CC BY
6
гиена и санитария 5/2008
4. Для разработки мер, направленных на восполнение установленных дефицитов макро- и микроэлементов, а также снижение риска развития элементозов у детей, внедрены методические рекомендации.
Литература
1. Агаджанян Н. А., Скальный А. В. Химические элементы в среде обитания и экологический портрет человека. — М., 2001.
2. Выявление и коррекция нарушений обмена макро-и микроэлементов: Метод, рекомендации. — М., 2000.
3. Методика определения микроэлементов в диагностируемых биосубстратах методом масс-спектромет-рии с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС): Метод, рекомендации, утв. ФЦГСЭН 26.03.2003. — М., 2003.
4. Методика определения микроэлементов в диагностирующих биосубстратах атомной спектрометрией с индуктивно связанной аргоновой плазмой, утв. ФЦГСЭН 29.01.2003. - М., 2003.
5. Определение химических элементов в биологических средах и препаратах методами атомно-эмисси-онной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой и масс-спектрометрией: Метод, указания (МУК
4.1.1482-03, МУК 4.1.1483-03) / Иванов С. И., Годунова Л. Г., Скачков В. Б. и др. — М., 2003.
6. Скальный А. В. Микроэлементы для вашего здоровья. - М., 2003.
7. Скальная М. Г., Дубовой Р. А/., Скальный А. В. Химические элементы — микронутриенты как резерв восстановления здоровья жителей России. — Оренбург, 2004.
8. Скальный А. В. Химические элементы в физиологии и экологии человека. — М., 2004.
9. Сусликов В. Л. Геохимическая экология болезней. Т. 2. Атамовиты. — М., 2000.
Поступила 04.12.07
Summary. Atomic emission spectrometry using inductively coupled argon plasma and mass spectrometry with inductively coupled argon plasma were employed to analyze the elemental composition of the hair of the children living in Ulan-Ude and going to preschool institutions. The children and adolescents were shown to be at high risk for deficiencies of a number of essential chemical elements: cobalt, copper, iodine, manganese, and silicon. The preschool children were also at high risk for zinc deficiency. The children going to kindergartens had abundant hair accumulation of sodium, potassium, and calcium, which suggests the high risk of electrolytic metabolic disturbances. They were also at moderate risk for hyperphosphorosis and hyperboronosis.
Профилактическая токсикология и гигиеническое нормирование
С КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2008
УДК 616.33-002.44-02:614.771:632.951-091.8-092.9
М. Т. Расулов, А. М. Шахназаров, М. А. Шахназаров
МОРФОГЕНЕЗ АЦЕТАТНОЙ ЯЗВЫ ЖЕЛУДКА В УСЛОВИЯХ ХРОНИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ПЕСТИЦИДА ГЕКСАХЛОРЦИКЛОГЕКСАНА
ГОУ ВПО Дагестанская государственная медицинская академия, Махачкала
Хлорорганические пестициды (ХОП) относятся к приоритетным веществам-загрязнителям окружающей среды [1]. Они оказывают общетоксическое и политроп-ное действие на организм [3—5], способны проникать в богатые липоидами нервные клетки, а также накапливаться в паренхиматозных органах. Некоторые ХОП (хлориндан, гептахлор) способны блокировать БН-груп-пы тиоферментов и белков (2]. Этим можно объяснить их влияние на процессы окисления и фосфорилирова-ния, нарушение углеводного обмена, биосинтеза белков, формирование симптоматики поражения ЦНС и печени.
Цель исследования — изучение морфогенетических и гистоэнзиматических особенностей репаративной регенерации язвы желудка в условиях длительного перораль-ного введения ХОП гексахлорциклогексана (ГХЦГ) в пороговых и действующих дозах.
