CC BY
40
Таблица 1
Показатели факторного анализа личностных черт 17-летних девушек в зависимости от типа телосложения (М ±ст)
Основная группа, стены n=47 Контрольная группа, стены n=99
A B C D E F G H I J O Q2 Q3 Q4 A B C D E F G H I J O Q2 Q3 Q4
5,5 ± 0,2 6,2 ± 0,2 2,7 ± 0,1 5,7 ± 0,1 6,0 ± 0,1 6,5 ± 0,1 4,5 ± 0,2 6,5 ± 0,2 5,0 ± 0,2 5,2 ± 0,3 8,0 ± 0,1 4,0 ± 0,2 5,5 ± 0,2 5,5 ± 0,3 7,1 ± 0,1 7,9 ± 0,1 6,4 ± 0,2 5,4 ± 0,2 8,7 ± 0,1 5,2 ± 0,1 6,4 ± 0,3 5,8 ± 0,2 2,3 ± 0,1 3,9 ± 0,2 5,2 ± 0,1 4,5 ± 0,1 6,2 ± 0,3 5,3 ± 0,2
Таблица 2
Социальная адаптированность и вегетативная устойчивость 17-летних девушек основной и контрольной групп
Группы наблюдения Начало учебного года, баллы Конец учебного года, баллы
Социальная адаптированность Вегетативная устойчивость Социальная адаптированность Вегетативная устойчивость
Основная n=47 10,19±2,29 10,22±0,35 9,41±2,48 10,54±0,33
Контрольная n=99 12,44±2,65 6,07±0,3 12,89±0,28 5,96±0,3
адаптации. Таким первокурсникам рекомендуется режим обучения, исключающий моменты, требующие особого интеллектуального, эмоционального и физического перенапряжения. Преподавателям, работающим с такими студентами, рекомендуется дозировать учебную нагрузку, совершенствовать систему поощрений, пытаться создать в группе максимально комфортную психологическую атмосферу. Вместо стандартных уроков физкультуры полезно ввести специфические занятия, в процессе которых физическая нагрузка будет индивидуализирована. Для проведения данных мероприятий целесообразно создание специализированных оздоровительных физкультурных групп.
Большую роль в нормализации состояния могут оказать регуляция режима труда и отдыха, оптимизация условий обучения, формирование здорового образа жизни, межличностных и семейно-социальных контактов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Баранов А. А., Кучма В. Р., Сухарева Л. М. Оценка здоровья детей и подростков при профилактических осмотрах (ру-
ководство для врачей). - М.: издательский дом «Династия», 2004. - 168 с.
2. Баранов А. А., Кучма В. Р., Рапопорт И. К. Руководство по врачебному профессиональному консультированию подростков. -М.: издательский дом «Династия», 2004. - 200 с.
3. Кононов А. В. Критерии доказательной медицины в разра-
ботке морфологического прогноза болезни (анализ работы клинического патолога) / А. В. Кононов, М. А. Ливзан, Т. В. Васькина // Актуальные вопросы патологической анатомии: Материалы
V межрегиональной научно-практической конференции патологоанатомов Урала и Западной Сибири. - Челябинск, 2001. -С.68-72.
4. Рукавишников А. А., Соколова М. В. Факторный личностный опросник Р. Кеттелла (методическое руководство). - СПб: «Има-тон», 1998. - 96 с.
5. Федорова А. А, Митина Т. Г., Чернышева О. В., Ярошевич О. В. Создание открытой многопрофильной среды - условия развития многопрофильного образования: методические рекомендации для педагогов, психологов, профориентаторов. - М., 2008. - С. 60-87.
Поступила 26.03.2009
С. В. ЯНЧЕНКО1, А. И. ЕРЕМЕНКО1, Р. А. ХАНФЕРЯН2, А. С. ЗАРУБИНА1, Е. В. ВАРЛАШИНА1, В. А. ШИПИЛОВ’
МУЛЬТИЦИТОКИНОВОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СЛЁЗНОЙ ЖИДКОСТИ У ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА
кафедра глазных болезней Кубанского государственного медицинского университета,
Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: [email protected];
2кафедра аллергологии и клинической иммунологии Кубанского государственного медицинского университета,
Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009 УДК 617.711-004.1
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009
В исследование были включены 20 добровольцев пожилого возраста без признаков офтальмопатологии (9 мужчин и 11 женщин, 56-72 лет, средний возраст - 66,5±2,1 года). В каждой пробе слёзной жидкости (собранной без стимуляции слёзопродукции) определяли концентрации 10 цитокинов (IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-a, INF-y) путём проведения singl-plex cytokine assay (Bio-Plex Assay; Bio-Rad Laboratories). Было установлено, что указанные провоспали-тельные и противовоспалительные цитокины присутствуют в слёзной жидкости лиц пожилого возраста даже при отсутствии офтальмопатологии. Полученные данные могут служить основой для дальнейших исследований качественного спектра и количественных уровней различных цитокинов слёзной жидкости при различных заболеваниях органа зрения, что позволит углубить данные относительно их патогенеза.
