CC BY
136
УДК 597.55б.333.1
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ФИЛОГЕНИЯ И НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ БЫЧКОВЫХ РЫБ (ООБПБЛЕ) САРМАТСКОЙ ГРУППЫ
© Д.А. Медведев
Ключевые слова: филогеография; цитохром Ь; Понто-Каспий; Neogobius.
Филогенетическая структура представителей рода Neogobius была изучена на основе анализа изменчивости гена цитохрома Ь. Показаны значительные различия в уровне дивергенции между черноморскими и каспийскими популяциями N. fluviatilis и N. melanostomus. В качестве основной причины формирования наблюдаемой картины дивергенции рассматривается серия геоморфологических преобразований Понто-Каспийского бассейна.
ВВЕДЕНИЕ
В бассейне Черного и Каспийского морей насчитывается несколько десятков видов рыб семейства Gobii-dae. Большинство из них относятся к эндемичной сарматской группе, обособленность которой от бычков, имеющих средиземноморское происхождение, не вызывает сомнения в настоящее время, однако первоначально они были отнесены к средиземноморскому роду Gobius Linnaeus, 1758. Обособленность большинства видов удалось установить на основе изучения морфологических признаков, в то время как для выявления филогенетических связей они оказались малоинформативными. Применение генетических методов сыграло ключевую роль в реконструкции филогении сарматских бычков [5, 15]. В результате была показана обособленность сарматской группы от средиземноморских бычков, парафилетическое происхождение рода Neo-gobius Iljin, 1927 sensu Берг [1] и близость родов Ben-thophilus Eichwald, 1831 и Caspiosoma Iljin, 1927. Изучение изменчивости нуклеотидных последовательностей широко распространенных в пределах Понто-Каспия видов (бычок-песочник Neogobius fluviatilis, бычок-кругляк N. melanostomus, бычок-цуцик Proteror-hinus marmoratus sensu lato) позволило обнаружить ряд географически обособленных популяций бычков с различным уровнем генетической дивергенции [9, 16-17, 19], не имеющих четких морфологических отличий [23]. В работе, посвященной филогении черноморскокаспийских бычков [15], была сделана попытка датирования дивергенции и показана ее связь с основными геоморфологическими преобразованиями в этом регионе.
Подобная картина дивергенции характерна как для рыб (Leuciscus cephalus [11], Syngnathus nigrolineatus [4]), так и для ряда групп беспозвоночных. Генетические различия между черноморскими и каспийскими популяциями были обнаружены у ракообразных отрядов Amphipoda, Cladocera, My sida [7, 10], моллюсков семейства Dreissenidae [12]. Замеченные различия в уровне генетической дивергенции близких видов представляют интерес для сопоставления филогеографических данных с геоморфологическими и палеоэкологическими событиями, происходившими в этом регионе.
На основе имеющихся данных были выдвинуты три зоогеографические гипотезы, объясняющие различия в уровне дивергенции филогенетических линий одного вида или ряда близких видов и их географическое распределение [7]:
1) глубокие генетические различия - следствие древней викариантной дивергенции, связанной с разделением Восточного Паратетиса на восточный (Каспийский) и западный (Черноморский) бассейны;
2) сравнительно небольшие генетические различия могли возникнуть в результате недавнего расселения и последующей дивергенции;
3) смешанный вариант, при котором недавнее расселение накладывается на уже существовавшую древнюю дивергенцию.
Цель работы - сравнение картин дивергенции двух видов, N. fluviatilis и N. melanostomus семейства Gobii-dae, широко распространенных в Понто-Каспий-ском бассейне, и сопоставление полученных данных с зоогеографическими гипотезами, выдвигавшимися при изучении дивергенции гидробионтов, населяющих Понто-Каспийский регион.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В данной работе использованы материалы по N. flu-viatilis и N. melanostomus из Черноморско-Каспийского бассейна (табл. 1, рис. 1 а). Всего в работе задействованы данные по 38 особям из 7 локалитетов.
