CC BY
28
УДК: 611.013;591.4;591.3+616.21/.22;616.28 DOI:10.12737/21760
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТКАНЕЙ БАРАБАННОЙ ПЕРЕПОНКИ В ПРОЦЕССЕ РАЗВИТИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО СРЕДНЕГО ОТИТА
Н.Н. ШЕВЛЮК*, В.А. ДОЛГОВ*, Н.И. ИВАНОВА**, Л.Б. ЛУНЬКОВА**
*ГБОУ ВПО Оренбургский государственный медицинский университет Минздрава России, ул. Советская, 6, г. Оренбург, 460000, Россия "ГБУЗ Оренбургский областной врачебно-физкультурный диспансер, ул. Постникова, 11, г. Оренбург, 460000, Россия
Аннотация. На основе разработанной модели экспериментального хронического гнойного среднего отита с использованием обзорных гистологических, гистохимических, иммуноцитохимических и морфометрических методов исследована морфофункциональная характеристика тканей барабанной перепонки в условиях острого и хронического воспаления. Проведён подсчёт численности и показана динамика изменения состава клеточных элементов крови и соединительной ткани в барабанной перепонке в процессе острого и хронического воспаления. Выявлено, что наибольшая синтетическая активность дифференцированных фибробластов в соединительной ткани барабанной перепонке наблюдается с конца первой до конца второй недели от начала воспаления. Пролиферативная активность эпителиев, учитываемая по количеству митозов в эпителиальной ткани барабанной перепонки и выраженности экспрессии маркёра пролиферации белка Ki67 была максимальной на второй неделе от начала моделирования воспаления. Экспрессия проапоптотического белка Р53 была незначительной на исследованных сроках воспаления, она отмечалась на фоне выраженной экспрессии белка bcl-2. Выраженность ангиогенеза наиболее рельефно проявлялась в сроки с конца первой до конца второй недели. Длительный характер воспаления, переход его в хроническую стадию, указывает на высокую вирулентность использованного для моделирования острого гнойного среднего отита штамма микроорганизмов. Проведение антибактериальной терапии приводило к снижению воспалительного процесса и способствовало активизации синтетической активности клеток соединительной ткани, при этом и пролиферативная активность эпителия оставалась на достаточно высоком уров-не(особенно у многослойного эпителия), что способствовало восстановлению целостности барабанной перепонки. Однако, в ряде случаев и после консервативного лечения в барабанной перепонке сохраняются перфорации различного размера, что требует последующего хирургического лечения с использованием различных видов трансплантатов.
Ключевые слова: гнойный средний отит, барабанная перепонка, эпителий, соединительная ткань.
MORPHO-FUNCTIONAL TISSUE CHARACTERISTICS OF THE EARDRUM IN DEVELOPMENT OF
EXPERIMENTAL OTITIS MEDIA
N.N. SHEVLUK*, V.A. DOLGOV*, N.I. IVANOVA**, L.B. LUN'KOVA**
'Orenburg State Medical University, Sovetskaya str., 6, Orenburg, 460000, Russia **Orenburg Regional medical-sports clinic, Postnikov str., 11, Orenburg, 460000, Russia
Abstract. On the basis of the developed model of experimental chronic suppurative otitis media using overview histologic, histochemical, immunocytochemical and morphometric methods, the authors investigated the morpho-functional characteristics of tissues of the eardrum in acute and chronic inflammation. Counting the number was carried out. Dynamic changes in the composition of blood cell elements and connective tissue in the eardrum during acute and chronic inflammation were demonstrated. It was revealed that the largest synthetic activity of differentiated fibroblasts in the connective tissue eardrum is observed since the end of the first before the end of the second week of the onset of inflammation. Proliferative activity
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 143-148
of epithelia, recorded under the number of mitoses in the epithelium of the eardrum and the expression of the marker protein expression of Ki67 proliferation was maximal in the second week of the onset of inflammation simulation. The expression of proapoptotic protein P53 was little at the studied terms of inflammation. It is noted on the background of the expressed protein expression of bcl-2. Intensity angiogenesis was manifested most clearly in terms of the end of the first before the end of the second week. The protracted nature of inflammation, its transition into a chronic stage indicates the high virulence used for modeling of acute suppurative otitis media microbial strain. Antibiotic therapy has helped reduce inflammation and activation of the synthetic activity of connective tissue cells, and the epithelium and proliferative activity remained at a high level (especially multilayered epithelium), which contributed to the restoration of the integrity of the eardrum. However, in some cases of the conservative treatment, in the eardrum the perforation of various sizes are preserved, which requires a subsequent surgical treatment using different types of transplants.
