CC BY
30
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ
Эпидемиология
IVh
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
РАЗДЕЛ I. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ИНФЕКЦИОННОМ ПАТОЛОГИИ
УДК 616.34-022-036.11:616.988:578.835.1-036.2-053.2(470.341-251
МОНИТОРИНГ ЦИРКУЛЯЦИИ ЭНТЕРОВИРУСОВ СРЕДИ ДЕТЕЙ С ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ В НИЖНЕМ НОВГОРОДЕ В 2006-2010 ГГ.
С.Г. Фомина, Н.А. Новикова,
ФГУН «Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной»
Фомина Светлана Григорьевна - е-mail - [email protected]
За период 2006-2010 гг. было проведено исследование 5218 образцов копроматериала детей с острой кишечной инфекцией. Энтеровирусы человека были обнаружены в 9,7% случаев (7,0%-18,3%). В 4,5% случаев вирусных гастроэнтеритов была зафиксирована моноэнтеровирусная инфекция. Энтеровирусы геногруппы I были выявлены в 63,0% случаев, в 37,5% обнаружены энтеровирусы геногруппы II. Показана выраженная гетерогенность нижегородской популяции энтеровирусов (20 серотипов), которая в 2006-2010 гг. была представлена энтеровирусами вида А (25%), В (40%) и С (35%). Относительно чаше выявлялись вирусы Коксаки А22 (13,0%), А5 (8,7%), А16 (8,7%).
Ключевые слова: энтеровирусы человека, метод ОТ-ПЦР, моноэнтеровирусная инфекция, мониторинг циркуляции.
During the period 2006-2010 study was carried out 5218 samples copromaterial of children with acute intestinal infection. Human enteroviruses were detected in 9.7% of cases (7.0% -18.3%). In 4,5% of cases of viral gastroenteritis was detected monoenterovirus infection. Enteroviruses of genogroup I were detected in 63.0% of cases, enteroviruses of genogroup II were found in 37.5%. Shows a marked heterogeneity of the Nizhny Novgorod population of enteroviruses (20 serotypes), which in 2006-2010 was represented by enteroviruses species A (25%), B (40%) and C (35%). Relatively more prevalent viruses Coxsackie A22 (13,0%), A5 (8,7%), A16 (8,7%).
Key words: human enteroviruses, PCR-method, monoenterovirus infection,
monitoring of circulation.
Введение
Энтеровирусы человека (ЭВ) составляют род Enterovirus, семейства Picornaviridae, являются безоболочечными РНК-содержащими вирусами. На основании молекулярнобиологических свойств ЭВ делят на 4 вида: A, B, C, D [www. Picornaviridae.com]. При анализе нуклеотидной последовательности 5'- НТР генома ЭВ были разделены на 2 геногруппы. В первую (I) входят вирусы вида А и В (неполиомиелит-ные ЭВ), а во вторую (II) - вирусы вида С (полиовирусы типов 1-3, а также вирусы, подобные полиовирусам) и D (ЭВ 68, 70, 94) [1, 2]. ЭВ играют важную роль в инфекционной патологии человека, вызывая заболевания, различающиеся по клиническим проявлениям и тяжести течения. Одной из клинических форм энтеровирусной инфекции (ЭВИ) является острая кишечная инфекция (ОКИ) [3]. В настоящее время проблеме энтеровирусной (неполио) инфекции уделяется большое значение в связи с нестабильностью ситуации по заболеваемости ЭВИ. Слежение за циркуляцией ЭВ проводят при анализе проб из объектов внешней среды и клинического материала от больных с ЭВИ и подозрением на ЭВИ с тяжелой специфической клиникой, как правило, это серозный менингит, экзантема. В настоящем исследовании дана оценка эффективности применения мониторинга циркуляции ЭВ среди детей с ОКИ для совершенствования эпидемиологического надзора за ЭВИ.
Цель исследования: мониторинг циркуляции энтеровирусов среди детей с ОКИ.
Материалы и методы
Материалом для исследования служили фекалии детей с ОКИ, госпитализированных в инфекционный стационар
Н. Новгорода в 2006-2010 гг. РНК ЭВ выделяли с помощью
комплекта реагентов Рибосорб согласно инструкции (ЦНИИЭ, Москва). Обратную транскрипцию осуществляли с использо-
ванием ревертазы M-MLV и гекса праймеров (НПАО «Силекс», Москва). Для выявления и одновременной дифференциации ЭВ на геногруппы по 5'-НТР генома применили лабораторный вариант метода ОТ-ПЦР [4]. Определение вида и серотипа выявленных ЭВ осуществляли методом частичного секвенирования генома с использованием универсальных для всех ЭВ праймеров, предложенных Nix с соавт. [5]. Статистическую обработку результатов проводили общепринятым методом расчета средней ошибки (m) и показателя существенности и вероятности (t) по Стьюденту [6].
