CC BY
56
DOI: 10.21294/1814-4861-2016-15-2-29-35 УДК: 18.19-006.6-08:615.28:577.21
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ЭФФЕКТИВНОСТИ НЕОАДЪЮВАНТНОй ХИМИОТЕРАПИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ АНТРАЦИКЛИНОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ
МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
П.В. Казанцева1, М.М. Цыганов13, Е.М. Слонимская12, Н.В. Литвяков13, Н.В. Чердынцева1, М.К. Ибрагимова13, А.В. Дорошенко1, Н.А. Тарабановская1, С.В. Паталяк1
Томский НИИ онкологии, г Томск1
ГБОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Томск2 Национальный исследовательский Томский государственный университет, г. Томск3 634009, г Томск, пер. Кооперативный, 5, e-mail: polydoctor@yandex.ru1
Аннотация
Цель исследования - изучение эффективности неоадъювантной химиотерапии антрациклинами в зависимости от наличия делеций и амплификаций различных хромосомных локусов и уровня экспрессии топоизомеразы 2а в опухолевой ткани у больных раком молочной железы. Материал и методы. В исследование включено 46 больных раком молочной железы Т2_^03М0 стадии, получивших 2-6 курсов НАХТ по схемам FAC и САХ. Результаты. При оценке зависимости эффекта НАХТ с включением антрациклинов от различных молекулярно-генетических характеристик опухоли получены данные о связи уровня экспрессии Тор2а>5, делеции АВСВ1; АВСВ3; 18р11.21; 1^22.1 локусов и амплификация ^24.1-43 с высокой эффективностью предоперационного лечения. Наличие в опухолевой ткани хотя бы одного из указанных маркеров выявлено у 34 больных, из них у 85,3 % в ответ на НАХТ была зарегистрирована регрессия новообразования более 50 % и у 14,7 % наблюдалась стабилизация и прогрессирование заболевания. В опухолевой ткани 12 пациенток отсутствовали все указанные маркеры, при этом предоперационное лечение ни в одном случае не было эффективным. Заключение. Полученные результаты позволяют рассматривать высокий уровень экспрессии Тор2а>5, делецию АВСВ1; АВСВ3; 18р11.21; 1^22.1 локусов и амплификацию ^24.1-43 в качестве предсказательных критериев высокой эффективности НАХТ с включением антрациклинов. Наличие хотя бы одного из представленных маркеров позволяет в 85,3 % наблюдений предсказать высокую эффективность предоперационного лечения антрациклинами.
Ключевые слова: рак молочной железы, неоадъювантная химиотерапия, предсказательные критерии, уровень экспрессии Тор2а, делеция генов АВС-транспортеров, СИУ ДНК опухоли.
Неоадъювантная химиотерапия (НАХТ) является одним из этапов комбинированного лечения рака молочной железы (РМЖ). Применение цитостатических препаратов в предоперационном периоде при первично-операбельном раке молочной железы продиктовано стремлением к уменьшению объема первичной опухоли, что создает, во-первых, более благоприятные условия для выполнения органосохраняющих операций. Во-вторых, определение чувствительности первичной опухоли к проводимой химиотерапии in vivo позволяет по результатам оценки эффективности адекватно планировать лечение в адъювантном режиме. В-третьих, тем, что достижение полной морфологической регрессии (ПМР) способствует улучшению отдаленных результатов [5, 16]. Кроме того, в последнее время в литературе появились данные, свидетельствующие о том, что не только полная, но и выраженная частичная регрессия
Казанцева Полина Вадимовна, polydoctor@yandex.ru
опухоли в ответ на НАХТ ассоциирована с улучшением показателей выживаемости [10, 14].
Однако значимое уменьшение размеров опухоли в ответ на проводимое лечение наблюдается далеко не всегда. В качестве одной из наиболее значимых причин неэффективности химиотерапии злокачественных новообразований рассматривается множественная лекарственная устойчивость (МЛУ) опухолевых клеток, которую наиболее часто связывают с работой энергозависимых ABC-транспортеров (ATP-Binding Cassette), осуществляющих выброс цитостатических и тар-гетных препаратов из опухолевых клеток против градиента концентрации с затратой энергии АТФ. По данным литературы, 75-85 % случаев низкой эффективности цитостатической терапии при РМЖ обусловлено развитием МЛУ клеток опухоли. Семейство ABC-транспортеров насчитывает 50 генов, и главными подсемействами являются
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ABCB, ABCCиABCG [1, 2, 8, 12, 13, 15]. Известно, что при делеции локусов генов АВС в опухолевых клетках отмечается снижение экспрессии этих генов и, как правило, наблюдается выраженный ответ на НАХТ [9].
