CC BY
22
УДК 546.22:547.87:663.12
В. Р. Ахметова (д.х.н., проф., с.н.с.) Р. А. Зайнуллин2 (д.х.н., проф.), Н. С. Ахмадиев (к.х.н., м.н.с.) Э. К. Хуснутдинова (д.б.н., проф., зав. каф.) 3, Б. И. Ялаев (магистрант) 3, Р. В. Кунакова (д.х.н., проф., зав. каф.) 2
МУЛЬТИКОМПОНЕНТНЫЙ СИНТЕЗ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ГИДРОХЛОРИДОВ СУЛЬФАНИЛЗАМЕЩЕННЫХ АЗОЛОВ И ИХ РОСТОСТИМУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ В ОТНОШЕНИИ SACCHAROMYCES CEREVISIAE
1 Институт нефтехимии и катализа Российской академии наук, лаборатория гетероатомных соединений 450075, г. Уфа, проспект Октября, 141, тел.-факс (347) 2842750, e-mail: vnirara@mail.ru 2 Институт экономики и сервиса Уфимского государственного нефтяного технического университета,
кафедра специальной химической технологии 450078, г. Уфа, ул. Чернышевского, 145, тел.-факс (347) 2520532, e-mail: 5599032@mail.ru 3Башкирский государственный университет, кафедра генетики и фундаментальной медицины 450076, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32, тел/факс (347) 299671, (347) 2356088, e-mail: elzakh@mail.ru
V. R. Akhmetova1, R. A. Zainullin2, N. S. Akhmadiev1, E. K. Khusnutdinova3, B. I. Yalaev3, R. V. Kunakova2
MULTICOMPONENTE SYNTHESIS OF HYDROCHLORIDES OF SULPHANYL-SUBSTITUED AZOLES AND THEIR GROWTH-PROMOTING ACTIVITY IN RESPECT OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE
1 Institute of Petrochemistry and Catalysis of Russian Academy of Sciences 141, Oktyabrya Pr, 450075, Ufa, Russia; e-mail: vnirara@mail.ru 2 Ufa State Petroleum Technological University 145, Chernyshevskogo Str, 450078, Ufa, Russia; e-mail: 5599032@mail.ru
3Bashkir State University 32, Zaki Validi Str, 450076, Ufa, Russia; e-mail: elzakh@mail.ru
Осуществлен синтез гидрохлоридов 4,4'-[метан-диил-бис(сульфандиилметандиил)]бис(3,5-ди-метил-1Н-пиразола) и 4,4'[метандиилбис (сульфандиилметандиил)]бис(3,5 диметил-изоксазола)мультикомпонентной реакцией ацети-лацетона с СН2О и 1,2-этандиолом с последующим взаимодействием in situ с гидрохлоридами гидразина или гидроксиламина. Структура синтезированных соединений установлена методами ИК-, ЯМР- 1Н и 13С спектроскопии. Изучена ростостимулирующая активность синтезированных водорастворимых соединений на дрожжах Saccharomyces cerevisiae, продуцирующих этанол. Тестируемые соединения оценивали в дозировке 0.1; 0.2; 0.5 мг/100 мл сусла. Контроль осуществляли подсчетом количества дрожжевых клеток с использованием камеры Горяева и микроскопа.
Дата поступления 24.06.16
The synthesis of hydrochlorides of 4,4'-[methanediyl-bis(sulphandiilmethaendiil)] bis(3,5-dimethyl-1H-pyrazole) and hydrochloride 4,4'-[methanediil-bis(sulphandiilmethanediyl)] bis(3,5-dimethylisoxazole) was carried out by multicomponent reaction of acetylacetone with CH2O and 1,2-ethanediol, followed by reaction in situ with hydrochlorides of hydrazine or hydroxylamine. The structures of the synthesized compounds were established by spectroscopic IR, 1H and 13C NMR methods. The growth promoting activity of the synthesized water-soluble compounds with respect to the yeast Saccharomyces cerevisiae, which producing ethanol, was studied. Test compounds were evaluated in a dose of 0.1; 0.2; 0.5 mg/100 ml of mash. The control was carried out by counting the number of yeast cells using the camera Goryaeva and microscope.
