CC BY
63
УДК 619:611- 636.93
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗАХ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА
Усенко В.И., Константинова И.С.
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: пушные звери, постнатальный онтогенез,
яичники.
Key words: postnatal ontogeny, fur-bearing animals, ovaries.
Половые железы самок пушных зверей имеют обширные вне- и внутрисистемные связи, обеспечивающие цикличность функционирования яичников. С наибольшей активностью опосредовано или непосредственно на гонады влияют структуры гипоталамо-гипофизарной системы, что обеспечивает видовые особенности гормональной регуляции функции размножения на этапах ее становления, наступления половой зрелости, на формирование и течение полового цикла. Длительность периода размножения у пушных зверей связана с определенными возрастными сроками постнатального онтогенеза, при этом имеются видовые и индивидуальные особенности.
Материал и методы исследования. Материал для морфологических исследований был получен от клинически здоровых соболей и лисиц после их убоя. Пушные звери (n=48) в зависимости от возраста были распределены на 4 группы, по 6 самок в каждой. Первую группу самок составляли животные в возрасте 0,5 лет. Вторую группу самок составляли пушные звери периода полового созревания (1,5 лет). Третью группу зверей, отражающих активный период размножения, составляли самки в возрасте 5,5-9,5 лет у соболя и 2,5-5,5 лет у лисицы. Четвертая группа, характеризуемая как период ослабления репродуктивной функции, была представлена соболями в возрасте 10,5-11,5 лет и лисицами - 6,5-8,5 лет. Массу яичников определяли с точностью 0,01 г. Для проведения гистологических и гистохимических исследований яичники фиксировали в спирт-формоле (9:1), жидкости Карнуа. Уплотнение материала проводили путем заливки в парафин и готовили срезы толщиной 5-7 мкм. Выявление нейтральных жиров, холестерина и его эфиров, эстрадиола происходило после фиксации исследуемых объектов в 10%-ном растворе нейтрального формалина в криостатных срезах толщиной 10-15 мкм с использованием микротома-криостата. Для изучения структуры яичников гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином по Маллори. Эластические волокна выявляли по Тенцеру-Унна. Содержание нуклеиновых кислот
определяли по Браше (РНК) и Фельген-Россенбеку (ДНК). Контролем на РНК служили срезы, обработанные рибонуклеазой, на ДНК - срезы без гидролиза (Э.Пирс, 1962). Выявление гликозаминогликанов проводили
по методике Стидмена в модификации Моури. На гликопротеиды и гликоген окрашивали комбинированным альциановым синим - ШИК методом по Моури. Оценку интенсивности гистохимических реакций проводили визуально в плюсах. Для инкубации контрольных срезов с амилазой слюны гистопрепараты выдерживали в термостате при 37°С в течение 60 минут. Окрашивание яичников на нейтральные жиры проводили суданом III и суданом IV. Холестерин и его эфиры выявляли методом Шульца в модификации Маллори и по Окамото. Наличие эстрадиола определяли по Льюису и Лоббану. Исследование генеративной функции яичников проводили на основе анализа фолликулярной кинетики, где выявляли примордиальные, первичные, вторичные, зрелые и атретические фолликулы. В перечисленных фолликулах определяли их состояние, метрические значения отдельных структур. Статистическую обработку цифрового материала проводили методом вариационной статистики (Г.Ф. Лакин, 1990) с использованием программных пакетов "Microsoft Exel-2003".