В последние годы получены новые данные, свидетельсвующие о том, что CNV (Copy Number Variation) (делеции и амплификации) в регионах, не являющиеся генами АВС, также могут быть ассоциированы как с химиорезистентностью опухоли, так и с показателями выживаемости [4, 17]. В работе корейских ученых была установлена связь между амплификацией 8q (24,3, 24.22, 22.1-3), 13q21.1, 20q (13.2-13.33) регионов, деле-цией 8р23.3-1 и 17р13.3 в ткани опухоли молочной железы с отсутствием эффекта при проведении предоперационной химиотерапии таксанами [3]. В исследовании Н.В. Литвякова и др. [9] также были выявлены хромосомные регионы, CNV в которых сопряжены с чувствительностью опухоли молочной железы к неоадъювантной химиотерапии (НАХТ): 18р11.21; 11q22.1-23.3; 1q24.1-43. Несмотря на результаты проводимых исследований, демонстрирующих зависимость эффективности предоперационной химиотерапии от определенных хромосомных аберраций в ДНК опухоли, нет однозначного мнения относительно предсказательной значимости изучаемых критериев.
Также не существует и унифицированного подхода к выбору схемы при РМЖ. Однако накоплено значительное количество информации относительно связи эффективности НАХТ с уровнем экспрессии некоторых молекул (TOP2A, TUBB3, TYMS), являющихся мишенями для действия цитостатиков. Наиболее изученной и доказанной является корреляция между высоким уровнем экспрессии топоизомеразы 2а (Тор2а) и эффективностью антрациклинсодержащих схем химиотерапии [7]. Несмотря на это, определение экспрессии генов-мишений в опухолевой ткани для персонализированного выбора препарата при проведении НАХТ широкого внедрения в практику не получило, хотя с клинических позиций является достаточно актуальным еще и потому, что на сегодняшний день антрациклины - одни из наиболее эффективных и часто используемых цитостатиков при РМЖ.
Цель исследования - изучение эффективности НАХТ антрациклинами в зависимости от наличия делеций и амплификаций различных хромосомных локусов и уровня экспрессии топоизомеразы 2а в опухолевой ткани у больных раком молочной железы.
Материал и методы
В исследование было включено 46 пациенток с диагнозом рак молочной железы T2-4N0-3M0 стадии, средний возраст составил 49 ± 8 лет (29-68 лет). До начала лечения пациентам под контролем УЗИ
выполнялась пистолетная биопсия опухоли. По стандартной методике определялись: гистологический тип опухоли, степень злокачественности, рецепторный статус (РЭ, РП), статус Her2Neu и уровень Ki-67. У 28 пациенток имел место лю-минальный В подтип опухоли, у 12 - трижды негативный, у 6 - Her2 положительный не люми-нальный. В ходе комбинированного лечения все больные получали 2-6 курсов НАХТ по схемам, включающим антрациклины (FAC: фторурацил, 500 мг/м2; доксорубицин, 50 мг/м2; циклофосфа-мид, 500 мг/м2; внутривенно в 1-й день, CAX: циклофосфамид, 100 мг/м2, внутримышечно в течение 14 дней; доксорубицин, 30 мг/м2 внутривенно в 1-й и 8-й дни; капецитабин, 2 000 мг/м2/ сут внутрь на два приема в течение 14 дней). Для определения CNV и уровня экспрессии Тор2а из опухолевой ткани выделяли ДНК и РНК. Для этого образцы опухоли помещали в консервирующий раствор RNALater (Ambion, USA) и сохраняли в холодильнике при -80°С. ДНК из опухолевой ткани выделяли с помощью набора QIAamp DNA mini Kit (Qiagen, Germany) и исследовали с помощью микрочипов фирмы Affymetrix (USA) CytoScan™ HD Array в соответствии с инструкциями производителя (http://www.qiagen.com, www.affymetrix. com). Тотальная РНК была выделена из биопсий-ных образцов до лечения с использованием набора RNeasy mini kit Plus, содержащего DNase I (Qiagen, Germany). Для получения кДНК на матрице РНК проводили реакцию обратной транскрипции с помощью набора RevertAid™ (Fermentas, Lithuania). Уровень экспрессии ТОР2а оценивали методом количественной ПЦР в режиме реального времени (qPCR) по технологии TaqMan на амплификаторе Rotor-Gene-6000 (Qiagen, Germany). Ранее была описана методика проведения ПЦР [8] и последовательность праймеров Тор2а.
Оценка эффективности неоадъювантной химиотерапии осуществлялась по шкале ВОЗ, исходя из данных УЗИ и маммографии. Статистическая обработка проводилась с использованием пакета программ SPSS 17.0.
