CC BY
293
Em&jSfc
УДК 581.4:582.711.714
морфолого-анатомическое исследование плодов рябины черноплодной
А.в. Егорова, в.А. Куркин, в.М. рыжов, л.в. Тарасенко,
Т.в. рязанова, Е.в. Каллина, ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Росздрава»
Куркин Владимир Александрович - e-mail: [email protected]
Изучены анатомо-морфологические свойства плодов рябины черноплодной, или аронии [Aronia melano-carpa (Michx.) Elliott]. Установлены характерные диагностические признаки сырья: места прикрепления волосков, группы склереид, особенности семенной кожуры. Выявленные анатомо-морфологические особенности включены в проект ФС на сырье «Рябины черноплодной плоды».
1Ключевые слова: Рябина черноплодная, Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott, плоды, анатомические и морфологические признаки.
The anatomic and morphological properties of fruits (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott) were studied. Characteristic diagnostic parameters of raw material of a place of an attachment fuzzes, groups of sclereids, features of a seed peel are established. The revealed anatomic and morphological characteristics were included in project pharmacopeial monograph on drug material «Aronia fruits ».
Key words: Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott, fruits, anatomic and morphological characteristics.
Введение
Лекарственные средства высокого качества могут быть изготовлены только при условии использования для их производства лекарственного растительного сырья (ЛРС), соответствующего требованиям нормативной документации, в частности, по разделам: «Внешние признаки»,
«Микроскопия», «Качественные реакции» («Подлинность»). В настоящее время подлинность плодов рябины черноплодной, или аронии [Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott], регламентируется нормативной документацией (ФС-42-66-87), однако имеющаяся методика микроскопического анализа
не соответствует современным требованиям стандартизации ЛРС [1]. В частности, она не включает раздел микроскопического анализа измельченных плодов аронии и не содержит цветных фотоснимков анализируемого объекта.
Целью настоящей работы является анатомоморфологическое исследование плодов аронии.
Материалы и методы
Объектами настоящего исследования служили плоды аронии черноплодной, заготовленные в Шадринском районе Курганской области (2008 г.), а также поселке Смышляевка Самарской области (2008 г.). В настоящем исследовании
І Ул і і
были использованы световые микроскопы следующих марок:
• цифровой микроскоп Мо1к DM111 (возможность увеличения данного прибора представлена четырьмя окулярами: 4х10; 10х10; 40х10; 100x10);
• цифровой стереоскопический микроскоп Моїіс DM-39С-N9GO-A (возможность увеличения данного прибора представлена четырьмя окулярами: х 20; х 40).
Микропрепараты готовили в соответствии с фармакопейной методикой ГФ СССР XI издания [2]. Их окраску проводили раствором Люголя (обнаружение крахмала), раствором судана III (обнаружение жирного масла) и сернокислым анилином (обнаружение одревеснения оболочек) [3, 4, 5].
Результаты и обсуждение
Плоды аронии черноплодной яблокообразные, с мягким эндокарпом, черные, блестящие, до 10 мм в диаметре [1]. Плодолистики внутри плода образуют 5 гнезд, в которых расположены семена. Мякоть плода образована сильно разросшимся гипантием, на верхушке плода имеются малозаметные чашелистики (рис. 1).
Внутри плода под чашелистиками заметно скопление большого числа волосков, похожее на паутину (рис. 1Б). Оно остается от завязи, имеющей на верхушке железистоволосистое опушение. Семена в очертании удлиненно обратнояйцевидные, красновато-коричневые, неясно продольно морщинистые, до 3 мм длиной [6, 7]. Микроскопическое исследование кожуры плода аронии показало, что клетки эпидермиса имеют полигональные очертания, местами в боковых стенках видны поры (рис. 2А, 2Б).
РИС. 2.
Эпидермис плода аронии (после вымачивания в щелочи): А - увеличение х100; Б - увеличение х 400; 1 - клетки эпидермиса; 2 - место прикрепления волоска; 3 - клеточная стенка с порами.
На поверхности эпидермиса имеются простые одноклеточные длинные извивающиеся волоски (рис. 3). Различимы
следы от отвалившихся волосков благодаря неравномерной утолщенности стенок у клеток, прилегающих к месту крепления волосков (рис. 2Б). Экзокарпий плодов образован несколькими рядами колленхимы, расположенной непосредственно под эпидермисом (рис. 4). Клетки паренхимы, следующего глубже мезокарпа, постепенно укрупняются вовнутрь (рис. 4).
РИС. 3.
Плод аронии. Эпидермис, вид с поверхности (после обработки раствором щелочи, х 400): 1 -
клетки эпидермы; 2 - место прикрепления волоска; 3 - простой одноклеточный волосок.
РИС. 4.
Плод аронии. Поперечный срез (после обработки раствором щелочи, х400): 1 - слой кутикулы; 2 - клетки эпидермиса; 3 -колленхима; 4 - клетки паренхимы; 5 - друзы оксалата кальция.
