CC BY
10
DOI 10.29254/2077-4214-2018-3-145-333-335 УДК 616.6 - 007.1 - 06: 613. 168: 615. 37 Шарапова О. М.
МОРФОЛОГ1ЧН1 ЗМ1НИ В ЯеЧКАХ ЩУР1В П1СЛЯ ВЖИВАННЯ ЕХ1НАЦЕ1' ПУРПУРОВО1
ДЗ «Дншропетровська медична академiя МЫстерства охорони здоров'я УкраТни» (м. Днiпро)
esharapova@ukr.net
Зв'язок публшацм з плановими науково-дослщ-ними роботами. Робота е фрагментом теми: «Мор-фофункцiональний стан оргашв i тканин експери-ментальних тварин та людини в онтогенезi в норм1 та пiд впливом зовшшшх i внутрiшнiх чиннишв», що виконуеться на кафедрi кл^чно''' анатомп, ана-томи i оперативно'!' хiрургií (№ державно''' реестраци 0117и003181).
Вступ. Медичш препарати, що використовуються для корекци iмунного статусу людини, подiляються на дектька груп: iмуномодулятори, iмуностимуля-тори та iмуносупресори. До групи iмуномодуляторiв належить такий препарат як 7% спиртова настоянка ехшаце''' пурпурово'''. Настоянка ехшаце''' пурпурово''' е адаптогеном рослинного походження - препаратом, який мае загальнотошзуючу дiю на основнi функци i системи, а також пщвищуе опiр органiзму до не-сприятливих впливiв [1]. Комплекс дiючих речовин настоянки ехшаце''' пурпурово''' пiдвищуе фагоцитар-ну активнiсть нейтрофiлiв i макрофапв, стимулюе синтез iнтерлейкiна-1, медiатора запалення та iмунi-тету, стимулюе трансформащю В-лiмфоцитiв у плаз-матичнi кл^ини, якi у свою чергу сприяють утворен-ню клiтин пам'ятi i продукують антитiла, покращуе функцiю Т-хелперiв. У механiзмi протизапально''' та iмуностимулюючоí дм ехшаце''' пурпурово''' мае мкце взаемодiя з бiологiчними мембранами клп"инних та субклiтинних структур [2,3].
Недостатньо дослщжена дiя цього препарату на органи сечостатево''' системи людей i тварин, що знаходилися пiд дiею шкiдливих факторiв рiзного ["енезу [4]. При дм таких факторiв знижуеться iмунi-тет, вiдбуваеться iзоляцiя аутоантигенними кланами сперматогенного епiтелiю ам'яних кaнaльцiв вiд центра iмунноí вщпов^д та поява у зв'язку з цим iмунологiчного конфлiкту мiж статевими кл^инами та iмунокомпетентними клiтинaми. Для зменшення прояву цього конфлiкту на клггинш структури яечка в медичнш прaктицi застосовують iмуномодулятори, зокрема 7% спиртову настоянку ехшаце''' пурпурово'''.
Метою даного дослщження стало з'ясування морфолопчних змiн, якi вiдбувaються в статевих органах, а саме в яечках щурiв, що вживали iмуномоду-лятор - 7% спиртову настоянку ехшаце''' пурпурово'''.
Об'ект i методи дослiдження. Контрольну групу склали щури вагою 250-300 г у ктькосл 6 тварин, як1 знаходилися у кликах в умовах вiвaрiю. Експеримен-тальну групу склали щури у ктькосл 40 тварин, яким протягом тижня внутршньошлунково вводили 7% спиртову настоянку ехшаце''' пурпурово''' iз розрахун-ку 0,0018 мл/г маси тварини. 20 тварин виводили з експерименту методом евтанази пщ тiопентaловим наркозом через 30 дiб та 20 тварин - через 45 дiб, вилучали з них яечка. Пстолопчш зрiзи товщиною 5-7 мкм забарвлювали метиленовим сишм i тетра-
борнокислим HaTpieM [5]. Проводили опис пстоло-гiчних препаратГв пiд бiнокуляpним мтроскопом. Препарати фотографували за допомогою цифровой' фотокамери та мiкpоскопу "LEICA СМЕ" (об'ектив Plan 4x~/-, 10хх/0.25, 40x х/0.65 ~/0.17). Мшромор-фометричне дослщження об'eктiв здiйснювaли на комплексi, до складу якого входили мГкроскоп "LEICA СМЕ", цифровий фотоапарат Olympus (модель NO.E - 300DC 9V, № Я625517820) i3 п'ятимегатксельною матрицею, що з'еднаний з мтроскопом системою aдaптеpiв виробництва ц1е' ж фipми. Вимipювaли довжину великого дiaметpa звивистих ам'яних ка-нaльцiв яечок i3 наступною статистичною обробкою одержаних результат.
