое в таксономии CANDIDA
species
Еликов Н.П.
ПИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина Г0УДП0СП6 МАП0, Санкт-Петербург, Россия
news in the taxonomy of
CANDIDA
YelinovN.P.
Kashkin Research Inst, of medical mycology, SEI APE SPb MAPE Saint Petersburg, Russia
Таксономия - составная часть, или субдисциплина систематики, и представляет собой науку о классификации грибов, содержание которой сводится к установлению соподчинённости отдельных групп грибов в ряду: Вид —> Род —> Семейство и т.д., каждый из которых именуют таксоном.
Род Candida относят к Домену (Надцарству-
Supraregnum) Eukaryota,
Царству (Regnum) Fungi,
Отделу (Division, Fylum) Ascomycota,
Подотделу (Sub-Division, S\xb-^yhxm) Ascomycotina,
Классу (Classis) Saccharomycetes,
Подклассу (Subclassis) Ascomycetidae,
Порядку (Ordo) Saccharomycetales,
Семейству (Family) Saccharomycetaceae,
Роду (Genus) Candida,
Виду (Species) albicans.
И если ранее признавали основными возбудителями кандидоза, главным образом, пять следующих видов - С. albicans, С. guilliermondii, С. krusei, С. pseudotropicalis (ныне - С. kefyr) и С. tropicalis, то теперь наиболее часто называют возбудителями 19-20 нижеследующих видов Candida (анаморфы): africana, albicans, albicans var. stellatoidea, catenulate, ciferrii, dubliniensis, famata var. famata, famata var. flareri, glabrata, guilliermondii, kefyr, krusei, lipolytica, lusitaniae, norvegensis, parapsilosis, pelliculosa, tropicalis, viswanathii, zeylanoides.
Частота выделения тех или иных видов зависит от региона и эпидемиологических ситуаций. Обычно виды Candida - космополиты. Привожу пример с кандидемией, сообщённый Дэвидом Эллисом из Аделаиды (Австралия), выявленной в 2002-2004 гг. у 944 пациентов (таблица 1).
Таблица 1.
Candida species у пациентов с кандидемией в 2002-2004 гг. в Австралии
Candida: Число пациентов % Candida: Число пациентов %
albicans 447 47,3 tropicalis 46 4,9
parapsilosis 182 19,3 dubliniensis 22 2,3
glabrata 167 17,8 quilliemondii 11 1,2
krusei 46 4,9 Другие виды 23 2,3
Из других видов названы С. lusitaniae - 8 случаев (0,8%), С. kefyr - 5 случаев (0,5%), С. pelliculosa - 3 случая (0,3%), С. rugosa - 2 случая (0,2%), С. colliculosa, С. famata, С. inconspicua, С. lípolytica, С. fabianii - по 1 случаю (по 0,1 % или всего 0,5 %).
Общее число известных видов сравнительно быстро нарастает в последние годы. Если, например, в 1989 г. в определителе дрожжевых организмов Куртцмана К.П. и Фелла Дж.У. описано 163 вида Candida, то к 2010 г. данный род возрос до 743 видов (Index Fungorum). В сравнимой мере возросло и число синонимов. Так, в 1954 г. Конант Н.Ф. и его коллеги отметили, что для С. albicans описано 190 синонимов и, очевидно, к сожалению, и ныне насчитывают столько же синонимов, отдельные из которых описаны, например, в 1960,1962, 1970 гг. Очевидно, следует исключать из списка синонимов давно устаревшие и не упоминаемые ни в никакой связи названия.
В последние 10-15 лет получены важные данные по генетике ряда представителей рассматриваемого рода. С. albicans содержит 8 хромосом, способных к переустройству как средству, генерирующему генетическое разнообразие, реципрокрых транслокаций, хромосомных делеций, а также трисомии индивидуальных хромосом. Прежде всего, эти данные получены на штаммах С. albicans SC 5314, сиквенирован-ном в Стэнфордском Центре ДНК-сиквенирования и технологии, и WO 1, сиквенированном коллективом сотрудников the Broad Institute of MIT & Harvard. Характеристика свершений по геному С. albicans и связанных с ними диморфизму и гетерозиготности будут продемонстрированы в докладе.
«ЛАМИЗИЛ УНО» В ПРАКТИКЕ ЛЕЧЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ МИКОЗОВ СТОП ЕшимовУ.Е.,ТохтиеваЗ.А.
Алматинский областной кожно-венерологический диспансер, г.Алматы, Казахстан
формам: 18 - с интригинозной, 7 - со сквамозной, 4 - со стертой и 1 - с дисгидротической. Клинический диагноз во всех случаях был подтвержден лабораторными микологическими методами. Пленкообразующий раствор наносили на обе стопы однократно в соответствии с инструкцией. Контроль лечения включал динамику клинических проявлений и лабораторное исследование на 7 и 10 день. Эффективность «Аамизила УНО» расценивали так: полное клиническое и микологическое выздоровление.
Результаты. У всех больных положительную динамику со стороны клинических проявлений отмечали на 3 сутки. Через 7 и 10 дней, соответственно, у 29 (97%) и 1 (3%) пациентов отмечали клинико-микологическое выздоровление. Все пациенты переносили лечение хорошо, побочных проявлений не наблюдали.
Выводы. Достигнуто 100% клинико-микологи-ческое излечение при минимальном сроке применения препарата. «Ламизил УНО» хорошо переносится больными, лечение не сопровождалось побочными эффектами. Полученные данные служат основой для рекомендации «Аамизила УНО» к более широкому применению в качестве эффективного и безопасного препарата для лечения интригинозной, стертой, сквамозной и дисгидротической форм микоза стоп.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНТРАВАГИНАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ КЕТОКОНАЗОЛА С ЦЕЛЬЮ ПРОФИЛАКТИКИ РЕЦИДИВА ХРОНИЧЕСКОГО РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО КАНДИДОЗА ГЕНИТАЛИЙ, ОБУСЛОВЛЕННОГО НЕ-ALBICANS ВИДАМИ CANDIDA SPP. Жорж О.Н., Мирзабалаева А.К.
НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина Г0У ДП0 СПб МАП0 Росздрава, Санкт-Петербург, Россия
«LAMISIL UNO» IN THE TREATMENT ОЕ SUPERFICIAL FEET MYCOSES Eshimov U.E., Tokhtiyeva Z.A.
Almaty Regional Skin and Venereal Diseases Dispensary, Kazahstan
Цель исследования - изучение клинической эффективности и переносимости 1% пленкообразующего раствора тербинафина - «Аамизила УНО» в лечении микозов стоп. Лечение проводили на базе Алматинского областного кожно-венерологического диспансера.
Объекты и методы. Под наблюдением находилось 30 больных (19 мужчин и 11 женщин) с диагнозом «микоз стоп» с давностью заболевания от 1 до 12 месяцев. Распределение больных по клиническим
EFFECTIVENESS OF 1NTRAVAGINAL KETOCONASOLE FOR PREVENTION OF CHRONICAL RECURRENT VULVOVAGINAL CANDIDOSIS CAUSED BY NON-ALBICANS SPECIES OF CANDIDA Zhorzh O.N., Mirsabalaeva A.K.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology of SEI APE SPb MAPE, Saint-Peterburg, Russia
Актуальность. Хронический рецидивирующий кандидоз гениталий (ХРКГ) у женщин представляет собой особую форму заболевания, при которой отмечают не менее четырех эпизодов обострения в течение одного года. Диагностика и лечение ХРКГ,
обусловленного Candida albicans, широко освещены в клинической практике. Частота ХРКГ, вызываемого не-albicans видами Candida, составляет от 10 до 15%. Принципы лечения ХРКГ, обусловленного не-albicans видами Candida, недостаточно разработаны.
Цель исследования - изучить эффективность и безопасность интравагинального применения ке-токоназола для профилактики рецидива ХРКГ, обусловленного не-albicans Candida spp.
Материалы и методы. В открытое сравнительное клиническое исследование было включено 30 пациенток с ХРКГ, обусловленным не-albicans видами Candida spp. (медиана возраста - 33,8±8,7). Группу «исторического» контроля составили 220 женщин, получавших антифунгальное лечение только для купирования рецидива ХРКГ. Диагноз ХРКГ верифицирован на основании выявления почкующихся дрожжевых клеток и псевдомицелия при микроскопии соскобов из пораженных слизистых оболочек и роста колоний Candida spp. при микологическом исследовании. Видовую идентификацию возбудителей ХРКГ проводили с использованием тест-систем Auxacolor-2 и Fongiscreen-4h. Чувствительность выделенных культур к флуконазолу in vitro определяли диско-диффузионным методом (протокол CLSI М-44А). Для профилактики рецидива ХРКГ применяли вагинальные свечи, содержащие 400 мг кето-коназола - 5 дней (после очередной менструации). Лечение выполняли на протяжении шести менструальных циклов. Оценку эффективности и безопасности антимикотической терапии проводили через б и 12 месяцев от начала профилактики рецидива ХРКГ.
Результаты исследования. Возбудителями ХРКГ, обусловленного не-albicans видами Candida, были С. krusei (27%), С. tropicalis (26%), С .glabrata (23%), С. dubliniensis (10%), С. parapsilosis (7%) и С. kefyr(7%). Чувствительными к флуконазолу были 56% штаммов Candida spp., 44% штаммов имели измененную чувствительность: 17% - дозозависимо чувствительны (С. glabrata, С. kefyr), 27% Candida spp. - резистентны к флуконазолу in vitro (все изоляты С. krusei). Эффективность профилактического интравагинального применения высоких концентраций кетокана-зола через 6 месяцев составила 93%. Нежелательные эффекты отмечали у одной больной. Дальнейшее наблюдение (180 дней) после окончания профилактического лечения свидетельствовало о стойкой ремиссии ХРКГ у 87% женщин. Продолжительность ремиссии у больных ХРКГ, обусловленного не-albicans видами Candida, составила 10,2±0,6 месяца, в группе «исторического контроля» - ремиссия существенно менее продолжительна (2,0±0,9 месяца).
Выводы. Интравагинальное применение 400 мг кетоконазола по разработанной методике является эффективным, безопасным методом профилактики рецидива, увеличивает продолжительность ремиссии в течение года у 87% больных ХРКГ.
©
сравнение морфо-биологических свойств при спонтанной изменчивости популяций штаммов рода ASPERGILLUS - продуцентов аллергеноактивных веществ Журавлева Н.П., Васильева Н.В., Чилина Г.А., Соловьева Г.И. НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Г0УДП0СП6 МАП0, Санкт-Петербург, Россия
com pa rison of morpho-biological characteristics düring the spontaneous variability of strains in populations of ASPERGILLUS -producent of allergen - active substances
Zhuravleva N.P.,Vasiiyeva N.V., Chilina G.A., Solovjova G.l.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEIAPE SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
Исследование изменчивости грибов в популяциях представляет интерес для медицины в случаях, когда микромицеты выступают этиологическими агентами микоаллергических заболеваний. Изменчивость патогенных грибов сказывается на своеобразии клинических проявлений соответствующих заболеваний, причем фенотипы сменяются в течение одной системной, например, Candida-инфекции у больных группы риска. Аспергиллы могут быть причиной аллергических заболеваний органов дыхания человека, таких как аллергического бронхолегочного аспергиллеза, бронхиальной астмы и экзогенного аллергического альвеолита.
При специфической сенсибилизации организма антигенами грибов необходимо иметь специфические высокоактивные и стандартные препараты для микоаллергодиагностики.
Задача настоящего исследования - сравнить изменчивость клонов по маркерам морфологии колоний и активности прорастания конидий в популяции штаммов 2-х видов аспергиллов: А. fumigatus и А. clavatus, полученных ранее в результате селекции исходных (музейных) штаммов в период 14-17 лет.
Цель изучения - показать перспективность селекционированных штаммов рода Aspergillus, сравнивая их по стабильности, специфичности, рентабельности, в связи с возможностью их дальнейшего использования в технологии изготовления тест-систем для микоаллергодиагностики.
Материалы и методы. Объекты исследования -3 штамма А. fumigalus. Генеалогия: исходный штамм (ИШ) РКПГ - 157/2308, выделенный от больного, се-
лекционированные (СШ) при изучении естественной изменчивости популяции штаммов: 157/2308/32 - в 2001 г., 157/2308/32/87 - в 2009 г. в процессе многоступенчатой селекции и в период хранения с 1992 по 2009 гг. А также 3 штамма А. clavatus: ИШ РКПГ -12/275 - в 1995 г. - из коллекции БИНА, СШ - при изучении спонтанной изменчивости популяций штамма - 12/275/75 - в 2009 г. Отбор клонов из моноспорового рассева популяций штаммов проводили при использовании методов прикладной генетики и селекции.
Морфологию колоний (МК) грибов изучали на агаризированной среде Чапека Докса, выделяя по 500 колоний каждого штамма. Изменчивость интенсивности прорастания конидий (ПК) исследовали в жидкой среде Сабуро с 4% глюкозы и добавлением органического азота. Из популяции каждого штамма просмотрено, в среднем, по 100 клонов. С целью отбора активных клонов по интенсивности ПК провели статистическую обработку результатов. СШ проверены на стабильность изучаемых свойств в ряде генераций. При сравнении естественной изменчивости в популяциях ИШ и СШ А. fumigatus и А. clavatus в течение длительного времени отмечены следующие показатели по МК и ПК.
Результаты. Популяция А. fumigatus СШ и ИШ по макроморфологии была представлена двумя типами колоний: типичными - I типа и нетипичными
- II типа. У СШ I тип составлял 74,6%, II - 25,4%. У ИШ процент II типа в 1,5 раза превышал данные СШ
- 37,9%. Популяция А. fumigatus как СШ, так и ИШ
- гетерогенна. Необходимо отметить, что в результате многоступенчатой селекции процент нетипичных колоний в популяциях СШ значительно уменьшился, что дало возможность на 3-ем этапе селекции отобрать типичные МК, стабильные в ряде генераций.
Популяции СШ А. clavatus при многоступенчатой селекции так же, как ИШ состояли из одного морфологического типа колоний (100%), что показало гомогенность популяций А. clavatus по маркеру МК в исследуемых генерациях.
При статистической обработке полученных данных показана значительная интенсификация активности ПК СШ, в сравнении с ИШ, как у А. fumigatus, так и у А. clavatus. Частота клонов по интенсивности ПК у СШ А. fumigatus, в сравнении с ИШ, выросла на 19,1% (в 1,5 раза), а у А. clavatus - на 40% (в 1,8 раза). Размах изменчивости увеличился в сторону активности ПК как у А. fumigatus, так и у А. clavatus на 20%. Увеличился также модальный класс в сторону активности ПК у А. fumigatus на 20%, у А. clavatus
- на 40%. Средняя арифметическая интенсивности ПК возросла как у А. fumigatus на 28,5% (в 1,8 раза), так и у Л. clavatus - на 14,5% (1,5 раза). У СШ обоих видов аспергиллов выявлен большой потенциал активности ПК. В результате у А. fumigatus селекционированы 4 штамма с интенсивным ПК от 85 до 90%, что составляет превышение над ИШ - 48-53%. У А. clavatus селекционированы также 4 штамма с ПК от
83 до 93%, что превысило среднюю активность ИШ на 49-59%. Показана стабильность СШ А. fumigatus и А. ЫауаШя по маркерам МК и ПК в ряде генераций, а также специфичность и рентабильность, что дает возможность использования их, в перспективе, для наработки отечественных микоаллергопрепаратов.
Выводы. На примере сравнения спонтанной изменчивости популяций штаммов А. fumigatus и А. с^а1ш по маркерам МК и интенсивности ПК показана необходимость периодической многоступе-чатой селекции, т.к. каждая ступень ведет к гомогенности популяции по МК, интенсификации ПК и стабилизации этих маркеров.
Помимо возможного практического применения, полученными селекционированными высокоактивными и стабильными штаммами пополнена коллекция музейных штаммов - продуцентов аллергенов в банке чистых культур грибов в НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина СПб МАПО.
спонтанная изменчивость популяций штаммов ASPERGILLUS CLAVATUS desmazieres - продуцентов аллергенов
Журавлева Н.П., Васильева Н.В., Чилина Г.А., Аак О.В. Соловьева Г.И.
НИИ Медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Г0У ДП0 СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
the spontaneous variability ое strains in populations ОЕ ASPERGILLUS CLAVATUS desmazieres - producents ое allergens
Zhuravleva N.P., Vasiiyeva N.V., Chilina G.A., Aak0.V., Solovjova G.l.
Kashkin Research Institute of Medical Mycologyof SEIAPESPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
В настоящее время общепризнано, что компоненты клеток микромицетов являются мощными сенсибилизирующими агентами, вызывающими развитие гиперреактивности практически всех типов. В большинстве случаев при аллергических заболеваниях дыхательных путей имеет место IgE-опосредованная гиперреактивность I типа. Однако нередки случаи (в основном, это касается профессиональных заболеваний), когда патогенез заболевания определяется антителами других классов, образующими иммунные комплексы. Так, А. clavatus является этиологическим агентом развития экзогенного аллергического альвеолита у лиц, работающих с солодом («легкие пивовара»).
В связи с этим, для исследования нами были взяты штаммы А. clavatus, входящие в банк культур -
продуцентов аллергенов. Поставленная перед нами задача заключалась в изучении естественной изменчивости клонов в популяциях исходного (ИШ) и селекционированных штаммов (СШ), полученных нами при ступенчатой селекции в течение 14 лет по маркерам морфологии колоний (МК) и интенсивности прорастания конидий (ПК).
Цель исследования - отбор из популяции микро-мицетов А. с1а\>а1ин штаммов - продуцетов аллергенов - высокоактивных и стабильных по маркерным свойствам, в связи с необходимостью получения стандартных, специфических и высокоактивных препаратов для микоаллергодиагностики.
Материалы и методы. Объекты исследования
- 3 штамма: исходный РКПГ - №12/275-1995 г., поступил из коллекции БИНА, селекционированные -при изучении спонтанной изменчивости популяций штамма №12/275/72 - 2002 г., №12/275/72/31 - 2009 г. Штаммы входят в банк культур - аллергопродуцен-тов и хранятся в коллекции грибов НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина.
Свойства клонов из моноспорового рассева популяций штаммов изучали с применением генетико-селекционных методик. Спонтанную изменчивость МК изучали на агаризованной модифицированной среде Чапека Докса (3% сахарозы заменили на 2% глюкозы), рН - 6,3, после выращивания при 28 "С в течение 7 суток. Из популяции каждого штамма было выделено, в среднем, по 500 колоний. Изменчивость интенсивности ПК исследовали при 27 "С в жидкой питательной среде Сабуро с 4% глюкозы и добавлением органического азота, с постоянным встряхиванием пробирок на шуттель-аппарате в течение 24 часов. Из популяции каждого штамма выделили, в среднем, по 109 клонов. Количество ПК подсчитывали в % к их общему числу в 10 полях зрения микроскопа МБИ-15. С целью отбора наиболее активных клонов по маркеру интенсивности ПК провели статистическую обработку результатов по методу сумм. Селекционированные варианты проверяли на стабильность изученных свойств в ряде генераций.
Результаты. При изучении естественной изменчивости свойств МК ИШ и СШ за длительный период выявили гомогенность популяции по морфологическому типу колоний. Популяция состояла из одного морфологического типа. На среде Чапека с глюкозой колония росла 7 суток, плотно-войлочная, белого цвета, воздушный мицелий зеленовато-голубоватый, концентрировался в центре колонии. Обратная сторона желтого цвета. При микроскопии конидиенос-цы гладкие, бесцветные, шириной 16 мкм, длиной до нескольких мм. Головка конидиеносца вытянутая
- эллиптическая, 32x60 мкм. Стеригмы однорядные, плотностоящие - по всей поверхности головки, 7x2-Змкм. Конидии округлые, эллиптические, гладкие, 4x6 мкм, слегка голубоватые.
При оценке спонтанной изменчивости свойств клонов в популяции ИШ и СШ по активности ПК выявили следующие показатели: на 3-ей ступени селек-
ции у СШ (в сравнении с ИШ) увеличился размах изменчивости от 0 до 100% (СШ-12/275/72/31), от 0 до 80% - (ИШ - 12/275). У СШ незначительно, но уменьшился коэффициент вариации на 2,4%. Так, у СШ большая часть по количеству активных клонов находится в широком интервале модального класса (Мкл) - от 40% до 80%, а у ИШ - от 20 до 40%. При этом Мкл у СШ сдвинулся в сторону значительной активности ПК на 20% (12/275/72) и на 40% (12/275/72/31) в сравнении с ИШ (12/275). Если в популяции ИШ (12/275) в интервале Мкл находятся 47% клонов с активностью до 40%, то у СШ (12/275/72) на второй ступени селекции в Мкл - 52% клонов с активностью до 60%, а у СШ (12/275/72/31) на третьей ступени селекции в Мкл - 30% клонов с высокой активностью до 80%, остальные 8% с активностью до 93%. Средняя арифметическая СШ на 3-ем этапе селекции выросла в 1,5 раза (на 14,5%) в сравнении с ИШ. По проведенной оценке статистических данных выделили клоны с высокой активностью от 83 до 93%, что превысило среднюю активность ПК ИШ на 49-59% соответственно.
Селекционированные штаммы стабильны, при проведенных исследованиях, по маркерам МК и высокой активности ПК в ряде генераций.
Выводы. В результате многоступенчатой селекции и поддерживающих пересевов за период 14 лет в популяции А, clavatus наблюдали гомогенность клонов по МК и увеличение интенсивности ПК, а также стабилизацию этих свойств гриба. СШ специфичны, стабильны и рентабильны благодаря вышеуказанным маркерам. Вновь полученные 4 селекционированных высокоактивных штамма пополнили банк музейной коллекции - продуцентов аллергенов. В перспективе эти штаммы могут быть использованы в технологии создания отечественных тест-систем для микоаллергодиагностики.
два случая микотического кератита у пациентов с онихомикозом
Заславский Д.В., Оловянишников О.В., В. Куликова С.Ю., Власова М.В., Алексеев Р.Д
Педиатрическая медицинская академия Санкт-Петербург, Россия
two cases of m ycotic keratitis in patients with onychomycosis
Zaslavsky D.V., Olovyanishnikov O.V., Kulikova S.Yu, Vlasova M.V., Alekseev R.D.
Pediatric Medical Academy, St. Petersburg, Russia
Цель - демонстрация редких клинических случаев микотического поражения роговицы глаза.
Объекты и методы. Больной С,, 69 лет. Жалобы: значительное снижение зрения, «туман» в правом глазу, дискомфорт и ощущение инородного тела в
глазу,Vis OD = 0,25. Лабораторная диагностика: при посеве с роговицы были обнаружены Fusarium spp. и дрожжи. Те же возбудители присутствовали при посеве соскобов с ногтей. Диагноз основной: «Ке-ратоувеит. Язва роговицы, обусловленная Fusarium spp., с перфорацией»; сопутствующий: «Онихомикоз кистей и стоп». Лечение: инсталляции в правый глаз - офтальмоферон 4р/д, дикло-ф 3 р/д, атропин 2 р/д, полудан 2 р/д, флоксал 5 р/д, мезатон 3 р/д, витабакт 3 р/д клотримазол 4 р/д, тетрациклиновая мазь 3 р/д. Внутривенно: реамберин 1 р/д, циклоферон 2 р/д, метрогил 3 р/д .Для спасения глаза потребовалось хирургическое лечении. Была выполнена пластика роговицы теноновой капсулой. Всего больной находился на отделении 22 дня. В настоящее время пациент правым глазом практически не видит.
Больная Ж., 65 лет. Жалобы: значительное снижение зрения, боли в правом глаз, светобоязнь,Vis OD = 0,05. Лабораторная диагностика: при посеве с роговицы были обнаружены дрожжевые грибы рода Candida, тот же возбудитель присутствовал при посеве соскобов с ногтей. Диагноз основной: «Грибковая язва роговицы с перфорацией»; сопутствующий: «онихомикоз кистей и стоп». Лечение: инсталляции в правый глаз - цикломед 3 р/д, атропин 2 р/д, ин-даколлир 5 р/д, тобракс 5 р/д, офтаквикс 2 р/д, витабакт 3 р/д, корнерегель 5 р/д, хлоргексидин 4 р/д. Внутривенно: реамберин 1 р/д, гентамицин 2 р/д, цефазолин 2 р/д, метрогил 3 р/д, диклофенак 1 р/д. Хирургическое лечение: пластика роговицы теноновой капсулой. Исход: больная находилась в офтальмологическом стационаре 33 дня. В настоящее время зрение в правом глазу практически отсутствует.
Вывод. В приведённых случаях мы видим стремительное развитие грибковой инфекции, попавшей с ногтей пальцев рук на роговицу, у пожилых людей с риском потери глаза и исходом в почти полную потерю зрения на один глаз.
роль микробиоты в развитии хронических синуситов у вич-инфицированных пациентов Затолока П.А.
Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Беларусь
носа у ВИЧ-инфицированных больных с хроническим синуситом.
Объекты и методы. В исследовании приняло участие 337 взрослых пациентов, состоящих на учете в диспансерном кабинете городской клинической инфекционной больницы г. Минска по поводу ВИЧ-инфекции. У 36 больных при повторных осмотрах выявили прогрессирование заболевания и констатировали переход в последующую стадию. Таким образом, за время наблюдения (с августа 2007 года) прогрессирование иммунодефицита у 36 (11%) пациентов потребовало пересмотра стадии заболевания, всего осмотров - 373. Обследовано 212 (62,9%) мужчин и 125 (37,1%) женщин. Средний возраст
- 24,8 ±4,9 года, максимальный - 51 год, минимальный - 18. Распределение пациентов по стадиям ВИЧ-инфекции (ВОЗ, 2004): 1 стадия - 156 пациентов, 2 -83,3-113,4-21.
Результаты. В целом, по выборке выявили 62 случая хронического синусита. На первой стадии вирусного иммунодефицита хронический синусит диагностировали у 7 (4,5%) пациентов, на второй -у 21 (25,3%), на третьей - у 28 (24,8%), на четвертой
- у 6 (28,6%). Микробиологическое исследование выполнили у 22 пациентов (с первой стадией ВИЧ-инфекции - у 5, второй - у 7, третьей - у 6, четвертой - у 4). Грибковую микробиоту обнаружили у 10 (45,4%) из них, в том числе Candida albicans - у 5, нe-albicans виды Candida - у 4, Cryptococcus lau-rentii - у 1. Из 5 микробиологически обследованных больных хроническим синуситом на первой стадии ВИЧ-инфекции грибы выявили у 1 (20%), из 7 на второй - у 2 (28,6%), из 6 на третьей - у 3 (50%), из 4 на четвертой (СПИД) - у 4 (100%).
Выводы:
1. Распространенность хронического синусита у ВИЧ-инфицированных лиц значительно варьирует (от 4,5% до 28,6%) в зависимости от степени иммунодефицита.
2. Грибковую микробиоту верифицировали у 45,4% ВИЧ-инфицированных больных с хроническим синуситом.
3. Частота выявления грибов при микробиологическом обследовании слизистой оболочки полости носа у ВИЧ-инфицированных больных с хроническим синуситом составила 20% на первой стадии заболевания, 28,6% - на второй, 50% - на третьей и 100% - на четвертой.
a role of mycobiota in development of chronic sinusitis among hiv-infected people
Zatoloka P.A.
Belarusian State Medical University, Minsk, Belarus
Цель исследования - определить распространенность микобиоты на слизистой оболочке полости
сравнительный анализ видового состава грибов, выделенных из воздуха больничных помещений на этапах окончания строительства и начала функционирования многопрофильного стационара
Иванова Л.В., Баранцевмч Е.П., Гоик В. Г., Жиховский C.B., ШляхтоЕ.В.
ФГУ «Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова Росмедтехнологий», Санкт-Петербург, Россия
comparative analysis of the species composition of fungi isolated from the air of hospital facilities at the stages of completion and launch of the multi-hospital
Ivanova L.V., Barantsevich E.P., Goic V.G., Zhihovsky S.V., Shlyakhto E.V.
FGI «Federal Centre of Heart, Blood and Endocrinology named after V.A. Almazov Rosmedtechnology», Saint-Petersburg, Russia
Проблема контаминации больничных помещений микромицетами становится все более актуальной. Грибы как возбудители нозокомиальных инфекций занимают одно из первых мест по частоте летальности от вызываемых ими заболеваний у иммуноком-прометированных больных. Основной путь заражения спорами грибов - аэрогенный. Кроме того, они являются значимыми аллергенными агентами, некоторые виды продуцируют опасные микотоксины.
Цель данного исследования - оценка качественного и количественного состава микобиоты больничных помещений до открытия и после начала функционирования многопрофильного стационара.
Объекты и методы. Исследовали помещения операционных, процедурные и перевязочные хирургических отделений, палаты ОРИТ, палаты отделений гематологии. Отбор воздуха производили аспирационным методом с помощью прибора air IDEAL(BioMerieux). Пробы воздуха отбирали на чашки Петри со средой Сабуро. Посевы инкубировали в термостате при двух температурных режимах - 28 °С и 37 °С в течение 7 дней. Затем определяли количество и таксономическую принадлежность выросших грибов по общепринятым методикам.
Результаты. Количество микромицетов в воздухе исследуемых помещений до открытия стационара укладывалось в диапазон от 90 до 125 КОЕ / м3. После открытия отделений количественный показатель колебался в пределах от 10 до 80 КОЕ /м3.
Видовой спектр до открытия стационара был
представлен следующими грибами: Penicillum spp., Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, Aspergillus fla-vus, Aspergillus Candidus, Scopularopsis brevicaulis, Trichosporon spp., Cladosporium spp. Наиболее частыми контаминатами воздуха внутри обследуемых помещений были грибы родов Penicillum (60%) и Aspergillus (20%).
По результатам обследования была проведена дезинфекционная обработка помещений хлорсодер-жащими биоцидами. По завершении дезинфекции помещений выполнили контрольное исследование воздушной среды. Обсемененности помещений грибами не выявили.
После начала функционирования стационара в обследуемых помещениях спектр микроорганизмов изменился и был представлен следующими родами: Penicillum (70-90%), Rhizopus (5-20%), Aspergillus (510%). Неоднократно высевали A. niger в условиях температурного режима 37 °С. До открытия стационара данный вид рос только при температуре 28 °С, что косвенно свидетельствует о его возможной па-тогенности.
Вывод. Необходимо обследовать строящиеся многопрофильные стационары для выявления степени контаминации воздуха грибами, потенциально патогенными для иммунокомпромитированных пациентов, как на этапе окончания строительных работ, так и в период функционирования чистых помещений, что позволит целенаправленно проводить дезинфекционную обработку и более рационально осуществлять эпидемиологический контроль вну-трибольничных инфекций.
антагонистические свойства LACTOBACILLUS spp. относительно штаммов CANDIDA spp., выделенных от новорожденных детей ИвахнюкТ.В., Каплин Н.Н. Сумский государственный университет, г. Сумы, Украина
antagonistic properties of LACTOBACILLUS spp. to CANDIDA spp. isolated from newborns Ivakhnjuk T.V., Kaplin N.N.
Sumy State University, Sumy, Ukraine
Цель нашего исследования - изучение антагонистической активности различных штаммов Lactobacillus spp. относительно Candida spp., выделенных от новорожденных детей.
Материалы и методы. Для изучения антагонистической активности использовали метод совместного (Lactobacillus spp. и Candida spp.) культивирования на поверхности плотной питательной среды в
виде смешанного газона. Для контроля делали посев 104 КОЕ/мл Candida spp. в монокультуре. Для достижения цели исследования были проведены 3 серии опытов совместного культивирования: 1 серия (n=20) - Candida spp., выделенные от новорожденных, рожденных через естественные родовые пути, и Lactobacillus spp., выделенные из фекалий обследуемого новорожденного; 2 серия (n=20) - Candida spp., выделенные от новорожденных, и Lactobacillus spp., выделенные из слизистой оболочки влагалища матери обследуемого новорожденного; 3 серия (п=20) - Candida spp., выделенные от новорожденных, и Lactobacillus spp., полученные из препарата «Лакто-бактерин сухой».
Результаты. При подсчете максимального количества КОЕ Candida spp. после 1 серии опыта установили, что эта величина снижается, по сравнению с контролем, в 1,5 раза у 80% штаммов С. albicans, в 2 раза - у 60% С. krusei и С. tropicalis, в 2,5 раза - у 40% С. kefyr.
Анализируя результаты 2 серии опыта, мы выявили статистически достоверные различия в чувствительности грибов рода Candida, выделенных от новорожденных, к вагинальным штаммам Lactobacillus spp. Так, 40% штаммов С. albicans, 60% - С. krusei и С. kefyr были чувствительны к лактобациллам, выделенным от матерей. При количественном учете КОЕ С. tropicalis после 2 серии опыта обнаружили, что 80% штаммов С. tropicalis были не чувствительны к вагинальным Lactobacillus spp. Данные показатели значительно отличались в 3 серии опыта. Антагонистический эффект Lactobacillus spp., полученные из препарата «Лактобактерин сухой», оказывали на 100% штаммов С. krusei и С. kefyr и на 80% штаммов С. tropicalis и С. albicans. На наш взгляд, данные 3 серии исследования имеют практическое значение при выборе средства лечения и профилактики кандидоза.
разработка мази с метиаеновым синим для лечения вагинального кандидоза
Камаева С.С.,Файзуллина Е.В., Стяжкина В.Н., Камаев А.А.
Казанский государственный медицинский университет, Казань, Россия
the working out of ointment with methylene blue to treat vaginal candidosis Kamayeva S.S., Faisullina E.V., Styazhkina V.N., Kamayev A.A.
Kazan State Medical University, Kazan, Russia
Кандидоз является наиболее распространённым грибковым заболеванием, причём заболеваемость вагинальным кандидозом, основным возбудителем которого является Candida albicans, в последние
годы резко возросла. Лечение грибковых поражений влагалища затруднительно, особенно - в период беременности. Фармакотерапия кандидозного вульвовагинита включает общее и местное лечение фунгицидными средствами. Однако при беременности и общее, и местное лечение антимикотическими препаратами, в частности азольными антимикоти-ками, не рекомендуется, а при необходимости разрешается только в первом триместре беременности. В связи с этим заслуживает внимания метиленовый синий - антимикробный препарат из группы красителей, проявляющий выраженное антимикотическое действие в отношении С. albicans при местном применении в виде 1-3 % водных растворов, не оказывая серьёзных побочных эффектов при беременности. Следует отметить, что применение в виде водных растворов для смазывания влагалища крайне неудобно, так как водные растворы не способны длительно задерживаться на слизистой оболочке влагалища ввиду их низкой вязкости.
