CC BY
53
A, Behavior and Your Hearth / M. Friedman, R.H. Rosenman.- New York.- Alfred A.- Knopf, 1974.
11. Nadler, J. Disorders of magnesium metabolism / J. Nad-ler// Med. Clin. North. Am.- 1995.- 24 (3).- 623-641.
THE STRESS HORMONES AND LOCOMOTION SYSTEM PATHOLOGY IN THE OLD PATIENTS
I.O. PROKHORENKO, E.G. ZARUBINA
Samara medical institute «Reaviz»
The influence of stressful situations on the level of adrenaline, noradrenaline and cortisol in blood was studied in the old patients with a certain psychological profile (according to the Cattel's questionnaire) having signs of osteoporosis of various intensity. The intensity of osteoporosis, which was estimated according to suprasonic densitometry of calcaneus, correlated with the kind of stress reaction, level of catecholamines and rate of calcium and magnesium in blood. Different possible mechanisms of the influence of patient’s psycho-physiological characteristics on the development of osteoporosis realized through modified stress hormones spectrum and calcium-magnesium interactions are being discussed. High levels of stress hormones in blood persisting for a long time lead to secondary disorders in mineral metabolism including calcium and magnesium metabolism. The rate of stress hormones depends on the kind of reaction of examined people on different stressful situations and correlates with characteristics of patient’s psychological profile and presence of depression, which indirectly leads to increase of frequency and severity of osteoporosis at people of senior age groups.
Keywords: psychological profile, stress hormones, osteoporosis, regulation of calcium and magnesium metabolism.
УДК 615.262
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КОЖИ МОРСКИХ СВИНОК ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ТРАНСДЕРМАЛЬНОГО ПЛАСТЫРЯ С МЕКСИДОЛОМ
С.О. ЛОСЕНКОВА, С.М. БАЖЕНОВ, Г.Н. ФЁДОРОВ*
С целью изучения изменений структурных компонентов кожи морских свинок, на фоне применения трансдермального пластыря с мексидолом в течение 3 и 5 дней, проведено исследование гистологических препаратов кожи. После применения сконструированного трансдермального пластыря отмечены основные типы индивидуальной реакции животных: утолщение эпидермиса и гипертрофия сальных желёз.
Ключевые слова: Структурные компоненты кожи морских свинок, гистологический препарат, трансдермальный пластырь.
Литературные данные свидетельствуют о том, что разнообразные лекарственные вещества (ЛВ) при трансдермальном применении могут воздействовать на морфофункциональные свойства кожи, проникая в организм через кератиновый слой кожи (поверхность) путём абсорбции, частично через волосяные фолликулы и сальные железы, растворяясь в воде и жирах, подвергаясь сложным физико-химическим изменениям. Неповреждённый кератиновый слой выступает в роли депо, из которого ЛВ проникают глубже в кожу, проходя через роговой слой, эпидермис, они доходят до дермы, где васкулярная сеть переносит их к органам, вызывая системный эффект [1,3,4,5]. Одним из требований к трансдермальным ЛФ является отсутствие раздражающего действия на кожу.
Цель исследования — изучение гистологической структуры и изменений кожи морских свинок на фоне 3 и 5-дневного применения сконструированного трансдермального пластыря с мексидо-лом. Исследования проведены на морских свинках, так как кожа морских свинок очень близка по строению к коже человека [2].
