Научная статья на тему 'Морфологическая характеристика гепатоцитов у 6-месячных телят породы красная степная в стандартных условиях содержания и при введении в рацион ЭМ-Курунги'

Морфологическая характеристика гепатоцитов у 6-месячных телят породы красная степная в стандартных условиях содержания и при введении в рацион ЭМ-Курунги Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
76
22
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
МОРФОЛОГИЯ / MORPHOLOGY / ГИСТОЛОГИЯ / HISTOLOGY / ГЕПАТОЦИТ / HEPATOCYTE / ПЕЧЕНЬ / LIVER / КРУПНЫЙ РОГАТЫЙ СКОТ / CATTLE / ЭМ-ТЕХНОЛОГИЯ / EM TECHNOLOGY

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Гуляева Екатерина Александровна, Лескова Анна Юрьевна, Митраков Николай Викторович

Оценивается состояние структурно-функциональной организации гепатоцитов печени 6-месячных телят на клеточном и тканевом уровнях организации в стандартных условиях содержанияи и при применении препарата «ЭМ-Курунга».

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Гуляева Екатерина Александровна, Лескова Анна Юрьевна, Митраков Николай Викторович

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Morphological characteristics hepatocytes in 6-month-old red steppe calves breed in standard conditions and at introduction in the diet Em-Kurunga

In this paper we evaluate the state of structural and functional organization of the liver hepatocytes 6-month-old calves at the cellular and tissue levels of the organization in standard conditions and the application of the preparation «Em-Kurunga».

Текст научной работы на тему «Морфологическая характеристика гепатоцитов у 6-месячных телят породы красная степная в стандартных условиях содержания и при введении в рацион ЭМ-Курунги»

SUMMARY

E.V. Badanova

Intermediate nerve of the domestic dog and fox ordinary

The article describes the anatomical and topographical features of the intermediate nerve in the domestic dog and ordinary fox. Intermediate nerve branches are a nervus petrosus major and chorda tympani. These nerves connecting through the trigeminal nerve branches are involved in the innervation of the lacrimal gland, mandibular and sublingual salivary glands. Chorda tympani joining the lingual nerve (V pair) is a connecting branch from ganglion oticus (IX pair).

Keywords: intermediate nerve ganglion crankshaft, large rocky nerve, pterygopalatine ganglion, chorda tympani.

УДК 591.8:636.5

Е.А. Гуляева, А.Ю. Лескова, Н.В. Митраков

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ГЕПАТОЦИТОВ У 6-МЕСЯЧНЫХ ТЕЛЯТ ПОРОДЫ КРАСНАЯ СТЕПНАЯ В СТАНДАРТНЫХ УСЛОВИЯХ СОДЕРЖАНИЯ И ПРИ ВВЕДЕНИИ

В РАЦИОН ЭМ-КУРУНГИ

Оценивается состояние структурно-функциональной организации гепатоцитов печени 6-месячных телят на клеточном и тканевом уровнях организации в стандартных условиях содержанияи и при применении препарата «ЭМ-Курунга».

Ключевые слова: морфология, гистология, гепатоцит, печень, крупный рогатый скот, ЭМ-технология.

Введение

В настоящее время большое внимание уделяется вопросам получения животноводческой продукции, отвечающей современным требованиям, и в первую очередь экологической безопасности [3]. Используемые в животноводстве и ветеринарии химиотерапев-тические препараты для лечения и профилактики болезней, а также различные биологические добавки, стимулирующие продуктивность животных, зачастую не только не дают желаемого эффекта, но и далеко не безопасны [2]. Таким образом, актуальным является поиск альтернативных эффективных путей повышения биорезистентности продуктивных животных, переход от химического к органическому сельскому хозяйству. В этом отношении особого внимания заслуживают пробиотические препараты, созданные на основе полезных бактерий, которые активно участвуют в пищеварении и в подавлении патогенной микрофлоры, заселяющей кишечник. ЭМ-технологии (ЭМ - эффективные микроорганизмы) рассматриваются как одно из наиболее перспективных направлений прикладного характера в области биотехнологии. Особо важную роль эффективные микроорганизмы играют в профилактике болезней сельскохозяйственных животных, прежде всего молодняка, как наиболее уязвимого звена в животноводстве.