В качестве материала исследования использовали 40 самцов белых беспородных крыс с воспроизведенной по методу Окабе—Пфейфера ацетатной язвой. Затравку животных начинали через 3 дня, к моменту формирования острой язвы. Все подопытные животные были разделены на 4 группы. 1-я группа получала перорапьно с питьевой водой ГХЦГ в концентрации 100 ПДК (2 мг/л); 2-я — 50 ПДК (1 мг/л); 3-я - 10 ПДК (0,2 мг/л); 4-я - 1 ПДК (0,02 мг/л).
Контроль обеспечивали 3 группы животных: контроль 1 — животные после воспроизведения модели аце-
татной язвы находились на обычном рационе (10 крыс); контроль II — животные без воспроизведения язвы, получавшие пестицид с питьевой водой (по 5 крыс для каждой дозы пестицида); контроль III — интактные (5 крыс).
Для изучения брали кусочки тканей желудка из области язвы и отдаленного участка. У контрольных животных кусочки ткани вырезали из адекватных отделов желудка. Срезы тканей изучали гистоморфологически посредством окраски гематоксилин-эозином и пикро-фуксином по методу Ван-Гизона. Наряду с этим использовали комплекс гистохимических и гистоэнзиматических методик. Определяли активность дегидрогеназ (ДГ) (а-глицерофосфата, сукцината, лактата и НАД-Диафора-зы) по методу Нахласса с использованием в качестве акцептора водорода нитросинего тетразолия, щелочной и кислой фосфатаз (ЩФ, КФ) — методом азосочетания по Берстону. Выявляли также содержание нейтральных (НГАГ) и кислых гликозаминогликанов (КГАГ) ШИК-реакцией по методу Мак-Мануса и окраской альциано-вым синим. Для оценки интенсивности процессов регенерации изучали содержание РНК и ДНК (метод Бра-ше). О состоянии медиаторов симпатической и парасимпатической иннервации судили по активности ацетилхо-линэстеразы (АХЭ, метод Келле—Жеребцова).
Все гистохимические и гистоэнзиматические данные подвергали денситофотометрии продукта реакции с по-
Рис. 1. Созревающая грануляционная ткань на дне язвы с дезорганизацией коллагеновых волокон и выраженной лимфоцитарно-нейтрофильной реакцией при хроническом введении ГХЦГ в дозе 10 ПДК.
Окраски гематоксилином и эозином. *40
мощью комплекса аппаратно-программного определения фотометрических параметров биоматериалов Мекос — Ц1 производства ЗАО "Медицинские компьютерные системы" (Москва).
В группе животных с ацетатной язвой желудка, получавших раствор ГХЦГ в дозе 1 ПДК, заживление язв наблюдалось у 70% крыс (в контроле 80%), пенетрация в печень — в 4 случаях (в контроле в 2 случаях), летальный исход — в 1. Незажившие язвы имели следующие макроскопические характеристики: диаметр 0,3—0,7 см, глубина до 0,3 см, контуры четкие, дно тусклое; на разрезе стенки желудка несколько истончены и уплотнены, контуры оболочек стертые. Спайки желудка с печенью прочные.
В случаях с зажившими язвами слизистая серо-розо-вого цвета, блестящая и без складчатости, представлена слабо выраженными мешотчатыми и воронкообразными углублениями. Спайки серозы желудка с печенью незначительные, легко разрываются. Стенка желудка на разрезе, как и в случае с незажившими язвами, была истончена и уплотнена. Микроскопически слизистая оболочка представлена покровно-ямочным эпителием, секрети-рующим слизь с формированием атрофичных железистых структур без главных и париетальных клеток.
При хроническом пероральном воздействии ГХЦГ в дозе I ПДК заживление язвы желудка происходит по типу гипо- и гиперрегенерации. При этом слизистая оболочка покрыта атрофичными мукоцитами без париетальных и главных клеток. По сравнению с контрольной фуппой животных в краевых отделах хронических язв повышалась активность всех ДГ, НАД-диафоразы и КФ, а также наблюдалось некоторое усиление реакции на нейтральные и кислые мукополисахариды (НМПС, КМПС) и РНК.