Материалы и методы исследования. Эксперименты поставлены на 12 животных массой 300,0-340,0 грамм. Морские свинки (самки) были разделены на 2 опытные группы по 6 свинок в каждой. Животным опытной группы №1 накладывали транс-дермальный пластырь с мексидоломплощадью 2 см2 с содержанием в нём 8 мг ЛВ с периодичностью один раз в течение 3 дней, а животным опытной группы №2 накладывали трансдермальный пластырь с мексидолом площадью 2 см2 с периодичностью два
* ГБОУ ВПО «Смоленская государственная медицинская академия Мин-здравсоцразвития России», ул. Крупской, д. 28, г. Смоленск, Смоленская область, 214019
раза в течение 5 дней. Поверхность спины свинок всех групп, включая контрольную,условно была разделена на 4 квадранта или зоны: верхняя левая (ВЛ) и правая (ВП), нижняя левая (НЛ) и правая (НП). Каждая зона кожи была очищена от шерсти путём тримингования с последующей обработкой 20% этанолом. На высушенную поверхностьзоны НП опытных групп накладывали трансдермальный пластырь с мексидолом площадью 2 см2, на НЛ зону пластырь, но без ЛВ (зона сравнения). Дополнительно сверху трансдермальный пластырь фиксировали полосками гипоал-лергенного перфорированного пластыря заводского производства. ВЛ и ВП зоны (тримингованные без наложения пластыря) служили контрольными для НЛ и НП зон. Через 3 и 5 дней пластырь удаляли, у животных под внутрибрюшинным наркозом раствором хлоралгидрата в дозе 350 мг/кг забирали 4 кусочка кожи. На раны накладывали швы, используя шёлковые нитки, края раны обрабатывали 5% спиртовым раствором йода. Операционный материал фиксировали в 10% растворе нейтрального-формалина. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, методомпо ван-Гизон.
При светооптическом изучении количественной оценке подвергались три основных части дермы: эпидермис и его производные; придатки дермы (волосяные фолликулы и сальные железы); клетки стромы кожи. Измеряли глубину и длину среза в мкм. В баллах оценивали: выраженность гиперкератоза, папилломато-за, толщину эпидермиса, кустистость расположения волосяных фолликулов (ВФ), количество митозов в волосяных луковицах, количество порочных ВФ, количество фибробластов, выраженность диффузной лейкоцитарной инфильтрации (ДЛИ) стромы, наличие очаговых васкулитов и объём прилежащей скелетной мышечной ткани, количествомиоцитов в сосочковом слое дер-мы.Учитывали общую характеристику эпидермиса, состояние его слоёв, число рядов эпидермоцитов. Морфометрическими методами определяли параметры сальных желёз, максимальный и минимальный диаметр ВФ, состояние сосудов микроциркулятор-ного русла (МЦР) в субэпидермальном слое дермы, расположение и абсолютное количество ВФ в одном срезе, количество волосяных луковиц, корней волоса (КВ) в ВФ, волосяных сумок вокруг волосяных луковиц.
Таким образом, проводили системную полуколичественную (по трёх-бальной шкале) и количественную (подсчёт и измерение) оценкунекоторых гистологических параметров строения кожи. Исследовали 21 первичный абсолютный показатель и 6 расчётных относительных. Результаты запротоколировали в специально разработанных бланках морфометрического исследо-ваниякожи. Полученные результаты обрабатывали с использованием пакета прикладных программ StatGraphics 5.0.
Результаты и их обсуждение. В ходе исследований гистологических препаратов выявлены проявления воздействия транс-дермального пластыря с мексидолом на гистологические структуры кожи морских свинок (табл.).
