CC BY
7УДК 615.849.12 DOI: 10.29039/2224-6444-2022-12-3-20-27
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СПЕРМАТОГЕНЕЗА У ПАЦИЕНТОВ С COVID-19
Демяшкин Г. А.1, Болдырев Д. В.2, Ночной М. С.1, Вадюхин М. А.1, Щекин В. И.1
'ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет), 119048, ул. Трубецкая, 8 стр.2, Москва, Россия
2ГБУЗ Городская клиническая больница имени В.П. Демихова Департамента здравоохранения города Москвы, Московский клинический центр инфекционных болезней «Вороновское», 109263, ул. Шкулева, 4, Москва, Россия
Для корреспонденции: Демяшкин Григорий Александрович, к.м.н., заведующий лабораторией гистологии и иммунногистохимии ИТМиБ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова (Сеченовский Университет); e-mail: dr.dga@ mail.ru
For correspondence: Grigory Demyashkin, PhD, Head of Department of Histology and Immunohistochemistry, ITM of I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), e-mail: dr.dga@mail.ru
Information about authors:
Demyashkin G. A., https://orcid.org/0000-0001-8447-2600 Boldyrev D. V., https://orcid.org/0000-0002-4548-5430 Nochnoy M. S., https://orcid.org/0000-0003-0057-9561 Vadyukhin M. A., https://orcid.org/0000-0002-6235-1020 Shchekin V. I., https://orcid.org/0000-0003-3763-7454
РЕЗЮМЕ
В феврале 2020 года ВОЗ была объявлена пандемия SARS-CoV-2. В настоящее время в мире зарегистрировано 219 млн. случаев этого заболевания и 4,5 млн. смертей. Согласно литературным данным, существуют прямые доказательства наличия патоморфологических изменений в яичках при некоторых вирусных инфекциях. Однако, большинство исследований проведены при малой выборке пациентов, а их результаты противоречивы. Цель исследования - морфологическая оценка сперматогенеза пациентов с подтвержденной COVID-19-инфекцией. Материал и методы. На основании клинических и морфологических данных были сформированы группы, каждая из которых включала подгруппы согласно возрастной периодизации: I - пациенты с COVID-19, ПЦР+ (n = 96; возрастом от 25 до 91 года); II - контроль (n = 20). Методом световой микроскопии рассчитывали следующие параметры: диаметр семенных извитых канальцев, толщину белочной оболочки яичка, высоту сперматогенного эпителия; количество сперматогенных клеток, клеток Сертоли и Лейдига. Результаты. При микроскопическом и морфометрическом анализе яичек во всех возрастных группах обнаружили признаки гипосперматогенеза различной степени выраженности, лимфоцитарно-плазмоцитарную инфильтрацию, тромбозы мелких кровеносных сосудов. Заключение. Морфологические изменения в яичках у пациентов с COVID-19 указывают на потенциальное влияние SARS-CoV-2 на сперматогенез и гистоархитектонику, которые проявляются снижением количества сперматогенных клеток и развитием вирусного орхита. При этом, у мужчин пожилого и старческого возрастов данные изменения наиболее выражены.
Ключевые слова: яички, вирусный орхит, гипосперматогенез, SARS-CoV-2, COVID-19.
MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF SPERMATOGENESIS IN PATIENTS WITH COVID-19
Demyashkin G. A.1, Boldyrev D. V.2, Nochnoi M. S.1, Vadyukhin M. A.1, Shchekin V. I.1
1I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russia 2Moscow Department of Health V.P. Demikhov Hospital, Moscow, Russia
SUMMARY
In February 2020, WHO declared SARS-CoV-2 a pandemic. Currently, 219 million cases of this disease and 4.5 million deaths have been registered in the world. According to the literature, there is direct evidence of the presence of pathomorphological changes in the testicles in some viral infections. However, most of the studies were conducted with a small sample of patients, and their results are conflicting. The purpose of the study was to morphologically assess spermatogenesis in patients with confirmed COVID-19 infection. Material and methods. Based on clinical and morphological data, groups were formed, each of which included subgroups according to age periodization: I - patients with COVID-19, PCR+ (n = 96; aged 25 to 91 years); II - control (n = 20). The following parameters were calculated by light microscopy: the diameter of the seminiferous tubules, the thickness of the albuginea of the testis, the height of the germinal epithelium; the number of germ cells, Sertoli cells and Leydig cells. Results. Microscopic and morphometric analysis of the testicles in all age groups revealed signs of hypospermatogenesis of varying severity, lymphocytic-plasmacytic infiltration, thrombosis of small blood vessels. Conclusion. Morphological changes in the testicles of patients with COVID-19 indicate the potential impact of SARS-CoV-2 on spermatogenesis and histoarchitecture, which is manifested by a decrease in the number of germ cells and the development of viral orchitis. At the same time, in men of elderly age, these changes are most pronounced.
Key words: testicles, viral orchitis, hypospermatogenesis, SARS-CoV-2, COVID-19.
Первые случаи заболевания СОУГО-19, вызываемые вирусом SARS-CoV-2, были зарегистрированы в декабре 2019 года в Китае [1], а в феврале 2020 года ВОЗ была объявлена пандемия SARS-CoV-2. В настоящее время в мире зарегистрировано 219 млн. случаев заболевания и 4,5 млн. смертей [2].
Согласно литературным данным, существуют прямые доказательства наличия патоморфо-логических изменений в яичках при некоторых вирусных инфекциях [3; 4]. При исследовании пациентов, перенесших SARS-CoV-инфекцию в 2002 году, обнаружили вирусный орхит, который характеризуется поражением мужских сперма-тогенных клеток (вплоть до их апоптоза), склерозом базальной мембраны и воспалительной инфильтрацией интерстициальной ткани [5]. Аналогичные структурно-функциональные изменения в яичках были выявлены и при новой SARS-CoV-2-инфекции. При TUNEL анализе отмечается увеличение количества апоптоти-ческих клеток, CD3+ Т-лимфоцитов, CD20+ В-лимфоцитов, CD138+ плазмоцитов, CD68+ макрофагов в интерстициальной ткани [6]. Эти данные указывают на то, что SARS-CoV-2 может вызвать вторичное аутоиммунное воспаление, которое является одним из звеньев патогенеза вирусного орхита, приводящего к поражению яичек и нарушению сперматогенеза [7; 8].
Однако, большинство исследований проведены при малой выборке пациентов, а их результаты противоречивы. В связи с этим, вопрос влияния COVID-19 на мужскую репродуктивную систему остаётся открытым [9]. Особый интерес представляет изучение влияния SARS-CoV-2 на сперматогенез в разных возрастных группах, в первую очередь у молодых.
Для того, чтобы пролить свет на эту проблему впервые была собрана когорта пациентов с подтвержденной COVID-19-инфекцией для изучения основных морфологических изменений паренхимы и стромального компонента яичек в ответ на инфекционный процесс, а также выявления вероятных различий в нарушении сперматогенеза в зависимости от возраста.
Цель исследования - морфологическая оценка сперматогенеза пациентов с подтвержденной COVID-19-инфекцией.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Дизайн эксперимента. На основании анамнестических, клинических и морфологических данных были сформированы группы, каждая из которых включала подгруппы согласно возрастной периодизации ВОЗ (табл. 1).
I группа (п = 96; возраст 25 - 91 лет, средний возраст - 59 лет). Причина смерти: коронавирус-ная инфекция, вызванная вирусом SARS-CoV-2
Таблица 1
Распределение по группам, согласно возрастной периодизация мужчин (ВОЗ, 2014 г.).
Возраст Подгруппа п Возраст Подгруппа п
25 - 44 (молодой) I - COVID-19 9 61 - 75 (пожилой) I - COVID-19 43
II - контроль 5 II - контроль 5
45 - 60 (средний) I - COVID-19 17 76 - 90 (старческий); > 90 (долгожители) I - COVID-19 21/6
II - контроль 5 II - контроль 5
(ПЦР+), с развитием двусторонней тотальной пневмонии смешанного генеза. Течение заболевания осложнилось острым респираторным дистресс синдромом взрослых (диффузное альвеолярное повреждение) и полиорганной недостаточностью, что и явилось непосредственной причиной смерти.