Цель нашей работы - разработка мази с метиле-новым синим для местного лечения вагинального кандидоза.
Материалы и методы. Были изготовлены 2% мази на гидрофильных основах, перспективных для применения в гинекологии - 8% геле натрийкарбок-симетилцеллюлозы и смеси полиэтиленоксида-1500 с глицерином в соотношении 7:3. Степень высвобождения метиленового синего из мази определяли микробиологическим методом диффузии в агар по зонам торможения роста С. albicans. Взвесь культуры гриба, полученного из ГИСК им. Л. А. Тарасевича, наносили на чашку Петри со средой Сабуро, куда затем в лунки диаметром 8 мм вносили образцы мази в количестве 0,2 г. Чашки термостатировали в течение 14 суток. Результаты оценивали по зонам торможения роста тест-микроорганизма.
Результаты. Наилучшие результаты и максимальное антимикотическое действие были получены при высвобождении метиленового синего из мазей на основе 8%-ного геля натрийкарбоксиметилцеллю-лозы, при этом наблюдали полное торможение роста С. albicans, что позволяет рекомендовать данную мазь для лечения вагинального кандидоза.
факторы персистенции грибов рода CANDIDA, выделенных из разных биотопов
'Капустина О.А.,2Карташова О.Л.,3Чайникова И.Н., 'Пашинин Н.С.
1 Оренбургский ГАУ; ^Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН;3Оренбургская Государственная Медицинская Академия, Оренбург, Россия
гне factors of persistent by
CANDIDA spp, isolated erom
different biotopes
'Kapustina O.A., 2Kartashova O.L., 3Chaynikova I.N., 'Pashinin N.S.
'Orenburg State Agrarian University; 2lnstitute of Cellular and Endocellular Symbiosis UrO Russian Academy of Science;3 The Orenburg State Médical Academy, Russia
Цель - изучение факторов персистенции грибов рода Candida, выделенных из разных биотопов тела человека.
Материалом послужили 152 штамма Candida spp., выделенных из кишечника, репродуктивного тракта, нижних дыхательных путей и слизистой оболочки ротовой полости. Выделение и идентификацию проводили по Р.Н. Ребровой (1989). Факторы персистенции определяли иммуноферментным методом: антилактоферриновую активность (АЛфА) -по методике И.В. Валышевой с соавт. (2003), антиим-муноглобулиновую активность (АИгА) - по методу И.Н. Чайниковой с соавт. (2005).
Результаты. Способность грибов к инактивации лактоферрина зависела от биотопа выделения. В кишечнике максимальное значение АЛфА отмечали у С. tropicalis (293,3±3,42 нг/мл), и значение признака уменьшалось в ряду С. albicans (148,8±30,10 нг/мл) —» С. glabrata (118,17±25,24 нг/мл) С. kefyr (95,5±6,17 нг/мл) —> С. krusei (86,33±3,48 нг/мл). В репродуктивном тракте максимальное значение АЛфА отмечали у С. albicans (259,2±64,07 нг/мл), минимальное - у С. krusei (86,3±3,48 нг/мл). В дыхательной системе высокими значениями признака характеризовались С. albicans (293,0±35,05 нг/мл) и С. glabrata (235,5±41,96 нг/мл), а активность С. kefyr и С. tropicalis была значительно ниже (112,25±1,67 нг/мл и 60,0±4,71 нг/мл). Штаммы С. albicans и С. glabrata, выделенные из ротовой полости, обладали высокими значениями антилактоферриновой активности (194,0±25Д2 нг/мл и 180,0±53,03 нг/мл). Таким образом, выраженность АЛфА Candida spp. убывала в ряду: репродуктивный тракт (202,3 нг/мл) —> ротовая полость (187,0 нг/мл) —» кишечник (148,46 нг/мл) н> дыхательная система (129,36 нг/мл).
Способность грибов к инактивации IgA также зависела от биотопа выделения. Штаммы Candida
spp., выделенные из дыхательной системы, проявляли максимальное значение АИгА - 15,88%. Выраженность признака убывала в ряду: ротовая полость (10,25%) —> репродуктивный тракт (9,97%) —> кишечник (8,79%).
Вывод. Для всех изученных штаммов Candida spp. характерно наличие АЛфА и АИгА, выраженность которых определяется нахождением в определенном биотопе.
формирование С AN DIDА-стафилококковых биопленок на материале катетера Караев 3.0, Мамедова Л.Р.
Кафедра микробиологии и иммунологии, А М У, Баку, Азербайджан
the formation of CANDIDA-staphylococcal biofilm on catheter material Karaev Z.O., Mamedova L.R.
AM U, Department of Microbiology and Immunology, Baku, Azerbaijan
В научной литературе описаны данные о формировании смешанных Сйягйгй-бактериальных биопленок на мочевыводящих катетерах, однако они не позволяют судить о последовательности развития событий при образовании смешанных биопленок, что затрудняет понимание патогенетических аспектов микст-инфекций.
Цель исследований - изучение особенностей Candida, -бактериальных биопленок, вызванных С. albicans и S. epidermidis.
Материалы и методы. В работе использовали штаммы С. albicans и S. epidermidis, выделенные из мочи больных с хронической инфекцией мочевыде-лительных путей (ИМИ). Для формирования биопленок С. albicans применяли суспензию клеток гриба, содержащую 1107 КОЕ/мл, для формирования биопленок S. epidermidis - 1,2 10s КОЕ/мл. Биопленки выращивали на диске диаметром 0,5 см, полученном из поливинилхлоридного катетерного материала фирмы «Rush».
Результаты. Выявили, что образование Candida-стафилококковых биопленок на катетере зависит от последовательности формирования биопленок, образованных монокультурами исследуемых микроорганизмов. При первичном образовании биопленки С. albicans бактериальный агент интенсивно адгези-ровал к биопленке гриба с последующим развитием Candida-бактериальной биопленки, где около 43% клеток составляли культуры гриба С. albicans, другие 57% - S. epidermidis. В случае первичного образования бактериальной биопленки С. albicans не адгези-ровал к бактериальным биопленкам, и через 48 часов после совместного культирования клеток гриба с
биопленками S. epidermidis, которые почти целиком (на 96,8%) состояли из бактериальных клеток.
Одновременное формирование смешанных биопленок путем инкубации катетерных дисков со смесью С. albicans и S. epidermidis не столь заметно увеличивало количество гриба в биопленках.
Из полученных данных следует, что первичное формирование Candida-nA.ew.OK на материале катетера в наибольшей степени предрасполагает к образованию смешанных биопленок, состоящих из С. albicans и S. epidermidis.
исследование содержания иммуноглобулинов и титры антител к CANDIDA ALBICANS в слюне у больных оральным кандидозом Караев 3,0., Гасанова Ф.М,
Кафедра микробиологии и иммунологии, Азербайджанского Медицинского Университета Баку, Азербайджан
stady of quantity iмmunoglobulins and titer of antibodies to CANDIDA ALBICANS in saliva of patients with oral candid osis KaraevZ.O.,Qasanova F.M.
Azerbaijan Medical University, Department of Microbiology and Immunology Baku, Azerbaijan
Одной из наиболее часто встречающихся клинических форм кандидоза является поражение грибами рода Candida слизистых оболочек полости рта -оральный кандидоз (OK). Патогенез OK - сложный, многие аспекты его остаются не ясными.
Цель работы - изучение особенностей изменения содержания иммуноглобулинов и титров антител к С. albicans у больных OK и Candida-носителей.
Материалы и методы. Обследовано 123 человека в возрасте от 14 до 80 лет, из них: 36 (I группа) -группа контроля, 42 - Candida-носители (II группа) и 45 - больные OK (III группа). В каждой группе, в зависимости от возраста пациентов, было выделено три подгруппы: подгруппа «А» - дети от 5 до 14 лет, подгруппа «Б» - пациенты от 14 до 55 лет, подгруппа «В» - лица в возрасте от 56 до 80 лет. Концентрации иммуноглобулинов в слюне определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа, титры специфических антител - в реакции непрямой имму-нофлуоресценции.
Результаты. Основное количество иммуноглобулинов относилось к slgA. Среди контрольных лиц (подгруппы А, Б, В) достоверных различий в концентрации этого slgA не выявили, хотя в подгруппе детей (I А) содержание его было ниже, чем у взрос-
лых; у больных III Б и III В подгрупп уровень slgA составил 0,52±0,065 г/л и 0,46±0,0069 соответственно, у детей IA slgA был в пределах 0,35±0,042 г/л. Более выраженный уровень slgA обнаружили у детей подгруппы IIА - носителей Candida в ротовой полости и III А - больных OK (до 0,29±0,052 г/л и 0,27±0,055 г/л). У больных OK (III В), напротив, выявили значительное (Р<0,05) увеличение концентрации slgA по сравнению с контролем (IB). У всех пациентов с OK в ротовой жидкости наблюдали увеличение содержание IgA и IgG (Р<0,05), что, по-видимому, связано с локальной трансдукцией белков из циркуляции. В слюне при этом значительно снижалось соотношение IgA/IgG. Так, в контрольных подгруппах обследованных пациентов соотношение «slgA/IgG» составляло от 5,6±0,57 до 7,4±0,69, в то время как у больных OK - от 1,6±0,21 до 3,2±0,39.
У всех больных OK титры антител в ротовой жидкости значительно (Р<0,05) превышали контрольные показатели, при этом в максимальном количестве (Log 3,7±0,27) антитела к С. albicans выявляли у больных старшего возраста (подгруппа III В), что, по-видимому, свидетельствует о выраженности ин-вазивного микотического процесса.
современные особенности де рм атом и козо в, индуцируемых TRICHOPHYTON spp. и MICROSPORUM spp. Карибаева А.Т., Аскарова Г.К., Алимкулова А.И. Научно-исследовательский кожно-венерологический институт ГККП «Кожно-венерологический диспансер», Алматы, Казахстан
modern peculiarities of fungal infections caused by TRICHOPHYTON spp. and MICROSPORUM spp. Karibayeva A.T., Askarova G.K., Alimkulova A.I. Dermato-Venerologica! Reserch Institute, Dermato-venerologic hospital, Almaty, Kazakhstan
Одной из причин высокой заболеваемости трихофитией и микроспорией является несвоевременное распознавание этих микозов, протекающих нередко в виде атипичных форм. Клиническая картина при трихофитии волосистой части головы может напоминать гранулематозный кандидоз, импетигинозную форму фавуса, инфильтративно-нагноительную форму микроспории, глубокий стафилококковый фолликулит, абсцедирующий и подрывающий фолликулит и перифолликулит головы Гоффмана, келоидные угри, экзему, псориаз и бляшечный парапсориаз. У некоторых больных может преобладать выраженное шелушение кожи головы при минимальной воспалительной реакции, и тогда заболевание дифференци-
руют с себорейным дерматитом. При наличии более выраженного очагового выпадения волос при поверхностной трихофитии волосистой части головы дифференциальную диагностику проводят с очаговой алопецией, трихотилломанией, вторичным сифилисом. По данным Потекаева H.H. (2000), микроспория волосистой части головы и гладкой кожи, обусловленнаяMicrosporum amis, протекала на фоне хронического кожно-слизистого кандидоза, иммунодефицита и эндокринопатии. В этих случаях микроскопическая и культуральная диагностика микозов приобретают наибольшую значимость, особенно для выявления латентных форм и носительства дермато-мицетов здоровыми людьми.
Материалы и методы. Было проведено микроскопическое исследование патологического материала от 78 больных трихофитией и микроспорией, пролеченных в ГКВД с 2002 по 2007 гг.
При исследовании материала от больных антро-понозной трихофитией волосистой части головы, лобковой области и гладкой кожи, вызванной Trichophyton violaceum, у 88,4% больных выявили поражение волос по типу крупноспорового эндотрикса, у 11,6% — имелись нетипичные для этого вида гриба изменения.
Для трихофитии, обусловленной Т. violaceum, характерны дихотомически ветвящийся септиро-ванный мицелий, цепочки полигональных мегаспор внутри волоса. У некоторых больных трихофитией в области гладкой кожи лица и шеи был найден мицелий вне волоса, расположенный в кожных чешуйках. У больных поверхностной трихофитией гладкой кожи и волосистой части лобковой области при исследовании чешуек и волос, взятых с поверхности очагов, обнаружили мицелий Trichophyton species (■endothrixj. В отдельных сегментах мицелий вне волоса, одновременно со спорами, тесными рядами заполнял волос. В других случаях мицелий был в виде цепочек интеркалярных хламидоспор. При исследовании кожных чешуек из очагов поражения выделяли скопления грибов в виде войлока, формы гриба характеризовались выраженным полиморфизмом, иногда напоминающим рост гриба в чистой культуре.
В ряде случаев у больных с атипичным течением микоза волосистой части лобковой области и пахово-бедренных складок обнаруживали нити мицелия вне волоса, однако при посеве материала выявляли Epidermophyton floccosum (!?).
У одного больного с клинической картиной инфильтративно-нагноительной трихофитии волосистой части головы наблюдали поражение волос по типу microides ectothrix, а при культуральном исследовании был выделен Microsporum canis (!?).
Согласно полученным результатам, можно говорить о полиморфизме антропофильных грибов. Из исследованных нами культур трихофитонов, Т. violaceum выделяли в 28,6% случаев. Наряду с типичными культурами, наблюдали бесцветные или беловато-
желтые (Т, РшОЬш&Ю уаг. ,фаЬтШт}) колонии от 1 см до 2,5-3 см. Иногда колонии образовывали белые пушистые участки. В молодых колониях мицелий был ровный, септированный, ветвящийся, при созревании становился шире, клетки округлялись, постепенно превращаясь в цепочки из хламидоспор. Наряду с ветвящимся фрагментированным, четкоо-бразным мицелием с хламидоспорами, встречался дихотомически ветвящийся мицелий, окруженный грануляционной тканью, формировались гигантские многоядерные клетки, вытянутые вдоль мицелия с ветвлением под прямым углом.
Некоторые культуры отличались значительным полиморфизмом. Морфологические элементы оставались неизменными, изменялась окраска колоний - от бесцветных до светло-сиреневых, а в процессе длительного хранения некоторых культур проявлялась их опушистенность.
Заключение. В приведенных данных показана частота встречаемости вариантов культур Т. ую1а-сеит, а также необходимость учета возможности полиморфизма и плеоморфизма при проведении куль-туральной диагностики дерматомицетов. Вероятно, вышеуказанное объясняет тот факт, что, наряду со специфичностью клинических проявлений, обусловленных тем или иным трихофитоном, установлено, что один и тот же возбудитель (фиолетовый трихо-фитон) может воспроизвести различные клинические картины заболевания (обычная поверхностная трихофития гладкой кожи, хроническая поверхностная трихофития, аллергические формы).
способ выделения
возбудителей трихофитии и
микроспории
Карибаева А.Т., Байдусекова А.У.
Научно-исследовательский кожно-венерологический институт, Казахская государственная медицинская академия, Алматы, Астана, Казахстан
the way of isolation and identification of fungal infections caused by TRICHOPHYTON spp. and MICROSPORUM spp. Karibayeva A.T., Baiduisenova A.U,
Dermato-Venerological Reserch Institute, Kazakh State Medical Academy, Almaty, Astana, Kazakhstan
Установлено, что среди возбудителей трихофитии и микроспории наиболее часто выделяемыми видами являются Microsporum canis (34,1%), Trichophyton violaceum (28,6%), Trichophyton mentagrophytes (11,2%), Trichophyton tonsurans (9,6%) и другие (16,5%). Основным возбудителем антропофильной
трихофитии являлся Т. violaceum, на долю которого приходилось 28,6% от всех возбудителей микозов за изучаемый период. С 2003 года имеет место тенденция к росту регистрации данного возбудителя, и к 2007 году количество выделенных культур возросло в 4,6 раза.
Для выделения и идентификации грибов используют плотные и жидкие питательные среды Сабуро, сусло-агар. Однако с их использованием не всегда удается идентифицировать вид гриба-возбудителя. Недостатком среды является медленный рост выделяемых культур, что приводит к длительным срокам определения вида гриба.
Мы использовали питательную среду со специальной добавкой для селективного культивирования и выделения дерматомицетов в целях сокращения сроков выделения культуры. В основу агара входили следующие ингредиенты в г/л: папаиновый перевар соевой муки - 10,0; глюкоза - 10,0; феноловый красный - 0,20; агар-агар - 20,0. В модифицированную селективную добавку для дерматомицетов входили: хлортетрациклин - 50,0 мг; гентамицин - 50,0 мг; амфотерицин В - 5,0 мг. Папаиновый агар соевой муки обеспечивает среде питательные вещества, содержащие азот и углерод, глюкоза служит источником энергии. Вводимый в среду циклогексимид подавляет рост грибов-сапробионтов, гентамицин подавляет рост грамотрицательных бактерий, включая псевдомонад, хлортетрациклин - широкий круг грамположительных и грамотрицательных бактерий.
На среде с селективной добавкой рост грибов наблюдали на 2-4 сутки, идентификация возможна на 5-7 день в зависимости от вида гриба. В отличие от этого, рост грибов на стандартной среде Сабуро регистрировали с 5 по 7 сутки, а культуры идентифицировали на 7-9 день.
Таким образом, использование данной среды приводит к раннему выделению и распознаванию представителей родов Microsporum и Trichophyton, а также позволяет провести предварительную идентификацию дерматомицетов.
иммунокомпетентные клетки
и цитокины в иммунном
ответе при дерматомикозах
Карибаева А.Т., Кустова Е.А., Уразалиева Н.Т.
Научно-исследовательский кожно-венеролотический институт; Научный центр педиатрии и детской хирургии, лаборатория иммунологии, Алматы, Казахстан
immunocompetent
cells and cytokines in
immunoresponsiveness by
dermatomycoses
Karibayeva A.T., Kustova Y.A., Urazaliyeva N.T.
Dermato-Venerological Reserch Institute, Science centre of Pediatric, Almaty,
Kazakhstan
Данные научной литературы об экспериментальном и клиническом изучении различных имму-нокомпетентных клеток и цитокинов (колониести-мулирующие факторы, интерферон-гамма, интер-лейкины-4, 10, 12,15,18, ФНО-альфа) для лечения и профилактики грибковых инфекций ограничены лишь несколькими исследованиями, противоречивы и недостаточны.
Цель работы - изучить показатели общего иммунного ответа и ранние цитокиновые реакции у больных дерматомикозами.
Материалы и методы. Обследовано 56 больных дерматомикозами (из них 21 - с микроспорией и 35 -с трихофитией). Контрольная группа состояла из 11 здоровых человек того же возраста. Критериями диагностики считали сочетание клинических признаков, данных микроскопии и выделение возбудителя при посеве материала. Определение основных популяций лимфоцитов проводили с помощью лазерной проточной цитометрии с применением моноклональных антител с помощью «двойной метки». Анализ образцов проводили на проточном цитофлуориметре FacsCalibur (Becton Dickenson, USA) в программе Cel-lQuest. Для статистической обработки результатов использовали компьютерную программу Biostat.
Результаты. Средние стандартные значения CD95+54+ у больных дерматомикозами были достоверно ниже по сравнению с показателями пациентов из контрольной группы (t=0,286,p=0,777). Показатель CD3 достоверно снижался у больных по сравнению с здоровыми лицами (t=2,172, р=0,033). Значения CD4 были достоверно снижены (t=4,001, р=0,000) у больных дерматомикозами, a CD8 повышены (t= 1,594, р 0.115). Соответственно, ПРИ (CD4:CD8) был достоверно ниже у больных дерматомикозами по сравнению с пациентами из контрольной группы (t=4,759, р=0,000). Фагоцитарный индекс и фагоцитарное число достоверно снижались (t=2,531, р=0,016), (t=4,062,
р=0,000) соответственно. Продукция интерферона-гамма была повышена (1=2,050, р=0,051). В то же время, продукция интерлейкина-10 была достоверно снижена, а выработка интерлейкина-4 повышена у больных по сравнению с здоровыми лицами (1=2,240, р=0,034), (1=0,392, р=0,698) соответственно. Отмечали повышение показателей Н1,А-1Ш+, 1чЧ<( 16+56+), 1ц(л. Установили снижение значений (!1)3+1Ж+, ега+ык+((:ш+а)1б+5б+), ^а, ^м.
Выводы. У больных дерматомикозами до лечения было установлено снижение активированных клеток и молекул адгезии, Т-лимфоцитов, Т-хелперов, поглотительной функции лимфоцитов, интерлейкина-10, и повышение Т-цитотоксических лимфоцитов, иммунного интерферона и противовоспалительного цитокина. Данное исследование иммунного и цитокинового профиля является основанием для назначения иммунокоррегирующего лечения больным дерматомико зами.
атипичные варианты
зооантропонозных форм
трихофитии и микроспории
Касымов 0,И.,Амакджанов М.Р,,ТаджибаевУ.А.
Кафедра дерматовенерологии института последипломной подготовки медицинских кадров, Душанбе, Таджикистан
atypical variants of zooanthroponosal trichophytosis and microsporia Kasymov 0., Amakzhanov M., Tadzhibaev U.
Department of dermatology & venereology, Institute of postgraduate medical education, Dushanbe,Tadjikistan
Цель работы - изучить особенности распространения и клиники зооантропонозных вариантов трихофитии и микроспории с атипичной локализацией.
Материал и методы. Под наблюдением находилось 50 больных (мужчин - 36, женщин - 14) в возрасте от 20 до 40 лет, обратившихся в Согдийский ОЦКВБ в 2009 г. Трудовых мигрантов было 33 (46%) человека, частных предпринимателей - 7 (14%), служащих - 4 (8%), домохозяек - 10 (20%), работников коммерческого секса - 3 (6%), военнослужащих - 3 (6%). Супружеских пар было 8. 37 (74%) больных вели беспорядочный половой образ жизни. Диагноз микоза устанавливали микроскопическим обнаружением спор и мицелия грибов в волосах и чешуйках кожи. Длительность заболевания колебалась от 2 недель до 3 месяцев.
Результаты. У 46 (92%) больных был установлен диагноз инфильтративно-нагноительной трихофитии, у 4 - зооантропонозной микроспории. У 15 (30%) больных выявили изолированное поражение лобковой области, у 35 (70%) - кожи лобковой обла-
сти и окружающих поверхностей. Количество очагов поражения колебалось от 2 до 28. Поверхностно-пятнистую стадию трихофитии наблюдали у 14 (30,4%) больных, инфилыративную - у 19 (41,3%), инфильтративно-нагноительную - у 13 (28,3%). У 2 больных с зооантропонозной микроспорией отмечали глубокую форму заболевания, у 1 - папуло-сквамозную, у 1 - эритематозно-отечную. 40 (80%) больных отметили, что заразились микозом половым путем, 4 (8%) - через полотенце в сауне, 2 (4%) - при уходе за домашним рогатым скотом, у 4 (8%) пациентов путь заражения установить не удалось.
Все больные были обследованы на инфекции, передаваемые половым путем. У 6 больных выявили урогенигальный хламидиоз, у 5 - уреамикоплазмоз, у 4 - трихомоноз, у 4 - бактериальный вагиноз, у 3 -кандидозный вульвовагинит, у 2 - генитальный герпес, у 1 - гонорею.
Вывод. Согласно исследованиям, в последние годы в Таджикистане участились случаи полового пути передачи зооантропонозных трихомикозов. В половине случаев у больных выявили инфекции, передаваемые половым путем.
ф
изучение эффективности разных методов лечения онихомикозов с использованием итраконазола (орунгала) Касымов О.И., Касымов A.Q.
Кафедра дерматовенерологии института последипломной подготовки медицинских кадров, Душанбе, Таджикистан
efficiency study of different т re atm en г methods of onychomycoses with the use of itraconazole (orungal) Kasymov 0., Kasymov A.
Department of Dermatology & Venereology, Institute of Postgraduate Médical Education, Dushanbe, Tadjikistan
Цель исследования - сравнение эффективности разных методов лечения больных онихомикозами с использованием орунгала.
Материал и методы. Обследовано 46 больных онихомикозами (мужчин - 29, женщин - 17) в возрасте от 17 до 67 лет. Длительность заболевания, в среднем, составила 7,4+0,5 лет. 66% больных имели сопутствующие заболевания - факторы риска возникновения онихомикоза.
У 26 больных наблюдали дистально-латеральную подногтевую форму онихомикозов, у 6 - тотально-дистрофическую, у 6 - поверхностно-белую, у 8 -проксимальную подногтевую. 42 пациентов страдали онихомикозами стоп, 4 - стоп и кистей. Среднее
количество пораженных ногтей составило 6,7±0,07. У всех 46 больных онихомикозами были поражены кожа стоп, стоп и кистей или кистей.
В зависимости от использованного метода лечения все больные были разделены на 2 группы. 1-ой группе (20 больных) было проведено общее лечение орунгалом методом пульс-терапии: при онихомико-зах кистей - 2 курса, при онихомикозах стоп - 3.
2-й группе (26 больных) дополнительно проводили местное лечение (20% уреапластырь и в дальнейшем - мазь клотримазол).
Результаты. Клинико-микологическое выздоровление к концу 6 месяца наблюдения при комбинированной терапии было достигнуто у 22 (84,6%) больных, через 9 и 12 месяцев - у 24 (92,3%), в то время как в группе больных, получавших только общее лечение, соответственно, у 80%, 75% и 75% (Р<0,02). Среди больных с тотально-дистрофической и проксимальной формами онихомикоза комбинированное (общая + местная терапия) лечение было эффективным у 77,7% пациентов, общее лечение - только у 60% (Р<0,01).
Вывод. В результате исследования выявили преимущество комбинированного (общая + местная терапия) метода лечения по сравнению с монотерапией итраконазолом (орунгалом).
микромицеты -биодеструкторы нефтяных углеводородов в загрязненных и рекультивируемых почвах Киреева H.A., ГригориадиА.С., Климина И.П. Башкирский государственный университет, Уфа, Россия
microscopical fungi -biodestructors of oil hydrocarbons in polluted and recultivated soils Kireeva N.A.,Grigoriadi A.S., Klimina I.P. Bashkir State University, Ufa, Russia
В настоящее время нефтедобыча и нефтепереработка являются приоритетными отраслями развивающейся промышленности. Однако их деятельность наносит наибольший экологически вред окружающей среде и влечет за собой опасность прямого и опосредованного воздействия на здоровье человека. В результате загрязнения нефтью и нефтепродуктами происходит перестройка комплекса почвенных микроскопических грибов (микромицетов), которые принимают активное участие в минерализационных процессах, в том числе в биодеструкции поллютанов. что имеет большое значение для экологических исследований в области рекультивации нефтезагряз-ненных почв.
Цель данной работы - характеристика мико-ценоза загрязненных дизельным топливом и восстанавливаемых почв. Исследования проводили на образцах серой лесной почвы, загрязненной дизельным топливом и рекультивируемой биопрепаратом Универсал, на основе углеводородокисляющего штамма Rhodococcus equi. Выделение микромицетов проводили по общепринятой методике посева почвенной суспензии на подкислённую агаризованную среду. Было отмечено выпадение чувствительных видов микромицетов (Pénicillium camemberti, P. gris-eoroseum, P. resedanum, P. resticulosum) и развитие нетипичных видов, способных к использованию углеводородов нефти в качестве источника углерода и энергии. Среди них наибольшей активностью обладали Aspergillus fumigatus, A. niger, A. restrictus, P. canescens, P. lanosum, Trichoderma viride. Aspergillus repens, P. canescens, P. chrysogenum, P. glauco-cinera-scens были выделены только в загрязненной почве. Внесение биопрепарата в загрязненную почву приводило к увеличению числа выделяемых видов за счет P. citrinum и A. fumigatus, который также относится в группе BSL2. A. tenuissima и Т. viride встречались исключительно в сильнозагрязненной почве вне зависимости от применения биопрепарата. Эти виды грибов синтезируют ряд токсинов, опасных как для растений, так для человека и животных. При анализе видового состава микроскопических грибов показано, что в загрязненной почве увеличивалась встречаемость фитотоксичных, фитопатогенных и потенциально патогенных для человека видов (BSL2).
новые представления о противоинфекционном иммунитете и защите о г грибов Киселева Е.П.
Кафедра лабораторной микологии и патомофрологии микозов, НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУДПО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
new aspects of infection immunity and anti-fungal defense Kiseleva E.P.
Chair of Laboratory mycology and Pathomorphology of Mycoses, Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
В настоящее время рассматривают четыре типа адаптивного иммунного ответа, которые регулируются разными популяциями Т-лимфоцитов, а именно - Thl, Th2, Thl7 и Т-регуляторными клетками. В основу классификации впервые положено разделение Т-лимфоцитов по транскрипционным факторам,
а не по продуцируемым ими цитокинами. Популяциям Т-лимфоцитов соответствует свой набор индивидуальных транскрипционных факторов и способ передачи сигнала. Каждая из форм ответа имеет ключевое значение в отношении определенных патогенов, а именно: ТЫ-ответ важен в борьбе с внутриклеточными бактериями и грибами, ТЫ 7 - с внеклеточными, ТЬ2 - в защите от гельминтов и простейших. Т-регуляторные клетки контролируют все формы ответа. Кроме того, они ограничивают воспалительные реакции и поддерживают толерантность в отношении нормальной микробиоты и пищевых антигенов, доминируют в слизистой оболочке кишечника. Разнообразие форм иммунного ответа достигается за счет вовлечения различных клеток-эффекторов. Так, ТЫ-тип ответа связан с активацией макрофагов, ТЬ2 - с участием В-лимфоцитов, а также с привлечением эозинофилов и тучных клеток. При превалировании ТЫ7-типа иммунного ответа активируются нейтрофилы и эпителиальные клетки. Направление дифференцировки Т-лимфоцитов напрямую зависит от цитокинов, синтезируемых клетками врожденного иммунитета. При взаимодействии фагоцитов с патогенами происходит распознавание паттернов на поверхности микроорганизмов с помощью паттерн-распознающих рецепторов, в результате чего фагоциты активируются и синтезируют цитокины. В настоящее время важную роль в этом процессе отдают патогену, который набирает некий код из рецепторов, находящихся на поверхности фагоцитов, что получило название «комбинаторного» распознавания. Недавно описаны разные пути сигналинга при активации фагоцитов, в результате которых происходит синтез тех или иных цитокинов, способствующих дифференцировке Т-лимфоцитов в определенном направлении. При изучении роли различных типов иммунного ответа в защите от грибов в экспериментальных условиях оказалось, что наиболее эффективным является иммунный ответ, развивающийся по ТЫ-типу. Иммунный ответ ТЬ2-типа мало влияет на характер течения экспериментальных микозов, а активация ТЫ7 способствует затяжному течению и снижает очищение организма от грибов.
цитофизиологические особенности клеточного иммунитета при системном кандидозе
Ковнер A.B.2, Бугримова Ю.С.1, Шаркова Т.В.1, Потапова О.В.1, Шку рупий В.А.1
'Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, ГОУ ВПО Новосибирский Государственный Университет, г. Новосибирск, Россия
cytophysiological features of cellular immunity in case of systemic candidosis
Kovner A.V.2, Bougrimova Yu.S.1, Sharkova T.V.', Potapova O.V.1, ShkurupyV.A.1
'Scientific Center of Clinical and Experimental Medicine SB RAMS, SEI HPE, Novosibirsk State University, Novosibirsk, Russia
В последние годы отмечают тенденцию к росту числа случаев инвазивных форм кандидоза, особенно у иммунокомпрометированных больных (Kordbacheh Р. et al., 2008), что обусловливает актуальность изучения состояния иммунной системы при микозах.
Цель исследования - изучение иммуноморфоло-гических особенностей клеточного звена иммунитета при системном кандидозе у млекопитающих.
Материалы и методы. Системный кандидоз моделировали на мышах-самцах линии СВА путем внутривенного введения С. albicans (штамм РКПГУ-1129/13) в дозе 12,5-Ю6 микробных тел в 0,5 мл физиологического раствора. Контролем служили интактные животные. Материал для гистологического, цитологического, иммуноморфологиче-ского исследований получали через 1, 3, 7 и 10 суток после инфицирования.
Результаты. С 1 по 3 сутки после инфицирования наблюдали снижение общего количества клеток костного мозга в 1,5 раза по сравнению с контрольной группой, связанное с выходом клеточных элементов в периферическое русло и формированием в легких, почках животных гранулем, состоящих из нейтрофилов, лимфоцитов и макрофагов. С 3 по 7 сутки эксперимента в исследуемых органах визуализировали гранулемы, в клеточном составе которых преобладали зрелые СБ68+-макрофаги с высокой фунгицидной активностью: в 82,3% клеток гранулем регистрировали положительную реакцию с антителами к индуцибельной NO-синтазе. Под действием провоспалительных цитокинов происходит активация костномозгового кроветворения, о чем свидетельствовало увеличение в 2,1 раза миелоцитов и ме-тамиелоцитов в клеточном составе костного мозга. На 10 сутки эксперимента в костном мозге выявили
увеличение числа нейтрофилов в 1,3 раза на фоне снижения в 1,2 раза моноцитов, что коррелировало с повышением численной плотности гранулем в органах, в среднем, в 1,7 раза и увеличением их диаметра на 22,4%. При этом наблюдали уменьшение в 3,8 раза секреторной активности эффекторных клеток гранулем: только в 21,2% клеток регистрировали экспрессию индуцибельной NO-синтазы, что может свидетельствовать о функциональной недостаточности клеток СМФ.
Работа выполнена в рамках Программы поддержки молодых ученых ведущих вузов России (Carl Zeiss).
случай успешного комбинированного лечения актиномикоза мягких тканей у больного с распространенной угревой болезнью
Козлова О.П., Мирзабалаева А.К.,.Чернопятова Р.М, Котрехова Л.П., Климко Н.Н.
НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина ГОУДПОСПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
case of successful combined treatment of the soft tissue actinomycosis in patient with spread acne
Kozlova O.P., Mirzabalaeva A.K., Chernopyatova R.M, Kotrehova L.P., KlimkoN.N.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Актиномикоз мягких тканей - медленно прогрессирующая бактериальная инфекция, протекающая с поражением мягких тканей перианальной области, ягодиц и бедер. Одним из редко встречающихся факторов риска развития и прогрессирования актиномикоза мягких тканей является тяжелое течение угревой болезни. В научной литературе описано не более десятка случаев развития актиномикоза у больных, страдающих тяжелой формой угревой болезни. Представлен случай клинического наблюдения актиномикоза мягких тканей у больного с распространенной угревой болезнью.
