CC BY
17МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ ЭНТЕРОХРОМАФФИННЫХ КЛЕТОК
ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ Орипов Ф.С.1, Дехканов Т.Д.2, Ахмедов А.И.3, Холхужаев Ф.И.4
1Орипов Фирдавс Суръатович - доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой;
2Дехканов Ташпулат Дехканович - доктор медицинских наук, профессор, кафедра гистологии, лечебный факультет; 3Ахмедов Адхам Ибодуллаевич - ассистент, кафедра хирургии;
4Холхужаев Фаррух Икромович - ассистент, кафедра травматологии и ортопедии, педиатрический факультет, Самаркандский государственный медицинский институт, г. Самарканд, Республика Узбекистан
Аннотация: люминесценто-гистохимическим методом изучена флюоресценция энтерохромаффинных клеток (ЕС клетки, эндокринные клетки открытого типа) двенадцатиперстной кишки в норме, при экспериментальной термической травме. Установлено, что при термической травме в ранние сроки происходит относительное уменьшение серотонина, который восстанавливается на 10 сутки после травмы.
Ключевые слова: двенадцатиперстная кишка, энтерохромаффинные клетки, экспериментальная термическая травма.
В регуляции функциональной деятельности внутренних органов в общем и органов пищеварительной системы в частности, наряду с центральным участвуют и местные регуляторные структуры, которым относятся их интрамуральный нервный и диффузный эндокринный (дисперсный эндокринный аппарат, АПУД - система) аппарат. Вырабатывая биогенные амины (пептидные гормоны) эндокриноциты диффузной эндокринной системы внутренних органов участвуют в обеспечении взаимосогласованной работы различных отделов органов и во взаимосвязи их с соседними органами. По морфофункциональным особенностям эндокриноциты бывают открытого и закрытого типов. Последние так называются потому, что они, поодиночно располагаясь среди эпителиоцитов слизистой оболочки, своим апикальным концом достигают поверхности эпителия, следовательно, полости органов. По данным некоторых исследователей, они несколько выступают в полость органа, образуя на апикальной части структуру в виде конца барабанной палочки. Следовательно, эти клетки первыми соприкасаются с содержимы органов пищеварения и в ответ на полученной хеморецепторной информации вырабатывают биогенные амины и этим формируют «систему первичного реагирования, оповещения и защиты организма» (2). Научные рабы, посвященные изучению диффузной эндокринной (АПУД-) системы имеются (3, 4, 5). Исследования, посвященные морфофункциональным особенностям диффузной эндокринной системы, продолжаются и в нынешнем столетии (1, 6, 7, 8). Клетки открытого типа (ЕС-клетки, энтерохромаффинные клетки) органов пищеварения содержат катехоламины и серотонин, которые при воздействии специальными веществами дают флюоресценции. Цвет и интенсивность свечения зависят от количественного соотношения этих моноаминов.
Цель исследования. Изучение морфофункциональных особенностей флюоресценции эндокриноцитов открытого типа двенадцатиперстной кишки при экспериментальной термической травме.
Материал и методы исследования. Материалом для наших исследований служили двенадцатиперстная кишка 12 взрослых кроликов. Из них 3 кролика составляли контрольную группу. У остальных кроликов моделирована экспериментальная кожная термическая травма. Эвтаназию 5 кроликов на 5 сутки эксперимента проводили кровопусканием под наркозом, соблюдая правила биоэтики. 4 кроликов на 10 сутки после эксперимента эвтаназировали таким же способом. Материал взятий сразу после забоя замораживали в криостате и серийные послойные срезы обработали раствором глиоксиловой кислоты по методу В.Н. Швалева и Н.И. Жучковой, Препараты рассматривали в тёмном поле под люминесцентным микроскопом ЛЮМАМ И2, используя фильтры ФС-1-4 и ФС-1-6. Фотографировали флюоресцируюшиеся эндокриноциты открытого типа на цветных позитивных пленках.
Результаты исследования. Двенадцатиперстная кишка является отделом пищеварительного тракта, где обнаруживается наибольшая плотность эндокринных клеток, в том числе и эндокриноцитов открытого типа. Поэтому некоторые исследователи называют ее «гипофизом» брюшной полости. Эндокриноциты открытого типа флюоресцирующие изумрудно-зеленым (катехоламинсодержащие участки) и желтовато белым (серотонинсодержащие участки) свечением обнаруживаются в составе эпителия ворсинок и крипт. Это можно наблюдать, используя фильтр ФС-1-2 (когда видны силуэты ворсинок и крипт). Соотношение размеров этих светящихся участков цитоплазмы неодинаковое.
