CC BY
21
УДК 619:576.895.122 D0I: 10.31016/1998-8435-2019-13-2-64-72
Морфофункциональные особенности изменения органов Fasciola hepatica после лечения овец триклабендазолом при фасциолёзе
Оксана Ивановна Бибик, Любовь Васильевна начева
Кемеровский государственный медицинский университет Минздрава России, 650029, г. Кемерово, ул. Ворошилова, 22а, e-mail: kemsma@kemsma.ru
Поступила в редакцию: 21.03.2019; принята в печать: 02.04.2019
Аннотация
цель исследований: изучить морфофункциональные изменения в тегументе, кишечнике и паренхиме Га$сю!а Ьврайса после воздействия триклабендазола.
материалы и методы. Объектом исследования служили трематоды Г. hepat¡ca, взятые через 24 ч из печени спонтанно инвазированных овец после введения триклабендазола в дозе 10 мг/кг. Трематод фиксировали в растворе метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3: 1, а затем в 70%-ном спирте. Материал обрабатывали по общепринятой гистологической методике и заливали в парафин. Срезы толщиной 5-7мкм окрашивали гистологическими и гистохимическими методами и изучали в световом микроскопе.
Результаты и обсуждение. Морфофункциональные исследования тегумента и кишечника Г. hepat¡ca - органов, которые первыми воспринимают антигельминтик, показали их глубокие структурные изменения после действия триклабендазола. Действию антигельминтика подвергается и паренхима - ткань внутренней среды, которая служит системой, регулирующей обменные процессы и гомеостаз организма паразита. Продукты распада паренхимы повышают токсические свойства антигельминтика и его метаболитов, и в совокупности это оказывает более выраженное воздействие на репродуктивные органы, в том числе и на матку с яйцами.
ключевые слова: Fasc¡o!a hepat¡ca, патоморфология, триклабендазол, тегумент, кишечник, овцы, паренхима.
Для цитирования: Бибик О. И., Начева Л. В. Морфофункциональные особенности изменения органов Fasc¡o!a hepat¡ca после лечения овец триклабендазолом при фасциолёзе //Российский паразитологический журнал. 2019. Т. 13. № 2. С. 64-72. йО1: 10.31016/1998-8435-2019-13-2-64-72.
© Бибик О. И., Начева Л. В.
Morphofunctional peculiarities of Fasciola Hepatica organs Changes After Treatment of sheep with triclabendazole in Case of Fasciolosis
Oksana i. Bibik, Lyubov v. Nacheva
Kemerovo State Medical University of Russia Ministry of Health, 650029, Kemerovo, Voroshilova str., 22a, e-mail: kemsma@kemsma.ru
Received on 21.03.2019; accepted for printing on: 02.04.2019
Abstract
The purpose of the research is to study morphofunctional changes in tegument, intestines and parenchyma of Fasciola hepatica after triclabendazole influence.
Materials and methods. The objects of the research were F. hepatica, taken from the liver of spontaneously infected sheep in 24 hours after triclabendazole influence at a dose of 10 mg/kg. Trematodes were fixed in methyl alcohol and glacial acetic acid solution at the ratio 3: 1, and then in 70% alcohol. The material was treated by the generally accepted histologic procedure and submerged into paraffin. Sections with thickness 5-7 mkm were dyed with histological and histochemical methods and were studied in a light microscope.
Results and discussion. Morphofunctional research of tegument and intestines of F. hepatica - organs which perceived anthelminthic first, showed its deep structural changes after triclabendazole influence. Parenchyma - a tissue of internal environment, which is a system regulating parasite's organism metabolic processes and homeostasis is also exposed to anthelminthic influence. Parenchyma's decay products increase toxic properties of anthelminthic and his metabolites, and in common this greatly influences on reproductive organs, including a female with eggs.
Keywords: Fasciola hepatica, pathomorphology, triclabendazole, tegument, intestines, sheep, parenchyma.
For citation: Bibik O. I., Nacheva L. V. Morphofunctional peculiarities of Fasciola hepatica organs changes after treatment of sheep with triclabendazole in case of fasciolosis. Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Parasitology. 2019; 13 (2): 64-72. DOI: 10.31016/1998-8435-2019-13-2-64-72.
