CC BY
102
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ХОЛОДОВОЙ СМЕРТИ
СТЕФАНЕНКО Е.В.. МЯДЕЛЕЦ О.Д.. КУХНОВЕЦ О.А..
МЯДЕЛЕЦ В.О.
УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский
университет»
Резюме. С целью установления морфологических признаков смерти от общего охлаждения организма исследована кожа от 50 трупов лиц обоего пола, погибших в результате переохлаждения и вскрытых в Управлении по Витебской области ГС МСЭ. В качестве контроля использовали кожу от 10 трупов людей. погибших в результате ДТП и от других причин. не связанных с действием холода. а также кожу 10 здоровых людей-добровольцев. С помощью окраски суданом III изучали распределение липидов. связанных с кожным покровом (липиды жировой ткани. секрета сальных желез. эпидермиса). Клетки Лангер-ганса эпидермиса и эпителия волосяных фолликулов изучали с помощью реакции на АТФазу. Установлено. что при холодовой смерти в адипоцитах жировой ткани снижалось содержание липидов до полного их отсутствия в отдельных клетках. В концевых отделах сальных железах уменьшалась суданофилия с увеличением ее в выводных протоках. В волосяных воронках нарастало количество липидов с уменьшением их содержания на поверхности межфоллику-лярного эпидермиса. В эпидермисе и в эпителии волосяных фолликулов резко уменьшалось количество клеток Лангерганса с появлением в них выраженных дегенеративных изменений.
Ключевые слова: холодовая смерть, кожа, клетки Лангерганса, липиды кожи.
Abstract. For to reveal the reason of the death because of general cooling of the organism we studied the skin of 50 corps of both sexes dead as a result of general cooling and post-mortem examinated in Vitebsk department of Criminal Medicine. We used the skin of 10 people dead because of car accidents and other reasons as well as healthy persons for the control. Using sudan III staining we studied the distribution of lipids connected with skin (lipids of hypoderma. secrets of sebaceous glands. epidermis). Langerhans cells of the epidermis and epithelium of the hair follicles where studied using reaction for ATP enzyme. It was found that in general cooling the quantity of lipids was lower and even absent in some cells. In the upper parts of sebaceous glands sudanophilia is observed. In the hair follicles the quantity of lipids was higher and decreased in the surface of inferfollicular epidermis. In epidermis and epithelium of hair follicles the number of Langerhans cells was decreased and degenerative changes where seen.
Адрес для корреспонденции: Республика
Беларусь. 210009. г. Витебск. пр-т Фрунзе. д.59. кв.71. тел. 24-32-65. - Стефаненко Е.В.
Смерть от холодового воздействия - достаточно частое явление в наших широтах. Однако ее точная диагностика до сих пор затруднительна. Как указывают Г.А. Акимов и соавт. [2]. общее охлаждение организма (замерзание) встречается часто в виде самостоятельного заболевания или сопутствующего патологического процесса. и анализ протоколов судебно-медицинских вскрытий погибших от глубокого охлаждения показывает. что оно. к сожалению. часто не диагносцируется вследствие недостаточной осведомленности врачей.
Смерть от охлаждения наблюдается не только во время наибольшего понижения температуры воздуха. По данным цитируемых авторов. 16% случаев смерти от охлаждения приходится на осенние. более 19% - на весенние месяцы. Кроме того. они встречаются даже в летнее время года - в июле и августе [2].
Общее охлаждение организма протекает различно в зависимости от его состояния. Оно определяется имеющимися патологическими состояниями. оказывающими существенное влияние на процесс охлаждения и его исход. Кроме того. те или иные патологические состояния могут присоединяться в процессе охлаждения. К таковым относятся холодовой шок. ушибы. контузия. кровопо-тери. асфиксия от попадания в воздухоносные пути воды. пищевых масс и др.
Патологоанатомические данные об изменениях в организме при охлаждении являлись долгое время основными в установлении диагноза. Вместе с тем. они не всегда были безупречными по ряду причин [2. 9]. Это связано с тем. что условия охлаждения и его сроки известны далеко не всегда. Время. проходящее между моментом смерти. обнаружением трупа и вскрытием может варьировать в широких пределах. Может наблюдаться сочетание посмертных изменений от действия холода и признаков трупного разложения. связанного с оттаиванием. что существенно искажает картину прижизненных изменений. Кроме того. как указывалось выше. смертельное охлаждение может протекать на фоне различных патологических процессов. Все это является причиной противоречивости данных. полученных при гистологическом исследовании.
