CC BY
69
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Онищенко Г.Г. и др. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики. - М., 1999. - 2. Садовой Н.В. и др. Пат. № 2115433 РФ. Вакцина сибиреязвенная
комбинированная // Бюл. изобр. - 1998. - № 20. - 3. Bhatnagar R., Batra S. // Crit. Rev. Microbiol. - 2001. - Vol. 27. - Р. 167200. - 4. De Bias A.L., Cherwinski H.M. // Anal. Biochem. - 1983. - Vol. 133, N 8. - P. 214-219. - 5. Galfree G. et al. // Nature. - 1977. - Vol. 266, N 5602. - P. 550-552. - 6. Jernigan D.B. et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2002. - Vol. 8, N 10. - Р. 10191028. - 7. Laemmli U.K. // Nature. - 1970. - Vol. 287, N 5259. -P. 680-685. - 8. Leppla H.S., Robbins J.B., Schneerson R. , Shiloach J. // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol. 110, N 2. -Р. 141-144. - 9. Nacane P.K., Kawaoi A. // J. Histochem. Cytochem. - 1974. - Vol. 22, N 12. - P. 1084-1091. - 10. Ouch-terlony O. // Scand. J. Lab. Invest. - 1948. - Vol. 21. - P. 246258. - 11. Skurnik M. // Infect. Immun. - 1985. - Vol. 47, N 1. -
P. 1S3-19Q. - І2. Towbin H., Staehelin T., Gordon J. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 1979. - Vol. 7б, N 9. - P. 435Q-4354.
V.P.Bondarev, A.V.Filippov, I.V.Darmov, I.V.Zhivov, V.A.Pyatkov
The Development of an Immuno-Enzyme Monoclonal Test-System to Detect Bacillus anthracis Protective Antigen
48-th Central Research Institute of RFDefense Ministry, Kirov
The development of a highly sensitive and specific monoclonal antibody-based immuno-enzyme test system is considered from the point of view of the perspective to use it for detecting and quantitative measurement of B. anthracis protective antigen in half-way products at different stages during manufacturing the chemical anthrax vaccine. A collection of 13 stable hybrid clones has been formed, all of them being characterized as highly productive and actively growing strains.
Key words: B. anthracis, protective anthrax antigen, monoclonal antibodies, immuno-enzyme analysis
Поступила 17.11.06.
УДК 616.981.452:636.91
С.А.Бугоркова, Р.А.Белобородов, С.М.Дальвадянц
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ ОРГАНОВ МОРСКИХ СВИНОК ПРИ РЕВАКЦИНАЦИИ ЖИВОЙ И ХИМИЧЕСКОЙ ЧУМНЫМИ ВАКЦИНАМИ
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Проведено сравнительное морфологическое исследование с элементами морфометрического анализа состояния органов иммунной системы и возможного развития нежелательных побочных реакций у морских свинок, связанных с ревакцинацией их препаратом химической (ХЧВ) и живой (ЖЧВ) чумными вакцинами. По результатам морфометрического исследования выявлено преимущество применения препарата ХЧВ для индукции вторичного иммунного ответа. Показана перспектива использования морфометрического принципа в морфологическом исследовании для характеристики иммуногенеза в зависимости от характера ревакцинирующего препарата, особенностей антигенного состава вакцин и схем их применения.
Ключевые слова: вакцины живые и химические, иммунокомпетентные органы, морфометрия.
Вакцинация остается перспективным и экономически выгодным направлением профилактики инфекционных заболеваний, а исследования в области вакцинопрофилактики являются приоритетными для решения задач по разработке эффективных мер противодействия биологической опасности [2, 16, 20]. Практика многолетнего применения живой вакцины для профилактики чумы позволяет считать этот препарат достаточно эффективным [10, 18, 19, 21, 22]. В то же время живая чумная вакцина (ЖЧВ) имеет ряд существенных недостатков, к которым относятся: относительная реактогенность препарата, выраженное аллергизирующее действие, снижение защитных свойств при заражении атипичными штаммами возбудителя чумы, а главное непродолжительность вызываемого ей иммунитета [3, 5, 7, 8, 13, 14].
Химические чумные вакцины (ХЧВ) имеют определенное преимущество перед живыми - это возможность их использования в качестве ревакцинирующих препаратов и одновременного применения со средствами экстренной профилактики.