Результаты и обсуждение
Из 46 пациентов, включенных в исследование, регрессия опухоли более чем на 50 % была отмечена в 29 (63 %), стабилизация и прогрессирование -в 17 (37 %) наблюдениях. При определении в опухолевой ткани уровня экспрессии Тор2а оказалось, что он колебался от 0,08 до 18,49, медиана составила 3,5 (1,05-7,2). Анализ сопряженности эффективности предоперационной химиотерапии с уровнем экспрессии Тор2а показал, что регрессия новообразования в ответ на антрациклин-содержащие схемы лечения наблюдалась чаще в опухолях с исходно высоким уровнем экспрессии топоизомеразы. Эмпирическим путем было выявлено, что в качестве разделяющего критерия
Таблица 1
Частота встречаемости отдельных СИУ в опухоли молочной железы и их связь с эффективностью
неоадъювантной химиотерапии
Показатель
Частота встречаемости маркера
Регрессия опухоли более 50 % при наличии маркера (СКУ, высокий уровень экспрессии)
Регрессия опухоли более 50 % при отсутствии маркера (CNV, высокий уровень экспрессии)
Р level по критерию Фишера
Делеция АВСВ1 7q21.1 Делеция АВСВ3 6p21.32 Делеция АВСС1 16p13.1 Делеция ABCG2 4q22 Делеция MVP 16p11.2
Делеция 18p11.21 Делеция 11q22.1-23.3 Амплификация 1q24.1-43 Уровень экспрессии Тор2а>5
17 % (8/46) 13 % (6/46) 11 % (5/46) 20 % (9/46) 9 % (4/46) 23 % (11/46) 44 % (20/46) 57 % (26/46) 34,8 % (16/46)
100 % (8/8) 100 % (6/6) 80 % (4/5) 78 % (7/9) 75 % (3/4) 100 % (11/11) 85 % (17/20) 85 % (22/26) 87,5 % (14/16)
целесообразно использовать уровень экспрессии Тор2а, равный 5. Эффективность НАХТ у пациентов с уровнем экспрессии Тор2а>5 в опухолевой ткани составила 87,5 % (14 из 16), а стабилизация и прогрессирование наблюдались только в 12,5 % (2 из 16) случаев. При низком уровне экспрессии Тор2а (менее 5) данные показатели составили 50 % (15 из 30) и 50% (15 из 30) соответственно (рис. 1). Различия статистически значимы (р=0,023). Полученные результаты соответствуют данным литературы. Так, ранее в работах К. Kawachi и ^ Miyoshi было показано, что при сверхэкспрессии ТОР2а по данным ИГХ в опухоли молочной железы наблюдался значительно более выраженный ответ на антрациклинсодержащие схемы лечения [6, 11].
По результатам исследования опухолевой ткани были выделены СКЫУ, ассоциированные с высокой эффективностью НАХТ. Так, делеции локусов генов ЛВСВ1(7^21.1) и АВСВ3(6р21.32) в 100 % случаев были сопряжены с частичной и полной регрессией опухоли. При делеции ИУР(16р11.2), АВСG2(4q22), АБСС1(16р13.1) непосредственная эффективность предоперационной химиотерапии
55,3% (21/38) 0,017
57,5% (23/40) 0,044
61 % (25/41) 0,405
56,8 % (21/37) 0,413
61,9 % (26/42) 0,604
51,4 % (18/35) 0,004
46,2 % (12/26) 0,007
35 % (7/20) 0,001
50 % (15/30) 0,023
была несколько ниже и составила 75-80 %, но уровень доверительной значимости оказался больше 0,05 (табл. 1). Можно полагать, что в результате аллельной делеции повышение экспрессии гена АВС в опухолевых клетках в ответ на химиотерапию оказывается недостаточным для элиминации лекарственных средств, что обусловливает высокую химиочувствительность опухолевых клеток.
Относительно других ранее выявленных генетических маркеров эффективности предоперационного лечения было показано, что делеции 18р11.21 и 11q22.1 - 23.3 регионов ассоциированы с регрессией новообразования в 100 и 85 % случаев соответственно. Амплификация региона 1q24.1-43 была связана с высокой эффективностью НАХТ также в 85 % случаев (табл. 1). Данных о сопряженности амплификации локуса 1q24.1-43, делеций 11q22.1-23.3 и 18p11.21 в опухоли молочной железы с эффективностью химиотерапии в литературе не представлено.