II группа (п = 20) - аутоптаты нормальных яичек, полученные не позднее 6 часов после констатации биологической смерти, без макроскопических признаков наличия воспалительного и/или опухолевого процесса, все пациенты этой подгруппы родили по крайней мере одного ребенка и ранее не подвергались воздействию токсических веществ. Причинами смерти у мужчин пожилого и старческого возрастов чаще были по-
стинфарктный кардиосклероз или хроническая ишемия головного мозга, у средней возрастной группы - язва желудка с прободением и/или кровотечением, панкреатит, обструктивный пиелонефрит, аневризмы различной локализации, а у молодых - врождённые пороки развития не моче-выделительной и половой систем. SARS-CoV-2. ПЦР - отрицательная.
Критерии исключения: эпидемический паротит, бесплодие, сепсис, бактериальная инфекция, ВИЧ, вирусные гепатиты В и С, вирус Эпштейна-Барр, атеросклероз, гипертоническая болезнь, сахарный диабет, эндокринные заболевания, ожирение, хронический алкоголизм, наркомания.
Морфологическое исследование. После извлечения оценивали внешний вид яичек и состояние
паренхимы на разрезе, взвешивали (в граммах) и измеряли. Затем нарезали параллельно сагиттальной плоскости каждые 2 мм, фиксировали в формалине, после проводки (аппарат гистологической проводки тканей, «Leica Biosystems», Германия) заливали в парафиновые блоки, из которых готовили серийные срезы (толщиной 3 мкм), депарафинировали, дегидратировали и окрашивали гематоксилином и эозином для гистологического исследования.
Морфологический и морфометрический анализ проводили в 10-ти случайно выбранных полях зрения микроскопа при увеличении ><400 в 5-ти рандомных срезах с каждого образца. Цифровые изображения гистологических срезов (отсканированные препараты) для морфоме-трических исследований получали с помощью системы видео-микроскопии (микроскоп Leica DM3000, Германия; камера DFC450 C; компьютер Platrun LG) и программного обеспечения для обработки и анализа изображений Leica Application Suite (LAS) Version 4.9.0. В каждом из полей рассчитывали следующие параметры: диаметр семенных извитых канальцев, толщину белочной оболочки яичка, высоту спермато-генного эпителия; количество сперматогенных клеток (подсчёт ядер сперматогоний, спермато-цитов, округлых сперматид), клеток Сертоли и Лейдига.
Оценку воспалительной инфильтрации проводили, используя полуколичественную шкалу, по 3-балльной системе с подсчетом количества иммунокомпетентных клеток в 10 случайно отобранных полях зрения светового микроскопа при увеличении ><400: «1/+» слабая (2 - 5 клеток), «2/++» умеренная (6 - 15 клеток), «3/+++» выраженная (16 - 25 клеток).
Оценку сперматогенного эпителия проводили с использованием критериев S.G. Johensen и модифицированную De Kretser and Holstein, согласно рекомендациям Европейского урологического общества [10]. Средний балл рассчитывали в 10-ти полях зрения микроскопа, при увеличении ><400.
По одному препарату от каждого случая окрашивали с использованием гистохимического метода по Гимзе для идентификации иммуно-компетентных клеток.
Статистический анализ. Полученные в результате подсчёта данные обрабатывали с использованием компьютерной программы SPSS 12.0 for Windows statistical software package (IBM Analytics, США). При этом определяли вариационные ряды, среднюю арифметическую, среднеквадратическое отклонения, среднюю ошибку и вероятность различия. Затем оценивали соответствие/несоответствие полученных
результатов нормальному распределению с применением критерия Колмагорова-Смирнова. При статистической обработке для оценки достоверности различий средних значений между группами использовались следующие непараметрические критерии: U-критерий Манна-Уитни, Н-критерий Краскалла-Уоллеса. При отсутствии нормального распределения данных использовали непараметрический критерий F. Wilcoxon (Statistical methods for research workers) с уровнем значимости p <0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Вес и макроскопическое строение яичек у пациентов с COVID-19 не отличалось от значений контрольной группы. Аутопсии яичек были выполнены с целью выявления причины и степени поражения сперматогенеза при одновременном исключении обструкции семенных протоков.
