CC BY
20ЕГЕПШАРНЫЙ
Врач
activity of fish farming. For example, in 2012 three fish farms (LLC «Fish farm Veletma», Kulebaksky region; LLC «Borok», Kstovsky region; and LLC «Fish farm Polderevky», Vyksa) were infected with fish diseases. Restrictive measures including the measures of complex control on the all elements of epizootic chain were timely introduced. One of the main measures for preservation infection-free status in fish farms is epizootological monitoring and screening of aquatic environment and fauna. It was also identified as an important measure for quality control of fishery products and protection of public health because on the regional food market the imported sea fish (from 18 to 89 percent) were infected by anisakidae (haddock, codfish and smelt, atlantic herring, alaska pollok, poutassou, capelin, mackerel and other). Conclusion: basing on the analysis of objective data of epizooty, implementation of parasitological monitoring, sanitation and microbiological control the carried out studies proved the efficacy and necessity of expert complex evaluation of biological safety and veterinary and sanitary health of fish and fishery products.
KEYwORDS: fishes and fishery products, epizootological monitoring, biological safety, ecological safety, fish parasitic diseases.
References
1. Gorchakova, N.G. Funktsionirovaniye otkrytykh parazitarnykh system na primere opistorkhoza [Functioning of open parasitic systems on the example of opisthorchiasis]/ N.G.Gorchakova, V.P.Bykov, V.V.Sochnev. - N. Novgorod, 2003. - 174 p.
2. Metody sanitarno-parazitologicheckoy ekspertizy ryby, mollyuskov, rakoobraznykh, zemnovodnykh, presmykayuschikhsya i produktov ikh pererabotki: Metodicheskiye ukazaniya (MUK 3.2.988-00) [Methods of sanitation and parasitological examination of fish, mollusks, crustaceans, amphibians, reptiles and products of their processing: methodical recommendations]. - Moscow: Minzdrav Rossii - the Russian Federation Ministry of Health, 2001. - 69 p.
3. Nozologicheskiy profil zaraznoy patologii obitateley vodnoy sredy basseynov Sredney, Nizney Volgi i Dona [Nosological profile of infectious pathology of aquatic fauna in basins of Middle and Lower Volga and Don] / S.A.Smolkina, A.V.Dybinin, G.A.Alikova // Voprosy normativno-pravovogo regulirovaniya v veterinarii - The issues of regulation in veterinary medicine. - 2014. - Vol.2. - P. 30-32.
4. Opredelenye znachimosti otdelnykh nozoform v formirovanii nozologicheskogo profilya zaraznoy patologii razlichnykh vidov zhivotnykh, ptits i ryb v usloviyakh Nizhegorodskoy oblasti [The significance of some nosological forms in the formation of nosological profile of infectious pathology in various species of animals, birds, and fish in Nizhny Novgorod region] /Yu.V.Pashkina, P.A.Gorbunov // Veterinarnyy vrach. - 2013. -Vol. 6. - P. 20-22.
5. Otsenka epizootologicheskoy situatsii po fotmirovaniyu infektsionnoy i invazionnoy patologii ryb v zone regionalnogo prodovolstvennogo rynka [Epizootical evaluation of fish infectious and parasitic diseases in the regional food market] / Yu.V.Pashkina, A.V.Pashkin, P.A.Gorbunov// Veterinarny vrach. - 2014. - Vol. 1. - P. 55-58.
6. Pashkin, A.V. Domashniye zhivotnyye i vozbuditeli zaraznykh bolezney - soaktanty infektsionnykh i invazionnykh parazitarnykh sistem [Pets and pathogens of infectious diseases - infectious and parasitic co-actors in parasite systems] / A.V.Pashkin, O.M.Paraeva, E.V.Sergeeva // Veterinarnaya meditsina domashnikh zhivotnykh: a collection of articles. issue 4. - Kazan: Pechatnyy dvor, 2007. - P. 133-136.