Таблица
Морфологические изменения кожи морских свинок при применениитрансдермального пластыря с мексидолом в течение 3 и 5 дней
Зона кожи / показатель Зоны кожи спины морских свинок
В.П.(верхняя правая зона контроля В.Л.(верхняя левая) зона контроля Н.Л.(нижняя левая) зона сравнения Н.П.(нижняя правая) зона опытная
1.Толщина эпидермиса, (балл) 0,8±0,2 0,9±0,2 0, 0, 98 2 2 0,9±0,3 1,2±0,4 1,0±0,5 1,5±0,3*
2.Количество волосяных луковиц, (%) 39,0±12,7 39,3±2,3 36,2±8,6 29,3±8,9 4, 7, 32 40,4±8,7 27,6±7,8*
3.Количество отчётливых волосяных сумок, (%) 15,6±5,1 16,3±5,0 13,8±5,7 14,3±5,4 9,0±2,9 18,7±6,5 12,0±4,7 27,3±6,8*#
4. Максимальный диаметр волосяных фолликул, (мкм) 117,5±20,8 111,7±10,3 118,8±17,0 130,0±13,3 108,6±15,5 133,3±22,7 110,0±25,3 151,7±22,4*
5.Количество сальных желёз, % 49,6±12,0 54,2±6,2 50,5±11,8 56,7±4,9 71,6±8,8* 76,5±3,8* 78,6±8,4* 85,8±4,2*#
Примечание: * - (р<0,05) - достоверность отличий от контрольной зоны; # (р<0,05) - достоверность отличий от зоны сравнения. Курсивом отмечены показатели через 5 дней эксперимента.
На срезах всех контрольных зон выявлен умеренный гиперкератоз, эпидермис тонкий, увеличена диффузная лейкоцитарная
инфильтрация, количество волосяных фолликул, волосяных луковиц и сальных желёз обычное (рис. 1). Папилломатоз носил диффузный характер и определённых закономерностей выявлено не было.
Рис.1. Гистологический срез контрольной зоныВП животного 1 опытной группы: умеренный гиперкератоз, незначительное количество сальных желёз. Самка массой 330,6грамм. Увеличение х100, окраска гематоксилином и эозином
В результате исследования отмечены региональные особенности строения кожи морских свинок, обусловленные своеобразием волосяного покрова, его густотой, характером ветвления кровеносных сосудов. На микроскопическом уровне эти особенности выражались различной толщиной эпидермиса, дермы и гиподермы. Толщина кожи в целом на различных участках отличалась в основном за счет слоя гиподермы.
После применения трансдермального пластыря с мексидо-лом, а также без ЛВ в течение 3 дней визуальных признаков отёка, шелушения и покраснения кожи не зафиксировано. В гисто-логическихбиоптатах контрольных зон ВП и ВЛ тонкий срез имел незначительное ороговение, зрелые волосяные фолликулы расположены были часто, лейкоцитов в строме кожи умеренное количество. Гистологический срез нижней левой зоны после 3дневного применения трансдермального пластыря без мексидола представлял собой срез с тонким эпидермисом, с признаками умеренного гиперкератоза (в 16,7% случаев), сальных желёз значительно больше, чем в соответствующей ей контрольной зоне. Зрелые волосяные фолликулы были расположены редко. В строме заметны редкие лейкоциты. В стенках отдельных сосудов микроциркуляторного русла заметны признаки умеренной клеточной продуктивной реакции (в 33,3% случаев).
На гистологических срезах опытной зоны с наложенным на 3 дня трансдермальным пластырем с ЛВ, выявлен тонкий эпидермис. В 33,3% случаев зона эпидермиса была расширена до 46 слоёв клеток. Придатки расположены неглубоко, в строме кожи заметны лимфоциты, плазмоциты, тучные клетки, макрофаги и нейтрофилы. Сосуды микроциркуляторного русла «оживлены». У двух морских свинок данной опытной группы выявлены признаки умеренного продуктивного васкулита.
Рис.2. Гистологический срез опытной зоны НП при 3-дневном применении пластыря смексидолом: умеренная гиперплазия сальных желёз. Самка массой 331,2грамма. Увеличение х200, окраска гематоксилином и эозином
Таким образом, на гистологических срезах кожи после 3дневного применения пластыря с мексидоломи без ЛВ (зоны НЛ и НП) сальные железы встречались чаще и выглядели крупнее, чем в контрольных зонах [2].
Во 2 опытной группе (двукратное наложение пластыря в течение 5-дней) визуально признаков раздражения (отёка, шелушения и покраснения) кожи в зонах НЛ и НП зафиксированоне было.