В гладкомышечных структурах также повышается активность всех ферментов и усиливается ШИК-реакция и реакция на нуклеопротеиды. В ауэрбаховских сплетениях снижается активность глицерофосфатдегидрогеназы (а-ГФДГ), НАД-диафоразы и повышается активность других ферментов. Следовательно, длительное воздействие малых доз ГХЦГ усиливает метаболические процессы в гистоструктурах вокруг зоны язвенного дефекта.
У всех животных, получавших ГХЦГ в дозе 10 ПДК (0,2 мг/л), обнаружена хроническая язва желудка с пенетрацией в печень; погибла I крыса. Язвы имели диаметр 0,3— 0,7 см, глубину до 0,4 см. Спайки желудка с тканью печени хорошо выражены. Дно дефектов сероватое, тускловатое, на разрезе стенки желудка уплотнены, белесоватые. Поверхностная зона в области дна незажившей язвы была представлена узкой полосой воспалительной инфильтрации нейрофилами и лимфоцитами со слоем фибриноидного некроза и заметным угнетением активности всех ДГ и НАД-диафоразы.
В грануляционной ткани, представленной коллагеновыми волокнами, вертикально ориентированными сосудами, фибробластами и лимфо-плазмоцитами (рис. 1), сохранялась слабая активность СДГ, а-ГФДГ и НАД-диафоразы с некоторым повышением в эпителии регенерирующих дисплазированных желез.
В краевых зонах язвы в слизистой и мышечной оболочках незначительно повышалась активность ДГ и КФ, а также гистохимических реакций на полисахариды и нуклеопротеиды. В ауэрбаховских сплетениях отмечалось угнетение активности СДГ, а-ГФДГ и ЩФ.
В группе животных, получавших раствор ГХЦГ в дозе 50 ПДК (1 мг/л), погибло 3 крысы. Незажившие язвы обнаружены в 50% случаев. Морфологически в случаях с незажившими язвами диаметр их составлял 0,4—0,8 см, глубина до 0,5 см (рис. 2); на разрезе в области дна язвы стенка желудка прочно сращена с тканью печени, белесоватая. Микроскопически здесь определялась значительно выраженная воспалительная лимфоцитарно-ней-трофильная инфильтрация с некробиозом и некрозом клеток в поверхностной зоне язвенного дефекта со значительным угнетением активности всех ДГ и выраженным повышением активности ЩФ и КФ в нейтрофилах.
Далее следовала созревающая грануляционная ткань с большим количеством сосудов и умеренным содержа-
Рис. 2. Незажившая пенетрирующая в печень язва желудка, обнаруженная у животного, получавшего перо-рально в течение 5—6 мес с питьевой водой ГХЦГ в дозе 50 ПДК (отмечена стрелкой).
^игиена и санитария 5/2008
Рис. 3. Частичное наползание пролиферирующего покровно-ямочного эпителия с формированием дефектных железистых структур со сниженной активностью НАД-диафоразы при введении ГХЦГ в дозе 100 ПДК. Реакция Нахласса. * 100.
нием лимфоплазмоиитов и фибробластов со сниженной активностью а-ГФДГ, СДГ и КФ и повышением активности ЛДГ, НАД-диафоразы и ЩФ, равно как и в зрелой соединительной ткани. В краевой зоне язвы наблюдалась пролиферация эпителия покровно-ямочного типа с несколько повышенной активностью СДГ и ЛДГ с частичным наползанием на дно язвы и более выраженным погружением в склерозированную подслизистую основу.
В более глубоких слоях повышается активность ЛДГ, НАД-диафоразы и ЩФ. В слизистой, мышечной оболочках и нейронах ауэрбаховских сплетений краевых отделов язв активность СДГ, а-ГФДГ, НАД-диафоразы и ЩФ понижалась.