Введение
Фасциолез человека - актуальная проблема здравоохранения во всём мире. Во многих странах Европы, Америки, Азии, Африки и Западной части Тихого океана регистрируют вспышки фасциолёза, охватывающие сотни людей [17, 22, 26, 32-35, 42-44]. Высокая зараженность фасциолами животных на территории России позволяет прогнозировать и увеличение заболеваемости человека этим гельминтозом [1, 9, 10, 12-15, 18, 21, 23, 24].
Высокая эффективность препарата (100%-ная) против взрослых и молодых фасциол была подтверждена при лечении триклабен-дазолом спонтанно инвазированных животных в естественных условиях [2, 7, 25, 28-30, 36-41].
Триклабендазол, в химическом строении 5-хлор-6-(2,3-дихлорфенокси)-2-метилтио-бензимидазол, был открыт и введен прежде всего в ветеринарную практику (под названием фазинекс) фирмой Сиба-Гейги (Швейцария) в 1983 г. [1, 16, 25, 27]. После экспертной оценки антигельминтика, ВОЗ принято решение об использовании триклабендазола для лечения фасциолеза людей в терапевтической дозе 10 мг/кг [11].
Морфофункциональные исследования органов и тканей фасциол до и после действия препарата в условиях как in vitro, так и in vivo, проведённые с помощью гистологических и
гистохимических методов, наглядно показали, что они дополняют копрологические данные по эффективности действия антигельминти-ков и одновременно позволяют установить механизм их воздействия на каждую ткань и каждый орган сосальщиков [4-6, 8, 19, 31]. Микроморфологические методы исследования дают возможность изучить действие лекарственного вещества единовременно на большом числе сосальщиков, что увеличивает статистическую достоверность действия препарата на фасциол и повышают эффективность данных исследований [3, 20, 41, 46].
Цель исследования - изучить морфофунк-циональные изменения в тегументе, кишечнике и паренхиме ¥а$ао1а ЬграНса после воздействия триклабендазола.
Материалы и методы
Объектом исследования служили трематоды Е Нграйса, взятые из печени спонтанно инвазированных овец после действия трикла-бендазола в дозе 10 мг/кг [2]. Животные контрольной группы антигельминтик не получали. ЬграНса, выделенные из организма овец через 24 ч после введения препарата, а также фасциол от нелеченых животных фиксировали в растворе метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3 : 1, а затем в 70%-ном спирте. Материал обрабатывали по общепринятой гистологической методике и заливали в парафин. Срезы толщиной
5-7 мкм окрашивали гистологическими и гистохимическими методами и изучали в световом микроскопе МБИ-6.
Результаты и обсуждение
Гистологические исследования Е НвраЫса после действия триклабендазола показали глубокие нарушения структуры эктосома-тических органов - тегумента и кишечника, которые первыми подвергаются влиянию антигельминтика. Вторичному воздействию триклабендазола подвергается и ткань внутренней среды - паренхима, которая служит системой, регулирующей метаболизм и гоме-остаз организма паразита. Продукты распада за счёт декомпозиции паренхимы повышают токсические свойства антигельминтика и его метаболитов и в совокупности оказывают действие на репродуктивные органы, в том числе и на матку с яйцами.
После действия антигельминтика границы слоев тегумента почти на всём протяжении тела трематод сохранены, но обнаружена отечность и изменение цветовой гаммы при окрашивании, т.е. нарушено химическое восприятие красителей морфологическими структурами эктосоматического органа. Местами встречается отторжение наружной части тегумента, особенно это видно в передней половине тела паразита, где наружная часть тегумента отслоена и шипы разрушены. С латеральных сторон в середине тела фасциол наружная часть тегумента отторгается частично, шипы местами сохранены, но структура их деформирована и кроме этого наблюдается повышение их эозинофильности. На продольном срезе препарата из Е. НвраЫса хорошо видно увеличение ширины шипов в их основании до 0,0021 мм, в то время как до действия триклабендазола она составляла 0,00112 мм. Это изменение ширины шипов подтверждает процесс их набухания. Базальная мембрана также имеет набухший вид с нехарактерным серым окрашиванием за счет отека коллагено-вых волокон и искажения их тинкториальных свойств. Во внутренней части тегумента увеличено число клеточных элементов. Пролиферация клеток возникает в данном случае как защитная реакция на токсическое действие антигельминтика. В базальной части тегумен-та обнаружены крупные клетки секреторного
типа (рис. 1), содержимое которых напоминает вид хлопьевидной субстанции, и очевидно, что это результат денатурации белков или их осаждения в результате высаливания под действием метаболитов антигельминтика и патологического процесса, возникающего в ткани. В норме в секрете этих клеток содержатся белки, которые хорошо окрашиваются бром-феноловым синим. После воздействия анти-гельминтика бромфенолофилия отсутствует.
