CC BY
10
гепатоцитов наряду со снижением числа двуядер-ных клеток можно рассматривать также как результат полиплоидизации, о чем свидетельствуют морфологические исследования при воздействии четыреххлористого углерода, обнаружившие снижение числа двуядерных гепатоцитов при одновременном увеличении количества одноядерных полиплоидных клеток [2].
Гепатогенное действие картолина-2 проявляется также при многократном воздействии более низких доз. В условиях подострого эксперимента препарат вызывает снижение содержания, нарушение структуры и характера распределения гранул РНК в печени подопытных животных, что указывает на нарушение белкового обмена в этом органе. Хроническое воздействие технической формы картолина-2 приводит к развитию очаговой жировой дистрофии и снижению гистохимических показателей печени у части подопытных животных (доза '/юо Ь05о). Более выраженные гистопатологические изменения в печени (липидная инфильтрация, снижение содержания гликогена, РНК) отмечены при хроническом воздействии препаративной формы картолина-2 (дозы '/юо И '/юоо Ь05о).
Полученные данные позволяют считать недействующими дозы: для технической формы карто-лина-2 4 мг/кг, для препаративной — 0,49 мг/кг.
Л и т е р а т.у р а • ,
1. Автандилов Г. Г. Проблемы патогенеза и патологической диагностики болезней в аспектах морфометрии.— М., 1984.— С. 41. . .
2. Бонашевская Т. И., Беляева Н. И., Купман II. Б., Пана-сюкЛ. В. Морфофункциональные исследования в гигиене.-— М„ 1984.— С. 65.
3. Вредные вещества в промышленности / Под ред. Н. В. Лазарева, Э. Н. Левиной.— Л., 1976.— Т. 2.— С. 63—76.
4. Логинов А. С., Аруин Л. И. Клиническая морфология печени.— М„ 1985.— С. 35.
5. Маковская Е. И. Патологическая анатомия отравлений ядохимикатами.— М., 1967.— С. 271—282.
6. Саркисов Д. С., Пальцын А. А., Втюрин Б. В. Электронно-микроскопическая авторадиография клетки.— М., 1980.
7. Саркисов Д. С. Очерки но структурным основам го-меостаза.— М., 1977.— С. 119.
8. Хесин Я. Е. Размеры ядер и функциональное состояние клеток.— М., 1967.— С. 141.
9. Hornboll P., Olsen Т. S. // Acta path, microbiol. scand.— 1982,— Vol. 90,— P. 199—205.
Поступила 27.04.89
I . ' Г I Jt * - ™ I % •
Sum тагу. Lipid distrophy, rapid reduction of RNA and glycogen content in the liver of all experimental rats, developing as a result of acute kartolin-2 poisoning testify to an expressed hepatotropic effect of the substance. Alongside with the processes of parenchymal liver cell damage the signs of intracellular regenerating processes — increase of the size of hepatocytes nuclea are detected. Liver protein metabolism disturbances are observed following exposure to kartolin-2 in the acute experiment. Chronic exposure to kartolin-2, and, specifically to its preparation form in the dose '/1oo LD5o cause lipid infiltration, reduction of histoche-mical indicators of liver glycogen, and RNA content. No-effect doses of kartolin-2 have been determined.
CX • 1 • * ♦ . 4 ' / • - 4 i,: . L- '*> : . . i • % \ • • I
Jl. А. РАДКЕВИЧ, H. Э. ПЫНЬКО, 1990
УДК 616.36-099-02:615.917:547.262 + 615.917:547.2621.099:616.36
Л. А. Радкевич, Н. Э. Пынько МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ГЕПАТОТОКСИЧЕСКОГО ЭФФЕКТА ЭТАНОЛА
I ^ « Г '"I С I > ' Ъ • 'It I . •* « у • | ' I ■ л | < % > •
НИИ технологии и безопасности лекарственных средств, п/о Старая Купавна Московской обл.