В паренхиме мезокарпа имеются многочисленные скле-реиды неправильной, чаще округлой формы, со сглаженными углами, объединенные в группы из 2-3 и более клеток (рис. 5). Их неравномерно утолщенная оболочка, пронизана многочисленными поровыми каналами. Она нативно окрашена пигментом клеточного сока в розовый цвет. После обработки раствором сернокислого анилина склереиды желтеют, что говорит об их лигнифицированных оболочках (рис. 5Б). В одном и том же плоде каменистые клетки имеют неодинаковую утолщенность стенок (рис. 5Б). Строение каменистых клеток и особенность их локализации может быть использована как диагностический признак данного вида сырья.
РИС. 5.
Каменистые клетки в плодах аронии: А - увеличение х100; Б - увеличение х 400. 1 - клетки мякоти; 2 - склереиды; 3 - клеточные стенки склереид.
В мякоти плодов особенно вблизи эндокарпия в значительном количестве были обнаружены друзы оксалата кальция и призматические монокристаллы. Монокристаллы располагаются группами в виде тяжей. Кристаллы имеют правильную призматическую форму, реже ромбическую (рис. 6А). Друзы, как и монокристаллы, располагаются группами, однако могут встречаться одиночные. Форма друз округлая, звездчатая (рис. 5Б). Цвет микропрепаратов плодов аронии
ЕЮ
обусловлен антоцианами, локализованными главным образом в клеточном соке эпидермиса и мезокарпия. Часто семена плодов в рамках одной таксономической единицы (семейство, род) имеют характерное строение, отличное от других. Данный факт может использоваться в диагностике плодов и выявлении примесных видов. Плоды аронии в среднем содержат от 4 до 7 семян. Структурными компонентами семян являются зародыш, эндосперм, перисперм и семенная кожура. Строение семенной кожуры имеет характерные отличительные признаки, что может быть использо-
Эпидермис семенной кожуры состоит из тонкостенных, ослизняющихся, полигональных клеток (рис. 7). Под тонкостенным эпидермисом находятся широкопросветные клетки склеренхимы коричневого цвета (рис. 8).
Под слоем этих волокон расположены 2-3 ряда спавшейся паренхимы, 1 ряд клеток с порами в боковых стенках, далее следует остаток перисперма. В эндосперме и зародыше содержится жирное масло, капли которого окрашиваются в розово-оранжевый цвет раствором судана III. Помимо жирного масла клетки эндосперма заполнены мелкими алейроновыми зернами. Слой эндосперма незначителен и представлен 5-7 рядами клеток. Основную массу семени составляют крупные семядоли, верхний эпидермис которых образован одним слоем тонкостенных клеток. Паренхима семядолей образована рядами высоких, палисадных пористых клеток.
Выводы
1. Проведено анатомо-морфологическое исследование плодов рябины черноплодной с использованием цифровой микроскопии.
2. Выявлены диагностические признаки данного лекарственного растительного сырья, заключающиеся в наличии: одноклеточных волосков, характерных следов мест прикрепления волосков с неравномерно утолщенными одревесневшими клетками, групп склереид с характерным строением, семенной кожуры с тонким ослизняющимся эпидермисом и слоем склеренхимы с широкопросветными клетками.
3. Результаты анатомо-морфологического исследования нашли отражение в разделе «Микроскопия» проекта фармакопейной статьи на сырье «Аронии черноплодной плоды».
ш
литература
1. Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для фармац. вузов. 2-е изд., пере-раб. и доп. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава». 2007. 1239 с.
2. Государственная Фармакопея XI. Выпуск 1. Общие методы анализа. М. 1987. 279 с.
3. Андреева И.И., Родман Л.С. Ботаника: Учебник для медицинских и фармац. вузов. 2-ое изд., перераб. и доп. М.: Колосс, 2002. 488 с.
4. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М.: Медицина, 1977. 33 с.
5. Паламарчук И.А., Веселова Т.Д. Пособие для учителей. Изучение растительной клетки. М.: Просвещение, 1969. 143 с.
6. Эмбриологическое исследование покрытосеменных. Труды Главного Ботанического сада. Том VI. М. Издательство Академии наук СССР.
7. Никитин А.А., Панкова И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений. М. 2000. 720 с.
Семенная кожура (х400): Поперечный разрез семени
1 - ослизняющиеся клетки; (х 400): 1 - широкополостные
2 - широкопросветные клетки волокна; 2 - спавшаяся паренхи-
склеренхимы. ма; 3 - клетки с порами в боковых
стенках; 4 - остаток перисперма; 5 - эндосперм.
вано в диагностике данного вида сырья. А Б
РИС. 6.
Клетки мякоти плода (х400): А - с друзами; Б - с монокристаллами. 1 - клетки мякоти; 2 - монокристаллы; 3 - друзы.