Key words: purulent otitis media, the eardrum, epithelium, connective tissue.
Вопросам патогенеза, диагностики и лечения гнойного среднего отита посвящена обширная литература [1,5-7,9-12,15]. Определены этапы и характер преобразований структур среднего уха в ходе воспалительного процесса. Разработан ряд методов консервативного и хирургического лечения гнойного среднего отита. Однако, многие аспекты пролиферации и цитодифферен-цировки клеточных структур барабанной перепонки в ходе воспалительного процесса являются либо недостаточно изученными, либо дискуссионными. Практически отсутствуют сведения, касающиеся апоптотической активности тканей барабанной перепонки в ходе воспалительных процессов. Следует также отметить, что лечение не всегда приводят к полной гистио- и органо-типической репарации барабанной перепонки, обширный дефект в барабанной перепонке может сохраняться, способствуя хронизации процесса и развитию тугоухости.
Цель исследования - изучить характер морфофункциональных изменений в тканях барабанной перепонки при экспериментальном остром и хроническом среднем отите.
Материалы и методы исследования. Работа выполнена на 35 беспородных собаках без признаков «спонтанного отита» (из них на 30 собаках воспроизводили односторонний экспериментальный хронический гнойный средний отит, а 5 животных служили контролем). Для моделирования отита в тимпанальную полость путём прокола барабанной перепонки шприцем с иглой вводили по 1 мл. взвеси суточной агаровой культуры золотистого стафилококка, содержащей 5 млрд. микробов. Инфицирование барабанной полости у животных выполняли трёхкратно под наркозом с использованием операционного микроскопа. 1-е введение про-
изводилось для воспроизведения отита, 2-е и 3-е - на 10-е и 30-е сутки отита для развития хронического воспалительного процесса в среднем ухе. Штамм золотистого стафилококка (S. aureus) был получен из коллекции культур Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук (Оренбург).
Через 40 дней после начала опыта проводили лечение животных (внутримышечно вводили по 0,5 г. цефазолина 2 раза в день, местно промывали слуховой проход раствором фура-цилина до получения «сухого уха».
Для гистологических исследований материал фиксировали в 12% водном растворе формалина, обезвоживали в спиртах возрастающей крепости и заливали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 5-7 микрометров изготавливали на ротационном микротоме. Гистологические срезы окрашивали обзорными гистологическими (гематоксилин Майера и эозин, по методу Ван-Гизону) и гистохимическими методиками (перйодатом калия и реактивом Шиффа по Мак Манусу с контролем амилазой) [8].
О содержании гликогена судили на основе визуальной оценки интенсивности гистохими-ечской реакции. С использованием иммуноци-тохимических методов на парафиновых срезах мышц выявляли экспрессию про- и антиапоп-тотических белков (p53, bci-2). Для этой цели использовали моноклональные антитела фирмы «ABBIOTEC» (титр 1:150, инкубация 45 минут при комнатной температуре) и систему визуализации фирмы «BioGenex» (США). Для идентификации клеток с признаками проли-феративной активности применяли иммуноци-тохимическую реакцию с моноклональными
антителами №7 с использованием реактивов фирмы «Дако», Дания. В гистологических срезах барабанной перепонки на условной единицы площади срезов (размером 35*35 мкм.) определяли содержание клеточных элементов крови и соединительной ткани. В эпителии подсчитывали митотическую активность, выражаемую в количестве митозов на 1000 клеток.
