CC BY
25
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2020; ТОМ 65; №1 |
Треглазова С. А., Соколова М. А., Макарик Т. В., Никулина Е. Е., Степанова Е. А., Абдуллаев А. О., Ковригина А. М.,
Моисеева Т. Н., Судариков А. Б.
МУТАЦИИ ГЕНА SRSF2 У ПАЦИЕНТОВ МДС/МПЗ: ПИЛОТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. К миелодиспластическим/миелопролиферативным заболеваниям (МДС/МПЗ) относят атипичный хронический миело-лейкоз (аХМЛ), хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ) и неклассифицируемые МДС/МПЗ. Сообщалось, что при этих заболеваниях (K.Zoi et а1., 2014; Аи)1а et а1., 2018) мутации в 1 экзоне гена 8Я8Е2 встречаются в 2—40% случаев и по классификация ВОЗ 2017 года могут считаться маркером клональности при JAK2, CALR или МРЬ-негативных МДС/МПЗ. Данные по российским пациентам до настоящего времени не публиковались.
Цель работы. Определение типов мутаций 1 экзона гена SRSF2 у пациентов НМИЦ гематологии с РЬ-негативными (РЬ-) МПЗ и МДС/МПЗ и оценка диагностической значимости данного анализа.
Материалы и методы. Материалом исследования являлась ДНК клеток крови пациентов, наблюдавшихся в поликлиническом отделении НМИЦ гематологии с 2018 по 2019 г. Диагнозы были установлены в соответствии с классификацией ВОЗ 2017. Всего в исследование включен 91 образец ДНК: 26 от пациентов с истинной полицитемией (ИП); 20 — с эссенциальной тромбоцитемией(ЭТ); 20 — с первичным миелофибро-зом (ПМФ); 4 — с ХММЛ; 5 — с неклассифицируемыми МДС/МПЗ, 1 — с аХМЛ и 14 — с вторичными изменениями показателей крови (контрольная группа). Все образцы исследовались на мутации в генах JAK2 ^6^), ОЛЬЯ (9 экзон), MPL ^515Ь/К). Молекулярно-генети-ческий анализ мутаций гена 8Я8Р2 проводился при помощи прямого секвенирования по Сэнгеру с использованием следующих праймеров: SRSF2-F 5ч-cttegttegcttteacgac-3ч и SRSF2-R 5ч-ccteagccccgtttacct-3\ Чувствительность определения составляла 10%.
Результаты и обсуждение. Мутации 1 экзона гена 8Я8Р2 были выявлена в 4 случаях: в 2 случаях с ПМФ, в 2 случаях с МДС/МПЗ (аХМЛ и ХММЛ). Все 4 пациента были первичными с коротким анамнезом заболевания (не более 1 года с момента первых симптомов) и имели неблагоприятное течение заболевания. Трое из пациентов были негативны по основным мутациям (табл. 1). У пациентов с ИП и ЭТ мутаций гена 8Я8Р2 выявлено не было, но все пациенты данной группы имели мутации, характерные для классических МПЗ
(табл. 2). Контрольная группа была отрицательна по всем 4 маркерам. У одного пациента с ПМФ была также выявлена точечная мутация 1ЛК2 V617F с аллельной нагрузкой 2%. Низкую аллельную нагрузку МК2, нехарактерную для больных ПМФ, можно объяснить вытеснением клона с мутацией МК2 V617F клоном с мутацией p.P95_R102 8Я8¥2 на стадии бластной трансформации.
Заключение. Нами протестированы образцы ДНК от пациентов НМИЦ гематологии с РЬ- МПЗ и МДС/МПЗ на наличие мутаций 1 экзона гена 8Я8Е2. Всего найдено 4 случая: в 3-х — однонуклеотид-ная замена в положении 284; в одном — делеция 284—307. Эти мутации, по данным литературы, являются наиболее частыми при МДС/ МПЗ. У пациентов с ЭТ, ИП в контрольной группе мутации в 1 экзо-не гена 8Я8Е2 не найдены. Все пациенты с мутацией гена 8Я8Е2 находились в стадии бластной трансформации. Это подтверждает возможность использования данного анализа для выявления больных с неблагоприятным течением заболевания, которым показано более интенсивное лечение (в частности ТСКК, ТКМ). Исследование может быть целесообразно для мониторинга эффективности терапии, но с применением более чувствительных методов.