Результаты исследований. Яичники у соболей до периода функциональной активности полового аппарата выстилает однослойный кубический эпителий, а в этот период и после него только однослойный плоский. Его высота снижается от 13,8±0,3 мкм до 9,0±0,3 мкм. У лисицы во все четыре исследуемых периода постнатального онтогенеза яичники покрывает однослойный плоский эпителий, а его высота изменяется от 5,5±0,2 мкм до 6,7±0,2 мкм. Под эпителием располагается белочная оболочка из плотной неоформленной волокнистой соединительной ткани. Белочная оболочка у пушных зверей преимущественно образована клетками фибробластического ряда различной степени зрелости и формы, с тинкториальными свойствами, влияющими на окрашиваемость оболочки. Между клетками в основном располагаются коллагеновые волокна с незначительным содержанием в межклеточном веществе эластических волокон. Гистохимическими реакциями в белочной оболочке выявляются гликопротеиды (ШИК-положительная реакция) и холестерин, являющийся предшественником при биосинтезе половых гормонов. Реакция на холестерин была более выраженной у лисицы, что, вероятно, связано с более высоким уровнем секреции половых гормонов у них. Гликопротеиды в белочной оболочке обеспечивают определенную вязкость и прочность ее структурного оформления. Толщина белочной оболочки имеет возрастную тенденцию к увеличению как у соболя так и лисицы, а наибольшей толщиной она характеризуется в период снижения репродуктивной активности. Толщина белочной оболочки у соболя изменяется от 30,4±2,2 мкм (1-й период) до 104,7±4,4 мкм (4-й период). У
лисицы этот показатель по периодам постнатального онтогенеза изменяется в значительно меньшем диапазоне от 23,0±0,4 мкм до 35,7±0,9 мкм.
Состояние фолликулярного аппарата у пушных зверей зависит от возраста и стадии полового цикла, связанной у соболя и лисицы с определенными сезонами года. У соболя активизация фолликулогенеза происходит в летний, у лисицы - в зимне-весенний периоды года (В .А. Берестов, 1985). У лисицы фолликулярный аппарат более развит и в корковом веществе выявляется больше фолликулов на более поздних стадиях фолликулогенеза, чем у соболя. До полового созревания пушных зверей диаметр примордиальных фолликулов у них отличается незначительно. Так, у соболя он составляет 35,4±0,5 мкм, а у лисицы 31,4±1,3 мкм. К периоду снижения репродуктивной активности их величина у этих видов животных составляет 73,0±2,5 мкм против 25,0±1,2 мкм. В активный период размножения, начиная со стадии вторичного фолликула, изменения их диаметра в яичниках соболя и лисицы в сравнительном аспекте становятся недостоверными (Р>0,05). Это утверждение справедливо только в отношении размера всего фолликула, так как диаметр овоцита в этих фолликулах у соболя больше, чем у лисицы. В первом случае он составляет 112,5±8,9 мкм, а во втором -59,6±1,0 мкм. Различия в диаметре овоцитов полостных фолликулов у соболя и лисицы сохраняются и в период снижения функциональной активности репродуктивной системы (4-й период). Так, у соболя диаметр овоцита составляет 177,2±4,6 мкм, а у лисицы 102,4±3,5 мкм. В зрелых фолликулах размер половых клеток у пушных зверей (соболь и лисица) различий не имеет (Р>0,05). Важным показателем клеточной активности является ядерно-цитоплазматическое отношение (ЯЦО) в клетке. Для полостных фолликулов яичников соболя и лисицы наиболее высокие значения ЯЦО овоцитов характерны для периода полового созревания, а наиболее низкие - для периода снижения репродуктивной функции. Причем их числовые выражения для этих видов пушных зверей являются примерно одинаковыми, так как их отличия статистически не достоверны (Р>0,05). Кроме развивающихся фолликулов, в корковом веществе яичников пушных зверей выявляются атретические фолликулы на всех стадиях предшествующего роста и развития. На более поздних стадиях атрезии фолликулов наблюдаются клетки, обладающие выраженной пиронинофилией, проникающие через блестящую оболочку в разрушающийся овоцит. Эти клетки являются макрофагами. В зрелых фолликулах в яичнике соболя и лисицы наиболее выраженная реакция на эстрадиол наблюдается в клетках гранулезы, наиболее близко расположенных к блестящей оболочке. Секретируемое вещество в полости фолликулов содержало гликозаминогликаны. Перед овуляцией зрелого фолликула в поверхностном эпителии отмечается интенсивный
митотический процесс, что предполагает влияние эпителия на процесс протеолиза и дезинтеграции белочной оболочки в яичнике.