Результаты и их обсуждение. Результаты исследования показали, что барабанная перепонка здоровых животных представляет собой тонкую соединительнотканную пластинку эллиптической формы, которая со стороны наружного слухового прохода покрыта многослойным плоским эпителием (рис. 1), со стороны барабанной полости - однослойным эпителием. Однослойный эпителий слизистой оболочки среднего уха на барабанной перепонке в основном однослойный плоский или кубический (реже - цилиндрический), а в периферийных участках барабанной перепонки - однослойный двурядный или многорядный мерцательный. Толщина барабанной перепонки небольшая, в нижней части она не превышает 100 микрометров и колеблется (в зависимости от её участка, а также от индивидуальной изменчивости) в пределах 60-100 микрометров. В верхней части барабанной перепонки её толщина достигает 200 и более микрометров. Размер длинной оси обычно не превышает 10 миллиметров, а размер короткой оси - не более 7 миллиметров. Соединительнотканная основа барабанной перепонки состоит из кол-лагеновых волокон, которые лежат в два слоя, в наружном слое они расположены радиально, а во внутреннем слое - циркулярно. В соединительной ткани барабанной перепонки располагаются сеть сосудов микроциркуляторного русла.
Клеточный состав соединительной ткани барабанной перепонки представлен преимущественно клеточными элементами фибробла-стического дифферона (фиброцитами, мало-дифференцированными и дифференцированными фибробластами), а также небольшим количеством иммуноцитов, среди которых преобладают лимфоциты. Содержание клеточных элементов соединительной ткани барабанной перепонки здорового животного отражён в табл. 1.
Рис. 1. Барабанная перепонка интактной собаки. Окраска препарата: гематоксилин Майера и эозин. Увеличение: окуляр *8, объектив *40
Таблица 1
Клеточный состав соединительной ткани барабанной перепонки и прилежащих участков наружного слухового прохода и слизистой оболочки среднего уха на этапах острого и хронического экспериментального воспаления
Содержание клеточных элементов на условной единице площади соединительной ткани (3600 квадратных микрометров)
Стадия 3 суток Стадия 7 суток Стадия 14 суток Стадия 21 суток Стадия 40 суток Клиническое выздо-ровле-ние
Лимфоциты 2,2±0,4 5,7±0,5* 2,0±0,5* 2,3±0,4 4,3±1,2* 0,8±0,1*
Макрофаги 1,4±0,3 5,0±0,2* 3,8±0,6* 3,1±0,3 3,6±1,4 0,5±0,1*
Гранулоци-ты 5,7±0,6 4,2±0,4* 2,0±0,4* 1,0±0,2* 1,0±0,3 -
Эндотелио-циты 4,0±0,3 5,7±0,6* 7,8±0,4* 6,9±0,5 7,3±0,5 3,6±0,3*
Малодиф-ферен ци-рованные фибробла-сты 3,1±0,7 4,0±0,5 2,9±0,5* 2,0±0,4 5,1±0,4* 3,0±0,2*
Дифференцированные фибробла-сты 2,1±0,5 6,3±0,6* 5,1±0,7 3,4±0,2* 5,2±0,4 1,9±0,1*
Фиброциты 1,7±0,2 1,9±0,3 3,2±0,3* 3,5±0,4 7,7±0,2* 2,4±0,1*
Примечание: * - Различия значимы при pк0,05
В условиях острого и хронического воспалительного процесса под воздействием бактериальных патогенов структура барабанной перепонки существенно изменяется. Толщина барабанной перепонки увеличивается за счёт отёка соединительной ткани органа. При этом усиливается миграция форменных элементов крови в соединительную ткань барабанной перепонки, а также прилежащих участков наружного слухового прохода и слизистой оболочки среднего уха (рис. 2).
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 143-148
В результате миграция в соединительную ткань клеточных элементов крови в соединительной ткани увеличивается доля иммуноци-тов (табл. 1). Из данных табл. 1 видно, что на начальных этапах воспаления в тканях барабанной перепонки повышено содержание гра-нулоцитов, преимущественно нейтрофилов, а при хронизации воспаления - преимущественно лимфоцитов и макрофагов. При этом в первую неделю воспаления в соединительной ткани обнаруживаются очаговые кровоизлияния.
Со стороны эпителиальной ткани отмечается инфильтрация эпителия лейкоцитами (преимущественно лимфоцитами). При этом лейкоцитарная инфильтрация наблюдается как в многослойном плоском эпителии, выстилающим наружную часть барабанной перепонки и стенку наружного слухового прохода, так и в однослойном эпителии слизистой оболочки среднего уха (рис. 2.).
