CC BY
27
■■■■I I I I III + I ■■ ТП
Новости клеточных технологий
ЛИТЕРАТУРА:
1. Bergers G., Benjamin L. Tumorigenesis and the angiogenic switch. Nat. Rev. Cancer 2003; 3: 401-10.
2. Ellis L., Hicklin D. VEGF-targeted therapy: mechanisms of anti-tumour activity. Nat. Rev. Cancer 2008; 8: 579-91.
3. Gao D., Nolan D., Mellick A. et al. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lung metastasis. Science 2008; 319: 195-8.
4. Lyden D., Hattori K., Dias S. et al. Impaired recruitment of bone-marrow-derived endothelial and hematopoietic precursor cells blocks tumor angiogenesis and growth. Nat. Med. 2001; 7: 1194-201.
5. Nolan D., Ciarrocchi A., Mellick A. et al. Bone marrow-derived endothelial progenitor cells are a major determinant of nascent tumor neovascularization. Genes Dev. 2007; 21: 1546-58.
6. Hattori K., Dias S., Heissig B. et al. Vascular endothelial growth factor and angiopoietin-1 stimulate postnatal hematopoiesis by recruitment of vasculogenic and hematopoietic stem cells. J. Exp. Med. 2001; 193: 1005-14.
7. Zhang F., Hackett N., Lam G. et al. Green fluorescent protein selectively induces HSP70-mediated up-regulation of COX-2 expression in endothelial cells. Blood 2003; 102: 2115-21.
8. Perry S., Zhao Y., Nie L. et al. Id1, but not Id3, directs long-term repopulating hematopoietic stem-cell maintenance. Blood 2007; 110 (7): 2351-60.
Подготовили: B.C. Сергеев, И.Л. Плакса По материалам: Purhonen S., Palm J., Rossi D. et al. Bone marrow-derived circulating endothelial precursors do not contribute to vascular endothelium and are not needed for tumor growth. PNAS 2008; 150: 6620-5
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки в терапии острой РТПХ, резистентной к глюкокортикоидам: результаты II фазы клинических испытаний
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) - общепринятый метод терапии многих гематологических заболеваний [1, 2]. Одним из наиболее тяжелых осложнений данного метода является «реакция трансплантат против хозяина» (РТПХ). РТПХ обусловлена иммунной атакой тканей реципиента лимфоцитами донора. Для предотвращения РТПХ обычно применяются глюко-кортикоиды, результативность такой терапии составляет 30-50%. В остальных же случаях наблюдается острая резистентная к глюкокортикоидам РТПХ с неблагоприятным прогнозом [1, 3, 4].
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) костного мозга способны дифференцироваться в различные клетки мезенхимного происхождения, преимущественно в остеоциты, хондроциты и адипоциты [5]. ММСК необходимы для поддержания пролиферации и дифференци-ровки ГСК в костном мозге [6]. Естественное взаимодействие этих двух популяций навело на идею о том, что котрансп-лантация ГСК и ММСК должна быть по многим параметрам более эффективна, чем трансплантация только ГСК. В экспериментах на животных было показано, что при котран-сплантации ГСК и ММСК приживаемость трансплантата существенно повышается, не происходит реакции отторжения трансплантата или она менее выражена [6].
В экспериментах по ^культивированию ММСК с алло-генными лимфоцитами in vitro было показано, что ММСК не индуцируют их пролиферацию, секрецию IFN-у и продукцию провоспалительных цитокинов [7, 8]. Иммуномодулирующие свойства ММСК были продемонстрированы в экспериментах in vivo: показано, что внутривенные инъекции HLA-несовместимых ММСК увеличивают время жизни аллогенных кожных трансплантатов [9]. В то же время, в недавнем пилотном клиническом исследовании котрансплантации ММСК и ГСК, проведенном группой H. Ning было показано, что ММСК снижают риск развития и остроту РТПХ, но,
возможно, за счет своих иммуномодулирующих/иммуно-супрессивных свойств могут повышать вероятность рецидива основного заболевания [10].