Експериментальн дослiдження було проведено з дотриманням вимог гуманного ставлення до пщдо-слiдних тварин, регламентованих Законом УкраТни «Про захист тварин вщ жорстокого поводження» (№ 3447-IV вiд 21.02.2006 р.) та бвропейською конвенци ею про захист хребетних тварин, ям використовуються для дослiдних та ¡нших наукових цiлей (Страсбург, 18.03.1986 р.).
Результати дослщження та Тх обговорення. У ре-зультaтi проведених експеpиментiв були одержан! наступн дaнi. Яечка контрольних щур!в мали наступ-ний вигляд: бткова оболонка не змiненa, звивистг с!м'ян! кaнaльцi щ!льно прилягали один до одного. Великий дiaметp звивистих ам'яних канальцГв дорГв-нював 0,226±0,030 мм (р<0,005). Базальна мембрана не мала ознак розшарування, на нш розташовували-ся св!тл! i темн сперматогонГТ. П!дтримуюч! кл!тини Сеpтолi розташовувалися м!ж спеpмaтогонiями на бaзaльнiй мембраш. 1снували свГтл i темнi клГтини. Ядра цих клГтин, одно або дектька, мали шрамщаль-ну форму з шкнотичними ознаками. Сустентоцити досягали веpхiвкaми просвГту канальця. У просвт ам'яних кaнaльцiв на рГзних дтянках простежували-ся вс! клГтини сперматогенного циклу, починаючи з сперматогонш до зртих сперматозо'ТдГв.
Морфолопчна картина яечок щурГв експеримен-тально'Т групи на 30-ту добу спостереження вигляди ла наступним чином. У просвт ам'яного канальця сперматогенн клГтини мали рГзну ступшь диферен-цшвання, на одних дтянках сперматогенез закш-чувався формуванням сперматогонш I порядку, на ¡нших - сперматогонш II порядку, на деяких - зртих сперматозо'ТдГв.
Бткова оболонка яечок залишалася такою ж, як i в яечках тварин попередньот групи, клГтиннот ¡н-фтьтрацп не вщзначалося. Звивист! ам'яш каналь-ц! щтьно прилягали один до одного, мали округлу, овальну або повздовжню форми. М!ж ам'яними канальцями набряково'Т рГдини у вигляд! скупчень вакуолей не спостерГгалося. Шари базально'Т мемб-рани ам'яних канальцГв зберкали свою орГентацГю,
Рис. 1. Яечко щура на 30-ту добу вживання ехшацеТ пурпуровоТ.
Забарвлення метиленовим синiм. Збiльшення х 400.
1 - звивистий ам'яний каналець; 2 - базальна мембрана;
3 - сперматогенний епiтелiй; 4 - сперматиди. Виражена шкнотичшсть ядер клiтин Сертолi.
набрякових явищ не простежувалося. На базаль-нiй мембраш були присутнi 4-5 шарiв епiтелiальних сперматогенних клiтин, якi представленi на вах ста-дiях сперматогенного циклу: вщ сперматогонiй до сперматозоíдiв, як у великiй кiлькостi скупчувалися у просвт канальцiв. Клiтини Сертолi виразно ди-ференцiювалися на базальнiй мембраш каналь^в у виглядi клiтин з ппохромною цитоплазмою i тк-нотичним ядром. На верхiвках люмiнальних частин ^тин Сертолi знаходилися бухтоподiбнi заглиблен-ня, до яких примикали сперматоцити i сперматиди, що диференцiювалися. Виразно позначалися зр^1 сперматозоíди з ппохромною цитоплазмою, що ви-ходили у просв^ канальцiв хвостиками вперед. Великий дiаметр сiм'яних канальцiв був б^ьшим, нiж у контрольних щурiв, i досягав значення 0,254±0,029 мм (р<0,005) (рис. 1).
Морфологiчна картина яечок щурiв експеримен-тальноí групи на 45-ту добу спостереження виглядта наступним чином. Сперматогенез у рiзних дiлянках сiм'яного канальця спостерiгався на рiзних стадiях: на одних д^янках сперматогенез закiнчувався фор-муванням сперматоци^в, на iнших - сперматид 1-11 порядку, на окремих д^янках ам'яних кaнaльцiв у полi зору простежувалися зр^ спермaтозоíди, як1 у великм кiлькостi скупчувалися у просвiтi каналь-цiв. Бiлковa оболонка яечок залишалася такою ж, як i в яечках тварин на 30-ту добу вживання ехшаце'1 пурпурово'|, клiтинноí шфтьтрацп не вiдзнaчaлося. Звивистi сiм'янi канальц щiльно прилягали один до одного, мали округлу, овальну або повздовжню форми. Мiж ам'яними канальцями набряково'| ри дини у виглядi скупчень вакуолей не спостеркалося. Нaбряковоí рщини мiж шарами бaзaльноí мембрани
Рис. 2. Яечко щура на 45-ту добу вживання ехшацеТ пурпуровоТ. 1 - базальна мембрана; 2 - клггина Сертол^ 3 - сперматогонп;
4 - ciм'яна рiдина. Забарвлення метиленовим сишм. Збiльшення х 400. 1 - базальна мембрана; 2 - клггина Сертол^ 4 - сперматозоТди. Процес активного сперматогенезу.