Рис. 2. Барабанная перепонка собаки через 3 суток после экспериментального инфицирования среднего уха штаммом золотистого стафилококка. Окраска препарата: гематоксилин Майера и эозин. Увеличение: окуляр х8, объектив *40
Рис. 3. Барабанная перепонка собаки через 3 суток после экспериментального инфицирования среднего уха штаммом золотистого стафилококка. Окраска препарата: гематоксилин Майера и эозин. Увеличение: окуляр *8, объектив *40. На препарате демонстрируется очаговая десквамация эпителия, лейкоцитарная инфильтрация, отёк и дезорганизация соединительной ткани
На препарате демонстрируется десквамация эпителия, лейкоцитарная инфильтрация,отёк и дезорганизация соединительной ткани.
Одновременно с этим на фоне лейкоцитарной инфильтрации и отёка отмечается очаговая
десквамация эпителиальной ткани (рис. 3) на обеих сторонах барабанной перепонки. Площадь повреждения эпителиального пласта подвержена индивидуальным колебаниям и у разных животных наблюдается от незначительной до сильной.
Воспалительный процесс приводит к нарушению соотношения между процессами повреждения и регенерации тканевых и клеточных структур [2-5,13,14]. Усиление деструктивных процессов в эпителии и соединительной ткани барабанной перепонки нарушает сложившееся эпителиально-соединительнотканное взаимоотношение, что является одной из причин образования перфораций в барабанной перепонке.
При остром воспалении в первые дни в тканях барабанной перепонки наблюдались альтерация, экссудация, выраженная лейкоцитарная инфильтрация соединительной и эпителиальной тканей. Затем в соединительной ткани наступала пролиферация и цитодиффе-ренцировка клеток фибробластического диф-ферона, приводящая к активному синтезу компонентов межклеточного вещества дифференцированными фибробластами. Одновременно с активизацией пролиферативных процессов в соединительной ткани наблюдается и проли-феративная активность эпителиальных тканей. Анализ пролиферативной активности эпители-ев барабанной перепонке отражён в табл. 2.
Таблица 2
Митотическая активность эпителиев барабанной перепонки и прилежащих участков наружного слухового прохода и слизистой оболочки среднего уха на этапах острого и хронического экспериментального воспаления
Количество митотически делящихся клеток (в промилле)
Стадия 3 суток Стадия 7 суток Стадия 14 суток Стадия 21 суток Стадия 40 суток Клиническое выздо-ровле-ние
Многослойный эпителий 4,2±0,3 6,8±0,5* 5,6±0,5* 4,6±0,4* 5,0±0,3* 4,9±0,3
Однослойный эпителий 0,9±0,1 2,0±0,3* 1,7±0,4* 1,6±0,3 2,1±0,2 0,8±0,1*
Примечание: * - различия значимы при pк0,05
Из цифровых показателей табл. 2 видно, что максимум митотической активности эпите-лиев барабанной перепонки проявляется с
конца первой до конца второй недели воспаления. При условии уничтожения вызвавшего воспаление бактериального агента воспалительный процесс завершается восстановлением повреждённых клеточных и тканевых структур.
При продолжающемся персистировании бактериального агента на фоне незавершённых процессов репаративного гистогенеза возникает хронический воспалительный процесс, чаще всего наступающий уже через 1,5 месяца от начала воспаления в органе.
Характеристика клеточных структур барабанной перепонки и прилежащих участков наружного и среднего уха у животных через 40 суток от начала моделирования экспериментального воспалительного процесса в среднем ухе представлены в табл. 1.
Анализ гистологических препаратов этих животных показал, что в соединительной ткани барабанной перепонки и прилежащих структурах наружного и среднего уха отмечается умеренная лейкоцитарная инфильтрация. При этом среди лейкоцитов отмечается большое количество лимфоцитов и макрофагов, а гра-нулоциты практически отсутствуют. В соединительной ткани также встречаются участки, в которых в результате активной синтетической деятельности фибробластов образовано большое количество коллагеновых волокон.
Проведённый подсчёт численности клеточных элементов в соединительной ткани и прилегающих к ней участках наружного слухового прохода и слизистой оболочки среднего уха животного через 40 суток от начала экспериментального воспаления показал картину, которая характеризует состояние хронического воспаления (табл. 1). Из данных таблицы видно, что среди мигрировавших в соединительную ткань лейкоцитов преобладают лимфоциты и макрофаги. Наличие значительного числа дифференцированных клеток фибробластиче-ского дифферона при этом не обеспечивало
Литература
1. Асташенко С.В., Аникин И. А. Реоперации при хроническом гнойном среднем отите: основные причины // Российская оториноларингология. 2011. № 2. С. 202-204.
