Морфологічні та лектиногістохімічні характеристики міокарда білих нелінійних щурів в нормі і за умов експериментального гіпотирозу Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

© Ященко А. М., Струе X. I., Смолькова О. В., Панкевич Л. В.

УДК 611. 127 - 018:547. 96]:616. 441-008. 64-092. 9

Ященко А. М., Струе X. I., Смолькова О. В., Панкевич Л. В.

М0РФ0Л0Г1ЧН1 ТА ЛЕКТИН0Г1СТ0Х1М1ЧН1 ХАРАКТЕРИСТИКИ М10КАРДА Б1ЛИХ НЕЛ1Н1ЙНИХ ЩУР1В В Н0РМ1 I ЗА УМ0В ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬН0Г0

Г1П0ТИР03У

Львшський нацюнальний медичний ушверситет ¡меш Данила Галицького (м. Льв1в)

Робота е фрагментом НДР кафедри петологи, цитологи та ембрюлогп Льв!веького нацюнального медичного уывереитету ¡мен1 Данила Галицького «Лектинов! маркери та цитоплазматичн! еигнальн! молекули у процее! кттинно! диферен^аци ! пролг ферацп», № державно! рееетрацп 07001100106.

Вступ. Ппотироз - ктычний еиндром, виклика-ний тривалою та етмкою недоетатыетю гормоыв щитопод!бно! залози в оргаызм! або зниженням 1х бюлопчного ефекту на тканинному р1внг Оеновною причиною ураження бшьшоет! оргаыв при ппотироз! е р!зке зниження еинтезу цтого ряду фермент!в уна-елщок дефщиту тиро!дних гормоыв [1, 10, 14, 15]. Порушення обмЫу глкозамшоглкаыв приводить до шфтьтрацп елизових оболонок, шюри пщшюрно! кттковини, мюкарда. 3 ¡ншого боку порушення вод-но-еольового обм!ну поеилюетьея надлишком вазо-прееину та недоетатыетю натрмуретичного чинника [1]. Оеобливу роль вщ1грають процееи накопичен-ня продукпв бшкового обмшу - глкозамЫоглкаыв, похщних проте!н!в, глюкуроново! та хондро!тине1р-чано! киелот. Вони накопичуютьея в ¡нтеретици, зу-мовлюючи елизопод1бний (муцинозний) набряк [6]. Внаелщок виеоко! пдрофтьноет глкозамшоглкаыв накопичуетьея вода та натрм у позаеудинному про-еторг у шюр!, еерц1, м'язах, порожнинах оргаызму. Можливий розвиток гщроторакеу, гщроперикарду, аециту [7]. Ппотироз зумовлюе також змши в мю-кард1, внаелщок набряку мюцит!в та ¡нтеретицю що в юнцевому результат! реал1зуетьея у ф1броз [8]. По-рушуетьея атрювентрикулярна провщыеть та про-вщыеть у мюкардг Д1агноетуютьея порушення ритму та провщноет!, як чаето резиетентн до етандартно-го протиаритм1чного л1кування. Розм1ри еерця збть-шуютьея, меж! його змщуютьея [3, 11, 14]. Вказан! зм!ни е наелщком як змш у мюкард!, так \ наелщком муцинозного випоту до перикарда з формуванням гщроперикарда. Наявыеть периферичних набряюв розцшюетьея як прояв еерцево! недоетатноет!. Хоча набряки можуть бути наелщком реетриктивних змш у мюкард! та периферичних муцинозних набряк!в. У мюкард! при ппотироз! вщбуваетьея значний набряк м'язових волокон та !нтеретиц!ально! тканини

yashchenko_am@ukr.net

[8, 12, 13]. Ц! зм!ни ноеять дифузний характер, при тривалому переб!гу ппотирозу виникае оеередко-вий, а по™ дифузний ф!броз. При об'ективному до-елщженн! виявляетьея збтьшення розм!р!в еерця, розширення його меж. Збтьшення розм!р!в еерця, набряк кард!омюцит!в та ф!брозн! зм!ни обумовлю-ють порушення передеердно-шлуночково! провщноет! [6, 7, 14].