Несмотря на то. что изучение влияния низких температур на организм человека и животных осуществляется на протяжении более 100 лет. морфологические изменения в коже при охлаждении организма изучены недостаточно [2.
4. 5. 8]. Вместе с тем. кожный покров представляет собой систему экзоорганов. которые в качестве одной из наиболее важных с позиций жизнеобеспечения функций имеют функцию поддержания температурного гомеостаза. в том числе и при понижении температуры окружающей среды. Следовательно. при реализации этой функции в условиях холодового воздействия в структурах кожи должны запечатлеться изменения. возникающие как результат напряжения терморегуляционной функции. как проявление холодового стресса. Работ. посвященных детальному изучению изменений структур кожи при смертельной гипотермии. мало. и выполнены они были достаточно давно. Потому сложилась ситуация. когда объект. который должен был бы испытывать на себе наиболее пристальное внимание при изучении морфологических критериев смерти от гипотермии. оказался наименее изученным. Полученные немногочисленные критерии. которые можно было бы отнести к специфическим для холодовой смерти. не изучаются всесторонне. используются недостаточно широко. а. кроме то-
го. не являются постоянными. Так. В.И. Кадакас [4. 5] после кратковременного холодового воздействия на кожу крыс и морских свинок (аппликация твердой углекислоты) обнаружил появление в базальном слое эпидермиса и концевых отделов сальных желез двух- и многоядерных клеток. Количество ядер в клетках достигало больших значений (до 100). причем эти клетки появлялись спустя определенное время после холодового воздействия. Дальнейшее изучение данного феномена не проводилось. поэтому неизвестно. появляются ли эти клетки в более ранние сроки. в частности. в момент непосредственного действия холодового фактора.
М.И. Касьянов [7] показал. что в коже погибших от холода людей образуются пенистые белковые структуры между клетками базального слоя и в протоках сальных и потовых желез. Он считает этот признак специфичным для охлаждения организма. В клетках эпидермиса автор отмечал очаги некроза. между которыми и дермой формировались полости с серозной жидкостью и единичными лейкоцитами. В дерме также наблюдался отек и значительные изменения кровеносных сосудов с распадом форменных элементов крови и повреждением внутренних оболочек стенок артериол. Г.Н. Клинцевич [8] находил у погибших от общего охлаждения отслоение эпидермиса.
Других работ. посвященных морфологическим изменениям в коже людей. погибших от глубокого охлаждения. обнаружить не удалось. Вместе с тем. представляется интересным изучение такой интересной популяции клеток эпидермиса. как клетки Лангерганса. Как показано в собственных исследованиях [11. 13. 14. 15]. при общей глубокой гипотермии крыс в эпидермисе происходят существенное снижение количества клеток Лангерганса и изменение их морфологии. сохранявшиеся длительное время (до 15 сут) в постгипотермическом периоде. Эти изменения. будучи скрупулезно изученными при холодовой смерти людей. возможно. могли бы стать одним из значимых критериев таковой. однако до сих пор детально не изучались.
Хорошо известно значение жировой ткани и содержащегося в ней жира для поддержания температурного гомеостаза организма. В коже жир находится. во-первых. в жировой ткани дермы и гиподермы. во-вторых. является секретом сальных желез (кожное сало). В-третьих. жироподобные вещества образуются в результате кератинизации клеток эпидермиса и накапливаются в роговом слое. Если жир жировой ткани играет в терморегуляции двойную роль (термоизоляционную и теплопродуктивную). то кожное сало. растекаясь после секреции по поверхности кожи. а также липиды рогового слоя осуществляют достаточно эффективную термоизоляцию. Мы не нашли в доступной литературе сведений об изменениях со стороны белой жировой ткани. сальных желез и кожного сала при холодовой смерти.
Целью данной работы явилось изучение изменений популяции жиросодержащих и жиропродуцирующих структур кожи (жировая ткань. сальные железы. жиры рогового слоя эпидермиса) клеток Лангерганса (КЛ) эпидермиса и эпителия волосяных фолликулов при холодовой смерти.