Ключевые слова: ацетилацетон; водорастворимые аддукты с HCl; гидрохлорид 4,4'-[метан-диилбис(сульфандиилметандиил)]бис(3,5-ди-метил-1Н-пиразол); гидрохлорид 4,4'[метан-диилбис(сульфандиилметандиил)]бис(3,5-ди-метилизокса-зола; дрожжи Saccharomyces cerevisiae; СН-кислота; мультикомпонентный синтез; реакция тиометилирования; ростостиму-лирующая активность.
Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (госзадание №2014/484) и Гранта Республики Башкортостан молодым ученым и молодежным научным коллективам на 2016 г.
Недавно 1 нами было показано, что насыщенные К,5-гетероциклы, содержащие в ядрах атомы серы и азота в разных сочетаниях — N-(1,3,5-дитиазинан-5-ил)тиомочевина (1), 5-ацетилсалицилоил-1,3,5-дитиазинан (2), 1,3,5-тиадиазинан-4-тион (3) и 3,7-дитиа-1,5-диазабицикло[3.3.0]октан (4), проявляют рос-тостимулирующую активность в отношении дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Перспективными среди соединений 1—4 оказались 1,3,5-тиадиазин-4-тион (3) и 3,7-дитиа-1,5-ди-азабицикло[3.3.0]октан (4), содержащие в структуре конденсированные тиадиазоловые циклы.
о
А.
N-
H
)=S S I S
N 3
V-N-^v
Следует подчеркнуть, что это направление актуально для развития возобновляемых источников энергии растительного происхождения, а именно, использующих сельскохозяйственные и промышленные полисахаридные отходы путем сбраживания в биотопливо с помощью сахаромицетов. Важными задачами в этой области являются увеличение выхода биомассы, а также улучшение качества микроорганизмов с помощью синтетических стимуляторов роста 1 Учитывая биологическую активность у производных тиазола 1 , пиразола 2-6 и изокса-зола 7-11, представляет интерес возможность практического применения новых водорастворимых производных азолов в качестве ростос-тимуляторов сахаромицетов.
В продолжение исследований зависимости «структура—свойства» для библиотеки синтетических соединений-кандидатов с ростости-мулирующей активностью в отношении сахаромицетов, мы изучили синтез и свойства во-
Key words: acetylacetone; CH-acid; growth-promoting activity; hydrochloride 4,4"-[methanediyl- bis(sulphandiilmethaendiil)] bis (3,5-dimethyl-1H-pyrazole); hydrochloride 4,4"-[methanediil-bis(sulphandiilmethanediyl)]-bis(3,5-dimethylisoxazole); multicomponent synthesis; the yeast Saccharomyces cerevisiae; thiometyilation reaction; water-soluble adducts with HCl.
This work was financially supported by the Ministry of Education and science of the Russian Federation (state task №2014/484) and Grant Republic of Bashkortostan for young scientists and youth research teams in 2016 year.
дорастворимых аддуктов азоловых гетероцик-ловс HCl.
С целью синтеза целевых продуктов осуществлен мультикомпонентный синтез гидрохлоридов бис-азолов, линейно связанных ал-килсульфанильной цепью, на основе реакции каталитического тиометилирования ацетилаце-тона 5 с СН20 и 1,2-этандиолом и последующим in situ взаимодействием продуктов реакции с гидрохлоридами гидразина или гидро-ксиламина 12 с образованием аддуктов — 4,4'-[метандиил-бис(сульфандиилметандиил)]бис-(3,5-диметил-1Н-пиразола) (7) и 4,4'-[метан-диил-бис(сульфандиилметандиил)]бис(3,5-ди-метилизоксазола) (8) с HCl.
В задачу данный работы входило также изучение ростостимулирующей активности вышеуказанных водорастворимых аддуктов к дрожжам Saccharomyces cerevisiae — сахаромицетам, продуцирующим этанол.
Материалы и методы исследования
Для синтеза гидрохлоридов 4,4'-[метанди-ил-бис(сульфандиилметандиил)]бис(3,5-диме-тилизоксазола) (7) и 4,4'-[метандиил-бис(-сульфандиилметандиил)]бис(3,5-диметил-1^-пиразола) (8) использовали коммерчески доступные исходные соединения чистотой >98% (Acrosorganics и Sigma Aldrich).