Объекты и методы. В НИИ медицинской микологии СПб МАПО (НИИ ММ) наблюдали больного М., 47 лет, который при поступлении предъявлял жалобы на субфебрильную температуру тела в течение года, выраженную слабость, утомляемость, боли при движении, изменение окраски и уплотнение кожи и подлежащих тканей и наличие свищей с гнойным обильным отделяемым в аногенитальной области, а также на распространенные высыпания в виде вос-
палительных узлов, пустул, камедонов, рубчиков, располагающихся на коже лица, груди, межлопаточной области, поясницы и ягодиц.
Первые проявления заболевания больной заметил около 3-х лет назад до момента обращения в НИИ ММ. Тогда появилось безболезненное уплотнение в области копчика. Через некоторое время в центре инфильтрата появилась флуктуация и свищ. Очаг воспаления разрешился без какой-либо терапии с развитием на его месте рубца. Больной указал на то, что за 10 лет до начала заболевания у него была травма копчика. Спустя 6 месяцев после первого эпизода появились множественные инфильтраты с абсце-дированием, которые сливались меду собой и располагались в аногенитальной области и на внутренних поверхностях бедер. В условиях хирургического стационара была выполнена операция по вскрытию и дренированию абсцессов аногенитальной области. Бактериологического исследования содержимого абсцессов не проводили. Антибактериальной терапии пациент не получал. Спустя полгода развился рецидив заболевания с той же локализацией процесса. На фоне абсцедирования сформировались свищевые ходы с сукровичным и гнойным отделяемым, чему способствовали особенности труда пациента. Он работает водителем по 12-13 часов в сутки.
Больной был госпитализирован в хирургический стационар, где произвели вскрытие и дренирование абсцессов с последующим бактериологическим исследованием содержимого абсцессов. Выделили Actinomyces israelii. Для последующего лечения пациент был направлен в НИИ ММ.
В микологической клинике было установлено, что пациент страдает распространенной формой угревой болезни в течение 22 лет, и систематической, адекватной терапии он никогда не получал.
При объективном осмотре при поступлении выявили, что у больного общее состояние было средней тяжести. Больной имел нормостеническое телосложение. Температура тела - фебрильная. Пульс - 72 удара в минуту, ритмичный, удовлетворительного наполнения. АД - 140/90 мм. рт. ст. Диссеминированно по всей поверхности кожного покрова туловища, головы, верхних и нижних конечностей (за исключением кистей и стоп) располагались конглобатные угри, множественные пустулы в разной стадии развития, рубчики, камедоны закрытые и открытые. В аногенитальной области пальпировался плотный, безболезненный инфильтрат, распространявшийся от копчика до аногенитальной области, переходивший на мошонку и внутреннюю поверхность левого бедра. Кожа над инфильтратом была багрово-синюшной. На фоне абсцедирования отмечали несколько свищевых ходов, с гнойным отделяемым неоднородной консистенции.
В клиническом анализе крови при поступлении отмечали признаки воспаления: лейкоциты - до 20409 /л, ускорение СОЭ - до 60 мм/ч. В биохимическом анализе крови (грансаминазы, билирубин,
общий белок, креатинин, мочевина) отклонений от нормы не выявили. На компьютерной томографии мягких тканей аногенитальной области, костей таза обнаружили инфильтрат, размерами 45,5*15,3*59,4 мм, неоднородной структуры с неровными нечеткими контурами, и увеличение пахово-бедренных лимфатических узлов.
Учитывая данные анамнеза, объективного осмотра, бактериологического и клинических исследований, пациенту был поставлен клинический диагноз «Актиномикоз аногенитальной области. Свищевая форма».
Сопутствующий диагноз: Густая себорея, тяжелой степени тяжести, распространенные конглобат-ные угри, закрытые, открытые камедоны.
Больному была проведена антибактериальная терапия натриевой солью бензилпенициллина в дозе 20 млн ЕД в сутки, парентерально в течение 21 дня. На фоне лечения отмечали положительную динамику (уменьшение размеров инфильтратов и отделяемого из свищевых ходов аногенитальной области, снижение уровня лейкоцитов до 13-14 109/л, СО. ) -32-20 мм/ч). В дальнейшем пациенту рекомендовали амоксициллин в дозе 2,0 в сутки длительно (не менее 6 месяцев) в сочетании с хирургическим лечением (в условиях хирургического стационара больному произвели вскрытие и дренирование абсцессов аногенитальной области). После выписки из стационара пациент самостоятельно прекратил прием амокси-циллина.
Через 2 недели после отмены препарата на коже передней брюшной стенки по периферии нагноившегося узла появился плотный инфильтрат. При бактериологическом исследовании отделяемого свищевых ходов выделили Actinomyces israelii. В связи с чем, больной повторно был госпитализирован в НИИ ММ.
Терапию возобновили (натриевая соль бензилпенициллина в дозе 20 млн ЕД в сутки парентерально в течение 14 дней, затем амоксициллин - клавула-новая кислота 875/125 мг в сутки - 10 дней, с переходом на амоксициллин 2,0 в сутки). Для снижения выраженности факторов риска и развития рецидива заболевания к лечению добавлен роаккутан 60 мг в сутки (системный ретиноид, применяющийся для лечения тяжелых форм угревой болезни). На фоне проводимого лечения отмечали положительную динамику: разрешение части инфильтратов, уменьшение инфильтратов аногенитальной области, отсутствие отделяемого из свищевых ходов аногенитальной области и передней брюшной стенки, нормализацию температуры тела, отрицательные результаты многократных бактериологических исследований, уменьшение количества угрей, отсутствие пустул, снижение уровня лейкоцитов (лейкоциты - 107407л, СОЗ - 15 мм/ч).
Заключение. Представлен клинический случай редкого развития свищевой формы актиномикоза мягких тканей аногенитальной области и передней
брюшной стенки на фоне тяжелого течения угревой болезни. Положительный эффект был достигнут только при сочетанном, одновременном лечении актиномикоза и угревой болезни: длительным приемом антибактериальных препаратов (не менее 6 месяцев) в сочетании с использованием системных ретиноидов и хирургическим лечением.
PITYRIASIS VERSICOLOR у больных первичным гипергидрозом Колонтая И.Я., Анчупане И.С., Милтиньш А.П.
Латвийский Университет, г. Рига, Латвия
primary hyperhidrosis patients who suffer from PITYRIASIS VERSICOLOR Kolontaya I.J.,Anchupane I.S., Miltinsh A.P.
Latvian University, Riga, Latvia
Первичный гипергидроз не только изменяет функции кожи, но и отрицательно влияет на эмоциональное и социальное состояние пациентов; примерно половина из них знает, что эти проблемы можно эффективно решить лечением, назначенным врачом. Как известно, повышенная потливость является фактором, способствующим развитию отрубевидного лишая, индуцируемого Pityriasis versicolor.
Цель - выяснить влияние первичного гипергидроза и его лечения препаратами ботулотоксина типа А на частоту рецидивов заболевания у лице повышенной активностью функции вегетативной нервной системы.
Материал и методы. Обследовано двадцать больных с первичным гипергидрозом, у которых в анамнезе было не менее 3-х рецидивов отрубевидного лишая в течение двух последних лет. Обследование больных проводили до лечения препаратами ботулотоксина типа А и один год после лечения. Согласно подробным анамнестическим данным и лабораторным исследованиям (анализ крови, определение уровня гормонов щитовидной железы и др.) исключили вторичный гипергидроз. Курс инъекций препарата проводили квалифицированные врачи-дерматологи. Полученные данные обобщили в таблицах Microsoft Excel и провели анализ полученных данных.
Результаты, Средний возраст двадцати обследованных больных - 33,850 (SD7, 49928; N20), из них женщин - 80%, т.к. женщины чаще соглашаются на курс терапии.
Среднее количество рецидивов отрубевидного лишая до лечения составляло 3,650 (SD-0,745; N-20), после лечения - 0,550 (SD-1,46; N-20).Средняя длительность действия препарата ботулотоксина типа А (в месяцах) - 8,950 (SD-1,504; N-20). У больных, у
которых после лечения первичного гипергидроза наблюдали рецидивы заболевания, средняя длительность действия ботулотоксина - 8,000 (81)-1,414; N-6), а у больных без рецидивов - 9,358 (80-1,393; N-14).
В результате лечения число рецидивов уменьшилось в 6 раз.
влияние металлических и гидроксидных наночастиц железа, меди и кобальта на CANDIDA spp. и ASPERGILLUS spp. Коноплева В.И., Евдокимова О.В., Чурилов Г. И., Дорогое М.Е. Государственный медицинский университет им. акад. И.Г1. Павлова, Государственный агротехнологический университет им. акад. П.А.Костычева, Рязань, Россия
influence of metallic and hydroxide nano pa r tiс l e s of iron, copper, and cob alt to CANDIDA spp. and ASPERGILLUS spp. Konoplyeva V.l., Evdokimova O.V., Churilov G.I., Dorogov M.E. Acad. I. P. Pavlov State Medical University, Acad. P.A. Kostychev State Agrotechnological University, Ryazan, Russia
Цель работы - изучение действия металлических и гидроксидных наночастиц железа, кобальта и меди в отношении грибов Candida spp. и Aspergillus SPP-
Методы исследования. Проведено 3 серии опытов с использованием водных суспензий наночастиц железа, кобальта и меди, полученных воздействием ультразвука (МИСиС г. Москва), в отношении штаммов грибов Candida albicans АТСС 10231/NCPF 3179 и Aspergillus niger АТСС 16404/NCPF 2273.
Суспензии наночастиц в различных концентрациях наносили (метод цилиндриков) на поверхность среды Сабуро, предварительно засеянной грибами; во втором эксперименте накладывали бумажные диски с суспензиями наночастиц, в третьем - совместно культивировали грибы и суспензии наночастиц в питательном бульоне с последующим высевом на среду Сабуро. Посевы инкубировали в стандартных условиях. Результаты учитывали: по зонам задержки роста вокруг цилиндриков, появлению зоны роста вокруг соответствующего диска и количеству выросших колоний в контрольных высевах.
В эксперименте установили, что наночастицы железа и кобальта в концентрациях 5 мг/мл, 1 мг/мл, 0,1 мг/мл не оказали угнетающего или стимулирующего действия в отношении грибов, наночастицы меди (5 мг/мл) задерживали рост, средние значения зон составили 20 и 17 мм для С. albicans и A. niger соответственно. Для остальных концентраций наночастиц меди воздействия не отмечали.
При совместном культивировании суспензии наночастиц железа, меди и гидроксида меди в концентрациях: 100 мг/мл; 50 мг/мл; 25 мг/мл; 12,5 мг/ мл; 2,85 мг/мл; 1,42 мг/мл; 0,855 мг/мл; 0,57 мг/ мл; 2,8540^ мг/мл; 2,8540'2 мг/мл; 2,8540'3 мг/мл; 2,8540^ мг/мл и Candida albicans не обнаружено достоверных различий в количестве выросших колоний в контроле и опытных вариантах. Угнетающее воздействие отмечали лишь для наночастиц гидроксида меди в концентрации 100 мг/мл.
Таким образом, металлические и гидроксидные наночастицы железа, кобальта и меди не обнаружили стимулирующего действия на рост грибов. Угнетающее действие выявили для наночастиц гидроксида меди (100 мг/мл) при культивировании в ПБ, наночастицы меди (5 мг/мл) задерживали рост С. albicans и A. niger при культивировании на среде Сабуро.
Ш
крип гококкозпри вич-инфекции в стадии спид: анализаутопсий Константинова A.M.
Санкт-Петербургский Государственный Университет, СПб, Россия
cryptococcosis in patients with aids: aytopsy's analysis Konstantinova A.M.
Saint-Petersburg State University, Saint-Petersburg, Russia
Цель исследования - анализ летальных случаев криптококкоза в Санкт-Петербурге, изучение морфологических особенностей криптококков и вызываемой ими инфекции на аутопсийном материале у ВИЧ-инфицированных пациентов.
Материалы и методы. Провели анализ 23 ау-топсийных наблюдений пациентов, умерших в Городской инфекционной больнице №30 имени С.П. Боткина и Усть-Ижорской Республиканской Клинической инфекционной больнице в период с 1990 по январь 2010 гг. Основным заболеванием во всех случаях была ВИЧ-инфекция в стадии СПИДа, а криптококкоз имел ведущее значение в наступлении летального исхода. Среди умерших было 15 мужчин и 8 женщин, средний возраст составил 36,4 года (от 20 до 51).
Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином, альциановым синим (по методу Моури), реактивом Шиффа и по методу Романовского. Истории болезни, аутопсийные и гистологические данные были тщательно проанализированы.
Был проведен морфометрический анализ диаметра клетки криптококков и толщины их капсулы в тканевых срезах тканей головного мозга и легких у двух умерших пациентов, не получавших при жизни ни антимикотических, ни противовирусных препара-
тов (всего измерений 1001); у двух умерших больных, которым проводили лечение антимикотиками (всего измерений 890); а также у пациента, при жизни который получал противогрибковые и противовирусные препараты (всего измерений 323).
Результаты. При криптококкозе наиболее часто в процесс вовлекается головной мозг, несколько реже - лимфатические узлы, легкие, селезенка и печень.
Преобладающими морфологическими изменениями во внутренних органах являются альтератив-ные с минимально выраженной клеточной реакцией. Наличие гранулематозного характера воспаления (отмечали в 21,7 % случаев) мы связываем с низкой вирулентностью штаммов, вызвавших инфекцию (небольшая зона лизиса в веществе головного мозга и преобладающее число деформированных бескап-сульных форм криптококков). Неблагоприятный исход криптококкоза у пациента, получавшего противовирусную и антимикотическую терапию, возможно, обусловлен высокой вирулентностью штаммов, вызвавших инфекцию.
Показаны статистически значимые различия в диаметре клеток криптококков и в толщине их капсулы в легких и головном мозге; в том числе и при различных видах проводимой терапии.
плесневые микромицеты в воздушной среде акушерских стационаров
Крылова И.О., Семериков В.В., Александрова Г.А., Кирьянова И.Н.,ЗлыгостеваМ.В.
Естественнонаучный институт Г1 ГУ, Пермь, Россия
moulds in the air environment of obstetric hospitals
Krylova 1.0., Semerikov V.V., Aieksandrova G.A., Kiryanova i.N., Zlygosteva M.V.
Natural Sciences Institute of Perm State University, Perm, Russia
Микроклимат лечебных медицинских учреждений (АПУ) - совокупность ряда факторов: температуры, скорости движения и влажности воздуха, интенсивности инсоляции, газового состава воздуха помещений и его запыленности. Оптимальные условия микроклимата помещений АПУ регламентируются СанПиН 2.1.3.1375-03. Загрязнение внутренней среды медицинских учреждений представляет особую опасность для людей, долговременно пребывающих в них (больные, медицинский персонал). В последнее время все чаще в качестве возбудителей ВБИ выступают плесневые грибы.
Цель работы - проведение обследования акушерских стационаров г. Перми на предмет выявления грибковой контаминации воздушной среды. Методы исследования. Отбор образцов воздуш-
ной среды производили после текущей (генеральной) уборки помещений аспирационным методом (пробоотборник ПУ-1Б, ЗАО «Химко») на чашки Петри с питательной средой Чапека-Докса с пересчетом на 1 м3 воздуха. Пробы термостатировали при 25±1 °С и 37 ВС в течение от 5-7 до 14 дней. Идентификацию проводили визуально с последующим микроскопи-рованием на оптическом микроскопе Olympus ВХ 51, с программным обеспечением cell'B согласно определителям и микологическим атласам.
Результаты. В лицензированной НИЛ «Бактерицид» ЕНИ ПГУ провели исследование помещений трех акушерских отделений АПУ г. Перми различных категорий чистоты. Биоразнообразие плесневых изолятов родильных отделений представлено: родом Pénicillium: P. glabrum, P. brevicompactum, P.fu-niculosum, P.griseofulvum, P. variabile, родом Aspergillus: A. Candidus, A. flavus, A, glaucus, A, ochraceus, A. restrictus, A. terreus, A. wentii, род Cladosporium: C. sphaerospermunr, в меньшей степени - родами: Alternaria, Aphanocladium, Arthrographis, Fusarium, Geomyces, Gliocladium, Mucor, Olpitrihum, Paecilomy-ces, Rhizopus, Stachybotrys, Trichoderma, Chrisonilia.
Вывод. Установлено, что основным фактором передачи микогенного агента является воздух, поверхности в помещениях и воздуховоды вентиляционных систем. В связи с этим, для предотвращения возникновения ВБИ необходимо принимать комплекс мер: дезинфекционные мероприятия с учетом выделенных внутрибольничных штаммов, контроль за работой приточно-вытяжной вентиляции и мониторинг плесневой контаминации воздуха в АПУ в весенне-оеенний период.
некогерентное импульсное
излучение как средство
инактивации грибов-
биодеструкторов
Кряжев Д.В., Кирилов A.A., Иванова И.П., Смирнов В.Ф.
Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского,
Нижний Новгород, Россия
uncoherent pulsewise
radiation as a means of
in activation of fungi-
bio d e structo rs
Kryazhev D.V., KirilovA.A., Ivanova I.P., SmirnovV.F.
Nizhegorodski state university named after N.I. Lobatchevski, Nyizhny
Novgorod, Russia
В создаваемых человеком сооружениях и местах массовых поселений формируется и свойственная поселениям, особенно городам, микробная среда со своими особенностями, в частности - преобладанием грибковой биоты над бактериальной. Развитие плес-
невых грибов внутри зданий приводит к резкому повышению концентрации грибных частиц в воздухе, что пагубно влияет на здоровье живущих или работающих там людей.
В связи с этим выявляют заболевания человека, вызванные плесневыми грибами. Спектр микоти-ческих заболеваний простирается от аллергических проявлений и микогенной сенсибилизации до глубоких системных микозов, нередко приводящих к летальному исходу.
Для уничтожения микроскопических плесневых грибов используют ряд физических факторов, наиболее широко применяют ультрафиолетовое излучение, однако известно, что оно имеет ряд негативных последствий: ожоги кожи и сетчатки глаз; высокую мутагенность. Подобная ситуация вынуждает специалистов постоянно вести поиск новых высокоинтенсивных физических факторов, эффективно и безопасно противодействующих жизнедеятельности микроскопических грибов.
Цель настоящей работы - изучение характера роста мицелия, развивающегося из спор темно- и светлоокрашенных микромицетов {Alternaría altérnala и Penicillum chrysogenum), засеянных уколом на поверхность агаризованной среды, различными дозами (5, 10 и 15 минут воздействия) некогерентного импульсного излучения, а также сравнение эффективности его фунгицидного действия по сравнению с ультрафиолетовым излучением.
В процессе выполнения данной работы были установлены следующие факты:
♦ для фунгицидного действия некогерентного импульсного излучения характерна зависимость «доза-эффект» для исследованных тест-культур;
♦ облучение в течение 10 минут тест-культур некогерентным импульсным излучением более интенсивно ингибирует их последующий рост, чем аналогичное по времени облучение ультрафиолетовым излучением.
особенности этиологии и лечения онихомикоза кистей, обусловленного недерматомицетами Кубасова Н.Л.
НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина СП6МАП0, Санкт-Петербург, Россия
peculiarities of etiology and treatment of non-dermatomycetes onychomycosis of hands Kubasova N.L.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SPbMAPE, Saint Petersburg, Russia
Цель исследования - изучить этиологическую структуру онихомикоза кистей и оценить эффективность стандартной терапии.
Материалы и методы. Обследовано 65 больных с клиническими признаками онихомикоза кистей.
Забор материала для исследования проводили с учетом типа поражения ногтевой пластины (дистально-латеральный подногтевой, белый поверхностный, проксимальный подногтевой, тотальный дистрофический, проксимальный с паро-нихией) при помощи аппарата для медицинского педикюра Berhtold-S. Микроскопию патологического материала проводили с добавлением 30% КОН и калькофлюора белого на флуоресцентном микроскопе Leica DMHB2. Посев осуществляли на среду Сабу-ро с 2% глюкозы и хлорамфениколом.
Результаты. Микологическое подтверждение диагноза онихомикоза кистей было получено при прямой микроскопии в 46% проб, при посеве рост микромицетов регистрировали в 45% проб.
При посеве в 69% проб выявили дрожжевые, преимущественно — почкующиеся клетки Candida sp. (19 штаммов) и Tríchosporon sp. (1 штамм). Дистально-латеральный тип поражения ногтевой пластины составлял 17(85%) случаев, проксимальный с паро-нихией - 3(15%).
Дерматомицеты обнаружили в 24% случаев, их спектр был представлен Т. rubrum (п=5), Т. mentagrophytes (п=1), Т. tonsurans (п=1) и дистально-латеральным (86%) и тотальным типом поражения (14%).
В 7% случаев отмечали рост плесневых мицели-альных грибов {Scopulariopsis spp., Fusarium spp.) при дистально-латеральном типе поражения.
Наиболее частыми при онихомикозе кистей факторами риска были: травмы, заболевание щитовидной железы, наследование онихомикоза по аутосомно-доминантному типу.
Лечение осуществляли в соответствии с современными рекомендациями.
59 пациентов с подтвержденным диагнозом они-хомикоза кистей получали соответствующие анти-микотики по стандартным схемам лечения. При поражении дерматомицетами (п=37, тербинафин по 250 мг в сутки в течение 6 недель) микологическое излечение составляло 97%, клиническое - 81% и полное — 76%.
При поражении дрожжевыми организмами (п=20, флуконазол по 150 мг в сутки в течение 3-6 месяцев) микологическое излечение составляло 75%, клиническое - 60% и полное - 55%.
При поражении нитчатыми недерматомицетами (п=2, пульс терапия итраконазолом по 400 мг в сутки 2-3 курса) микологическое излечение составляло 100%, клиническое — 50% и полное — 50%,
Выводы.
1) Соотношение дерматомицетов/недермато-мицетов при онихомикозе кистей составляет 1,5:1; среди недерматомицетов дрожжевые микромицеты значительно преобладают над нитчатыми недерматомицетами в соотношении 10:1.
2) Стандартные схемы антифунгальной терапии в случае онихомикоза кистей недостаточно эффективны.
инфицированность пациентов и контаминация больничной среды детского стационара плесневыми грибами Кудрявцева Л.Г., Сергевнин В.И.Дорошавин В.А. Управление Роспотребнадзора по Пермскому краю, Россия
mould contamination ое patients and in environment of pediatric hospital Kudryavtseva L.G., Sergevnin V.I., Choroshavin V.A.
Department of Rospotrebnadzor of Perm région, Russia
Цель работы - оценка распространенности различных родов и видов плесневых грибов среди пациентов и в больничной среде детского стационара.
Материалы и методы. Обследовали 226 пациентов, находящихся на стационарном лечении в онкологическом, гематологическом, пульмонологическом и реанимационном отделениях детской больницы на плесневые грибы. Из них 160 больных были обследованы однократно - в течение первой недели госпитализации, 66 детей - двукратно - в течение первой недели и через 3-4 недели пребывания в стационаре. У пациентов были взяты на анализ мазки из зева и носа. Параллельно исследовали 73 пробы воздуха на наличие плесневых грибов.
Результаты. Инфицированность пациентов дет-
ской больницы плесневыми грибами, преимущественно из родов Aspergillus и Pénicillium, в группе однократно обследованных лиц составила 19,3%, двукратно обследованных - 53%. Обнаружили, что увеличение частоты контаминации пациентов ми-кромицетами коррелирует с продолжительностью основного заболевания и количеством госпитализаций. Отмечали наибольший уровень инфицированное™ детей в зимние месяцы на фоне минимальной грибковой контаминации воздуха помещений. Максимальную частоту выделения плесневых грибов выявили у пациентов пульмонологического отделения за счет больных муковисцидозом, явившихся, таким образом, группой риска инфицирования. Группой риска заболевания оказались иммунокомпромети-рованные пациенты онкологического отделения, страдающие лимфобластным лейкозом, среди которых за последние 3 года было зарегистрировано 4 случая инвазивного легочного аспергиллеза.
Все пробы воздуха, взятые в стационаре детской больницы, содержали плесневые грибы, относящиеся преимущественно к родам Aspergillus и Pénicillium. Общая концентрация микромицетов в воздухе составила 112,3 КОЕ/м3. Наибольшую грибковую загрязненность воздуха обнаружили в пульмонологическом отделении, что может быть связано с наличием большого количества инфицированных плесневыми грибами больных муковисцидозом, у которых нельзя исключить выделение возбудителя из организма во внешнюю среду.
проблемы микологии и
эпидемиологии в вологодском
областном онкологическом
диспансере
Кузьмина H.A.', Зинченко М.А.\ Зинченко A.B.2
ТУЗ Вологодский областной онкологический диспансер, г. Вологда;
2Санкт-Петербургский Государственный медицинский университет им.
акад. И.П.Павлова, Санкт-Петербург, Россия
problems of mycology and
epidemiology in the vologda
regional oncology center
Kuzmina N.A.', Zinchenko M.A.', Zinchenko A.V.2
'Vologda Regional Oncology Center; Academician I.P.Pavlov State Medical University, St. Petersburg, Russia
Изучали микотическую контаминацию окружающей среды в Вологодском областном онкологическом диспансере. Хирургический корпус был сооружен более 8 лет назад, открыт в 2001 году со значительными недочетами, увлажнениями строительных конструкций. Первоначально не организована достаточно эффективная система вентиляции и кондиционирования, ремонтов.
В рамках производственного контроля для оценки санитарно-противоэпидемического режима по исследованию воздуха помещений проводили анализ количественных проб отобранного воздуха, в том числе положительных находок плесневых грибов с расчетом процентов по годам - с 2005 по 2009 гг. В среднем, за 5 лет процент контаминации воздуха микромицетами составил 57,9%. После проведенных ремонтных работ на отделениях, смены вентиляционных систем частично снизилась контаминация воздуха плесневыми грибами, поэтому в 2009 году процент неудовлетворительных проб составил 39,8%. Однако наиболее подверженными оказались отделения интенсивной терапии и шести операционных, размещенных на верхнем этаже семиэтажного здания.
Идентификацию микромицетов частично проводили в лаборатории НИИ им. П.Н. Кашкина. Выделили 7 родов условно-патогенных плесневых грибов: Cladosporium cladosposporoides, Chaetomium globo-sum, Acremonium recifer, Geotrichum candidum, Pénicillium chrusogenum, Aspergillus versicolor, Aspergillus nidulans. Это только в операционных и в отделении реанимации. Грибковая нагрузка оказалась больше бактериальной. При изучении проблемы, не получили четкой связи заболеваемости среди больных и персонала.
Пребывание больных в операционных, в среднем, не более полутора часов, а в отделениях - 16 суток. Среди 1133 онкологических больных выделили 186 культур, из них в 82,8% - Candida albicans, единичные - С. krusei, С. globrata, С. tropicalis. Среди персонала распространены жалобы на симптомы со стороны верхних дыхательных путей, заложенности носа, простудные явления и головную боль. Причинные соотношения между контаминациями микромицетов в воздухе и заболеваемости среди пациентов и сотрудников остаются не ясными. Не исключены воздействия ультрафиолетового облучения и дезинфекционных средств, или всё вместе.
Необходимо решить вопросы микологических исследований как во внешней среде, так и у больных, вывести критерии решения проблем идентификации микогенных культур, провести экономические расчеты, четкую взаимосвязь или ее отсутствие с загрязнениями помещений микомицетами и заболеваниями, будь то пациенты или персонал, и начать решение этой проблемы в лечебных учреждениях.
применение системной и местной противогрибковой терапии в лечении грибкового аденоид ига у детей Кунельская В.Я., Мачулин А.И.
ГУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» ДЗ Москвы, Россия
eungal adenoiditis treatment
using systemic and local
antifungal therapies at
children
Kunelskaya V.YA., Machulin A.l.
GUS «Moscow Scientifically-Practical Centre Otorhinolaringology»
Department ofMoscow Public Health, Russia
Кандидозное поражение глотки y детей - довольно распространенная патология, которая в основном имеет место после длительной антибактериальной терапии. Постановка диагноза «фарингомикоз», как правило, не вызывает затруднения. Однако существуют сложности при установления диагноза изолированного поражения глоточной миндалины грибковой этиологии у детей.
Проблемы постановки диагноза, в основном, связаны с анатомическим расположением глоточной миндалины, детальный осмотр ее доступен только при использовании эндоскопической техники.
Цель исследования - определение частоты распространенности грибковой биоты у детей с хроническим воспалением глоточной миндалины, а также определение клинической эффективности проводимой противогрибковой терапии.
Объекты и методы. Обследовали 112 детей (62 девочки и 50 мальчиков) в возрасте от 3 до 14 лет с хроническим аденоидитом в стадии обострения. Все дети в данной группе предъявляли жалобы на заложенность носа, затруднение носового дыхания, выделения из носа как слизистого, так и слизисто-гнойного секрета, явления храпа во время сна, а также жалобы на дневную сонливость. Всем детям проводили общеклиническое обследование, осмотр ЛОР-органов с применением эндоскопической техники, микологическое и бактериологическое исследование мазков с аденоидных вегетаций. При определении микробного пейзажа из 112 детей у 102 (91%) высевали бактериальную биоту, которая, в основном, была представлена стафилококками и стрептококками, у 10 детей - грибковую биоту. При выполнении эндоскопической эпифарингоскопии у 102 Детей, у которых выявили кокковую биоту, визуализировали отек глоточной миндалины, сглаженность лакун, в области борозд определяли скопление слизистого или слизисто-гнойного секрета. У 10 детей (9%) с вы-
севом грибковой биоты, помимо выше перечисленных симптомов, определяли мелкоточечные беловатые вкрапления на глоточной миндалине при выполнении эндоскопической эпифарингоскопии. Микоти-ческая биота у этой группы детей была представлена Candida spp., чувствительная к препаратам азольной группы. По степени разрастания аденоидных вегета-ций превалировала II и III степень. В группе детей с грибковым поражением глоточной миндалины мы применяли системную антимикотическую терапию препаратом флуконазол в возрастной дозировке. Для местной терапии использовали 0,01% р-р мирамисти-на в разведении 1:1 с 0,9% NaCl в виде назальных капель. Курс лечения составил 10 дней.
Результаты. Проявления клинических симптомов аденоидита купировались к 10 суткам лечения. В повторно проводимых микологических исследованиях роста грибковой биоты не выявили. Отмечали уменьшение степени аденоидных вегетаций, а при катамнестическом наблюдении - снижение обострений хронического бактериального аденоидита.
Вывод. Ранняя диагностика грибкового аденоидита у детей и применение комплексной антимико-тической терапии способствуют иррадикации очага грибковой инфекции.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ РАСПРОСТРАНЁННОСТИ ГРИБКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ УХА В Г. МОСКВЕ Кунельская В.Я., Шадрин. Г.Б.
ГУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» Департамента здравоохранения города Москвы, Россия
THE EPIDEMIOLOGICAL RESEARCH OF OTOMYCOSIS PREVALENCE IN MOSKOW Kunelskaya V.YA., Shadrin G.B.
GUZ «Moscow Scientifically-Practical Centre of Otorhinolaringology» Department of Moscow Public Health, Russia
В последние годы появилось большое число сообщений об увеличении частоты выявления микоза различной локализации, в том числе и микоза АОР-органов. Наиболее часто при этом грибами поражается ухо. Типичным клиническим проявлением ми-котического процесса считается рефрактерность к стандартной терапии - местному и системному применению антибактериальных и кортикостероидных средств.
Цель исследования - определение частоты мико-тического поражения уха среди взрослых больных подострым и хроническим отитом.
Материалы и методы. Для установления диагно-
за грибкового отита, помимо стандартного оторино-ларингологического обследования с применением микроскопической и эндоскопической техники, мы проводили комплексное микологическое исследование, включавшее микроскопию нативного и окрашенного препаратов патологического отделяемого уха, посевы на элективные питательные среды для определения рода и вида выделенного гриба.
За период с января 2003 по декабрь 2007 г. в кабинете миколога консультативного отделения Московского научно-практического Центра оториноларингологии и клинических отделениях ГКБ им. С.П. Боткина обследовано 4675 больных с подозрением на грибковое заболевание ЛОР-органов. Из них 1761 больной - с заболеванием уха, что в структуре общей воспалительной патологи ЛОР-органов составило 38,24%.
Результаты. Грибковую природу заболевания установили у 405 больных (562 уха) - 23%, при этом монокультуру гриба выявили в 470 случаях, а ещё у 92 - грибковые или грибково-бактериальные ассоциации. Из них женщин - 228, мужчин - 177, возраст пациентов - от 15 до 87 лет. Основное число больных приходится на работоспособный возраст (252 человека), при этом пик (96 человек) - на возрастную группу от 50 до 59 лет. Длительность заболевания до момента обращения составила от 2 месяцев до 45 лет. У 280 (69,1%) выявили наружный грибковый отит (у 136 - процесс двусторонний), у 53 (13,1%) -микоз послеоперационной полости среднего уха (у двоих - процесс двусторонний), у 72 (17,8%) - грибковый средний отит (у 19 - процесс двусторонний).
Мицелиальные грибы выделяли в 60,5% случаев (245 больных), при этом доля Aspergillus spp. составила 92% изолятов, Pénicillium - 4%, Mucor, Rhizomucor - 4%. Дрожжеподобные грибы рода Candida вызывали заболевание в 39,5% наблюдений (160 человек), среди них Candida spp. - у 62 больных, С. albicans - у 36, С. parapsilosis - у 19, С. krusei - у 18, С. sake - у 13, С. pseudotropicalis - у 8, С. glabrata - у 4.
При наружном грибковом отите и микозе послеоперационной полости среднего уха доминировали плесневые грибы - 180 и 50 наблюдений соответственно, при среднем грибковом отите превалировали Candida spp. (57 наблюдений). Также установили, что спецификой микоза послеоперационной полости среднего уха является смешанная инфекция - соче-танное поражение грибами Aspergillus niger и С. albicans (16 больных).
При анализе течения заболевания выявили, что, по сравнению с бактериальным, при грибковом поражении уха длительное время сохраняются патологические выделения, имеющие как специфический, так и неспецифический для микоза характер.
Вывод. При обследовании больных с длительно текущим воспалением в ушах в обязательном порядке необходимо проведение микологической диагностики, что в целом повышает эффективность терапии больных с данной патологией.