В литературе есть сведения об эффективной иммунобиологической перестройке у мышей, вак-
цинированных экспериментальным образцом полу-синтетической вакцины из капсульного антигена и поли-4-винил-Ы-этилпиридина [1].
По результатам комплексного экспериментального исследования была показана высокая иммунизирующая и ревакцинирующая активность бикомпонентного препарата химической вакцины, состоящей из капсульного антигена (Ф1) и основного соматического антигена (ОСА) чумного микроба, предлагаемой для ревакцинации в экстренных эпидемиологических ситуациях [4, 5, 23].
В то же время морфологические аспекты ревакцинации, неоднократного введения вакцинирующих препаратов и развития возможных нежелательных побочных реакций организма представлены лишь в единичных публикациях [7, 12, 13, 17].
Цель данной работы заключалась в проведении сравнительного морфологического исследования с элементами морфометрического анализа состояния органов иммунной системы и возможного развития нежелательных побочных реакций у подопытных животных, связанных с ревакцинацией их препаратом ХЧВ или ЖЧВ.
б9
Материалы и методы
Морских свинок подкожно иммунизировали живой вакциной ЕВ НИИЭГ (ЖЧВ) в дозе 3-108 ж.м.к. (что соответствует 1 человекодозе), а по прошествии 6 мес. подкожно ревакцинировали: 1-ю группу - химической Ф1-ОСА (ХЧВ) вакциной в дозе 100, 200 и 1000 мкг; 2-ю - ЖЧВ в дозе 3-108 ж.м.к. Умерщвление подопытных животных, описание видимых изменений по органам и забор материала для гистологического исследования проводили на 2, 14-е и 21-е сутки. Группы сравнения составляли морские свинки, вакцинированные ЖЧВ без повторной иммунизации, а также интактные животные. Кусочки органов (кожа с места введения, регионарные и отдаленные лимфатические узлы, селезенка, печень, легкие, почки, сердце) фиксировали в 10 % водном нейтральном растворе формалина. Дальнейшую обработку материала, приготовление полутонких срезов и окраску их гематоксилином и эозином проводили по стандартной методике [9]. С помощью программы «Денситоморфо-метрия» для аппаратно-программного компьютерного комплекса МЕКОС-Ц проводили морфометрическое исследование срезов лимфоидных органов (лимфатические узлы и селезенка) морских свинок, умерщвленных на 14-е сутки после ревакцинации указанными препаратами, и животных групп сравнения. Анализ изображений по срезам включал в себя 4 этапа: нахождение и выделение анализируемого объекта и его признаков (Т- и В-зон лимфоидных органов); измерение заданных параметров объекта (площади фолликулов, диаметра фолликулов, их количества, ширину Т-зон); передачу полученных характеристик в компьютер; компьютерную статистическую обработку информации об изучаемом объекте.
Результаты и обсуждение
Через 2 сут у животных 1 -й группы на коже в месте введения ХЧВ в дозе 100 мкг наблюдали лишь небольшие участки гиперемии. У свинок, получивших препарат в дозе 200-1000 мкг, отмечали появление участков уплотнения и умеренной воспалительной реакции (1,0 х 1,5 см). К 14-м суткам изменения на коже у экспериментальных животных этой группы отсутствовали, умеренное уплотнение тканей места введения сохранялось только у свинок, реиммунизированных 1000 мкг препарата. При гистологическом исследовании регистрировали очаги преимущественно мононуклеарной инфильтрации с примесью эозинофилов в субдермальной клетчатке, причем с увеличением иммунизирующей дозы (200-1000 мкг) участки инфильтрации распространялись на подкожную и межмышечную клетчатку, а в составе инфильтратов появлялись полиморфонук-леары (ПМН). К 14-м суткам отмечали резорбцию клеточных элементов в субдермальной клетчатке (доза препарата 100 мкг) и небольшие очаги фиброзных изменений в дерме и подкожной клетчатке (доза препарата 200-1000 мкг), которые у отдельных животных, ревакцинированных 1000 мкг препарата ХЧВ, сохранялись до 21-х суток.