Результаты и их обсуждение
На наличие ЭВ было исследовано 5218 образцов копроматериала детей с ОКИ. Частота обнаружения ЭВ составила 9,7% (7,0-18,3%). Проведена дифференциация выявленных
ЭВ (506 изолятов) по 5'-НТР генома. ЭВ геногруппы I были выявлены в 63,0%, ЭВ геногруппы II - в 37,5% случаев.
В 5,1% случаев ЭВ выявлялись в микстинфекции с другими вирусами кишечной группы (ротавирусы, калицивирусы, аденовирусы, астровирусы, парэховирусы). В 4,5% случаев вирусных гастроэнтеритов была зафиксирована моноэнтеровирусная инфекция. Установлено, что на фоне увеличения частоты обнаружения ЭВ в августе-сентябре 2006 г. выросла заболеваемость моноэнтеровирусной инфекцией, протекающей в форме острого гастроэнтерита (ОГЭ) у детей в возрасте от 2 до 14 лет (рис.). Методом секвенирования было установлено, что в данный промежуток времени активно циркулировали вакцинные полиовирусы типов 1, 2 и 3. Начиная с апреля 2007 г., в Н. Новгороде наблюдался значительный рост числа госпитализации детей с ОГЭ, с пиком в июне 2007 г., т. е. в период, предшествовавший сезонному подъему заболеваемости энтеровирусным серозным менингитом. В июне 2006 г. частота обнаружения ЭВ у детей с ОКИ составила 15,2% (как правило в виде микстинфекции с
Эпидемиология
другими кишечными вирусами), а за аналогичный период 2007 г. ЭВ были обнаружены в 52,4% (р^0,001), причем в 77,3% случаев ЭВИ представляла собой моноинфекцию (р^0,001). ЭВ, циркулирующие в июне 2007 г., были представлены неполиомиелитными ЭВ ЕСН030 и ЕСНО18. Впоследствии данные серотипы ЭВ были выделены от больных серозным менингитом во время подъема заболеваемости энтеровирусным серозным менингитом в августе-октябре 2007 г. Данные результаты дают основание полагать, что увеличение частоты госпитализации детей с ОКИ, вызванной неполиомиелитными ЭВ, может служить предвестником роста заболеваемости ЭВИ с более тяжелыми клиническими проявлениями. В 2008 г. произошел резкий спад заболеваемости ЭВИ (р^0,001), которая осталась на том же уровне в 2009-2010 гг.
Частота обнаружения и спектр ЭВ, выявленных при моно-и микстинфекциях у детей с ОКИ в Н. Новгороде в 2006-2010 гг.
С использованием молекулярно-генетических методов исследования был определен спектр ЭВ, выделенных от детей с ОКИ. Идентифицировано 20 серотипов ЭВ: ЭВ-А
(Коксаки А2, А4, А5, А6, А16), ЭВ-В (Коксаки А9, Коксаки В2, В4, В5, ECHO 16, 18, 25, 30) и ЭВ-С (полиовирусы типов 1, 2 и 3, Коксаки А1, А22, А19/22, А24). При этом относительно чаще выявлялись вирусы Коксаки А22 (13%), А5 (8,7%), А16 (8,7%).
Выводы
1. На большой выборке обследуемых установлена частота обнаружения ЭВ у детей с ОКИ, которая составила 9,7% (7,0-18,3%).
2. В 4,5% случаев вирусных гастроэнтеритов была зафиксирована моноэнтеровирусная инфекция.
3. Показана выраженная гетерогенность нижегородской популяции ЭВ (20 серотипов), которая в 2006-2010 гг. была
представлена ЭВ вида А (25%), В (40%) и С (35%).
4. Представленные результаты свидетельствуют о том, что группа детей с ОКИ является значимой для мониторинга циркуляции ЭВ в рамках эпидемиологического надзора за энтеровирусной (неполио) инфекцией.
Ел
ЛИТЕРАТУРА
1. Hyypia T., Hovi T., Knowles N., Stanway G. Classification of enteroviruses based on molecular and biological properties. J. Gen. Virol. 1997. № 78. Р. 1-11.
2. Oberste M., Maher K., Pallansh M.A. Molecular phylogeny of al human enterovirus serotypes based on comparison of sequences of the 5 and of the region encoding VP2. Virus. Res. 1998. № 58. р. 35-43.
3. Ворошилова М.К. Энтеровирусные инфекции человека. М.: Медицина, 1979. С. 360.
4. Голицына Л.Н., Новикова Н.А., Домбровская Л.К.и др. Оценка разработанного «nested»-варианта полимеразной цепной реакции при выявлении энтеровирусов у больных. Вопросы вирусологии. 2002. № 5. С. 41-43.
5. Nix W.A., Oberste M.S., Pallansch M.A. Sensitive, seminested PCR amplification of VP1 sequences for direct identification of all Enterovirus serotypes from original clinical specimens. J. of Clinical microbiology. 2006. № 44. Р. 2698-2704.
6. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999. С. 459.
ЭПИДЕМИОЛОГИЯ