Оеобливу роль вщграють процееи накопичен-ня продукт!в б!лкового обм!ну - глкозамЫоглкаыв, пох!дних проте!н!в, глюкуроново! та хондро!тине!р-чано! киелот [7]. В!домо, що вуглеводн! залишки як! входять до екладу глкопротешт кл!тин вщграють ключову роль у процееах морфогенезу, забезпечу-ючи м!жкл!тинн! та кл!тинно-матричн! взаемоди [4]. 3м!ни вуглеводного репертуару кттинно! мембрани може призвеети до незворотних наел!дк!в в ембр!-огенез!, розвитку л!зоеомних хвороб чи мал!гн!заци в поетнатальному перюд!. Аналаз динамки екепре-е!! рецептор!в лектин!в на кл!тинних мембранах дозволяв давати вщповщь про р!вень функцюнально! активноет! кл!тин, здатн!еть до м!граци, фагоцитозу, початок незворотних змш та апоптоз [9]. У доетуп-н!й нам науков!й л1тератур1 е поодинок! дан1 про роль гл!коконюгат1в у функцюнальнм активноет! кард1-ом1оцит1в у норм! I на тл! г!пофункц|! щитопод|бно! залози.

Метою роботи було доел!дити загальну мофо-лог!ю та вуглеводн! детермшанти гл!коконюгат!в етруктурних компонент!в м!окарда у контрольних тварин та при екепериментальному г!потироз!.

0б'ект I методи досл1дження. Доел!ди проводили на етатевозртих щурах -еамцях маеою 150180 г, як! були розд!лен! на дв! групи (10 контрольних ! 10 доел!дних). Екзогенний ппотироз !ндукували щоденним введенням з !жею тиреоетатичного препарату мерказол!лу у доз! 7мг/кг маеи т!ла упродовж 30 д!б. Через 30 д!б проводили евтаназ!ю тварин шляхом передозування еф!рного наркозу. Доел!-дження зд!йенювалиеь зг!дно !з оеновними етандар-тами йОР (1996 р.), бвропейеько! конвенцп !з прав людини та бюмедицини в!д 04.04.1997, Гелье!неько! декларац!! Вееев!тньо! медично! аеоц!ац!! !з етичних

л • • 6

ъ ах.Л * v v.-'5 у

Л .Л * , л. i. \ < f

i-W Vr^-* , f • ** 5

J ^ 4 .« . г

»Л. v > чь. * 4.

Рис. 1. Щитопод1бна залоза контрольних та дослщних щур1в. Забарвлення гематоксилшом та еозином.

Зб.:х150.

А - контроль, Б - експериментальний ппотироз.

принцитв наукових медичних дослщжень ¡з залу-ченням людей (1964-2008), Наказу МОЗ Украши № 690 вщ 23.09.2009, та за погодженням з Kомiсieю з бiоетики ЛНМУ iменi Данила Галицького (Протокол № 6 вщ 24.06.2013). Гiстологiчний матерiал (кусочки мiокарда з дiлянки шлуночюв та щитоподiбноí зало-зи) фксували у 4 % нейтральному формалш, зне-воднювали, ущiльнювали i заливали у парафЫ. Зрiзи товщиною 5-7 мкм забарвлювали гематоксилЫом та еозином для загальноУ морфологií. Bуглеводнi детермЫанти глiкоконюгатiв структурних компо-нентiв мюкарда дослiджували методом лектин-пе-роксидазноУ технки з використанням лектинiв LABA (LFuc), HPA(NAcDGal), WGA(DGlcNAc>NeuNAc). Bi-зуалiзацiю рецепторiв лектинiв проводили в системi дiамiнобензидину тетрагiдрохлориду у присутностi пероксиду водню. Для контролю специфiчностi пс-тохiмiчних реакцiй було використано: 1) виключен-ня лектин - пероксидазних кон'юга^в з протоколу зафарбування; 2) перед нанесенням розчину лек-тину, з метою окислення вуглеводних детермЫант глiкополiмерiв, проводили пречнкубацю пстолопч-них зрiзiв 60 хв в 1 % Н1О4 (Reanal, Budapest, Hungary). У першому випадку результати гiстохiмiчноí реакцií були цiлковито негативними, у другому -ютотно редукованi. Окрiм вищеозначеного, в якостi своeрiдного контролю специфiчностi реакцií служило негативне забарвлення окремих кттинних компартментiв на ™i лектино-реактивних структур. Контроль функци щитоподiбноí залози здiйснювали шляхом вивчення морфологи щитоподiбних залоз, пiсля забарвлення препара^в гематоксилiном та еозином, та визначенням гормошв Т3 та Т4 у сироватцi кровi радЫзотопним методом з допомогою стан-дартних наборiв. Морфометричнi дослiдження параметрiв щитоподiбноí залози проводи з використанням комп'ютерно'| програми ImageTool for Windows (version 2.00) з подальшою статистичною обробкою результат з використанням програми EXEL (Windows 2003).