Обсуждение. Абсолютная масса яичников у соболя и лисицы в активный период размножения соответственно равняется 174,1±14,2 и 510,3±35,1 мкм. Несмотря на меньшие размеры и массу яичников у соболя по сравнению с лисицей, у первых относительная масса (0,20) превышает таковую у лисицы (0,12). Вследствие этого наиболее широко
представленные в количественном отношении первичные фолликулы, находящиеся в начале фолликулогенеза, по своему размеру больше у соболя, чем лисицы. Это объясняется тем, что начальные стадии развития фолликулов до образования в них полости не контролируются
гонадотропинами, и лишь с момента ее возникновения фолликулы
становятся восприимчивы к ним. В этот период фолликулы увеличиваются в размере и приобретают способность к секреции половых гормонов. Диаметр вторичных фолликулов у лисицы увеличивается, прежде всего, за счет более развитых гранулезы и теки, в клетках которых и происходит синтез эстрогенов. Это, в конечном счете, способствует более массовому развитию преовуляторных фолликулов в яичниках лисицы. Изменения ЯЦО в яичниках свидетельствуют о том, что в период полового созревания пушных зверей отмечаются наиболее интенсивные синтетические
процессы в ядре и в меньшей степени синтез и процессы накопления желточных включений в цитоплазме. В период ослабления репродуктивной функции у пушных зверей более активно в овоцитах протекают процессы накопления в цитоплазме включений, о чем свидетельствует снижение числового выражения ЯЦО в 4-6 раз.
Таким образом, наряду с общими морфофункциональными изменениями в яичниках пушных зверей, происходящих в активный период размножения, у соболя и лисицы отмечаются и видовые различия. Они проявляются в разной высоте поверхностного эпителия и толщине белочной оболочки, величине диаметра овоцитов полостных фолликулов. Диаметр овоцита в полостном фолликуле в яичниках соболя превышает таковой у лисицы (Р<0,05). Перед овуляцией в зрелых фолликулах овоциты у соболя и лисицы принимают равнозначные метрические выражения, так как их различия достоверностью не обладают (Р>0,05). Атрезия полостных фолликулов происходит вследствие нарушения поступления питательных веществ в овоцит. Этот процесс сопровождается гибелью фолликулоцитов и их отслоением от базальной мембраны, деформацией блестящей оболочки и последующей вакуолизацией и плазморексисом овоцитов.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Берестов, В. А. Биологические особенности
пушных зверей / В.А. Берестов, Л.К. Кожевникова // Научные основы звероводства - Л.: Наука, 1985. - С. 35-54; 2. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. - М.: Высшая школа, 1990. - 352с.; 3. Пирс, Э. Гистохимия
теоретическая и прикладная / Пер. с англ. под ред. В.В. Португалова.- М.: издательство иностранной литературы, 1962. - 962с.
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗАХ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВОЗРАСТА
Усенко В.И., Константинова И.С.
Резюме
В четырех группах самок соболя и лисицы, отражающих различные периоды постнатального онтогенеза, исследованы макро-, микроморфологические и гистохимические особенности яичников пушных зверей. Выявлены видовые и морфофункциональные особенности яичников соболя и лисицы в активный период размножения.
MORPHOFUNCTIONAL MODIFICATIONS AT THE GONADS OF FUR-BEARING ANIMALS, DEPENDING ON THEIR AGE
Usenko V. I., Konstantinova I.S.
Sammary
Macro and micromorphological and histochemical peculiarities of the ovaries of the fur-bearing animals were investigated in the four groups of female sables and foxes, which reflect different periods of postnatal ontogeny. Specific and morphofunctional peculiarities of sables ovaries and vixen were discovered in the active period of reproduction.
УДК - 619:615.9:636.087+(470.41)
ИЗУЧЕНИЕ ЭМБРИОТОКСИЧЕСКИХ И ТЕРАТОГЕННЫХ СВОЙСТВ САПРОПЕЛЯ ОЗЕРА БЕЛОЕ ТУКАЕВСКОГО РАЙОНА
РЕСПУБЛИКИ ТАТАРСТАН
Файзрахманов Р.Н., Багманов М.А., Шакиров Ш.К., Файзрахманов Р.Н.
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: лабораторные животные, кормление, природные биологически активные вещества, эмбриотоксичность, тератогенность.
Key words: laboratory animals, feeding, natural biologically active substances, embryotoxicity, teratogenicity.