В журнале Lancet была опубликована работа группы исследователей под руководством K. Le Blanc посвященная результатам II фазы мультицентровых клинических испытаний, в которых трансплантация аллогенных ММСК была проведена 55 пациентам с тяжелой резистентной к глюкокортикоидам РТПХ, развившейся после трансплантации ГСК (48 пациентов) либо аллогенных лимфоцитов (7 пациентов). У большинства пациентов наблюдалась РТПХ III и IV стадии с вовлечением в патологический процесс двух или трех органов. У 45 пациентов операции выполнены по поводу онкогематологических, а у 10 - незлокачественных гематологических заболеваний. Все пациенты проходили стандартные курсы терапии. В качестве профилактики РТПХ применялся циклоспорин в комбинации с метотрексатом либо микофенолат с мофетилом. Пяти пациентам, получившим трансплантации ГСК пуповинной крови, циклоспорин назначался в комбинации с преднизолоном. Ни один из пациентов из исследуемой группы не реагировал на иммуно-супрессивную терапию в течение семи или более дней.
Полным клиническим ответом на терапию ММСК считалось полное исчезновение симптомов РТПХ, частичным ответом - улучшение состояния пациента по крайней мере на одну степень РТПХ, стабильным считалось состояние без изменений, а прогрессией - ухудшение состояния пациента и дальнейшее прогрессирование РТПХ. ММСК для клеточной терапии были получены от HLA-совместимых, гаплоидентичных либо HLA-несовместимых доноров. Фенотип ММСК определялся как CD73+/CD90+/CD105+/ CD34-/CD45-/CD14-/CD3-. Количество трансплантируемых клеток варьировало от 0,6 до 9x106 клеток на кг веса пациента. Для трансплантации использовались клетки 2, 3 и 4 пассажей.
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том III, № 3, 2008
тттт
Новости клеточных технологий
Из 55 пациентов у 39 наблюдался положительный ответ на терапию ММСК, у большинства остальных наблюдалась прогрессия заболевания. Выживаемость в группе пациентов с полным клиническим ответом на терапию была значительно выше, чем в группе с частичным или негативным ответом на терапию (13% смертности в сравнении с 60% смертности в течение первых 100 сут. после трансплантации ММСК, и 37% смертности и 72% смертности соответственно в течение 1 года после трансплантации ММСК). Не было отмечено никаких токсических и других побочных эффектов трансплантации ММСК.
Степень реакции на терапию не различалась в группах пациентов с III и IV степенями РТПХ. В то же время, требуется более масштабное исследование, чтобы подтвердить либо опровергнуть предварительный вывод авторов о независимости ответа на клеточную терапию от степени РТПХ у пациентов. Среди пациентов исследуемой группы было 25 детей и 30 взрослых, по результатам данного исследования, ответ на терапию ММСК также не зависит от возраста реципиента, однако для статистического подтверждения либо опровержения данного тезиса требуется по крайней мере 80 пациентов (по 40 пациентов в каждой группе).
Работа K. Le Blanc и соавт. была направлена на оценку безопасности и эффективности применения трансплантаций ММСК при рефрактерной острой РТПХ. Авторы не ставили перед собой задачу оценить зависимость эффективности терапии от количества трансплантируемых клеток, однако отметили, что, с одной стороны, клинически выраженный результат наблюдался при трансплантации от 0,8x106 клеток на кг веса пациента, в то время как «доза» 9x106 клеток на кг веса пациента была неэффективна. Также было отмечено, что у одного из пациентов не наблюдалось улучшения состояния в ответ на первичную инъекцию ММСК в количестве 0,6x106 клеток на кг, однако в ответ на вторичную инъекцию этих клеток в количестве 2,0x106 клеток на кг веса произошло частичное исчезновение симптомов РТПХ. В то же время у 12 пациентов не наблюдалось никаких изменений течения РТПХ несмотря на повторные трансфузии ММСК. Причем в случае, когда нескольким реципиентам были трансплантированы ММСК от одного донора, отмечалась различная реакция реципиентов на клетки одного происхождения. Таким образом, ответ на терапию в целом можно назвать предсказуемым, но в то же время весьма индивидуальным.
flMTEPATyPA:
1. Blume K.G., Forman S.J., Appelbaum F.R., eds. Thomas' hematopoietic cell transplantation. Oxford: Blackwell Publishing; 2004.