Методы
Исследована кожа от 50 трупов лиц обоего пола. погибших в результате переохлаждения и вскрытых в Управлении по Витебской области ГС МСЭ. В качестве контроля использовали кожу от 10 трупов людей. погибших в результате ДТП и от других причин. не связанных с действием холода. а также кожу 10 здоровых людей-добровольцев. От трупов кусочки кожи получали при вскрытии из межлопаточной и эпигастральной областей. У добровольцев кожу забирали путем трепанобиопсии под местной анестезией. Местом взятия служила область левого предплечья. Материал фиксировали в 10% формалине и заливали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Для исследования содержания в структурах кожи липидов использовали нефиксированный материал. готовили криостатные срезы и окрашивали их суданом III. На криостатных срезах выявляли клетки Лангерганса эпидермиса (КЛЭ) и эпителия волосяных фолликулов (КЛВФ) по методу Вакстейн-Мейзель-Робинс-Брендон в прописи О.Д. Мядельца [12]. С помощью морфометрической сетки Автандилова подсчитывали количество КЛ в эпидермисе и эпителии наружного корневого влагалища волосяных фолликулов.
Результаты и обсуждение
В контроле поверхность кожи была относительно ровной. лишь в отдельных участках формировались небольшие возвышения и впадины. В дерме отмечалось умеренное полнокровие артерий. Сосуды микроциркуляторного русла были более выражено полнокровными (Рис. 1. а). Встречающиеся артериоло-венулярные анастомозы были закрытыми. В мышцах. поднимающих волосы. отсутствовали признаки сокращения: они были удлинены. гладкие миоциты имели веретеновидную форму (Рис. 1.б). Отмечалось полнокровие капиллярного русла вокруг концевых отделов сальных и потовых желез.
Жировая ткань выявлялась в виде долек в гиподерме (Рис. 1. в). а также в виде небольших муфт вокруг концевых отделов сальных (Рис. 1. г) и потовых (Рис. 1. д) желез. волосяных фолликулов. сосудов глубокого и подсосочкового поверхностного сосудистых сплетений (Рис. 1. е). Интенсивность окраски жировых клеток суданом во всех случаях была максимальной.
г) д) е)
Рис. 1. а - полнокровие сосудов микроциркуляторного русла в контроле; б - контроль: мышца, поднимающая волос, в расслабленном состоянии: гладкие миоциты удлинены, имеют веретеновидную форму; в - контроль: практически все адипоциты подкожной жировой ткани содержат большое количество жира; г - дольки жировой ткани в вокруг фолликулярно-железистого комплекса, контроль; д - жировая ткань в виде небольших муфт вокруг концевых отделов потовых желез, контроль; е) жировая ткань вокруг сосудов подсосочкового поверхностного сосудистого сплетения, контроль. Окраска суданом III. Увел.:
а, б, г, д - х100, в, е - х400.
В сальных железах окраска появлялась на уровне супрабазальных рядов эпителия концевых отделов и быстро нарастала до достижения максимальных значений при удалении от базального слоя (Рис. 2. а). В выводных протоках интенсивность окрашивания была ниже (Рис. 2. б).
В волосяных воронках выявлялось умеренное количество липидов с максимальным окрашиванием (Рис. 2. в). При этом жир располагался и в роговой пробке. закрывающей вход в воронку. и на ее поверхности. На поверхности эпидермиса обнаруживалась выраженная пленка жира со значительной интенсивностью окраски. Жир пропитывал расслоенный на пластины роговой слой на всю толщину. а также находился на его поверхности (Рис. 2. г). В коже спины все эти явления были выражены в меньшей степени. чем в коже живота (Рис. 2. д. е).
Рис. 2. а - липиды в концевых отделах сальных железах в контроле: окрашивание появляется на уровне супрабазальных рядов эпителия концевых от-
делов и быстро нарастает до достижения максимальных значений при удалении от базального слоя; б - содержание липидов в выводных протоках в контроле ниже. чем в концевых отделах; в - в волосяных воронках в контроле определяется умеренное количество липидов с максимальным окрашиванием; г - выраженная пленка жира со значительной интенсивностью окраски на поверхности эпидермиса и в роговом слое в контроле; д - поверхностные липиды кожи спины; е - поверхностные липиды кожи живота. Окраска суданом III и гематоксилином. Увел.: а-д - х400. е - х200.
При исследовании образцов кожи. полученных от трупов людей. погибших в результате переохлаждения организма. было установлено следующее. В результате холодовой контракции кожи ее поверхность становилась более рельефной. чем в контроле. В эпидермисе появлялись небольшие округлые полости (пузыри). расположенные выше базального слоя (Рис. 3. а). Эти пузыри были различных размеров и иногда множественными. Во всех случаях они имели различную форму и лучше выявлялись на свежезамороженных срезах. Обычно дном пузыря являлся базальный слой эпидермиса. но в отдельных случаях они возникали и внутри шиповатого слоя. В эпидермисе кожи живота пузырей было больше. чем в коже спины. что может быть объяснено более прочными межкератиноцитарными связями в эпидермисе кожи спины [10]. Обнаруживались также и субэпидермальные пузыри. которые чаще имели большие размеры. чем внутриэпидермальные пузыри (Рис. 3. б). Так же. как и внутри-эпидермальные. субэпидермальные пузыри чаще встречались в коже живота.