Сравнительная морфологическая характеристика яичек с установленным патологоанатоми-ческим основным диагнозом коронавирусная инфекция (COVID-19+, ПЦР+) и нормой.
При микроскопическом анализе яичек разных возрастных групп выявили следующие нарушения гистоархитектоники: снижение количества сперматогенных клеток (табл. 2), которые на большом протяжении отслаивались от базальной мембраны и заполняли просвет (десквамация и конгломерация); сперматозоиды - отсутствуют. Клетки Сертоли сохранены у большинства пациентов, отсутствуют лишь у некоторых мужчин старческого возраста. Базальная мембрана семенных извитых канальцев утолщена и разрыхлена (табл. 2) (рис. 1).
При оценке по С. Джонсену (JS) у пациентов всех возрастных групп диагностировали гипо-сперматогенез различной степени выраженности (в семенных извитых канальцах располагаются сперматогонии и разрушенные сперматоциты, JS - 5 баллов), блок созревания с фокусами субтотальной аплазии сперматогенных клеток (единичные сперматогонии, JS - 3 балла); Сертоли-клеточный синдром, JS - 2 балла; тубулярную аплазию канальцев, JS - 1 балл (табл. 3).
Также во всех исследуемых случаях выявили гиперплазию клеток Лейдига. В большинстве микропрепаратов отмечали утолщение интер-стициального компонента, выраженный отек. Во всех образцах межканальцевых пространств обнаружена выраженная воспалительная инфильтрация: большое количество плазмоцитов, тучных клеток и лимфоцитов, а также единичные нейтрофилы. Кроме того, отмечали другие признаки воспаления - обильные внутрисосуди-стые тромбозы и эндотелииты. Таким образом, преобладание в образцах иммунокомпетентных
Примечание: Средние значения параметров, определяемых в поперечных срезах извитых канальцев; р <0,05. * Sa, Sb, Sc, Sd - сперматиды на разных стадиях сперматогенеза.
Таблица 2
Количественная характеристика сперматогенеза у пациентов с COVID-19.
возраст (лет) количество пациентов диаметр канальца (мкм) толщина белочной оболочки (мкм) клетки Сертоли спермато-гонии сперма-тоциты сперматиды (Ба+БЬ)* сперматиды (Sc+Sd)*
25-44 (контроль) 9 160±8 9,2±0,9 10,0±0,3 19±0,5 25±0,4 33±1,0 21±0,6
45-60 17 158±7 9,4±1,1 10,1±0,7 18±0,9 25±1,0 31±1,9 17±1,0
61-75 43 154±10 11,6±1,3 9,2±0,5 17±1,0 23±0,8 27±2,0 6±0,3
76-90 21 121±10 13,6±1,5 8,6±0,7 13±0,7 20±1,1 19±1,5 4±0,6
>90 6 92±9 17,4±2,0 7,3±1,0 8±0,2 12±0,9 11±2,0 2±0,5
Таблица 3.
Оценка сперматогенного эпителия по шкале С. Джонсона, в баллах.
Возраст Подгруппа по шкале С. Джонсона Возраст Подгруппа по шкале С. Джонсона
25 - 44 (молодой) I - COVID-19 6 - 7 61 - 75 (пожилой) I - COVID-19 4 - 6
II - контроль 9 - 10 II - контроль 9 - 10
45 - 60 (средний) I - COVID-19 6 - 7 76 - 90 (старческий); > 90 (долгожители) I - COVID-19 1 - 3
II - контроль 9 - 10 II - контроль 9 - 10
клеток лимфоцитарного ряда (от 15 до 25 в поле зрения) свидетельствует о вирусной природе орхита. Просветы кровеносных сосудов были полнокровными, местами с признаками тромбо-образования, отмечали выраженную метахрома-зию внутренней оболочки. Лимфатические сосуды расширены, их просветы содержат большое количество белка (рис. 1).
