CC BY
0
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
по количеству агглютинированных эритроцитов (АЭ) соответствующими ЦК. Генотипирование проводили ПЦР с праймерами для выявления генов систем ABO, Резус, Kell, MNS по методике производителя.
Результаты и обсуждение. В 2018—2020 гг. в НМИЦ гематологии проведено 270 трансплантаций ГСК. У 129 пар донор — реципиент (47,78%) была одинаковая группа крови ABO, у 141 пары (52,22%) — несовместимость. Проблемы оценки серологических результатов былиу 98 больных (36,3%): 79 больных с ПТХ и 19 больных с ОЭА. Генотипирование провели 49 больным с ПТХ, уточнение генотипа при ОЭА — 14 больным. Типирование по ABO провели 32 больным: 25 с ПТХ с АЭ ЦК 5-98% и 7 с ОЭА А (6 человек) и В (1 человек). У больных с АЭ 50-80% с ЦК а-А1 был генотип АВ0*01А2 (группа А2). У больной с 50% АЭ с а-А1 - АВОЮ1А1 (группа Al). У пациента с 50% АЭ с а-А и а-В — АВО*В1В1 (табл.). По Резус — 21 больному. Найдены гены RHCE'Cy лиц с АЭ ЦК а-С 20-95%, RHCE°c -сАЭ а-с 40-90%, RHD°D - с АЭ a-D 20-90%, RHCE°E - с АЭ а-Е 3090%, RHCE°e - с АЭ а-е 95%. По MNS - 20 больным. У больных с АЭ ЦК а-М в 50-90% и a-N 50-80% был генотип NN. У больных
с 90-100% АЭ а-М и 50-80% АЭ a-N - ММ. Со 100% АЭ а-М и 5080% АЭ a-N - MN. Со 100% АЭ а-М и 70-80% АЭ a-N - ММ. По Kell — 4 больным. Пациент с 50% АЭ ЦКа-К и а-к оказался гомозиготным по гену KEL*01.01. У 3 больных с 80—97% АЭ а-К найдены гены KEL*01.01 и KEL*02. Уточнение генотипа провели 15 донорам. Причины: отсутствовали сведения о группе крови при поступлении криоконсервированных ГСК из-за лизиса эритроцитов (4); уточнение генотипа для выявления информативных маркеров мониторинга приживления ГСК (1); ОЭА (у 10 доноров и 14 больных подтверждены гены 01А2, В1В1, RHD weak type 1, RHD weaktype 2, RHD weak type 3, RHCE*Cw).
Заключение. Отмечено преобладание трансплантаций ГСК, несовместимых по ABO. Проблемы с определением группы крови возникали у больных перед трансплантацией ГСК из-за ПТХ и ОЭА (36,3%). Уточнение генотипа доноров ГСК связано с ОЭА и поступлением криоконсервированных клеток. Процент АЭ не может быть надежным критериемустановления истинного фенотипа пациента. Обнаружение смешанного химеризма при определении группы крови серологическими методами является показанием к генотипированию.
Гончарова М. И., Зеркаленкова Е. А., Солдаткина О. И., Дёмина И. А., Казакова А. Н., Попов А. М.
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ВП-ОЛЛ У ДЕТЕЙ С ПОВЕРХНОСТНОЙ ЭКСПРЕССИЕЙ Т8ЬРЯ
ФГБУ «НМИЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России
Введение. Ген CRLF2 расположен в псевдоаутосомном регионе в локусах Xp22.3/Ypll.3 и кодирует подобный цитокиновым рецепторам фактор 2. Совместно с рецептором интерлейкина-7 (IL7R) CRLF2 формирует гетеродимерный рецептор тимического стромального лимфопоэтина (TSLPR). В результате хромосомных перестроек ген CRLF2 переносится либо в локус генов тяжелых цепей иммуноглобулинов с формированием химерного гена IGH::CRLF2, либо под промотор P2RY8 с формированием химерного гена P2RY8::CRLF2 в результате фокальной делеции. Считается, что оба вида хромосомных перестроек приводят к гиперэкспрессии белка CRLF2 на поверхности лимфобластов.
Цель работы. Охарактеризовать молекулярно-генетический профиль ВП-ОЛЛу детей с поверхностной экспрессией TSLPR.