ДНК из тканей грудных плавников, фиксированных в 96 %-ном этиловом спирте, выделяли с использованием набора «DNA Diatom PREP» («Изоген», Россия). Амплификацию митохондриального гена цитохрома b проводили с использованием праймеров AJG15, H5 [6] и набора Master Mix от Dialat Ltd (Россия) с добавлением по 0,5 мкл (5 ед./мкл) SmartTaq ДНК-полимеразы от Dialat Ltd (Россия). ПЦР протекала в следующем режиме: I - 94 °С (2 мин.); II - 40 циклов: 94 °С (45 с), 53 °С (30 с), 72 °С (60 с); III - 72 °С (3 мин.). Анализ результатов амплификации проводился при помощи электрофореза в 1,5 %-ном агарозном геле, в TBE-буфере с добавлением бромистого этидия. Секвениро-вание проводилось на автоматическом генетическом анализаторе ABI 3500 (Applied Biosystems, USA). По-
3045
Таблица 1
Места сбора материала, обозначение выявленных гаплотипов и номера в базе данных GenBank NCBI изученных экземпляров N. fluviatilis и N. melanostomus
Вид Обозначение гаплотипа Номер в GenBank Место сбора материала
N. melanostomus Nm 1 те88б27б р. Черная, п-ов Крым, Украина, 2008
Nm 2 те88б277 оз. Сасык, Одесская обл., Украина, 2011
Nm 3 те88б278 Черное море, Одесская обл., Украина, 2011
Nm 4 EU331215 р. Черная, п-ов Крым, Украина, 2008
Nm 5 EU331165 Черное море, бухта Стрелецкая, г. Севастополь, Украина, 2008
Nm б KF549989 Устье р. Кубань, Таманский п-ов, 2011
Nm 7 KF549990 Устье р. Кубань, Таманский п-ов, 2011
Nm 8 KF549988 Каспийское море, г. Актау, Казахстан, 2012
Nm 9 EU331175 Каспийское море, г. Актау, Казахстан, 2012
N. fluviatilis Nf 1 те88б273 оз. Сасык, Одесская обл., Украина, 2010
Nf 2 FJ526752 р. Дон в районе пос. Кагальник, Ростовская обл., 2008
Nf 3 те88б275 оз. Сасык, Одесская обл., Украина, 2011
Nf 4 GQ444338 оз. Сасык, Одесская обл., Украина, 2010
Nf 5 те88б274 северная часть Каспийского моря
Nf б GQ444372 северная часть Каспийского моря
Nf 7 GQ444411 северная часть Каспийского моря
Nf 8 KF549993 Каспийское море, г. Актау, Казахстан, 2012
Nf 9 KF549992 Каспийское море, г. Актау, Казахстан, 2012
Nf 10 KF549991 Каспийское море, г. Актау, Казахстан, 2012
лученные последовательности выравнивали в программе BioEdit 7 [13].
В исследование также включены материалы, представленные в базе данных NCBI [9, 17] N. fluviatilis (GQ444336-GQ444442), N. melanostomus (EU331156-EU331236), их использование позволило оценить уровень генетической дивергенции внутри каждой линии бычков. Собственные данные позволяют нам судить об уровне дивергенции генетических линий между наиболее крупными современными Понто-Каспийскими изо-лятами, Черным и Каспийским морями. Для укоренения филогенетических деревьев был использован близкий к N. fluviatilis и N. melanostomus вид N. caspius (FJ526756, FJ526757, KC886279), а также ряд близких видов бычков пуголовок: Benthophilus abdurahmanovi (FJ526777),