Результати дослщжень та Тх обговорення. У

щурiв дослiдноí групи макроскопiчно щитоподiб-н залози збiльшувалися у 2-3 рази в порiвняннi з контрольноí групою, мiкроскопiчно - тироíднi фолили набували неправильноí складчастоí форми, не мютили колоíду або ж вЫ був присутнiй у малих кшькостях, кубiчний тироíдний епiтелiй контроль-но1 групи (рис. 1А) набував цилЫдрично! форми у дослiдi (рис. 1Б), виявлялися гiперплазiя тироци-тiв та рiзка гiперемiя органа. Aналогiчнi результати морфологи щитоподiбноí залози в нормi та при ек-спериментальному ппотироз^ iндукованому вве-денням мерказолiлу (5мг/кг) спостерiгали [5].

Окрiм того, змЫювалась i висота тироцитiв щитоподiбноí залози. Так, у щурiв контрольноí групи висота тироци^в була в межах 9,31 ± 0,49 мкм, тодi як у дослiдних тварин висота цих кттин дорiвнювала 13,29 ± 0,29 мкм, р < 0,001.

Ппотироз супроводжувався змiною рiвня тиро-íдних гормонiв у сироватцi кровi дослiдних щурiв (Т3 вiд 1,16 ± 0,11 нмоль/л до 1,04 ± 0,13 нмоль/л, р <0,01; та Т4вщ50,0 ± 3,39 нмоль/л до 40,67 ± 3,6 нмоль/л, р < 0,01).

Мiкроскопiчне дослщження стiнки серця показало, що мюкард мае типову будову i утворений кар-дiомiоцитами з оксифшьною цитоплазмою у центрi яких розташовуються ядра веретеноподiбноí форми з невеликою кшькютю гетерохроматину. Мiж карди омюцитами добре видно прошарки сполучноí тка-нини з клiтинними елементами i великою кiлькiстю гемокапiлярiв. Проглядаються i бiльш великi судини, типу артерм, заповненi плазмою кровi та формени-ми елементами кровi (рис. 2 А, В). Слщ зазначи-ти, що при гiпотирозi спостерiгаeться гiперхромiя ядер кардiомiоцитiв, розширення просвiту судин, периваскулярний набряк i незначна Ыфтьтра^я сполучноí тканини лейкоцитами, локально терито-рií скупчення адипоцитiв (рис. 2 Б, Г, Д, Е). Набряк сполучно1 ткинини мiокарда i пперхромю ядер при тиреоíдектомií спостерiгали [2].

1 v>

т i

ь

/А * * АЁ d ' '» i U,' г ffi ч / яГ J W /1 ■/ JTr Al i J¿A wm 'fm

» 1 .1 J 'i' ■ • w ! '1 Mi .'

1 ^rFi Ж1

<: ) К i \ • A

•' i 4 t v ** 4i / Щ

t

7 \ 11 ' J' 'Л ' , fÉ ' * ' 1' « V ' f< 4¡ 1 t 1 /'/'.* w '.J Л ля'*** л .7 J У Wf LMi

F *

jf *

'ф'

у

У ^

■ (1

« ■ ;

'Г.

- 4

г

V-

Г ' £ •

i

. ' » • ГГ „ .

- •• , ' V* ". '- *. *.

Рис. 2. Оглядовг препарати мгокарда, забарвлення гематоксилгном та еозином.

А - контроль Зб.:х150; В - контроль Зб.:х600; Б - (дослщ) Зб.:х150 - лейкоцитарна шфшьтрацгя;

Г - (дослщ) Зб.:х600 - територп адипоцитгв; Д - (дослщ) Зб.:х150 - навколо судин периваскулярний набряк;

Е - (дослщ) Зб.:х600 - набряк гнтерстицгю.

Лектинопстох1м1чш дослщження показали спе- компонентами мюкарда однак у стшщ судин епкар-

циф1чн1сть зв'язування лектишв ¡з структурними да задекларовано пом1тно високу його експресю

компонентами мiокарда (табл.). Рецептори фукозоспецифiчного лектину LABA екс-

Так, у мiокардi тварин контрольно! групи рецеп- понувалися у ендотели судин мкроциркуляторно-

тори лектину WGA асоцшвались з базальною мемб- го русла та у перинуклеарнм зонi кардюмюци^в, а

раною гемокапiлярiв, ендотелieм, перинуклеарною також у ядрах ендотелш ендокарда та ядрах ^¡тин

зоною кардюмюци^в та з внутрiшньою оболонкою пiдендотелiального шару. При експерименталь-

судин мкроциркуляторного русла мiокарда (рис. 3). ному гiпотирозi спостерiгались деякi вiдмiнностi у