активность катааазы CANDIDA
ALBICANS в условиях избытка и
недостатка железа
Леонов В.В.1, Костерина В.В.', Тимохина Т.Х.2, Варницына В.В.2
Угорский государственный университет, Ханты-Мансийск; Тюменская государственная медицинская академия, Тюмень, Россия
CANDIDA ALBICANS catalase activity in conditions surplus and deficiency of iron
LeonovV.V.', Kosterina V.V.1, Timokhina Т.К.2, Varnitsina V.V.2
^gra State University, Khanty-Mansiysk; 2Tyumen State medical academy, Tyumen, Russia
Имеется немного работ, посвященных изучению влияния ионов железа на синтез гемсодержащих белков дрожжеподобными грибами рода Candida, хотя подобные исследования важны для понимания особенностей их экспрессии в зависимости от условий существования микроорганизма.
Цель исследования - изучение влияния содержания ионов железа Fe2+ в питательной среде на активность каталазы Candida albicans.
Объекты и методы. В работе были использованы 2 штамма С. albicans, выделенные из кишечника (147) и крови (9708) больных в ОКБ г. Ханты-Мансийска. В качестве контрольного использовали музейный штамм С. albicans АТСС 24433. Изучение влияния Fe2' на активность каталазы проводили на железо-дефицитной питательной среде, приготовленной на основе бульона Сабуро. Железо вносили в среду в виде сульфата железа(П) до конечной концентрации - 0; 3,0; 6,0; 10,0 и 50,0 мкМ. Активность каталазы определяли фотометрическим методом по убыли пе-роксида водорода.
Результаты. Увеличение содержания ионов Fe2+ в питательной среде от 0 до 10 мкМ приводило к возрастанию активности каталазы штаммов 147 и 9708 по сравнению с исходным уровнем. Для музейного штамма получили аналогичные результаты, однако активность каталазы достигала своего максимального значения уже при концентрации ионов Fe2+ 6,0 мкМ. При концентрации ионов Fe2+ 50 мкМ активность каталазы всех исследованных штаммов С. albicans ингибировалась. Возможно, что при избытке ионов Fe2f грибная клетка минимизирует потребление железа, а, соответственно, уменьшает экспрессию каталазы, несмотря на развитие окси-дативного стресса, связанного с нарастанием активного гидроксильного радикала (-ОН) в питательной среде. Следует отметить, что активность каталазы штаммов С. albicans, выделенных из организма больных людей, имела более высокие значения (0,21-0,82 мкмоль/лхмин) и характеризовалась более резким
изменением, в зависимости от концентрации ионов Fe2+, по сравнению с музейным штаммом 24433 (0,23-0,67 мкмоль/лхмин).
Вывод. В результате полученных данных можно говорить о том, что штаммы С. albicans, выделенные из организма больных людей, более устойчивы к ок-сидативному стрессу по сравнению с контрольным музейным штаммом.
изменение вирулентных свойств CANDIDA ALBICANS в ассоциациях с KLEBSIELLA PNEUMONIAE
Лисовская С.А., Глушко Н.И., Халдеева Е.В., Баязитова Л.Т.
Казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии, Казань, Россия
change of CANDIDA ALBICANS virulence in the associations with KLEBSIELLA PNEUMONIAE Lisovskaya S.A., Glushko N.I., Khaldeeva E.V., Bayazitova L.T.
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Kazan, Russia
Candida albicans является наиболее частым патогеном, вызывающим заболевания, в основном, у людей с ослабленной иммунной системой. Грибы, как правило, развиваются в условиях микробных ассоциаций и редко выступают в качестве первичного патогена.
Мы провели работу по изучению взаимодействия и vitro С. albicans с одним из значимых этиологических факторов дисбактериоза кишечника, хронического пиелонефрита, хронического тонзиллита -Klebsiella pneumoniae.
Изучение взаимодействия С. albicans и К. pneumoniae проводили при культивировании в жидкой среде и на плотной питательной среде методами перпендикулярных штрихов для выявления отсроченного антагонизма. Объектами исследования служили клинический штамм К. pneumoniae № 34 и два штамма С. albicans №4 (музейный) и № 786 (клинический).
Методом перпендикулярных штриховых посевов установили, что К. pneumoniae, после инкубации культуры на модифицированной среде Сабуро и среде МПА, МПБ не оказывает фунгистатического действия на С. albicans. Кроме того, после 24 часов инкубации грибы разрастались за пределы зоны нанесения - в бактериальную зону. Однако, несмотря на данный факт, угнетения роста К. pneumoniae, засеянного перпендикулярно грибам, не наблюдали. При совместном культивировании микроорганизмов в жидкой питательной среде и при посеве их в смешанном газоне на плотных средах, на протяжении всего периода наблюдений, количество жизнеспособных бактерий и грибов росло равномерно по нарастающей и практически не отличалось от монокультур.
При совместной инкубации С. albicans и К. pneumoniae отмечали некоторые морфологические изменения по сравнению с клетками С. albicans, выращенными в монокультуре. Наблюдали активное формирование трубок прорастания и псевдогиф, деление клеток С. albicans было более активным. Кроме того, образовывались бактериально-грибковые конгломераты, за счет адгезии клеток К. pneumoniae на сформировавшиеся трубки прорастания у клеток С. albicans, причем отмечали активное деление бактериальных клеток в конгломератах. При сравнении адгезивной активности у грибов С. albicans, после их совместной инкубации с бактериями К. pneumoniae и в их отсутствие, наблюдали повышение уровня адгезии в 1,5-2 раза (28,5±0,1 и 10,8±0,4 соответственно).
Таким образом, в условиях взаимоотношений С. albicans и К. pneumoniae выявили усиление вирулентных свойств С. albicans, что свидетельствует о выраженном синергизме и «указывает» на возможность активизации микотического процесса.
вуаьвовагинааьный кандидоз и беременность: эффективность натамицина Матова И.О., Кузнецова Ю.А.
Государственный медицинский университет, г. Иркутск, Россия
vulvovaginal candidosis and pregnancy: efficiency of natamycin Malova I.O., Kuznetsova U.A.
State medical university, Irkutsk, Russia
Цель исследования - оценить эффективность лечения натамицином беременных женщин с различными формами вульвовагинального кандидоза.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находились 197 пациенток в возрасте от 19 до 32 лет во 2 и 3 триместрах беременности. Candida-носительство констатировали у 21 (10,7%) женщины, острый УГК - у 124 (62,9%), хронический рецидивирующий УГК - у 52 (26,4%). Наличие кандидозного вагинита установили у 176 (89,3%) женщин, вагинит сопровождался вульвитом - у 69 (35,0%), цервицитом - у 92 (46,7%), уретритом с выявлением элементов дрожжеподобных грибов из уретры - у 21 (10,7%). У большинства пациенток выявляли Candida albicans, однако, наряду с этим видом, у 76,1% женщин выявляли нe-albicans виды Candida.
Натамицин при лечении беременных женщин назначали в режиме, рекомендованном Уральским НИИ ДВ и ИП (2005): при Candida-носительстве -100 мг натамицина в виде вагинальной свечи «Пима-фуцин» 1 раз в сутки в течение 3 дней; при остром неосложнённом УГК - 1 свеча 1 раз в сутки в течение
6 дней; при остром осложненном УГК - 1 свеча 1 раз в сутки в течение 9 дней в комбинации с перораль-ным приёмом «Пимафуцина» по 100 мг 4 раза в сутки в течение 5 дней; при хроническом рецидивирующем УКГ - 1 свеча 1 раз в сутки в течение 9 дней в комбинации с пероральным приёмом «Пимафуцина» по 100 мг 4 раза в сутки в течение 10 дней. При наличии вульвита на область вульвы назначали 2% крем «Пи-мафуцин» дважды в сутки в течение 6-9 дней.
Результаты. В процессе лечения отмечали положительную динамику клинических симптомов воспаления: проявления вульвита купировались у всех пациенток к 6 дню лечения, цервицита - к 8 дню, вагинита - к 10 дню.
Через 10 дней после окончания терапии микробиологическая эффективность лечения составила 95,2% при Candida-носительстве, 94,8% - при остром неосложнённом УГК, 85,7% - при остром осложнённом УГК, 88,5% - при хроническом рецидивирующем УГК. Средняя микробиологическая эффективность натамицина составила 91,9%. Все пациентки перенесли лечение натамицином без осложнений.
Вывод. Натамицин сохраняет свою высокую активность по отношению к Candida spp. и остается высокоэффективным и безопасным препаратом при лечении беременных с кандидозным вульвовагини-том.
микромицеты-биодеструкторы
в различных техногенных
субстратах
Маметьева А.А., Павлова И.Э., Чилина Г.А.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина Г0УДП0СП6 МАП0, Санкт-Петербург, Россия
micromycetes-
biode1eriorators in different technogenic substrates
mametyeva а.а., pavlova i.e., chilina g .a.
Kashkin Research Institute of Médical Mycology SEI АРЕ SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
При микологическом обследовании помещений, зданий, сооружений, возводимых конструкций исследователь сталкивается с различными строительными материалами, которые условно можно разделить на основные конструкционные (кирпичная кладка, бетон, и др.) и отделочно-облицовочные (гипсокаргон, штукатурка, шпатлёвка, обои, герме-тик и др.).
Цель работы - изучение видового состава микромицетов-биодеструкторов на различных техногенных субстратах.
Объекты и методы. За пятилетний период было обследовано около 360 объектов путём отбора образцов с поверхностей. Смывы и соскобы засевали на среду Сабуро и/или сусло-агар. Посевы инкубировали при 28 °С и 37 "С до 20 дней.
Результаты. Основным микромицетом-био-деструктором является Pénicillium spp. В очагах биоповреждения кирпичной кладки количество микромицетов редко превышает 300 КОЕ/г, в повреждённом кладочном растворе - около 600 КОЕ/г. В некоторых случаях сильно повреждённая кирпичная кладка содержит до 70000 КОЕ/г. Также в кирпичных стенах часто встречаются микромицеты-биодеструкторы из рода Aspergillus, но в значительно меньших концентрациях.
При биологическом повреждении материалов наиболее активно повреждаются именно отделочные материалы, к которым также можно отнести различные герметики. Нередки случаи, когда видимые повреждения имеются на герметике. При обследовании очагов биоповреждения на герметике обнаруживают микромицеты Cladosporium sp., Fusarium sp., Aureo-basidium pullulans, Pénicillium spp., а также дрожжевую биоту, чаще всего представленную родом Rhodo-torula в количестве до 30000 КОЕ/см2.
На биоповреждённых участках отделочных слоёв краски, штукатурки и шпаклёвки также чаще всего выявляют грибы из родов Pénicillium (до 30000 КОЕ/г) и Aspergillus (до 10000 КОЕ/г). Отдельно можно выделить шпаклёвку, которая может быть повреждена микромицегами Scopulariopsis brevicau-lis, Acremonium sp., при этом количество достигает 50000-100000 КОЕ/г.
Опасность могут представлять виниловые обои, так как после нарушения температурно-влажностного режима визуальных повреждений на них может не быть, но под их слоем создаются благоприятные условия для размножения микромицетов, в частности, на внутренней поверхности нередко обнаруживают грибы Scopulariopsis brevicaulis, Chaeto-mium globosum, Stachybotrys chartarum и др. в количестве до 28000 КОЕ/см2. Как правило, микромицеты на обоях повторяют состав микромицетов на шпаклёвке и штукатурке на стене под обоями.
В последнее время распространённым в строительстве материалом стал гипрок, а также его разновидность гипсоволокнистые листы (ГВЛ). Особенностью этих материалов является наличие целлюлозного компонента в его составе. Это даёт возможность для интенсивного роста микромицетов при создании благоприятных условий (нарушение температурно-влажностного режима). При этом основными микромицетами-биодеструкторами чаще всего являются Pénicillium spp., Chaetomium globosum, Tricho-derma viride, Stachybotrys chartarum. Количество микромицетов может доходить до 50000 КОЕ/г. Согласно строительным нормам Санкт-Петербурга РВСН 20-01-2006, при высокой степени биоповреждения (Ш) материала необходима его замена.
Вывод. Качественный состав микромицетов-биодеструкторов, в некоторых случаях, может определяться субстратом, т.е. видом материала, что, в первую очередь, характерно для герметика и гипсо-картона.
отличительные особенности видов серии ASPERGILLUS VERSICOLOR как возбудителей аспергиллезов
Марфенина Q.E.1, Василенко 0.8/, Фомичева Г.М.1, Богомолова Т.С.3, КулькоА.Б.4
Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова, 2ГНЦ РФ Институт медико-биологических проблем РАН; 3НИИ медицинской микологии СГ16МАП0, Санкт-Петербург;^Московский научно-практический центр борьбы с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы,Россия
distinctive features of the species of ASPERGILLUS VERSICOLOR group, as the causative agents of aspergillosis
Marfenina O.E.1, Vasilenko Q.V.2, Fomicheva G.M.', Bogomolova T.S., KulkoA.B.4
lomonosov Moscow State University; institute for Biomedical Problems of RAS; ^Research Institute of Medical Mycology Saint-Petersburg Postgraduate Education Medical Academy; 4Scientific and Clinical Antituberculosis Center of Moscow Government Health Department, Russia
Цель работы - определить отличия молекулярных и эколого-физиологических свойств оппортунистических грибов труппы Aspergillus versicolor (A versicolor (Vuill.) Tiraboschi и A. sydowii (Bain. And Sart.) Thorn and Church). Всего было исследовано 20 клинических (из БАЛ, легких человека, слухового канала) и из внешней среды штаммов.
Показано, что A. versicolor и A. sydowii не отличаются по морфологическим и имеют незначительные отличия (по пигментации колоний) по культураль-ным признакам, но четко различаются по молекулярным и экологическим свойствам. Молекулярно-генетические различия видов A. versicolor и A. sydowii выявляют по регионам D1/D2 28S рДНК, эти виды различаются на 4-5 нуклеотидов, сходство составляет 99,0-99,2%, По регионам ITS1-5.8S-ITS2 сходство штаммов двух исследованных видов составляет 97,7-98,6%.
Установлено, что исследованные виды занимают разные экологические ниши по отношению к температуре и влажности. Для штаммов вида/1, sydowii показана способность к росту в более широком интервале температур (7-41 °С), активный рост - при 37 °С, в то время как штаммы A. versicolor при этой температуре развиваются плохо. Температурный оптимум роста штаммов A. versicolor составляет 25-27 °С, в то
время как оптимум роста A. sydowii - 27-30 °С. A. sy-dowii имеет более высокие скорости роста (3,9 мм/ сут), чем A, versicolor (2,7 мм/сут). Следует отметить, что все выделенные в России и проанализированные нами клинические штаммы, по молекулярно-генетическим свойствам были идентифицированы как A. sydowii. Уместно предположить, что вид A.sydowii может обладать большим патогенным потенциалом, чем A, versicolor. Исследование выполнено при поддержке гранта РФФИ 08-04-00359а.
влияние
пептидополисахаридного комплекса с OR YNEBA CTERIUM DIPHTERIAE на взаимодействие буккальных эпителиоцитов с
CANDIDA ALBICANS
Махрова Т.В., Маянский А.Н., Шмелева Е.А., Заславская М.И.
Нижегородская государственная медицинская академия, Нижний Новгород,Россия
influence of
COR YNEBA CTERIUM DIPHTERIAE peptidopolysacchar1de complex in the interaction of buccal epithelial cells with CANDIDA ALBICANS
Makhrova T.V., Maianski A.N., Shmeleva H.A., Zaslavskaia M.I.
Nizhny Novgorod Medical State Academy, Nizhny Novgorod, Russia
ТоИ-подобные рецепторы человека (TLR) играют важную роль в гомеостазе> обеспечивая взаимодействие врожденного и адаптивного (специфического) иммунитета. TLR способны сканировать стимулы, исходящие от разнородных агентов, на основе распознавания их наиболее общих (консервативных) структур - рекогносцировочных образов (от англ. «pattern recognition receptors»). При этом Toll-молекулы могут связывать бактериальные липопо-лисахариды, пептидогликаны, липотейхоевые кислоты, липопротеины, гликолипиды, флагеллин, ДНК, фунгальные маннаны, вирусные белки и суперантигены. Известно, что ТоИ-подобные рецепторы TLR-2 и TLR-4 принимают участие во взаимодействии эпителиоцитов с С. albicans. Мы предположили, что компоненты бактерий, которые способны связываться с То11-рецепторами эпителиоцитов, могут за счет конкурентного ингибирования тормозить адгезию С. albicans к эпителиальным клеткам. В качестве подобного бактериального компонента в нашей работе мы использовали пептидо-полисахаридный комплекс С. diphtheriae (препарат «Кодивак», ФГУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, г. Москва). Ампулу «Кодивака» разводили в 1 мл физиологического
раствора для получения концентрации действующего вещества 3 мг/мл. Препарат смешивали в равных объемах с буккальными клетками (105кл/мл) и после инкубации (30 мин, 37 °С) проверяли адгезивную активность эпителиоцитов в системах с Candida. Подсчитывали количество грибов, закрепившихся на одном эпителиоците (просматривали 100 эпителиоцитов). Для сравнения испытывали действие «Кодивака» только на Candida в том же режиме. Контролем служила система с интактными эпителиоцитами и интактными Candida.
В результате выявили отсутствие какого-либо эффекта препарата на адгезию в системе «буккаль-ные эпителиоциты - Candida». Это можно объяснить тем, что пептидо-полисахаридный комплекс С. diphtheriae взаимодействует не со всеми типами TLR-структур буккальных эпителиоцитов, либо тем, что адгезия Candida к эпителиальным клеткам существенно не ограничена Toll-зависимыми межклеточными контактами.
случай сочетания синдрома «зеленых ногтей» с кандидозной онихией у пациентки с протекающим псориатическим поражением ногтей
Медведева Т.В., Митрофанов B.C., Чилина Г.А., Босак И.А.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина Г0УДП0СП6 МАП0, Санкт-Петербург, Россия
the case of «green nails» syndrome and candida onychia in patient with psoriaric nails lesions
Medvedeva T.V., Mitrofanov V.S., Chilina G.A., Bosak I.A.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Первое описание поражения ногтевых пластинок, вызванных синегнойной палочкой (Pseudomonas aeruginosa), сделано в 1944 г. L. Coldam и Н. Fox. В дальнейшем, в англоязычной научной литературе данное поражение ногтевых пластинок получило название «green nails». Отечественные авторы впервые синдром «зеленых ногтей» описали в 1974 г. (A.M. Ариевич, З.Т. Огепанищева, В.Ю. Бормотов).
P. aeruginosa - грам-негативная бактерия, относящаяся к числу возбудителе нозокомиальных инфекций. Провоцирующим фактором в развитии синдрома «зеленых ногтей» является частая травматизация и мацерация ногтевых пластинок. Как правило, заболевания, вызванные P. aeruginosa, обусловлены нарушением обменных процессов, иммуносупрессией,
широким применением антибиотиков, кортикосте-роидных препаратов и цитостатических средств.
Характерное зеленое окрашивание ногтевых пластинок при псевдомонадных онихиях обусловлено внедрением Р. aeruginosa в роговую субстанцию ногтя, где образуется пигмент. Псевдомонадные онихии протекают с чередованием обострений и ремиссий, иногда - в течение многих лет.
Объекты и методы. Под нашим наблюдением находилась женщина 52 лет с поражением ногтевых пластинок кистей и стоп. По специальнос ти она врач-анестезиолог, постоянно, в течение многих лет, имеет контакт с дезинфицирующими средствами. В течение 20 лет пациентка больна псориазом, последние 3 года выявляют гиперхолестеринемию. При осмотре все ногтевые пластинки на кистях с множественными точечными углублениями (симптом «наперстка»), поперечными бороздками; на стопах - с пятнами желтого цвета (симптом «масляного пят-на»)( Пластинки I пальцев кистей и стоп частично отслоены от ногтевого ложа, имеют темно-зеленую окраску. Околоногтевые валики кистей гиперемиро-ваны, отечны. При исследовании ногтевых чешуек кистей и стоп обнаружили почкующиеся дрожжевые клетки; при посеве на среду Сабуро - рост Candida spp., при посеве на мясо-пептонный агар получены колонии Р. aeruginosa. Установили диагноз: псори-артрические онихии, осложненные присоединением Candida-псевдомонадной инфекции.
Выводы.
1. Описан случай сочетанных поражений ногтевых пластинок дрожжевыми грибами р. Candida и Р. aeruginosa у пациентки с псориатическим поражением ногтевых пластинок.
2. Факторами риска в формировании бакте-риально-микотического поражения ногтевых пластинок у данной пациентки явилось наличие хронического кожного заболевания, протекающего с поражением ногтевых пластинок (псориаз), а также наличие профессиональных вредностей - контакт с дезинфицирующими растворами.
иммунологические и иммуногисгохимические особенности рецидивирующего кандидоза пищевода у больных без вич-инфекции
Мелехина Ю.Э., Фролова Е.В.,Учеваткина А.Е., Филиппова Л.В., Выборнова И.А.,Авдеенко Ю.Л. Цинзерлинг В.А., ШевяковМ.А., Васильева Н.В., Климко Н.Н.
НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
immunological and iм m un о нi s t о с н е мiс a l peculiarities of recurrent esophageal candidosis in hivnegative patients
Melekhina J.Yu., Frolova E.V., Uchevatkina A.E., Filippova L.V., Avdeenko Yu. L., Zinzerling V.A., Shevyakov M.A., Vasiiieva N.V., KlimkoN.N.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEi APE SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
Рецидивы кандидоза пищевода развиваются у 1545% больных после успешного лечения первого эпизода.
Цель - изучить клинико-иммунологические особенности рецидивирующего кандидоза пищевода (РКП).
Объекты и методы. Обследовали 96 больных РКП: женщин - 68 (71%), мужчин - 28 (29%) в возрасте от 46 до 65 лет, из которых 50 человек - с РКП в фазе обострения и 46 - с РКП в фазе ремиссии. Группа сравнения состояла из 20 человек с рефлюкс-эзофагитом (РЭ). Критериями диагностики РКП считали сочетание характерных клинических и эндоскопических признаков, выявление псевдомицелия при микроскопии, выделение возбудителя при посеве материала из биоптата слизистой оболочки пищевода, длительность заболевания - 3-7 лет и частоту рецидивов - не менее 1 раз в год.
Субпопуляционный состав лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD 16, CD20, CD25) определяли иммуно-цитохимическим методом с использованием моно-клональных антител. Кислородзависимую бакте-рицидность нейтрофилов оценивали в НСТ-тесте, а также определяли их фагоцитарную и киллерную активность в отношении С. albicans. Продукцию ИФН-у определяли через 24 часа в супернатантах клеток крови с использованием иммуноферментных тест-систем. Иммуногистохимические исследования эпителия пищевода и подлежащей ткани проводили с использованием моноклональных антител (МАТ) к лимфоцитарным антигенам (АГ).
Полученные результаты статистически обрабатывали с помощью программной системы STATISTICA for Windows (версия 6.0).
Результаты. Выявили следующие факторы риска и фоновые заболевания РКП: заболевания щитовидной железы (57%), гипофункцией щитовидной железы (21%), применение антибактериальных препаратов (21%).
Установили, что, по сравнению с больными РКП в фазе ремиссии и Р8, у больных РКП в фазе обострения достоверно снижено абсолютное количество Т-хелперов, продукция ИНФ-у и фагоцитарная активность нейтрофилов. Продукция ИЛ-10 была достоверно выше у всех обследованных больных кан-дидозом пищевода (таблица 1). При исследовании местного иммунитета слизистых оболочек показано, что у пациентов РКП в фазе обострения уровень CD3 клеток был достоверно выше, а уровень CD68 клеток - достоверно ниже, уровень CD4 и CD8 клеток достоверно не отличался по сравнению с группой больных в фазе ремиссии (таблица 2).
Таблица 1.
Показатели иммунореактивности у пациентов РКП
показатель Рецидивирующий кандидоз пищевода в фазе обострения in—3:5) Рецидивирующий кандидоз пищевода в фазе ремиссии fn=33) рефлюкс-эзо-фагит in 20;
С04абс.,х107л 0,735 (0,532—0,951) «# 0,787(0,5904-0,997) 0,901 (0,80240,966)
Фагоцитарный индекс% 60,0(56,04-62,0) ** # 62,0(58,0466,0) 66,0(62,5470,0)
ИНФ-у индуцированный 419,0 (279,0 4 542,0) 695,10±84,44 415,43 ±32,75* **
ИЛ-10 144,0 (123,04-211,0)* ■з* 225,0 (152,04274,0) 33,0 (26,0472,0)
- достоверное отличие между РКО и РЭ (р<0,001-0,05) * - достоверное отличие между РКП в фазе ремиссии и
обострения (р<0,001-0,05)
Таблица 2.
показатели РК0(п =40) РКР(п= 33) РЭ(п=30)
CD3 % 12,44 # (7,664 18,41) 6,25 (2,09 430,71) 13,31 (4,73 431,81)
CD4 % 1,91 (0,37413,26) 1,01 (0,204 2,90) 0,77 (0,3241,88)
CD8 % 5,61 (5,31-8,41) 5,53 (1,77410,19) 3,25 (2,4849,85)
CD68 % 4,85^ (3,05412,88) 3,72 (1,29414,90) 6,52 (1,04412,48)
?= -достоверное отличие между соответствующими показателями группы больных с РКО и РКР (р<0,001-0,05)
Выводы. Возбудителем рецидивирующего кан-дидоза пищевода является С. albicans (чувствительность к флуконазолу - 100%). У больных РКП в фазе обострения при исследовании общего иммунного статуса отмечали снижение числа Т-хелперов, фагоцитарной активности нейтрофилов, продукции ИНФ-у. При исследовании местного иммунитета у этой категории больных установили увеличение CD3 клеток и снижение CD68 в эпителии пищевода и подлежащей ткани. У пациентов РКП в фазе ремиссии выявили повышение продукции ИЛ-10.
хронический рецидивирующий кандидоз гениталий у женщин: к вопросу о профилактике рецидива
Мирзабалаева А.К.1, Долго-Сабурова Ю.В.2
кафедра клинической микологии, аллергологии и иммунологии ГОУ ДПО СПб МАПО; 2НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДНО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
chronic recurrent genital
candidosls in women: to the
question about relapses
prevention
Mirzabalaeva A.K.1, Dolgo-Saburova Yu.V.2
'Chair of Clinical Mycology, Allergy and Immunology SEI APE SPb MAPE;
2Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-
Petersburg, Russia
Хронический рецидивирующий кандидоз гениталий (ХРКГ) занимает ведущее место в структуре заболеваний нижнего отдела половых путей у женщин. Особенностью ХРКГ является сочетание Candida spp. с условно-патогенными бактериями, хламидиями, трихомонадами, микоплазмами, уреа-плазмами. Больные получают многодневные курсы антибактериальной терапии (АБТ), которые влияют как на состояние вагинальной нормобиоты, так и на микробиоту кишечника. По некоторым данным, источником высоковирулентных штаммов Candida spp., поражающих слизистые оболочки полости рта, половых органов (влагалище, вульва, цервикальный канал), является кишечник. Кроме того, гинекологи сталкиваются с проблемой назначения антимикоти-ческой терапии в связи с АБТ воспалительных заболеваний малого таза, экстрагенитальных инфекций.
Объекты и методы. При обследовании 251 женщины с ХРКГ в возрасте от 15 до 71 года (средний возраст -30,6±8,7 года) выявили, что одними из наиболее значимых факторов рецидивирующего течения С а п did а - и i г фе к ц и и являются длительные и повторные курсы АБТ (продолжительность применения антимикробных препаратов > десяти дней). У 51% (132) больных ХРКГ фактором риска развития рецидива была многокурсовая АБТ (не менее двух курсов с момента дебюта ХРКГ, максимальное количество курсов - шесть в течение года). Многокомпонентную АБТ в связи с лечением ИППП и рецидивов хронических воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей и мочевыделительной системы получали 63% и 37% женщин соответственно.
Результаты. У 53% больных ХРКГ рецидивирует уже после семидневного приема антибиотиков. Применение антибиотиков в 68% случаев способствовало формированию дисбиотического процесса на сли-
зистой оболочке влагалища: снижению количества лактобацилл менее 102-103 КОЕ/мл. У 48% женщин выявили дисбиоз кишечника.
В связи с этим, целесообразно проведение клинических исследований эффективности профилактического назначения антимикотических препаратов совместно с антибиотиками.
влияние факторов антропогенного загрязнения на заболеваемость поверхностными микозами работников нефтехимической отрасли Мозжерова М.А.
ФГУ Поликлиника Министерства образования и науки РФ, г.Москва, Россия
the influence of anthropogenic pollution on the incidence of superficial mycosis of workers petrochemical industry Moszherova M.A.
Polyclinic of Education and Science Ministry of Russian Federation, Moscow, Russia
Цель - изучение влияния экологических факторов на заболеваемость поверхностными микозами.
Материалы и методы. Проведено исследование двух групп работников ОАО «Юго-Запад Транснефтепродукт», имеющих одинаковый характер работы, вредные факторы производства, но находящихся в районах, различных по экологическим характеристикам. В 1 группу вошли 163 работника филиала ОАО «Юго-Запад Транснефтепродукт» ЛПДС-8Н, находящегося в Унечском районе Брянской области. Группу сравнения (2 группа) составили 115 сотрудников ПУ ЛДПС «Становая» Становлянского района Белгородской области. Вредные факторы работы обеих групп практически одинаковы, наиболее значимым является контакт со смесью углеводородов, часто - в сочетании с другими вредностями. Территории работ 2 группы имеют фоновые значения радиоактивного загрязнения (средняя плотность загрязнения Cs-137 — 0,13 Ku/км2; уровень у-фона -0,10 мкР/час). Работа 1 группы проводится в районах, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС (средние значения плотности загрязнения Cs-137 - 115,5 Ku/км2; уровень у-фона - 13,5 мкР/час).
Результаты. В 1 группе дерматологические заболевания выявили у 41,7% пациентов, из них микозы - у 28,8%. Во 2 группе дерматозами страдали 34,7% больных, микологическую патологию выявили у 18,2%, в том числе онихомикозы - у 13,9%, микозы гладкой кожи и слизистых оболочек - у 4,3%, По-
казатели дерматологической заболеваемости у лиц, контактирующих со смесью углеводородов, в обеих группах не различались. Микологическая заболеваемость в исследуемой группе, а также заболеваемость онихомикозами была достоверно выше, чем в контрольной (р < 0,1 и р < 0,05). Во 2 группе у работников, имеющих стаж работы 6-10 лет, среди всех исследуемых дерматозов достоверно выше заболеваемость онихомикозами: р<0,01.
Выводы. Установили достоверное увеличение заболеваемости онихомикозами у работников нефте-транспортной отрасли, имеющих производственные вредности (контакт со смесью углеводородов) и находящихся в экологически неблагополучных районах. Также установлена связь заболеваемости онихомикозами с длительност ью контакта с вредными условиями труда и пребывания на экологически загрязненных территориях.
определение видового спектра CANDIDA spp - возбудителей орофарингеального кандидоза у вич-инфицированных пациентов
Мозжерова М.А., 2Колупаев В.Е., 3Локшина Р.И.
'ФГУ Поликлиника Министерства образования и науки РФ, г.Москва; 2000 «БИО-РАД-Лаборатории», г. Москва; ТУЗ «Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Брянской области», Брянск, Россия
identification of species spectrum of CANDIDA spp. as pathogens of oropharyngeal candidosls in hiv-infected patients
'Moszherova M.A.,2KolupaevV.E.,3Lokshina R.I.
1 Polyclinic of Education and Science Ministry of Russian Federation, Moscow;
2 Bio-Rad Laboratories, Moscow;3 Center for Prevention and Control of AIDS and Infectious Disease of Bryansk region, Bryansk, Russia
Цель - исследование видового спектра Candida spp. у ВИЧ-инфицированных лиц в Брянской области.
Методы. Обследовано 174 ВИЧ-инфицированных пациентов Брянского Центра по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями. Провели микроскопическое исследование клинических образцов с окраской по Граму и метиленовым синим и культуральное исследование на селективной хромогенной среде CandiSelect 4.
Результаты. Рост Candida spp. выявили у 70,7% больных, отсутствие клинической симптоматики и отрицательные результаты микологического исследования отмечали у 9,8%, Сяягйй-носительство - у 9,2%. У 29 ВИЧ-инфицированных лиц с клини-
ческими проявлениями поражения слизистых оболочек полости рта результаты микологического исследования были отрицательными (16,6%). Видовой спектр дрожжевых грибов был представлен: С. albicans - 28,5%, С. tropicalis - 18,7%, С. glabrata - 8,9%, С. krusei - 7,3%. В 0,8% случаев выявили дрожжевые грибы, идентифицировать которые не удалось; в 0,8% обнаружили рост плесневых грибов. В 35% случаев выявили микст-инфекцию дрожжевыми грибами, причем в 28,5% обнаружили 2 вида дрожжевых грибов, в 5,7% - 3 вида, в 0,8% - сочетание С. tropicalis и плесневых грибов, а также сочетания видов грибов р. Candida: С. albicans и С. tropicalis - 13,8%, С. albicans и С. glabrata - 3,25%; С. albicans и С. krusei - 6,5%; С. tropicalis и С. krusei - 2,4%; С. tropicalis и С. glabrata -по 1,8%, С. krusei и С. glabrata; С. albicans, С. glabrata и С. tropicalis, С. albicans, С. tropicalis и С. krusei - по 2,4%.
Выводы. Менее чем у трети обследованных ВИЧ-инфицированных лиц с поражениями слизистых оболочек полости рта этиологическим агентом является С. albicans. Выявили нарастание в спектре возбудителей поверхностного кандидоза у больных ВИЧ-инфекцией доли видов Candida с природной резистентностью к антифунгеальным препаратам, а также микст-инфекции дрожжевыми грибами.
роль CANDIDA Ж ASPERGILLUS в иммунопатогенезе язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у лиц с наследственными нарушениями соединительной ткани Москалёв А.В., Рудой А.С. Военно-медицинская академия,Санкт-Петербург, Россия
role of CANDIDA and ASPERGILLUS
in im m un о pato g e n e sis of the
duodenal ulcer at persons with
hereditary infringements of the
connecting fabric
MoskalevA.V., RudoyA.S.
Military Medical Academy, Saint-Petersburg, Russia
Проблему язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, несмотря на достижения последних лет в диагностике и лечении, следует признать недостаточно изученной, а отдельные ее аспекты - весьма далекими от разрешения. Особенно сложной эта проблема выглядит у лиц с наследственными нарушениями соединительной ткани (ННСТ) различной степени выраженности. Согласно научным исследованиям, несмотря на то, что Н. pylori является в настоящее время ведущим инфекционным этиологическим
фактором, но далеко не единственным. К тому же маркеры его присутствия у больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (ЯБДК) выявляют реже, чем в популяции в целом. Видимо, роль других этиологических факторов может быть недостаточно изучена.