B. granulosus (FJ526778), B. mahmudbejovi (FJ526779), B. stellatus (FJ526780), Caspiosoma caspium (FJ526781).
Оценка внутригруппового генетического разнообразия и тест Таджимы на нейтральность проводились в программе DnaSP v5 [14] на основе собственных данных. В программе Network 4.6.1.1 [8] были построены медианные сети гаплотипов. Подбор оптимальной мутационной модели был основан на информационном критерии Байеса (BIC) и проводился в программе MEGA5 [20]. В этой программеа были построены филогенетические деревья на основе подобранной модели TN93 + G, методами максимального правдоподобия (ML), ближайшего соседа (NJ), максимальной парси-монии (MP) и рассчитаны средние внутригрупповые и межгрупповые дистанции на основе гаплотипов, полученных нами и представленных в базе данных NCBI.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В результате секвенирования нами получены данные о 38 последовательностях ДНК митохондриально-
го гена цитохрома b длиной 1098 п.н. Было выявлено 19 гаплотипов, 12 из них оказались уникальными. Результаты анализа генетического разнообразия черноморских и каспийских линий бычков представлены в табл. 2, также в нее вошли результаты теста Таджимы на нейтральность [21] и оценка средних внутригрупповых и межгрупповых генетических дистанций. Тест Таджимы показал, что эволюция нуклеотидных последовательностей каждой из линий (N. fluviatilis fluviatilis (бассейн Черного моря), N. fluviatilis pallasi (бассейн Каспийского моря), N. melanostomus melanostomus (бассейн Черного моря), N. melanostomus afinis (бассейн Каспийского моря)) была нейтральной. Наиболее низкий уровень нуклеотидного разнообразия (0,00052) наблюдается в линии N. melanostomus afinis. Очевидно, это связано с использованием в расчетах всего 2 обнаруженных нами гаплотипов, относящихся к этой линии. Наиболее высокий уровень нуклеотидного (0,01103) и гаплотипического (0,929) разнообразия наблюдается в каспийской линии бычка-песочника N. fluviatilis. Средние внутригрупповые дистанции черноморских и каспийских линий для каждого из видов оказались приблизительно одинаковы. Оценка генетических различий между черноморскими и каспийскими линиями бычков показала, что эволюционная дистанция между линиями N. fluviatilis (0,094) значительно больше дистанции между линиями N. melanostomus (0,011). Различия в уровне дивергенции хорошо видны на филогенетических деревьях (рис. 1б, 1в, 1г) и медианных сетях гаплотипов (рис. 1д, 1е). При этом можно отметить, что уровень бутстреп-поддержки образования ветвей, соответствующих черноморским и каспийским линиям бычков, высок (рис. 1б) вне зависимости от метода построения филогенетических деревьев.
304б
0.01
Рис. 1. а) точки сбора материала и распределение филогенетических линий бычка-песочника и бычка-кругляка (А - N. АшгШйгв АтгаНЬъ, ▲ - N. АтгаНЬя раНаяг, о - N. тЛапояЮтт тв1апоъ1отиъ, • - N. твЬстовХотш а/гпгъ); б) филогенетическое дерево рода Шо2оЫш, построенное методом максимального правдоподобия (МЬ) в соответствии с моделью эволюции ЮТ3 (индексы на рис. 1б, 1в и 1г рядом с узлами ветвления - бутстреп-поддержка в процентах от 1000 реплик, рассчитанная для МЬ/Ю/МР деревьев; в случаях оценки бутстреп-поддержки менее 50 % ее значения не указывались); в) укорененное МЬ дерево N. АшгШг-¡гъ (фигуры на рис. 1в и 1г соответствуют обозначениям линий на рис. 1а); г) укорененное МЬ дерево N. тв1аповХотив\ д) медианная сеть гаплотипов N. АшгШйгв (индексы над линиями, соединяющими гаплотипы, соответствуют числу эволюционных шагов; белым на рис. 1д и 1е обозначены черноморские гаплотипы, черным - каспийские; длина связи черноморских и каспийских гаплотипов N. АшгШйгв не соответствует числу эволюционных шагов, представленных в виде индекса, отмеченного «*»); е) медианная сеть гаплотипов N. тв1апо$Хоти$
Таблица 2
Оценка генетического разнообразия линий N. /¡иушНШ и N. тв1апос1отт, результаты теста Таджимы на нейтральность, рассчитанные в программе БиаБР 5
Наименование генетической линии N 5 к На ± ББщ п ± ББп к О Средние внутригрупповые дистанции ± ББ Эволюционные дистанции между группами последовательностей ± ББ
N./. АиугаШгъ 11 17 4 0,673 ± ± 0,123 0,00636 ± ± 0,00112 6,98182 0,90873 0,009 ± 0,0014 0,094 ± 0,009
N. /. раИаъг 8 29 6 0,929 ± ± 0,084 0,01103 ± ± 0,00131 12,10714 0,43669 0,008 ± 0,0011
N. т. те1апоъ-1отиъ 12 15 7 0,924 ± ±0,047 0,00374 ± ± 0,00036 4,10606 -0,74427 0,004 ± 0,0007 0,011 ± 0,003
N. т. а/гпгъ 7 2 2 0,286 ± ±0,196 0,00052 ± ± 0,00036 0,57143 -1,23716 0,004 ± 0,0008
Примечание: N - число последовательностей; 5 - число вариабельных сайтов; к - число гаплотипов; Ш - гаплотипическое разнообразие; ББна - стандартное отклонение от гаплотипического разнообразия; п - нуклеотидное разнообразие; ББп - стандартное отклонение от нуклеотидного разнообразия; к - среднее число нуклеотидных различий; О - тест Таджимы на нейтральность. Средние внутригрупповые дистанции ТЫ93 + О линий N. /¡тгахШя и N. тв1апосХоти$ и эволюционная дистанция между линиями каждого вида, рассчитанные в программе МЕОА5.