Експресш рецепторiв лектину WGA спостеркали в зв'язуваннi лектинiв, так помiрна експресiя рецеп-

ендотелiоцитах синусоТдних гемокапiлярiв печiнки торiв лектину HPA задекларована у перинуклеарнм

[17] та ендотели гемокапiлярiв шюри [16]. Лектин зон кардiомiоцитiв та ядрах ендотелiоцитiв вну-

HPA виявив гомогенне зв'язування з структурними тршньоТ' оболонки вен. У порiвняннi з контрольною

OV

л

>

r ' - 0 s

■ A

S&.;

«

О

m ,

f

»

-V 4/»'

J>

V

e

• > 4

У «dr ;

.f ' i

< I. ~

V

/

N *

Б

■4

^ - - V

4

.4

s ,p

Л v »"ï* 4.

к \

V

V

v

* »V 4.

n \i

* г

& i a»

VI

m

»л

\

/а *

tf rJ

V

ih

/

fj

/

if ,

ж

4S

V »

N -

' "X, cv

Pиc. 3. Eкcпpeciя peцeптopiв лeктинy WGA y cтpyктypниx кoмпoнeнтax мioкapдa. A - кoнтpoль Зб.:х150; B,Ä,e - кoнтpoль Зб.:х600; Б - дocлiд Зб.:х150; Г, E, Ж - дocлiд Зб.:х600.

Taá.Mun 1

BMKopMCTaHi ^eKTMHM Ta Yx cneöM^iHHicTb 3B'fl3yBaHHA. iHTeHCMBHÍCTb 3B'fl3yBaHHA .eKTMHiB

¡3 cTpyKTypHMMM KOMnoHeHTaMM ctíhkm cepua

Ha3Ba .eKTMHy éoro aápeBÍaTypa, BymeBoAHa cneun<£ÍHH¡cTb EHAoTe.ié cyAMH eHAoKapäa EíAoTe.ié cyAMH MioKapAa Kapäio-MioUMTM CyAMHM eniKapAa

K Ä K Ä K Ä K Ä

JleKTH 3o.oToro Ao^y, LABA (Laburnum anagyroides medik) cneun<£ÍHHMé ao LFuc + + + + + + + + + n. H. 3 + + + n. K. + + + + + +

leKTMH BMHorpaAHoro c.MMaKa, HPA (Helix pomatia l.) cneun<£ÍHHMé ao NAcDGal + + + + r. 3. n. H. 3. + + + + + n. e. + + +

leKTMH 3apoAK¡B nweínui, WGA (Wheat germ agglutinin) cneun<£ÍHHMé ao DGlcNAc>NeuNAc + + + 6. M. + + 6. M. + + + n. + + + + + + n. H. 3. + + + n. K. + + H. B. + + + BH. o. + +

npMMiTKa: + + + ¡HTeHcMBHe 3B'n3yBaHHn; + + noMipHe 3B'n3yBaHHn, + c.aáKe 3B'n3yBaHHn, - BiflcyTHe 3B'n3yBaHHn. K-KoHTpo.b, Ä - flocifl (rinoTHpo3). n. - nflpa; n. e. - nflpa eHfloTe.n¡ou,MT¡B; n. k. - nflpa KapflioM¡ou,MT¡B; 6. m. - 6a3a.bHa MeMÖpaHa; bh. o. - BHyTpiwHn oáo.oHKa; r. 3. - roMoreHHe 3B'n3yBaHHn; h. b. - HepBoBi Bo.oKHa; n. h. 3. - nepMHyK.eapHa 3oHa. *BynneBoflHa cneu,M$¡HH¡cTb BMKopMcTaHMx .eKTMHiB noflaHa 3riflHo 3 [4].

rpynoio, ái.bm bmcokoio 6y.a eKcnpecin peuenTopÍB HaápnK i He3HaHHa ÍH^mbTpauin ÍHTepcTMiuiio jieéKo-

.eKTMHy WGA y 6a3a.bHié MeMápaHÍ reMoKani.npiB uMTaMM, .oKa.bHÍ TepMTopií cKynHeHHn aflMnouMTÍB.