Несмотря на высокую частоту регрессии опухоли (75-80 %), ассоциированную с делецией генов АВСС1, ABCG2 и MVP, проверку на статистиче-
Рис. 1. Зависимость эффективности НАХТ антрациклинами от уровня экспрессии Тор2а в опухолевой ткани СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2016. ТОМ 15, № 2. С. 29-35 31
клинические исследования
таблица 2
Эффективность нАхт в зависимости от различного количества в опухолевой ткани генетических маркеров эффективности предоперационного лечения
Наличие/отсут- _ „ _
Кол-во маркеров в Регрессия опухоли Стабилизация и _
ствие изучаемого _ ,_„. Чувствительность Специфичность
ткани опухоли . . более 50 % прогрессирование
кол-ва маркеров (п)
Только 1 Только 2 3 и более
+(8/46) 75 % (6/8) 25 % (2/8)
-(38/46) 60,5 % (23/38) 39,5 % (15/38)
+(8/46) 75 % (6/8) 25 % (2/8)
-(38/46) 60,5 % (23/38) 39,5 % (15/38)
+(18/46) 94,4 % (17/18) 5,6 % (1/18)
-(28/46) 42,9 % (12/28) 57,1 % (16/28)
20,6 % 20,6 % 58,6 %
88,2 % 88,2 % 94,1 %
Рис. 2. Эффективность НАХТ в зависимости от наличия в опухолевой ткани хотя бы 1 из генетических маркеров эффективности предоперационного лечения (чувствительность - 100 %, специфичность - 70,6 %)
скую значимость при сравнении частоты ответа у больных с делецией и без делеции эти маркеры не прошли (р=0,405-0,604) (табл. 1). По этой причине дальнейший анализ предполагал оценку предсказательной значимости следующих маркеров: делеций АВСВ1, АВСВ3, 18р11.21, Щ22.1-23.3, амплификации ^24.1-43 и уровня экспрессии ТОР2а>5.
Оказалось, что наличие в опухолевой ткани только одного из 6 перечисленных выше маркеров наблюдалось у 8 пациентов, регрессия опухоли более 50 % имела место в 75 % (6 из 8) наблюдений. Аналогичные результаты получились при наличии только двух изучаемых маркеров. Чувствительность в обоих случаях составила 20,6 %, а специфичность - 88,2 %. Одновременное наличие трех и более маркеров было отмечено у 18 пациентов, а у 17 из них диагностирована регрессия опухоли на фоне НАХТ более 50 %, что составляет 94,4 %, чувствительность метода - 58,6 %; специфичность -94,1 % (табл. 2).
При анализе общей группы больных у 34 пациентов в опухолевой ткани определялся хотя бы один или любое другое количество изучаемых маркеров. У 85,3 % из них (29 из 34) в ответ на предоперационное лечение была зарегистрирована регрессия новообразования более 50 %, и только у 14,7 % (5 из 34) пациенток имело место прогрессирование заболевания. У остальных 12 пациенток предоперационное лечение ни в одном случае не
было эффективно (уровень доверительной вероятности по критерию Фишера р=1,59*10"7). Чувствительность данного подхода составила 100 %, специфичность - 70,6 % (рис. 2).
Заключение
Полученные данные свидетельствуют о том, что эффективность антрациклинсодержащих схем НАХТ у больных раком молочной железы ассоциирована не только с высоким исходным уровнем ТОР2а, но и с наличием в опухолевой ткани ряда генетических маркеров, таких как делеция локусов генов АВС: АВСВ1 (7^21.1), АВСВ3(6р21.32), а также хромосомных аберраций в регионах ДНК, не связанных напрямую с генами АВС, - делеция 18р11.21; 1Ц22.1 локусов и амплификация Ц24.1-43, что позволяет рассматривать их в качестве информативных предсказательных параметров. Наиболее значимым результатом проведенной работы, на наш взгляд, является тот факт, что наличие хотя бы одного из представленных генетических маркеров позволяет не только предсказать высокую эффективность предоперационного лечения антра-циклинами, но и имеет чувствительность, равную 100 %, при достаточно высокой специфичности -70,6 %. Таким образом, применение описанного выше подхода в клинической практике целесообразно при определении показаний к назначению НАХТ антрациклинами у больных раком молочной железы.
■HMTEPATYPA
1. EechouteK., SparreboomA., BurgerH., FrankeR.M., Schiavon G., Verweij J., Loos W.J., WiemerE.A., MathijssenR.H. Drug transporters and imatinib treatment: implications for clinical practice // Clin. Cancer Res.
2011. Vol. 17 (3). P. 406-415. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-10-2250.
2. Gillet J.P., Gottesman M.M. Overcoming multidrug resistance in cancer: 3 5 years after the discovery of ABCB1 // Drug Resist Updat. 2012. Vol. 15 (1-2). P. 2-4. doi: 10.1016/j.drup.2012.03.001.