7. Metodologiya nauchnykh issledovaniy v epiziitologii [An investigation methodology used in epizootology] / Yu.V.Pashkina [et al.]. - Nizhniy Novgorod: NGSHA, 2006. - 148 p.
8. Epizootologicheskiy analiz i ekspertnaya otsenka formirovaniya nozologicheskogo profilya infektsionnoy i invazionnoy patologii ryb v razlichnykh regionakh Rossii [Epizootological analysis and expert assessment of nosological profile of fish infectious and parasitic diseases in different regions of Russia] / D.A.Pomerantsev [et al.] // Veterinarnyy vrach. - 2010. - Vol. 4. - P. 29-32.
619:616.5-002:636.7:611.018.51
морфология эритроцитов при дерматитах паразитарной этиологии У собак
О.А.Шаповалова - аспирант; Н.Ю.Сысоева - кандидат ветеринарных наук, доцент; Г.М.Крюковская - кандидат ветеринарных наук, доцент; Г.Л.Верховская - заведующая лабораторией.
ФГБОУ ВПО«Московский государственный университет пищевых производств», г.Москва (125080, Москва, Волоколамское шоссе, 11, тел. (495) 750-01-11, e-mail: info@mguhh.ru).
Заболевания кожи различного генеза, протекающие в форме дерматитов, по мнению многих авторов, регистрируют у 30-70% собак, поступивших в ветеринарную клинику. Паразитирование блох на коже собак является
одной из причин развития блошиного дерматита, который по механизму своего развития является иммунологической реакций. При этом специфические клинические признаки заболевания отсутствуют. В большинстве случаев блошиный дерматит проявляется кожным зудом, покраснением участков кожи, образованием узелков, корок и облысением. В тяжелых случаях к расчесам присоединяется вторичная инфекция с развитием гнойного дерматита. Клетки крови активно реагируют на различные физиологические и патологические процессы в организме, поэтому изменение их морфологии имеет диагностическое значение для определения тяжести протекания патологического процесса. В статье приведены результаты исследований морфологии эритроцитов при блошином дерматите собак с различной степенью тяжести протекания патологического процесса. Материалы и методы. Исследования проводили методом световой микроскопии, позволяющим не подвергать клетки крови жестоким воздействиям и выявлять патологию эритроцитов в более короткие сроки. Результаты исследований. При блошином дерматите, сопровождающемся эрозивно-язвенными поражениями кожи в области спины, картина морфологических изменений эритроцитов проявлялась четко выраженным пойкилоцитозом. Нарушение структуры эритроцитов приводит к снижению обменных процессов и ацидозу, что угнетает иммунную систему организма. Доля эхиноцитов (10 полей зрения в препарате, %) составила в среднем 15,0±0,49%, стомато-цитов - 13,81±0,03%, кодоцитов - 20,00±1,24%. Увеличение доли измененных эритроцитов свидетельствует об интоксикации в организме собак и нарушении функции печени. У собак с незначительными кожными манифестациями содержание эхиноцитов составило 3,09±0,01%, стоматоцитов 2,75±0,01, кодоцитов - 3,73±0,02%. Интоксикации любой этиологии, в том числе и хронические воспалительные процессы, сопровождаются активацией и выделением в кровоток различных медиаторов воспаления и цитокинов, приводит к развитию полиорганной недостаточности. Заключение. Считаем, что методы исследования, позволяющие оценить изменения клеток крови при дерматитах паразитарной этиологии, можно использовать в качестве диагностического теста.
ключЕВыЕ слоВА: патологический процесс, блошиный дерматит, морфология эритроцитов.
Одним из самых распространенных кожных заболеваний является дерматит - воспаление всех кожных слоев, не сопровождающееся образованием сыпи. Заболевания кожи у собак, протекающие в форме дерматитов, в настоящее время регистрируются у 30-70% животных, хозяева которых обратились в ветеринарную клинику. Такие дерматиты возникают чаще всего в возрасте 1-5 лет независимо от пола и породы [1].