Ta nepMHyKneapHÍé 3oh¡ KapAÍoMÍouMTÍB (pMc. 3 B, r, Ha ochobí .eKTMHoricToxÍMÍHHMx flooniflxeHb noKa3aía

E, X), a TaKox peöenTopM öboro .eKTMHy BMnB^n.Mcn y MoflM^iKauin peuenTopÍB .eKTMHÍB b näpax KapAÍoMÍo-

HepBoBMx Bo^oKHax iHTepcTMöira (Ta6^.). 0yK°3°cne- 4mt¡b Ta y eHfloTe.iouMTax cyAMH MÍKpouMpKy.nTopHo-

UM0iHHMM .eKTMH LABA 36epiraB BMcoKy cnopÍAHeHicTb ro pyc.a, ^o BKa3ye Ha 3MÍHy ÍHTeHcMBHocTÍ MeTaáo-

äo eHAoTe.i| cyAMH, a TaK°x He3HaHHy cnopiAHeHicTb .íhhmx npoueciB y KapAÍoMÍouMTax Ta eHAoTe.iouMTax BMnBMB ao nflep KapflioMiouMTiB (Ta6..). ockí.ükm per . . MiKpouMpKy.nTopíoro pyc.a Ha t.í eKcnepMMeHTa.b-uenTopM TMpoiflHMx ropMoHiB .oKa.i3oBaíi b nflpax k1„

. . Horo r¡noTMpo3y. DGlcNAc>NeuNAc-cneöMmiHHMM

tomó Ha T.i r¡noTMpo3y moxtimbí KoHmopMauiMHi 3míhm ,

„ .eKTMH WGA Moxe 6yTM MapKepoM eHAoTe/iíouMTíB.

ix cTpyKTypM 3a yHacTi ByrneBoflHoro KoMnoHeHTa, a ' K K M ^

caMe DGlcNAc Ta LFuc, Ta Bn.MBaTM Ha cMHTe3 aKTM- nepcneKTMBM n°fla*brnMx floc.ifl*eHb. Y nep-

hobmx Ta Mio3MHoBHx ^maMeHTÍB i 3MÍHIOBaTM 0yHKöi- cneK™Bi n.aHyeTbcn npoBecTM .eKTMHoricToxiMiHHi

oía.bíy aKTMBHicTb KapAÍoMÍouMTÍB. floc.iflxeHHn ctíhkm cepun 3 BMKopMcTaHHnM ái.bw

Bmchobok. l~loKa3aHo, ^o npM rinoTMpo3Í cnocTe- WMpoKoí naHe.i .eKTMHÍB pÍ3Hoí Byr.eBoflHol cneuM-

piraeTbcn rinepxpoMÍn nflep KapAÍoMÍouMTÍB, po3WM- ^íhhoctí Ta t.í rino- Ta nnep^yHKuií ^MTonofliáHol 3a-

peHHn npocBÍTy cyflMH MÍoKapfla, nepMBacKy.npHMé .o3M b eKcnepMMeHTÍ.

Literature

1. Balabolkin M. I. Fundamentalnaya i klinicheskaya tirhoidologiya / M. I. Balabolkin, E. M. KlebanovaoBa, - M. : Medicina, 2007. - 816 s.

2. Histologicheskaya kartina miokarda krysy pri khirurgicheskom hypothireose / K. A. Lieva, A. Kh. Kade, S. A. Zanin, A. S. Gu-meniuk // Sovremennyie problemy nauki i obrazovaniya. - 2014. - № 5. - S. 453.

3. Katerenchuk V. I. Sertsevo-sudynni masky hipothyreosu / V. I. Katerenchuk, O. P. Beregova // Vnutrenniaya medicina. -2007. - T. 3, № 3. - S. 26-46.

4. Lytsyk A. D. Lektiny v histochimii / A. D. Lutsyk, Ye. S. Detiuk, M. D. Lutsyk; pod red. Ye. N. Panasiuka. - Lvov : Vysha shkola, 1989. - 140 s.

5. Lutsyk S. O. Experymentalnyi hipothyroidysm obumovliuye posylene exponuvanniaya vuglevodnykh determinant aLFuc, ßDGal ta DGalNAc u nadnyrkovykh zalozakh shuriv / S. O. Lutsyk, A. M. Yashchenko // Svit medycyny ta biologii. - 2012. -№ 2. - S. 123-128.

6. Pan'kiv V. I. Praktychna tyreoidologiya / V. I. Pan'kiv. - Donetsk : Zaslavs'kyi O. Iu., 2011. - 224 s.

7. Prystupiuk O. M. Hipothyreos : ushkodzhenniya organiv i system / O. M. Prystupiuk // Mizhnarodnyi endokrynologichnyi zhurnal. - 2011. - № 4. - S. 104-109.

8. Stechenko L. A. Serdtse pri hipothireose (experimental'noye issledovaniye) / L. A. Stechenko, V. A. Petrenko, T. P. Kuftyriova, A. P. Motuliak [ta in.] // Ivano-Frankovsk. Simfoniya forte. 2008. - 194 s.