3. Han S, Park K, Shin E, Kim H.J., Kim J.Y., Kim J.Y., Gwak G. Genomic change of chromosome 8 predicts the response to taxane-based neoadjuvant chemotherapy in node-positive breast cancer // Oncol. Reports. 2010. Vol. 24 (1). P. 121-128.
4. Han W, Woo J.H., Yu J.H., LeeM.J., MoonH.G., KangD, NohD.Y. Common genetic variants associated with breast cancer in Korean women and differential susceptibility accoding to intrisic subtype // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2011. Vol. 20 (5). P. 793-798. doi: 10.1158/1055-9965.EPI-10-1282.
5. Kaufmann M., von Minckwitz G., Mamounas E.P., Cameron D., Carey L.A., Cristofanilli M., Denkert C., Eiermann W., Gnant M., Harris J.R., Karn T., Liedtke C., Mauri D., Rouzier R., Ruckhaeberle E., Semiglazov V., Symmans W.F., TuttA., Pusztai L. Recommendations from an international consensus conference on the current status and future of neoadjuvant systemic therapy in primary breast cancer // Ann. Surg. Oncol.
2012. Vol. 19 (5). P. 1508-1516. doi: 10.1245/s10434-011-2108-2.
6. Kawachi K., Sasaki T., Murakami A., Ishikawa T., Kito A., Ota I., Shimizu D., Nozawa A., Nagashima Y., Machinami R., Aoki I. The topoi-somerase II alpha gene status in primary breast cancer is a predictive marker of the response to anthracycline-based neoadjuvant chemotherapy // Pathol. Res. Pract. 2010. Vol. 206 (3). P. 156-162. doi: 10.1016/j. prp.2009.10.009.
7. Konecny G.E., Pauletti C., Untch M., Wang H.-J., Modus V., Ku-lin W., Thomssen C., HarbeckN., WangL., Apple S., JanickeF., SlamonD.J. Association between HER2, TOP2A, and response to antracycline-based preoperative chemotherapy in high-risk primary breast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2010. Vol. 120. P. 481-489. doi: 10.1007/s10549-010-0744-z.
8. Litviakov N., Cherdyntseva N., Tsyganov M., Denisov E., Gar-bukov E., Merzliakova M., Volkomorov V., Vtorushin S., Zavyalova M., Slonimskaya E. Changing the expression vector of multidrug resistance genes is related to neoadjuvant chemotherapy response // Cancer Chem-other. Pharmacol. 2013. Vol. 71 (1). P. 153-163. doi: 10.1007/s00280-012-1992-x.
9. LitviakovN.V., CherdyntsevaN.V., TsyganovN.V., SlonimskayaE.M., Ibragimova M.K., Kazantseva P.V., Kzhyshkowska J., Choinzonov E.L. Deletions of multidrug resistance gene loci in breast cancer leads to the down-regulation of its expression and predict tumor response to neoadjuvant chemotherapy // Oncotarget. 2016. Vol. 7 (7). P. 7829-7841. doi: 10.18632/oncotarget.6953.
10. MillerM, OttesenR.A., Niland J.C., KruperL., Chen S.L., Vito C. Tumor response ratio predicts overall survival in breast cancer patients treated with neoadjuvant chemotherapy // Ann. Surg. Oncol. 2014. Vol. 21. P. 3317-3323. doi: 10.1245/s10434-014-3922-0.
11. Miyoshi Y., Kurosumi M., Kurebayashi J., Matsuura N, Taka-hashi M., Tokunaga E., Egawa C., Masuda N., Kono S., Morimoto K., Kim S.J., Okishiro M., Yanagisawa T., Ueda S., Taguchi T., Tamaki Y., Noguchi S. Predictive factors for anthracycline-based chemotherapy for human breast cancer // Breast Cancer. 2010. Vol. 17 (2). P. 103-109. doi: 10.1007/s12282-009-0152-6.
12. O'Driscoll L., ClynesM. Molecular markers of multiple drug resistance in breast cancer // Chemotherapy. 2006. Vol. 52 (3). P. 125-129.
13. SchinkelA.H., Jonker J.W. Mammalian drug efflux transporters of the ATP binding cassette (ABC) family: an overview // Adv. Drug Deliv. Rev. 2012. Vol. 64. P. 138-153.