Рис. 1. Фрагмент тегумента и кортикальной зоны паренхимы Р.ЫраИса после воздействия триклабендазола (окраска по маллори)
Морфофункциональные изменения, обнаруженные нами в тегументе фасциол после действия триклабендазола in vivo, имеют место и в работах иностранных учёных, изучавших действие триклабендазола на F. hepatica находящихся в условиях in vitro [45].
После действия триклабендазола отмечено нарушение секреции клеток кишечного эпителия. В передней части тела апикальная зона кишечного эпителия частично расплавлена, а местами на продольных срезах F. hepatica хорошо видна десквамация микроворсинок кишечного эпителия и их скопление в просвете кишечника. Клетки базальной зоны кишечного эпителия передней части тела представлены гомогенно окрашенным слоем, состоящим из слипшихся клеток, с отсутствием конту-рируемых ядер. В задней части тела фасциол произошел аутолиз кишечного эпителия и за счет расплавления клеточных структур границы его слоев размыты; не определена апикальная и базальная зоны кишечника (рис. 2). В прилежащей паренхиме наблюдали декомпозицию и деструкцию соединительной тка-
Рис. 2. Фрагменты кишечника F. hepatica после действия триклабендазола (окраска гематоксилином и эозином)
ни, а мышечные волокна вблизи кишечника были представлены фрагментарно. На всем протяжении тела паразита выражена отечность разных тканей с явлениями фокального расплавления.
Установлено, что триклабендазол воздействует на базальные мембраны пограничных органов - тегумента и кишечника, а также плазматических мембран клеток внутри тела паразита, что вероятнее всего ведет к утрате активного мембранного транспорта. За счёт нарушения структуры мембран, избирательная проницаемость прекращается, и внутрь клеток проникают низкомолекулярные анионы, а затем и катионы, повышается внутриклеточное осмотическое давление. В результате этого резко нарушается мембранный водно-электролитный транспорт, вследствие чего происходит набухание, отек клеток и тканей. Выявлена отечность клеточных элементов кортикальной зоны паренхимы - ткани, прилегающей к внутренней части тегумента. В передней части тела паразита паренхима сохраняет ячеистый характер с наличием содержимого. В средней части тела паразита ячеистый характер паренхимы сглаживается, волокна соединительной ткани оборваны, выпрямлены, удлинены и представлены деструктивной массой, заполняющей пространство между органами. Наличие полостей с участками выраженного некроза характерно для глубинной части паренхимы, следующей за кортикальной зоной. Разрушение паренхимы повышает ток-
сические свойства антигельминтика и в совокупности с деструкцией и дисфункцией оказывает действие на репродуктивную систему, в том числе и на матку с яйцами.
Заключение
Морфофункциональный анализ органов и тканей F. hepatica показал, что тегумент и кишечник - эктосоматические органы, подвергающиеся воздействию антигельминтика в первую очередь, а также мезосоматическая ткань - паренхима после действия триклабендазола характеризуются деструкцией, декомпозицией и дисфункцией, что подтверждает фасци-олоцидную эффективность антигельминтика.
Литература
1. Архипов И. А. Антигельминтики: фармакология и применение. М., 2009. 406 с.
2. Архипов И. А., Кошеваров Н. И., Мусаев М. Б., Бибик О. И., Михайлицын Ф. С. Действие триклабендазола в системе «паразит-хозяин» // «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями»: матер. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН. М., 2009. Вып. 10. С. 26-28.
3. Бибик О. И. Патоморфология и гистохимическая реактивность органов и тканей трематод после действия антигельминтиков: автореф. дис... канд. биол. наук. М., 1997. 13 с.
4. Бибик О. И. Морфофункциональная характеристика органов и тканей паразита и хозяина при трематодозах после химиотерапии анти-гельминтиками: дис. . д-ра биол. наук. М., 2012. 360 с.
5. Бибик О. И. Патоморфологическое описание органов и тканей паразита как критерий оценки противотрематодной эффективности анти-гельминтиков // «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины»: сб. науч. трудов к 60-летию Кемеровской государственной медицинской академии. Кемерово, 2015. С. 26-27.