В этиологии дерматитов у собак одной из наиболее частых причин является паразитирование блох. Питаясь кровью животного, блоха выделяет в дерму слюну, которая препятствует свертыванию крови. Эта слюна содержит не менее 15 биологически активных веществ, которые могут оказывать раздражающее или аллергизирующее действие. До 80% всех аллергических дерматитов у собак, как установлено, связано с блохами. Паразитируя на животных, блохи наносят болезненные укусы, в результате образуются папулы, развивается дерматит, часто сопровождающийся се-кундарной инфекцией [2]. При этом специфические клинические признаки заболевания отсутствуют. В большинстве случаев блошиный дерматит проявляется кожным зудом, покраснением участков кожи, образованием узелков, корок и облысением. В тяжелых случаях к расчесам присоединяется вторичная инфекция с развитием гнойного дерматита. Поэтому сбор анамнеза жизни и болезни, а также простое физикаль-ное обследование животного, недостаточны для диагностики дерматитов.
Клетки крови, будучи важнейшими компонентами внутренней среды организма, чутко реагируют на различные физиологические и патологические процессы в организме, что позволяет использовать их в качестве
дифференциально-диагностического теста при самых разнообразных нозологических формах. Ни в одной другой ткани состояние клеточной поверхности не ответственно в такой степени за развертывание ряда явлений, происходящих в организме, как в норме, так и при патологических состояниях [3].
Механизм возникновения нарушений морфологии эритроцитов при дерматитах паразитарной этиологии у собак изучен недостаточно и раскрытие его имеет существенное значение для целенаправленной патогенетической терапии больных животных. Изменения морфологии эритроцитов проявляются уменьшением размеров, формы эритроцитов, интенсивности и характера их окрашивания, появлением патологических включений. Важнейшим признаком патологического состояния эритроцитов является пойкилоцитоз - образование измененных форм эритроцитов: эхиноцитов, овалоцитов, шизоцитов, сфероцитов и др.
Целью наших исследований было изучить морфологические изменения эритроцитов крови собак при блошином дерматите различной степени тяжести.
материалы и методы. Работу выполняли на базе кафедры «Ветеринарная медицина» Института ветеринарной экспертизы и санитарии ФГБОУ ВПО МГУПП и ветеринарных клиник г.Москвы. Было исследовано 97 собак разных возрастных групп с кожной патологией, хозяева которых обратились в клинику с жалобами на состояние животных. Всем животным проводили общепринятые клинические исследования, обращая особое внимание на состояние кожного покрова. Особое внимание уделяли наличию признаков зуда, его интенсивности, времени появления и характеру экссудатов, наличия местной температуры. При наличии кожных манифестаций проводили микроскопическое иссле-
ЕГЕПШАРНЫЙ
Врач
дование кожи методом глубоких соскобов и приготовления мазков отпечатков. Глубокие соскобы с площади около 4 см2 брали с 5 участков тела каждого животного до появления сочащейся из капилляров крови. С пораженных участков кожи брали 2-3 мазка-отпечатка, которые затем окрашивали азуром и эозином.
Оценку мазка проводили путем подсчитывания количества поверхностных и глубоких клеток эпителия, нейтрофилов, а также наличия бактерий и грибов в 10 полях зрения с последующим их подсчетом по полям зрения. Исследования проводили под иммерсией светового микроскопа (объектив х90, окуляр х10). Окончательный диагноз ставили по результатам исследования соскобов и мазков отпечатков.