Причиной этого может быть более прочное дермо-эпидермальное соединение в указанной зоне [10. 15]. В дерме пузыри выявлялись вокруг выводных протоков и концевых отделов сальных желез (Рис. 3. в). Таким образом. собственные исследования подтверждают данные. полученные М.И. Касьяновым [7].
г) д) е)
Рис. 3. а. - внутриэпидермальный пузырь в коже человека. погибшего от общего охлаждения; б - субэпидермальный пузырь в коже человека. погибшего от общего охлаждения; в - дермальные пузыри вблизи концевых отделов сальных желез в коже человека. погибшего от общего охлаждения; г - спазм сосудов поверхностной сосудистой сети в коже человека. погибшего от общего охлаждения; д - полнокровие артериолы артериоло-венулярного анастомоза: справа артериола. слева - венула; е - спазм мышцы. поднимающей волос. в коже человека. погибшего от общего охлаждения. Реакция на АТФазу. Увел.
Х400.
Большинство сосудов поверхностной и глубокой дермальных сетей было спавшееся (Рис. 3. г). малокровно. тогда как встречающиеся артериоло-венулярные анастомозы. наоборот. были умеренно полнокровными (Рис. 3. д). Встречались спазмированные мышцы. поднимающие волос (Рис. 3. е).
При окраске суданом обнаружено. что в островках и дольках жировой ткани появлялись группы неокрашенных или слабоокрашенных адипоцитов (Рис. 4. а). В концевых отделах сальных желез уменьшалась окраска на жиры. тогда как в выводных протоках она несколько увеличивалась (Рис. 4. б. в). Обращало на себя внимание то обстоятельство. что в волосяных воронках резко увеличивалось содержание интенсивно окрашенных липидов. причем увеличение было связано с липидами. свободно располагающимися на поверхности роговой пробки. тогда как объем связанных с роговой пробкой липидов не изме-
нялся (Рис. 4, г,д). В то же время жировая пленка на поверхности рогового слоя межфолликулярного эпидермиса и в нем была существенно меньшей толщины, а чаще полностью отсутствовала на значительных пространствах (Рис. 4, е). Эти изменения были выражены как в коже спины, так и кожи живота.
Рис. 4. а - появление в жировой дольке большого количества адипоцитов. не содержащих жировых включений при холодовой смерти; б - уменьшение интенсивности окрашивания на жир в концевых отделах сальных желез при холодовой смерти; в - увеличение окрашивания на жир в выводном протоке сальной железы при холодовой смерти; г - увеличение содержания липидов на поверхности роговой пробки в волосяной воронке при холодовой смерти; д - липиды. связанные с роговой пробкой. закрывающей волосяную воронку. при холодовой смерти; е - крайне незначительное содержание липидов на поверхности рогового слоя межфолликулярного эпидермиса при холодовой смерти. Окраска суданом III и гематоксилином. Увел.: а. в. г - х400; б - х100; е - х200.
Уменьшалось количество жира в жировой ткани. окружающей производные кожи и сосудистые сплетения. Вокруг сосудов поверхностной дермальной сети появлялось значительное количество адипоцитов. лишенных жировых включений (Рис. 5. а). Аналогичная картина наблюдалась и вокруг концевых отделов желез. Отдельные концевые отделы этих желез практически полностью лишались жировых муфт. Вокруг других концевых отделов эти муфты существенно уменьшались (Рис. 5. б).
Аналогичная картина наблюдалась вокруг встречавшихся фолликулярножелезистых комплексов. В эти комплексы входят волосяные фолликулы. саль-
ные и потовые железы. В норме вокруг таких комплексов скопления жировых клеток особенно значительное. В коже людей. погибших от общего охлаждения. наблюдалось существенное уменьшение количества жира из-за потери его многими адипоцитами (Рис. 5. в. г).