6. Бибик О. И., Архипов И. А. Микроморфофунк-циональные особенности органов мужской половой системы фасциол после действия анти-гельминтиков - бензимидазолов // «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями»: матер. докл. междунар. науч. конф. Все-рос. о-ва гельминтол. РАН. М., 2017. Вып. 18. С. 59-62.
7. Бибик О. И., Начева Л. В. Патоморфологическая оценка эффективности действия триклабенда-
зола на органы и ткани фасциолы печёночной // Медицина в Кузбассе. 2007. № 3. С. 19-22.
8. Бибик О. И., Начева Л. В. Гистохимические исследования эктосоматических органов трематод - тегумента и кишечника, как основа функциональной морфологии // «Наука в современном информационном обществе»: матер. XIII междунар. науч.-практ. конф. н.-и. ц. «Академический». 2017. Т. 3. С. 9-12.
9. Горохов В. В. Прогноз эпизоотической ситуации в РФ по основным гельминтозам на 2014 год // Российский паразитологический журнал. 2014. № 2. С. 32-33.
10. Докторов Ю. С., Круглое Ю. А., Глимин В. Н. Некоторые особенности фасциолеза крупного рогатого скота в Ульяновской области // «Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе»: сб. докл. междунар. конф. М., 1999. С. 226.
11. Использование основных лекарственных средств: Восьмой доклад комитета экспертов ВОЗ (Серия техн. докл. № 882). М., 1999. С. 41.
12. Каримов Ф. А. Клинико-морфологическая характеристика костной ткани при фасцио-лезе крупного рогатого скота // «Основные достижения и перспективы развития паразитологии»: матер. междунар. конф. М., 2004. С. 134-135.
13. Коляда Е. Е. Эпизоотология и терапия фасци-олёза и дикроцелиоза крупного рогатого скота в Среднем Поволжье: автореф. дис... канд. вет. наук. М., 2004. 25 с.
14. Лошкарёва В. В. Маритогония трематод у крупного рогатого скота и оптимизация сроков применения антигельминтиков в условиях Среднего Предуралья: автореф. дис. канд. вет. наук. М., 2005. 25 с.
15. Мальцев К. Л., Аксенов А. Н. Экстенсивность и интенсивность фасциолезной инвазии крупного рогатого скота в Центральночерноземной зоне России. М., 2001. 6 с.
16. Михайлицын Ф. С., Архипов И. А., Елеев А. Б., Подушкин В. Ю., Севбо Д. П. Разработка отечественного образца противофасциолезного антигельминтика триклабендазола и оценка его терапевтической эффективности // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2005. № 4. С. 40-41.
17. Молчанов И. А., Сорокина Н. П., Фабиан А., Горохов В. В. Фасциолез как серьезный зоо-антропоноз // Ветеринарная патология. 2004. № 4 (11). С. 97-102.
18. Мусаев М. Б, Миленина М. В., Архипов И. А., Халиков С. С., Михайлицын Ф. С., Варламова А. И. Эффективность супрамолекулярных комплексов триклабендазола с полимерными наполнителями при фасциолёзе // Российский паразитологический журнал. М. 2017. Т. 41, Вып. 3. С. 271-276.
19. Начева Л. В. Морфоэкологический анализ и эволюционная динамика тканевых систем трематод, реактивность их органов и тканей при действии антигельминтиков: автореф. дис. ... д-ра биол. наук. М., 1993. 57 с.
20. Начева Л. В., Бибик О. И., Гребенщиков В. М. Антигельминтики, эффективность их действия на органы и ткани Opisthorchis felineus (гистологические и гистохимические исследования). Кемерово, 2000. 93 с.
21. Сорокина Н. П., Молчанов И. А. Эпизоотология фасциолеза крупного рогатого скота в Московской области // «Основные достижения и перспективы развития паразитологии»: матер. междунар. конф. М., 2004. С. 295-296.
22. Сорокина Н. П., Москвин А. С., Горохов В. В. Фасциолез человека, вызываемый Fasciola hepatica // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2003. № 1. С. 37-39.
23. Тхакахова А. А., БиттироваА. А.,БережкоВ. К., Биттиров А. М. Видовой состав гельминтов и зараженность овец в горных урочищах Кабардино-Балкарии на высоте 1200-2500 м н. у. моря // «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями»: матер. докл. между-нар. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН. М., 2017. Вып. 18. С. 492-495.