ОБСУЖДЕНИЕ
Настоящее исследование показывает, что у пациентов разных возрастов с COVID-19 наблюдаются поражения яичек воспалительного характера и кровеносных сосудов с признаками ишемии [11].
Воздействие SARS-CoV-2 приводит к нарушению сперматогенеза (гипосперматогенез), который опосредованно усугубляется вирусным орхитом.
Выявленные морфологические изменения образцов яичек у пациентов с подтвержденной коронавирусной инфекцией очень схожи с таковыми при паротите, который осложняется орхитом в 1 из 3 случаев [12]. Предполагается, что фокальная аплазия семенных извитых канальцев при коронавирусной инфекции также
является морфологическим проявлением индуцированного вирусом иммунного воспаления, которое в ряде случаев может способствовать гипофункции сперматогенеза, особенно у лиц старше 70 лет, что было выявлено в ходе нашего исследования. Высота сперматогенного эпителия у SARS-CoV-2-положительных пациентов после 70 лет ниже в среднем на 34% относительно контрольной группы, однако у пациентов средней возрастной категории данный показатель не превышал 5%. Десквамация и отслойка базальной мембраны семенных извитых канальцев можно связать с нарушением трофики гематотестику-лярного барьера на фоне ишемии кровеносных сосудов и тромбообразования.
О вирусной природе орхита свидетельствует преобладание в образцах I группы иммунокомпе-тентных клеток лимфоидного ряда [13].
В основе механизма развития патологического процесса лежит первичное опосредованное АПФ-2 повреждающее воздействие вируса SARS-CoV-2 на ткань яичка, усугубляемое развитием синдрома высвобождения цитокинов и приводящее к выраженному отеку и дистрофии сперматогенных клеток [14; 15; 16]. Избыточная продукция интерлейкина-6, как основного меди-
Рисунок 1. Микроскопическая картина яичек пациента В., 43 года. А - выраженная дезорганизация сперматогенного эпителия и его очаговая десквамация, о чем свидетельствует расположение сперма-тогенных клеток в адлюминальном отсеке семенных извитых канальцев; гипосперматогенез, окраска - гематоксилиномиэозином,увелич.*100;В,С, миграциятучных клеток сих дегрануляци-ей (стрелки), окраска по Романовскому-Гимзе, увелич. х100, х400, х1000.
атора цитокинового «шторма», может вызвать повреждение базальной мембраны семенных извитых канальцев вследствие аутоиммунной реакции и, как следствие, нарушение проницаемости гематотестикулярного барьера. Если вирусный орхит носит односторонний характер, что маловероятно при коронавирусной инфекции, со временем может произойти нарушение сперматогенеза и в нормальном яичке в связи с началом выработки аутоантител к антигенам на поверхности сперматогенных клеток.
Двукратное увеличение числа клеток Лейдига в аутоптатах I группы в свою очередь происходит по компенсаторному механизму на фоне нейро-иммунного воспаления. Подавление интерферо-нами андрогенсинтезирующей функции клеток Лейдига по принципу отрицательной обратной связи стимулирует выработку лютеинизирую-щего гормона передней долей гипофиза, что и приводит к их гиперплазии [17].
Несмотря на схожую морфологическую картину, воспаление яичек при свинке характерно
для 15 - 40% мужчин постпубертатного периода через неделю после перенесенного паротита, к тому же поражение чаще носит односторонний характер (в 70% случаев). В свою очередь, ассоциированный с COVID-19 орхит - двусторонний, а средний возраст пациентов превышает 55 лет [18]. Следует обратить внимание на то, что наше исследование впервые позволяет сделать заключение о связи возраста больного COVID-19 с тяжестью вирусного орхита и последующим снижением фертильности, не исключающим физиологический гипосмерматогенез.