також не визначалося. На базальшй мембраш були присутш всi шари епiтелiaльних сперматогенних кли тин. Клiтини Сертолi виразно диференцiювaлися на бaзaльнiй мембраш каналь^в з одним або двома ядрами i вiдрiзнялися вiд iнших сперматогенних кли тин. На верхiвкaх люмiнaльноí частини клiтин Сертол1 знаходилися бухтоподiбнi заглиблення, до яких примикали сперматоцити i сперматиди, що диференци ювалися. Виразно позначалися зрЫ спермaтозоíди з гiпохромною цитоплазмою, що виходили у про-свiт каналь^в хвостиками вперед. Великий дiaметр ам'яних каналь^в був бiльшим, нiж у щурiв, що вжи-вали настоянку ехшаце'[ пурпуровоí на попередню добу спостереження, i досягав значення 0,262±0,037 мм (р<0,005) (рис. 2).
Висновки
1. В яечках щурiв на 30-ту i 45-ту добу вживання 7% настоянки ехшаце'[ пурпурово'| морфологiчнi змiни виражалися в появi всiх клiтин сперматогенного циклу, в рiзних дiлянкaх сiм'яних каналь^в на рiзних етапах диференцiювaння.
2. У просвт ам'яних канальщв яечок щурiв, що вживали iмуномодулятор, спостер^алися у великiй кiлькостi зрiлi сперматозощи. Середнi значення великого дiaметрa сiм'яних кaнaльцiв досягали зна-чень 0,262±0,037 мм, збiльшувaлaся площа сперма-тогенноí тканини, що вказувало на позитивну ^ю ехiнaцеí пурпуровоí.
3. Кл^ини Сертолi видiлялися на базальшй мембраш ам'яних каналь^в, приймаючи активну участь у формуванш повноцшних спермaтозоíдiв.
Перспективи подальших досл1джень. У подаль-шому дiю ехiнaцеí пурпурово'| на яечка щурiв можна дослщити у бiльшi строки спостереження.
Л^ература
1. Krytskih TV. Izychenie farmakologicheskih i tehnologicheskih svoistv sybstantsii Altabora. Odesskiy meditsinskiy jyrnal. 2015;4:11-3. [in Russian].
2. Klish IM, Drogovoz SM. Doslidjennia vplivy kombinovanih tabletok ta ekstraktiv ehinatsei na indikatori imynnoi sistemi. Farmatsevtichniyi jyrnal. 2012;2:112-6. [in Ukrainian].
3. Koval VI, Groshovii TA. Doslidjennia na vibir dopomijnih rechovin dlia otrimannia tabletok tsinky asparginaty z ekstraktom askorbinovoi kisloti ta ehinatsei. Farmatsevtichniy jyrnal. 2013;1:74-8. [in Ukrainian].
4. Gritsenko VI, Ryban OA. Doslidjennia poroshkiv roslinnih ekstraktiv z metoiy stvorennia sypozitoriyv dlia likyvannia zahvoryvan peredmihyrovoi zalozi. Farmatsevtichniy jyrnal. 2013;4:92-5. [in Ukrainian].
5. Bagrii MM, Dibrova VA, Popadinets OG, Grishyk MI. Metodiki morfologichnih doslidjen. Vinnitsia: Nova Kniga; 2016. 328 s. [in Ukrainian].
МОРФОЛОГ1ЧН1 ЗМ1НИ В ЯеЧКАХ ЩУР1В П1СЛЯ ВЖИВАННЯ ЕХ1НАЦЕ1 ПУРПУРОВО1
Шарапова О. М.
Резюме. В данш po6oTi автором дослiдженi морфолопчш змши в яечках щyрiв, що вживали 7% спиртову настоянку ехшацеТ пурпуровоТ, у порiвняннi з контрольними тваринами. Доведено, що морфолопчна структура тканини яечок тварин, якi вживали iмyномодyлятор, значно не вiдрiзнялaся вщ структури контрольних тварин. У просвт сiм'яних кaнaльцiв спостерiгaвся активний процес сперматогенезу 3i статевими клiтинaми на рiзних стaдiях розвитку. Середнiй дiaметр сiм'яних кaнaльцiв яечок щyрiв суттево не вiдрiзнявся в yсiх гру-пах тварин.