24. Устинов А. М., Сафиуллин Р. Т., Сафиуллин Р. Р. Распространение фасциолёза и гипо-дерматоза крупного рогатого скота в хозяйствах Калужской области // «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями»: матер. докл. междунар. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН. М., 2017. Вып. 18. С. 502-506.
25. Boray J. C., Crowfoot P. D., Strong M. B., Allison J. R., Schellenbaum M., von Orelli M., Sarasin G. Treatment of immature and mature Fasciola hepatica infections in sheep with triclabendazole. Vet. Rec., 1983;113: 315-317.
26. Ersoy N., Tinar R. Human distomatosis (Fasciola hepatica): a case report from Bursa Social Security Hospital. T. Parazitol. Derg., 1992; 16: 73-79.
27. Fairweather I. Triclabendazole: New skills to unravel an old(ish) enigma. J. Helminthol., 2005; 79: 227-234.
28. Fairweather I., Boray J. C. Mechanisms of fasciolicide action and drug resistance in Fasciola hepatica. In Fasciolosis Dalton J.P. Ed. CABI Publishing. Wallingford UK, 1999; 7: 225-276.
29. Halferty L., Brennan G. P., Hanna R. E. B., Edgar H. W., Meaney M. M., McConville M., Trudgett A., Hoey L., Fairweather I. Tegumental surface changes in juvenile Fasciola hepatica in response to treatment in vivo with triclabendazole. Vet. Parasitol., 2008; 115: 49-58.
30. Halferty L., Brennan G. P., Trudgett A., Hoey L., Fairweather I. Relative activity of triclabendazole metabolites against the liver fluke, Fasciola hepatica. Vet. Parasitol., 2009; 159: 126-138.
31. Hanna R. Fasciola hepatica: Histology of the Reproductive Organs and Differential Effects of Triclabendazole on Drug-Sensitive and Drug-Resistant Fluke Isolates and on Flukes from Selected Field Cases. Pathogens. 2015; 4(3): 431456.
32. Holm P. I., Kristoffersen E. K. Скандинавский случай (местного) заражения фасциолезом человека. Scand. J. Infec. Diseases. 2002; 34(7): 548-550.
33. Kabaalioglu A., Cubuk M., Senol U., Cevikol C., Karaali K., Apaydin A., Sindel T., Luleci E. Fascioliasis: US, CT and MRI findings with new observations. Abdom Imaging. 2000; 25: 400404.
34. Kabaalioglu A., Ceken K., Alimoglu E., Saba R., Cubuk M., Arslan G., Apaydin A. Hepatobiliary Fascioliasis: Sonographic and CT Findings in 87 Patients during the Initial Phase and Long-Term Follow-Up. Hepatobiliary Imaging Clinical Observations. 2007; 189: 824-828.
35. Mas-Coma S., Bargues M. D., Valero M. A. Fascioliasis and other plant-borne trematode zoonoses. Int. J. Parasitol., 2005; 35: 1255-1278.
36. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Edgar H. W. J, Hanna R. E. B., McCoy M., Gordon A. W., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. An evaluation of the efficacy of compound alpha and triclabendazole against two isolates of Fasciola hepatica. Vet. Parasitol., 2009; 162: 75-88.
37. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Edgar H. W J., McCoy M., Castillo R., Hernandez-Campos A., Fairweather I. Surface and internal tegumental changes in juvenile Fasciola hepatica following treatment in vivo with the experimental fasciolicide, compound alpha. Vet. Parasitol., 2008; 153: 52-64.
38. McConville M., Brennan G. P., Edgar H. W. J., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I.
Ultrastructural changes to the tegumental system and the gastrodermal cells in adult Fasciola hepatica following in vivo treatment with the experimental fasciolicide, compound alpha. Parasitology. 2009; i36: 655-680.
39. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Hanna R. E. B., Edgar H. W. J., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Surface changes in adult Fasciola hepatica following treatment in vivo with the experimental fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res., 2009; i05: 757-767.
40. McConville M., Hanna R. E. B., Brennan G. P., McCoy M., Edgar H. W. J., McConnell S., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Fasciola hepatica: Disruption of spermatogenesis by the fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res., 20i0; i06: 3П-323.
41. McConville M., Hanna R. E. B., Brennan G. P., McCoy M., Edgar H. W. J., McConnell S., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Fasciola hepatica: Disruption of spermatogenesis by the fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res., 20i0; i06: 3П-323.