4
к % ■4
9
Рис. 1. Степень свечения эндокриноцитов открытого типа контрольного (А) кролика и у кролика на 5 сутки термической травмы (Б). Метод обработки раствором глиоксиловой
кислоты. Об.20. гомаль 5
В цитоплазме эндокринных клеток открытого типа двенадцатиперстной кишки контрольных кроликов также различается два вида свечения. Участки, содержащие катехоламины, светятся изумрудно-зеленым свечением, а участки, содержащие серотонин, - желтовато-белым свечением. Соотношение и локализация этих участков у разных клеток разные и, по-видимому, зависят от их функционального состояния в момент забора материала (рис. 1А). На 5 сутки экспериментальной термической травмы интенсивность их свечения усиливается, расширяются участки цитоплазмы с зеленым свечением. Видны силуэты их несветящихся ядер (рис. 1Б). Соотношение
моноаминов увеличивается в сторону катехоламинов. На препаратах, приготовленных из материала, взятого из кроликов на 10 сутки после эксперимента, флюоресценция клеток становятся идентичной с показателями контрольных кроликов.
Заслуживающим внимания, на наш взгляд, фактом является то, что у контрольных кроликов в цитоплазме эндокриноцитов открытого типа участки со светящимися серотонином относительно больше, а на 5 сутки термической травмы, наоборот больше участки со светящимися катехоламинами (зеленое свечение). У кроликов на 10 сутки после эксперимента соотношение серотонина и катехоламинов приближается к показателям контрольных кроликов,
Таким образом, наше исследование позволяет предполагать, что при термической травме в цитоплазме эндокриноцитов открытого типа двенадцатиперстной кишки участки со светящимся серотонином уменьшаются, а участки с зеленым свечением увеличиваются по сравнению с показателями кроликов контрольной группы. На 10 сутки после эксперимента приблизительно восстанавливается прежнее соотношение биогенных аминов в цитоплазме клеток открытого типа. Повышение доля катехоламинов при термической травме можно квалифицировать как ответную реакцию их организма на стресс, связанный с термической травмой.
Список литературы
1. Дехканов Т.Д. Некоторые вопросы функциональной морфологии апудоцитов гастроэнтеропанкреатической зоны // Проблемы биологии и медицины, 2003. № 2. С. 35-37.
2. Яглов В.В. Актуальные проблемы биологии диффузной эндокринной системы // Архив .анатом. гист. и эмбриол.,1989. № 1. С. 14-29.
3. Alumets J., Häkanson R., Sundler F. Ontogeny of endocrine cells in porcine gut and pancreas. Animmunocytochemicalstudy. Gastroenterology, 1983. Dec.; 85(6):1359-72. PMID: 6138293.
4. Andrew A., Kramer B., Rawdon B.B. The origin of gut and pancreatic neuroendocrine (APUD) cells--the last word? J Pathol., 1998 Oct;186(2): 117- 8. doi: 10.1002/(SICI)1096-9896(1998100)186:2<117::AID-PATH152>3.0.CO;2-J. PMID: 9924424.
5. Ayer-Le Lievre C., Fontaine-Perus J. The neural crest: its relations with APUD and paraneuron concepts. ArchHistolJpn., 1982 Dec; 45(5):409-27. PMID: 6133509.
6. Cirillo C., VandenBerghe P., Tack J. Role of serotonin in gastrointestinal physiology and pathology. Minerva Endocrinol., 2011. Dec; 36(4):311-24.
7. Mil'to I. V., Sukhodolo I. V., Gereng E.A., Shamardina L.A. [Disperse endocrine system and APUD concept]. Morfologiia, 2011; 139(2):80-8. Russian. PMID: 21866814.
8. Mohammad-Zadeh L.F., Moses L., Gwaltney-Brant S.M. Serotonin: a review. J Vet Pharmacol Ther., 2008 Jun; 31(3):187-99. doi: 10.1111/j.1365-2885.2008.00944.x. PMID: 1847113.