Патоморфологические изменения кровеносных сосудов, такие как, гиперемия, отёк эндотелия и фибринозные тромбы, более вероятно являются проявлениями системного поражения SARS-CoV-2 (гипоксемия, гиперкоагуляция и тромбообразование, присоединение вторичной инфекции) [19].
Предметом дальнейших исследований может служить возможное отсутствие корреляции между степенью экспрессии АПФ-2 (в зависимости от возраста) и вероятностью развития орхита при ко-ронавирусной инфекции, так как по результатам исследования в каждом из аутоптатов COVID-19-положительных пациентов были обнаружены исчерпывающие признаки вирусного воспаления [20].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Морфологические изменения в яичках у пациентов с COVID-19 указывают на потенциальное влияние SARS-CoV-2 на сперматогенез и гистоархитектонику, которые проявляются в снижении количества сперматогенных клеток и развитием вирусного орхита. При этом у мужчин пожилого и старческого возрастов данные изменения наиболее выражены.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА
1. Chaolin H. Y., Wang X., Li Huang C., Wang Y., Li X., Ren L., Zhao J., Hu Y. et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet. 2020;395(10223):497-506. doi:10.1016/S0140-6736(20)30183-5.
2. Cereda D., Tirani M., Rovida F., Demicheli V., Ajelli M., Poletti P. et al. The early phase of the COVID-19 outbreak in Lombardy, Italy. Epidemics. 2021;37:100528. doi: 10.1016/j. epidem.2021.100528.
3. Lardone M., Piottante A., Valdevenito R. Histological and hormonal testicular function in oligo/azoospermic infertile men. Andrologia. 2013;45(1):379-85. doi: 10.1111/and.12026.
4. Xixiang M., Chuhuai G., Rong Ch., Yunyun W., Shenglei F., Shenglei F. et al. Pathological and molecular examinations of postmortem testis biopsies reveal SARS-CoV-2 infection in the testis and spermatogenesis damage in COVID-19 patients. Cellular Molecular Immunology. 2021;14(12):487-9. doi:10.1038/s41423-020-00604-5.
5. Xu J., Qi L., Chi X., Yang J., Wei X., Yang J. et al. Orchitis: A complication of severe acute respiratory syndrome (SARS). Biol Reprod. 2006;74(1):410-6. doi: 10.1095/ biolreprod.105.044776.
6. Ming Y., Shuo C., Bo H., Jing-Min Z., Hua S., Ya-Jun C. et al. Pathological Findings in the Testes of COVID-19 Patients: Clinical Implications. 2020;15(9):1124-9. doi: 10.1016/j.euf.2020.05.009.
7. Rong Li, Tailang Y., Fang F., Qin Li, Jiao C., Yixin W. et al. Potential risks of SARS-Cov-2 infection on reproductive health. Reprod Biomed Online. 2020;41(1):89-95. doi: 10.1016/j. rbmo.2020.04.018.
8. Yanfei H., Jie W., Junlin R., Yubo Z., Jing C., Xuejiao C. et al. Effect of COVID-19 on Male Reproductive System - A Systematic Review. Front Endocrinol (Lausanne). 2021;12(1):677-701. doi:10.3389/fendo.2021.677701.
9. Achua J., Chu K., Ibrahim E., Khodamoradi K., Delma K., Iakymenko O. et al. Histopathology and Ultrastructural Findings of Fatal COVID-19 Infections on Testis. J Mens Health. 2021;39(1):65-74. doi:10.5534/wjmh.200170.
10. Johnsen S. G. Testicular biopsy score count - a method for registration of spermatogenesis in human testis: normal values and results in 335 hypogonadal males. Hormones. 1970;1(1):2-25. doi:10.1159/000178170.
11. Abdel-Moneim A. COVID-19 Pandemic and Male Fertility: Clinical manifestations and pathogenic mechanisms. Biochemistry. 2021;86(4):389-96. doi: 10.1134/S0006297921040015.