Рис. 5. а - появление адипоцитов. не содержащих жировых включений. вокруг сосудов поверхностной дермальной сети в коже больных. погибших в результате общего охлаждения организма; б - существенное увеличение ади-поцитов. не содержащих жировых включений. вокруг концевых отделов потовых желез в коже больных. погибших в результате общего охлаждения организма; в - существенное увеличение адипоцитов. не содержащих жировых включений. вокруг фолликулярно-железистых комплексов в коже больных. погибших в результате общего охлаждения организма; г - существенное увеличение адипоцитов. не содержащих жировых включений. вокруг волосяных фолликулов в коже больных. погибших в результате общего охлаждения организма. Окраска суданом III и гематоксилином. Увел.: а - х400; б-г - х200.
Таким образом. липиды. содержащиеся в структурах кожи. играют важную метаболическую и термоизоляционную роль. В связи с этим компоненты жировой ткани локализованы прежде всего вокруг важнейших структур: концевых отделов желез. сосудистых сетей. волосяных фолликулов и фолликулярножелезистых комплексов. участвующих не только в росте и регенерации волос. но и в посттравматической регенерации эпидермиса. Синтезируемый сальными железами жир периодически поступает в выводные протоки. а затем в силу своей текучести распространяется по поверхности эпидермиса. покрывая и. оче-
а) б)
в)
видно. частично пропитывая роговой слой. что способствует удержанию жировой пленки на поверхности кожи. Эта пленка существенно уменьшает теплопо-тери организма [15].
Холодовой фактор вызывает в коже замерзающих людей важные адаптационные перестройки: перераспределение кровотока таким образом. что поверхностные участки лишаются притока крови из-за спазма сосудов и направления кровопотока через шунты - артериоло-венулярные анастомозы. Это позволяет уменьшить теплопотери «ядра». т.е. внутренних органов. и замерзание организма. Вместе с тем. в результате анемии поверхностных отделов кожи они (в первую очередь на открытых ее участках) могут подвергаться отморожениям. Одновременно с перераспределением кровотока усиливается липолиз жира в жировой ткани. что ведет к выделению энергии. препятствующей быстрому охлаждению организма. В результате усиленного липолиза появляются адипо-циты. не содержащие жира. Одновременно усиливается секреция жира сальными железами. Он поступает в протоки желез. фолликулярный канал и далее в волосяную воронку. чему содействует сокращение мышц. поднимающих волос. Интенсификация липолиза и секреции сальных желез имеет место. надо полагать. на начальных этапах действия холодового фактора. Со все большим снижением температуры тела. как известно. происходит холодовая ингибиция ферментов. в том числе ферментов липолиза и ферментов. осуществляющих деградацию себоцитов сальных желез и превращение их в кожное сало. Отсюда следует ожидать постепенное угасание интенсивности липолиза и секреции сальных желез. параллельное снижению температуры тела замерзающих людей. Кроме того. как известно. текучесть жира под действием холодового фактора снижается. и он скапливается в области волосяных воронок. тогда как основная площадь поверхности эпидермиса оказывается лишенной термоизоляционной жировой пленки. Это в определенной степени должно. хоть и незначительно. способствовать замерзанию.
Как известно. помимо двух основных источников жиров они могут продуцироваться и эпидермисом в процессе его ороговения [15.16]. но их объем зависит от того. имеются или отсутствуют в данном участке кожи сальные железы. При их наличии доля липидов. продуцируемых эпидермисом. весьма мала. но может быть существенной при отсутствии желез. У. Нобл [16] приводит следующую цифру: на коже лба количество эпидермальных липидов варьирует от 5 до 10 мкг. т.е. является ничтожно малым. По данным К. А. Калантаевской [6]. кожа лба относится к области. содержащей большое количество сальных желез (от 72 до 162 на 1 кв. см). В коже спины. груди и живота плотность указанных желез ниже. в среднем около 40-60 на 1 кв. см. Следовательно. в этих областях можно ожидать наличие большей фракции эпидермальных липидов. чем в коже лба. Эти липиды пропитывают роговой слой эпидермиса. входя в его состав. тогда как липиды. находящиеся на поверхности. являются продуктом сальных желез.
Процессы ороговения эпидермиса являются достаточно протяженными во времени. Следовательно. можно предположить. что при охлаждении кожи и организма в целом в первую очередь происходит усиление отделения из сальных
желез кожного сала. синтезированного до этого и депонированного в них. а процессы биосинтеза новых порций секрета и рогового слоя требуют большого времени и. очевидно. не имеют ощутимого значения. Кроме того. при охлаждении интенсивность биосинтетических процессов существенно замедляется или полностью прекращается. Как указывает У.К. Нобл [16]. локальные изменения температуры на 1 градус изменяет продуктивность сальных желез на 10%.