Цель - изучить морфологию гепатоцитов и тинкториальные свойства печени 6-месячных телят породы красная степная в стандартных условиях содержания и при введении в рацион концентрата кормового «ЭМ-Курунга» с использованием программы ImageJ 1.46.

Материал и методы исследования

Исследование проведено на телятах породы красная степная в 2013 г. на базе ООО «Омсксельхозпродукт». Сформированы две группы животных: опытная (п = 25) - в ежедневный рацион введен кормовой концентрат «ЭМ-Курунга»; контрольная группа (п = 25) - животные с обычным стандартным рационом.

© Гуляева Е.А., Лескова А.Ю., Митраков Н.В., 2014

Путем пункционной биопсии с соблюдением правил асептики и антисептики, с предварительным проведением местной инфильтрационной анестезии 0,25%-ным раствором лидокаина с помощью автоматического биопсийного инструмента SuperCore фирмы Angiotech забирался столбик печени длинной 5-10 мм. При взятии биопсии печени прокол осуществлялся с правой стороны в области 11-го межреберья на 2-3 см ниже линии маклока. У взрослых животных, согласно имеющимся рекомендациям, игла вводится в направлении левого плечелопаточного сочленения. Учитывая топографические особенности расположения печени у растущих животных (молодняк крупного рогатого скота), иглу вводили медленно, перпендикулярно поверхности кожи на глубину 2-3 см [6; 8].

Печень фиксировали в 10%-ном нейтральном растворе формалина на фосфатном буфере фирмы ООО «Биовитрум» (Санкт-Петербург). Материал заливали в парафин по общепринятой методике [5; 7]. На ротационном микротоме LaboCut 4055 (фирма Slee, Германия) готовили срезы толщиной 3-5 мкм, размещали на стандартных по толщине предметных стеклах, окрашивали гематоксилином и эозином. После окраски срезы заключали в синтетическую среду BioMount и покрывали стандартными покровными стеклами. Микрофотосъемку гистологических препаратов проводили на микроскопе Axio Imager. Z1 с встроенным TV-адаптером и цифровой видеокамерой Carl AxioCam MRс 5, окуляр W-PI 10x/23, объективы: A-Plan 5x/0.12; EC Plan-Neofluar 10x/0.30 M27; EC Plan-Neofluar 20x/0.50 M27; EC Plan-Neofluar 40x/0.75 M27; EC Plan-Neofluar 100x/1.30 Oil M27. Морфометрический анализ проводили согласно общепринятым рекомендациям [1] с использованием программы ImageJ 1.46. Статистический анализ проводили с использованием программы Statistica for Windows (Версия 6.0, StatSoft, Inc.). Различия между независимыми выборками определяли с помощью двухвыборочного критерия Манна-Уитни, для категориальных переменных и множественного сравнения использовался критерий х2 [4]. Нулевая гипотеза отвергалась, а альтернативная принималась при p < 0,05.

Результаты исследований

Установлено, что параметры, характеризующие структурно-функциональное состояние паренхимы печени у животных обеих групп, варьировали в рамках физиологической нормы. Признаков дистрофических и некробиотических очаговых изменений не выявлено. Различия, обнаруженные в ходе морфометрического исследования, в основном касались содержания гранул гликогена, количества многоядерных гепатоцитов, фигур митоза и клеток Купфера. У животных основной группы значения вышеназванных показателей были статистически значимо выше соответственно на 25,5, 12,4, 10,5 и 8,6% (критерий Манна-Уитни, p < 0,05).