Ключевые слова: цитокины, слёзная жидкость, пожилой возраст.
S. V. YANCHENKO1, A. I. EREMENKO1, R. A. KHANFERYAN2,
A. S. ZARUBINA1, E. V. VARLASHINA1, V. A. SHIPILOV1
MULTICYTOKINE ASSAY OF TEARS AT ELDERLY HEALTHY VOLUNTEERS
Department of Ophthalmology of the Kuban State Medical University,
Krasnodar, Russia, 350063, Sedin St., 4. E-mail: [email protected];
2Department of Allergology and Clinical Immunology, Kuban State Medical University,
Russia, 350063, Krasnodar, Sedin St., 4
Tear samples were collected (with no stimulation) from 20 elderly volunteers with out signs of ocular diseases (9 males and 11 females, 56-72 years of age, average 66,5±2,1 years). The cytokines (IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-a, INF-y) in each sample of tears were measured using singl-plex cytokine assay (Bio-Plex Assay; Bio-Rad Laboratories). The present study showed that pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines are present in tears of elderly volunteers with out signs of ocular diseases. The obtained data can form a basis for the further researches of a qualitative spectrum and quantitative levels various cytokines of tears at various ocular diseases.
Key words: cytokines, tears, elderly healthy volunteers.
Введение
Цитокины слёзной жидкости играют ключевую роль в иммунном и воспалительном ответе глазной поверхности (путём регуляции активации, диффе-ренцировки и пролиферации иммунокомпетентных клеток конъюнктивы), и соответственно, в патогенезе различных заболеваний органа зрения, включая синдром сухого глаза [3-5, 7]. Максимальные уровни заболеваемости синдромом сухого глаза отмечаются среди лиц пожилого и старческого возраста, что связано с нарастанием количества факторов риска данного полиэтиологического заболевания [1, 2].
Актуальной научной задачей является исследование слёзной жидкости лиц указанной возрастной группы при отсутствии офтальмологической патологии для определения нормального спектра и диапазона концентраций провоспалительных и противовоспалительных цитокинов. Вместе с тем до недавнего времени не представлялось возможным проведение мультицитокиновых исследований отдельных образцов слёзной жидкости, что определялось малым объёмом проб и недостаточной чувствительностью иммуноферментного анализа (ELISA) [5, 6]. С другой стороны, в доступной литературе нам не удалось выявить данных, описывающих результаты мультицито-киновых исследований слёзной жидкости, полученной в условиях отсутствия стимуляции слёзопродукции, у офтальмологически здоровых лиц пожилого возраста. Приведенные факты определили актуальность настоящего исследования и его цель.
Цель исследования - изучить качественный спектр и количественные уровни цитокинов слёзной жидкости у офтальмологически здоровых лиц пожилого возраста путём проведения мультицито-кинового исследования.
Методика исследования
В исследование было включено 20 добровольцев (11 мужчин, 9 женщин) без признаков офтальмопатологии (40 глаз, 40 проб слёзной жидкости) от 56 до 72 лет (средний возраст 66,5±2,1 года). Проведение настоящей работы было одобрено локальным этическим комитетом Краснодарского краевого регионального отделения Общества офтальмологов России. У всех лиц, включенных в исследование, получали информированное согласие.
Забор образцов слёзной жидкости проводили из нижнего слёзного мениска (в условиях отсутствия стимуляции слёзопродукции) при помощи полуавтоматического дозатора и одноразовых полимерных ат-равматичных наконечников 30 мл (НП «Термо Фишер Сайнтифик», Россия). Пробы слёзной жидкости помещали в пробирки Эппендорфа (1 мл), разбавляли стандартным буферным раствором до общего объёма 50 мл и сохраняли до проведения исследования при температуре 20° С.
В каждом образце слезы определяли количественные уровни 10 цитокинов (IL-1 b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-a, INF-y) путём проведения singl-plex cytokine assay (Bio-Plex Assay; Bio-Rad Laboratories, Hercules, California, СШ^). Детектирующие платформы были калиброваны с высокой степенью чувствительности (от 2,39 до 30 000 пг/мл). В качестве одного из контролей использовали только пробы с разводящим буфером.
Накопление данных исследования и их статистическая обработка проводились с использованием программного обеспечения Bio-Plex (Bio-Plex Manager software).