Таблица 1. Обнаруженные типы мутаций 5К5Р2
ID Диагноз SRSF2 1 экзон JAK2 V617F CALR 9 экзон MPL W515L/K
40786 аХМЛ c.284 c>t (p.P95L) 0 0 0
41145 ХММЛ c.284 c>t (p.P95L) 0 0 0
39180 ПМФ. БК c.284 c>g (p.P95R) 0 0 0
38397 ПМФ. БК o.284_307del (p.P95_R102) 2% 0 0
Таблица 2. Характеристика исследованных образцов
Диагноз Всего JAK2 V617F CALR 9 экзон MPL W515L/K SRSF2 1 экзон Без мутаций
ИП 26 26 0 0 0 0
ЭТ 20 16 4 0 0 0
ПМФ 21 14 3 0 2 3
МДС/МПЗ 10 0 0 0 2 9
Контроль 14 0 0 0 0 0
Трегубова Е. В., Сарпова М. В., Овсепян В. А., Лучинин А. С.
ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА -2467ТЮЕГГ ГЕНА СУР1А2 У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ ПРИ ТЕРАПИИ ИНГИБИТОРАМИ ТИРОЗИНКИНАЗЫ ПЕРВОГО ПОКОЛЕНИЯ
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г. Киров
Введение. В настоящее время стандартом лечения хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) является терапия ингибиторами тиро-зинкиназы (ИТК). Применение ингибитора тирозинкиназ первого поколения (ИТК1) — иматиниба — в клинической практике позволило значительно повысить выживаемость больных ХМЛ, при этом достижение большого молекулярного ответа (БМО) (снижение экспрессии BCR-ABL ниже уровня 0,1 %) к 12 мес терапии удается получить в 86% случаев. У остальных пациентов клинически значимый эффект терапии ИТК1 не достигается, развивается резистентность к препарату или появляется непереносимость иматиниба. В этих случаях (у 40—45 % пациентов с ХМЛ) применяются ИТК второго поколения (ИТК2) или трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК).
Цель работы. Определить прогностическое значение полиморфизма 2467Т>ае1Т гена СУР1А2 в достижении молекулярного ответа у больных ХМЛ при терапии ИТК1 к 12 мес терапии.
Материалы и методы. В исследование включены 60 больных ХМЛ в хронической фазе заболевания: 33 (55 %) мужчины и 27 (45 %) женщин в возрасте от 17 до 78 лет (медиана — 50 лет), получавших лечение иматинибом в течение 12 мес. Из них у 37 пациентов наблюдался БМО (группа сравнения), у 23 — БМО отсутствовал. Генотипирование проводили методом полимеразной цепной реак-
ции с последующим анализом полиморфизма длины рестрикцион-ных фрагментов (ПДРФ). Амплифицированные фрагменты ДНК обрабатывали эндонуклеазой рестрикции FauNDI (ООО «Синтол», Россия). Ассоциацию изучаемых генетических вариантов с риском недостижения БМО оценивали по соотношению шансов (ОШ) с доверительным интервалом (ДИ) при 95% уровне значимости.
Результаты и обсуждение. Среди обследованных у 11 (33,3 %) мужчин больных ХМЛ выявлен делеционный аллель -2467(1е1Т гена СУР1А2, из них у 3 (27,3 %) — наблюдалось достижение БМО к 12 мес терапии ИТК1. Из 22 (66,7 %) мужчин, не имевших данный аллель, БМО достигнут у 17 (77,3%). Из анализа оценки шансов (ОШ) следует, что носительство аллеля -2467(1е1Т у мужчин с ХМЛ значительно повышает риск недостижения БМО в сравнении с мужчинами, не имеющими данный аллель (р = 0,02; ОШ = 9,1; ДИ 95% = 1,37-50,00). Делеционный аллель -2467(1е1Т выявлен у 6 (22,2%) женщин, из них БМО достигнут у 5 (83,3%). Статистически значимых различий по данному признаку среди лиц женского пола не выявлено (р > 0,2).
Заключение. Наличие аллеля -2467(1е1Т гена СУР1А2 у мужчин больных ХМЛ ассоциировано с риском неэффективной терапии има-тинибом к 12 мес. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости продолжения исследований на более представительных выборках.