2. Бабаева А.Г. Регенерация:факты и перспективы. М.: Издательство РАМН, 2009. 336 с.
3. Безносик Р.В., Безносик В.Н., Стадников А.А., Шев-люк Н.Н. Роль гипоталамической нейросекреции в
активного синтеза межклеточного вещества соединительной ткани.
Результаты иммуноцитохимических реакций показывают, что экспрессия маркёра пролифера-тивной активности - белка Ki67 в эпителии и соединительной ткани барабанной перепонки наиболее выражена в первые две недели воспаления, а затем происходит её снижение. Выраженность экспрессии белка P-53 была незначительной на исследованных сроках, она отмечалась на фоне выраженной экспрессии белка bcl-2.
Проведение антибактериальной терапии приводило к снижению воспалительного процесса и способствовало активизации синтетической активности клеток соединительной ткани, при этом и пролиферативная активность эпителия оставалась на достаточно высоком уровне (особенно у многослойного эпителия), что способствовало восстановлению целостности барабанной перепонки. Однако, в ряде случаев и после консервативного лечения в барабанной перепонке сохраняются перфорации различного размера, что требует последующего хирургического лечения с использованием различных видов трансплантатов.
Заключение. Результаты анализа морфо-функциональной характеристики тканей барабанной перепонки на этапах воспаления показали, что наиболее выраженная пролифератив-ная активность эпителиев барабанной перепонки (определяемая по митотической активности эпителиев и экспрессии белка ki-67) отмечалась на второй недели эксперимента. Синтетическая активность дифференцированных фибробластов соединительной ткани барабанной перепонки была максимальной с конца первой до конца второй недели экспериментального гнойного среднего отита. В ходе хро-низации воспалительного процесса происходило снижение репаративных возможностей эпителиев и соединительной ткани барабанной перепонки.
References
Astashenko SV, Anikin IA. Operation of chronic suppurative otitis media: the main causes of. Rossiyskaya otorinolaringologiya. 2011;2:202-4. Russian.
Babaeva AG. Regeneration: facts and prospects. Moscow: Izdatel'stvo RAMN; 2009. Russian. Beznosik RV, Beznosik VN, Stadnikov AA, Shev-lyuk NN. The role in the regulation of hypothalamic
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2016 - V. 23, № 3 - P. 143-148
регуляции адаптивных и репаративных процессов воздухоносных путей в условиях взаимодействия про- и эукариот. Оренбург: Издательство ОрГМУ, 2015. 156 с.
4. Долгов В.А. Сравнительная характеристика видового состава микрофлоры барабанной полос-ти,слизистой оболочки носа и наружного уха в процессе экспериментального стафилококкового гнойного среднего отита // Вестник оториноларингологии. 2014. № 5. С. 34-36.
5. Долгов В.А., Шевлюк Н.Н., Иванова Н.И., Лунькова Л.Б., Чесноков В.П., Мажарцева Н.А. Морфофунк-циональная характеристика тканей барабанной перепонки и результаты мирингопластики на разных сроках ремиссии хронического гнойного среднего отита // Практическая медицина. 2015. № 2-2 (87). С. 60-63.
6. Егоров В.И., Козаренко А.В. Об улучшении результатов миринго- и тимпанопластики // Российская оториноларингология. 2013. Т. 64, № 3. С. 42-45.
7. Забиров Р.А., Рахматуллин Р.Р., Щетинин В.Н., Га-рифзянова С.М., Грязнов С.А. Использование новых биопластических материалов в клинической практике // Российская оториноларингология. 2011. № 4. С. 77-85.
8. Канюков В.Н., Стадников А.А., Трубина О.М., Стре-каловская А.Д. Методы исследования в биологии и медицине. Оренбург. ООО «Агентство «ПРЕССА», 2013. 196 с.
9. Косяков С.Я., Коршок В.В., Пчеленок В.В. Результаты закрытых типов операции при хроническом среднем отите с холестеатомой // Российская ринология. 2012. Т. 20, № 2. С. 42.