Синтез водорастворимых гидрохлоридов 7, 8. К реакционной смеси, полученной из 1.0 мл (10 ммоль) ацетилацетона 5 по методике 12, не выделяя промежуточный сульфа-нилзамещенный бис-дикетон 6, небольшими порциями добавляли 1.15 г (11 ммоль) NH2NH2-2HCl или 0.76 г (11 ммоль) NH2OH-HCl. Смесь перемешивали при 60 оС в течение 2 ч. Далее реакционную массу охлаждали, упаривали на роторном испарителе, про-
S
N
S
S
1
2
4
мывали твердый остаток хлороформом (1x5 мл) и сушили на воздухе.
4,4'[Метандиил-бмс(сульфандиилметан-диил)]бис(3,5-диметилизоксазол)гидрохло-
рид (7). Белое кристаллическое вещество, выход 0.35 г (90 %), т. пл. 144-146 °С. ИК спектр, v, см-1:1694, 1193, 1038, 882, 770, 722. Спектр ЯМР *Н (400 МГц, ДМСО-D^, 5, м. д.: 2.18 (с, СН3), 2.31 (с, СН3), 2.62 (с, SCH2CH2S), 3.58 (с, 1г-СН2-Б), 10.10 (уш. с, НС1). ЯМР 13С (400 МГц, ДМСО-D^, ?, м. д.: 10.10 (СН3), 10.92 (СН3), 22.75 (Iz-СН2-S), 31.20 (SCH2CH2S), 111.23 (C-4,13), 159.71 (CO), 166.21 (C-N).
4,4'-[Метандиил-бмс(сульфандиилме-тандиил)]бмс(3,5-диметил-1Н-пиразол)-4ЫС1 (8). Светло-желтое вещество, выход 0.18 г (47 %), т. пл. 194-197 оС. ИК спектр, v, см-1: 3439, 1591, 1280, 1031, 810, 724. Спектр ЯМР (400 МГц, D2O), 5, м. д.: 2.29 (с, СН3), 2.69 (с, SCH2CH2S), 3.63 (с, Pz-СН2-S), 9.24 (уш. с, НС1). Спектр ЯМР 13С (500 МГц, D2O), 5, м. д.: 8.87 (СН3), 22.47 (Pz-СН2-S), 30.93 (SCH2CH2S), 114.83 (C-4,13), 144.11 (C-N).
Методика тестирования ростостимулирующей активности синтезированных соединений
В работе использовали штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae расы 717 для получения этилового спирта, полученный из коллекции ВНИИПБТ (Москва). Для культивирования Saccharomyces cerevisiae в качестве питательной среды использовали солодовое сусло. Дрожжевую разводку готовили, исходя из расчета 0.1 г дрожжей на 100 мл питательной среды, разливали для культивирования в конические колбы в одинаковом объеме. Путем последовательных разведений готовили растворы тестируемых соединений и вносили их в среду, содержащую Saccharomyces cerevisiae. Тестируемые соединения оценивали в дозировке 0.1; 0.2; 0.5 мг/100 мл сусла.
Контроль — ячменное солодовое сусло без добавления химических соединений. Дрожжи инкубировали в термостате при 25 0С до стационарной фазы роста. Через каждые 12 ч подсчитывали количество живых и погибших клеток с использованием камеры Горяева и светового микроскопа Микмед-5 (ЛОМО, Россия) с комплексом визуализации ТСА-3.0 С. Также оценивали морфологические характеристики дрожжей — внешний вид клеток, состояние клеточной стенки и просматриваемых в цитоплазме органелл. Размер клеток оценивали с
помощью окуляр-микрометра. Для анализа оценивали не менее 3000 клеток. Статистическую значимость между вариантами оценивали с помощью i-критерия Стьюдента при доверительной вероятности 0.95. Повторность экспериментов трехкратная.
Результаты и их обсуждение
Мультикомпонентный синтез гидрохлоридов 4,4 ' -[метандиил-бмс(сульфандиилметан-диил)]бмс(3,5-диметилизоксазола) (7) и 4,4'-[метандиил-бмс(сульфандиилметандиил)]-бмс(3,5-диметил-1Н-пиразола) (8) осуществляли реакцией тиометилирования ацетилаце-тона 5 под действием смеси формальдегида и 1,2-этандитиола (2:1) в присутствии 5% мол. NiCl2- 6H2O с последующим введением гидрохлоридов гидразина или гидроксиламина в реакционную смесь. В результате осуществлялась конденсация двух молекул дикетона 5, с двумя молекулами формальдегида и молекулой дитиола по а-положению СН-кислоты, и далее промежуточный бмс-дикетон 6 подвергался гете-роциклизации по карбонильным группам под действием гидрохлоридов 1, 2-динуклеофилов — NH2OH-HCl или NH2NH2-2HCl (схема).