42. Miguel F., Carrasco J., Garcia N., Bustamante V., Beltran J. CT findings in human fascioliasis. Gastrointestinal Radiology. i984; 9: i57-i59.
43. Ooms H. W A., Puylaert J. B. C. M., van der Werf S. D. J. Biliary fascioliasis: US and endoscopic retrograde cholangiopancreatography findings. Eur. Radiol., i995; 5: i96-i99.
44. Pulpeiro J. R., Armesto V., Varela J., Corrdoira J. Fascioliasis: findings in i5 patients. Br. J. Radiol., i99i; 64: 798-80i.
45. Savage J., Meaney M., Brennan G. P., Hoey E., Trudgett A., Fairweather I. Increased action of triclabendazole (TCBZ) in vitro against a TCBZ-resistant isolate of Fasciola hepatica following its co-incubation with the P-glycoprotein inhibitor, R(+)-verapamil. Experimental Parasitology. 20i3. 642-653.
46. Scarcella S., Hanna R. E. B., Brennan G. P., Solana H., Fairweather I. Fasciola hepatica: Histological changes in the somatic and reproductive tissues of liver fluke following closantel treatment of experimentally-infected sheep. Veterinary Parasitology. 20i6; 2i5: 38-47.
References
1. Arkhipov I. A. Anthelmintics: pharmacology and application. M., 2009; 406. (In Russ.)
2. Arkhipov I. A., Koshevarov N. I., Musaev M. B., Bibik O. I., Mikhailitsyn F. S. Triclabendazole influ-
ence in system "parasite-host". «Theory and practice of parasitic diseases control»: materials of scientific conference of All-Russia society of helminthology RAS (Russian Academy of Sciences). М., 2009; 10: 26-28. (In Russ.)
3. Bibik O. I. Pathomorphology and histochemical reactivity of trematodes organs and tissues after anthelmintics influence: a dissertation abstract... candidate of biological sciences. М., 1997; 13. (In Russ.)
4. Bibik O. I. Morphofunctional characteristic of parasite and host organs and tissues in case of trema-todosis after chemotherapy with anthelmintics: a dissertation ... of doctor of biological sciences. М., 2012; 360. (In Russ.)
5. Bibik O. I. Pathomorphological description of parasite's organs and tissues as a criterion of assessment of anthelminthic effectiveness against trematodes. «Actual questions of clinical and experimental medicine»: a collection of scientific works to the 60 anniversary of Kemerovo State Medical Academy. Kemerovo, 2015; 26-27. (In Russ.)
6. Bibik O. I., Arkhipov I. A. Micromorphofunctional peculiarities of masculine reproductive system organs of fasciolas after anthelmintics - benzidamo-zoles influence. «Theory and practice of parasitic diseases control»: materials of report of international scientific conference of All-Russia society of hel-minthology RAS (Russian Academy of Sciences). М., 2017; 18: 59-62. (In Russ.)
7. Bibik O. I., Nacheva L. К Pathomorphological assessment of triclabendazole influence effectiveness on Fasciola hepatica organs and tissues. Meditsina v Kuzbasse = Medicine in Kuzbass. 2007; 3: 19-22. (In Russ.)
8. Bibik O. I., Nacheva L. V. Histochemical researches of trematodes ectosomatical organs - a tegument and intestines as a basis of functional morphology. «Science in contemporary informational society»: materials of XIII international scientific conference of scientific and research center «Akademiches-kiy». 2017; 3: 9-12. (In Russ.)
9. Gorokhov V. V. Prognosis of epizootic situation in the RF on basic helminthosis on 2014 year. Rossiys-kiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian journal of parasitology. 2014; 2: 32-33. (In Russ.)
10. Doktorov Yu. S., Kruglov Yu. A., Glimin V. N. Some peculiarities of cattle fasciolosis in Uliya-novsk region. «Problems of infective and invasion diseases in animal breeding on contemporary stage»: a collection of reports of international conference. М., 1999; 226. (In Russ.)
11. Application of main pharmaceutical products: The eighth report of WHO (World Health Orga-
nization) (Series of technical reports № 882). М., 1999; 41.
12. Karimov F. A. Clinical and morphological characteristic of bone tissue in case of animal fasciolosis. «Main achievements and perspectives of parasitology»: materials of international conference. М., 2004; 134-135. (In Russ.)
13. Kolyada Е. Е. Epizootology and cattle fasciolosis and dicrocoeliosis therapy in Middle Volga: a dissertation abstract...candidate of veterinarian sciences. М., 2004; 25. (In Russ.)