14. Symmans W.F., Peintinger F., Hatzis C., Rajan R., Kuerer H., Valero V., Assad L., Poniecka A., Hennessy B., Green M., Buzdar A.U., Singletary S.E., Hortobagyi G.N., Pusztai L. Measurement of residual breast cancer burden to predict survival after neoadjuvant chemotherapy // J. Clin. Oncol. 2007. Vol. 25 (28). P. 4414-4422.
15. Szakacs G., Paterson J.K., Ludwig J.A., Booth-Genthe C., Gottesman M.M. Targeting multidrug resistance in cancer // Nat. Rev. Drug Discov. 2006. Vol. 5 (3). P. 219-234.
16. Von Minckwitz D., Untch M., Blohmer J.U., Costa S.D., Eidt-mann H., Fasching P.A., Gerber B., Eiermann W., Hilfrich J., Huober J., Jackisch C., Kaufmann M., Konecny C., Denkert C., Nekljudova V., Me-hta K., Loibl S. Definition and impact of pathologic complete response on prognosis after neoadjuvant chemotherapy in various intrinsic breast cancer subtypes // J. Clin. Oncol. 2012. Vol. 30 (15). P. 1796-1804. doi: 10.1200/JC0.2011.38.8595.
17. WikmanH., Sielaff-FrimpongB., Kropidlowski J., WitzelI., MildeLangosch K., Sauter G., Westphal M., Lamszus K., Pantel K. Clinical Relevance of Loss of 11p15 in Primary and Metastatic Breast Cancer: Association with Loss of PRKCDBP Expression in Brain Metastases // PLoS ONE. 2012. Vol. 7 (10): e47537. doi: 10.1371/journal.pone.0047537.
Поступила 15.01.16.
Принята в печать 29.02.16.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Казанцева Полина Вадимовна, аспирант отделения общей онкологии. Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: polydoctor@yandex.ru. SPIN-код автора: 7881-6259.
Цыганов Матвей Михайлович, младший научный сотрудник лаборатории онковирусологии, Томский НИИ онкологии (г Томск, Российская Федерация). E-mail: TsyganovMM@yandex.ru. SPIN-код: 1253-0240.
Слонимская Елена Михайловна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая отделением общей онкологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: slonimskaya@rambler.ru. SPIN-код: 7763-6417. Литвяков Николай Васильевич, доктор биологических наук, заведующий лабораторией онковирусологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: nvlitv72@yandex.ru. SPIN-код: 2546-0181.
Чердынцева Надежда Викторовна, доктор биологических наук, профессор, заведующая лабораторией молекулярной онкологии и иммунологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: nvch@oncology.tomsk.ru. SPIN-код: 5344-0990.
Ибрагимова Марина Константиновна, младший научный сотрудник лаборатории онковирусологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: imk1805@yandex.ru. SPIN-код: 2340-1628.
Дорошенко Артем Васильевич, кандидат медицинских наук, научный сотрудник отделения общей онкологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: doroshenko@sibmail.com. SPIN-код: 7874-7606.
Тарабановская Наталья Анатольевна, кандидат медицинских наук, младший научный сотрудник отделения общей онкологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail:tarabanovskaya@inbox.ru. SPIN-ra^:7481-2159. Паталяк Станислав Викторович, кандидат медицинских наук, младший сотрудник отделения общей онкологии, Томский НИИ онкологии (г. Томск, Российская Федерация). E-mail: Patalyak@gmail.com. SPIN-код: 8497-1750.
Авторы данной статьи подтвердили отсутствие финансовой поддержки / конфликта интересов, о котором необходимо сообщить
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
MOLECULAR-GENETIC MARKERS OF RESPONSE
TO NEOADJUVANT CHEMOTHERAPY WITH ANTHRACYCLINES IN BREAST CANCER PATIENTS
P.V. Kazantseva1, M.M. Tsyganov13, E.M. Slonimskaya2, N.V. Litvyakov13, H.B. Cherdyntseva1, M.K. Ibragimova13, A.V. Doroshenko1, N.A. Tarabanovskaya1, S.V. Patalyak1
Tomsk Cancer Research Institute, Tomsk1
Siberian State Medical University, Tomsk2
National Research Tomsk State University, Tomsk3
5, Kooperativny per., 634009-Tomsk, e-mail: polydoctor@yandex.ru1
Abstract
The purpose of the study: to evaluate the response to neoadjuvant anthracycline-based chemotherapy depending on the presence of deletions and amplifications of different chromosomal loci and the expression level of topoisomerase 2a in tumor tissue of breast cancer patients. Materials and methods. The study included 46 patients with stage T24N03M0 breast cancer, who received 2-6 cycles of neoadjuvant chemotherapy with FAC and CAX regimens. Results. The relationship between the expression level of Top2a>5, deletions of ABCB1, ABCB3, 18p11.21, 11q22.1 loci and amplification of 1q24.1-43 and the response to preoperative treatment was found. Of the 34 patients having at least one of these markers in the tumor tissue, 85.3 % of them demonstrated partial response to neoadjuvant chemotherapy (> 50 % reduction of tumor) and 14.7 % had stable disease and disease progression. No above markers were found in the tumor tissue of 12 patients, who did not respond to preoperative treatment. Conclusion. High levels of Top2a>5 expression, deletions of ABCB1; ABCB3; 18p11.21; 11q22.1 loci and 1q24.1-43 amplification were shown to be predictive markers of response to neoadjuvant anthracycline-based chemotherapy. The presence of at least one of these markers allowed us to predict response to preoperative treatment in 85 % of cases.