Цель исследования - уточнить иммунопатогене-тическую взаимосвязь условно-патогенных грибов с состоянием механизмов фагоцитоза у больных с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, ассоциированной с наследственными нарушениями соединительной ткани различной степени выраженности.
Материалы и методы. Обследовано 78 мужчин молодого возраста (21,3±1,6 г.) с ЯБДК, которые по выраженности признаков соединительно-тканных нарушений были распределены на две группы по 29 человек. Контрольную группу (п=20) составили больные с ЯБДК без признаков дисморфогенеза. Маркеры кандидоза и аспергиллёза (IgG) выявляли с помощью диагностических тест-систем фирмы «Вектор-Бест».
Результаты. У больных с ЯБДК с выраженными формами ННСТ IgG к антигенам Candida выявляли достоверно чаще по сравнению с больными с незначительной диспластической стигматизацией (р<0,01) и группой контроля (р<0,05), маркеры аспергиллёза выявляли достоверно чаще только по сравнению контрольной группой (р<0,05). В отношении состояния механизмов фагоцитоза установили, что у лиц с выраженными формами ННСТ было достоверно снижено количество фагоцитирующих клеток, микробное число и показатель завершенности фагоцитоза по сравнению как с показателями контрольной группы, так и с данными больных с незначительными ННСТ (р<0,05). Кроме того, у всех лиц с грибковой сенсибилизацией обнаружили достоверное увеличение количества эозинофилов.
®
атипичные формы микроспории в детском возрасте Мурашкин H.H., Материкин А.И.
ГУЗ «Клинический кожно-венерологический диспансер» департамента здравоохранения Краснодарского края, г.Краснодар, Россия
atypical forms of microsporia in children Murashkin N.M., Materikin A.I.
Clinical Dermatovenerological Dispensary of Krasnodar region, Krasnodar, Russia
Зооантропонозная микроспория - самое распространенное высококонтагиозное заболевание кожи и волос, общее для человека и животных.
Цель исследования - изучение атипичных форм
микроспории в детском и подростковом возрастах, встречающихся в клинической практике в условиях южного региона России, где всегда отмечался высокий уровень распространенности дерматомикозов. Заболеваемость микроспорией составила в РФ 234,4 на 100 тыс. населения, а в Краснодарском крае -310,2 на 100 тыс. Доля атипичных форм заболевания среди детей и подростков составила 3,2%. Несмотря на небольшое число этих форм в структуре общей заболеваемости, в тактике ведения данной категории пациентов существует наибольшее количество лечебно-диагностических ошибок, что обусловливает сохранение эпидемиологической опасности в очаге заболевания. Среди атипичных форм нами выделены: псориазиформный, себороидный, вол-чаночноподобный, экссудативно-воспалительный тип и нетипичные формы локализации. Для псо-риазиформного типа микроспории характерно наличие инфильтрированных очагов, напоминающих бляшки с массивными серебристо-белого цвета чешуйчатыми наложениями; для себороидного типа - диффузное или очаговое шелушение, разреженность волос или формирование участков очаговой алопеции. Волчаночноподобный тип является исходом длительно недиагностированной и неадекватно леченной инфильтративно-нагноительной формы микроспории, осложненной микидами, быстрым исходом в рубцовую атрофию или люпусподобными очагами, локализующимися на лице. Экссудативно-воспалительный тип характеризуется значительным отеком и эритемой при почти отсутствующем шелушении. При локализации на коже лобка, половых губ и мошонки у подростков, заражение происходит при сексуальных контактах или совместном использовании предметов личной гигиены (как правило, клинические проявления характерные для инфильтративно-нагноительной формы микроспории).
Таким образом, дифференциальная диагностика атипичного течения микозов является важным условием эффективности лечения и прерывания эпидемиологического процесса в очагах дерматомикозов.
микробиота у больных хроническим обсгруктивным бронхитом Нариманов В.А.
Кафедра микробиологии и иммунологии Азербайджанского Медицинского Университета, Баку, Азербайджан
microbiota in patients with chronic obstructive bronchitis NarimanovV,A.
Azerbaijan Medical University, Department ofmicrobiology and immunology, Baku, Azerbaijan
Хронический обструктивный бронхит (ХОБ) -полиэтиологическое заболевание, характеризующееся воспалением бронхов и сопровождающееся гиперсекрецией бронхиальной слизи, поверхностным дыханием и продуктивным изнурительным кашлем. Многие аспекты этиопатогенеза этого заболевания окончательно еще не выяснены.
Цель работы - определить особенности и характер микробиоты при ХОБ.
Материалы и методы. Обследовано 54 больных с ХОБ в возрасте от 52 до 65 лет. Всем пациентам были проведены комплексные клинико-инструментальное, бактериологическое и микологическое обследования. Микробиологическое обследование включало микроскопию нативных и окрашенных препаратов мокроты больных, выделение и идентификацию чистой культуры плесневых грибов и Candida spp., а также бактериобиоты с оценкой чувствительности патогенов к антимикробным препаратам.
Результаты. При изучении 204 образцов мокроты у больных выделили всего 112 видов микроорганизмов в различных сочетаниях; бактерии, преимущественно Streptococcus pneumaniae, S. epidermidis, Hemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Esherihia coli - у 18 больных, плесневые грибы, в частности Aspergillus fumigatus, A. fla-vus - у 7 больных, Candida spp., преимущественно С. albicans - у 10 больных, других представителей этого рода - С. glabrata, С. krusei, С. tropicalis - у 4 больных.
В этиопатогенезе у 12 больных ХОБ важную роль играли ассоциации грибов Candida spp. и бактерий - S. pneumaniae, S. epidermidis, P. aeruginosa, К. pneumaniae, у 3 больных - сочетание Aspergillus spp. и бактерий. Обращает на себя внимание устойчивость и умеренная чувствительность изолированных от больных штаммов микроорганизмов к антимикробным препаратам.
распространенный кандидоз слизистых оболочек на фоне первичной хронической недостаточности коры надпочечников
Неверова Ю.В.,Мирзабалаева А.К., Гулордава М.Д., Котрехова Л.П.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СП6МАП0, Санкт-Петербург, Россия
the clinical case ое diffuse candidosis of mucose membranes in patients with primary insufficiency adrenal cortex
Neverova U.V., Mirsabalaeva A.K., Gulordava M.D., Kotrehova I.P.
KashKin Research Institute of Medical Mycology of SEI APE SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
Приводим случай развития распространенного кандидоза слизистых оболочек у больной атопиче-ским дерматитом с первичной хронической недостаточностью коры надпочечников. Больная М., 35 лет, поступила на лечение на дерматологическое отделение микологической клиники НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина с диагнозом «атопиче-ский дерматит».
При поступлении больная предъявляла жалобы на снижение аппетита, потерю массы тела на 4 кг за 3 месяца, выраженную слабость, низкие цифры артериального давления - 80/60 мм рт.ст., тошноту, боли в верхних отделах живота, тягу к соленому, пигментацию кожи, кожный и влагалищный зуд. Больная страдала атопическим дерматитом в течение 12 лет, и за последний год отметила распространение кожного процесса, появление мокнутия в пределах высыпаний, резкое ухудшение самочувствия. При углубленном клиническом обследовании были выявлены симптомы кандидоза слизистых оболочек полости рта, пищевода, вульвы и влагалища. Диагноз был подтвержден результатами микологического обследования. При микроскопии мазков, взятых с пораженных участков слизистых оболочек полости рта, пищевода, половых органов, обнаружили почкующиеся дрожжевые клетки и псевдомицелий грибов рода Candida. При культуральном исследовании (посев на среду Сабуро) выделили Candida albicans - 10s КОЕ/ мл. Особенности субъективных жалоб и данных объективного обследования больной (боли в животе, тошнота, астения, гипотония, выраженная гиперпигментация кожного покрова) позволили предположить наличие хронической недостаточности коры надпочечников. В связи с этим было проведено
исследование уровней кортизола и адренокортико-тропного (АКТГ) в сыворотке крови с использованием радиоиммунологических методов исследования. Выявленные низкий уровень кортизола крови - 205 нмоль/л (норма 260-720 нмоль/л) и высокий уровень АКТГ - 55,0 пг/мл (норма 8,3-57,8 пг/мл) подтвердили диагноз первичной хронической недостаточности коры надпочечников. При исследовании уровня тиреодных, половых гормонов, с-пептида, инсулина отклонений не обнаружили. В связи с выявленным кандидозом слизистых оболочек больной была начата антифунгальная терапия флуконазолом в дозе 200 мг/сут. в течение 14 дней. Для компенсации функции коры надпочечников параллельно проводили гор-монозаместительную терапию глюкокортикоидами парентерально (преднизолон в дозе 60 мг/сут) с постепенным переходом на пероральные препараты.
Была подобрана комбинированная схема лечения минералкортикоидами (кортинефф 0,1 мг/сут) и глюкокортикоидами (преднизолон 10 мг/сут, кортизон ацетат 37,5 мг/сут). Через 4 недели больная М. повторно госпитализирована в НИИ медицинской микологии. Пациентка отмечала улучшение самочувствия, уменьшение слабости, нормализацию артериального давления до 115/70 мм рт.ст., повышение аппетита, прибавку массы тела на 4 кг, исчезновение болей в животе, зуда кожи и слизистых оболочек. Явления атопического дерматита исчезли. При повторном микроскопическом исследовании не выявили С. albicans на слизистых оболочках. Больная выписана в удовлетворительном состоянии с рекомендациями постоянного приема глюкокортикоидов и коррекции дозы в зависимости от самочувствия под наблюдением эндокринолога и повторных курсов антифун-гальной терапии при рецидивах кандидоза.
Заключение. Представлен клинический случай развития поверхностного кандидоза слизистых оболочек на фоне впервые выявленной хронической недостаточности коры надпочечников у больной атопическим дерматитом. Благодаря антифунгальной терапии в сочетании с адекватной гормонозамести-тельной терапией достигнута ремиссия заболевания. Следует подчеркнуть, что таким больным необходимо проводить диспансерное наблюдение эндокринологом и клиническим микологом в связи с высокой вероятностью развития рецидива кандидоза слизистых оболочек и высокого риска формирования аутоиммунного полиэндокринного синдрома.
влияние экзометаболитов
ассоциативной микробиоты
на фосфолипазную
активность CANDIDA ALBICANS
Николенко М.В., Тимохина Т.Х., Варницына В.В.
ГОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия, г. Тюмень,
Россия
the influence of exsometabolites of the associative miс ro вiо та in the CANDIDA ALBICANS phospholipase activity
Nikolenko M.V., Timokhina Т.Н., Varnitsyna V.V.
Tyumen Medical Academy, Tyumen, Russia
Цель исследования - изучить влияние секреторных продуктов бактерий-ассоциантов на фосфолипазную активность Candida albicans.
Материалы и методы. В эксперименте исследовали воздействие экзометаболитов музейных штаммов: Staphylococcus aureus - 25923 АТСС, Escherichia coli - 35218 АТСС, Pseudornonas aeruginosa 2- 7853 АТСС, Bifidobacterium bifidum на фосфолипазную активность С. albicans - 24433 АТСС, Активность фермента определяли титрометрическим методом (Суплотов С.Н, Журавлева Т.Д., 2009) в течение суток с 4-часовым интервалом. Контроль - активность данного фермента без воздействия метаболитов. Данные статистически обрабатывали по Стьюденту (R.A. Fisher, 1954) и методу наименьших квадратов (W. Nelson et.al., 1979).
Результаты. В ходе экспериментов выявили суточную динамику фосфолипазной активности музейного штамма С. albicans. Биологический ритм характеризовался достоверным циркадианным вкладом, стабильной акрофазой в утреннее время. На основании смоделированного в эксперименте влияния экзометаболитов бактерий-ассоциантов на ферментативную активность грибов оценивали характер межмикробных взаимоотношений. Нейтральный тип ассоциативного симбиоза выявили у С. albicans и условно-патогенных микроорганизмов. Экзометаболиты симбионтов — Е. coli, P. aeruginosa и В. bifidum не изменяли ритмометрические показатели активности фосфолипазы грибов. Стабильность фазово-амплитудных значений и показателей мезора С. albicans могут быть показателями закономерности колебаний и оказались типовым признаком временных рядов ферментативной активности гриба. В биоценозе «С. albicans - S. aureus» определен сателлитный тип взаимоотношений. Под влиянием метаболитов S. aureus изменился профиль
ритма фосфолипазной активности гриба. Характер колебаний определяли два ритмичных компонента спектра - 12- и 8-часовая гармоника, с максимумами активности в 8.00 и 16.00 часов, наблюдали увеличение мезора.
Вывод. Метаболиты S. aureus усиливали внеклеточное выделение фосфолипазы культурой С. albicans- 24433 АТСС каждые восемь часов, повышая ее агрессивность, а также устойчивость гриба к факторам иммунитета.
суточная динамика фосфолипазной активности
CANDIDA ALBICANS
Николенко M.В., Тимохина Т.Х., Варницына В.В. Машкина H.A., Нестерова О.С.
ГОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия, г. Тюмень, Россия
the daily dynamic of CANDIDA ALBICANS phospholipase activity
Nikolenko M.V., Timokhina Т.Н., Varnitsyna V.V., Maschkina N.A., Nyesterowa O.S.
Tyumen Medical Academy, Tyumen, Russia
В связи с широким диапазоном поражений Ca п di da - и п ф с к ц и й необходимо пристальное внимание и всестороннее изучение факторов патогенности (колонизации, вирулентности, агрессии) у выделенных культур. Одним из универсальных факторов вирулентности является фосфолипаза.
Цель исследования - изучить динамику фосфолипазной активности Candida albicans в течение суток.
Материалы и методы. В экспериментах использовали штамм С. albicans - 24433 АТСС и изоляты, выделенные из клинического материала - биотопов: зева, кишечника, влагалищного отделяемого со степенью высеваемости 102 и 106. Активность фосфолипазы определяли титрометрическим способом (Су-плотов С.Н, Журавлева Т.Д., 2009). Результаты статистически обрабатывали по Стьюденту (R.A. Fisher, 1954) и методу наименьших квадратов (W. Nelson et.al., 1979). Динамику фосфолипазной активности С. albicans изучали в течение суток.
Результаты, Экспериментально выявили суточную динамику фосфолипазной активности всех изучаемых культур. У штамма С. albicans АТСС установлен достоверный околосуточный ритм ферментативной активности с максимальным значением показателя в утреннее время. Профиль ритма и ритмометрические показатели фосфолипазной активности культур, выделенных из разных биотопов в 102 степени высеваемости, не отличались от музейного штамма. Возможно, грибы, при клинически не мани-
фестируемой степени высеваемости, обладают биологическим ритмом активности фермента, достаточно устойчивым и, по возможности, независимым от многочисленных случайных воздействий. В хроно-инфраструктуре фосфолипазной активности изоля-тов С. albicans, выделенных из разных биотопов в 106 степени высеваемости, преобладал ультрадианный (12-часовой) вклад ритма, наблюдали снижение ме-зора и амплитуды колебаний, изменение профиля ритма с максимумом показателя в дневное и ночное время. Выявленный факт служит основанием реализации патологического резерва ферментативной активности С. albicans и максимальных возможностей грибов адаптироваться к новым условиям существования.
стереонаправленный синтез олигосахаридных фрагментов гаикопоаимеров клеточной стенки грибов и гликоконьюгатов на их основе - инструментов для гликобиологических исследований Нифантьев Н.Э., Цветков Ю.Е., Карелин А.А. Лаборатория химии гликоконъюгатов, Институт органической химии им. Н.Д.Зелинского, Российская академия наук, Москва, Россия
stereo controlled synthesis of
oligosaccharide fragments of
fungal cell wall glycopolymers
and glycoconjugates thereof -
the tools for g lyco bio lo g 1с a l
investigations
NifantievN.E., TsvetkovY.E., Karelin A.A.
Laboratory of glycoconjugate chemistry, N. D. Zeiinsky Institute of Organic
Chemistry, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia
Важнейшими компонентами клеточной стенки грибов являются разнообразные углеводсодержащие биополимеры. К ним относят полисахариды, такие как р-(1-»3)-, (3-(1—>6)- и а-(1—>3)-глюканы, хитозан и другие, и гликопротеины, наиболее распространенным из которых является маннопротеин. Углеводсодержащие биополимеры играют определяющую роль в адгезии к клеткам организма-хозяина и индукции иммунного ответа. Для выяснения биологической роли углеводов в процессах взаимодействия клеток грибов с клетками высших организмов и создания противогрибковых вакцинных препаратов нового поколения необходимо располагать образцами оли-госахаридных фрагментов гликополимеров строго определенной химической структуры.
В настоящем сообщении будет представлен сте-
реонагтравленный химический синтез олигоманно-зидных фрагментов манногтротеина Candida, отвечающих антигенным факторам 1, 4, 9 и 34, и серии (3-(1—>3)-связанных глюкоолигосахаридов вплоть до тридекасахарида. В структуре синтезированных оли-госахаридов предусмотрен элемент, позволяющий осуществлять их ковалентное связывание с белками-носителями или метками с получением различных типов неогликоконъюгатов. Синтезированные таким образом иммуногены и молекулярные зонды являются удобными инструментами для изучения глико-биологии грибковых патогенов.
заболеваемость и клинические особенности микозов у населения г. воронежа за 2009 год Новикова Л.А., Бахметьева Т.М.
ГОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко», Воронеж, Россия
incidence and clinical peculiarities of mycoses in voronezh population for 2009 year
Novikova L.A., Bakhmetyeva T.M.
GOU VPO «Voronezh State Medical Academy them. N.N. Burdenko», Voronezh, Russia
Снижение уровня распространенности заразных кожных заболеваний, в первую очередь, грибковых, по-прежнему, остается одним из приоритетных направлений профилактической деятельности дерматологической службы.
Цель исследования - изучение заболеваемости и клинических особенностей грибковых заболеваний в городе Воронеже за 2009 год.
Методы исследования. По отчетным материалам и амбулаторным картам микологического кабинета МУЗ ГО г. Воронежа ГКБ № 7 изучали заболеваемость и клинические особенности грибковых заболеваний за 2009 год. Диагноз выставляли на основании клинического, лабораторного исследования: микроскопической и культуральной диагностики, а также люминесцентного исследования.
Результаты. Нами установлено, что за 2009 год по г. Воронежу зарегистрировано 17273 больных с заболеваниями кожи, в том числе первичных - 13728 человек. В общей структуре заболеваний кожи больных с инфекционными и паразитарными заболеваниями кожи было 6660 случаев (48,5%), Среди инфекционных и паразитарных болезней кожи было 4652 больных с грибковыми заболеваниями кожи, что составило 69,8%. При сравнительном изучении структуры грибковых Заболеваний кожи населения
г.Воронежа показано, что среди грибковой заболеваемости кожи наиболее часто встречаются микозы стоп (2882 больных, 62%), на втором месте - отру-бевидный лишай (1561 больных, 33,5%), на третьем месте - микроспория (271 больной, 4,5%). Случаев трихофитии не зарегистрировали. По данным лаборатории МУЗ ГКБ № 7, в течение 2009 года было выявлено 2567 случаев (89,1%) микоза стоп, вызванного Trichophyton rubrum, 315 случаев (10,9%) - Trichophyton mentagrophytes var. inter digitale. Анализом клинических особенностей больных микроспорией за 2009 г. показано следующее. Среди больных микроспорией лиц женского пола было 180 человек (66,4%), мужского - 91 человек (33,6%). Возраст больных колебался от 3 до 42 лет. Удельный вес детей (0-14 лет) среди больных микроспорией составил 90,4% (245 больных), подростков - 5,9% (16), взрослых - 3,7% (10). Пациентов в возрасте до 3 лет было 39 человек (14,4%), 4-7 лет - 101 (37,3 %), 8-14 лет - 105 (38,7%), 15-17 лет - 16 (5,7%), 18-19 лет - 2 (0,7%), 40 и старше - 8 (3%). Поражение гладкой кожи наблюдали у 183 больных (67,5%), гладкой кожи и волосистой части головы - у 78 (28,8%), волосистой части головы
- у 10 (3,7%). Соотношение частоты встречаемости поражения гладкой кожи к случаям с поражением волосистой части составило в 2009 г. 2,1:1. 87 больных микроспорией (32,1%) посещали детские дошкольные учреждения, 127 (46,9%) - школы, 4 (1,5%)
- колледжи, вузы. При микроскопическом исследовании у всех больных в анализах были обнаружены патогенные грибы, при культуральном исследовании определЬли рост патогенного М. canis, то есть больные имели зооантропонозную форму. Максимальный пик заболеваемости микроспорией, вызываемой М. canis, приходился на конец лета - начало осени. Источниками заражения больных микроспорией служили чаще животные (212 случаев 78,2%), в том числе бездомные. У 27 больных (9,9%) источником заражения были контактные люди, чаще - члены семьи.
Выводы. В структуре кожных заболеваний населения г. Воронежа имеет место значительное число грибковой патологии со значительным удельным весом микоза стоп, отрубевидного лишая, микроспории. Основным возбудителем микоза стоп является Trichophyton rubrum, микроспории - М. canis. Согласно полученным данным, акцентируем внимание на особенностях структуры микозов, в том числе - в разных возрастных группах, и рациональной организации лечебно-диагностических, диспансерных, профилактических мероприятий, уделяя большее внимание повышению знаний врачей по грибковым заболеваниям.
эпидемиологические особенности микроспории за период 2000-2009 годы в г. воронеже Новикова Л.А., Бахметьева Т.М.
Г0У ВП0 «Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко», Воронеж, Россия
epidemiological peculiarities of microsporia in the period of 2000-2009 years in voronezh, russia
Novikova L.A., Bakhmetyeva T.M.
GOU VPO «Voronezh State Medical Academy them. N.N. Burdenko», Voronezh, Russia
Микроспория относится к наиболее часто встречающимся заболеваниям микотической этиологии. Среди заболеваний грибковой природы у человека, по распространенности, микроспория занимает второе место после микозов стоп. Заболеваемость микроспорией в 2007 году в Российской Федерации составила 49 случаев на 100 тысяч населения (в 2006 году - 50,8 случаев).
Цель исследования - изучение эпидемиологических особенностей микроспории в городе Воронеже.
Методы исследования. По отчетным и статистическим материалам микологического кабинета МУЗ ГО г. Воронеж ГКБ № 7 изучали показатели заболеваемости микроспорией за последние 10 лет (20002009 гг.).
Результаты. При изучении показателей и динамики заболеваемости микроспорией за период 20002009гг. показано следующее, В 2000 году заболеваемость микроспорией увеличилась на 8,1% (по сравнению с итоговым значением заболеваемости в 1999 году) и составила 71,4 на 100 тыс. населения, или 683 случая. В 2001 году отмечали снижение заболеваемости микроспорией на 31,1% (по сравнению с 2000 г.), она составила 47,3 на 100 тыс. населения (464 случая против 683 случаев в 2000 г.). В 2002 году наблюдали рост заболеваемости микроспорией на 1,3% (по сравнению с 2001 г.), она составила 48,0 на 100 тыс. населения (470 случаев против 464 случаев в 2001 г.). В 2003 году заболеваемость микроспорией снизилась на 24,6% (по сравнению с 2002 г.) и составила 36,0 на 100 тыс. населения (352 случая против 470 случаев в 2002 г.). В 2004 году отмечали снижение заболеваемости микроспорией на 3,1% (по сравнению с 2003 г.), она составила 34,9 на 100 тыс. населения (341 случай против 352 случаев в 2003 г.). В 2005 году наблюдали снижение заболеваемости микроспорией на 23,2% (по сравнению с 2004 г.), и она составила 28,2 на 100 тыс. населения (262 случая против 341 случая в
2004 г.). В 2006 году заболеваемость микроспорией снизилась на 22,5% (по сравнению с 2005 г.) и составила 21,9 на 100 тыс. населения (203 случая против 262 случаев в 2005 г.). По итогам 2007 года заболеваемость микроспорией возросла на 29,1% в сравнении с тем же отчетным периодом 2006 года и составила 28,5 на 100 тыс. населения, что соответствует 262 случаям против 203 случаев в 2006 г. По итогам 2008 года заболеваемость микроспорией снизилась на 10,3%. в сравнении с тем же отчетным периодом 2007 года и составила 25,5 на 100 тыс. населения, что соответствует 235 случаям против 262 случаев в 2007 г. В 2009 году заболеваемость микроспорией увеличилась на 15,7% в сравнении с тем же отчетным периодом 2008 годом и составила 29,4 на 100 тыс. населения, что соответствует 271 случаю против 235 случаев в 2008 г. В общем, за анализируемый период уровень заболеваемости микроспорией в 2009 году снизился в 2,5 раза по сравнению с 2000 годом.
Выводы. За последние 10 лет произошло снижение заболеваемости микроспорией в г. Воронеже. В то же время ежегодно число регистрируемых случаев остаётся значительным, при этом изменение показателя заболеваемости характеризуется чередованием периодов его увеличения и уменьшения. Учитывая значительный уровень заболеваемости микроспорией, необходимо дальнейшее совершенствование мероприятий по ее снижению.
ПРИМЕНЕНИЕ «ИТРАЗОАА»
В ТЕРАПИИ МИКОЗОВ И
ОНИХОМИКОЗОВ СТОП
Новикова Л.А., Бахметьева Т.М., Бахметьев А.А.
Г0У ВП0 «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко», Воронеж, Россия
USING OF «ITRAZOL» IN THERAPY OF
FEET MYCOSIS AND ONYCHOMYCOSIS
Novikova L.A., Bakhmetyeva T.M., Bakhmetiev A.A.
G0U VP0 «Voronezh State Medical Academy them. NN Burdenko», Voronezh, Russia
ском фармацевтическом рынке появился новый отечественный играконазол под торговой маркой «Итразол» (ЗАО «Вертекс» Россия) по цене, доступной большому количеству пациентов. «Итразол» активен в отношении дерматомицетов, дрожжевых, дрожжеподобных, плесневых и др. грибов. Максимальную биодоступность «Итразола» отмечают при применении препарата сразу же после плотной еды. Связывание с белками плазмы составляет 99,8%. «Итразол» распределяется в различных тканях. Терапевтическая концентрация в кератине ногтей достигается через одну неделю после начала лечения и сохраняется в течение 6 месяцев после завершения 3-месячного курса лечения. Препарат метаболизиру-ется в печени с образованием большого количества метаболитов, которые выводятся почками и с калом уже в неизмененном виде.
Объекты и методы. Под нашим наблюдением находилось 23 больных в возрасте от 29 до 52 лет. У 12 пациентов диагностировали рубромикоз стоп, у 11 -онихомикоз. Перед началом лечения «Итразолом» и по его окончании исследовали общий анализ крови, мочи, функциональное состояние печени, оценивали индекс КИОТОС. При микозе гладкой кожи стоп препарат назначали по 200 мг (2 капсулы) 1 раз в сутки после плотной еды. При онихомикозе применяли методику пульс-терапии (3 курса по 200 мг 2 раза в сутки в течение 7 дней с интервалом в 3 недели). Переносимость препарата была хорошей у 21 больного, двое пациентов отмечали незначительные диспепти-ческие явления, которые не потребовали его отмены.
Результаты. После проведенного лечения клинико-лабораторное выздоровление наступило у 12 больных, страдающих рубромикозом стоп, и у 9 больных с онихомикозом; 2 больным была назначена дополнительная топическая терапия антимикоти-ческим кремом. У пациентов с онихомикозом начали отрастать здоровые ногтевые пластинки на 25-30% площади при сроке наблюдения 3-4 месяца.
Вывод. «Итразол» представляет собой эффективный и хорошо переносимый препарат, который можно использовать как монотерапию, так и в комплексе с наружной терапией микоза стоп и онихоми-коза.
Одной из актуальных проблем дерматологии являются микозы кожи и ее придатков. Необходимость поиска новых этиотропных средств лечения микозов кожи и ногтевых пластинок обусловлена высокой распространенностью данной патологии и длительным, нередко рецидивирующим, течением. В последние годы арсенал лекарственных средств у дерматологов пополнился новыми препаратами местного и системного лечения микозов. Выбор препарата зависит от распространенности очагов поражения, результатов предшествующей терапии.
Нами накоплен положительный опыт лечения микозов стоп итраконазолом. Недавно на россий-
©
к вопросу о терапии
себорейного дерматита
Новикова Л.А., Буравкова А.Г., Демьянова О.Б.
Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко, Россия
то the question of the seborrhoic dermatitis therapy Novikova L.A., Buravkova A.G., Demyanova O.B.
Voronezh State Medical Academy, Russia
Себорейный дерматит - хроническое воспалительное заболевание, возникающее на участках кожи с хорошо развитыми сальными железами и встречающееся у 3-5% всего населения. В настоящее время в качестве ведущего этиопатогенетического фактора себорейного дерматита рассматривают дрожже-подобные грибы рода Malassezia, а также отмечают определенную роль бактериальной микробиоты. Поэтому предпочтение отдают комбинированным средствам наружной терапии, влияющим одновременно на несколько механизмов этиопатогенеза. Такими средствами являются кремы «Травокорт» и «Травоген», оказывающие выраженные противовоспалительный, противогрибковый и антибактериальный эффекты.
Цель исследования - оценить эффективность, безопасность и переносимость кремов «Травокорт» и «Травоген» в лечении пациентов, страдающих се-борейным дерматитом.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 19 больных себорейным дерматитом (11 мужчин и 8 женщин) в возрасте от 17 до 59 лет.
У 5 пациентов очаги поражения локализовались на коже волосистой части головы, у 4 - на коже лица, у б - на коже лица и волосистой части головы, у 4 -на коже туловища. В комплексное лечение включали витамины, антигистаминные и седативные средства, сорбенты и др. В качестве наружного лечения всем пациентам на первом этапе назначали крем «Травокорт» 2 раза в день в течение 5-7 дней, а после снятия остроты воспалительного процесса, на втором этапе - крем «Травоген» 1 раз в день в течение 2-3 недель. При поражении волосистой части головы терапию кремами дополняли шампунями «Кето-плюс», «Фридерм-Zn». До лечения и после его окончания проводили динамическое наблюдение за показателями общих анализов крови и мочи, основных биохимических тестов.
Результаты. У всех наблюдаемых пациентов на фоне лечения зуд и жжение в очагах исчезли на 3—4 день, на 5-6 день значительно уменьшились эритема, отечность, шелушение, сократилось количество чешуек-корок. Отмечали более медленный регресс
элементов сыпи при локализации очагов поражения на коже туловища, что потребовало более длительной терапии кремом «Травокорт». Длительность наружного лечения состав ила 3-4 недели. Клиническое выздоровление было достигнуто у 17 пациентов, значительное улучшение - у 2 человек с локализацией процесса на коже туловища.
Отмечали хорошую переносимость «Травокорта» и «Травогена». Лишь один пациент отметил появление кратковременного ощущения жжения в очаге поражения в первые сутки нанесения крема «Травокорт», что не потребовало отмены препарата. Все пациенты отметили простоту и удобство применения кремов.В общих анализах крови, мочи и в биохимических тестах по окончании лечения патологических отклонений не выявили.
Вывод. Комбинированные препараты «Травокорт» и «Травоген» являются эффективными, безопасными и удобными в применении лекарственными
средствами в лечении себорейного дерматита. @
опыт применения «итразола» в терапии кандидоза кожи и ногтей
Новикова Л.А., Буравкова А.Г., Демьянова О.Б.
Воронежская государственная медицинская академия им. H.H. Бурденко,Россия
experience of cutaneus and nail candidosis treatment by «itrazol»
Novikova L.A., Buravkova A.G., Demyanova O.B.
Voronezh State Medical Academy, Russia
Поражения кожи и ногтей, обусловленные условно-патогенными Candida spp., составляют вторую после дерматомикозов по численности и значимости группу. Проблема кандидоза в последние десятилетия становится все более актуальной из-За неуклонного роста распространенности этой патологии во всем мире. Кандидозные поражения кожи и ногтей сопутствуют иммунодефицитным состояниям различной природы.
Цель исследования - оценить эффективность, безопасность и переносимость итроконазола в форме препарата «Игразол» в лечении кандидозных онихий и паронихий.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находились 18 пациентов, страдающих кандидозны-ми онихиями кистей (16 женщин и двое мужчин), в возрасте от 20 до 62 лет. Количество ногтевых пластинок, вовлеченных в патологический процесс, колебалось от 6 до 10. у 10 пациентов онихии сочетались с паронихиями, у 5 - с поражением межпальцевых складок правой кисти.
Диагностику кандидозных поражений проводили на основании клинических и лабораторных данных (микроонихоскопия, микроскопия и микробиологическое исследование). Лечение проводили отечественным препаратом «Итразол» (итроконазол в капсулах по 100 мг; производитель ЗАО «Вертекс») по традиционной схеме пульс-терапии в течение 2 месяцев (2 курса). На очаги поражения кожи использовали кремы «Травокорт» и «Травоген».
До лечения и после его окончания проводили динамическое наблюдение за показателями общих анализов крови и мочи, основных биохимических тестов.
Результаты. Клиническое выздоровление, сопровождающееся микробиологическим излечением, наступило у 15 пациентов. У 3 человек, страдающих сахарным диабетом, начался рост здоровых ногтевых пластинок, но микологического излечения не наступило. Им был назначен дополнительный курс «Итразола». Следует отметить, что у ряда пациентов (4 чел.) при отрицательных микологических тестах сохранялась деформация отдельных ногтевых пластинок. Высыпания на коже разрешились на 7-11 день от начала лечения. Переносимость «Итразола» была хорошей. Лишь 1 пациент в первый день приема отмечал дискомфорт в эпигастральной области, который прошел самостоятельно и не потребовал отмены препарата. Патологических отклонений в показателях биохимического анализа крови, общего анализа крови и мочи не наблюдали.
Вывод. По нашему опыту лечение кандидозных поражений ногтей и кожи «Итразолом» было высокоэффективным, хорошо переносимым и безопасным.
современные подходы к рациональной наружной терапии кандидозного баланита и баланопостита Новикова Л.А., БяликЛ.Р,
Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, г. Воронеж, Россия
modern approaches то rational topical therapy of candida balanitis and balanopostitis Novikova L.A., Byalik L.R.
