УДК 612.621.5.821:616.8-008.615:618.17:615.832.9]-092.9 © О.В. Ершова, Д.А. Еникеев, В.Д. Захарченко
О.В. Ершова, Д.А. Еникеев, В.Д. Захарченко НАРУШЕНИЯ, ВОЗНИКАЮЩИЕ В РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЕ САМОК КРЫС, ПОДВЕРГШИХСЯ ЭМОЦИОНАЛЬНО-БОЛЕВОМУ СТРЕССУ,
И ИХ КОРРЕКЦИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДА РИТМИЧЕСКОЙ КРАНИОЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ГИПОТЕРМИИ ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» г. Уфа
Эмоционально-болевой стресс вызывает нарушения циклических процессов репродуктивной системы самок крыс. О состоянии репродуктивной системы судили по эстральному циклу (на основании цитологии влагалищных мазков) и уровню гормонов в периферической крови иммуноферментным методом. Для оценки фертильности самок крыс осуществляли их спаривание с интактными самцами. В группе самок крыс после эмоционально-болевого стресса эструс регистрировался к 15-16-му дню после прекращения действия стресса. Проведение ритмической краниоцеребральной гипотермии приводило к восстановлению овуляции между 5 и 8 сутками. Изменение уровня гормонов периферической крови отражало общую тенденцию изменения состояния репродуктивной системы. Ритмическая краниоцеребральная гипотермия корригирует нарушение циклических процессов репродуктивной системы после эмоционально болевого стресса.
Ключевые слова: эмоционально-болевой стресс, циклических процессов репродуктивной системы, ритмическая краниоцеребральная гипотермия.
O.V.Ershova, D.A.Enikeev, V.D.Zaharchenko INFRINGEMENTS ARE ARISD IN THE REPRODUCTIVE SYSTEM OF THE FEALE-RATS, AFTER THE EMOTIONAL-PAINFUL STRESS AND THEIR CORRECTION WITH THE USE OF THE METHOD RHYTHMIC
KRANIOTSEREBRALNOJ GIPOTERMII
The emotional-painful stress causes the infringements of the cyclic processes of the reproductive system the female-rats. We judged by estralniyi cycle about the condition of the reproductive system (on the basis of cytology vlagalishnye mazki) and to a level of hormones in peripheral blood by immunofermentnyi method. For the estimation of the fertilnost of the female-rats we carried-out their pairing with the intaktnye males. In the group of the female-rats after the emotional-painful stress estrus was registered by 15-16 day after the cancellation of the stress.
Carrying out of the rhythmic kraniotserebralnaya gipotermiya led to the restoration ovuljatsiya between 5 and 8 day. Change of the level of hormones of the peripheral blood reflected the general tendency of the change of the condition of reproductive system. Rhythmic kraniotserebralnaja gipotermija korrigiruet the infringement of the cyclic processes of the reproductive system after the emotional-painful stress.
Key words: the emotional-painful stress, the cyclic processes of the reproductive system, the rhythmic kraniotserebralnaja gipotermija.
Научно-технический прогресс наряду с диционных методов лечения. Таким методом,
огромной положительной ролью в развитии по нашему мнению, может быть применение
цивилизации создал предпосылки для увели- ритмической краниоцеребральной гипотер-
чения психоэмоциональных нагрузок [5]. мии с частотой воздействия 0,1 Гц. Ритмиче-
Возникающие в результате хронического или ская гипотермия стимулирует (через измене-
острого стресса аффективные расстройства ние гематоэнцефалического барьера) вегета-
способствуют ухудшению психоэмоциональ- тивную нервную систему и прежде всего её
ного статуса, направленным изменениям ней- главный интегратор - гипоталамус [1]. Целью
рохимических процессов и формированию настоящего исследования является определе-
устойчивого замкнутого патологического оча- ние в эксперименте влияния ритмической
га «психосоматического расстройства» с раз- краниоцеребральной гипотермии на нейрогу-
витием нейроэндокринного синдрома. Часто- моральные механизмы регуляции цикличе-
та нарушений менструального цикла возросла ских процессов репродуктивной системы у
в 2 раза у взрослых женщин и в 3,5 раза у самок крыс, подвергшихся эмоциональноподростков [4]. Выявлены изменения нейро- болевому стрессу.
медиаторных систем головного мозга при Материалы и методы
наиболее распространённых гипоталамо- Исследования выполняли на половозре-
гипофизарных дисфункциях, сопровождаю- лых самках крыс популяции Вистар массой
щихся нарушениями функции яичников [6,4]. 180-200 г. Эксперимент проводился на 48
Таким образом, нарушения процессов репро- самках крыс (6 групп самок крыс по 8 в каж-
дукции являются актуальной проблемой, за- дой группе). Для спаривания брали 8 самцов.
ставляющей специалистов искать новые под- Животные содержались в условиях вивария
ходы к выбору терапии, а также к экспери- при световом режиме (10 часов свет и 14 ча-
ментальному моделированию для изучения сов темнота) на стандартном пищевом рацио-
механизмов формирования патологических не. Эксперименты проводились с ноября по
изменений с целью разработки новых нетра- февраль. Различные манипуляции осуществ-
лялись в первой половине дня. Гипотермиче-ские воздействия проводили на установке, состоящей из электрогенератора и электроэнцефалографа, подключенных к планшетному потенциометру, у которого каретка с пером была заменена шторкой для прерывания потока холодного воздуха (+ 4°С), подаваемого от промышленного гипотерма (марка ПГВ-02 производство г. Горький) в камеры с животными при частоте воздействия 0,1Гц. Время воздействия 90 минут. Эмоционально-болевой
стресс вызывали по методике Ведяева Ф.П. и Воробьёвой Т.М. [2]. Периодически крыс помещали в пластиковые контейнеры, существенно ограничивающие движение [3].