Рис. 6. а - клетки Лангерганса в коже здоровых людей-добровольцев; б -клетки Лангерганса в коже трупов людей. погибших от причин. не связанных с действием холодового фактора; в - клетки Лангерганса в эпителии наружного корневого влагалища в коже здоровых людей-добровольцев; г - клетки Лангер-ганса в области волосяной воронки кожи здоровых людей-добровольцев; г -существенное. иногда до полного отсутствия. уменьшение клеток Лангерганса в коже людей. погибших от общего охлаждения; е - существенное уменьшение количества клеток Лангерганса при увеличении их размеров. уменьшении количества отростков и увеличении активности АТФазы в коже людей. погибших от общего охлаждения организма. Реакция на АТФазу. Увел.: а - х100. б-е -
х400.
КЛЭ в коже людей-добровольцев располагались чаще в нижних рядах шиповатого слоя. но отдельные клетки лежали и в базальном слое. Они имели выраженную отростчатую форму и при помощи отростков часто контактировали между собой. У многих клеток отростки имели вертикальное направление. достигали зернистого слоя. где заканчивались пуговчатыми утолщениями. Некоторые клетки посылали свои отростки к базальному слою. а также в подле-
жащую дерму. где формировали связи с гемокапиллярами сосочкового слоя. Характерным являлось невыраженность ярусности расположения клеток. т.е. локализации их на разных уровнях. Клетки располагались преимущественно в один ряд. и лишь в отдельных случаях могли формировать два неотчетливых ряда. Количество КЛЭ составляло в среднем 675.9 кл/кв.мм. Активность АТФа-зы в КЛЭ была высокой. иногда максимальной (5 усл. ед.). причем в большинстве случаев клетки окрашивались полностью (Рис. 6. а. б).
Клетки Лангерганса волосяных фолликулов (КЛВФ) в условиях нормы располагались и в базальном. и в супрабазальных слоях наружного корневого влагалища. Таким образом. сохранялась ситуация. обнаруживаемая в интерфолликулярном эпидермисе. Клетки имели строение. аналогичное таковому КЛ эпидермиса (Рис. 6. в. г). Активность фермента в перикарионах клеток была высокой. однако при удалении клеток от базальной мембраны в некоторых случаях была значительно ниже. чем в клетках. расположенных базально и супра-базально. В КЛВФ часто отчетливо контурировало ядро из-за более низкой интенсивности АТФазы. В некоторых случаях клетки располагались в базальном слое очень плотно. давая сплошную линию. Отростки клеток иногда проникали в дерму и вступали в контакт с капиллярным руслом. В то же время. с клетками контактировали проникающие в наружное корневое влагалище нервные волокна.
Особенно высокая плотность клеток Лангерганса наблюдалась в эпидермисе волосяной воронки (Рис. 6. г). Здесь они формировали небольшие скопления. Как известно. клетки Лангерганса являются производными стволовой кроветворной клетки. Их непосредственными предшественниками являются моноциты крови. Поскольку волосяная воронка является входными воротами для антигенов. в том числе и микроорганизмов [15. 16]. то увеличение количества антигенпредставляющих клеток в выстилающем ее эпителии может иметь большое значение для реализации иммунных процессов.
Нам не удалось получить срезы на уровне припухлости наружных волосяных влагалищ. которая является его иммунологически привилегированной зоной. однако показано. что количество клеток Лангерганса снижается по направлению к более глубоким его отделам.
КЛЭ кожи трупов людей. погибших от общей гипотермии. претерпевали выраженные изменения. Происходило резкое уменьшение их числа. клетки теряли отростки. округлялись. иногда существенно увеличивались в размерах и давали максимальную активность АТФазы в перикарионе (Рис. 6. д). Отмечалось прокрашивание продуктом реакции всего тела клетки вместе с ядром. Увеличение размеров клеток и повышение в них активности фермента может быть связано с сокращением и исчезновением отростков и перемещением АТФазы в перикарион. Это приводило к образованию большого количества продукта реакции (нитрата свинца). который маскировал клеточное ядро.
На значительных участках эпидермиса клетки Лангерганса отсутствовали полностью. Вместо них выявлялась мелкая зернистость коричневого или черного цвета. Эта картина может свидетельствовать о распаде клеток под действием холода. В тех участках эпидермиса. где обнаруживались пузыри. КЛ также от-
сутствовали (рис. 3. а). Подсчет КЛ показал. что в коже живота их число со-
22 ставляло 67.3 кл/мм . а в коже спины - 59.9 кл/мм . При этом различия между
показателями числа клеток в эпидермисе кожи контрольных лиц и людей. погибших от охлаждения. были достоверными (Р<0.001). тогда как различия между количеством их в эпидермисе кожи живота и спины у людей. погибших от общей гипотермии. были недостоверными (Р>0.05).