У животных, ревакцинированных ЖЧВ, изме-
нения в месте введения препарата на 2-е сутки были значительными, встречались участки выраженной гиперемии, уплотнения, кровоизлияния. Гистологическими методами регистрировали проявления острой воспалительной реакции в дерме и подкожной клетчатке в виде крупноочаговых участков инфильтрации тканей ПМН и мононуклеарами. Ни в одном случае при микроскопии бактерии чумного микроба в месте введения не выявлены. К 14-м суткам на коже обнаруживали абсцессы и гематомы, позднее наблюдали инкапсулирование абсцессов или разрешение очагов нагноения с образованием нежных рубчиков. При гистологическом исследовании регистрировали крупные участки инфильтрации тканей ПМН, в центре которых образовывались очаги некроза, участки созревающей грануляционной ткани, к 21 -м суткам - практически полное замещение фокусов гнойного воспаления грануляционной тканью, представленной эпителиоидными клетками, гистиоцитами и фибробластами.
Умеренная гиперемия регионарных лимфатических узлов на 2-е сутки отмечалась от введения 100 мкг ХЧВ, в больших дозах (200-1000 мкг) препарат вызывал некоторое увеличение регионарных лимфатических узлов, причем при использовании ревакцинирующей дозы в 1000 мкг до 0,3 х 0,5 см, а также их уплотнение и умеренную гиперемию. При гистологическом исследовании регистрировали хорошо выраженные начальные признаки гиперпла-стических процессов в лимфоидной ткани: гиперплазию паракортикальных зон, появление в них бластических форм, умеренную плазмобластиче-скую реакцию в мозговых тяжах, умеренную активацию Т- и В-зависимых зон узлов. Введение препарата ХЧВ в дозе 1000 мкг, помимо вышеописанных признаков активации лимфатических узлов, вызывало развитие очагового краевого лимфаденита - накопление эозинофилов, лимфоцитов и незначительного количества ПМН, серозное пропитывание отдельных трабекул, мононуклеарные инфильтраты вокруг сосудов. У животных, получивших препарат ХЧВ в дозе 100 мкг, к 14-м суткам видимой реакции со стороны регионарных лимфатических узлов не наблюдали. При гистологическом исследовании регистрировали значительную гиперплазию фолликулов (средняя площадь фолликула составляла 51642,56±40510,59 мкм2), наличие в них четких светлых центров (32,35 % фолликулов со светлыми центрами), нарастающую плазмобласти-ческую и плазмоклеточную реакцию. Степень функциональной активности органа в этот срок отражают морфометрические характеристики, представленные в табл. 1. К 21-м суткам отмечалось некоторое стихание гиперпластических процессов, но гиперплазия паракортикальных зон еще сохранялась. При введении 1000 мкг препарата в регионарных лимфатических узлах после 14-х суток наблюдали некоторое стихание воспалительной реакции, отмеченной на 2-е сутки, и развитие значительной гиперплазии лимфоцитов в паракортикальной зоне и фолликулах, активацию светлых центров последних, плазмобластическую и плазмоклеточную реакцию в мякотных тяжах. Во 2-й группе увеличение регионарных лимфатических узлов не превышало
Морфометрические характеристики структурных компонентов лимфатических узлов морских свинок, привитых ЖЧВ и ревакцинированных различными препаратами, на высоте иммунного ответа (14-е сутки)
Таблица 1
Ревакцинирующий препарат Параметры
Число лимфатических фолликулов Средняя площадь лимфатического фолликула, мкм2 (М±т) Средний диаметр лимфатического фолликула, мкм (М±т)
общее (в одном поле зрения среза) (М±т) со светлыми центрами, %
Регионарные лимфатические узлы
ХЧВ 2,62±1,17 32,35 51642,56±40510,59 245,73±73,28
ЖЧВ 2,24±0,86 24,12 39547,65±6937,05 213,74±30,48
Без ревакцинации 2,0±0,61 10 33476,54±7135,04 206,83±21,92
Интактные 1,90±0,89 10,5 29002,91±7395,37 190,76±23,23
Отдаленные лимфатические узлы
ХЧВ 2,45±0,52 25,90 96595,30±65363,98 333,10±109,7
ЖЧВ 2,17±0,32 17,43 69848,72±21467,48 312,24±76,85
Без ревакцинации 2,3±0,93 8,69 59771,64±19584,86 272,38±43,72
Интактные 1,9±0,62 10,5 26678,31±6486,77 183,02±21,76
показателей в 1-й группе. При гистологическом исследовании отмечали некоторую задержку развития гиперпластических процессов в коре ко 2-м суткам, умеренные явления гиперплазии паракортикальных зон к 14-м суткам, некоторое увеличение размеров фолликулов (средняя площадь фолликула составляла 39547,65±б937,05 мкм2) и умеренную активацию их центров (24,12 % фолликулов со светлыми центрами).