О состоянии репродуктивной функции животных судили по эстральному циклу на основании цитологии влагалищных мазков. Для оценки фертильности самок крыс осуществлялось их спаривание с интактными самцами, которые предварительно тестировались на половую активность.
Индекс плодовитости = Число оплодотворенных самок х 100%
Число самок в опыте
Индекс беременности = Число беременных самок__________х 100%
Число оплодотворенных самок
Для определения уровня гормонов им-муноферментным методом использовалась периферическая кровь.
Результаты и обсуждение Изучение эстрального цикла по вагинальным мазкам крыс определило его продолжительность в 4,3 дня. Течковый период (проэструс + эструс) составил 1,64 ± 0,09 дня, межтечковый период (метаэструс + диэструс) составил 2,75 ± 0,08 дня. У всех крыс в стадии проэструса, подсаженных к самцам, в вагинальных мазках на утро после спаривания обнаружены сперматозоиды. Индекс плодовитости составил 100 % как и наличие беременности отмечено в 100 % случаев. В других стадиях цикла спаривание не давало положительных результатов. Выявленные циклические изменения в содержании ФСГ, ЛГ и эст-радиола в периферической крови согласуются с данными литературы (табл. 1).
Таблица 1
Уровень гормонов в периферической крови экспериментальных
Эстрадиол, МЕ ФСГ, нМ/л ЛГ, нМ/л
ПЭ 0,372±0,0238 * 4,08±0,39 * 5,94±0,69
Э 0,428±0,0356* 6,98±1,13 * 9,04±1,3
МЭ 0,225±0,0437 3,35±0,84 3,016±1,28
ДЭ 0,14±0,0552 2,72±0,63 2,64±1,02
Примечание. ПЭ-проэструс, Э-эструс, МЭ-метаэструс, ДЭ-диэструс, *р< 0,05
В группе самок крыс после эмоционально-болевого стресса лишь к 15-16-му дню в вагинальных мазках регистрировался эст-рус. При этом начиная с 5 дня после эмоционально-болевого стресса к крысам подсаживали самцов, с которыми они пребывали на протяжении последующего срока наблюдения. В вагинальных мазках фиксировали наличие сперматозоидов. Индекс плодовитости составил 12 %.
Проведение ритмической гипотермии
существенно отражалось на состоянии самок крыс. На 7-8-е сутки после прекращения проведения эмоционально-болевого стресса животных спаривали. Индекс беременности был такой же, как у животных контрольной группы. Не выявилось также различий в имплантации от показателей контрольной (интакт-ной) группы самок крыс. Постимплантацион-ная гибель эмбрионов у самок крыс после эмоционально-болевого стресса достигала 30%, в то время как у крыс после ритмической краниоцеребральной гипотермии гибель составила 3,1%.
Изменения уровня гормонов периферической крови: ЛГ, ФСГ и эстрадиол повышался непосредственно после ритмической краниоцеребральной гипотермии, превышая уровень их после эмоционально-болевого стресса.
При этом уровени ЛГ и ФСГ были выше, чем у контрольной группы животных в стадии эструса, а эстрадиол был значительно ниже. В дальнейшие сроки наблюдения отмечалось выравнивание соотношения уровня исследуемых гормонов, что особенно заметно по соотношению ЛГ и ФСГ (табл. 2).
Таблица 2
Уровень гормонов в периферической крови экспериментальных животных при стрессе и ритмических холодовых воздействиях (М±т, п=8)
Эстрадиол, МЕ ЛГ/ФСГ ФСГ, нМ/л ЛГ, нМ/л
Исходный уровень 0,368±0,022 * 1,33±0,12 4,10±0,59 5,46±0,63
РКЦГ 0,286±0,022 * 1,36±0,1 4,408±0,52 6,01±0,86
Стресс 0,197±0,004 * 2,09±0,41 3,57±0,45 5,94±0,69
Стресс +РКЦГ 0,22±0,02 2,17±0,56 4,64±1,07 8,12±0,81
5 суток 0,242±0,01* 0,93±0,12* 2,9±0,29 * 2,66±0,40*
8 суток 0,213±0,06 * 0,86±0,17* 3,33±0,30 2,96±0,88*
*р< 0,05 (относительно исходного уровня).
Заключение
Таким образом, эмоционально-болевой стресс у самок крыс приводит к нарушению циклических процессов в репродуктивной системе, фертильности и изменению гормонального уровня в периферической крови.
Ритмическая краниоцеребральная гипотермия корригирует данные нарушения, восстанавливает фертильность самок крыс, нормализует гормональный урововень в периферической крови экспериментальных животных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бабийчук Г.А., Марченко В.С., Марченко Л.Н., Алтуева Е.В. К механизмам регуляции проницаемости гематоэнцефалического барьера охлажденного мозга // Проблемы криобиологии. -1996. - № 1. - С. 22-23.
2. Ведяев Ф.П., Воробьева Т.М. Модели и механизмы эмоциональных стрессов. - Киев.: Здоров’я, 1983. - 136 с.
3. Гладкова А.И. Репродуктивная функция крыс-самок в условиях скученности // Физиол. журн. им. И. М. Сеченова. - 1992. - Т 78, № 5. - 86-91.
4. Кулаков В.И. Бесплодный брак. - М.: Гэотар-медиа, 2006. - 610 с.
5. Пшенникова М. Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии // Журн.
патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2000. - № 3.- С. 20-25.
6. Шевчик Н.В., Зуев В.М., Леонова А.Б., Чубаровский В.В. Влияние нервно-психического напряжения на репродуктивную функцию женщин молодого возраста // Акушерство и гинекология. - 2002. - № 4.- С. 27-30.