Печень крысы как центральная система детокси-кации служит объектом постоянного изучения в токсикологических экспериментах [1]. Осуществляя процессы метаболизма ксенобиотиков, гепато-циты являются мишенью действия как самих ве-
функциональной гетерогенности различных долей печени крыс. Так, установлены неоднозначные из-
ществ, так и в большей степени их реакционно-способных радикалов.
Особенность строения печени крысы заключается в ее многодольчатости: в литературе указывается на наличие в печени крыс от 4 до 6 долей. Аналогичное строение имеет печень мышей, кроликов, кошек, собак [2]. В печени крыс выделяют правые внутреннюю и боковую, левые внутреннюю и боковую, добавочную и хвостатую доли. Самая объемная из них — правая боковая, несколько меньшие размеры имеет левая внутренняя доля.
В экспериментальных исследованиях при изучении реакции печени для анализа обычно берут кусочки одной из долей, чаще левой. Нередко в опубликованных работах вообще не указывается доля, из которой взят кусочек ткани. *
Вместе с тем имеются физиологические, биохимические и морфологические данные о структурно-
менения показателей массы разных долей печени, оставшихся после резекции правой внутренней и левой боковой долей, что свидетельствует о дифференцированном влиянии их на регенерационные способности тех или других зон печени [5]. Обнаружено [4], что резекция правых или левых долей печени у собак сопровождается неодинаковой степенью нарушения желчевыделительной функции и свертываемости крови. Выявлены различия активности инсулиназы по долям [3]. Единичные морфологические работы свидетельствуют о различиях в реакциях долей печени на токсические воздействия. При ингаляции четыреххлористого углерода выявлена большая повреждаемость правых долей печени, а при воздействии нитрозодиметиламина—левых [6].
Приведенные данные указывают на необходимость дифференцированного подхода к оценке ге-патотоксичности ксенобиотиков с учетом исследуемых долей печени.
Цель настоящей работы — сравнительный ана-
Морфометрические показатели гепатотоксического действия этанола (М^т)
% • Показатель ' 1 Контроль • % с Опыт
левая доля правая доля . левая доля правая доля
~ * #
Объемная доля, %: гепатоцитов синусоидов
лимфоидных инфильтратов сосудов
Число неповрежденных ядер, %
Число гепатоцитов с неповрежденной цитоплазмой, %: центр дольки периферия дольки
89,2±0,8
8,9±0,6 0,8±0,1 1,1 ±0,4
64,5± 1,6
49,64=3,3 47,8=4=3,1
93 ±0,6* 4,7±0,3* 0,9±0,4 1,4±0,5 67,24=2,2
50,1н=5,5 47,6+3,9
89,8±0,8 8,2±0,7 1,1 ±0,3 0,9±0,3 64,1 =4= 1,2
25,7±3,1 24,6±3,6
87,5±0,7** 10,7±0,7** 0,8±0,2 1,0±0,2 57,6=4= 1,6
20,6±3,0 25,4=1=3,1
Примечание. Одна звездочка — достоверные различия по сравнению с показателями левой доли печени живот ных той же. группы (р<0,05); две — с показателями правой доли печени в контроле (р<0,05).
лиз ряда морфометрических показателей в левой и правой латеральных долях печени и оценка изменений, этих показателей в условиях этаноль-ной интоксикации.
Исследования проведены на беспородных белых крысах-самках массой 250—300 г. Подопытные животные в течение 7 мес получали в поилках вместо воды 10 % раствор этанола. Контрольная группа животных находилась в аналогичных условиях и получала питьевую воду без этанола..; Всех крыс содержали на стандартном рационе. В каждой группе было по 10 животных. Крыс за-1 бивали методом декапитации после предваритель-.' ного усыпления эфиром. Непосредственно после эвтаназии кусочки печени, взятые из правой и левой латеральных долей, фиксировали и готовили гистологические препараты по общепринятой методике. Объемную долю гепатоцитов, синусоидов, лимфоидных инфильтратов и сосудов определяли путем-наложения на анализируемый срез морфо-'. метрической сетки с последующим подсчетом процента попадания узлов сетки на указанные гистологические структуры. Аналогично определяли объемную долю нормальных и поврежденных! ядер. Подсчет гепатоцитов с неповрежденной цитоплазмой осуществляли в центролобулярных и перипортальных отделах печеночной дольки путем определения процента гепатоцитов с поврежденной и неповрежденной цитоплазмой в 20 полях зрения при увеличении микроскопа1 10X40. Количество двуядерных клеток, клеток ре-тикулоэндотелиальной системы (РЭС) и безъ-; ядерных клеток определяли путем подсчета среднего числа клеток на единицу площади тканевого среза в 20 полях зрения при том же увеличении.