Визуально отдаленные лимфатические узлы (контрлатеральные) после введения как ХЧВ, так и ЖЧВ несколько увеличивались в размерах. При гистологическом исследовании регистрировали умеренные проявления гиперпластических реакций в них у животных 1 -й группы со 2-х суток, которые достигали максимума к 14-м суткам (средняя площадь фолликула составляла 96595,30±б5363,98 мкм2). Во 2-й группе признаки иммунологической перестройки в отдаленных лимфатических узлах, регистрируемые с 14-х суток, были выражены значительно слабее (средняя площадь фолликула составляла 69848,72+ 21467,48 мкм2), табл. 1. Введение экспериментальным животным 1000 мкг ХЧВ приводило не только к иммунологической перестройке в отдаленных лимфатических узлах, но и вызывало умеренные проявления иммунного воспаления в синусах узлов и в окружающей узлы подкожной клетчатке (умеренные проявления лимфаденита и периаденита).
Селезенка подопытных животных на 2-е сутки несколько увеличивалась в размерах у свинок, реим-мунизированных ЖЧВ, и лишь у единичных животных, ревакцинированных препаратом ХЧВ в дозах 200-1000 мкг. При гистологическом исследовании у животных 1 -й группы отмечены признаки гиперпла-
стической реакции в органе в виде умеренной гиперплазии фолликулов и незначительной активации В-зон после введения 100 и 200 мкг препарата. Введение 1000 мкг ХЧВ приводило к еще более выраженным проявлениям активации органа, гиперпластиче-ским процессам не только в В-зонах, но и в Т-зонах, а также к развитию умеренно выраженного серозного спленита с накоплением в синусах эозинофильных лейкоцитов. К 14-м суткам, на фоне усиления гипер-пластических процессов в Т-зонах (ширина Т-зон составляла 0,048±0,015 мкм), отмечали некоторое стихание активности В-зон и уменьшение количества фолликулов с четкими светлыми центрами (27,90 % фолликулов со светлыми центрами). Значительная гиперплазия Т-зон в селезенке сохранялась до 21 -х суток наблюдения (табл. 2). При ревакцинации ЖЧВ гиперпластические процессы в белой пульпе селезенки в указанные сроки были выражены значительно слабее, чем в 1-й группе. Отмечали раннее снижение активности фолликулов селезенки (21,17 % фолликулов со светлыми центрами) и сохранение к 21 -м суткам лишь незначительных гиперпластических процессов в периартериальных зонах.
Со стороны внутренних органов у подопытных животных 1 -й и 2-й групп отмечали однотипного плана изменения в виде умеренного диффузного дистрофического поражения печени, почек, миокарда (незначительное увеличение органов, набухание, сероватый оттенок окраски), неравномерное полнокровие сосудов. При гистологическом исследовании наблюдали во все сроки очаговую гидро-пическую дистрофию гепатоцитов, в целом клетки печени находились в состоянии повышенного функционального напряжения, небольшие гистио-лим-
Морфометрические характеристики структурных компонентов селезенки морских свинок, привитых ЖЧВ и ревакцинированных различными препаратами, на высоте иммунного ответа (14-е сутки)
Таблица 2
Параметры
Ревакцинирующий Число лимфатических фолликулов Средняя площадь лимфатиче- Средний диаметр лимфати- Ширина Т-зон, мкм
препарат общее (в одном поле зрения среза) со светлыми ского фолликула, мкм2 ческого фолликула, мкм
(М±т) центрами, % (М±т) (М±т)
ХЧВ 3,58±0,77 27,90 99091,17±41739,52 345,32±83,19 0,048±0,015
ЖЧВ 3,01±0,98 21,17 57711,64±49807,29 298,89±71,86 0,041±0,017
Без ревакцинации 2,75±1,76 18,18 45907,84±21721,43 246,98±111,72 0,037±0,012
Интактные 1,50±0,31 13,30 39901,13±13180,04 222,38±36,75 0,022±0,003