Гистологические срезы контрольной зоны ВП были представлены кожей и прилегающей подкожно-жировой клетчаткой. Эпидермис с умеренными признаками ороговения представлен 23 слоями клеток с низкой митотической активностью. Волосяные фолликулы были расположены обычно, несколько варьировали по степени зрелости и глубине залегания, незначительное количество перифокально залегающих мелких сальных желёз. В рыхлой соединительной ткани сосочкового слоя очагово и диффузно были заметны лимфоциты, макрофаги, тучные клетки. Сосуды МЦР малокровны.
При исследовании гистологического среза контрольной зоны ВЛ выявлено неравномерное расположение волосяных фолликул, глубина залегания 350 мм. В остальном препарат аналогичен предыдущему. При окраске по ван-Гизон препаратов зон ВП и ВЛ выявлена высокая степень зрелости соединительной ткани.
На гистологическом срезе зоны сравнения НЛ, на которую был наложен трансдермальный пластырь без мексидола в течение 5 дней, придатки кожи (ВФ) были расположены неравномерно и являлись частично незрелыми. Заметно «оживлённый» эпидермис состоял из 3-5 слоёв сочных клеток со светлыми ядрами. В глубине был заметен слой поперечнополосатых мышечных клеток. В сосудах МЦР и перифокально имелись единичные сегментарные нейтрофилы и эозинофилы. Гистологические срезы опытной зоны НП были шире предыдущих срезов, эпидермис также «оживлён» как и в зоне НЛ, зонально расширен до 4-6 слоёв светлых клеток (рис. 3).
Рис.3. Гистологический срез опытной зоны НП при 5-дневном применении трансдермальногомексидола: утолщение эпидермиса. Самка-альбинос массой 340,7грамм. Увеличение х100, окраска по ванн-Гизон
Степень зрелости волосяных фолликулов была невысокой. Фигуры митоза почти не выявлялись, ядрышки были подчёркнуты. Количество и размеры сальных желёз увеличены. В строме немного лимфоцитов, макрофагов и тучных клеток. В сосудах микроциркуляторного русла выявлены признаки очагового умеренного васкулита. Под мышечными волокнами заметны единичные нейтрофилы. В 50% случаев количество лейкоцитов в строме дермы зон НП и НЛ заметно меньше, чем в препаратах контрольных зон. В 33,3% случаев количество лейкоцитов в зонах НЛ и НП, на которые был наложен пластырь, превышало значения данного показателя контрольных зон.
В результате пятидневного наложения трансдермального пластыря на интактную кожу животных (табл.) наблюдали достоверное уменьшение количества волосяных луковиц в зоне НП относительно показателей контрольнойзоны. Максимальный диаметр волосяных фолликул опытной зоны НП достоверно превышал значения контрольной зоны ВП. Под пластырем после применения его в течение 5 дней также наблюдали достоверное увеличение количества отчётливых волосяных сумок относительно контрольной зоны (р<0,05).
Несмотря на неоднозначную реакцию животных, на гистологических срезах зон НЛ и НП после 5-дневного применения трансдермального пластыря без ЛВ, а также с мексидолом в
100% случаев была выражена гипертрофия и гиперплазия сальных желёз, утолщение эпидермиса (табл.), что достоверно отличало исследуемые зоны от контрольных ВП и ВЛ. В контрольных зонах количество лейкоцитов было незначительно больше, чем в опытной зоне и зоне сравнения. Несмотря на это, патологических изменений структуры кожи не выявлено.
Реакция сосудов МЦР на тримингование была заметна у большинства животных на всех 4 зонах. Фаза экссудации через
3 дня сочеталась с фазой пролиферации и далее через 5 дней переходила в фазу фиброзирования кожи. Наличие васкулита на гистологических срезах свидетельствовало об этом. Трансдер-мальный пластырь с мексидолом после наложения его в течение
3 или 5 дней не препятствовал фиброзированию кожи и переходу воспалительной реакции из 2 фазы в третью, что гистологически проявлялось разрастанием коллагеновых волокон. Микроорганизмы с поверхности кожи животного проникают внутрь волосяных фолликулов, поддерживая динамику воспалительной реакции. Согласно литературным источникам, мексидол не обладает антибактериальной и противовоспалительной активностью. Необходимо учитывать, что в период воспалительных изменений в коже, наблюдаемых в результате её тримингования, резорбцион-ные процессы активизируются, при этом проницаемость тримин-гованной кожи животных будет отличаться от нетримингованной кожи человека.