Однако морфологические изменения в печени при использовании препарата не ограничивались только найденными морфометрическими сдвигами. Необходимо учитывать то, что ткань печени неоднородна по своей структуре и представляет собой совокупность модулей (надклеточных интегрированных компартментов) - долек, являющихся функционально целостными самостоятельными элементами с детерминированными межклеточными взаимоотношениями, определяющими их функцию. Любые внешние и внутренние воздействия приводят к тому, что существующие в норме строгие функциональные взаимосвязи между каждым из составляющих модуля (гепатоциты, клетки Купфера, клетки крови, триады, центральные вены) изменяются. Эти изменения могут отражать активацию адаптивных или патологических процессов. В зависимости от последнего меняется и сбалансированная работа печеночной паренхимы.

Поэтому любая информация о сдвиге каких-либо параметров, включая и тинктори-альные свойства составляющих модуля, в любом направлении позволяет судить о переходе на другой уровень работы или о дестабилизации функциональных систем печени. Изменения тинкториальных свойств ткани печени, содержащей преимущественно печеночные клетки, как правило, выявляются раньше структурных и поэтому могут отражать начальные этапы активации патоморфоза или компенсаторного гистогенеза в печени.

Программа ImageJ 1.46 позволяет с помощью построения гистограмм распределения пикселей осуществить описание тинкториальных изменений ткани печени количественными показателями, выявить временные и пространственные закономерности их развития на малых и больших увеличениях.

С этих позиций нами установлено, что ткань печени животных основной группы, незначительно отличающаяся по классическим морфометрическим параметрам от таковой группы сравнения, приобретала явные отличия при построении гистограмм в различных спектрах.

Было выявлено, что при использовании «ЭМ-Курунги» на 8-битовых гистограммах распределения серого цвета происходит сдвиг максимальной яркости окраски от триады, а также увеличение яркости пика почти в 1,2 раза по сравнению с группой сравнения. Кроме того, выявлялось статистически значимое (критерий х2 = 35,6, df = 12 p = 0,001) различие относительного содержания основных групп пикселей, отражающих синий, зеленый и красный цвета. Эти данные свидетельствуют о возможности получения ранее недоступной информации при использовании автоматического анализа графических объектов с помощью программы ImageJ 1.46. Полученные количественные данные о тинкториальных свойствах ткани печени позволяют свидетельствовать о различии функциональной активности гепатоцитов сравниваемых групп 6-месячных телят красной степной породы, а также о меньшей вероятности развития в основной группе цитотоксических и фибропластических процессов.

Таким образом, прижизненное гистологическое исследование структуры и тинктори-альных свойств печени телят при обычном рационе и использовании «ЭМ-Курунги» позволило установить наличие статистически значимых различий по ряду количественных параметров, отражающих структурно-функциональное состояние печени на клеточном и тканевом уровнях. Обнаруженные различия целесообразно также интерпретировать как отражение внутри- и междифферонных (модульных) различий строения печени при использовании про-биотиков. Вполне вероятно, что «ЭМ-Курунга» активирует биоэнергетические и биосинтетические процессы в печени, изменяет взаимоотношения клеток различных дифферонов в гистионе, целенаправленно повышая компенсаторно-восстановительные возможности печеночных клеток 6-месячных телят красной степной породы.

Список литературы

1. Автандилов, Г.Г. Введение в количественную патологическую морфологию / Г.Г. Автандилов. - М. : Медицина, 1980. - 216 с.

2. Войнов, Н.А. Современные проблемы и методы биотехнологии : электронное учеб. пособие / Н.А. Войнов, Т.Г. Волова, Н.В. Зобова и др. - Красноярск : ИПК СФУ, 2009. - 418 с.

3. Новицкий, А.А. Использование пробиотических препаратов («Байкал ЭМ1», «ЭМ-Курунга») в животноводстве и ветеринарии методические рекомендации / А.А. Новицкий [и др.]. - Омск : ФГОУ ВПО ИВМ ОмГАУ, 2009. - 48 с.

4. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. - М. : МедиаСфера, 2002. - 312 с.

5. Гистологическая техника : учеб. пособие / В.В. Семченко, С.А. Барашкова, В.Н. Ноздрин, В.Н. Артемьев. - 3-е изд., доп. и перераб. - Омск ; Орел : Ом. Обл. типография, 2006. - 290 с.

6. Прижизненная оценка морфофункционального состояния тканей, органов и систем животного

B.В. Семченко [и др.] // Мофология. - 2013. - Т. 144. - № 5. - С. 112.

7. Хонин, Г.А. Морфологические методы исследования в ветеринарной медицине / Г.А. Хонин,

C.А. Барашкова, В.В. Семченко. - Омск : Ом. Обл. типография, 2004. - 198 с.

8. Способы прижизненного взятия материала для гистологического исследования у животных / А.Ю. Лескова [и др.] // Обеспечение ветеринарного благополучия в животноводстве и птицеводстве : матер. Междунар. науч.-практич. конф. - Омск : Вариант-Омск, 2013. - С. 132-135.

SUMMARY E.A. Gulyaeva, A. Y. Leskova, N. V. Mitrakov

Morphological characteristics hepatocytes in 6-month-old red steppe calves breed in standard conditions and at introduction in the diet Em-Kurunga

In this paper we evaluate the state of structural and functional organization of the liver hepatocytes 6-month-old calves at the cellular and tissue levels of the organization in standard conditions and the application of the preparation «Em-Kurunga».

Keywords: morphology, histology, hepatocyte, liver, cattle, EM technology.

УДК 619:616.981.49:636.4.(579.64)

К.В. Околелов, П.В. Аржаков, Л.С. Эпельдимов

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КОМПОСТНЫХ БУРТОВ И ПОЧВЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ УЧАСТКОВ ПОСЛЕ УБОРКИ БУРТОВ

Представлены результаты исследования на выживаемость патогеных микрофлоры в компостных буртах при всех сроках закладки и в почвах экспериментальных участков после уборки буртов. Полученные данные свидетельствуют, что для микробиологических показателей компостных буртов характерно отсутствие патогенных микроорганизмов во все сроки закладки, почва по микробиологическим показателям - чистая, свободная от патогенных энтеробактерий и органических загрязнений.

Ключевые слова: бурт, получение компоста, патогенные энтеробактерии, индекс бактерий группы кишечной палочки, индекс энтерококков.

Введение

В самой начальной стадии строительства крупных птицеводческих комплексов допущено упущение проектных институтов, которые в своих разработках запланировали технологию утилизации птичьего помета при закладке его в бетонные пометохранилища или вывозе на специальные площадки для буртования. В проектах предусматривалось длительное накапливание пометных масс с последующим использованием в земледелии [1].

Технология переработки птичьего помета должна быть направлена на получение эффективного органического удобрения, соответствующего санитарно-гигиеническим показателям. Для получения качественного органического удобрения необходимо изучение микробиологических показателей почвы до и после закладки птичьего помета в бурты для компоста [1, 2, 3].

Цель исследований - изучить выживаемость патогенной микрофлоры в компостных буртах при всех сроках закладки и в почвах экспериментальных участков после уборки буртов.

Объекты и методы

Объектами исследования служили компостные бурты на основе птичьего помета от 120-дневной птицы с разными сроками закладки и почва после уборки буртов.

Выделение микробных культур проведено на средах Эндо, МПА.

Идентифицированы выделенные микроорганизмы при помощи наборов для идентификации микроорганизмов по биохимическим показателям MIKRO-LA-TEST®, разработанных в фирме «Erba Lache ma». Наборы влючали: ЭНТЕРОтест 24, предназначенный для идентификации микроорганизмов семейства энтеробактерий, СТАФИтест 24 - для идентификации мик-

© Околелов К.В., Аржаков П.В., Эпельдимов Л.С., 2014

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.