У 100% животных, получавших ГХЦГ в дозе 100 ПДК (2 мг/л), обнаружены незажившие пенетрируюшие в печень язвы; погибло 2 крысы. Макроскопические характеристики язвенных дефектов: диаметр 0,4—1,2 см, глубина до 0,4 см, края валикообразные, вишнево-красного цвета, дно обложено тусклым налетом. На разрезе контуры стенок "смазаны" с тканью печени в результате пе-нетрации.
Микроскопически зона детрита представлена в виде широкого вала фибринозно-нскротических масс с воспалительной инфильтрацией с преобладанием нейтро-филов и еще более выраженным угнетением активности ДГ и НАД-диафоразы и повышенной активностью КФ и ЩФ. Границы между зонами экссудации и фибрино-идного некроза стертые. В нижележащей грануляционной ткани сохранялась значительно выраженная воспалительная смешанно-клеточная инфильтрация с преобладанием нейтрофилов с высокой активностью ЩФ и КФ и умеренной активностью ДГ в соединительнотканных структурах. Отмечался более активный ангиогенез с вертикальной ориентацией сосудов и коллагеновых волокон, достигающих поверхностных слоев дня язвы. В глубже лежащей рубцующейся грануляционной ткани определялась более выраженная цитогенность (фибро-бласты, лимфоплазмобласты, с примесью нейтрофилов) с умеренной активностью а-ГФДГ и СДГ и выраженным
повышением активности ЛДГ и НАД-диафоразы.
В краевых участках язвы наблюдалось частичное наползание пролиферирующего ямочного эпителия с формированием на поверхности дефектных железистых структур с повышенной активностью СДГ на 1%, КФ на 56% и ЩФ на 50%; снижение активности отмечено со стороны а-ГФДГ на 9%, ЛДГ на 32% и НАД-диафоразы на 6% (рис. 3).
Таким образом, в результате морфологических и гистоэнзимати-ческих исследований с учетом данных цитофотометрических измерений установлены некоторые особенности морфогенеза ацетатной язвы желудка при длительном перо-ральном введении различных доз ГХЦГ. По мере увеличения дозы вводимого препарата от 10 до 100 ПДК в области дна язвы расширялась зона фибриноидного некроза и воспалительной реакции. При дозах 50 и 100 ПДК нарастала также интенсивность пенетрации язвы в печень; на большую глубину распространялись дистрофические и некробиотические изменения гепатоцитов, а также зона интерстициального гепатита. Если при дозах 1 и 10 ПДК в краевых отделах язвы в слизистой и мышечной оболочках можно было наблюдать повышение активности всех изучаемых ферментов и гистохимических показателей на МПС и РНК, то при введении в дозах 50 и 100 ПДК наступает угнетение активности ДГ и реакции на ГАГ. В области дна язвы нервные ганглии не выявляются даже в случаях регенерации дефекта слизистой желудка. Обнаруженные по краям язвы ганглии атрофич-ные, со сниженной активностью АХЭ, ДГ и повышенной ЩФ.
Л ите ратура
1. Александрии А., Бунатян Ю., Сахкалян Э. // Тезисы докладов 2-го съезда токсикологов России. — М.. 2003. - С. 45-46.
Артамонова В. Г., Шата,юва Н. Н. // Профессиональные болезни. — М., 1996. — С. 342. Федоров J1. А., Яблоков А. В. Пестицины — токсический удар по биосфере и человеку. — М., 1999. O'MaUey М. // Energ. - Sante. - 1997. - Vol. 8, N 3. Sanderson W. Т., Talaska G.,IZaebst D. et al. // Environ. Rosr. - 1997. - Vol. 74. - P. 133-144.
Поступила 19.07.07
Summary. Morphological, histochemical, and histoenzy-matic studies were employed to study the morphogenetic features of acetate-induced gastric ulcer in 40 rats during chronic enteral administration of the organic chlorine pesticide hex-achlorocyclohexane. The authors first established the structural and metabolic bases of mucosal regeneration defects in the region of an ulcer upon chronic enteral exposure to the toxic agent and the dose dependence of the chronic nature of acute gastric ulcer.
2.
3.
4.
5.
