CC BY
14
Науковий вкчшк', 2004, вип. 14.6
УДК 630 Ю.А. Марковская, В.В. Трухоновец - ГНУ "Институт
леса НАН Беларуси "
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВЕШЕНКИ ОБЫКНОВЕННОЙ (PLEUROTUS OSTREATUS (FR.) KUMM)
Целью настоящего исследования явилось изучение ряда ген-ферментных систем и описание выявленной аллозимной изменчивости хозяйственно-ценного вида -вешенки обыкновенной (Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm).
Уы.А. Markovskaya, V.V. Truhonovets - SNU "Institute offorest of NAS
of Byelorussia"
Molecular-genetic analysis of Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm
The study of row of the gen-fermentive systems and description of the exposed allosive changeability of economic-valuable kind was the purpose of the real research -Pleurotus ostreatus (Fr.) Kumm.
В последнее время большое внимание уделяется товарному грибоводству. Особый интерес в этом отношении представляют грибы рода Pleurotus, вследствие чего в разных странах мира активно ведутся исследования этих видов [1]. Вместе с тем, несмотря на значительные успехи, достигнутые в вопросах технологии культивирования съедобных грибов [1], остаются проблемы, связанные с разработкой точных методов идентификации различных штаммов и изучение генетических различий между ними. Одним из наиболее удобных методов, позволяющих изучать генетическую структуру любого вида, является электрофоретический анализ изоферментов [2].
Изоферментный анализ экспериментального материала грибов, вегетативного мицелия тринадцати штаммов P. ostreatus из коллекции Института леса НАН Беларуси проводился с использованием метода электрофореза в крахмальном геле [3]. В ходе исследований было изучено 7 ферментных систем. Распределение ферментов по буферным системам, их название и кодовый номер [4] следующие:
Трис-Цитрат/Трис-НС1 буферная система [5]: изоцитратдегидрогеназа (IDH, К. Ф. 1.1.1.42.), малатдегидрогеназа (MDH, К. Ф. 1.1.1.37.), аспартатами-нотрансфераза (AAT, К.Ф. 2.6.1.1.), супероксиддисмутаза (SOD, К.Ф. 1.1.1.14.).
Трис-Цитрат буферная система [5]: глюкозофосфатизомераза (GPI, К. Ф. 5.3.1.9.), алкогольдегидрогеназа (ADH, К. Ф. 1.1.1.1.).
LiOH-Борат/Трис-Цитрат буферная система [4]: лейцинаминопепти-даза (LAP, К. Ф. 3.4.11.1.).
В ходе электрофоретического исследования 7 ген-ферментных систем тринадцати штаммов вешенки обыкновенной удалось выявить 17 электрофо-ретических вариантов, находящихся под генетическим контролем 10-ти независимых локусов.
Ниже приводится описание ген-ферментных систем, использованных при анализе штаммов вешенки обыкновенной/
Глюкозофосфатизомераза. Глюкозофосфатизомераза была представлена одной зоной ферментативной активности. В ходе исследований штаммов вешенки обыкновенной было выявлено три электрофоретических вари-
1. Лкознавство, лшвництво, лкова наука i освгга
131
УкраТнський державний лкотехшчний унiверситет
анта - ОРГ, ОРГ0 и ОР1 ' . Гетерозиготные по какому-либо из локусов образцы на фореграмме окрашивались в виде трех фракций, что говорит о ди-мерной структуре активной молекулы глюкозофосфатизомеразы.
Алкогольдегидрогеназа. При гистохимическом окрашивании гелей на алкогольдегидрогеназу была выявлена одна зона ферментативной активности, представленная двумя электрофоретическими вариантами - ДОИ0'95 и АОИ1'00. Электрофоретические спектры гетерозиготных индивидуумов по ло-кусу АёИ окрашивались тремя фракциями, что указывает на димерную структуру данного фермента'
Лейцинаминопептидаза. Данный фермент выявлялся на фореграм-мах двумя зонами ферментативной активности (рисунок). Изменение подвижности в каждой из зон не влияло на подвижность электрофоретических вариантов другой зоны, что указывает на самостоятельность ЬДР-1 и ЬДР-2. В ходе исследований штаммов Р. оБ^ваШБ, зона ЬДР-1 оказалась мономор-фной, а ЬДР-2 была представлена тремя электрофоретическими вариантами - ЬДР-20'90, ЬДР-20'9 и ЬДР-21'00. Спектры гетерозиготных образцов по ЬДР-2 были представлены двумя фракциями, что указывает на мономерную структуру данного фермента'
Супероксиддисмутаза. В ходе исследований штаммов вешенки обыкновенной на супероксиддисмутазу была выявлена одна зона ферментативной активности, которая у исследованных образцов оказалась мономорфной'
Малатдегидрогеназа. При гистохимическом окрашивании гелей на малатдегидрогеназу было выявлено две основные зоны ферментативной активности. Быстро мигрирующая зона, обозначенная нами как МОИ-1, у изученных штаммов вешенки оказалась мономорфной. В медленной зоне, обозначенной нами как МОИ-2, было обнаружено два электрофоретических варианта - МОИ-21'00 и МОИ-21'25' Гетерозиготные по данному локусу образцы на фореграмме выявлялись тремя фракциями, что соответствует димерной структуре молекулы МОИ-2.