Voronezh State Medical Academy named by N.N. Burdenko, Voronezh, Russia
Среди многих вопросов, связанных с инфекциями, передаваемыми половым путем, и заболеваниями урогенитальной сферы, есть один, которому в настоящий момент уделяется мало внимания - это баланит и баланопостит (БЛП).
Согласно анализу имеющихся данных, доля об-
ращаемости по поводу баланита и БЛП составляет порядка 11% всех больных в структуре медицинских учреждений, занимающихся проблемами урогени-тальных инфекций. При этом кандидозное поражение головки полового члена и крайней плоти выявляют примерно в 15% случаев.
Клиническая картина БЛП часто представлена воспалением, т.е. покраснением, резкой степенью отечности, нередко мацерацией и/или эрозировани-ем и различного рода субъективными ощущениями, среди которых превалирует зуд.
Чаще всего в терапии БЛП микотической этиологии используют топические антимикотики широкого спектра действия, однако применение композиционных мазей и кремов, имеющих в своем составе антимикотик, антибиотик и кортикостероид, позволяет достигнуть эффекта от лечения быстрее. Таким образом, назначение комбинированного препарата «Тридерм» (бетаметазон дипропионат + гентамицин сульфат + клотримазол) крем при лечении микоти-ческого БЛП обеспечит быструю элиминацию возбудителя, снятие симптомов воспаления и предотвращение присоединения вторичной бактериальной инфекции.
На пораженные участки кожи и слизистой оболочки наносят, слегка втирая, небольшое количество препарата 2 раза в сутки. Длительность лечения определяют индивидуально - она зависит от тяжести заболевания; средняя продолжительность терапии составляет от 5 дней до 2 недель. Такая продолжительность зависит от того, что клинические симптомы исчезают медленнее, чем наступает этиологическое излечение.
Пациентам рекомендуют открывать и промывать головку полового члена водой с гигиеническим мылом несколько раз в день, тщательно высушивая ее после каждой процедуры.
оценка эффективности современной терапии онихомикозом у лиц пожилого возраста Новикова Л.А., Бялик Л.Р., Донцова Е.В. Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, г. Воронеж, Россия
efficiency of onychomycosis treatment in the elderly patients
Novikova L.A., Byalik L.R., Dontzova E.V.
Voronezh State Medical Academy named by N.N. Burdenko, Voronezh, Russia
Цель работы - оценка эффективности лечения онихомикозов у пожилых лиц.
Материалы и методы. Для комплексного лече-
ния микоза ногтевой пластинки были выбраны тер-бинафин, лак «Аморфин». Тербизил (тербинафин) назначали в суточной дозе 250 мг после еды в течение 3—4 недель. «Аморфин» 5% лак применяли местно 1 раз в неделю в течение 6 месяцев.
Результаты. Под наблюдением находилось 63 больных онихомикозом (29 мужчин и 34 женщины). Возраст больных - от 54 до 78 лет. У большинства пациентов преобладали множественные поражения ногтей (79,2%), у 76,5% больных диагносцировали онихомикоз стоп и кистей. 12 пациентов страдали онихомикозом более 14 лет, 17 - от 7 до 11 лет; 21 - от 1 до 3 лет. У 11 пациентов отмечали тотальный онихомикоз; у 31 - поражения отдельных ногтей, стоп; у 21 больного онихомикоз сопровождался интертригинозно-сквамозными поражениями стоп. У 46 пациентов диагноз был подтвержден культу-ральным обнаружением Trichophyton rubrum, у 17 - дрожжеподобных грибов. Мы использовали клинический индекс оценки тяжести онихомикозов -КИОТОС (А.Ю. Сергеев, 2006 год).
В результате лечения у 58% пациентов зуд кожи исчезал к 6-7 суткам лечения, воспалительные явления регрессировали к 10-11 дню лечения, а явления десквамации - к 16-17 дню терапии. Переносимость препаратов была хорошей, неблагоприятных побочных реакций не отмечали.
Вывод. После комплексного лечения онихомико-за, включающего сочетание тербинафина и «Амор-фина», отмечали рост здоровых ногтей у 68% больных, у которых при дальнейшей диспансеризации здоровые ногти выросли у 41%. При этом позитивный результат лечения наблюдали у пациентов с меньшей длительностью и объемом поражения ногтей. Все больные перенесли лечение удовлетворительно, побочных явлений и интоксикации не отмечали.
сравнение результатов различных методов обследования женщин с хроническим вагинальным кандидозом Паулов О.И.1, Юцковский А.ДЛ Кулагина Л.М.2 'Краевой клинический кожно-венерологический диспансер, г. Владивосток; владивостокский государственный медицинский университет, Россия
the comparative results various metods researches of womens with chronic candida vaginosis PaulovO. l.1,YutskovskyA.D.2, Kulagina L.M.2
'Prymorie Regional Skin Venereal Dispensary,2VSMU, Vladivostok, Russia
Нами было замечено, что при культуральном обследовании у части женщин, имевших положитель-
ные результаты морфологического исследования, рост микробиоты на питательных средах полностью отсутствовал и, как правило, это были женщины, неоднократно применявшие для лечения препараты флуконазола.
Цель исследования - сравнение результатов морфологического и культурального методов обследования женщин с хроническим вагинальным канди-дозом.
Объекты и методы. Обследовано 94 женщины с хроническим вагинальным кандидозом. Один и тот же материал параллельно микроскопировали в на-тивных препаратах с 10% КОН и засевали на среду Candiselect 2 (BioRAD) с последующей идентификацией на планшетах Auxocolor 20 (BioRAD).
Результаты. По результатам микроскопии обследованные женщины были разделены на 4 группы, и в каждой было проведено культуральное исследование: в 1-й группе - у 20 человек (21,3%) обнаружили грибы в форме мицелия или псевдомицелия, рост грибов наблюдали у 100%; во 2-й - у 24 (25,5%) выявили грибы в форме типичных дрожжеподобных клеток, рост грибов был у 79%; в 3-й - у 25 (26,6%) обнаружили грибы в виде атипичных дрожжеподобных клеток (необычная форма, гипертрофированные размеры, утонченная стенка), рост грибов - у 16%; в 4-й - у 25 (26,6%) грибы в препаратах не обнаружили, рост отмечали у 16% женщин.
Выводы. Представляют интерес результаты 3-й группы, где морфологически выявляли атипичные формы Candida, а культурально рост грибов был лишь у 16%, как и в 4-й группе, где микроскопически Candida не обнаружили совсем. По видимому, пребывание грибов рода Candida в атипичной морфологической форме препятствует их росту на питательной среде. Не исключено, что эта форма формируется под воздействием системной терапии вагинального кандидоза и, возможно, является аналогией L-формы бактерий, позволяющей микроорганизмам выжить в организме хозяина, несмотря на лечение. В любом случае, мы уверены, что данный вопрос требует дальнейшего изучения.
оптимизация условий амплификации и терминации для последующего сиквенирования днк по генам ррнк у грибов родов ASPERGILLUS, CRYPTOCOCCUS, CANDIDA и TRICHOPHYTON
Пестова Н.Е., Богданов К.В., Горбунова A.B., Игнатьева С.М.
НИИ Медицинской микологии им. Кашкина СПбМАПО Росздрава, С-Петербург, Россия
optimization of amplification and termination steps for dna sequencing of aspergillus spp., CRYPTOCOCCUS spp., CANDIDA spp., TRICHOPHYTON spp. Pestova N.E., Bogdanov K.V., Gorbunova A.V., Igtatieva S.M. Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEI APE SPb MAPE, St. Petersburg, Russia
Регионы внутреннего транскрибируемого спей-сера ITS и D1/D2 (NL) 28S субъединицы рРНК являются наиболее вариабельными у эукариот. Эти ло-кусы часто используют для видовой идентификации грибов методом сиквенирования ДНК. Проведение этого анализа в лабораторных условиях является трудоемким и сопровождается рядом методических сложностей.
Цель исследования - подобрать оптимальные условия проведения ПЦР и терминирования для последующего сиквенирования ДНК с целью видовой идентификации грибов.
Материалы и методы. Исследовали образцы ДНК, полученные из чистых культур грибов родов Aspergillus, Cryptococcus, Candida и Trichophyton (п=51). Для всех микромицетов было выполнено сиквенирование локуса ITS и региона D1/D2 - NL с помощью генетического анализатора 3500 (Applied Biosystems). Оценку результатов сиквенирования проводили с помощью программного обеспечения (DNA Sequencing Analysis Software v.5.4; Applied Biosystems).
Результаты. Для каждого рода гриба и каждой пары праймеров опытным путем подбирали температуру отжига, количество циклов ПЦР и концентрацию праймеров. Результаты оптимизации условий амплификации представлены в таблице.
Оптимизация условий амплификации
Программа амплификации Candida spp. Aspergillus spp. Cryptococcus spp. Trichophyton spp.
Г отжига 57 °С 55° С 55 °С 574
95°С-10мин; 95 °С- 1 мин;
время отжига -1 мин.; 72° С-1,5 мин; 35 циклов 40 циклов 35 циклов 35 циклов
72°С- 10 мин
Конц. праймера 1151/ 1Т54 или ШЖ4 (на объем реакции 50 гпк!) 5pmol 20 pmol 20 pmol 10 pmol
Кроме того, для исследуемых микромицетов была проведена оптимизация условий постановки реакции терминации. При этом для каждого рода опытным путем подбирали концентрацию ДНК-амплификата и праймеров: ITS1, ITS4, NL1, NL4.
Очистку продуктов терминации проводили двумя способами: этанол/ЭДТА преципитация (Applied Biosystems, Protocol: BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit, Ethanol/EDTA Precipitation) и с помощью набора для удаления избытка терминаторов (Applied Biosystems, BigDye XTerminator Purification Kit). Было показано, что очистка продуктов терминации методом этанол/ЭДТА преципитации проходила хуже, чем при использовании коммерческого набора. При этом длина фрагмента ДНК после очистки продуктов терминации методом этанол/ЭДТА преципитации оказалась, в среднем, на 50-70 нуклеотидов короче, чем при использовании набора, что не обеспечивало полное прочтение последовательности сиквенируемой ДНК.
Выводы. Для каждого рода исследуемых микромицетов следует проводить индивидуальную оптимизацию условий амплификации с учетом температуры отжига, количества циклов ПЦР и концентрации праймеров. Применение коммерческого набора для очистки продуктов терминации повышает качество сиквенирования и длину прочтения последовательности ДНК.
сравнительный анализ видовой идентификации грибов рода ASPERGILLUS, CR YPТО СО CCUS, CANDIDA и TRICHOPHYTON традиционными культуральными и молекулярно-генетическими методами
Пестова Н.Е., Богданов К.В., Пицик Е.В., Горбунова A.B., Игнатьева С.М.
НИИ Медицинской микологии им. Кашкина С116МАП0 Росздрава, С-Петербург, Россия
identification of ASPERGILLUS SPP., CRYPTOCOCCUS spp., CANDIDA spp., TRICHOPHYTON SPP. by using the traditional cultural and molecular genetic methods
Pestova N.E., Bogdanov K.V., Pitsik E.V., Gorbunova A.V., Igtatyeva S.M.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEI APE SPb MAPE, St. Petersburg, Russia
Введение. Секвенирование ДНК по генам рРНК стало универсальным молекулярным методом идентификации микроорганизмов, в том числе микроми-цетов. Гены, кодирующие рРНК эукариот, включают консервативные и неконсервативные участки, которые могут быть использованы для проведения филогенетического анализа. Оперон рибосомальной РНК состоит из четырех генов: 18S (малая субъединица), 5.8S, 28S (большая субъединица) и 5S. Известно, что локусы внутреннего транскрибируемого спейсера ITS и D1/D2 (NL) 28S субъединицы являются наиболее вариабельными, и поэтому их часто используют для видовой идентификации грибов.
Цель исследования - проведение видовой идентификации грибов из Российской коллекции патогенных грибов НИИ Медицинской микологии им, П.Н. Кашкина и клинических изолятов от пациентов, находящихся в микологической клинике, методом сиквенирования.
Материалы и методы. Исследовали образцы ДНК, полученные из чистых культур аспергиллов, криптококков, кандид и трихофитонов (п=51). Для всех микромицетов была проведена видовая идентификация с использованием традиционных куль-туральных и молекулярно-генетических методов анализа, включающих сиквенирование локуса ITS и региона D1/D2 - NL с помощью генетического анализатора 3500 (Applied Biosystems). Оценку результатов сиквенирования проводили с помощью программного обеспечения (DNA Sequencing Analysis
Software v.5.4; Applied Biosystems).
Результаты. Для каждого рода гриба оптимизировали условия амплификации с использованием праймеров ITS1, ITS4 и NL1, NL4 соответственно.
Было проанализировано 27 образцов ДНК, выделенных из Candida spp. Сиквенирование по локусу ITS оказалось достаточным для видовой идентификации Candida spp., за исключением вида С. krusei, для которого результаты, полученные традиционными и молекулярными методами, не совпадали. Поэтому для более точной идентификации Candida spp. следует проводить анализ по локусу NL и/или ß-тубулину.
Сиквенирование ITS-локуса 14 образцов ДНК, выделенных из Cryptococcus spp., оказалось достаточным для их видовой идентификации и подтверждало результаты культуральных исследований.
Молекулярно-генетическим анализом 8 культур Aspergillus spp. по двум локусам (ITS1 и NL1) показано, что идентификация видов этого рода грибов более информативна при сиквенировании по ITS, чем по NL.
Анализ 2 образцов ДНК, выделенных из Trichophyton spp., проводили по двум локусам - ITS1/ITS4 и NL1/NL4. Результаты сиквенирования совпадали с культуральными исследованиями только для Т. mentagrophytes var. interdigitale. Идентификация Т. viola-сеит молекулярными методами была мало информативна и необходимо проведение сиквенирования по другим генам, например ß-тубулину.
Выводы. Сиквенирование по рибосомальным генам, в частности участку внутреннего транскрибируемого спейсера ITS, можно эффективно применять для видовой идентификации Aspergillus spp., Cryptococcus spp., Candida spp. и Trichophyton spp. В случае, если сиквенирование по этому локусу мало информативно, то следует рекомендовать проведение генетического анализа ДНК по локусу NL или ß-тубулину.
особенности клиники и терапии дерматозов, вызванных и ассоциированных с
MALASSEZIA spp
Пиотровская И.В., Котрехова Л.П., Васильева К.В., Разнатовский К.И.,
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАЛО, Санкт-Петербург, Россия
peculiarities of clinic and therapy of dermatoses caused by and associated with MALASSEZIA spp.
Piotrovskaja I.V., Kotrekhova L.P., Vasilyeva N.V., Raznatovskij K.I.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Аипофильные дрожжи рода Malassezia являются представителями нормальной микобиоты кожи человека и теплокровных животных. В то же время Malassezia spp. могут вызывать развитие разноцветного лишая (синонимы: отрубевидный лишай, Pityriasis versicolor) или Malassezia-фолликулита у лиц, предрасположенных к этим заболеваниям. В настоящее время доказана ключевая роль Malassezia spp. в развитии себорейного дерматита. Установили, что Malassezia spp. оказывают влияние на характер течения атопического дерматита и себорейного псориаза. К эндогенным факторам, способствующим колонизации на коже этих липофильных дрожжеподоб-ных грибов, относят гипергидроз, вегето-сосудистые нарушения, эндокринные заболевания, метаболический синдром, иммунодефицитные состояния. Экзогенными факторами, способствующими обсеменению кожи и развитию малассезия-ассоциированных заболеваний, являются климатические факторы, такие, как высокая температура окружающей среды и повышенная влажность. При этом особенности клинической картины и терапии дерматозов, вызванных и ассоциированных с Malassezia spp., изучены недостаточно.
Цель исследования — изучить этиопатогенети-ческие и клинические особенности дерматозов, вызванных или ассоциированных с Malassezia spp., и разработать методы их комплексной терапии.
Методы и материалы. Критерии включения больных в исследование: лица обоих полов и любого возраста, страдающие дерматозами, вызванными и ассоциированными Malassezia spp. В первой части исследования у больных были взяты соскобы кожных чешуек с поверхности высыпаний и проведен их микроскопический (с КОН и калькофлюоором белым) и культуральный анализы с целью выявления
МаЫтвжт *рр. Во второй части исследования была назначена комплексная антифунгальная терапия и проведена оценка ее эффективности.
Обследовано 369 больных хроническими дерматозами. У 289 больных выявили дерматозы, вызванные или ассоциированные с Ма1аанег1а крр.: отрубевидный лишай, малассезия-фолликулит, себорейный дерматит и атопический дерматит, псориаз. Под наблюдением находилось 289 больных: 167 женщин (57,8%) в возрасте от 5 до 72 лет (медиана - 33 года) и 122 мужчины (42,2%) в возрасте от 5 до 61 года (медиана - 31 год).
111 больным отрубевидным лишаем было проведено лечение по двум схемам: 93 пациентам - анти-микотиками местного действия (спрей тербинафин, шампунь кетоконазол) и 18 - антимикотиками местного (спрей тербинафин, шампунь кетоконазол) и системного действия (кетоконазол 200 мг/сутки, 7 дней). 14 больным малассезия фолликулитами (по 7 больных в каждой группе) лечение проводили по тем же схемам. 77 больных себорейным дерматитом лечили также по 2 разным схемам: 47 больных - изо-коназолом с дифлукортолоном и шампунем кетоконазол с добавлением вегетокорректоров и 30 - топическими глюкокортикостероидами с добавлением вегетокорректоров. 27 больных псориазом прошли лечение по стандартным схемам терапии псориаза в сочетании с антимикотиками местного действия и 20 больных псориазом - по стандартным схемам без добавления антимикотиков, 20 больных атопиче-ским дерматитом - по стандартным схемам терапии атопического дерматита в сочетании с антимикотиками местного действия и 20 больных атопическим дерматитом - по стандартным схемам без добавления антимикотиков.
Результаты. ШакШММ ФР- были обнаружены у 111 (38,4%) больных отрубевидным лишаем, у 77 (26,6%) - себорейным дерматитом, у 47 (16,3 %) -атопическим дерматитом, у 40 (13,9%) - себорейным псориазом и у 14 (4,8%) - малассезия-фолликулитом. Следует отметить, что методом посева были выделены возбудители в 47 (41,3%) случаях отрубевидного лишая, в 29 (37,7%) случаях себорейного дерматита, в 20 (42,6%) случаях атопического дерматита, в 13 (92,9%) случаях малассезия фолликулита и в 17 (40,5%) случаях себорейного псориаза. Во всех остальных случаях грибы Ма1аяяег1а ярр. были выявлены только с помощью прямой микроскопии.
В результате проведенного анализа было установлено, что у больных себорейным дерматитом наличие Ма1аннег1а ярр. не оказывало какого-либо значимого влияния на клиническую картину заболевания. Однако характер течения себорейного дерматита отличался частыми рецидивами и устойчивостью к проведению терапии глюкокортикостероидными препаратами и другими противовоспалительными средствами. У большинства (76%) больных атопическим дерматитом при выделении МаШшшЫ ярр. определяли высокое содержание ^ Е в крови — от
100 до 1000 МЕ\мл, а у 15% больных этот показатель превышал 1000 МЕ\мл. Эти больные имели высокий показатель индекса ЯСС ЖА1). Среднее его значение составляло 36,8±2,3 балла. Обращал на себя внимание характер высыпаний: они имели либо диффузный характер и сопровождались выраженным мелкопластинчатым шелушением, либо преимущественно располагались на волосистой части головы, лице, шее, передней грудной стенке и в межлопаточной зоне, т.е. в «себорейных» зонах и также сопровождались значительным шелушением. Все больные отмечали наличие мучительного приступообразного зуда пораженных участков кожного покрова. У больных псориазом при выявленииМаШм&%М ярр. псориати-ческие бляшки были покрыты чешуйками, пропитанными экссудатом, имели более яркую окраску и были распространены на большей площади кожного покрова, чем у больных псориазом, у которых не были обнаружены Ма1а&иег1а ярр.
В результате применения антимикотиков местного действия микологическое выздоровление было установлено у 95,7% больных отрубевидным лишаем и 85,7% — малассезия-фолликулитом. После применения антмикотиков системного и местного действия микологическое выздоровление наступило у 94,4% больных отрубевидным лишаем и у 85,7% — малассезия-фолликулитом.
В результате проведенной терапии у всех больных атоническим дерматитом отмечали клиническое улучшение, что подтверждалось уменьшением индекса ЯСХША!), в среднем, на 12,4 ±1,4 балла. После проведения терапии разрешение себорейного дерматита достигнуто у 61,7% больных, улучшение — у 34,0%. Не отмечали никакой динамики в течении заболевания у 2,1% больных, ухудшение наблюдали у 2,1% больных. Улучшение в течении псориаза после проведения комплексной терапии наступило у 60,0% больных.
Выводы.
1. Ма1аннег1а ярр. осложняют течение себорейного и атонического дерматитов, а также себорейного псориаза.
2. Эффективность монотерапии топическими антимикотиками дерматозов, вызванных и ассоциированных с Ма1аннег1а нрр., сопоставима с эффективностью терапии системными антикотиками в сочетании с топическими.
ИЗУЧЕНИЕ АССОЦИАТИВНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ CANDIDA SPP. С БАКТЕРИЯМИ IN VITRO
Пинегина О.Н.1, Колесникова О.Ю.1, Пальваль Г.В.2, КулеваЗ.В2., Плахотнюк Л.В.', Сатурнов ft. В.', Васильева Н.В.1, Игнатьева С,М.
'НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина Г0УДП0СП6МАП0; Ленинградская областная клиническая больница, Санкт-Петербург, Россия
STUDYING OF ASSOCIATIVE INTERACTIONS OF CANDIDA SPP. WITH BACTERIA IN VITRO
Pinegina Q.N.1, Kolesnikova O.Y.1, Palval G.V., Kuleva Z.V.2, Plahotnuk L.V.2, Saturnov A.V.2, Vasilyeva N.V.1, Ignatyeva S.M.
'Kashkin Research Institute of Medical Mycology SPbMAPS, Saint Petersburg; Leningrad Regional Clinical Hospital, Saint Petersburg, Russia
Колонизация микроорганизмами венозных (BK) и уретральных (УК) катетеров может быть фактором, предрасполагающим к развитию системной инфекции. В некоторых случаях катетер может быть колонизирован несколькими видами микроорганизмов. Ассоциативные взаимодействия между микроорганизмами могут играть роль в развитии системной инфекции и влиять на патогенность каждого из участников микробного сообщества.
Цель данной работы - изучить in vitro ассоциативные взаимодействия Candida spp. и бактерий, выделенных с ВК и УК.
Методы исследования. Для работы использовали С. albicans, С. tropicalis, С. glabrata vi Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Enterococcusfaecalis, E. faecium, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Aci-netobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia no 3 штамма каждого вида. Все исследования проведены чашечным методом на агаре Мюллер-Хинтон в трех повторностях. Микробную взвесь готовили в стерильном изотоническом физиологическом растворе, доводя оптическую плотность инокулюма до 0,5 по стандарту МакФарланда. Петлей № 4 равномерно распределяли штрихом суспензию бактерий по диаметру чашки, затем взвесь Candida spp. петлей №2 подсевали перпендикулярно бактериальному штриху, не доводя штрих на 2 мм до линии посева бактерий (Рис.1). Засеянные чашки инкубировали в термостате при 37 °С в течение 2-х суток.
Рис.1. Пример посева грибов и бактерий для изучения ассоциативных взаимодействий. По диаметру чашки штрихом посеян Е. faecium, перпендикулярно к бактериальному штриху - С. albicans, С. tropicalis, С. glabrata (сверху вниз)
Результаты. Проведено микробиологическое исследование 50 УК и 112 ВК. Частота положительных высевов с УК составила 100%, с ВК - 33%, В посевах УК чаще всего выделяли ассоциации бактерий и грибов - в 38 %, монокультуру грибов - в 30%, бактериальные ассоциации - в 18%, монокультуру бактерий - в 14 % случаев. При посеве фрагмента ВК микроорганизмы выделяли преимущественно в монокультуре: бактерии составили 77 % (преимущественно Staphylococcus spp.) грибы (преимущественно С. albicans) - 15 %, бактериальные ассоциации - 5%, бактериально-грибковые ассоциации - 3%. По данным микробиологического исследования мы отобрали наиболее часто встречающиеся в ассоциациях и монокультуре микроорганизмы (см. материалы и методы). При изучении ассоциативных взаимодействий было отмечено значительное подавление роста грибов Candida spp. грамотрицательными бактериями К. pneumoniae, P. aeruginosa, A. baumannii, S. maltophilia. При этом все грамотрицательные бактерии по-разному влияли на рост разных видов Candida spp. Бактерии, наиболее сильно подавляющие рост С. glabrata, следующие: К. pneumoniae, А. baumannii, Р. aeruginosa до 70 %, S. maltophilia проявляла выраженные штаммные различия и, в зависимости от штамма, либо практически не влияла на рост С. glabrata, либо полностью его ингибировала. Грамотрицательные бактерии незначительно тормозили рост С. albicans (от 10 до 30% в зависимости от штамма бактерий) и С. tropicalis (от полного отсутствия влияния до торможения в 30%). Грамположительные кокки не оказывали статистически значимого влияния на рост всех видов Candida.
Выводы. На основании полученных данных об ассоциативных взаимодействиях, в определенной степени можно интерпретировать распределение микроорганизмов в высевах с УК. Так, С. glabrata значительно чаще обнаруживали в монокультуре (27%), а не в ассоциациях (16%), в то время как С. albicans в монокультуре изолировали в 67% случаев, а в ассоциациях - в 63%, С. tropicalis, напротив, чаще оказы-
валась в ассоциациях с бактериями - 16% и реже - в монокультуре -7%. Микроорганизмы на ВК выявляли преимущественно в виде монокультуры, что, по-видимому, определяется не столько ассоциативными взаимодействиями, сколько микробным окружением и материалом катетера (полиуретан), который в большей степени препятствует адгезии микроорганизмов, чем силикон, из которого изготавливают УК.
факторы, влияющие на общую и 12 недельную выживаемость после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток у взрослых больных с инвазивными микозами
Попова М.0.,3убаровская Н.И., Вавилов В.Н., Волкова А.Г., Аверьянова М.Ю., Борзова Ю. В.Достелиди С. Н., Климко H. Н., Афанасьев Б.В.
Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова, клиника «Институт детской гематологии и трансплантологии имени Р. М. Горбачевой», г. Санкт-Петербург, Россия
factors associated with overall and 12-week survival after hemopoetic stem cells transplantation in patients with invasive fungal infection
Popova M., Zubarovskaya N... Vaviiov V., Volkova A., Averyanova M., Borzova Y., Hostelidi S., Klimko N., Afanasyev B.
I.P. Pavlov State Médical University, Raisa Gorbacheva mémorial institute of children hematologyand transplantology, St.Petersburg, Russia
Инвазивные микозы (ИМ) занимают лидирующее место в структуре инфекционных осложнений и связаны с высоким уровнем летальности у больных после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК).
Цель нашего исследования - определение частоты и этиологии ИМ, а также факторов, влияющих на выживаемость реципиентов ТГСК.
Объекты и методы. В исследование включено 88 взрослых больных (женщин - 43, мужчин - 45); период наблюдения - с декабря 2000 г. по декабрь 2009 г. Медиана возраста составила 32 года (18-67). Диагноз: острый лейкоз - 29, миелопролиферативные заболевания - 7, лимфома - 42, другие - 10. В фазе ремиссии основного заболевания ТГСК была проведена у 54 больных, в фазе рецидива - у 34. Вид трансплантации: аутологичная - 49, аллогенная родственная
- 16, аллогенная неродственная - 21, гаплоидентич-ная - 2. Режимы кондиционирования: миелоаблатив-ные - 31, немиелоаблативные - 56. Источник трансплантата: периферические стволовые клетки крови (ПСКК) - 62, костный мозг (КМ) - 19, ПСКК+КМ
- 7. Медиана клеточности трансплантата (CD34+/
кг веса пациента) составила 4" 106. Для профилактики острой реакции трансплантат против хозяина (РТПХ) использовали: циклоспорин А + короткий курс метотрексата или такролимус + микофенолат мофетил ± антилимфоцитарный иммуноглобулин 60 мг/кг при аллогенной ТГСК, и аутологичной ТГСК у больных с рассеянным склерозом. Для диагностики ИМ применяли критерии EORTC/MSG 2008.
Результаты. Частота развития ИМ составила 35% (31/88). До D+100 после ТГСК инвазивные микозы развились у 26 пациентов, после D+100 - у 6. По критериям EORTC/MSG 2008 «возможный» ИМ диагностировали у 14 (45%) больных, «вероятный» -у 15 (48,5%), «доказанный» - у 2 (6,5%). Возбудители ИМ: Aspergillus spp. - 92%, Cryptococcus spp. - 4,5%, Candida spp. - 3,5%.
Общая выживаемость в 12 недель составила: у больных с ИМ - 74%, у пациентов без ИМ - 90% (Р<0,05). Достоверно снижали выживаемость в течение 12 недель следующ ие факторы: аллогенная ТГСК (64% vs 91% при аутоТГСК), использование глюкокортикостероидов (ГКС) в предшествующих курсах ПХТ (62% vs 100% при лечении без ГКС), рецидив основного заболевания на момент трансплантации (48% vs 96% ремиссия), длительность нейтро-пении более 10 дней (61% vs 100% нейтропения менее 10 дней), поражение ИМ более 2 долей легких (64% vs 82% при поражении одной доли легкого; р<0,1). Установили, что использование вориконазола для лечения ИМ достоверно улучшает 12 недельную выживаемость (95% vs 57% без вориконазола; р<0,05).
Общая 5-летняя выживаемость составила: у больных с ИМ - 14%, у пациентов без ИМ - 38% (Р<0,05). Факторов, достоверно влияющих на общую 5-летнюю выживаемость у больных с ИМ после ТГСК, не выявили. Заключение. Инвазивный аспергиллез, криптококкоз или кандидоз развились у 35% взрослых реципиентов ТГСК. Факторами, повышающими риск ИМ после ТГСК, являются аллогенная ТГСК, применение ГКС, рецидив, длительность нейтро-пении более 10 дней. Развитие инвазивного микоза достоверно снижает раннюю (12 недель) и 5-летнюю выживаемость реципиентов ТГСК. Применение вориконазола достоверно повышает выживаемость больных при развитии ИМ после ТГСК.
РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ МИКОЗОВ КОЖИ И ЕЕ ПРИДАТКОВ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ РайденкоО. В., Иванова Ю.А.
Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом, кафедра дерматовенерологии Алтайского государственного медицинского университета, Барнаул, Россия
PREVALENCE OF MYCOSES OF SKIN AND ITS APPENDAGES IN HIV-INFECTED PATIENTS Raydenko 0. V., Ivanova U.A.
Altay Regional Center for prevention and against AIDS, Chair of dermatovenerealogy, Altay State Medical University, Barnaul, Russia
Нарушение клеточного звена иммунитета обеспечивает возможность условно-патогенным микроорганизмам проникать в ткани и вызывать оппортунистические инфекции. Эти инфекции у больных с иммунодефицитом могут протекать очень тяжело и угрожать жизни.
Кожная патология у ВИЧ-инфицированных лиц многочисленна, и кожа часто является первым органом, страдающим в ходе гтрогрессирования заболевания. У этой категории больных, помимо оппортунистических микозов кожи, каковыми являются малассезиоз и кандидоз, в несколько раз чаще, чем у иммунокомпетентных людей, встречаются инфекции, вызванные дерматомицетами.
Согласно имеющимся в настоящее время сведениям (данные, полученные за 1983-2004 гг. в отделениях дерматологии и венерологии одной из Университетских больниц в Германии по вопросу распространенности грибковых инфекций кожи и ее придатков у больных в латентной стадии ВИЧ и в стадии СПИДа) из 2149 ВИЧ-инфицированных лиц у 502 (23%) был обнаружен дерматомикоз различной локализации. Распространенность грибковых заболеваний у ВИЧ-инфицированных лиц, обращавшихся в поликлиники в Кингстоне (Ямайка) в 2000-2006 гг., составляет 29% от общего числа пациентов с кожными заболеваниями. По данным индийских врачей, доля грибковой инфекции кожи у этой категории пациентов составляет 44,16%; в Сенегале - 16%; Малайзии - 9,9% только одни онихомикозы.
В Алтайском крае в 2009 году зарегистрировано 1771 человек с впервые выявленной ВИЧ-инфекцией, среди них с кандидозом кожи и ногтей - 10%, с дер-матомикозами и другими поверхностными микозами - 15%, при этом с паховым Эпидермомикозом -3%.
Заключение. Заболеваемость грибковыми инфекциями кожи у ВИЧ-инфицированных пациентов достаточно высока. В Алтайском крае показатели
несколько ниже вышеприведенных зарубежных данных, однако это может быть связано с недостаточной их регистрацией и статистической обработкой. Значимость этих инфекций не вызывает сомнений, поскольку количество ВИЧ-инфицированных лиц с микозами кожи неуклонно возрастает, и, как следствие, необходимо уделять большее внимание этой проблеме, своевременно выявлять и лечить пациентов с данной патологией.
МИКРОМИЦЕТЫ В СУДЕБНО-БИОАОГИЧЕСКОЙ ЭКСПЕРТИЗЕ Саганяк Е.А.
Крымский научно-исследовательский институт судебных экспертиз, Симферополь, Украина
MIKROMICETES IN EXAMINFTION JUDICAL DIOLOGY Saganyak E.A.
Crimea Scientific Research Institute Judicial Examinations, Simferopol, Ukrain
Необходимость исследования микромицетов и субстратов, на которых они развиваются, возникает как по гражданским, так и по уголовным делам.
Судебно-биологические экспертизы проводят по гражданским делам при судебных разбирательствах, по заявлениям частных лиц, в связи с капитальным ремонтом домов и квартир, их куплей и продажей, возмещения материального убытка после залива помещений. Основными целями исследования являются: установление факта наличия грибов-биодеструкторов в помещениях, причины их появления, определение их таксономической принадлежности, степени поражения помещений грибами, а также о вредном воздействии грибов-биодеструкторов на здоровье человека.
Проводят органолептический анализ (наличие специфического запаха, изменение цвета штукатурки, обоев, деревянных перекрытий и т.п.), визуальную оценку поражения помещения микромицетами, наличие признаков спороношения. В процессе исследования измеряют температуру, влажность, определяют источник появления влаги, измеряют площадь помещения, площади поражения микромицетами и отбирают образцы для определения таксономической принадлежности микромицетов и степени поражения объектов грибами в лабораторных условиях.