КЛ волосяных фолликулов кожи людей. погибших от общей гипотермии. претерпевали похожие изменения. Происходило существенное уменьшение их количества вплоть до полного исчезновения и образования мелкозернистого темноокрашенного материала (Рис. 6. е). Сохранившиеся клетки практически полностью теряли отростки. увеличивались в размерах и приобретали интенсивную гомогенную окраску перикариона без просветления на месте ядра. Степень выраженности изменений КЛ в коже живота и спины была недостоверной.
Таким образом. холодовой фактор приводит к существенным изменениям в популяции клеток Лангерганса кожи. Эти изменения носят как качественный. так и количественный характер. Это подтверждает установленный ранее факт высокой чувствительности данных клеток к холоду [11]. Как известно. КЛ имеют костномозговое (моноцитарное) происхождение и являются антиген-представляющими клетками [15]. При этом в эпидермисе находятся так называемые незрелые КЛ. Их окончательное созревание происходит в регионарных лимфоузлах. Эти клетки обладают повышенной способностью к миграционным процессам. в ходе которых у них постоянно формируются и исчезают многочисленные отростки. И КЛЭ. и КЛВФ при помощи отростков могут связываться с кровеносным микроциркуляторным руслом дермы. Возможно. данное обстоятельство отражает факт происходящих в данный момент миграционных процессов. Исчезновение отростков КЛЭ и КЛВФ может свидетельствовать о проявлении их высокой реактивности. т.е. являться закономерной реакцией на экстремальный фактор. имеющей место и в условиях нормы. В литературе описано исчезновение отростков клеток Лангерганса и при действии ряда других внешних факторов [15].
Заслуживает внимания и вопрос сохранности КЛ в посмертном периоде. Этот вопрос недостаточно обсужден в литературе. Имеется лишь одна работа. посвященная данному вопросу [14]. В работе была исследована кожа живых людей различного пола и возраста и 85 трупов с различным временем от момента смерти до вскрытия (получения материала): от нескольких часов до 45 сут после смерти. Кожа от живых лиц получена во время оперативных вмешательств. причинами которых являлись: рак легкого. вентральная грыжа. гамар-тома легкого. острый холецистит. язвенная болезнь 12-перстной кишки. меланома кожи. генерализованная форма лимфосаркомы. рак молочной железы. Возраст больных составлял от 44 до 77 лет. Взятие материала во всех этих случаях производилось из места операционного разреза. Трупная кожа забиралась во время вскрытий в морге Витебского бюро судебно-медицинской экспертизы. Причины смерти были следующие: внезапная смерть от сердечно-сосудистой недостаточности. механическая асфиксия. отравление этиловым алкоголем и суррогатами алкоголя. общее охлаждение организма и др. Условия. в которых
находились трупы до вскрытия. также различались: комнатная температура. в ледяной воде. при различной температуре воздуха. а также в замерзшем состоянии. Взятие кожи от каждого трупа производилось в межлопаточной области.
Исследования показали. что эпидермис обладает высокой устойчивостью к процессам аутолиза и гниения. При изучении кожи живых людей и трупов людей. страдавших перед смертью тяжелыми заболеваниями. приведшими к дистрофии. отмечалось снижение количества КЛ. их отростков и активности в них АТФ-азы. В коже трупов лиц с высоким содержанием алкоголя в крови отмечались повышение активности АТФ-азы и высокая сохранность КЛ. Привлекает внимание увеличение активности АТФ-азы и количества отростков КЛ на 3-и сутки посмертного периода. В целом с 1-х по 5-е сут посмертного периода прослеживалась следующая динамика: количество КЛ и их отростков резко снижалось с 1-х по 2-е сут. а затем увеличивалось со 2-х по 3-и. не достигая первоначальных значений. с 3-х по 4-е сут количество КЛ снижалось медленно. при этом количество их отростков продолжало увеличиваться. а позже. на 5-е сут. оба показателя резко падали. Активность АТФ-азы в посмертном периоде снижалась очень медленно. снижение это не отличалось последовательностью. т.к. с 3-их по 4-е сут активность АТФ-азы даже возрастала КЛ являются удобным объектом для количественной оценки состояния кожи в посмертном периоде.