Выводы. Таким образом, результаты исследований указывают на то, что после применения сконструированного трансдермального пластыря с мексидолом с содержанием в 1 см2 2 мг ЛВ в течение 3 и 5 дней возникало 3 основных типа индивидуальной реакции животных, проявляющихся в
изменении строения кожи на регионально различных участках:
1. Выраженное утолщение эпидермиса в 33,3% случаев при
3-дневном применении и в 100% случаев при 5-дневном наложении пластыря;
2. Диффузная лейкоцитарная инфильтрация была характерна для всех исследуемых зон в разной степени, что, вероятно, отражало реакцию кожи животных на тримингование;
3. Количество СЖ в опытной зоне при 3-дневном применении трансдермального мексидола достоверно отличалось от значений контрольных зон, а при 5-дневном от значений контрольной зоны и зоны сравнения.
Литература
1Жучков, С.А. Состояние кератиноцитовинтерфолликуляр-ного эпидермиса при аппликации 13-цис-ретиноевой кислоты (иммуноцитохимический анализ) / С.А. Жучков // Морфология.-2007.- Т. 132.- №4.- С. 68-72.
2.Кулага, В.В. Аллергические заболевания кожи /
В.В.Кулага, И.М.Романенко.- К.: Здоровье, 1997.- 256 с.
3Мизина, П.Г. Чрескожное введение лекарственных средств: современные аппликационные лекарственные формы: Учебное пособие / П.Г.Мизина, В.А.Быков.- Самара, 2004.- 124 с.
4.Яцковский, А.Н. Гистоструктурные и морфометрические проявления дерматотропной активности препарата нафтадерм в эксперименте / А.Н.Яцковский, Т.А.Белоусова, В.И. Ноздрин // Ретиноиды: Сб.ст.- М.: Изд-во ЗАО «Ретиноиды».- 2003.- Вып. 15.- С. 51-60.
5. Histopathological and ultrastructural effects of glycolic acid on rat skin / S. Inan [et al]// ActaHistochem.- 2006.- Vol. 108.-№ 1.- P. Ъ1-41.
MORPHOLOGICAL FEATURES OF THE SKIN OF PORPOISES AT APPLICATION ТРАНСДЕРМАЛЬНОГО OF THE PLASTER WITH MEXIDOL
S.O. LOSENKOVA, S.M. BAZHENOV, G.N. FYODOROV Smolensk state medical academy Minzdravsotsrazvitija of Russia, Smolensk
For the purpose of studying of changes of structural components of a skin of porpoises against application transdermal a plaster with mexidol within 3 and 5 days research of histologic preparations of a skin is carried out. After application designed transdermal a plaster the basic types of individual reaction of animals are noted: a thickening of skin surface and a hypertrophy of sebaceous glands.
Key words: Structural components of a skin of porpoises, a histologic preparation, transdermal a plaster.
УДК 617.764.5-089.819.1
РЕНТГЕНФИЗИОЛОГИЯ СТЕНТИРОВАННОЙ ПОЧКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
С.В. ШКОДКИН*^*, М.И. КОГАН***, С.В. ИВАНОВ****,
И.Б. КОВАЛЕНКО*,**, Ю.Б. ИДАШКИН**, В.В. ФЕНТИСОВ*
Статья посвящена экспериментальному исследованию внутренних мочеточниковых стентов. В ней отражены рентген физиологические изменения верхних мочевых путей на различных сроках дренирования. Полученные данные свидетельствуют о высокой частоте развития обструктивной уропатии и пузырно мочеточникового рефлюкса при использовании внутренних мочеточниковых стентов из полиуретана.