2. Goldman J.M., Baughan A.S., McCarthy D.M. Marrow transplantation for patients in the chronic phase of chronic granulocytic leukaemia. Lancet 1982; 2: 623-5.
3. Storb R., Thomas E.D. Graft-versus-host disease in dog and man: the Seattle experience. Immunol. Rev. 1985; 88: 215-38.
4. Deeg H.J. How I treat refractory acute GVHD. Blood 2007; 109: 4119-26.
5. Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I., Frolova G.P. Heterotopic of bone marrow: analysis of precursor cells for osteogenic and hematopoietic tissues. Transplantation 1968; 6: 230-47.
6. Noort W.A., Kruisselbrink A.B., in't Anker P.S. Mesenchymal stem cells promote engraftment of human umbilical cord blood-derived CD34(+) cells in
NOD/SCID mice. Exp. Hematol. 2002; 30: 870-8.
7. Klyushnenkova E., Mosca J.D., Zernetkina V. T cell responses to allogeneic human mesenchymal stem cells: immunogenicity, tolerance, and suppression. J. Biomed. Sci. 2005; 12: 47-57.
8. Le Blanc K., Tammik L., Sundberg B., Haynesworth S.E., Ringd/n O. Mesenchymal stem cells inhibit and stimulate mixed lymphocyte cultures and mitogenic responses independently of the major histocompatibility complex. Scand. J. Immunol. 2003; 57: 11-20.
9. Bartholomew A., Sturgeon C., Siatskas M. Mesenchymal stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and prolong skin graft survival in vivo. Exp. Hematol. 2002; 30: 42-8.
10. Ning H., Yang F., Jiang M. et al. The correlation between cotransplantation of mesenchymal stem cells and higher recurrence rate in hematologic malignancy patients: outcome of a pilot clinical study. Leukemia 2008; 22: 593-9.
Подготовила А.С. Григорян
По материалам: Le Blanc K, Frassoni F, Ball L. et al. Mesenchymal stem cells for treatment of steroid-resistant, severe,
acute graft-versus-host disease: a phase II study. Lancet 2008; 371: 1579-86
Применение гемопоэтических клеток пуповинной крови для лечения сахарного диабета I типа
Сахарный диабет - это заболевание, характеризующееся хронической гипергликемией, развивающейся под влиянием наследственных и экзогенных факторов [1]. Согласно современной классификации, по механизму патогенеза выделяют инсулинзависимый (I типа), неинсулинзавивимый (II типа) и смешанный сахарный диабет [1].
Доля инсулинзависимого сахарного диабета в общей структуре заболевания составляет около 10%, при этом чаще страдают дети [2]. Пусковым механизмом для реализации генетической предрасположенности является воздействие на паренхиму поджелудочной железы биологических (вирусная инфекция), химических или физических факторов. Важную роль играет нарушение функций иммунной системы в виде расстройства противовирусной защиты, приводящие к развитию вирусной инфекции, повреждающей эндокриноциты поджелудочной железы, или в виде снижения активности CD4+CD25+ регуляторных Т-лимфоцитов, а также
В-лимфоцитов, макрофагов, дендритных клеток, что является основой аутоиммунного механизма заболевания [5].
Тактика лечения пациентов с сахарным диабетом I типа базируется на применении препаратов животного и человеческого инсулина в сочетании с регулярным мониториро-ванием уровня глюкозы в крови. Для предотвращения аутоиммунного повреждения паренхимы поджелудочной железы используется иммунносупрессивная терапия, которая неизбежно приводит к активизации оппортунистических инфекций и другим осложнениям. Так как выздоровление пациентов в настоящее время невозможно, то каскад метаболических нарушений, связанных с недостаточной секрецией инсулина, со временем приводит к развитию микро- и макроанги-опатий, расстройств со стороны нервной системы и другим осложнениям.
Из-за неудовлетворительных результатов современных методов лечения больных сахарным диабетом, а также
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том III, № 3, 2008