12. Rubin S., Eckhaus M., Rennick L., Bamford C., Duprex P. Molecular biology, pathogenesis and pathology of mumps virus. J Pathol. 2015;235(2):242-52. doi: 10.1002/path.4445.
13. Roychoudhury S., Das A., Jha N., Kesari K., Roychoudhury S., Jha S. et al. Viral pathogenesis of SARS-CoV-2 infection and male reproductive health. Open Biol. 2021;11(1):200-347. doi: 10.1098/rsob.200347.
14. Hoffmann M., Kleine-Weber H., Schroeder S., Krüger N., Herrler T., Erichsen S. et al. SARS-CoV-2 Cell Entry Depends on ACE2 and TMPRSS2 and Is Blocked by a Clinically Proven Protease Inhibitor. Cell. 2020;181(2):271-80. doi: 10.1016/j. cell.2020.02.052.
15. Hoffmann M., Kleine-Weber H., Krüger N. The novel coronavirus 2019 (2019-nCoV)
uses the SARS-coronavirus receptor ACE2 and the cellular protease TMPRSS2 for entry into target cells. BioRxiv. 2020;31(1). doi: 10.1016/j. cell.2020.02.052.
16. Fan C., Li K., Ding Y., Lu W., Wang J. ACE2 Expression in kidney and testis may cause kidney and testis damage after 2019-nCoV infection. MedRxiv. 2020;13(2). doi: 10.3389/ fmed.2020.563893.
17. Wang Z., Xu X. scRNA-seq Profiling of Human Testes Reveals the Presence of ACE2 Receptor, a Target for SARS-CoV-2 Infection, in Spermatogonia, Leydig and Sertoli Cells. Preprints. 2020;9(4):920. doi: 10.3390/cells9040920.
18. Lai C. C., Shih T. P., Ko W. C., Tang H. J., Hsueh P. R. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) and coronavirus disease-2019 (COVID-19): The epidemic and the challenges. J Antimicrob Agents. 2020;55(3):105-924. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2020.105924.
19. Maccio U., Zinkernagel A., Shambat S., Zeng Xi, Cathomas G., Ruschitzka F. et al. SARS-CoV-2 leads to a small vessel endotheliitis in the heart. EBioMedicine. 2021;63(1):103-82. doi: 10.1016/j.ebiom.2020.103182.
20. Beyerstedt S., Casaro E., Rangel E. COVID-19: angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expression and tissue susceptibility to SARS-CoV-2 infection. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2021;40(5):905-19. doi: 10.1007/s10096-020-04138-6.
REFERENCES
1. Chaolin H. Y., Wang X., Li Huang C., Wang Y., Li X., Ren L., Zhao J., Hu Y. et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet. 2020;395(10223):497-506. doi: 10.1016/S0140-6736(20)30183-5.
2. Cereda D., Tirani M., Rovida F., Demicheli V., Ajelli M., Poletti P. et al. The early phase of the COVID-19 outbreak in Lombardy, Italy. Epidemics. 2021;37:100528. doi: 10.1016/j. epidem.2021.100528.
3. Lardone M., Piottante A., Valdevenito R. Histological and hormonal testicular function in oligo/azoospermic infertile men. Andrologia. 2013;45(1):379-85. doi: 10.1111/and.12026.
4. Xixiang M., Chuhuai G., Rong Ch., Yunyun W., Shenglei F., Shenglei F. et al. Pathological and molecular examinations of postmortem testis biopsies reveal SARS-CoV-2 infection in the testis and spermatogenesis damage in COVID-19 patients. Cellular Molecular Immunology. 2021;14(12):487-9. doi: 10.1038/s41423-020-00604-5.
5. Xu J., Qi L., Chi X., Yang J., Wei X., Yang J. et al. Orchitis: A complication of severe acute respiratory syndrome (SARS).
Biol Reprod. 2006;74(1):410-6. doi: 10.1095/ biolreprod.105.044776.