10. Меланьин М.Д., Хоров О.Г., Мухаммедов И.Т. Хронический гнойный средний отит Реконструкция среднего отдела уха - возможности и перспективы // Оториноларингология Восточной Европы. 2016. Т. 22, № 1. С. 10-19.
11. Хоров О.Г., Плавский Д.М. Результаты первичной тимпанопластики обширных дефектов барабанной перепонки у пациентов с хроническим мезотимпа-нитом // Вестник оториноларингологии. 2013. № 1. С. 54-57.
12. Хоров О.Г., Плавский Д.М. Тимпанопластика с применением хрящевых пластин при обширных дефектах барабанной перепонки // Новости хирургии. 2010. Т. 18, № 1. С. 108-113.
13. Шевлюк Н.Н., Стадников А.А. Представления о тканях. История и современность // Морфология. 2014. Т. 145, № 2. С. 74-78.
14. Шевлюк Н.Н., Стадников А.А. Взаимодействие про-и эукариот и проблемы биологии тканей // Морфология. 2015. Т. 148, № 5. С. 7-13.
15. Щербакова Я.Л., Янов Ю.К., Кузовков В.Е., Мегре-лишвили С.М. Нарушения слуха и методы их коррекции // Российская оториноларингология. 2014. № 6. С. 104-110.
neurosecretion adaptive and reparative processes of the airways in the conditions of interaction of pro- and eu-karyotes. Orenburg: Izdatel'stvo OrGMU; 2015. Russian.
Dolgov VA. Comparative characteristics of the species composition of the microflora of the tympanic cavity, nasal mucous membrane and external ear in the process of experimental staphylococcal suppurative otitis media. Vestnik otorinolaringologii. 2014;5:34-6. Russian.
Dolgov VA, Shevlyuk NN, Ivanova NI, Lun'kova LB, Chesnokov VP, Mazhartseva NA. Morphofunctional characteristics of tissues of the eardrum and results my-ringoplasty at different stages of remission of chronic suppurative otitis media. Prakticheskaya meditsina. 2015;2-2(87):60-3. Russian.
Egorov VI, Kozarenko AV. On the improvement of the results miringo- and tympanoplasty. Rossiyskaya oto-rinolaringologiya. 2013;64(3):42-5. Russian. Zabirov RA, Rakhmatullin RR, Shchetinin VN, Garif-zyanova SM, Gryaznov SA. Use of new bio plastic materials in clinical practice. Rossiyskaya otorinolaringo-logiya. 2011;4:77-85. Russian.
Kanyukov VN, Stadnikov AA, Trubina OM, Streka-lovskaya AD. Metody issledovaniya v biologii i medit-sine. Orenburg. OOO «Agentstvo «PRESSA»; 2013. Russian.
Kosyakov SYa, Korshok VV, Pchelenok VV. Rezul'taty zakrytykh tipov operatsii pri khronicheskom srednem otite s kholesteatomoy. Rossiyskaya rinologiya. 2012;20(2):42. Russian.
Melan'in MD, Khorov OG, Mukhammedov IT. Khroni-cheskiy gnoynyy sredniy otit:Rekonstruktsiya srednego otdela ukha - vozmozhnosti i perspektivy. Otorinola-ringologiya Vostochnoy Evropy. 2016;22(1):10-9. Russian.
Khorov OG, Plavskiy DM. Rezul'taty pervichnoy tim-panoplastiki obshirnykh defektov barabannoy pere-ponki u patsientov s khronicheskim mezotimpanitom. Vestnik otorinolaringologii. 2013;1:54-7. Russian.
Khorov OG, Plavskiy DM. Timpanoplastika s primene-niem khryashchevykh plastin pri obshirnykh defektakh barabannoy pereponki. Novosti khirurgii. 2010;18(1):108-13. Russian.
Shevlyuk NN, Stadnikov AA. Predstavleniya o tka-nyakh. Istoriya i sovremennost'. Morfologiya. 2014;145(2):74-8. Russian.
Shevlyuk NN, Stadnikov AA. Vzaimodeystvie pro- i eukariot i problemy biologii tkaney. Morfologiya. 2015;148(5):7-13. Russian.
Shcherbakova YaL, Yanov YuK, Kuzovkov VE, Megre-lishvili SM. Narusheniya slukha i metody ikh korrekt-sii. Rossiyskaya otorinolaringologiya. 2014;6:104-10. Russian.