Key words: breast cancer, neoadjuvant chemotherapy, predictive markers,
level of Top2a>5 expression, deletion of ABC-transporter genes, DNA copy number variations.
REFERENCES
1. EechouteK., SparreboomA., BurgerH., FrankeR.M., Schiavon G., Verweij J., Loos W.J., WiemerE.A., MathijssenR.H. Drug transporters and imatinib treatment: implications for clinical practice // Clin. Cancer Res.
2011. Vol. 17 (3). P. 406-415. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-10-2250.
2. Gillet J.P., Gottesman M.M. Overcoming multidrug resistance in cancer: 3 5 years after the discovery of ABCB1 // Drug Resist Updat. 2012. Vol. 15 (1-2). P. 2-4. doi: 10.1016/j.drup.2012.03.001.
3. Han S, Park K, Shin E, Kim H.J., Kim J.Y., Kim J.Y., Gwak G. Genomic change of chromosome 8 predicts the response to taxane-based neoadjuvant chemotherapy in node-positive breast cancer // Oncol. Reports. 2010. Vol. 24 (1). P. 121-128.
4. Han W, Woo J.H., Yu J.H., LeeMJ, MoonH.G., KangD, NohD.Y. Common genetic variants associated with breast cancer in Korean women and differential susceptibility accoding to intrisic subtype // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2011. Vol. 20 (5). P. 793-798. doi: 10.1158/1055-9965.EPI-10-1282.
5. Kaufmann M., von Minckwitz G., Mamounas E.P., Cameron D., Carey L.A., Cristofanilli M., Denkert C., Eiermann W., Gnant M., Harris J.R., Karn T., Liedtke C., Mauri D., Rouzier R., Ruckhaeberle E., Semiglazov V., Symmans W.F., TuttA., Pusztai L. Recommendations from an international consensus conference on the current status and future of neoadjuvant systemic therapy in primary breast cancer // Ann. Surg. Oncol.
2012. Vol. 19 (5). P. 1508-1516. doi: 10.1245/s10434-011-2108-2.
6. Kawachi K., Sasaki T., Murakami A., Ishikawa T., Kito A., Ota I., Shimizu D., Nozawa A., Nagashima Y., Machinami R., Aoki I. The topoi-somerase II alpha gene status in primary breast cancer is a predictive marker of the response to anthracycline-based neoadjuvant chemotherapy // Pathol. Res. Pract. 2010. Vol. 206 (3). P. 156-162. doi: 10.1016/j. prp.2009.10.009.
7. Konecny G.E., Pauletti C., Untch M., Wang H.J., Modus V., Ku-lin W., Thomssen C., HarbeckN., WangL., Apple S., JanickeF., SlamonD.J. Association between HER2, TOP2A, and response to antracycline-based preoperative chemotherapy in high-risk primary breast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2010. Vol. 120. P. 481-489. doi: 10.1007/s10549-010-0744-z.
8. Litviakov N., Cherdyntseva N., Tsyganov M., Denisov E., Gar-bukov E., Merzliakova M., Volkomorov V., Vtorushin S., Zavyalova M.,
Slonimskaya E. Changing the expression vector of multidrug resistance genes is related to neoadjuvant chemotherapy response // Cancer Chem-other. Pharmacol. 2013. Vol. 71 (1). P. 153-163. doi: 10.1007/s00280-012-1992-x.
9. Litviakov N.V, Cherdyntseva N.V, Tsyganov N.V., Slonimskaya E.M., Ibragimova M.K., Kazantseva P.V., Kzhyshkowska J., Choinzonov E.L. Deletions of multidrug resistance gene loci in breast cancer leads to the down-regulation of its expression and predict tumor response to neoad-juvant chemotherapy // Oncotarget. 2016. Vol. 7 (7). P. 7829-7841. doi: 10.18632/oncotarget.6953.