Анализируя морфометрические показатели, представленные в таблице, можно видеть их различия в левой и правой долях печени интакт-ных крыс. В левой доле число гепатоцитов на единицу площади меньше, что, по-видимому, связано с некоторым превалированием объема клеток. В этой доле число синусоидов в 2 раза выше,- чем в правой. Указанные различия между долями, возможно, связаны с неодинаковыми
условиями кровоснабжения. Остальные показате-. ли (объемная доля сосудов, лимфоидных инфильтратов, нормальных ядер и число гепатоцитов с неповрежденной цитоплазмой) в исследуемых долях печени не различаются. При дифференцированном морфометрическом анализе с учетом зон печеночных долек достоверных различий морфометрических показателей в центре и периферических (перипортальных) отделах печеночных долек не установлено, кроме количества клеток РЭС. Данный показатель выше в периферических отделах печеночных долек, чем в центре. Эта тенденция отчетливо прослеживается в левой и правой латеральных долях.
Изучение гепатотоксического действия этанола показало снижение доли гепатоцитов с сохраненной структурой цитоплазмы как в левой, так и в правой латеральных долях. Максимальные изменения этого показателя выявлены в центролобулярных отделах печеночных долек правой доли. В обеих долях снижается число двуядерных гепатоцитов, по-видимому, в связи с использованием их как пластического и, генетического материала для образования одноядерных клеток более высокой плоидности. Статистически значимо возрастает содержание клеток РЭС с преобладанием сдвигов в правой доле печени. Ряд показателей изменяется только в правой доле. В ней в условиях этанольной интоксикации плотность расположения синусоидов на единицу площади увеличивается в 2 раза, снижается процент ядер с сохраненной структурой.
Результаты исследований свидетельствуют о различии ряда показателей в левой и правой латеральных долях печени, о более выраженном токсическом действии этанола на правую латеральную долю печени по сравнению с левой, что следует учитывать при изучении гепатотоксического эффекта веществ.
« 4 л^Ж { • * > $л , * а г* ». « 1 , _ ' ^ л • ' А*!* _ •
' V « * " ' - - Л ^ г , ' * I уСдЯщЗ0 • . Т I • • Т 4 *
* \ 4 г. • • * • • , ' Ч * * * " ) + • ^ * 1 г*
Литература
Л * ' рЛ * ' ^ й* ' Ч . ь I" . ^ % 1 9 ' ^
1. Боншиевская Т. И., Беляева И. Н. Морфофункциональные
исследования в гигиене.— М., 1984.
2. Западнюк И. П., Западнюк В. И., Захария Е. А. Лабо-
раторные животные: Разведение и содержание в эксперименте.— 2-е изд.— Киев, 1974.
3. Караев А. И., Кадыров И. А. // Докл. АН АзССР.— 1967.— Т. 23, № 3.— С. 50—52.
4. Солопаев Б. П. Регенерация нормальной и патологически измененной печени.— Горький, 1980.
5
6
Грефилов А. Б., Березкина И. А., Физиол. журн. СССР.— 1986.— Т. 1438.
Lawson Т. АPound A. W. // Brit.
Vol. 55, N 6.— P. 583—588.