3047
ОБСУЖДЕНИЕ
Использование в работе двух близких видов N. flu-viatilis и N. melanostomus, относящихся к одному роду [5, 15], обусловлено предположением о сходной скорости эволюции по сравнению с другими видами сарматских бычков, которые могут быть подвержены воздействию иных эволюционных факторов. Полученные результаты говорят о четкой географической приуроченности филетических линий, относящихся к обоим видам бычков. Волга и Волго-Донской канал являются зоной вторичного контакта особей, принадлежащих к этим филогенетическим линиям, что стало следствием современной инвазии [9, 17]. Данная картина представляет интерес, т. к. уровень генетической дивергенции между линиями этих видов значительно отличается. Генетическая дистанция между линиями бычка-песочника N. fluviatilis почти в 9 раз превышает дистанцию между линиями бычка-кругляка N. melanostomus (табл. 3), что согласуется с датировками дивергенций их черноморских и каспийских линий (350 тыс. лет - N. melanostomus [9] и 3 млн лет - N. fluviatilis [17]). Рассматривая филогеографические гипотезы, выдвигаемые в отношении других гидробионтов, населяющих бассейн Понто-Каспия, можно предположить, что образование линий N. fluviatilis имеет викариантный характер и обусловлено возникновением древней изоляции между бассейнами Черного моря и Каспия 5 млн лет назад [18]. Дивергенция между линиями N. melanostomus является более поздней и, вероятно, ее происхождение связано с расселением бычка-кругляка через временные связи, соединявшие бассейн Каспия с Черным морем в позднем плейстоцене или голоцене.
Дивергенция 4 филогенетических линий другого представителя сарматской группы - Proterorhinus mar-moratus sensu lato - представлена как значительными, так и сравнительно небольшими различиями [16, 19]. Такая картина может наблюдаться при наложении недавних эволюционных событий на древнюю дивергенцию.
Представленную интерпретацию следует рассматривать в качестве одной из существующих гипотез [16, 19]. Из имеющихся данных видно, что на формирование генетической структуры сарматских бычков оказали воздействие как древнее преобразование Понто-Каспийского бассейна, так и последовательные геоморфологические события плейстоцена и голоцена. Полученные результаты включают новые оригинальные данные о генетическом разнообразии представителей бычковых рыб сарматской группы и охватывают необследованные ранее регионы. Бассейн Понто-Каспия представляет большой интерес для изучения дивергенции различных групп гидробионтов, населяющих его.
ЛИТЕРАТУРА
1. Берг Л.С. Рыбы пресных вод СССР и сопредельных стран. Москва; Ленинград: Изд-во АН СССР. 1949. Ч. 3. С. 927-1381.
2. Васильева Е.Д. Внутривидовая изменчивость и видовая специфика черепа бычка-песчаника Gobius fluviatilis Pallas (Gobiidae, Pisces) // Вестн. Моск. ун-та. Сер. 16. Биология. 1988. № 2. C. 30-38.
3. Васильева Е.Д. Морфология черепа бычка-кругляка Gobius mela-nostomus и сирмана G. syrman в связи с их положением в роде Gobius sensu lato // Вопр. ихтиологии. 1989. Т. 29. Вып. 2. С. 186-197.