10. MillerM., OttesenR.A., NilandJ.C., KruperL., Chen S.L., Vito C. Tumor response ratio predicts overall survival in breast cancer patients treated with neoadjuvant chemotherapy // Ann. Surg. Oncol. 2014. Vol. 21. P. 3317-3323. doi: 10.1245/s10434-014-3922-0.
11. Miyoshi Y., Kurosumi M., Kurebayashi J., Matsuura N., Taka-hashi M., Tokunaga E., Egawa C., Masuda N., Kono S., Morimoto K., Kim S.J., Okishiro M., Yanagisawa T., Ueda S., Taguchi T., Tamaki Y., Noguchi S. Predictive factors for anthracycline-based chemotherapy for human breast cancer // Breast Cancer. 2010. Vol. 17 (2). P. 103-109. doi: 10.1007/s12282-009-0152-6.
12. O'DriscollL., ClynesM. Molecular markers ofmultiple drug resistance in breast cancer // Chemotherapy. 2006. Vol. 52 (3). P. 125-129.
13. SchinkelA.H., Jonker J.W. Mammalian drug efflux transporters of the ATP binding cassette (ABC) family: an overview // Adv. Drug Deliv. Rev. 2012. Vol. 64. P. 138-153.
14. Symmans W.F., Peintinger F., Hatzis C., Rajan R., Kuerer H., Valero V., AssadL., Poniecka A., Hennessy B., Green M., Buzdar A.U., Singletary S.E., Hortobagyi G.N., Pusztai L. Measurement of residual breast cancer burden to predict survival after neoadjuvant chemotherapy // J. Clin. Oncol. 2007. Vol. 25 (28). P. 4414-4422.
15. Szakacs G., Paterson J.K., Ludwig J.A., Booth-Genthe C., Gottesman M.M. Targeting multidrug resistance in cancer // Nat. Rev. Drug Discov. 2006. Vol. 5 (3). P. 219-234.
16. Von Minckwitz D., Untch M., Blohmer J.U., Costa S.D., Eidt-mann H., Fasching P.A., Gerber B., Eiermann W., Hilfrich J., Huober J., Jackisch C., Kaufmann M., Konecny C., Denkert C., Nekljudova V., Me-hta K., Loibl S. Definition and impact of pathologic complete response
on prognosis after neoadjuvant chemotherapy in various intrinsic breast cancer subtypes // J. Clin. Oncol. 2012. Vol. 30 (15). P. 1796-1804. doi: 10.1200/jc0.2011.38.8595.
17. WikmanH., Sielaff-FrimpongB., Kropidlowski J., WitzelI., MildeLangosch K., Sauter G., Westphal M., Lamszus K., Pantel K. Clinical
Relevance of Loss of 11p15 in Primary and Metastatic Breast Cancer: Association with Loss of PRKCDBP Expression in Brain Metastases // PLoS ONE. 2012. Vol. 7 (10): e47537. doi: 10.1371/journal.pone.0047537.
Received 15.01.16. Accepted 29.02.16.
ABOUT THE AUTHORS
Kazantseva Polina V., Postgraduate student, Department of General Oncology. Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: polydoctor@yandex.ru. SPIN-code: 7881-6259.
Tsyganov Matvey M., Junior Research, Laboratory of Viral Oncology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: TsyganovMM@yandex.ru. SPIN-code: 1253-0240.
Slonimskaya Elena M., MD, DSc Professor, Head of General Oncology Department, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: slonimskaya@rambler.ru. SPIN-code: 7763-6417.
Litviakov Nikolay V., DSc, Head of Laboratory of Viral Oncology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: nvlitv72@yandex.ru. SPIN-code: 2546-0181.
Cherdyntseva Nadezhda V., DSc Professor, Deputy Director for Basic Science, Head of Laboratory of Molecular Oncology and Immunology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: nvch@oncology.tomsk.ru. SPIN-code: 53440990.
Ibragimova Marina K., Junior Research, Laboratory of Viral Oncology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: imk1805@yandex.ru. SPIN-code: 2340-1628.
Doroshenko Artem V., MD, PhD Researcher, Department of General Oncology Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: doroshenko@sibmail.com. SPIN-code: 7874-7606.
Tarabanovskaya Natalia A., MD, PhD Junior Research, Department of General Oncology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: tarabanovskaya@inbox.ru. SPIN- code: 7481-2159.
Patalyak Stanislav V., MD, PhD Junior Research, Department of General Oncology, Tomsk Cancer Research Institute (Tomsk, Russian Federation). E-mail: Patalyak@gmail.com. SPIN-code: 8497-1750.
Authors declare lack of the possible conflicts of interests