14. Loshkaryova V. V. Trematodes maritogony of cattle and optimization of anthelminthic application terms in conditions of Middle Volga: a dissertation abstract.candidate of veterinarian sciences. М., 2005; 25. (In Russ.)
15. Maltsev К. L., Aksenov А. N. Extensity and intensity of cattle fasciolosis infection in Central Black Earth zone of Russia. М., 2001; 6. (In Russ.)
16. Mikhailitsyn F. S., Arkhipov I. A., Eleev А. B., Podushkin V. Yu., Sevbo D. P. Development of local sample of fasciolicide triclabendazole and assessment of its therapeutic effectiveness. Medit-sinskaya parazitologiya i parazitarnyye bolezni = Medicine parasitology and parasitic diseases. 2005; 4: 40-41. (In Russ.)
17. Molchanov I. А., Sorokina N. P., Fabian А., Gorokhov V. V. Fasciolosis as a serious zooan-throponosis. Veterinarnaya patologiya = Veterinary pathology. 2004; 4 (11): 97-102. (In Russ.)
18. Musaev М. B., Milenina М. V., Arkhipov I. А., Khalikov S. S., Mikhailitsyn F.S., Varlamova А. I. Effectiveness of triclabendazole supramolecular complexes with polymer filling in a case of fasciolosis. Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian journal of parasitology. М. 2017; 41(3): 271-276. (In Russ.)
19. Nacheva L. V. Morphoecological analysis and evolutionary dynamics of trematodes tissue systems, their organs and tissues reactivity in case of anthelminthic influence: a dissertation abstract. candidate of biological sciences. М., 1993; 57. (In Russ.)
20. Nacheva L. V., Bibik О. I., Grebenschikov V. М. Anthelmintics, effectiveness of their influence on Opisthorchis felineus organs and tissues (histo-logical and histochemical researches). Kemerovo, 2000; 93. (In Russ.)
21. Sorokina N. P., Molchanov I. А. Fasciolosis epi-zootology of cattle in Moscow region. «Main achievements and perspectives of parasitology development»: materials of international conference. М., 2004; 295-296. (In Russ.)
22. Sorokina N. P., Moskvin А. S., Gorokhov V. V. Human fasciolosis caused by Fasciola hepatica. Meditsinskaya parazitologiya i parazitarnyye bolezni = Medicine parasitology and parasitic diseases. 2003; 1: 37-39. (In Russ.)
23. Tkhakakhova А. А., Bittirova А. А., Berezhko V. К., Bittirov А. М. Helminthes species composition and sheep infection in mountain natural boundaries of Kabardino-Balkaria at the height of 1200-2500 m below sea level. «Theory and practice of parasitic diseases control»: materials of report of international scientific conference of All-Russia society of helminthology RAS (Russian Academy of Sciences). М., 2017; 18: 492495. (In Russ.)
24. Ustinov А. М., Safiullin R. Т., Safiullin R. R. Extension of cattle fasciolosis and hypodermatosis in Kaluga region farms. «Theory and practice of parasitic diseases control»: materials of report of international scientific conference of All-Russia society of helminthology RAS (Russian Academy of Sciences). М., 2017; 18: 502-506. (In Russ.)
25. Boray J. C., Crowfoot P. D., Strong M. B., Allison J. R., Schellenbaum M., von Orelli M., Sarasin G. Treatment of immature and mature Fasciola hepatica infections in sheep with triclabendazole. Vet. Rec. 1983; 113: P. 315-317.
26. Ersoy N., Tinar R. Human distomatosis (Fasciola hepatica): a case report from Bursa Social Security Hospital. T. Parazitol. Derg., 1992; 16: 73-79.
27. Fairweather I. Triclabendazole: New skills to unravel an old(ish) enigma. J. Helminthol. 2005; 79: 227-234.
28. Fairweather I., Boray J. C. Mechanisms of fas-ciolicide action and drug resistance in Fasciola hepatica. In: Fasciolosis Dalton J.P. Ed. CABI Publishing. Wallingford UK, 1999; 7: 225-276.
29. Halferty L., Brennan G. P., Hanna R. E. B., Edgar H. W., Meaney M. M., McConville M., Trudgett A., Hoey L., Fairweather I. Tegumental surface changes in juvenile Fasciola hepatica in response to treatment in vivo with triclabendazole. Vet. Parasitol. 2008; 115: 49-58.