Структура синтезированных соединений подтверждена данными ИК-, ЯМР-1Н и 13С спектроскопии.
Оценку биологической активности соединений 7,8 проводили на тест-объекте Saccharomyces cerevisiae. Эти дрожжи часто применяются в биологических исследованиях в качестве модельной системы в связи с широким распространением, удобством культивирования и быстрым ростом клеток, в том числе и для токсикологической оценки поллютантов ок-
14
ружающей среды .
Следует отметить, что в литературе мы обнаружили лишь одну публикацию, в которой была исследована антимикробная активность тетрагидротиадиазинтионов — структурных аналогов синтезированных нами соединений — с использованием в качестве тест-объекта различных микроорганизмов, в том числе Saccharomyces cerevisiae 15.
На рис. 1 представлена зависимость общего количества дрожжей от продолжительности брожения в присутствии соединения 7. По характеру зависимостей можно сказать, что соединение явно проявляет стимулирующую активность во всех концентрациях. Но наиболее выраженная стимулирующая активность проявляется на 2-е сутки при концентрации препарата 7, равной 0.001 г/100 мл: по сравнению с
контролем количество клеток дрожжей увеличивается почти в 2 раза.
На рис. 1 представлена зависимость общего количества дрожжей от продолжительности брожения в присутствии соединения 7. По характеру зависимостей можно сказать, что соединение явно проявляет стимулирующую активность во всех концентрациях. Но наиболее выраженная стимулирующая активность проявляется на 2-е сутки при концентрации препарата 7, равной 0.001 г/100 мл: по сравнению с контролем количество клеток дрожжей увеличивается почти в 2 раза.
о о
1 1 + сн2о + / \
Ме^^^Ме 2 Ш 8Н
Ме
N
о^
Ме
На рис. 2 изображены кривые зависимости общего количества почкующихся дрожжей в зависимости от продолжительности брожения в присутствии соединения 7. Характер зависимостей подтверждает наличие эффекта стимуляции дрожжей и увеличения количества почкующихся дрожжей при брожении в присутствии соединения 7 при всех концентрациях, которые использовались в эксперименте. Из рисунка видно, что максимальное количество почкующихся клеток дрожжей наблюдается при концентрации 0.00001 г/100 мл на вторые сутки.
Ме
Ме
Ме Ме
8 8
Ме
У
Ме
■ 2НС1
6
КН2ЫН2. 2НС1
Ме
N НЫ^
Ме
Ме
-ЫН I
Ме
■4НС1
Схема
Время, сут
Рис. 1. Зависимость общего количества дрожжевых клеток от продолжительности брожения в присутствии соединения 7
5
ЫН2ОН НС1
7
8
я
с
X
^
9
у V о
т
п е
1= ^ V
о X
ш п
т т
с е
е *
*
о
п р
V
е
е
ю
О
контрольная
ОД
0,01
0,001
0,0001
0,00001
Время, сут
Рис. 2. Зависимость общего количества почкующихся дрожжей от продолжительности брожения в присутствии соединения 7
Время, сут
Рис. 3. Зависимость общего количества дрожжей в сусле от продолжительности брожения при добавлении в него соединения 8
я с
х ^
2
е е
\о О
контрольная
ОД
0,01
0,001
0,0001
0,00001
Время, сут
Рис. 4. Зависимость количества почкующихся клеток дрожжей продолжительности брожения в присутствии соединения 8
Наибольший рост числа клеток дрожжей обнаруживается на 2-е сутки культивирования, затем на 3-4-е сутки культивированияиде-тих убывание. При этом активность роста числа клеток увеличивается с уменьшением дозы препарата 7. Рост числа почкующихся дрожжей превышает почти в 2 раза аналогичный показатель в контрольном опыте. Максимум количества мертвых клеток при концентрации препарата 0.001 г/100 мл приходится на 5-е сутки.
На рис. 3 представлена зависимость общего количества дрожжей от продолжительности брожения в присутствии соединения 8. Из графика следует, что активность стимуляции дрожжей испытуемым соединением усиливается с уменьшением концентрации препарата 8,
при этом можно говорить об отсутствии угнетения дрожжей, так как при любой концентрации препарата общее количество дрожжей выше, а их максимум наблюдаются на сутки раньше, чем в контрольном опыте.