6. Ming Y., Shuo C., Bo H., Jing-Min Z., Hua S., Ya-Jun C. et al. Pathological Findings in the Testes of COVID-19 Patients: Clinical Implications. 2020;15(9):1124-9. doi: 10.1016/j.euf.2020.05.009.
7. Rong Li, Tailang Y., Fang F., Qin Li, Jiao C., Yixin W. et al. Potential risks of SARS-Cov-2 infection on reproductive health. Reprod Biomed Online. 2020;41(1):89-95. doi: 10.1016/j. rbmo.2020.04.018.
8. Yanfei H., Jie W., Junlin R., Yubo Z., Jing C., Xuejiao C. et al. Effect of COVID-19 on Male Reproductive System - A Systematic Review. Front Endocrinol (Lausanne). 2021;12(1):677-701. doi: 10.3389/fendo.2021.677701.
9. Achua J., Chu K., Ibrahim E., Khodamoradi K., Delma K., Iakymenko O. et al. Histopathology and Ultrastructural Findings of Fatal COVID-19 Infections on Testis. J Mens Health. 2021;39(1):65-74. doi: 10.5534/wjmh.200170.
10. Johnsen S. G. Testicular biopsy score count - a method for registration of spermatogenesis in human testis: normal values and results in 335 hypogonadal males. Hormones. 1970;1(1):2-25. doi: 10.1159/000178170.
11. Abdel-Moneim A. COVID-19 Pandemic and Male Fertility: Clinical manifestations and pathogenic mechanisms. Biochemistry. 2021;86(4):389-96. doi: 10.1134/S0006297921040015.
12. Rubin S., Eckhaus M., Rennick L., Bamford C., Duprex P. Molecular biology, pathogenesis and pathology of mumps virus. J Pathol. 2015;235(2):242-52. doi: 10.1002/path.4445.
13. Roychoudhury S., Das A., Jha N., Kesari K., Roychoudhury S., Jha S. et al. Viral pathogenesis of SARS-CoV-2 infection and male reproductive health. Open Biol. 2021;11(1):200-347. doi: 10.1098/rsob.200347.
14. Hoffmann M., Kleine-Weber H., Schroeder S., Krüger N., Herrler T., Erichsen S. et al. SARS-CoV-2 Cell Entry Depends on ACE2 and TMPRSS2 and Is Blocked by a Clinically Proven Protease Inhibitor. Cell. 2020;181(2):271-80. doi: 10.1016/j. cell.2020.02.052.
15. Hoffmann M., Kleine-Weber H., Krüger N. The novel coronavirus 2019 (2019-nCoV) uses the SARS-coronavirus receptor ACE2 and the cellular protease TMPRSS2 for entry into target cells. BioRxiv. 2020;31(1). doi: 10.1016/j. cell.2020.02.052.
16. Fan C., Li K., Ding Y., Lu W., Wang J. ACE2 Expression in kidney and testis may cause kidney and testis damage after 2019-nCoV infection. MedRxiv. 2020;13(2). doi: 10.3389/ fmed.2020.563893.
17. Wang Z., Xu X. scRNA-seq Profiling of Human Testes Reveals the Presence of ACE2 Receptor, a Target for SARS-CoV-2 Infection, in Spermatogonia, Leydig and Sertoli Cells. Preprints. 2020;9(4):920. doi: 10.3390/cells9040920.
18. Lai C. C., Shih T. P., Ko W. C., Tang H. J., Hsueh P. R. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) and coronavirus disease-2019 (COVID-19): The epidemic and the challenges. J Antimicrob Agents. 2020;55(3):105-924. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2020.105924.
19. Maccio U., Zinkernagel A., Shambat S., Zeng Xi, Cathomas G., Ruschitzka F. et al. SARS-CoV-2 leads to a small vessel endotheliitis in the heart. EBioMedicine. 2021;63(1):103-82. doi: 10.1016/j.ebiom.2020.103182.
20. Beyerstedt S., Casaro E., Rangel E. COVID-19: angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) expression and tissue susceptibility to SARS-CoV-2 infection. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2021;40(5):905-19. doi: 10.1007/s10096-020-04138-6.