Следовательно. являясь высокореактивными в отношении тяжелых соматических заболеваний. клетки Лангерганса в посмертном периоде отличаются достаточно высокой устойчивостью к аутолитическим процессам. Это обстоятельство особенно важно. поскольку позволяет исследовать данные клетки для диагностики смерти от общего охлаждения в достаточно широких временных пределах после наступления смерти без опасения наложения посмертных изменений клеток на изменения от действия гипотермического фактора.
Заключение
Наряду с существующими специфическими признаками смерти от общего переохлаждения организма имеются сопутствующие морфологические признаки. которые при сопоставлении с обстоятельствами дела. места обнаружения трупа и др. могут помочь судебно-медицинским экспертам наиболее точно установить причину смерти. Таковыми признаками являются: 1) формирование внутриэпидермальных. субэпидермальных и дермальных микропузырей; 2) шунтирование в коже кровотока; 3) активация липолиза и исчезновение жира в адипоцитах жировой ткани подкожной клетчатки. а также жировой ткани. окружающей производные кожи и сосудистые сплетения; 4) нарушение процесса формирования термозащитной жировой пленки на поверхности кожи; деструктивные изменения со стороны клеток Лангерганса.
Клетки Лангерганса являются достаточно устойчивыми к аутолитиче-ским процессам. что позволяет использовать изменения в их популяции для диагностики смерти. в том числе и от общего охлаждения. в достаточно широких временных пределах после наступления смерти.
Литература
1. Авдеев. М.И. Судебная медицина / М.И. Авдеев. - Москва. 19б0. -С. 195-199.
2. Акимов. Г. А. Общее охлаждение организма / Г. А. Акимов. Н.В.
Алишев. В А. Бернштейн. - М.: Медицина. 1977. - 184 с.
3. Десятов. В.П. Смерть от переохлаждения организма / В.П. Десятов.
- Издательство Томского университета. 1977. - С. 3-128.
4. Кадакас. В.И. Изменения клеток кожного эпителия крыс после кратковременного замораживания / В.И. Кадакас // Архив анат. - 19б8. - Т. 54. № 3. - С. 53-58.
5. Кадакас. В.И. О содержании ДНК в двуядерных и многоядерных клетках. образующихся после кратковременного охлаждения кожи / В.И. Кадакас / Цитология. - 19б9. - Т. 11. № 5. - С. бЗб-б41.
6. Калантаевская. К.А. Морфология и физиология кожи человека / К.А. Калантаевская. - Киев: Здоровья. 1982. - 2б7 с.
7. Касьянов. М.И. Очерки судебно-медицинской гистологии / М.И. Касьянов. - Медгиз. 1954. 210 с.
8. Клинцевич. Г.Н. Поражения холодом / Г.Н. Клинцевич. - Л.: Медицина. 1973. - 214 с.
9. Лушников. Н.А. Аутолиз / Н.А. Лушников. Е.Ф. Шапиро. - М.: Медицина. 1974. - С. 198-200.
10. Михайлов. И.Н. Структура и функция эпидермиса / И.Н. Михайлов.
- М.: Медицина. 1979. - С.239-245.
11. Мяделец. О. Д. Морфофункциональные изменения в коже в норме и при общей глубокой гипотермии у белых крыс разных возрастов / О.Д. Мяделец: дисс. ... канд. мед. наук. - Витебск. 1985. - 245 с.
12. Мяделец. О. Д. Выявление клеток Лангерганса и определение их функциональной активности / О.Д. Мяделец // Материалы Белорусского съезда физиологов. - Минск. 1987. - С. 1б4-1б5.
13. Мяделец. О.Д. Структурные взаимоотношения внутриэпидермаль-ных макрофагов (клеток Лангерганса) с другими компонентами кожи в норме и при измененной реактивности организма / О.Д. Мяделец // Арх. патологию -1993. - Т.55. № 1. - С. 49-52.
14. Мяделец. О.Д. Количественная динамика Клеток Лангерганса эпидермиса в постмортальном периоде / О. Д. Мяделец. В.В. Полчанинова // Вестник Ивановской медицинской академии. - 1997. - Т.2. №4. - С.32-37.
15. Мяделец О. Д. Морфофункциональная дерматология / О. Д. Мяделец. В.П. Адаскевич. - М.: Медицинская литература. 200б. - 734 с.
16. Нобл. У.К. Микробиология кожи человека / У.К. Нобл. - М.: Медицина. 198б. - 493 с.
17. Шигеев. В.Б. Холодовая смерть / В.Б. Шигеев. С.В. Шигеев. Е.М. Колударова. - М.: Медицина. 2004. - 214 с.