Отбор образцов микромицетов, по возможности, производят вместе с субстратом, каждый образец упаковывют отдельно с сопроводительной надписью о месте отбора. Отбор проб выполняют с мест разной степени поражения и спороношения: с наиболее повреждённой зоны, со средним повреждением и со слабой степенью повреждения, для более точного
определения степени поражения исследуемых помещений.
Согласно литературным данным, в сухих и во влажных помещениях качественный состав спор микромицетов примерно одинаков, но возникают различия в их количестве.
С целью количественного определения спор грибов в помещениях, приходящихся на единицу площади в Крымском НИИСЭ, была разработана методика определения степени поражения помещений микромицетами (Патент на корисну модель № 32139 «Способ втшаченпя ступеню ураження примпцень мжроскошчними грибами» Зарегистрировано в гос. реестре патентов Украины в 2008 г.). Оценка степени поражения помещений даёт возможность получить не только сопоставимые результаты при исследовании различных помещений, а также необходима при расчёте предельно допустимых норм количества спор в помещении, которые в Украине пока ещё отсутствуют.
Индикаторная ценность микроорганизмов связана с определением общего состава видов и выделением среди них доминант, на определённом субстрате.
В процессе исследования фрагментов субстратов исследуют волокнистый состав бумаги, картона, ткани, их цвет красители, состав штукатурки и т.п., а также определяют таксономическую принадлежность грибов-биодеструкторов, развивающихся на исследуемых субстратах.
При таких исследованиях возможно определить более узкую групповую принадлежность субстрата, обнаруженного на одежде (обуви) подозреваемого или пострадавшего, с субстратом, поражённом микромицетами, с места происшествия, что указывает на вероятное нахождение и подозреваемого и пострадавшего на месте происшествия.
Исследование грибов-биодеструкторов, а также субстратов, на которых они развиваются, могут быть промежуточным исследованием при решении идентификационных задач или выступать в качестве самостоятельной задачи при установлении интересующих следствие обстоятельств расследуемого события.
избирательное действие леворина на ряд возбудителей инфекций Самедова A.A., Касумов Х.М.
Институт ботаники HAH Азербайджана, Баку
selective action of levorin against number of originators of pathogens Samedova A.A., Kasimov Kh.M.
Institute of Botany of NAS, Azerbaijan, Baku
Полиеновые антибиотики (ПА) являются одними из эффективных соединений, используемых в клинической медицине для борьбы с грибковыми инфекциями. Особенность ПА состоит в том, что они при низких концентрациях (10~8-10~6М) взаимодействуют с липидными компонентами клеточных мембран, в которых способны формировать каналы молекулярных размеров, избирательно проницаемых для ионов и органических соединений. Среди большого класса полиенов особый интерес представляет леворин.
Цель настоящего исследования - изучение эффективности действия новой лекарственной формы леворина (ноу-хау) на возбудителей грибковых, бактериальных и вирусных инфекций (кандидоза, с т аф и л л о к о к к о : j а, эшерихиоза, некоторых условно-патогенных бактерий и вирусов Коксаки A, ECHO и простого вируса герпеса типа I и II).
Материалы и методы. Изучали активность препарата в различных тест-системах: на клеточных культурах фибробластов человека и эмбрионах белых мышей. Для контроля брали чистую бульонную среду с патогенами. Суспензию вирусных частиц (в 1 мл 2-109) разбавляли в 10 раз и из него по 0,1 мл вводили животным внутрибрюшинно.
Результаты. Установили, что леворин в новой лекарственной форме и в малых концентрациях (10' МО"'1 М) оказывает антигрибковое и антибактериальное действия на клетки Candida albicans, Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris и Escherichia coli. Обнаружили также антивирусное действие препарата на вирусы Коксаки А 20, ECHO 9 и простого герпеса I и II типов. В той питательной среде, где отсутствовал препарат, зафиксировали рост патогенных микроорганизмов. Таким образом, было установлено, что лекарственная форма препарата, содержащая леворин, обладает способностью с высокой эффективностью и селективностью подавлять не только возбудителей грибковых инфекций, но и вирусных, и бактериальных инфекций. Мы предполагаем, что фунгицидное, вирулоцидное и бактерицидное действия препарата состоят в том, что его взаимодействие с липидным
компонентом сопровождается декомпозицией и/или разрушением последнего.
молекулярная диагностика CANDIDA ALBICANS/GLABRATA/ KRUSEIу вич-инфицированных больных Сафонова А.П.
ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии, Москва, Россия
molecular diagnostics of candida albicans / glabrata / krusei in hiv-infected patients Safonova A. P.
FSIS Institute of Epidemiology, Moscow, Russia Тезисы не представлены.
результаты лечения онихомикоза стоп у больных псориазом Свиридова К.В.
Кафедра лабораторной микологии и патоморфологии микозов НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина, МАПО, г.Санкт-Петербург
results of onychomycosis treatment in patients with psoriasis Sviridova K.V.
Chair of laboratory mycology and pathomorphology of mycosis of Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Цель - оценить эффективность внтимикотиче-ской терапии онихомикоза стоп у больных псориазом.
Объекты и методы. Лечение получали 52 больных псориазом с онихомикозом стоп. Возраст пациентов - от 15 до 79 лет. Длительность изменения ногтевых пластин - от 1 года до 25 лет. Диагноз онихомикоза был поставлен на основании клинических и лабораторных признаков, выявленных прямой микроскопией, культуральными исследованиями. Возбудителями онихомикоза стоп у 40 (77%) больных были дерматомицеты (Trichophyton spp.) и у 12 (23%) - дрожжеподобные грибы (Candida spp.). Лечение онихомикоза стоп у пациентов с псориазом проводили комплексно с учётом индивидуальных особенностей больных после снятия обострения псориаза. В первую группу вошли 26 больных, получавших тербинафин (250 мг в сутки ежедневно, курсом 3
¡месяца), в качестве наружного лечения применяли антимикотический лак (аморолфина гидрохлорид) 2 раза в неделю. Во вторую группу были включены 12 пациентов, получавших флуконазол (150 мг в неделю, курсом 6 месяцев), в качестве наружной терапии применяли антимикотический лак (аморолфина гидрохлорид) 2 раза в неделю. Флуконазол явился препаратом выбора для лечения онихомикоза, обусловленного Candida spp. В третью группу вошли 14 больных, получавших только местные антимикоти-ческие препараты (аморолфина гидрохлорид 2 раза в неделю).
Перед началом наружной терапии всем больным проводили аппаратную подчистку ногтевых пластин и кожи стоп в условиях педиатрического кабинета.
Результаты. Период наблюдения от начала лечения составил 72 недели. Критериями эффективности были клиническое улучшение (отрастание не менее 5 мм непораженной ногтевой пластинки) и отрицательное микологическое исследование. В первой группе микологическую эффективность отмечали у 22 (85%), клиническую - у 15 (58%), полное выздоровление - у 13 (50%) больных. В группе пациентов, получавших флуконазол (вторая группа), микологическую эффективность наблюдали у 11 (92%), клиническую - у 7 (58%), полное выздоровление - у 4 (33%) больных. У пациентов третьей группы, получавших только топическую терапию, микологическое излечение было отмечено у 7 (50%), клиническое - у 4 (29%), полное - у 1 (7%) больного.
Выводы. Таким образом, у больных псориазом для лечения онихомикоза следует применять комбинированную терапию наружными и системными антимикотиками в связи с низкой эффективностью топических препаратов.
разработка методики выявления днк CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS на основе пцр с гибридизационно-флюоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени Скачкова Т.С.
ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии, Москва, Россия
development of methodology for detection of CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS dna by pgr with hybridizate- fluorescent detection of amplification products in real time Skachkova T.S.
FSIS Institute of Epidemiology, Moscow, Russia Тезисы не представлены.
этиологическая структура
основных возбудителей
ноз оком и альной инфекции в
ожоговом отделении муз мсч
«северсталь»
Скопенко О.Л., Котик Л.М.
МУЗ МСЧ «Северсталь», Череповец, Россия
etiologic structure of main
agents nosocomial infections
in burn units ldh msd
«severstal»
Skopenko O.L., KotikLM.
LDH MSD «Severstal», Cherepovets, Russia
Цель - провести анализ этиологической структуры раневых инфекций в ожоговом отделении МУЗ МСЧ «Северсталь» за 2009 г.
Материалы и методы. Материалом для исследования были раневое отделяемое и моча от пациентов с микробиологически подтверждённой инфекцией. Идентификацию микроорганизмов проводили на анализаторе iEMS Reader MF, ThermoLabsistems, обработку данных выполняли с помощью системы микробиологического мониторинга «Микроб-2».
Результаты. Исследовали 739 ран и 201 пробу мочи. Выделили 1875 штаммов микроорганизмов из раневого отделяемого, в том числе монокультуры
- 48,2%» ассоциации - 51,8%. Из мочи выделен 181 штамм микроорганизмов, в том числе монокультуры - 68,3%, ассоциации - 31,7%. Среди выделенных из ран культур ведущими оказался Staphylococcus aureus - 24,5%, на втором месте Enterococcus spp. -19,3%, который чаще оказывался в ассоциациях. Ассоциации Enterococcus spp. с неферментирующими бактериями высевали в 52 (13,3%) случаях, S. aureus с Enterococcus spp. - в 32 (8,4%) случаях, S. aureus с Enterococcus spp. и неферментирующими бактериями - в 28 (7,3%) случаях. Последующими оказались представители семейства Enterobacteriaceae - 12,6%, Pseudomonas aeruginosa - 7,7%, Acinetobacter spp. -6,8%. Неферментирующие бактерии высевали вместе с S. aureus в 21 (5,5%) случае. Candida spp. выделяли из ран в 6,0% случаев, в том числе в ассоциациях -в 4,4%. Среди выделенных 17 видов возбудителей из мочи ведущими оказались: Candida spp. - 44,8%, энтерококки - 30,4% (Enterococcus faecalis - 25,4%), неферментирующие бактерии -14,4%, энтеробактерии
- 9,9% (Escherichia coli - 6,1%). Из 46 ассоциаций в 35 (76,1%) случаях выделяли Candida spp. с энтерококками - 48,6%, с неферментирующими бактериями -25,7%, со стафилококками - 11,4%.
Вывод. Независимо от ведущей роли S. aureus и грамотрицательных бактерий в возникновении гнойно-воспалительных инфекций у пациентов ожогового отделения, грибы рода Candida при этом имеют существенное значение.
аллергический ринит у детей в санкт-петербурге и ленинградской области Соболев A.B., АакО.В.
НИИ медициской микологии им. П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СП6МАП0, Санкт-Петербург, Россия
несцентного анализа (MAST-CLA) компании «Хитачи Кемикл Диагностике, Инк.» (США).
Результаты. Из 125 детей с ринитом (средний возраст - 8,87 ±3,70, медиана - 9) аллергический ринит был выявлен у 72 человек. У 53 детей был установлен неаллергический ринит.
При анализе степени выраженности повышенной чувствительности к 36 аллергенам были выделены группы с наличием выраженности сенсибилизации «+» и более и «++» и более. Существенные различия отмечали в группе лиц с повышенной чувствительностью к грибам рода Alternaría и рода Aspergillus, соответственно, 10,2% и 2,1% и 13,2% и 0,5%. То есть в группе детей степень сенсибилизация к грибам рода Aspergillus не превышала «+». Выраженная сенсибилизация к дерматофагоидным клещам составила в первой группе 88,3% и 39,2% - к D. farinae и к D. pteronissimus - 70,8% и 32,2% соответственно. Сенсибилизация к домашней пыли была 75,5% и 47,3%. Из пыльцевых аллергенов наиболее выраженную сенсибилизацию отмечали к пыльце берёзы - 58,2% и 43,6%, а наименьшую - к пыльце лебеды 30,9% и 16,9%, Среди пищевых аллергенов преобладала аллергия к коровьему молоку - 39,2% и 10,3%. Наиболее выраженную сенсибилизацию выявили у детей к аллергену шерсти кошки - 83,5% и 55,1%, а к шерсти собаки - 76,2% и 55,4%,
Отчётливый клинический эффект наблюдали при проведении элиминационных мероприятий. Детям с сенсибилизацией к бытовым, пыльцевым, эпидер-мальным аллергенам и аллергенам грибов назначали спрей Назаваль, представляющий собой мелкодисперсную целлюлозу. Препарат дети переносили хорошо, и выраженность аллергического ринита уменьшалась.
Проведение элиминационных мероприятий у детей в возрасте 5-7 лет было особенно эффективно, что связано с увеличением частоты респираторной аллергии в этой возрастной группе.
allergic rhinitis in children in saint petersburg and leningrad region SobolevA.V.,Aak0.V.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology Saint Petersburg Medical Academy of Postgraduate Education, Russia
Цель работы - изучение спектра сенсибилизации к распространенным аллергенам у детей с признаками ринита с последующим проведением необходимых элиминационных мероприятий в зависимости от этиологического фактора.
Объекты и методы. Было проведено аллерголо-гическое обследование 125 детей в возрасте от 2 до 15 лет. Диагностику аллергии проводили с учётом жалоб, анамнеза, объективного и лабораторного исследования с использованием множественного ал-лергосорбентного теста с применением хемилюми-
некоторые аспекты цитологического изучения прорастающих конидий ASPERGILLUS FUMIGATUS (pres.) Степанова А.А., Синицкая И,А,
НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО Росздрава, Санкт-Петербург, Россия
some as pects of с yто lo giс a l investigations of ASPERGILLUS FUMIGATUS (fres.) germinating conidia Stepanova A.A., Sinitskaya I.A.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEI APE SPbMAPE, Saint-Petersburg, Russia
Формирование первой септы в системе конидия—»ростковая трубка (РТ) у мице-лиальных грибов дает начало процессам компартментализа-ции РТ, а также «сигналом» к переключению к формированию первичного мицелия.
Цель настоящего исследования - выяснить особенности строения первой септы (включая ее поро-вый аппарат), формирующейся в ходе прорастания конидий A. fumigatus.
Материал и методы. Зрелые конидии A. fumigatus (штамм РКПГ F-1172 изолирован из бронхолегоч-ного лаважа больного аспергиллезом) выращивали в жидкой среде Чапека в термостате при 28 Через 6, 12,24 и 36 часов после начала эксперимента питательную среду с растущими конидиями центрифугировали. Центрифугат фиксировали глутаральдегидом-осмием для трансмиссионной электронной микроскопии по стандартной методике.
Результаты. В системе конидия^-РТ первая септа закладывалась непосредственно в основании ростковой трубки либо на некотором расстоянии от конидии. В этот момент длина РТ могла достигать 13,3, 15,0, 23,0, 42,1 и, даже, 50,0 мкм. Она закладывалась как складка плазмалеммы, растущая синхронно и центростремительно внутрь РТ. Окончательная толщина септы вблизи латеральной клеточной стенки составляла 0,20 мкм, а в средней части - 0,18 мкм. Диаметр септальной поры был равен 0,13 мкм. В этот период в цитозоле РТ и вблизи формирующейся септы наблюдали небольшое число (от 4 до 8) телец Воронина (ТВ) варьирующих размеров (0,100,14 мкм) и формы (сферическая, гексагональная, эллипсоидная). Они имели высокую электронную плотность и были окружены контрастной ограничивающей мембраной. Такие «ювенильные» ТВ были окружены равномерным по толщине тонким ореолом, в котором отсутствовали свободные рибосомы и присутствовал светлый цитозоль с радиально ори-
ентированными тонкими темными микрофибриллами. Прослежены все этапы формирования ТВ из пероксисом, Со временем в просвете сформированной септы появлялась крупная гомогенная темная пробка в форме шкива, полностью перекрывающая ее просвет. Вблизи такой септальной поры можно было наблюдать четыре ТВ (по два с каждой стороны септы). С этого момента в содержимом конидии усиливались процессы вакуолизации, сокращался объем цитозоля и число органелл; их клеточная стенка утоньшалась и сильно деформировалась.
Выводы: 1) компонентами порового аппаратапер-вой (отделительной) септы в системе конидия—>РТ являлись пробка и ТВ; 2) формирование пробки в поре первой септы было сигналом для начала процессов старения и последующего автолиза содержимого конидии, с одной стороны, и блокированию транспорта содержимого отмирающей конидии в растущие и дифференцирующиеся клетки первичного мицелия, с другой; 3) у объекта настоящего исследования ТВ являются производными пероксисом.
ультраструктура TRICHOPHYTON
SCHOENLEINII (lebert) nannizzi,
выращенного in vitro
Степанова A.A., Синицкая И.А., Краснова Э.В.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
ultra structure of TRICHOPHYTON SCHOENLEINII (lebert) nannizzi, growing in vitro
Stepanova A.A., Sinitskaya I. A., Krasnova E.V.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Цель - изучить in vitro ультраструктуру клеток вегетативного мицелия и макрокони-дий Т. schoenleinii.
Материал и методы. Штамм Т. schoenleinii (RCPF F - 234/780) был ранее выделен из волос головы и кожных чешуек пациента, больного фавусом. Кусочки с разных зон колоний гриба через 3, 5, 7, 10 и 20 дней после посева на питательную среду Чапека фиксировали для трансмиссионной электронной микроскопии 4 часа в 3% растворе глутаральдегида и затем 1 час - в 1% растворе осмиевой кислоты. Образцы обезвоживали в серии спиртов и ацетоне, а затем заливали в смесь эпоксидных смол эпон-аралдит.
Результаты. Клетки воздушного и субстратного мицелия были идентичны по числу, размерам (в среднем, 2,0 мкм) и форме интерфазных ядер. Они не различались между собой и по уровню развития компонентов эндомембранной системы, пред-
ставленной исключительно небольшим числом коротких агранулярных цистерн. Морфогенез клеток воздушного мицелия сопровождался формированием небольшого числа мелких вакуолей, синтезом умеренного количества запасных веществ в форме липидных включений и розеток гликогена, тогда как субстратного - формированием одной крупной центральной вакуоли, пролиферацией митохондрий и синтезом сходных типов запасных веществ, но в значительно большем количестве. Клеточные стенки зрелых клеток мицелия (независимо от их типа) тонкие (в среднем, 0,2 мкм), с двумя слоями разной электронной плотности (верхний - темный и внутренний - светлый) и сходной толщины (в среднем, 0,1 мкм).
Клетки мицелия отделены друг от друга электронно-светлыми клиновидными септами. Вблизи септальных пор растущих и зрелых клеток мицелия присутствовали округлые (в среднем, 0,2 мкм) темные тельца Воронина в числе от 1 до 6. Вторым компонентом порового аппарата септ были темные пробки, варьирующие по размерам и форме. Они, как правило, отмечались в просвете септальных пор стареющих клеток.
Зрелые макроконидии (ЗМ) состояли из 3-х или 4-х клеток, которые были богаты запасными веществами в виде липидных включений и розеток гликогена. ЗМ имели тонкие (0,2 мкм) однослойные фибриллярные латеральные клеточные стенки умеренной электронной плотности и толстые (0,4 мкм) прямые сплошные поперечные септы. Отличительной особенностью морфологии ЗМ этого вида гриба было наличие в апексе ЗМ светлого утолщения (в среднем, до 0,4 мкм) линзовидной формы (на продольном срезе). В ходе морфогенеза макроконидий поперечные септы формировались в акропетальном направлении. Они закладывались в виде складок плазмалеммы, растущих центрипетально.
Выводы. Выявили различия в морфогенезе клеток воздушного и субстратного мицелия Т. schoenleinii. Показано, что по строению порового аппарата септ и особенностям формирования макроконидий этот вид гриба отличается от ранее изученных видов дерматомицетов (Т. rubrum. Т. violaceum, Т. mentagrophytes var. inter digitale), выращенных в сходных условиях, что позволяет предложить эти признаки в качестве ключевых для решения общих и частных вопросов систематики рода Trichophyton.
препараты выбора при лечении грибковой инфекции у больных с сосудистой патологией Степанова C.B.1, Егоров A.A.2
ТУЗ «Рязанский областной клинический кожно-венерологический диспансер»; ТУЗ «Рязанский областной клинический кардиологический диспансер», Рязань, Россия
agents of choice for mycotic infection therapy of patients with vascular pathologies Stepanova S.V.1, Egorov A.A.2
^El «Ryazanskiy Regional Clinical Skin-veneral dispensary»; 2SEI «Ryazanskiy Regional Clinical Cardiology dispensary», Ryazan, Russia
Среди больных с сосудистой патологией имеется множество пациентов с трофическими изменениями нижних конечностей, такими как некрозы и трофические язвы. Довольно часто этих больных объединяет поражение сосудов нижних конечностей, сочетанное с поражением грибковой инфекцией ногтевых пластин и кожи стоп.
Цель исследования - определение эффективности использования комбинированных методов лечения, объединяющих мероприятия, направленные на улучшение кровообращения в нижних конечностях и адекватную противогрибковую системную терапию.
Метод исследования. На базах ГУЗ «Рязанский областной клинический кожно-венерологический диспансер» и ГУЗ «Рязанский областной клинический кардиологический диспансер» провели лечение 57 больных с сосудистой патологией нижних конечностей, отягощенной микозами. Для лечения микозов применяли антмикотики, наиболее широко представленные на отечественном фармацевтическом рынке: тербинафин, итраконазол, флуконазол. При подборе адекватной системной терапии приходилось учитывать такие факторы, как: эффективность препарата, его безопасность и экономичность. Характерной особенностью терапии в подобных случаях является значительное увеличение сроков применения противогрибковых препаратов по сравнению с лечением больных, не имеющих патологии артериального или венозного русла нижних конечностей, поскольку биодоступность лекарств при сосудистой патологии существенно снижена.
Результаты. Установили, что положительный эффект дают все перечисленные антимикотики. Удовлетворительные результаты лечения тербинафином подтверждено в 98% случаев его применения.
Выводы. Тербинафин оказался наиболее эффективным антимикотиком в качестве препарата выбора для лечения грибковой инфекции у больных с сосудистой патологией. Именно этот препарат мы
использовали при долечивании больных, когда по различным причинам возникали проблемы с остальными препаратами.
синергизм STAPHYLOCOCCUS AUREUS и CANDIDA ALBICANS при CANDIDA-колонизации ки шечного тракта Сулейманова Т.Х.
Кафедра микробиологии и иммунологии Азербайджанского Медицинского Университета, Баку, Азербайджан
synergism of STAPHYLOCOCCUS AUREUS and CANDIDA ALBICANS in CANDIDA - colonization of intestinal tract Suleymanova T.Ch.
Azerbaijan Medical University, Department of microbiology and immunology Baku, Azerbaijan
С a ndlda -колони;! а ц и я интестинального тракта, а также диссеминация Candida spp. из кишечника, развитие различных форм С а п did а - и 11 фе к ц и и обусловлено особенностями ассоциативных отношений этих грибов с другими микроорганизмами, экологически изменившимся состояниями в гастроинтестиналь-ном тракте (ГИ) и, в целом, в организме.
Цель работы - изучение синергизма S. aureus и С. albicans при Candida-колонизации кишечника в условиях эксперимента.
Материалы и методы. Опыты были проведены на 1,5 месячных линейных (BALb/C) мышах весам 25-30 г. Candida-колонизацию ГИ тракта мышей проводили орогастральной инокуляцией 108 живых клеток С. albicans в 0,1 мл физиологическом растворе (ФР) с помощью тонкого пластического катетера длиной 5 см со специальным наконечником. Спустя 3 дня после С, а п dida - и i к > к ул я ц и и, опытным группам мышей также вводили взвесь суточной культуры S. aureus перорально в количестве 108 кл в 0,1мл. Для того, чтобы избежать возможности непосредственного влияния местной (кишечной) микробиоты мышей на С а п did а -колони,! а ц и и в опытных группах, животные до начала орогастральной инокуляции С. albicans в течение 5 дней перорально в ФР получали ванкомицин и гентамицин в терапевтических дозах.
Результаты. У мышей, получавших антибиотики предварительно в течение 5 дней, последующая, спустя двое суток орогастральная инокуляция С. albicans, сопровождалась, в отличие от контроля, выраженной колонизацией ГИ тракта. Выявили также выраженное усиление С а п dida -колони,! а ц и и в ГИ тракте у животных, инокулированных дополнительно взвесью S. aureus. Одновременно обнаружили диссеминацию С. albicans и S. aureus из интестиналь-
ного тракта в кровь и почки, что свидетельствует, по-видимому, об их синергизме.
оценка заболеваемости онихомикозами в белгородской области. терапевтический эффект итраконазола и тербинафина в лечении онихомикозов Тарасова Т.К., Донецкая Ю.В., Селиверстова М.С. Белгородский государственный университет, Россия
the estimation of onychomycoses in belgorod region, itraconazolum and terbinafinum therapeutic effect in the treatment of onychomycoses Tarasova Т.К., Donetskaya. Yu. V., Seliverstova M.S. Belgorod State University, Russia
Цель исследования - установление уровня заболеваемости онихомикозами в Белгородской области и сравнение терапевтического эффекта итраконазо-ла и тербинафина в зависимости от этиологии они-хомикотического поражения.
Объекты и методы. В исследовании принимали участии 206 пациентов, которым, в связи с клиническими формами онихомикотического поражения, была назначена системная терапия. Из системных антимикотиков применяли два препарата - итра-коназол и тербинафин, соответственно, и наблюдавшиеся пациенты были поделены на две группы, в каждой из которых использовали только один из препаратов. Выбор препарата основан на этиологии поражения - дерматофитного, кандидозного или дерматофито-кандидозного и, соответственно, широте терапевтического действия каждого из препаратов.
На основе результатов исследования можно сделать следующие выводы:
1. заболеваемость онихомикозами в 2008 и 2009 годах составляет 19,5% и 13,65% соответственно;
2. в структуре микозов преобладают кератоми-козы (отрубевидный лишай 45,1% - 2008 г., 40,82% - 2009 г.);
3. наблюдается стабильная картина по заболеваемости онихомикозами в г. Белгороде и Белгородской области - 23,7% и 25,7%, соответственно, в 2008 и 2009 годах;
4. преобладает дистально-латеральная форма поражения в обеих группах, при сопутствующем поражении кожи (группа «Итраконазол») - преобладает проксимальная форма поражения;
5. число выздоровевших пациентов в группе «Тер-бинафин» составило 85,6%, в группе «Итраконазол» - 78,1%; улучшение результата - 12,6% и 18,3% соответственно (по данным наблюдений за 6 месяцев).
состояние микробоценоза влагалища у женщин с акушерским разгружающим пессарием на фоне невынашивания беременности Фадина Ю.П.
Кафедра акушерства и гинекологии, ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия имени И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», Россия
мiс r о в о с о е n о sis at the women with obstetrical pessary in a noncarrying of pregnancy Fadina Yu.P.
Department of obstetrics and gynecology, SEI HPE «Saint-Petersburg I.I. Mechnikov Medical Academy», Russia
Одной из важнейших проблем акушерства является невынашивание беременности, которое в России составляет 15-20%. Среди причин выделяют инфекционные заболевания матери (в том числе инфекционные заболевания половых органов), токсикозы, травматические повреждения половых органов, эндокринную патологию матери, пороки развития гениталий, интоксикации, хромосомные аномалии плода, нарушения в системе гомеостаза (дефицит гомоцистеина). Одной из главных причин невынашивания, по-прежнему, является истмико-цервикальная недостаточность. Способами коррекции являются наложение циркулярного шва на шейку матки или применение акушерского разгружающего пессария (АРП).
Известно, что наличие инородного тела во влагалище, нередко, становится причиной развития дис-биоза влагалища, проявляющегося повышенным количеством выделений, зудом, дискомфортом.
Цель - изучить частоту и спектр возбудителей микробиоценоза влагалища у беременных с АРП.
Объекты и методы. Обследовано 27 беременных женщин, которых разделили на 2 группы: 1 группа -12 женщин с установленным АРП; 2 группа (группа сравнения) - 15 беременных женщин с наложенным циркулярным швом на шейку матки.
Средний возраст беременных - 23-29 лет. АРП поставлен в сроки 30-31 недели беременности, циркулярный шов наложен в срок 16-20 недель беременности.
Показания к применению АРП: беременные женщины, потенциально угрожаемые по невынашиванию (с рубцовой деформацией шейки матки, с нару-
шением функции яичников или половым инфантилизмом, с многоплодной беременностью; имеющие в анамнезе выкидыши на поздних сроках, преждевременные роды, страдающие привычным невынашиванием). Показанием для наложения циркулярного шва на матку является истмикоцервикальная недостаточность органического и функционального гене-за.
Период наблюдения за пациентками составил 1-3 месяца. В течение всего этого периода у всех женщин из обеих групп отмечали явления кольпита, которые проявлялись жил оба,vi и на дискомфорт, выделения из влагалища, зуд и жжение в области половых органов, диспареунию.
При объективном исследовании у данных пациенток выявили гиперемию, отечность и обильные выделения из половых путей.
С диагностической целью провели цитологическое, бактериоскопическое и бактериологическое исследование из слизистых оболочек шейки матки, цервикального канала и уретры.
Результаты. Микробный пейзаж беременных женщин при использовании АРП и циркулярного шва на шейку матки был представлен следующими видами условно-патогенной и патогенной биоты: Candida spp. - 51,6% и 45,8% в обеих группах соответственно. В 1 группе: Chlamydia trachomatis - у 14,2%, Mycoplasma hominis - у 7,7%, Gardnerella vaginalis
- у 23,4%, Staphylococcus epidermidis - у 19,1%. У женщин во второй группе (группе сравнения) выделены: Mycoplasma hominis - у 8,9%, Ureaplasma urealyticum - у 13,1%, Gardnerella vaginalis - у 21,7%, Staphylococcus epidermidis - у 14,6%. В первой группе частота развития кольпита составила 44%, во второй
- 56%.
Выводы.
1. Микотическая инфекция была доминирующей в группах женщин с АРП (1 группа) и циркулярным швом на шейку матки (2 группа) и составила 51,6% и 45,8% соответственно.
2. У всех пациенток выявили ассоциации условно-патогенных и патогенных агентов.
3. Высокая частота инфекционной патологии у женщин с АРП и циркулярным швом на шейке матки являлется основанием для проведения клинических исследований эффективности профилактических мероприятий.
современное состояние заболеваемости микозами стоп с онихомикозами в среднеповолжском регионе Файзуллина Е.В.1, Ибрагимова Р.З.2
'Кафедра дерматовенерологии ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет»; 2МУЗ «Республиканский клинический кожно-венерологический диспансер»**, г. Казань, Россия
the modern condition of mycoses and onychomycoses morbidity in the middle volga region
Fayzullina E.V.', Ibragimova R.Z.2
'The Department of Dermatology & SEI HPE Kazan State Medical University, 2VD Dispensary of Tatarstan Republic, Kazan, Russia
Современные тенденции показателей распространенности микозов стоп и онихомикозов в Российской Федерации в 2002-2006 гг. являются свидетельством возрастания заболеваемости на 3,9% и 16,9% соответственно (Кубанова А.А., 2008). В республиках и областях среднеповолжского региона показатели заболеваемости микозами стоп (МС) и онихомикозами (ОМ) оказались крайне разноречивыми. Данные представлены в таблице (на 100 000 населения).
2008 г. 2009 г.
Татарстан 151,2 195,1
Ульяновск 36,4 62,9
Башкортостан 218,2 164,6
Самарская 21,4 18,1
Марий-Эл 30,1 31,5
Удмуртия 379,1 76,6
Кировская 50,1
Так, «полярными» оказались показатели заболеваемости в Республике Башкортостан, где заболеваемость микозами стоп была в разные годы от 269,5 на 100 тысяч населения в 2004 году до 339,4 на 100 тысяч населения в 2007 году, а в Ульяновской области - в 10 раз меньшие: 19,3 и 26,6 на 100 тысяч населения в те же годы. Лучшая регистрация случаев грибковых заболеваний связана с исторически сложившейся ситуацией в Башкортостане по изучению природно-очаговых микозов в рамках научно-исследовательской работы профильных НИИ. Во многом представленные данные подтверждают факт о разной степени корректности регистрации показателей. В Республике Татарстан заболеваемость микозами составила 164,3 и 146,9 на 100 тысяч населения в 2004 и 2007 гг., она приближается к общероссийским данным.
Одной из задач организационно-методической работы мы видим в актуализации существующих и внедрении новых форм статистического наблюде-
ния, в том числе изучении распространенности по данным скрининговых исследований.
факторы микробоцидности макрофагов по отношению к штаммам CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS разной вирулентности
Филиппова Я.В., Васильева Н.В., Киселева Е.П., Фролова Е.В., Учеваткина А.Е.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина Г0УДП0СП6 МАП0, Санкт-Петербург, Россия
mikrobicidal factors of macrophages in relation to the CR YP TO CO С С US NEOFORMANS strains of different virulence
Filippova L.V., Vasilieva N.V., Kiseleva E.P., Froiova E.V., Uchevatkina A.E.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology, SEI APE SPb MAPE, Saint Petersburg, Russia
Известно, что макрофаги являются первой линией защиты от различных микроорганизмов, и их способность к разрушению патогена зависит от активации кислородзависимых механизмов микро-боцидности. Они включают в себя токсичные антимикробные формы кислорода и оксид азота, причем механизмы индукции этих факторов различны. В современной литературе представлены противоречивые данные о роли каждого из этих факторов в патогенезе криптококкоза.
Цель работы - оценить влияние штаммов С. neoformans разной вирулентности на способность перитонеальных макрофагов к образованию активных форм кислорода и выработке NO in vitro.
Материалы и методы. В экспериментах использовали культуры 12 штаммов С. neoformans (РКПГ 1106, 1178, 1165, 1090, 1216, 1262, 1272, 1257, 1271, 1276, 1175, 1164), различающихся по вирулентности. Все штаммы были получены из Российской коллекции патогенных грибов и выделены от больных криптококкозом. Для определения вирулентности мыши-самцы линии Balb/c были инфицированы внутривенно дозой 5105 кл/мышь каждого штамма С. neoformans. Культура макрофагов была получена из перитонеальной полости мышей-самцов линии Balb/c в возрасте 8-12 недель. Концентрацию клеток доводили до 1Т06 кл/мл. В эксперименте использовали интактные макрофаги и предварительно обработанные липополисахаридом (ЛПС) (£. coli 055:В5, Sigma). Продукцию NO оценивали спектрофотоме-трически с использованием реактива Грисса. Для выявления уровня кислородного метаболизма использовали метод автоматизированного учета теста
с нитросиним тетразолием (HCT-тест) в спонтанной и индуцированной модификациях. Для определения спонтанного показателя к клеточной суспензии пе-ритонеальных макрофагов (1106кл/мл) в лунки добавляли полную культуральную среду, а для определения индуцированного показателя НСТ-теста — равный объем стимулятора, в качестве которого использовали 0,1% суспензию зимозана или штаммы С. neoformans (1105кл/мл). Результат выражали в единицах оптической плотности (ед.ОП) на Т106 пе-ритонеальных макрофагов.