Ключевые слова: мочеточниковый стент, рефлюкс, гидронефроз, пиелонефрит.
Простота, минимальная травматичность и небольшая затратность на инструментальное обеспечение, наряду с высокими показателями качества жизни, делают внутреннее дренирование верхних мочевых путей приоритетной методикой для многих оперирующих урологов [3,5,8]. Риски, связанные с миграцией дренажа при использовании современных стентов, невелики [1,9]. В литературе практически не рассматриваются такие слабые стороны внутреннего дренирования, как обструкция стента, реф-люкс и восходящая инфекция [2,4,7]. В единичных сообщениях [4,6] приводятся данные о негативном воздействии стента на микроциркуляцию в стенке мочеточника и его перистальтику.
Цель исследования — оценить влияние внутреннего дренажа на рентгенфизиологию верхних мочевых путей в эксперименте в зависимости от сроков дренирования.
Материал и методы исследования. Рентгенанатомия и физиология стентированной почки изучена на 10 кроликах самцах породы «Серый великан» в возрасте 6 месяцев и массой 23802560 гр. Перед началом эксперимента животных выдерживали на карантине в течение 7 суток в стандартных условиях вивария, за
4 часа до наркоза животных вели на голоде.
Животным выполнена односторонняя имплантация стента White-star standart фирмы Urotech (ФРГ) наружным диаметром
4 Ch и длиной 8 см. Хиругические вмешательства выполнены комбинированным наркозом (золетил 5 мг/кг и ксилазин 3 мг/кг внутривенно), премедикация - атропин 0,04 мг/кг внутримышечно, интраоперационная антибиотикопрофилактика - цефатоксим 50 мг/кг внутрибрюшинно. Из срединного лапаротомного разреза
4-5 см выделяли мочевой пузырь и правый мочеточник (рис. 1А). Мочу аспирировали, выполняли продольную цистотомию 1 см (рис. 1Б) на 0,5 см выше места впадения мочеточника в мочевой пузырь. Правое устье катетеризировали полужестким проводником 0,0036'' (рис. 1В), по которому устанавливали стент (рис. 1 Г). Цистотомическую рану ушивали наглухо непрерывным однорядным швом моносин 6-0. Визуализацию и стентирование мочеточника проводили при помощи хирургической лупы с 4-кратным увеличением. Лапаротомную рану ушивали без дренажа. Животных выдерживали на голоде в течении 6 часов.
В до- и послеоперационном периоде (14 и 30 сутки) производили экскреторную урографию и рентгеновскую цистомано-метрию (14 сутки) - на ангиографическом комплексе «Omega Digital Cath» в рамках Научно-образовательного центра «Современные медицинские технологии в диагностике, лечении и профилактике социально-значимых заболеваний» НИУ БелГУ.
Инструментальные исследования проводили после интра-назальной анестезии золетилом 5 мг/кг веса животного.
Экскреторная урография: животное фиксировали в
вентральном положении, выполняли обзорную рентгеноскопию. Мочевые пути контрастировали внутривенным введением Ультравист 300 из расчета 0,5 мл на кг веса животного в краевую вену ушной раковины. Регистрировали проекционную морфометрию почек, чашечно-лоханочной системы и различных отделов мочеточника и рентгенфизиологические показатели почечной функции и уродинамики верхних мочевых путей (время визуализации нефрограммы, чашечно-лоханочной системы,
* ФГФОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследова-
тельский университет», ул.Победы, 85, г.Белгород, 308015
ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоаса-фа», улица Некрасова, дом 8/9, г. Белгород, Россия, 308007
ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Нахичеванский пер., 29, г. Ростов-на-Дону, ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, ул. Карла Маркса, 3, г. Курск,