Результаты исследования
В образцах слёзной жидкости здоровых добровольцев пожилого возраста, полученных в условиях мини-
мальной стимуляции, был зафиксирован весь спектр исследовавшихся провоспалительных цитокинов, включая интерлейкины (IL-1b, IL-6, IL-8, IL-12) и TNF-a. Количественные уровни указанных провоспалительных цитокинов колебались в пределах всех изученных проб в достаточно широких пределах и составили соответственно 39,8±8,3 пг/мл; 73,6±12,3 пг/мл; 197,3±25,3 пг/мл; 37,3±7,7 пг/мл; 9,2±2,1 пг/мл.
Противовоспалительные цитокины (IL-2, IL-4, IL-10, IL-13) выявлялись в следующих концентрациях: 9,1±1,9 мл; 9,5±2,4 пг/мл; 15,2±3,1 пг/мл; 9,7±2,5 пг/мл. Количественный уровень INF-y составил 80,1±16,3 пг/мл.
Обсуждение
Исследование показало, что в слёзной жидкости лиц пожилого возраста провоспалительные цитокины (IL-1b, IL-6, IL-8, IL-12, TNF-a) определяются даже при отсутствии офтальмологической патологии, что соотносится с данными Y. Nakamura et al. [6].
Необходимо отметить, что Y. Nakamura et al. изучали количественные уровни отдельных провоспалительных цитокинов (IL-1 a, IL-1 b, IL-6, IL-8) в слёзной жидкости здоровых добровольцев первого и второго периодов зрелого возраста путём использования иммуноферментного анализа (ELISA). При этом для определения количественных уровней нескольких цитокинов в ходе исследования проводилось объединение образцов слезы (pooled tears), поскольку объединение проб слёзной жидкости делало возможным выполнение мультицитокино-вого исследования. Вместе с тем известно, что при подобном подходе полученные результаты могут попадать под влияние проб с более высокими концентрациями. По всей видимости, приведенными фактами можно объяснить достоверно более высокие количественные уровни IL-8 в базальной и стимулированной слёзной жидкости (731,4±116,2 пг/мл и 276,1±47,5 пг/мл соответственно), по данным указанных авторов, сравнительно с результатами настоящего исследования.
С другой стороны, в ходе работы было установлено, что в слёзной жидкости офтальмологически здоровых добровольцев пожилого возраста основные проти-
вовоспалительные цитокины (IL-2, IL-4, IL-10, IL-13) и INF-y также определяются при отсутствии заболеваний глазной поверхности.
Таким образом, настоящее исследование позволило уточнить качественный спектр и количественные уровни провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в отдельных образцах слёзной жидкости (собранной без стимуляции слёзопродукци) офтальмологически здоровых добровольцев пожилого возраста. Было установлено, что провоспалительные и противовоспалительные цитокины присутствуют в слёзной жидкости лиц указанной возрастной группы даже при отсутствии признаков поражения переднего отрезка глаза. Полученные данные могут служить основой для дальнейших мультицитокиновых исследований слёзной жидкости при различных заболеваниях органа зрения, что позволит углубить данные относительно их патогенеза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бржеский В. В., Сомов Е. Е. Роговично-конъюнктивальный ксероз. Издание 2-е. - СПб, 2003. - С. 157.
2. Ерёменко А. И., Янченко С. В. Эпидемиология синдрома сухого глаза у лиц пожилого возраста // Вестн. новых мед. технол. -2009. - Том XVI. - № 1. - С. 149-150.
3. Майчук Д. Ю. Патогенетическая роль воспаления в формировании вторичного сухого глаза // Современные методы диагностики в офтальмологии: Сборник научных статей. - М., 2006. - С. 412.
4. Cook E. B. Tear cytokines in acute and chronic ocular allergic inflammation // Cyrr Opin Allergy Clin Immunol. -- 2004. - Vol. 4. -P. 441-445.
5. Malvitte L., Montange T., Vejux A. et al. Measerment of inflammatory cytokines by multicytokine assay in tears of patients with glaucoma topically treated with chronic drugs // Br J Ophthalmol. -2007. - Vol. 91. - P. 29-32.
6. Nakamura Y., Sotozono C., Kinoshita S. Inflammatory cytokines in normal human tears // Curr Eye Res. - 1998. - Vol. 17. - № 6. -Р. 673-676.
7. Yoon K. C. et al. Interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in tears of patients with dry eye syndrome // Cornea. - 2007. -Vol. 26. - № 4. - P. 431-437.
Поступила 29.05.2009
Кубанский научный медицинский вестник № 4 (109) 2009