Полученные результаты статистически обрабатывали с помощью программной системы STATISTICA for Windows (версия 6.0). Различия считали достоверными при р<0,05.
Результаты исследования. При инфицировании мышей разными штаммами С. neoformans, в зависимости от сроков наступления смерти половины экспериментальных животных, грибы условно разделили на две группы - сильновирулентные (п=5; 8-16 день) и слабовирулентные (п=7; 27-65 день). Различные по вирулентности штаммы С. neoformans были не способны индуцировать в интактных макрофагах продукцию оксида азота и активных форм кислорода. Поэтому проводили оценку их влияния на способность к выработке факторов микробоцидности макрофагами, стимулированными ЛПС или зимо-заном. Установлено, что высоковирулентные штаммы достоверно снижали продукцию оксида азота макрофагами, предварительно стимулированными ЛПС (66,6± 16,9 пмоль/Ю'кл; контроль - 168,3± 18,89 нмоль/106кл), а низковирулентные штаммы оказывали на макрофаги, активированные ЛПС, стимулирующее действие (228±45 нмоль/106кл) (р<0,05). Напротив, при изучении влияния штаммов С. neoformans разной вирулентности на способность макрофагов, стимулированных зимозаном, продуцировать активные формы кислорода, не выявили их существенного влияния на развитие респираторного взрыва в фагоцитах. Данные величины составили 0,189±0,013 и 0,173±0,010 ед. ОП для слабовирулентных и сильновирулентных штаммов соответственно (контроль 0,184±0,07 ед.ОП). Также было установлено, что выживаемость мышей в высокой степени коррелировала с продукцией NO макрофагами, стимулированными ЛПС (г=0,83 р<0,05).
Заключение. Установили, что штаммы С. neoformans разной вирулентности не влияют на продукцию активных форм кислорода макрофагами. Важной особенностью криптококков является их способность подавлять или стимулировать продукцию оксида азота, что подтверждается прямой корреляционной связью со степенью вирулентности разных штаммов и, вероятно, является важным фактором в способности грибов выживать внутри фагоцитов, способствуя диссеминации инфекции.
клинико-иммунологические особенности атопического дерматита у больных с микогенной аллергией
Фролова Е.В., Аак О.В.Дчеваткина А.Е., Филиппова J1.B., Шкоруба M ./1., Гулордава M .Д., Белова С.Г.
НИИ медицинской микологии им.П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО, Санкт-Петербург, Россия
clinical and immunological features for atopic dermatitis in patients with mold allergy
Frolova E.V., Aak 0.V, Uchevatkina A.E, Filippova L.V., Shkoruba M.L., Gulordava M.D., Belova S.G.
Kashkin Research Institute of Medical Mycology SEI APE SPb MAPE, Saint-Petersburg, Russia
Атопический дерматит — это генетически обусловленное аллергическое хроническое рецидивирующее заболевание кожи. Среди этиологических факторов, приводящих к развитию заболевания, важную роль может играть микогенная сенсибилизация.
Цель - изучение особенностей показателей общего иммунного ответа у больных атоническим дерматитом в зависимости от наличия микогенной аллергии.
Материалы и методы. Обследовано 26 больных атоническим дерматитом в стадии обострения. Аллергологическое обследование проводили с применением MAST-панелей на 36 аллергенов (Hitachi Chemicals Diagnostic). Критериями диагностики микогенной аллергии считали наличие специфических IgE в сыворотке крови к аллергенам грибов хотя бы одного из родов: Pénicillium, Aspergillus Mucor, Candida, Cladosporium, Alternaría. Субпопуляционный состав лимфоцитов определяли иммуноцитохими-ческим методом с использованием моноклональных антител. Продукцию интерферонов-а и -у (ИФН-а и ИФН-у) определяли через 24 часа в супернатантах клеток крови с использованием коммерческих имму-ноферментных тест-систем. Полученные результаты статистически обрабатывали с помощью программной системы STATISTICA for Windows (версия 6.0).
Результаты. Микогенная аллергия была выявлена у 73% (19 человек) больных атопическим дерматитом. В группе больных с микогенной аллергией частота сенсибилизации к отдельным родам грибов колебалась от 67 % (Aspergillus spp.) до 100 % (Pénicillium spp.). Наиболее высокий уровень сенсибилизации отмечали к Мисог и Pénicillium. У больных с атопическим дерматитом и микогенной аллергией наблюдали не только более тяжелое течение основного заболевания, по сравнению с группой больных без этого отягощающего фактора, а также наличие
нарушений со стороны желудочно-кишечного тракта (дискинезию желчевыводящих путей) в 6 случаях из 19 (32%). При изучении состояния иммунной системы не было получено достоверных различий в субпопуляционном составе лимфоцитов у больных с разной степенью сенсибилизации к грибковым аллергенам. Однако у больных с микогенной аллергией было установлено более глубокое смещение баланса между защитным клеточным иммунным ответом, активность которого оценивали по продукции ИФН-у и гуморальным иммунным ответом, показателем напряженности которого являлся уровень общего иммуноглобулина Е (IgE), в сторону активности последнего. Так, при наличии сенсибилизации к грибам у этих больных был достоверно выше уровень IgE (768±63 ЕД/мл) по сравнению с больными без сенсибилизации к грибам (247±166 ЕД/мл), что коррелировало с более низкой продукцией ИФН-у (419±44 пг/мл против 514±162 пг/мл соответственно, р<0,05). Кроме того, у больных с микогенной аллергией была достоверно ниже продукция ИФН-а (233±32 против 362,3±8,9 пг/мл, р<0,05). Известно, что ИФН-а обладает защитной противовирусной активностью и способен подавлять аллергическую перестройку иммунной системы по Т-хелпер 2-му типу. Следовательно, его снижение также могло влиять на течение атопического дерматита.
Выводы. Наличие сенсибилизации к грибковым аллергенам у больных атопическим дерматитом сопровождается снижением продукции интерферона-а и -у, что, в свою очередь, может отягощать течение основного заболевания. Следовательно, больные с микогенной аллергией нуждаются в назначении им-муномодулирующих препаратов как для стимуляции клеточного иммунного ответа, так и для снижения активности Т-хелперов 2 типа, поддерживающих аллергическое воспаление. Кроме того, так как конидии и фрагменты мицелия Aspergillus spp. и Pénicillium spp. являются аэроаллергенами, то рекомендуется микологическое обследование мест проживания пациентов с миколенной аллергией и проведение соответствующей санитарной обработки помещений.
новые подходы к оценке иммуномодулирую1цих свойств SACCHAROMYCES CEREVISIAE Фролова Я.Н.
ФГУН Ростов НИИ микробиологии и паразитологии, южный федеральный университет, Ростов-на-Дону, Россия
new approaches то the evaluation of immunomodulatory properties of SACCHAROMYCES CEREVISIAE Froiova J.N.
Rostov Research Institute of Microbiology and Parasitology, Southern Federal University, Rostov-on-Don, Russia
Цель - выявить возможный механизм влияния лизата клеток Saccharomyces cerevisiae при экспериментальном дисбиозе.
Объекты и методы. Исследовали производственную расу хлебопекарских дрожжей S. cerevisiae, Paie Gida Üretum ve Payarlama A.S., Турция. Для постановки эксперимента использовали беспородных белых лабораторных мышей 12-14 шт. (самцы), которым внутрибрюшинно вводили гентамицина сульфат в суточной дозировке, соответствующей пересчету на кг массы тела (1-я группа животных). С 3-го дня эксперимента параллельно гентамицину давали per os лизат S. cerevisiae по 0,2 мл в день в течение 10 суток (2-я группа животных). Затем 0,5 г фекалий мышей помещали в 4,5 мл изотонического раствора хлорида натрия, тщательно перемешивали при 1500 об./мин. в течение 20 минут для получения копро-фильтрата. Далее в эксперименте использовали наборы реагентов для количественного определения методом ИФА ИЛ-1, ИЛ-6, ИФ-гамма в биологических жидкостях и культуральных средах.
Результаты. Использование лизата S. cerevisiae для коррекции дисбиотических нарушений микро-биоты кишечника способствовало снижению содержания условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) и условно-патогенных энтер о бактерий {Staphylococcus sp., Candida spp.). При этом количество Bifidobactirium sp., Lactobacillus sp. и E. coli оставалось стабильным. Механизм действия лизата S. cerevisiae при дисбиотических нарушениях в кишечнике, вероятно, складывался из прямого антагонистического влияния биологически активных субстанций S. cerevisiae на УПМ и иммуномодули-рующий эффект, выражавшийся в стимулировании выработки провосполительных цитокинов, способствующих активизации Т-клеточного звена иммунитета, защите на местном уровне.
микромицеты в исторических зданиях и эффективность противогрибковой обработки
'Халдеева Е.В.,'Лисовская С.А.,1Глушко Н.И.,'Паршаков В.Р., 2Мангушева Т.Д., 2Михеева Е.А.
казанский НИИ эпидемиологии и микробиологии; 2000 «НПФ «Рекон», Казань, Россия
micromycetes in historical buildings and effectiveness of antifungal treatment
'Khaldeeva E.V./Lisovskaya S.A.,'GlushkoN.I.,'ParshakovV.R., 'Mangusheva Т.Д., 'Mikheeva E.A.
1 Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology; 2000 NPF «Rekon», Kazan, Russia
Биоразрушение зданий старой постройки является одной из проблем, от решения которой нередко зависит сохранение архитектурно-художественной целостности городского ансамбля, неповторимой атмосферы городов с многовековой историей, к которым относят и Казань. Здание филиала архитектурно-художественного института им. В.И.Сурикова, построенное на рубеже XIX-XX вв. по проекту К.Л. Мюфке, является памятником истории и культуры; в течение длительного времени его использовали в качестве учебного здания технологического университета, подвергая при этом значительной нагрузке. Это, наряду с неблагоприятными экологическими факторами, характерными для крупных городов, способствовало развитию грибковой микробиоты и, как следствие, биодеструкции сооружения. Одним из начальных этапов реставрационных работ стало микологическое обследование. Особенностью здания являются сводчатые кирпичные перекрытия между подвалом и первым этажом, внутри которых проложены бревна лиственницы, а наиболее ценной частью - парадная лестница, украшенная гипсовой лепниной.
При микологическом обследовании выявили разнообразные виды грибов-биодеструкторов, при этом в подвальной части здания и на первом этаже преобладали деструкторы древесины - Trichoderma viride и Cladosporium herbarum и, реже, неорганических материалов: Acremoniella atra, Acremonium ти-rorum, Aspergillus terreus. При этом очаги грибковых поражений были сосредоточены по нижней части стен (до 2 м) и распространялись в глубину до 4-5 см. На поверхности поврежденной лепнины были обнаружены Gliocladium penicilloides и Chaethomium stru-marium, образующие желтые каротиноидные пигменты. В глубине поврежденной и неповрежденной лепнины грибов не обнаружили. Практически повсеместно в здании выявили значительную обсеменен-
ность Aspergillus niger, A. fumigatus, A. flavus.
По результатам обследования в здании была проведена противогрибковая обработка, причем в качестве фунгицида использовали противогрибковый раствор ПГР, изготовленный на основе полигексаме-тиленгуанидина гидрохлорида. Для полной первичной обработки использовали 5% раствор ПГР, затем через сутки стены были обработаны 3% раствором ПГР. Через 7 дней после обработки при микологическом обследовании констатировали уничтожение более 95% грибов, причем видов-биодеструкторов при обследовании не обнаружили.
опыт лечения инвазивного зигомикоза в санкт-петербурге
'ХостелидиС.Н.,'Борзова Ю.В.,'КозловаЯ.И.,'Попова М.О., 2Чернопятова P.M.,2 Богомолова Т.С., 2Аравийский Р.А., 2Цинзерлинг В.А., "Колбин А.С., "Бойченко Э.Г., 3Зубаровская Н.И., 'Медведева Н.В., 5Подольцева Э.И., 'Климович А.В., 1Климко Н.Н.
1 кафедра клинической микологии, иммунологии и аллергологии ГОУ ДПО СПб МАПО; НИИ медицинской микологии им. П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО; ^Институт детской гематологии и трансплантологии им.Р.М.Горбачевой СПбГМУ им.ак. И.П.Павлова; 4Детская городская больница №1; 'Городская больница №31, Санкт-Петербург, Россия
experience of treatment of invasive zygomycosis in saint petersburg
'Khostelidi S.N., 'Borzova Y.V., 'Kozlova Y.I., 'Popova M.O., 2Chernopiyatova R.M., 2Araviyskiy R.A., 2Bogomolova T.S., 2Cinserling V.A., "Kolbin A. S., "Boychenko E.G., 3Zuborovskaya N.I., "Medvedeva N.V., 5Podoltseva E.I., 'Klimovich A.V., 'Kiimko N.N.
1 Chair of Clinical Mycology, Allergology and Immunology of SEI APESPb MAPE; 2Kashkin Research Institute of Medical Mycology of SEI APE SPb MAPE; 3Saint Petersburg State Medical University named after I.P. Pavlov; Pediatric City Hospital №1;5City Hospital №31, Saint-Petersburg, Russia
Зигомикоз - тяжелое заболевание, частота которого в последние годы увеличивается у разных категорий больных.
Цель исследования - провести анализ факторов риска, клинических проявлений и результатов лечения зигомикоза в Санкт-Петербурге, сравнить полученные данные с данными европейского исследования European Confederation of Medical Mycology.
Методы. Проспективное исследование больных зигомикозом в Санкт-Петербурге. Использовали критерии диагностики инвазивных микозов EORTC/ MSG 2008.
Результаты. Наблюдали 18 больных инвазивным зигомикозом в возрасте от 11 до 60 лет (медиана - 32 года), из них: 9 мужчин и 9 женщин. У 8 больных фактором риска развития инвазивного зигомикоза были гематологические заболевания, у 7 - хирургические вмешательства, у 1 - декомпенсированный сахарный
диабет, у 2 - поражение зигомицетами жилых помещений.
У всех пациентов диагноз был подтвержден при микроскопии материала из очагов поражения, где выявляли широкие нити несептированного мицелия. У 7 больных (39%) возбудители были выделены в культуре: Rhizopus oryzae, Rhizopus microsporus, Rhizopus sp., Rhizomucor pusillus, Rhizomucor variabilis, Absidia corimbifera, Syncephalastrum racemosum и Rhizomucor sp. (последние два возбудителя - у одного больного).
Зигомикоз легких развился у 8 больных, зигоми-коз придаточных пазух носа - у 6, диссеминирован-ный - у 2. Риноцеребральный зигомикоз, поражение кожи и мягких тканей наблюдали в единичных случаях.
Все больные получали лечение. Антифунгальную терапию проводили 14 больным (два пациента отказались от лечения антимикотиками, у двоих - диагноз установили посмертно). Десять больных получали амфотерицин В по 1 мг/кг/сут, в дальнейшем двое из них получали липосомальный амфотерицин В по 3 мг/кг/сут, один пациент - липидный комплекс амфотерицина В по 3 мг/кг/сут. Шесть пациентов получали позаконазол 800 мг/сут. Продолжительность антифунгальной терапии составила от 28 дней до 6 месяцев. Оперативное лечение провели 8 пациентам. Общая выживаемость в течение 6-х месяцев составила 72% (13 из 18 больных), при этом у гематологических больных - 37%.
Вывод. В Санкт-Петербурге основными факторами риска возникновения зигомикоза являются гематологические заболевания и травма. Наиболее частые клинические варианты - поражение легких и околоносовых пазух. Ранняя диагностика и адекватное лечение позволяют спасти большинство больных.
генерализованный криптококкоз при вич-инфекции Чарушина И.П., Воробьева H.H.
Цель - выявление клинических особенностей генерализованного криптококкоза.
Объекты и методы. В ККИБ г. Перми с 2007 по апрель 2010 гг. под наблюдением находилось 6 пациентов с генерализованным криптококкозом: 4 женщины и 2 мужчин в возрасте от 26 до 54 лет. Заболевание развилось на фоне ВИЧ-инфекции, 4 в стадии без антиретровирусной терапии. Диагноз был установлен на основании комплекса клинико-инструментальных и микробиологических методов.
Результаты. Пациенты поступили в стационар на 16-32 день болезни в тяжелом состоянии с выраженной интоксикацией и общемозговой симптоматикой (фебрильная лихорадка, головная боль, тошнота, повторная рвота). Отмечали менингеальные и очаговые симптомы (гемиплегия, одностороннее поражение 3, 4 и 7 пар черепных нервов).
Всем пациентам выполнили спинальную пункцию, выявили резкое повышение давления ликво-ра, лимфоцитарный плеоцитоз от 20 до 1664 клеток в 1 мкл, умеренное повышение белка и снижение сахара. При микроскопии и микологическом исследовании ликвора у всех пациентов обнаружили Cryptococcus neoformans, а у 5 человек возбудитель выявили при посеве крови. Уровень СД-4 лимфоцитов крови был в пределах 0,007-0,086109/л. Несмотря на применение противовирусных и адекватных антимикотических препаратов, летальный исход наступил у 5 пациентов. Патоморфологическая картина была представлена множественными фокусами некроза со скоплениями криптококков в головном мозге, печени, селезенке, лимфатических узлах.
Выводы. Генерализованный криптококкоз наблюдается на фоне ВИЧ-инфекции с выраженным иммунодефицитом, характеризуется преимущественным поражением ЦНС и быстро приводит к летальному исходу. При наличии лихорадки и клиники менингита ВИЧ-инфицированным пациентам необходимо проводить обязательное обследование на криптококкоз и незамедлительное лечение антимикотиче-скими препаратами.
Пермская государственная медицинская академия им. акад. Е.А.Вагнера, Краевая клиническая инфекционная больница г. Пермь, Россия
generalized cryptococcosis in
hiv-patients
Charushina I.P. Vorobyeva N.N.
Medical Academy, Regional infectious hospital, Perm, Russia
Важнейшим фактором риска возникновения криптококкоза является ВИЧ-инфекция. С последней четверти 20 столетия в мире отмечают значительный рост заболеваемости генерализованным криптококкозом ВИЧ-инфицированных людей: на их долю приходится от 4 до 8%.
CANDIDA species и микробоценоз полости рта у детей с рефаюкс-эзофагитом
Шабанов A.M.', Кузьмина Д.А.2, Новикова В.П.1, Шабашова Н.В. \ Оришак Е.А.3
'Санкт-Петербургская государственная педиатрическая академия; 2Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования; 3Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И.Мечникова, Россия
CANDIDA species and microbocenosis of oral cavity in children with reflux-esophagitis
1ShabalovA.M., 2Kuzmina D.A.,'Novikova V.P., 2Shaba$hova N.V., 'OnshakE.A.
'St. Petersburg State Pediatric Medical Academy; 2St. Petersburg Medical Academy of Postgraduate Education;3 St. Petersburg I.I. Mechnikov's State Medical Academy, Russia
Цель - изучить содержание Candida spp. в биотопе ротовой полости у детей с рефлюкс-эзофагитом (РЭ) и их роль в развитии внепищеводных проявлений РЭ.
Объекты и методы. Было проведено микробиологическое исследование ротовой жидкости, антилизоцимной активности выделенных микробов, определение антимикробных пептидов (дефензины 1-3, каталецидины LL-37), провосгталительного цито-кина ИЛ-8 у 42 детей в возрасте от 12 до 17 лет, страдавших РЭ, диагностированным эндоскопически, на фоне хронического гастродуоденита (ХГД) и у 20 детей того же возраста с ХГД без РЭ. Всем детям для регистрации внепищеводных проявлений РЭ проводили ЭКГ и кардиоинтервалографию.
Нарушение микробоценоза полости рта в виде избыточного роста условно-патогенных бактерий отмечали у всех больных с РЭ. У этих детей чаще, чем в группе пациентов с ХГД, наблюдали переход в доминирующую группу микроорганизмов дрожже-подобных грибов рода Candida (58% и 12%, х2=5,58, р<0,05). При этом у 47% грибов отмечали усиление антилизоцимной активности (АЛА), что расценивали как один из факторов патогенности. Среди детей с РЭ и наличием дисбиотических изменений в полости рта, ассоциированными с Candida albicans, доля нарушений ритма сердца (НРС) составила 43,5%. При выявлении С. albicans в полости рта при РЭ относительный риск развития НРС увеличивался в 1,25 раза (RR =1,25).
Результаты. После комплексной терапии РЭ (стандартное лечение, санация полости рта и ЛОР-органов, а также коррекция микробоценоза и местного иммунитета полости рта с применением имму-
номодулятора «Гепон») через 6 месяцев радикально изменялись показатели как содержания Candida spp. (5,15±0,61 и 1,34±0,51 lgKOE/ мл, р<0,001), так и АЛА (43% и 12%). Вероятно, это может быть связано с активацией «Гепоном» нейтрофильных грану-лоцитов в полости рта и увеличением ими синтеза антимикробных пептидов дефензинов 1-3 - на 30,6%, каталицидина LL-37 - на 188,8% по сравнению с их исходным уровнем. Получена обратная корреляция между уровнем провосгталительного цитокина ИЛ-8 и каталицидина LL-37 (г=-0,3812, Р=0,01). В результате комплексного лечения были ликвидированы симптомов РЭ и нарушения ритма сердца у всех обследованных пациентов.
Заключение. Применение иммуномодулятора «Гепон» в комплексной терапии РЭ приводило к нормализации микробоценоза полости рта, увеличению уровня антимикробных пептидов, снижению ИЛ-8 и более благоприятному течению основного заболевания и его пищеводных и внепищеводных симптомов.
влияние гнойно-воспалительного процесса CA NDIDA -БАКТЕРИАЛЬНОЙ этиологии на проявление гиперчувствительности замедленного типа Шеховцова О.В.1, Шаталова Е.В. ', Жалнина Т.С.2 'ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии Курской области», 2Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
effect of pus inflammatory process of CANDIDA -bacterial etiology in the manifestation of delayed type hypersensitivity Shekhovtsova O.V.\Shatalova E.V.2, Zhainina T.S.2 '«Federal center of Hygiene and Epidemiology of Kursk region», 2Kursk State Medical University, Kursk, Russia
Известно, что существенную роль в становлении клеточного иммунитета при инфекционных процессах любой этиологии играет гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ). На развитие ГЗТ при любой инфекции влияют биологические особенности возбудителя.
Цель исследования - изучить проявление ГЗТ при гнойно-воспалительных процессах Candida-бактериальной этиологии на фоне экспериментальной ожоговой травмы.
Материалы и методы. Эксперименты выполняли на мышах линии СВА и крысах Вистар. Термический ожог III-B степени площадью 30% поверхности тела вызывали под эфирным рауш-наркозом с помощью прибора для нанесения дозированного ожога (Минухин В.В., 1985). Для создания модели микет-
инфекции ожоговую поверхность орошали смесью живых культур (по 0,2 мл 1 млрд. взвеси) через сутки после воспроизведения ожога: Candida spp. (в дальнейшем просто «грибы»)+синегнойная палочка; грибы + кишечная палочка; грибы + клебсиеллы. Для постановки реакции ГЗТ мышей сенсибилизировали подкожным введением эритроцитов барана (ЭБ) в дозе 1107. На 5-е сутки после сенсибилизации в подушечку правой задней лапы вводили разрешающую дозу ЭБ (2407 в объеме 0,04 мл), в левую (контрольную лапу) - 0,85% раствор натрия хлорида в том же объеме. Через 24 часа оценивали интенсивность реакции ГЗТ по формуле Л. Йегера (1990).
Результаты и их обсуждение. Установлено, что у мышей в ответ на ожоговую травму происходит угнетение ГЗТ (Р<0,05). На присоединившийся гнойно-воспалительный процесс смешанной этиологии организм обожженных животных по-разному реагировал относительно формирования ГЗТ. Это зависело от вариантов ассоциации возбудителей гнойно-воспалительного процесса. Грибы в ассоциации с кишечной палочкой вызывали достоверное (Р<0,01) угнетение ГЗТ. Маловыраженную гиперергическую реакцию наблюдали у обожженных животных, инфицированных грибами + клебсиеллы. В то время как ассоциация грибов и синегнойной палочки формировала у последних резко выраженную гиперергическую реакцию ГЗТ (Р<0,01).
Известно, что формирование чрезмерной ГЗТ во многих случаях приводит к значительным повреждениям тканей, которые утяжеляют течение инфекции и существенно осложняют течение основного заболевания. Полученными нами данными подтверждено это предположение. В группе животных с Candida-псевдомонадной инфекцией наблюдали затяжное течение инфекционного процесса с высокими показателями летальности.
Вывод. Организм обожженных животных по-разному реагирует на присоединившийся гнойно-воспалительный процесс -бактериал ы к) й
этиологии относительно проявления ГЗТ. Можно предположить, что это зависит от складывающихся форм взаимоотношений между грибами и различного рода бактериями.
©
современный взгляд на
лечение микозов стоп
Юцковский А.Д.\ Кулагина Л.М'., Паулов О.й.
владивостокский государственный медицинский университет; 2Краевой клинический кожно-венерологический диспансер, г. Владивосток, Россия
modern view at the treatment of the tinnea pedis YutskovskyA.D.1, Kulagina L.M.', PaulovO. I.2
'VSMU, 2Prymorie Regional Skin Venereal Dispensary, Vladivostok, Russia
С позиции современной фармакотерапии лекарственные средства для проведения эффективной местной терапии микозов стоп должны отвечать следующим критериям: обладать широким спектром антимикотической активности, давать дополнительный антибактериальный и противовоспалительный эффект, при этом кратность применения должна быть минимальной, а курс терапии коротким, тем самым обеспечивая комплаентность.
Цель исследования - обобщение собственных результатов использования лекарственных форм «ла-мизил уно», «ламизил дермгель», «ламизил спрей» при топическом лечении микозов стоп.
Материалы и методы. Исследование проводили в трех медицинских центрах города Владивостока: краевом клиническом кожно-венерологическом диспансере, в лечебно-диагностическом центре « Мечников», в Военно-морском госпитале Тихоокеанского флота. Критерием включения в исследование служил клинический диагноз - микоз стоп, крупных складок, подтвержденный данными микроскопии патологического материала (соскоб) и /или культу-ральным исследованием.
Обследованы 48 пациентов (30 мужчин, 18 женщин) в возрасте от 20 до 79 лет (средний возраст -47,3 лет), длительность заболевания микозом стоп варьировала от 2 месяцев до 20 лет (в среднем, 2,8 лет). Предшествующее лечение микоза стоп проводили у 10 пациентов. Среди 48 пациентов диагностировали клинические формы микоза стоп: сквамоз-ную - у 15 человек, сквамозно-гиперкератотическую легкой степени - у 13, интертригинозную - у 16, дис-гидротическую - у 3. Соматический анамнез был отягощен у 21 (43,8%) пациента. Всех больных разделили на три группы: 1-ая группа - 16 человек, которым наносили наружно «ламизил уно» однократно на обе стопы; 2-ая группа - 15 больных, которым применяли наружно «ламизил дермгель» в течение 7 дней, и 3-я группа - 17 пациентов, которым орошали стопы «ламизил спрей» в течение 7 дней.
Результаты. Через 10 дней терапии клиническое излечение отмечали у 79,2% из всех групп пациен-
тов, а микологическое - у 100% через 2 недели после окончания лечения. Все три формы тербинафина являются эффективными, безопасными, удобными в терапии.
этиотропная терапия хронических гнойных средних отитов грибково-бактериааьной этиологии Ядченко Е.С., Ситников В.П., Шляга И.Д. У0 «Гомельский государственный медицинский университет», г.Гомель, Республика Беларусь
etiotropic therapy of chronic suppurative otitis media the d1fferentr aetyology Yadchencko E.S., SitnikovV.P., Shlyaga I.D.
Gomel State Médical University, Gomel, the Republic of Belarus
За последние годы существенно изменился характер биоты, вызывающий гнойные процессы в организме. Произошел рост заболеваемости микозами различной локализации, в том числе со стороны среднего уха. Грибковые поражения верхних дыхательных путей и уха протекают тяжелее, чем другие воспалительные процессы данной локализации, и могут явиться первичным очагом висцерального микоза или стать причиной сепсиса при запоздалой диагностике и нерационального лечения.
Цель исследования - изучение спектра микро-биоты и ее резистентности к основным антимикробным препаратам на предмет проведения рациональной этиотропной терапии хронических гнойных средних отитов (ХГСО) грибково-бактериальной этиологии.
Материалы и методы. В исследования включены 90 пациентов (108 ушей) в возрасте от 16 до 75 лет с ХГСО бактериальной, грибковой и грибково-бактериальной этиологии. Диагностика базировалась на комплексе методов: ЛОР-осмотр, отомикро-скопия, рентгенологическое, аудиометрическое, бактериологическое и микроскопическое исследования. Идентификацию, определение чувствительности возбудителей проводили с помощью микробиологического анализатора miniAPI (bioMerieux, Франция).
Результаты. Различные виды грибов выявили в 49 случаях (45,4%), Микробиологическое (культу-ральное) подтверждение микотической природы ХГСО отмечали в 18 (16,7%), бактериальной - в 40 (37%), смешанной грибково-бактериальной - в 31 (28,7%), роста не получено в 19 (17,6%) случаев. При ХГСО грибковой и грибково-бактериальной природы этиологически значимыми возбудителями являлись мицелиальные грибы Aspergillus spp. (fumigatus, niger) - 20 случаев (40,8%), Pénicillium spp. - 5 (10,2%),
дрожжевые грибы С. albicans обнаружили в 21 случае (42,8%). Ассоциацию Aspergillus niger vi С. albicans выявили в 3 случаях (2,7%). В сочетании с микро-мицетами наиболее часто из полостей среднего уха и послеоперационной полости выделяли грам-отрицательные бактерии Pseudomonas aeruginosae, Escherichia coli, Acinetobacter, Proteus - 37 случаев (52,1%), грам-положительные - Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis - 27 случаев (38%), в 7 случаях (9,8%) выделили несколько возбудителей одновременно. Исходя из литературных данных и полученных нами результатов по антимикотикочувстви-тельности выделенных штаммов, для местного применения при плесневом поражении среднего уха и послеоперационной полости наиболее эффективны нитрофунгин, нафтифин, амфотерецин В, а при кан-дидозном - клотримазол, нафтифин, амфотерицин В. При отсутствии эффекта от проводимой местной антимикотической терапии препаратами выбора при лечении ХГСО грибковой этиологии являются итра-коназол, вориконазол; при подтверждении этиологической роли С. albicans - флуконазол, итраконазол.
Выводы. С целью повышения эффективности лечения ХГСО грибковой этиологии показано использование методов идентификации и определения антимикотикочувствительности возбудителей. Этиологически значимыми возбудителями отомикоза в настоящее время являются, в равной степени, как плесневые (51%), так дрожжевые грибы (42,9%), смешанная микобиота встречается в 9,8% случаев. Препаратами выбора для местной терапии отомикоза является нафтифин, а для системной - итраконазол по 100 мг в сутки 14 дней. Для антибактериальной терапии ХГСО бактериально-грибковой этиологии целесообразно применение цефалоспарина 3-4 поколения, защищенных аминопеницилинов, респираторных фторхинолонов.
критерии дифференциального диагноза псевдомонадной онихии и онихомикоза Яковлев А.Б.
Кафедра дерматовенерологии и косметологии Г0УДП0 РМАП0, Москва, Россия
the criteria for the differential diagnosis of the pseudomonas onychia and onychomycosis YakovlevA.B.
Chair of dermatovenereology and cosmetology SEI APE RMAPE, Moscow, Russia
Псевдомонадная онихия (ПМО) - одна из форм бактериальной онихии, возникающая в результа-
те травмы ногтевой пластинки, с последующим ее инфицированием Pseudomonas aeruginosa. Частота выявляемое™ данной патологии на амбулаторном микологическом приеме составляет, по нашим оценкам, 2-5 случаев в месяц, больше - весной-летом. Здоровый ноготь синегнойная палочка не поражает!
Цель исследования - разработка критериев и алгоритма постановки диагноза ПМО и оценка частоты встречаемости данной патологии ногтей в условиях социального учреждения у больных с синдромом Дауна.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находится 535 больных с синдромом Дауна в социальном учреждении. За период 2008-2010 гг. у этих больных зарегистрировали возникновение поражения ногтей кистей (3 случая) и стоп (4 случая). Клиника: нормотрофический дистальный тип поражения, частичный онихолизис, ногтевая пластинка поражена в виде «сектора» насыщенно зеленого цвета, в двух случаях до черного; границы поражения четкие. Проксимальный тип поражения зафиксировали в 2 случаях на кистях и в 1 случае - на стопах. Во всех случаях провели троекратное исследование патологического материала на наличие мицелия патогенных грибов, с интервалом 3-4 дня.
Результаты. Мицелий патогенных грибов во всех 7 случаях не обнаружен троекратно, с интервалом 3-5 дней.
Обсуждение. Поражение ногтя зеленого цвета
подозрительно на инфицирование либо синегной-ной палочкой (а при наличии черной окраски - ассоциацией с Proteus vulgaris), либо плесневым грибом-недерматомицетом. Правда, в случае ПМО зеленый цвет имеет «красивый» насыщенный оттенок, в то время как плесень дает грязно-зеленый оттенок. При недерматомицетном микозе чаще встречается и гиперкератоз ногтевого ложа. Однако эти клинические критерии субъективны и могут быть применены в качестве дополнительных либо отборочных. Рост гриба при посеве следует ожидать в 35-50% случаев, рост Р. aeruginosa получить еще сложнее. Сочетание поражения одного и того же ногтя и Р. aeruginosa, и грибом - казуистика.
Выводы. В условиях амбулаторного микологического приема в КВД следует применять повторные исследования на грибы, при первичном обследовании больного - до 3 раз с интервалом 3-4 дня, повторные - 1 раз в месяц.
Частота возникновения ПМО стоп у больных с синдромом Дауна в условиях социального учреждения ниже, чем на амбулаторном приеме, что объясняется наличием эндокринной и сосудистой патологии, особенностями строения стоп (брахидактилия), а при ПМО кистей предрасполагающим фактором является работа с клеем в мастерской и частая мацерация кожи; отсутствует сезонность, столь характерная и обнаруживаемая при амбулаторном приеме пациентов.