Рубинштейн A. Jl. // 72, № 10.— С. 1435—
J. exp. Path.— 1975.—
Поступ ила 12.10.88
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК 616.1 /.8-007.1-02:614.71-07
Н. Я. Литвинов, В. И. Казачков, Л. Ф. Астахова, 3. М. Гасимова
КОМБИНИРОВАННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭМБРИОТОКСИЧЕСКИХ И ТЕРАТОГЕННЫХ
ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ (обзор)
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
В реальных условиях на человека воздействует огромный комплекс химических, физических, биологических факторов окружающей среды антропогенного и естественного происхождения, причем это воздействие в ряде случаев происходит на фоне уже имеющихся генетических нарушений.
Высокая частота возникновения различной патологии репродуктивной функции женщин, незначительное число химических соединений, классифицированных как тератогены для человека [1, 45], уже не позволяют, по нашему мнению, считать достаточной оценку эмбриотоксической или тератогенной опасности какого-либо химического вещества при его изолированном поступлении в организм. Только изучение комплексного, комбинированного действия химических факторов окружающей среды на репродуктивную функцию дает возможность приблизиться к реальной ситуации и оценить фактическую нагрузку этих факторов на организм.
Эпидемиологические исследования подтверждают зависимость частоты развития различных нарушений репродуктивной функции у женщин, работающих на производстве в разных отраслях промышленности и сельского хозяйства или проживающих в условиях населенных мест с различной степенью химического загрязнения атмосферы, воды и почвы [2], от воздействия именно комплекса химических соединений. Так, например, органические растворители (ароматические, алифатические и галогенизированные углеводороды и др.) повышали частоту рождения детей с аномалиями развития мочеполовой системы, желудочно-кишечного тракта, ЦНС и сердечно-сосудистой системы, а также частоту спонтанных абортов у контактирующих с ними женщин [23, 26, 35, 48]. У работниц производства минеральных удобрений, подвергающихся влиянию комплекса химических соединений, наблюдалось достоверное повышение частоты прерывания беременности [3]. Лишь аварии на химических заводах в городах Севезо и Бхопал позволили выявить достоверную зависимость частоты «спонтанных» абортов и рождения детей с порока-
ми развития от изолированного действия конкретных химических веществ — тетрахлордибенз-п-ди-оксина (Севезо) и метилизоцианата (Бхопал) [33,50], что подтверждается данными экспериментальных исследований с использованием этих химических соединений [31, 37, 46].
Значительная часть исследований по изучению действия комбинаций различных химических соединений на репродуктивную систему самок экспериментальных животных направлена на поиск химических веществ, снижающих или предотвращающих эмбриотоксическое или тератогенное действие химических факторов, обладающих ранее доказанными и выраженными свойствами поражать репродуктивную систему. В качестве таких веществ обычно использовали различные соли кадмия, свинца, метилртуть.
В настоящее время как на различных видах и линиях экспериментальных животных, так и с использованием органных и тканевых культур установлен ряд химических соединений, снижающих эмбриотоксический или тератогенный эффект, индуцированный кадмием, свинцом, метилртутью, никелем, циклофосфамидом и некоторыми другими химическими веществами: селен [11, 29, 38, 39, 43], цинк [4, 7, 19, 40], глутатион [47]; а-трип-тофан [30], аскорбиновая кислота [17], хлорид кальция [8]. Указанные вещества ослабляли степень тяжести или полностью предотвращали аномалии развития эмбрионов, ускоряли темпы роста потомства, развития у них рефлексов и т. д.
К данной группе исследований наиболее близки экспериментальные работы по изучению механизмов действия химических соединений, используемых как антидоты при острых и хронических^ отравлениях, вызванных главным образом кадмием и. ртутью. Наиболее эффективными из исследованных антидотов оказались тиоловые соединения и некоторые другие химические вещества из различных групп: диэтилкартамат [12, 22, 27], соли этилендиаминтетрауксусной кислоты [14], эрготионеин [34], меркапто-(3-(2-фурил) акриловая кислота [18], кадмий-метал-лотионеин (эндогенное соединение) [13,25].