фоцитарные инфильтраты вокруг сосудов, умеренную пролиферацию ретикулоэндотелиоцитов. При введении 1000 мкг ХЧВ и ЖЧВ в ранние сроки регистрировали развитие очаговых мелких внутри-дольковых гистио-лимфо-макрофагальных инфильтратов, иногда с центральным очагом некробиоза. После 14-х суток отмечали небольшие участки соединительной ткани на месте бывших инфильтратов. В почках также наблюдали неравномерное полнокровие сосудов коры и мозгового вещества и очаги гистиоцитарной инфильтрации стромы, чаще у животных 2-й группы. В сердце гистиоцитарные инфильтраты встречались под эндокардом, отмечалось функциональное напряжение кардиомиоцитов у животных как 1-й, так и 2-й групп. Не наблюдали связи этих изменений ни с дозой вакцины, ни со сроком наблюдения, ни с видом ревакцинирующего препарата. Макроскопические участки пониженной воздушности или уплотнения легочной ткани, небольшие свежие кровоизлияния под плеврой относили к способу умерщвления животных. При гистологическом исследовании у животных как 1 -й, так и 2-й групп отмечали умеренную интерстициальную реакцию в легочной ткани в виде утолщения меж-альвеолярных перегородок за счет мононуклеарной инфильтрации и умеренной гиперпластической реакции клеточных элементов в них.
В результате проведенного морфометрического исследования выявлены более выраженные проявления вторичного иммунного ответа к 14-м суткам наблюдения со стороны иммунокомпетентных органов морских свинок, ревакцинированных препаратом ХЧВ, по сравнению с ЖЧВ (табл. 1, 2). В регионарных лимфатических узлах при ревакцинации ХЧВ гиперплазия лимфатических фолликулов выражалась в увеличении их площади, которая в 1-й группе в 1,3 раза превышала аналогичный показатель во 2-й и почти в 2 раза площадь фолликулов у интактных животных. Отмечали увеличение числа лимфатических фолликулов со светлыми центрами, характеризующими процессы активации этих структур. У животных 1-й группы в 1,3 раза чаще встречались лимфатические фолликулы с активными светлыми центрами по сравнению со 2-й группой, а у интактных свинок этот показатель был в 3 раза ниже. Чуть слабее была реакция со стороны отдаленных лимфатических узлов, где гиперпластические процессы в виде увеличения паракортикальных зон и размеров фолликулов наблюдались с 14-х суток в обеих группах. При этом средняя площадь фолликула в отдаленных лимфатических узлах животных 1 -й группы была в 1,4 раза выше, чем во 2-й и в 3,6 раза превышала аналогичное значение показателя у интактного животного. В селезенке гиперпластическая реакция характеризовалась увеличением средней площади лимфатического фолликула у животных 1 -й группы в 1,7 раза по сравнению со 2-й, в процентном отношении в 1,3 раза чаще встречались фолликулы с активными светлыми центрами именно в 1-й группе; в 1,2 раза ширина Т-зон в органе у свинок 1 -й группы была больше, чем во 2-й. Все эти показатели практически в 2 раза превышали аналогичные значения в группе интактных животных.
Выраженности иммунологической перестройки
в лимфоидных органах подопытных животных, регистрируемой по результатам морфометрического исследования к 14-м суткам после ревакцинации указанными препаратами, соответствовало максимальное накопление антител к Ф1 у морских свинок, иммунизированных ЖЧВ и ревакцинированных различными препаратами (табл. 3).
Таким образом, морфометрический принцип морфологического исследования перспективен для характеристики иммуногенеза в зависимости от характера ревакцинирующего препарата, особенностей антигенного состава вакцин и схем их применения.