Изоцитратдегидрогеназа. Изоцитратдегидрогеназа была представлена одной мономорфной зоной ферментативной активности'
Аспартатаминотрансфераза. Данный фермент выявлялся на форег-раммах двумя зонами ферментативной активности' Изменение подвижности в каждой из зон не влияло на подвижность электрофоретических вариантов другой зоны, что указывает на двулокусный контроль ДЛТ. В ходе исследований штаммов Р. оъ^ваЫъ ААТ-1 оказалась мономорфной, а в зоне ААТ-2 было выявлено два электрофоретических варианта - АДТ-21'00 и АДТ-21'50. Электрофоретические варианты гетерозиготных образцов по АДТ-2 были представлены тремя фракциями, что указывает на димерную структуру данного фермента'
Таким образом, даже использование только 7 генов позволило провести генетическую идентификацию большинства изученных штаммов. Увеличение выборки изоферментных локусов даст возможность выявить генетические различия и у остальных штаммов' Исследованные ферментные системы, после проведения генетического анализа будут использованы в качестве генетических маркеров в селекционной работе со штаммами вешенки обыкновенной'
132
Стан i тенденци розвитку лшвничоТ освгги, науки та лкового господарства в УкраТш
Науковий вкник, 2004, вип. 14.6
Литература
1. Трухоновец В.В., Бабицкая В.Г., Щерба В.В. Сравнительная оценка химического состава и антиокислительной активности плодовых тел и глубинного мицелия съедобных ба-зидиальных грибов Pleurotus и Lentinus// Проблемы лесоведения и лесоводства: Сб. науч. тр./ Институт леса НАН Б. - Гомель, 2001, вып. 52. - С. 90-114.
2. Левонтин Р. Генетические основы эволюции: Пер. с англ. - М.: Мир, 1978. - 350 с.
3. IUPAC-IUB Comission on Biochemical Nomenclature. The Nomenclature of multiple forms of enzymes// Arch. Biochem. Biophys. - 197. - Vol. 147, № 1. - P. 1-3.
4. Гончаренко Г.Г., Падутов В.Е., Потенко В.В. Руководство по исследованию хвойных видов методом электрофоретического анализа изоферментов. - Гомель, Госкомитет СССР по лесу, 1989. - 64 с.
5. Гончаренко Г.Г., Силин А.Е. Популяционная и эволюционная генетика сосен Восточной Европы и Сибири. - Мн.: Тэхналопя, 1997. - 192 с.
УДК 630*228:630*831 Доц. В.1. Ткачук1, канд. с.-г. наук -
ДЛГО "Житомирлк"
ПРОБЛЕМА ОПТИМ1ЗАЦ11 Л1СОВОГО ПОКРИВУ ПОЛ1ССЯ
Проанашзовано теригсральний розподш лав репону та запропоновано засади оп-тим1заци рiвня люистосп. Наведено розрахунки вирiвнювання структури соснових лав Правобережного Полюся за в1ком. Даеться прогнозне бачення розвитку соснових дю1в.
Doc. V.I. Tkachuk-SFE "Zhitomirlis" Problem of optimization of a forest cover in the woodlands
The territorial distribute of regional forests are analyzed and made proposes according optimizations of the level of foresting. Accounting of approximated of age structure of pine forests in Left-bank Polissia are present. The prognosis visions of developed pine forests are given.
Вступ. Сучасна нацюнальна люова полггика, виходячи з позицш ста-лого розвитку, передбачае невщкладне виршення у найближчш перспектив! оптим1зацп породного складу та вiковоi структури деревосташв на засадах вщповщносп ix бюлопчним особливостям та люорослинним умовам.
Це забезпечить у майбутньому збшьшення ресурЫв деревини та роз-ширення експлуатацiйниx можливостей лiсiв. Такий концептуальний шдхщ мае своi зонально-регiональнi особливостi, зумовленi не лише диференщ-ацiею природноклiматичниx умов та специфжою формування лiсовоi рослин-ност^ але й структурних економiко-ринковиx вщносин.
Iсторичнi та лiсiвничо-економiчнi передумови. Оскшьки сосна зви-чайна е домшуючою та типотвiрною породою на значнш частинi територп Украiни, то проблема оптимiзацii системи вирощування соснових насаджень е одшею з найважливiшиx з точки зору не лише регюнального лiсiвництва, але й еколого-географiчноi стабшзацп мiсцевиx ландшафтiв [1, 3]. У зв'язку з цим до 2015 р. на Полюс плануеться залюити 23 тис. га неугiдь. Якщо витри-муватиметься пропорцiя у стввщношенш мiж насадженнями сосни зви-
1 Ген. директор державного л1согосподарського об'еднання "Житомирл1с", м. Житомир, вул. Хл1бна, 41, тел. (0412) 22-64-99.
1. Лкознавство, лiсiвництво, лiсова наука i освiта
133