На рис. 4 представлена зависимость количества почкующихся дрожжей в период брожения в присутствии соединения 8 в сусле. Из рисунка видно, что наибольшее количество почкующихся дрожжей наблюдается на вторые сутки брожения с минимальной концентрацией препарата — 0.00001 г/100 мл сусла.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о выраженном стимулирующем действии соединения 7 на рост дрожжей Saccharomyces cerevisiae.
Литература
1. Ахметова В. Р., Зайнуллин Р. А., Хайруллина Р. Р., Хабибуллина Г. Р., Кунакова Р. В. Одно-реакторный синтез и ростостимулирующая активность в отношении Saccharomyces cerevisiae насыщенных N^-гетероциклов // Баш. хим. ж.- 2014.- Т. 21, №4.- С. 143-149.
2. Yamamoto T., Muto K., Komiyama M., Canivet J., Yamaguchi J., Itami K. Nickel^atalyzed C—H arylation of azoles with haloarenes: scope, mechanism, and applications to the synthesis of bioactive molecules // Chem. Europ. J.— 2011.— V. 17, №36.- P. 10113-10122.
3. Edward D., Keith J., Paul B.A., Martin D.J., Paul W. Discovery and development of pyrazole-scaffold Hsp90 inhibitors // Curr. Top. Med. Chem.- 2006.- V. 6, №11.- P. 1193-1203.
4. Yerragunta V., Suman D., Swamy K., Anusha V., Patil P., Naresh M. Pyrazole and its biological activity. // Pharma Tutor Magazine.- 2014.-V. 2, №1.
5. Alam Md. J., Alam O., Alam P., Naim M. J. Review on pyrazole chemical entity and biological activity // IJPSR.- 2015.- V. 6, №12.-P. 1433-1442.
6. Jamwal A., Javed A., Bhardwa V. A review on pyrazole derivatives of pharmacological potential. // J. Pharm. Bio. Sci.- 2013.- V. 3.- P. 114123.
7. Гаренко А. В., Хлебников А. Ф., Новиков М. С., Пакальнис В. В., Ростовский Н. В. Последние достижения химии изоксазола // Успехи химии.- 2015.- Т. 84, №4.- С. 335-377.
8. Kumar K. A., Jayaroopa P. Isoxazoles: molecules with potential medicinal properties. // IJPCBS.- 2013.- V. 3(2).- P. 294-304.
9. Rajput S. S., Patel S. N., Jadhav N. B. Isoxazole - a basic aromatic heterocycle: synthesis, reactivity and biological activity // Int. J. Chem. Tech. Res.- 2015.- V. 8(7).- P. 297-317.
10. Ruthu M., Pradeepkumar Y., Madhusudha-nachetty C., Prasanthi G., Jaya Sankar Reddy V. Pharmacological activities of isoxazole derivatives // J. Global Trends Pharm. Sci.-2011.- V. 2, №1.- P. 55-62.
References
1. Akhmetova V. R., Zainullin R. A., Khairullina R. R., Khabibullina G. R., Kunakova R. V. Odnoreaktornyi sintez i rostostimuliruyushhaya aktivnost' v otnoshenii Saccharomyces cerevisiae nasyshhennykh N,S-geterotsiklov [One-pot synthesis of saturated N,S-heterocycles and their growth-promoting activity in respect of Saccharomyces cerevisiae], Bashkirskii khimi-cheskii zhurnal, 2014, vol. 21, no. 4, pp. 143-149.
2. Yamamoto T., Muto K., Komiyama M., Canivet J., Yamaguchi J., Itami K. [Nickel-catalyzed C— H arylation of azoles with haloarenes: scope, mechanism, and applications to the synthesis of bioactive molecules]. Chem, Europ, J,, 2011, vol. 17, no. 36, pp. 10113-10122.
3. Edward D., Keith J., Paul B.A., Martin D.J., Paul W. [Discovery and development of pyrazole-scaffold Hsp90 inhibitors]. Curr,Top, Med, Chem., 2006, vol. 6, no. 11, pp. 1193-1203.
4. Yerragunta V., Suman D., Swamy K., Anusha V., Patil P., Naresh M. [Pyrazole and its biological activity]. Pharma Tutor Magazine, 2014, vol. 2, no. 1.