Известно, что уровень специфической перестройки у морских свинок, иммунизированных ЖЧВ, определяется выраженностью «нестерильной» фазы иммунитета [18, 19]. При повторном, спустя 6 мес., введении в организм ЖЧВ происходит резкое сокращение сроков выделения живых бактерий чумного микроба [4, 15]. Поэтому ревакцинация препаратом ЖЧВ не способствовала быстрой и эффективной вторичной иммунологической перестройке организма биомодели в силу указанных обстоятельств. Повторное введение ЖЧВ в острый период (2-е сутки) приводило к развитию умеренных альтеративных и экссудативных изменений в тканях места введения препарата и регионарных лимфатических узлах, разрешающихся к 21 -м суткам без грубых некротических изменений и очагов расплавления вовлеченных в воспалительный процесс тканей. В то же время ХЧВ лишь в большой дозе (1000 мкг, приблизительно 10 человекодоз) и только в остром периоде вызывала развитие иммунного воспаления в тканях места введения препарата, у отдельных животных - в регионарных лимфатических узлах. Однако отмеченные признаки тканевой гиперчувствительности являются закономерным проявлением вторичной иммунологической реакции, а развитие такого рода изменений в острый период считается допустимым с точки зрения безвредности препаратов [6, 11].
Ревакцинация указанными препаратами в условиях эксперимента не вызывала серьезных изменений со стороны внутренних органов, а гиперпласти-ческая реакция клеточных элементов в тканях этих органов в виде лимфогистиоцитарных инфильтратов вокруг сосудов отражала реакцию на повторную антигенную стимуляцию.
В результате проведенного морфологического исследования с элементами морфометрического анализа перспектива применения для индукции
Таблица 3
Динамика накопления антител к ФІ чумного микроба у морских свинок, привитых ЖЧВ и ревакцинированных различными препаратами
Исследо- вание Показатели (средние геометрические) уровня антител к ФІ по результатам РПГ А
сывороток, Ревакцинация ЖЧВ (3-108 м.к.) Ревакцинация ХЧВ (100 мкг)
сут (М±т) (М±т)
0 (фоновое) 1,76±0,16 1,76±0,16
2 2,4±0,02 2,58+0,31
14 2,8±0,48 4,28±0,10
21 2,9±0,46 4,66±0,19
вторичного иммунного ответа ХЧВ не вызывает сомнений, а включение ревакцинации этим препаратом в общую систему мероприятий по вакцино-профилактике чумной инфекции является обоснованным.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Алексеева Н.Ю., Калита С.А., Савинова И.В. и др. // Иммунол. и специфич. профилакт. особо опасных инф. -Саратов, 1993. - С. 145. - 2. Аубакиров С.А. // Там же. -С. 139. - 3. Бунин К.В., Гапочко К.Г. Прививочные реакции при иммунизации живыми вакцинами. - М.: Медицина, 1970. - 295 с. - 4. Дальвадянц С.М., Сероглазов В.В. // Матер. VII съезда Всерос. об-ва эпидемиол., микробиол. и пара-зитол. - М., 1997. - Т. 2. - С. 85-86. - 5. Дальвадянц С.М., Дятлов И.А., Еремин С.А., Кутырев В.В. // Пробл. особо опасных инф. - 2003. - Вып. 86. - С. 123-132. -6. Исупов И.В., Бугоркова С.А., Кутырев В.В. Патоморфологические аспекты доклинических испытаний различных вакцин против чумы сибирской язвы и холеры. - Саратов, 2004. - 179 с. - 7. Котлярова Р.И., Ледовская А.П., Власьянц О.В. // Тр. Азербайджанск. противочумн. ст. -1962. - Т. 3. - С. 250-256. - 8. Котлярова Р.И. Значение дозы кратности вакцинации и ревакцинации в иммуногенезе при чуме: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Саратов, 1965. - 21 с. -9. Меркулов Г. А. Курс патогистологической техники. - М.: Медицина, 1969. - 423 с. - 10. Мишанькин Б.Н., Лопатина Н.В. // Биотехнол. - 1996. - № 4. - С. 3-9. - 11. Методические указания (МУ 3.3.1.1113-02): Основные требования к вакцинным штаммам чумного микроба. - М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2002. - 63 с. -12. Назарова Л.С., Исупов И.В., Самойлова Л.В. и др. // Патогенез и механизмы формирования иммунол. к особо опасным инф. - Саратов, 1987. - С. 9-16. - 13. Назарова Л.С., Исупов И.В., Самойлова Л.В. и др. // ЖМЭИ. -1994. - № 6. - С. 65-66. - 14. Николаев Н.И. // Специфич. профилакт. особо опасных инф. М.: Медицина, 1964. - С. 314. - 15. Овсянников В. И. Экспериментальное обоснование коротких схем экстренной профилактики чумы в динамике