9. Tabachniuk N. V. Lektynohistokhimichni doslidzhenniya ta embriogenez / N. V. Tabachniuk, I. Iu. Oliinyk, L. P. Lavriv // Klin-ichna anatomiya ta operatyvna khirurgiya. - 2010. - T. 9, № 3. - S. 95 - 100.

10. Danzi S. Effect of serum T3 on the regulation of cardiac gene expression : role of histone acetylation / S. Danzi, P. Dubon, I. Klein // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2005. - Vol. 289. - P. 1506-1511.

11. Danzi S. Thyroid hormone and the cardiovascular system / S. Danzi, I. Klein // Minerva Endocrinologica. - 2004. - Vol. 29. -P. 139-150.

12. Dillmann W. H. Cellular action of thyroid hormone on the heart / W. H. Dillmann // Thyroid. - 2002. - Vol. 12. - P. 447-452.

316 Bíchmk npo6.neM 6io.noni'i mgamumhm - 2015 - BMn. 2, Tom 3 (120)

13. Kahaly G. J. Thyroid hormone action in the heart / G. J. Kahaly, W. H. Dillmann // Endocrine Rev. - 2005. - Vol. 26. -P. 704-728.

14. Klein I. Thyroid Disease and the Heart (Cardiovascular Involvement in General Medical Condi Conditions) / I. Klein, S. Danzi // Circulation. - 2007. - Vol. 116. - P. 1725-173.

15. Klein I. Thyroid hormone and the cardiovascular system / I. Klein, K. Ojamaa // N. Engl. J. Med. - 2001. - Vol. 344. -P. 501-509.

16. Strus Kh. Influence of maternal experimental hypothyroidism on quantitative-qualitative indicator of rat progeny skin mast cells in age aspect according to histochemical investigation results and on the base of lectins GNA and PNA receptors cytotopography / Kh. Strus, A. Yashchenko, O. Smolkova, O. Nakonechna // Advances in Bioscience and Biotechnology. -2013, Vol. 4. - P. 840-845.

17. Yashchenko A. M. Rat liver carbohydrate alterations sn streptozotocininduced diabetic rats / A. M. Yashchenko, L. V. Pankevych, A. D. Lutsyk // E. J. Anat. - 2012. - Vol. 16. - P. 82-90.

YflK 611. 127 - 018:547. 96]:616. 441-008. 64-092. 9

MOPOO^OriHHI TA nEKTMHOHCTOXIMIHHI XAPAKTEPMCTMKM MIOKAPflA BI.MX HEnIHIMHMX ^yPIB B HOPMI I 3A yMOB EKCnEPMMEHTAnbHOrO nnOTMPO3Y

fl^eHKO A. M., CTpyc X. I., CMO.bKOBa O. B., naHKeBMH n. B.

Pe3№Me. BMBHa.M 3ararnbHy Mop^o/ioriio Ta rniKOKOH'raraTM cTpyKTypHMX K0Mri0HeHTiB MioKapfla Koi-rrpo.nb-hmx Ta flocrniflHMX TBapMH. flocrniflM npoBoflM.M Ha CTaTeBo3pi.MX iiypax -caMu^x Macoi 150- 180 r HKi 6yrnM po3fli.eHi Ha flBi rpynM (10 KoHTpo.bHMX i 10 flocrniflHMx). EK3oreHHMM rinoTMpo3 iHflyKyBarnM iiofleHHMM BBefleH-hhm 3 ixeio TMpeocTaTMHHoro npenapaTy MepKa3o.i.y y flo3i 7Mr/Kr MacM Ti.a ynpofloBx 30 fli6. Hepe3 30 fli6 npoBoflM.M eBTaHa3ii TBapMH iirniaxoM nepeflo3yBaHHH e^ipHoro HapKo3y. TicTo.oriHHMM MaTepia. (KycoHKM MioKapfla 3 fli.^HKM umiyHoHKiB Ta i|MTonofli6Hoi 3a.o3M) ^iicyBarnM y 4 % HePiTparnbHoMy ^opMarnmi. 3pi3M tobiim-hoio 5-7 mkm 3a6apB.iBa.M reMaToKcM.iHoM Ta eo3MHoM flm^ 3ara.bHoI Mop^o.oril. Byr.eBoflHi fleTepMiHaHTM rniKoKoH'roraTiB cTpyKTypHMX KoMnoHeHTiB MioKapfla flocrniflxyBarnM MeTofloM .eKTMH-nepoKcMfla3Hoi TexHiKM 3 BMKopMcTaHHflM rneiKTMHiB LABA (LFuc), HPA(NAcDGal), WGA(DGlcNAc>NeuNAc). Bi3ya.i3auii peuenTopiB .ei-TMHiB npoBoflM.M b cMcTeMi fliaMiHo6eH3MflMHy TeTpariflpoxrnopMfly y npMcyTHocTi nepoicMfly BoflHio. l~loKa3aHo, io npM rinoTMpo3i cnocTepiraeTbca rinepxpoMrn flflep KapflioMiouMTiB, po3i±mpeHHH npocBiTy cyflMH MioKapfla, nepMBacKy.^pHMM Ha6p^K i He3HaHHa iH^rnbTpauifl iHTepcTMuii rnePiKouMTaMM, .oKa.bHi TepMTopii ciynHeHHH aflMnouMTiB. Ha ocHoBi rneKTMHoricToxiMiHHMX floc.iflxeHb noKa3aHa MoflM^iiauifl peuenTopiB rneiKTMHiB b Hflpax KapflioMiouMTiB Ta y eHfloTe.iouMTax cyflMH MiKpouMpKy.^TopHoro pyc.a, |o BKa3ye Ha 3MiHy iHTeHcMBHocTi Me-Ta6o.iHHMX npoueciB y KapflioMiouMTax Ta eHfloTe.iouMTax MiKpouMpKy.^TopHoro pyc.a Ha T.i eKcnepMMeHTa.b-Horo rinoTMpo3y. DGlcNAc>NeuNAc- cneuM^iHHMM rneiKTMH WGA Moxe 6yTM MapKepoM eHfloTe.iouMTiB.