Для оценки состояния эритроцитов проводили исследование морфологии эритроцитов в мазках крови. Для приготовления нативных мазков каплю крови из вены Сафена, стабилизированную антикоагулянтами (этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), гепарин и др.), наносили на предметное стекло и накрывали покровным стеклом и исследовали методом световой микроскопии. Метод микроскопического исследования нативной крови подразумевает исследование образца крови сразу после взятия в течение не более 1015 минут, после чего в крови происходят необратимые изменения. Капельку крови под покровным стеклом изучали сначала обзорно под малым увеличением, затем анализировали морфологию клеток и содержимое плазмы под иммерсией при максимальном увеличении. Важным отличием данного метода от обычных анализов является проведение исследования образца крови без какой-либо его предварительной обработки. Модернизация световой микроскопии современной техникой позволила добиться максимально эффективного увеличения визуализируемых структур и объектов плазмы, причём, в их динамике и оценить жизнедеятельность клеток крови.
Результаты исследований. Из 97 обследованных собак нами было отобрано 19 (19,58%) собак пород французский бульдог, боксер, шарпей, мопс, такса, ротвейлер в возрасте 2-4 года. При клиническом осмотре отмечали выпадение шерсти, зуд у основания хвоста, в области поясницы и спины. Отмечалось шелушение кожи, образование ранок в результате расчесов и покрытых тонкими, легко отторгающимися корочками-чешуйками. У 7 собак в области шеи, нижних областях живота отмечали картину эрозивно-язвенного дерматита, развивающегося при механическом травмировании эпидермиса.
Собаки были свободными от гельминтозной инвазии, не имели признаков инфекционных забо-
леваний, а также патологии дыхательной системы. Температура тела имела предельные колебания и составляла 37,5-38,5 0С, что находится на верхней границе физиологической нормы для данного вида животных. Частота пульса составила 80-100 ударов в минуту, частота дыхания - 15-23 дыханий в 1 минуту. Видимые слизистые оболочки бледно-розовые. Лимфатические узлы не увеличены.
При микроскопии глубоких соскобов кожи клещи рода Оетс^ех не обнаружены.
Исследование мазков отпечатков с поверхностных пораженных участков кожи выявило у 7 собак в возрасте 3-4 лет наличие перивазальных эозинофильных клеточных инфильтратов, которые в отдельных случаях образовывали довольно крупные очаги. Клеточный инфильтрат включал также значительное количество тканевых базофилов, большинство из которых имели нечеткие контуры, а их цитоплазма не содержала специфических гранул (рис.1). Появление эозинофи-лов, маркеров аллергических реакций, в мазках с поверхности кожи собаки подтверждает аллергическую природу блошиного дерматита.
Рис. 1. Эозинофилы и нейтрофилы в цитологическом препарате кожи собаки при блошином дерматите (ув. х400).
Возникающая в ответ на микробное вторжение воспалительная реакция с гибелью многочисленных ней-трофильных лейкоцитов в результате незавершенного фагоцитоза сопровождается разрушением эпидермиса протеолитическими ферментами, выделяющимися на поверхность кожи из распадающихся нейтрофилов. Блошиный дерматит, проявляющийся первоначально лишь как папулезное поражение, затем характеризуется появлением корочек на папулах, постепенным появлением на коже гнойничков, которые, сливаясь друг с другом, образуют различные по форме и величине участки эрозии, лишенные эпидермиса [4].
При проведении световой микроскопии натив-ных мазков собак с популезной формой блошиного дерматита установлено, что большинство эритроцитов имеет форму дискоцитов. Такая форма эритроцитов обеспечивает наиболее адекватное обеспечение тканей кислородом и во многом определяет эффективность протекания физиологических процессов [5]. Доля деформированных эритроцитов в форме эхиноцитов составила (10 полей зрения в ка-
ждой пробе, %) в среднем 3,09+0,05%, стоматоци-тов - 2,75+0,01, кодоцитов - 3,73+0,02%.
При дерматите, сопровождающимся эрозив-но-язвенными поражениями кожи в области спины, изменения в морфологической картине эритроцитов проявлялись четко выраженным пойкилоцито-зом. Доля эхиноцитов составила (10 полей зрения в препарате) в среднем 15,0+0,49%, стоматоцитов - 13,81+0,03%, кодоцитов - 20,00+1,24%.
