CC BY
80
УДК 636.52/.58.082.13
Молекулярно-генетическая идентификация пород кур
М.В. Михайлов, к.б.н.
Процессы одомашнивания и селекции кур привели к широкому их разнообразию, однако с ростом продуктивности современных кроссов конкурентоспособность большинства аборигенных пород не позволяет сохранять их в промышленных стадах. В связи с этим все большее число местных пород кур находятся под угрозой исчезновения.
Взрыв работ по геномике и функциональной геномике в последние годы открыл новые возможности для создания молекулярных маркеров. Метод полимеразной цепной реакции и определение микросателлитов является наиболее чувствительным и специфичным для идентификации породной принадлежности кур по их ДНК.
Птицеводство является наиболее наукоемкой отраслью животноводства России. Анализ информационных источников по вопросу генетического разнообразия пород, кроссов и аборигенных популяций сельскохозяйственной птицы выявил высокий уровень технической оснащенности молекулярно-генетических лабораторий научных центров различных стран мира.
В рамках международного проекта АУ!АЫЭ!У (1998-2000 гг.) были изучены 54 популяции кур по 25 микросателлитам, в результате чего выявлены отличия в генетическом разнообразии между курами различных пород и коммерческими линиями. Ученые из ВНИИГЖ и ИОГЕН им. Вавилова изучили генетическое разнообразие отдельных пород кур отечественной селекции на основании определения
микросателлитных маркеров [1].
Несмотря на накопленный материал по проблеме разнообразия аллелофонда пород кур, существует ряд нерешенных вопросов, таких как связь современных кроссов кур с их предками и достоверность их происхождения.
В результате проведенного анализа научно-технических исследований по изучению аллелофонда кур различных пород по микросателлитам было выявлено, что тема является актуальной и находит практическое применение для контроля сохранения
генетического разнообразия редких пород кур по всему миру.
Применение микросателлитных исследований позволяет на более высоком методическом уровне и с большей точностью, чем при использовании других методов, производить построения
филогенетического древа различных пород кур и получать данные об их генетическом разнообразии, а также выявлять степень родства современных кроссов яичных и мясных кур с аборигенными и местными породами кур.
В связи с необходимостью завоза молодняка родительских пар и гибридного поголовья кур-несушек и цыплят-бройлеров
птицеводческими предприятиями как из других регионов России, так и из-за её пределов, выявлена целесообразность работ по установке соответствия между желательным и фактически завозимым генетическим материалом. Наиболее подходящим методом такого контроля может служить установка степени родства между родителями и потомством по микросателлитным маркерам.
Таким образом, проведенный анализ показал возможность более широкого применения микросателлитных маркеров в птицеводстве [1-3]. Что может быть применено для решения различных задач: филогенетических - породное родство и происхождение от древнего предка; селекционных - находит применение в индейководстве [2], производственных - для подтверждения отцовства и материнства родительских пар и финальных гибридов современных кроссов яичных, мясных кур и индеек.
С целью поиска наиболее оптимального вида ткани (органа) кур для выделения ДНК нами были проведены исследования на курах различных пород и кроссов. Для этого нами был отобран генетический материал из таких органов и тканей кур, как кожный покров (фрагмент гребня), соединительная, мышечная (мышечный желудок) жировая ткани, перо в период линьки, а также из крови. В результате выделения ДНК диатомным и перхлоратным методами нами не были установлены различия в качестве выделения ДНК вышеуказанных органов и тканей данными методами. Особенностью выделения ДНК диатомным методом из крови птицы является необходимость большей частоты промывания буферным раствором лейкоцитов от эритроцитов, что снижает скорость выделения ДНК. Также нами была установлена необходимость более длительного нахождения пробы генетического материала при лизисе в термостате при выделении ДНК диатомным методом из жировой ткани кур. Что рекомендуется учитывать при выборе ткани, из которой планируется выделить ДНК.
Работа выполнена в рамках выполнения соглашения, заключенного ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии и Министерством науки и образования Российской Федерации в рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России», 2012 г., регистрационный номер заявки на участие в конкурсе № 2012-1.4-12-000-1001-3473» по теме «Изучение генофондов
доместицированных и диких видов животных с использованием ДНК-технологий». Выполнение НИР проводилось в рамках работы НОЦ по молекулярной генетике и биотехнологии животных ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии и «Научно-образовательного центра «Биоиндустрия и биоресурсы в животноводстве и птицеводстве» Российской академии сельскохозяйственных наук (НОЦ «Биоиндустрия и биоресурсы в животноводстве и птицеводстве») по теме «Изучение аллелофонда кур различных пород по микросателлитам».
Литература:
1. Волкова, В.В. Исследование информативности мультиплексных тест-систем анализа микросателлитов кур с различным числом локусов /В.В. Волкова, Е.А. Гладырь, Н.А. Зиновьева, В.И. Фисинин, А.А. Севастьянова //Научные основы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных. Сб. научных трудов. Ч.2. СКНИИЖ -Краснодар, 2009. - С. 16-18.
2. Новгородова, И.П. Исследование информативности мультиплексных тест-систем анализа микросателлитов кур с различным числом локусов /И.П. Новгородова, В.И. Фисинин, Н.А. Зиновьева, Е.А. Гладырь, М.В. Михайлов, Я.С. Ройтер, Г. Брем //Достижения науки и техники АПК. - 8, 2012. - С. 62-65.
3. Шинкаренко, Л.А. Селекционно-генетические методы выведения и использование новых пород, линий и кроссов индеек /Л.А. Шинкаренко //Автореферат диссертации на соискание ученой степени канд. сел.-хоз. наук /ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет». - Краснодар, 2012. - 24 с.
4. Hillel J. Biodiversity of 52 chicken populations assessed by microsatellite typing of DNA pools /J. Hillel, M.A. Groenen, M. Tixier-Boichard, et al. //Genet Sel Evol 2003 Sep-Oct; 35(5) :533-57.