K.roHOBi c.OBa: eKcnepMMeHTarnbHMM rinoTMpo3, MioKapfl, 3ara.bHa Mop^ornorm, rneKTMHoricToxiMm.

yflK 611. 127 - 018:547. 96]:616. 441-008. 64-092. 9

MOPOO.OrMHECKME M .EKTMHOrMCTOXMMMHECKME XAPAKTEPMCTMKM MMOKAPflA BE.blX HE.MHEMHblX KPbIC B HOPME M nPM 3KCnEPMMEHTA.bHOM rMnOTMPEO3E

fl^eHKO A. M., CTpyc X. M., CMO.bKOBa O. B., naHKeBMH n. B.

Pe3№Me. M3yHa.M o6|yro Mop^ornorMio m rniMKoKoHtioraTbi cTpyKTypHbix KoMnoHeHToB MMoKapfla KoHTpo.bHHX m noflonbiTHbix xmbothux. Mcc.efloBaHM^ npoBoflM.M Ha no.noBo3pe.nbix Kpbcax - caMuax MaccoM 150- 180 r, KoTopue 6brniM pa3flerneHbi Ha flBe rpynnbi (10 KoHTpo.bHbix m 10 noflonbiTHbix). 3K3oreHHbiM rMno-TMpeo3 MHflyuMpoBa.M exeflHeBHbiM BBefleHMeM c efloM TMpeocTaTMHecKoro npenapaTa MepKa3o.M.a b flo3e 7Mr/Kr Maccb Te.a Ha npoT^xeHMM 30 cyToK. Hepe3 30 cyToK npoBoflM.M 3BTaHa3Mio xmbothux nyTeM nepe-flo3MpoBKM a^MpHoro HapKo3a. rMcTo.orMHecKMM MaTepMa. (KycoHKM MMoKapfla M3 o6.acTM xe.yfloHKoB m im-ToBMflHoM xe.e3b) ^MKcMpoBa.M b 4 % HeMTpa.bHoM ^opMa.MHe. Cpe3b to.imhom 5-7 mkm oKpaixiMBarnM re-MaToKcM.iHoM m 3o3mhom fl.^ o6|eM Mop^o.orMM. YmeBofliHe fleTepMMHaHTb rniMKoKoHtroraToB cTpyKTypHbx KoMnoHeHToB MMoKapfla Mcc.efloBa.M MeTofloM .eKTMH-nepoKcMfla3HoM TexHMKM c Mcno.b3oBaHMeM .eKTM-hob LABA (LFuc), HPA(NAcDGal), WGA(DGlcNAc>NeuNAc). BM3ya.M3auMi peuenTopoB .eKTMHoB npoBoflM.M b cMcTeMe flMaMMHo6eH3MflMHa TeTparMflpoxrnopMfla b npMcyTcTBMM nepoKcMfla Boflopofla. l~loKa3aHo, hto npM rMnoTMpeo3e нa6nroflaeтca rnnepxpoMMH ^flep KapflMoMMouMToB, pacrnMpeHMe npocBeTa cocyfloB MMoKapfla, nepмвacкynapннм oTeK m He3HaHMTe.bHaa MH^M.bTpauM^ MHTepcTMuM^ .eMKouMTaMM, .oKa.bHHe TeppMTopMM cKon.eHM^ aflMnouMToB. Ha ocHoBe .eKTMHorMcToxMMMHecKMX MeTofloB noKa3aHa MoflM^MKauM^ peuenTopoB .eKTMHoB b ^flpax KapflMoMMouMToB m b aHfloTe.MouMTax cocyfloB MMKpouMpKy.^TopHoro pyc.a, hto cBMfle-Te.bcTByeT o6 M3MeHeHMM MHTeHcMBHocTM MeTa6o.MHecKMX npoueccoB b KapflMoMMouMTax m eHfloTe.MouMTax MMKpouMpKy.^TopHoro pyc.a Ha 0oHe aKcnepMMeHTa.bHoro rMnoTMpeo3a. DGlcNAc>NeuNAc- cneuM^MHecKMM rneiKTMH WGA MoxeT 6bTb MapKepoM aHfloTe.MouMToB.