30. Halferty L., Brennan G. P., Trudgett A., Hoey L., Fairweather I. Relative activity of triclabendazole metabolites against the liver fluke, Fasciola hepatica. Vet. Parasitol. 2009; 159: 126-138.
31. Hanna R. Fasciola hepatica: Histology of the Reproductive Organs and Differential Effects of Triclabendazole on Drug-Sensitive and Drug-Resistant Fluke Isolates and on Flukes from Selected Field Cases. Pathogens. 2015; 4(3): 431-456.
32. Holm P. I., Kristoffersen E. K. Scandinavian occasion of (local) human fasciolasis. Scand. J. Infec. Diseases. 2002; 34(7): 548-550.
33. Kabaalioglu A., Cubuk M., Senol U., Cevikol C., Karaali K., Apaydin A., Sindel T., Luleci E. Fas-cioliasis: US, CT and MRI findings with new observations. Abdom Imaging. 2000; 25: 400-404.
34. Kabaalioglu A., Ceken K., Alimoglu E., Saba R., Cubuk M., Arslan G., Apaydin A. Hepatobiliary Fascioliasis: Sonographic and CT Findings in 87 Patients during the Initial Phase and Long-Term Follow-Up. Hepatobiliary Imaging Clinical Observations. 2007; i89: 824-828.
35. Mas-Coma S., Bargues M. D., Valero M. A. Fas-cioliasis and other plant-borne trematode zoono-ses. Int. J. Parasitol. 2005; 35: i255-i278.
36. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Edgar H. W. J., Hanna R. E. B., McCoy M., Gordon A. W., Castillo R., Hernández-Campos A., Fair-weather I. An evaluation of the efficacy of compound alpha and triclabendazole against two isolates of Fasciola hepatica. Vet. Parasitol. 2009; i62: 75-88.
37. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Edgar H. W. J., McCoy M., Castillo R., Hernandez-Campos A., Fairweather I. Surface and internal tegumental changes in juvenile Fasciola hepatica following treatment in vivo with the experimental fasciolicide, compound alpha. Vet. Parasitol. 2008; i53: 52-64.
38. McConville M., Brennan G. P., Edgar H. W. J., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Ultrastructural changes to the tegumental system and the gastrodermal cells in adult Fasciola hepatica following in vivo treatment with the experimental fasciolicide, compound alpha. Parasi-tology. 2009; i36: 655-680.
39. McConville M., Brennan G. P., Flanagan A., Hanna R. E. B., Edgar H. W. J., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Surface changes in adult Fasciola hepatica following treatment in vivo with the experimental fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res. 2009; i05: 757-767.
40. McConville M., Hanna R. E. B., Brennan G. P., McCoy M., Edgar H. W. J., McConnell S., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Fas-ciola hepatica: Disruption of spermatogenesis by the fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res. 20i0; i06: 3П-323.
41. McConville M., Hanna R. E. B., Brennan G. P., McCoy M., Edgar H. W. J., McConnell S., Castillo R., Hernández-Campos A., Fairweather I. Fas-
ciola hepatica: Disruption of spermatogenesis by the fasciolicide, compound alpha. Parasitol. Res. 2010; 106: 311-323.
42. Miguel F., Carrasco J., Garcia N., Bustamante V., Beltran J. CT findings in human fascioliasis. Gastrointestinal Radiology. 1984; 9: 157-159.
43. Ooms H. W. A., Puylaert J. B. C. M., van der Werf S. D. J. Biliary fascioliasis: US and endoscopic retrograde cholangiopancreatography findings. Eur. Radiol. 1995; 5: 196-199.
44. Pulpeiro J. R., Armesto V., Varela J., Corrdoira J. Fascioliasis: findings in 15 patients. Br. J. Radiol. 1991; 64: 798-801.
45. Savage J., Meaney M., Brennan G. P., Hoey E., Trudgett A., Fairweather I. Increased action of triclabendazole (TCBZ) in vitro against a TCBZ-resistant isolate of Fasciola hepatica following its co-incubation with the P-glycoprotein inhibitor, R(+)-verapamil. Experimental Parasitology. 2013. 642-653.
46. Scarcella S., Hanna R. E. B., Brennan G. P., Solana H., Fairweather I. Fasciola hepatica: Histological changes in the somatic and reproductive tissues of liver fluke following closantel treatment of experimentally-infected sheep. Veterinary Parasitology. 2016; 215: 38-47.