Материалы и методы. Поверхностную экспрессию определяли методом проточной цитометрии с помощью антител Anti-Hu TSLP Receptor (Thermo Fisher Scientific, Pittsburgh, PA, US) на проточном цитометре FACSCanto II (BD Biosciences, San Jose, CA, US). Была выделена когорта 36 детей с первично выявленным ВП-ОЛЛ с поверхностной экспрессией белка TSLPR. В нее включили детей в возрасте от 1 года до 17 лет (медиана 5,5 года), 14 мальчиков и 22 девочки. У всех пациентов был диагностирован В2-ОЛЛ. Всем пациентам было проведено стандартное кариотипирование методом G-banding и исследование методом FISH для определения значимых хромосомных перестроек. Перестройку гена CRLF2 определяли методом FISH с пробами CRFL2 Breakapart (Cytocell, Cambridge, UK) и XL CRLF2 Breakapart (Metasystems, Altlussheim, Germany). Природу гена-партнера CRLF2yтoчняли методом FISH с пробами IGH breakapart (Leica,
Amsterdam, Netherlands) и P2RY8 Deletion (Cytocell, Cambridge, UK). Пациентам без перестройки гена CRLF2 было выполнено секвени-рование полного транскриптома с подготовкой бибилиотек NEBNext Ultra II Directional (NEB, Ipswich, MA, USA) на платформе NextSeq (Illumina, CA, USA).
Результаты и обсуждение. Из 36 проанализированных пациентов с поверхностной экспрессией белка TSLPR у 34 пациентов была выявлена перестройка гена CRLF2. Среди этой группы пациентов были выявлены следующие варианты хромосомных аберраций: у 25 пациентов был обнаружен химерный ген P2RY8::CRLF2, у 7 пациентов — IGH::CRLF2, у 2 пациентов — перестройки CRLF2 с неизвестным геном. У 2 пациентов перестройка CRLF2 сочеталась с внутрихромосомной амплификацией гена RUNX1 и прилежащих регионов хромосомы 21 (iamp21),y одного — с парциальной делецией IGH, у одного — с дицентриком dic(9;20), у одного — с субклональ-ной перестройкой гена ETV6. У 2 пациентов из когорты ген CRLF2 не был перестроен по данным FISH. У этих пациентов были выявлены гиперплоидные клоны с трисомией X. По данным исследования полного транскриптома, эти пациенты не экспрессировали никаких CRLF2-xHMepHbix транскриптов. Также они не имели патогенных мутаций в генах CRLF2, JAK1, JAK2 и IL7R, для которых в литературе ранее была показана высокая частота при ОЛЛ с дерегуляцией
CRLF2.
Заключение. Таким образом, поверхностная экспрессия белка TSLPR не является абсолютным предиктором перестроек гена CRLF2. Механизм аберрантной экспрессии TSLPR при отсутствии перестроек гена CRLF2 является предметом дальнейшего изучения.
Грицаев С. В.1, Жук А. С.2, Кострома И. И.1, Аксенова А. Ю.3, Лада А. Г.4, Зотова И. В.3, Качкин Д. В.3, Гарифуллин А. Д.5,
Волошин С. В.6, Степченкова Е. И.3, Павлов Ю. И.7
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ПЛАСТИЧНОСТЬ КЛЕТОК МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ
Республиканский центр трансплантации костного мозга, ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии ФМБА России», г. Санкт-Петербург, Национальный исследовательский университет ИТМО, 3Санкт-Петербургский государственный университет, 4Университет Калифорнии в Дэвисе (University of California, Davis), 5Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии ФМБА России, 6ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии ФМБА России» и ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова» Минобороны России,
7Медицинский центр университета штата Небраска
Введение. Множественная миелома (ММ) — второе по уровню заболеваемости онкогематологическое заболевание, характеризующееся гиперпролиферацией плазматических клеток в костном мозге (КМ). Встречается преимущественно у лиц старшего возраста. Причины развития ММ не ясны. Предполагается генетическая предрасположенность, возможны эндогенные или внешние
генотоксические воздействия. Окончательно не изучены и молекулярные механизмы лекарственной резистентности и прогрессирова-ния болезни.
Цель работы. С применением N08 изучить динамику генетических изменений, ассоциированных с развитием и прогрессированием
мм.
3S