рис. 2. Эхиноциты и кодоциты в нативном мазке крови собаки в возрасте 3 лет с аллергическим блошиным дерматитом. световая микроскопия.
Изменение формы эритроцитов (пойкилоцитоз) может быть результатом нарушения внутриклеточного обмена или возникать вследствие внешних физико-химических и иммунологических воздействий, то есть клетки могут подвергаться различным обратимым и необратимым трансформациям [6].
заключение. Результаты наших исследований позволили установить, что блошином дерматите изменения морфологии эритроцитов, характеризуются появлением деформированных форм в зависимости от тяжести патологического процесса.
Пойкилоцитоз при этом можно рассматривать как универсальные биохимические и морфологические изменения в составе крови при эндо- и экзогенных интоксикациях [7].
Таким образом, обнаруженные изменения морфологии эритроцитов существенно дополняют клиническую картину, позволяют косвенно судить о характере патологического процесса при дерматитах паразитарной этиологии и могут служить дополнительным методом оценки состояния организма и разработки этио-патогенетической терапии.
Литература
1. Никитушкина, Н.А. Методы диагностики дерматитов мелких домашних животных, вызванных патогенной и условно-патогенной микрофлорой / Н.А.Никитушкина, Л.Н.Гордиенко // Материалы 12-го Московского Всероссийского ветеринарного конгресса. - М., 2005. - С. 109-110.
2. Патерсон, С. Кожные болезни собак: пер. с англ. / С.Патерсон. - М.: Аквариум ЛТД, 2000. - 495 с.
3. Смирнова, О.О. Изменение морфологических и биохимических показателей эритроцитов при интоксикации / О.О.Смирнова // Международный вестник ветеринарии. - 2010. - Т. 137, вып. № 3. - С. 31-35.
4. Тиханин, В.В. Патогенетические механизмы эрозивно-язвенных поражений кожи у собак / В.В.Тиханин, Н.Л.Карпецкая // Ветеринарная клиника д-ра Тиханина. - СПб.:Мысль, 2001. - С. 56-64.
5. Новодержкина, Ю.К. Конфигурация и поверхность клеток крови в норме и патологии / Ю.К.Новодержкина, З.Г.Шишканова, Г.И.Козинец. - М.: Триада-фарм, 2004. - 151 с.
6. Скопичев, В.Г. Изменение морфологических и биохимических показателей крови при детоксикации с применением локальной компрессии / В.Г.Скопичев, О.О.Смирнова // Ветеринарная практика. - 2009. - № 3 (4б). - С. 35-39.
7. Изменение морфологии эритроцитов коз после торакального вмешательства на реберном каркасе / В.И.Луцай [и др.] // Ветеринарная практика. - 2011. -№ 3 (54). - С. 20-25.
ERYTHROCYTE MORPHOLOGY IN DOGS AT PARASITIC DERMATITIS
Shapovalova O.A. - postgraduate; Sysoeva N.Yu. - Candidate of Veterinary Sciences;
Kryukovskaya G.M. - Candidate of Veterinary Sciences; Verkhovskaya G.L. - head of the laboratory.
Moscow State University of Food Production Technology, (e-mail: info@mguhh.ru, winter28@mail.ru).