иммуногенеза после одно и многократных прививок: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Саратов, 1991. - 21 с. - І6. Онищен -ко Г.Г., Дроздов И.Г. // Bестн. РАМН. - 2QQ4. - № 5. -С. 14-2Q. - І7. Сагеева О.Ф., Самойлова Л^. // Пробл. особо опасных инф. - 1969. - Bbm. 3 (7). - С. 26-33. -І8. Самойлова Л^. // Специфич. профилакт. особо опасных ипф. - М., 1964. - С. 78-87. - І9. Самойлова Л^. // Совр. асн. профилакт. зоопозп. ипф. - Иркутск, 1984. - Ч. 1. - С. 132133. - 20. Черкасский П.Л. Руководство но общей эпидемиологии. - М.: Медицина. - 2QQ1. - 56Q с. - 2І. Чичерин Ю^., Евстигнеев B.^, Романов B.E. и др. // Акт. вонр. профилакт. опасных инф. забол.: Тез. докл. межведомств. науч. конф. - Киров, 1991. - С. 125-126. - 22. Meyer K.F. // Бюл. BОЗ. - 1971. - Т. 42, № 5. - С. 689-7Q4. - 23. Kutyrev V.V., Dalvadyants S.M., Dyatlov I.A. // 8th Intern. Symposium on Yersinia, September 4-8, 2QQ2. - Turku, Finland, 2QQ2. - P. 1Q8.
S.A.Bugorkova, R.A.Beloborodov, S.M.Dalvadyants
Morphologic Characterization of Guinea-Pig Immunocompetent Organs after Revaccination with Live and Chemical Plague Vaccines
Russian Anti-Plague Research Institute "Microbe ", Saratov
A comparative morphologic study involving the methods of morpho-metric analysis of the immune system organs and possible adverse responses in guinea pigs associated with their revaccination with the preparations of chemical and live plague vaccines (CHPV and LPV, respectively) demonstrated the advantageous application of the CHPV preparation to induce the secondary immune reaction. Good prospects were shown for the morphome-tric method to be used in the morphologic studies to describe the immunoge-nesis depending on the character of the revaccination preparation, peculiarities of vaccine antigenic components and the schedule of its inoculation.
Key words: live and chemical vaccines, immunocompetent organs, morphometry.
Поступила 17.03.06.
УДК 616.981.51:616.-097
В.И.Дубровина, А.В.Родзиковский, О.Б.Колесникова, Т.П.Старовойтова,
С.А.Витязева, Т.А.Иванова, Т.Т.Шкаруба
ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСНОГО АНТИГЕННОГО ПРЕПАРАТА BACILLUS ANTHRACIS И ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК ФАГОЦИТАРНОЙ СИСТЕМЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока, Иркутск
Результаты проведенных исследований расширяют сведения о закономерностях взаимоотношения микроб-фагоцит и намечают направления изысканий в области изучения механизмов формирования резистентности макроорганизма к возбудителю сибирской язвы. Впервые разработан химически связанный иммуногенный комплекс клеточных стенок и антигенов сибиреязвенного микроба, испытана иммуномодулирующая активность арабиногалактана и сквалена, а также показаны пути коррекции функционального состояния системы мононуклеарных фагоцитов арабиногалактаном и скваленом при взаимодействии с сибиреязвенным микробом.
Ключевые слова: фагоциты, иммунитет, Bacillus anthracis СТИ, антигены, иммуномодуляторы.
В настоящее время для стимуляции неспецифической резистентности организма большое внимание уделяется полисахаридам растительного и животного происхождения. В частности, для повышения иммуногенности химической сибиреязвенной вакцины на основе протективного антигена Bacillus anthracis нашел применение сквален - субстрат, широко распространенный в тканях растений,
животных и человека [9].
Предпринятое нами экспериментальное изучение действия подобных препаратов - сирингина, К-212, диквертина, арабиногалактана из лиственницы сибирской (^т sibirica), любезно предоставленных сотрудниками Иркутского института химии им. А.Е.Фаворского, - на клетки системы мононуклеар-ных фагоцитов (СМФ) показало, что по физико-