K^№HeBue c^OBa: aKcnepMMeHTa.bHHM rMnoTMpeo3, MMoiapfl, o6|aa Mop^o.orM^, .eKTMHorMcToxMMM^.

UDC 611. 127 - 018:547. 96]:616. 441-008. 64-092. 9

Morphological and Lectin Histochemical Characteristics of Myocardium of White Nonlinear Rats in Normal and under Experimental Hypothyroidism

Yashchenko A. M., Strus Kh. I., Smolkova O. V., Pankevych L. V.

Abstract. General morphology and glycoconjugates of myocardium structural components has been studied in control and experimental animals. Experiments were performed on mature rats - males with weight 150-180g, who were divided into two groups (10 control and 10 experimental). Exogenous hypothyroidism was induced by daily administration of food thyreostatic drug mercazolilum at a dose of 7 mg / kg body weight within 30 days. After 30 days the animal euthanasia was performed by an overdose of ether anesthesia. Investigations were carried out in accordance with the basic standards GCP (1996), the European Convention on Human Rights and Biomedicine from 04.04.1997, the Helsinki Declaration of the World Medical Association with the ethical principles of scientific medical research involving humans (1964-2008), the Order of the Ministry of Health of Ukraine № 690 from 23. 09. 2009 and in agreement with the Commission on Bioethics of Danylo Halytsky Lviv National Medical University (Protocol № 6 of 24.06.2013). Histological material (pieces of myocardium from ventricular areas and thyroid gland) were fixed in 4 % neutral formalin, dehydrated, compacted and embedded in paraffin. Sections 5-7 |im thick were stained by hematoxylin and eosin for general morphology. Glycoconjugate carbohydrate determinants of myocardium structural components were studied by lectin-peroxidase technique using LABA (LFuc), HPA (NAcDGal), WGA (DGlcNAc>NeuNAc) lectins. Lectin receptors visualization was conducted in 3'3-diaminobenzidine tetrahydrochlo-ride system in H202 presence. For specificity control of histochemical reactions were used: 1) lectin-peroxidase conjugates exclusion from staining protocol; 2) before lection solution application, for oxidation of glycopolymers carbohydrate determinants, pre-incubation of histological slides was conducted during 60 min. in 1 % HIO4 (Reanal, Budapest, Hungary). Function control of thyroid gland was performed by investigation of thyroid glands morphology after staining slides by hematoxylin and eosin, and by determining T3 and T4 hormones in blood serum using radiological method by means of standard sets. Morphometric investigations of thyroid glands parameters were performed by using computer program ImageTool for Windows (version 2.00), followed by statistical processing results using the new EXEL (Windows 2003). It is shown that in hypothyroidism hypechromia of cardiomyocytes' nuclei, expansion of myocardial vascular lumen, perivascular edema and insignificant interstitial infiltration by leukocytes, local area accumulations of adipocytes are observed. Based on lectin histochemical studies it is shown modification of lectin receptors in the nuclei of cardiomyocytes and in endothelial cells of the microcirculatory bed, thus indicating the change of intensity of metabolic processes in cardiac myocytes and endothelial cells of the microcirculatory bed on the background of experimental hypothyroidism. DGlcNAc> NeuNAc-specific WGA lectin may be a marker of endothelial cells.

Keywords: experimental hypothyroidism, myocardium, general morphology, lectin histochemistry.

Рецензент - проф. Б1паш С. М.

Стаття надшшла 09. 03. 2015 р.