Introduction: according to references skin diseases of various origin proceeding in the form of dermatitis is registered in 30-70% of dogs admitted to a veterinary clinics. The parasitic dog fleas is one of the reason of flea-borne dermatitis, the mechanism of its development is the immune response without any specific clinical symptoms. In most cases flea-borne dermatitis is manifested by skin pruritus, redness, formation of nodules, crusts and alopecia. In severe cases the scratching is followed by a secondary infection with the development of purulent dermatitis. /4s blood cells actively respond to various physiological and pathological processes taking place in a body, change in their morphology has diagnostic significance to determine the severity of the disease. The article presents the results of studying erythrocytes morphology at dog dermatitis with various level of severity. Methods and materials: the studies were carried out using the method of light microscopy prevents cells destruction and provides detection of erythrocytes pathology in a shorter time. Results: at flea-borne dermatitis accompanied by erosive and ulcerative skin lesions on animal back, changes in erythrocytes morphology was manifested with an expressed poikilocytosis. Damage in erythrocytes structure results in lower metabolism and acidosis which affects body immunity. At average, echinocytes ratio (10 fields of view per drug) was 15.0±0.49%, stomatocytes - 13.81±0.03% and codocytes - 20.00±1.24% accordingly. A higher ratio of alternated cells evidences the process of intoxication and liver deficiency taking place in a dog body. In dogs with minor skin manifestations the level of echinocytes reached 3.09±0.01%, stomatocytes - 2.75+0.01, and codocytes - 3.73±0.02% accordingly. Intoxication of any etiology, including chronic inflammatory processes, are accompanied by activation and secretion into the bloodstream of various inflammatory mediators and cytokines, which leads in turn to the development of multiple organs failure. Conclusion: therefore, research methods that allow assessing changes of blood cells can be used as a diagnostic test at dermatitis of parasitic etiology.
KEYwORDS: pathological processes, flea-borne dermatitis, morphology of erythrocytes.
References
1. Nikitushkina, N.A., Metody diagnostiki dermatitov melkih domashnih zhivotnyh, vyzvannyh patogennoy i uslovno patogennoy mikrofloroy [Methods detecting pet dermatitis caused by pathogenic and opportunistic pathogenic microflora] / N.A.Nikitushkina, L.N.Gordienko // Proceedings from 12th Moscow All-Russian veterinary congress. -Moscow, 2005. - P. 109-110.
2. Paterson, S. Skin diseases of the dog / S.Paterson. - Russian edition; translated into Russian by E.Osipova. -Moscow: «Aquaruim LTD», 2000. - 495 p.
3. Smirnova, O.O. izmenenie morfologicheskih i biohimicheskih pokazateley ehritrotsitov pri intoksikatsii [Changes in morphology and biochemical parameters of erythrocytes at intoxication] / O.O.Smirnova // Mezhdunarodny vestnik veterinarii. - 2010. - Vol. 137, issue. № 3. - P. 31-35.
4. Tihanin, V.V. Patogeneticheskie mekhanizmy ehrozivno-yazvennyh porazhenij kozhi u sobak[Pathogenetic mechanisms of erosion and ulcer lesions of skin in dogs] / V.V.Tihanin, N.L.Karpetskaya // Veterinarnaya klinika doktora Tihanina - veterinary clinics of doctor Tihanin. - Saint Petersburg: Mysl, 2001. - P. 56-64.
5. Novoderzhkina, Yu.K. Konfiguratsiya i poverhnost kletok krovi v norme i patologii [Configuration and surface of blood cells at normal state and pathology] /Yu.K.Novoderzhkina, Z.G.Shishkanova, G.i.Kozinets. - Moscow: Triada-farm, 2004. - 151 p.
6. Skopichev, V.G. izmenenie morfologicheskih i biohimicheskih pokazateley krovi pri detoksikatsii s primeneniem lokalnoy kompressii [Changes in blood morphological and biochemical parameters at detoxication using local compression] / V.G.Skopichev, O.O.Smirnova // Veterinarnaya praktika. - 2009. - № 3 (46). - P. 35-39.
7. izmenenie morfologii ehritrotsitov koz posle torakalnogo vmeshatelstva na rebernom karkase [Changes in erythrocytes morphology in goats after thoracic surgery in ribcage] / V.i.Lutsay [et al.] // Veterinarnaya praktika. - 2011. -№ 3 (54). - P. 20-25.