5. Alam Md. J., Alam O., Alam P., Naim M. J. [Review on pyrazole chemical entity and biological activity]. IJPSR, 2015, vol. 6, no. 12, pp. 1433-1442.
6. Jamwal A., Javed A., Bhardwa V. [A review on pyrazole derivatives of pharmacological potential]. J, Pharm, Bio, Sci,, 2013, vol. 3, pp. 114-123.
7. Galenko A.V., Khlebnikov A. F., Novikov M.S., Pakalnis V.V., Rostovskii N.V. Poslednie dostizheniya khimii izoksazola [Recent advances in isoxazole chemistry]. Russ, Chem, Rev, (Eng, Transl,), 2015, vol. 84, no 4, pp. 335-377.
8. Kumar K.A., Jayaroopa P. Isoxazoles: molecules with potential medicinal properties. IJPCBS, 2013, vol. 3 (2), pp. 294-304.
9. Rajput S. S., Patel S. N., Jadhav N. B. [Isoxazole — a basic aromatic heterocycle: synthesis, reactivity and biological activity]. Int, J, Chem, Tech, Res,, 2015, vol. 8, no. 7, pp. 297-317.
11. Manna K., Banik U., Ghosh P. S., Das M. A review on synthesis and pharmacological diversity of isoxazoles and pyrazolines // Nirma Univ. J. Pharm. Sci.- 2014.- V. 1(1).- P. 37-49.
12. Ахметова В. P., Ахмадиев H. С., Мещерякова Е. С., Халилов Л. М., Ибрагимов А. Г. Многокомпонентный синтез и биологическая активность (сульфанилалкил)-замещенных азагете-роциклов // ХГС.- 2014.- №5.- С. 806-815.
13. Akhmetova V. R., Akhmadiev N. S., Starikova Z. A., Tulyabaev A. R., Mescheryakova E. S., Ibragimov A.G. Catalytic multicomponent thiomethylation of aliphatic 1,3-diketones as efficient one-pot synthesis of novel bis( 1, 3-diketone-2-ylmethylsulphanyl)alkanes // Tetrahedron.- 2015.- V. 71, №40.- P. 7722-7728.
14. Fai P. B., Grant A. A comparative study of Saccharomyces cerevisiae sensitivity against eight yeast species sensitivities to a range of toxicants // Chemosphere.- 2009.- V. 75, №3.- P. 289296.
15. Pat. № 3946006 USA / Eggensperger H., Diehl K.-H. Tetrahydrothiadiazinethiones // 1976.
10. Ruthu M., Pradeepkumar Y., Madhusudhana-chetty C., Prasanthi G., Jaya Sankar Reddy V. [Pharmacological activities of isoxazole derivatives]. J. Global Trends Pharm. Sci., 2011, vol. 2, no. 1, pp. 55-62.
11. Manna K., Banik U., Ghosh P. S., Das M. [A review on synthesis and pharmacological diversity of isoxazoles and pyrazolines]. Nirma Univ. J. Pharm. Sci., 2014. vol. 1 (1), pp. 37-49.
12. Akhmetova V. R., Akhmadiev N. S., Mescheryakova E. S., Khalilov L. M., Ibragimov A. G. Mnogokomponentnyi sintez i biologicheskaya aktivnost' (sul'fanilalkil)-zameshhennykh aza-geterotsiklov [Multicomponent synthesis and biological activity of (sulfanylalkyl)-substituted azaheterocycles]. Chem. Heterocyclic Comp. (Eng. Transl. ),2014, vol. 50, no. 5, pp. 742-751.
13. Akhmetova V. R., Akhmadiev N. S., Starikova Z. A., Tulyabaev A. R., Mescheryakova E. S., Ibragimov A. G. [Catalytic multicomponent thiomethylation of aliphatic 1,3-diketones as efficient one-pot synthesis of novel bis(1,3-diketone-2-ylmethylsulphanyl)alkanes]. Tetrahedron, 2015, vol. 71, no. 40, pp. 77227728.
14. Fai P. B., Grant A. [A comparative study of Saccharomyces cerevisiae sensitivity against eight yeast species sensitivities to a range of toxicants]. Chemosphere, 2009, vol. 75, no. 3, pp. 289-296.
15. Eggensperger H., Diehl K.-H. [Tetrahydrothiadiazinethiones]. Patent USA no. 3946006, 1976.