^K>40Bi слова: щур, яечко, сiм'янi кaнaльцi, спермaтогеннi клiтини, ехiнaцея пурпурова.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ЯИЧКАХ КРЫС ПОСЛЕ УПОТРЕБЛЕНИЯ ЭХИНАЦЕИ ПУРПУРНОЙ
Шарапова Е. Н.
Резюме. В данной работе автором исследованы морфологические изменения в яичках крыс, которые употребляли 7% спиртовую настойку эхинацеи пурпурной, в сравнении с контрольными животными. Доказано, что морфологическая структура ткани яичек животных, употреблявших иммуномодулятор, значительно не отличалась от структуры яичек контрольных животных. В просвете семенных канальцев наблюдался активный процесс сперматогенеза с клетками на разных стадиях развития. Средний диаметр семенных канальцев яичек крыс существенно не отличался во всех группах животных.
Ключевые слова: крыса, яичко, семенные канальцы, сперматогенные клетки, эхинацея пурпурная.
MORPHOLOGICAL CHANGES IN THE TESTICLES OF RATS AFTER THE USE OF ECHINACEA PURPUREA
Sharapova E. N.
Abstract. The search of drugs that improve the morphological condition of the testicles of humans and animals that have been subjected to the action of harmful factors of the external environment, in particular the electromagnetic field is the actual problem of modern morphology today. The author in this study tried to investigate the effects of 7% alcohol tincture of Echinacea purpurea by identifying morphological changes in testicles of rats.
The aim of the study was to determine the morphological changes in testicles of rats after using them immunomodulator — 7% alcohol tincture of Echinacea purpurea. Experimental group consisted of 40 white rats-males weighing 180-200 g, control group — 6 males. Animals of the experimental group was administered intragastrically 7% alcohol tincture of Echinacea purpurea based 0,0018 ml/g weight of the animals for five days. After the experiment in 30 and 45 days the animals were euthanized by cervical dislocation, the animals were removed from the testes. Methylene blue and sodium tetraborateusedduring the manufacture of histological preparations for coloring the slices. The preparations were photographed using digital camera and microscope «LEICA CME» (lens Plan 4x 10x x/0.25, 40x x/0.65 ~/0.17). Micromorphometric study of the objects was carried out on the complex, composed of microscope «LEICA CME», digital camera Olympus with five-megapixel matrix, which is connected to the microscope by system of adapters of the same company. The large diameter of convoluted seminiferous tubules of the testes is expected. The results of the study were evaluated using the methods of variation statistics.
It was ascertained during the investigation that the morphological changes were taking place in the animals' testes injected immunomodulator. Those changes slightly differed from the structure of the control animals' testes. Tunica albuginea of testicles was of the same structure as in the testes of the animals of the control group, the cell dissemination was not observed. Convoluted seminiferous tubules are closely adjoined to each other, have rounded or oval forms. The layers of basal membrane retained its orientation, edematous effects were not observed, there was not a delamination of basal membrane. 4-5 spermatogenic epithelial layers, where germ cells at all stages of the spermatogenic cycle: spermatozoon, spermatocytes, spermatids 1, 2 order and spermatozoa are determined on the basal membrane. The gametes at all stages development were present in greater numbers comparing with the control animals' testicles in sight of the microscope. The large diameter average values of the rats' tests convoluted seminiferous tubules consumed the immunomodulator increased in comparison with the animals' control group to 0,262±0,037 mm (p<0,005). It attested the improvement in the testicles' spermatogenic function.
Moderate venostasis in the arterial and venous link of the testicular ovarian blood stream was observed in rats after application of Echinacea purple tincture in 30 and 45 days. Mild arterial edema was manifested more than in the venous bed in the structure of the rats' microcirculatory bed of testicles after their using of immunomodulator. Desmosome contacts recovered between Sertolli cells. Cells of Sertolly had pycnotic nuclei with several nucleoli. The spermatocytes and spermatids at different stages of differentiation were adjoined on lateral surfaces of the bay-like recess of Sertolli cells. Mature spermatozoa were in the lumen of the tubules tails forward. Sertolli cells fully perform all of the functions that are inherent in interstitial endocrinocytes: produce testosterone, substances that contribute to its formation. They regulated reducing of production of follicle stimulating hormone so.
Key words: tincture of Echinacea purpurea, rat, testicle, convoluted seminiferous tubules.
Рецензент — проф. Блаш С. М.
Стаття надшшла 27.07.2018 року