4. Кирюхина Н.А., Холодова М.В. Анализ полиморфизма контрольного региона в митохондриальных ДНК в аборигенных и инвазийной популяциях черноморской пухлощекой иглы-рыбы Sungnathus nigrolineatus Eichwald, 1831 // Докл. АН. 2011. Т. 437. № 1. С. 136138.
5. Медведев Д.А., Сорокин П.А., Васильев В.П., Чернова Н.В., Васильева Е.Д. Реконструкция филогенетических связей черноморскокаспийских бычков (Gobiidae, Perciformes) на основе изменчивости митохондриального генома и некоторые проблемы таксономии // Вопросы ихтиологии. 2013. Т. 53. (В печати).
6. Akihito, Iwata A., Kobayashi T., Ikeo K., Imanishi T. et al. Evolutionary aspects of gobioid fishes based upon a phylogenetic analysis of mitochondrial cytochrome b genes // Gene. 2000. V. 259. P. 5-15.
7. Audzijonyte A., Daneliya M.E., Väinölä R. Comparative phylogeo-graphy of Ponto-Caspian mysid crustaceans: isolation and exchange among dynamic inland sea basins // Mol. Ecol. 2006. V. 15. P. 29692984.
8. Bandelt H.-J., Forster P., Röhl A. Median-joining networks for inferring intraspecific phylogenies // Mol. Biol. Evol. 1999. V. 16. P. 37-48.
9. Brown J.E., Stepien C.A. Ancient divisions, recent expansions: phylo-geography and population genetics of the round goby Apollonia mela-nostoma // Mol. Ecol. 2008. V. 17. P. 2598-2615.
10. Cristescu M.E.A., Hebert P.D.N., Onciu TM. Phylogeography of Ponto-Caspian crustaceans: a benthic-planktonic comparison // Mol. Ecol. 2003. V. 12. P. 985-996.
11. Durand J.D., Persat H., Bouvet Y. Phylogeography and postglacial dispersion of the chub (Leuciscus cephalus) in Europe // Mol. Ecol. 1999. V. 8. P. 989-997.
12. Gelembiuk G. W., May G.E., Lee C.E. Phylogeography and systematics of zebra mussels and related species // Mol. Ecol. 2006. V. 15. P. 10331050.
13. Hall T.A. BioEdit: A user friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT // Nucl. Ac. Symp. Ser. 1999. № 41. P. 95-98.
14. Librado P., Rozas, J. DnaSP v5: A software for comprehensive analysis of DNA polymorphism data // Bioinformatics. 2009. V. 25. P. 14511452.
15. Neilson M.E., Stepien C.A. Escape from the Ponto-Caspian: Evolution and biogeography of an endemic goby species flock (Benthophilinae: Gobiidae: Teleostei) // Mol. Phyl. Evol. 2009. V. 52. P. 84-102.
16. Neilson M.E., Stepien C.A. Evolution and phylogeography of the tube-nose goby genus Proterorhinus (Gobiidae: Teleostei): evidence for new cryptic species // Biol. J. Linn. Soc. 2009. V. 96. P. 664-684.
17. Neilson M.E. Stepien C.A. Historic speciation and recent colonization of Eurasian monkey gobies (Neogobius fluviatilis and N. pallasi) revealed by DNA sequences, microsatellites, and morphology // Diversity and Distributions. 2011. P. 1-15.
18. Reid D.F., Orlova M.I. Geological and evolutionary underpinnings for the success of Ponto-Caspian species invasions in the Baltic Sea and North American Great Lakes // Canad. J. Fisher. Aquat. Sci. 2002. V. 59. P. 1144-1158.
19. Sorokin P.A., Medvedev D.A., Vasil'ev V.P., Vasil'eva E.D. Further studies of mitochondrial genome variability in Ponto-Caspian Prote-rorhinus species (Actinopterygii: Perciformes: Gobiidae) and their taxonomic implications // ACTA Ichthyol. Piscator. 2011. V. 41. № 2. P. 95-104.
20. Tamura K., Peterson D., Peterson N., Stecher G., Nei M., Kumar S. MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likelihood, Evolutionary Distance, and Maximum Parsimony Methods // Mol. Biol. Evol. 2011. V. 28. P. 2731-2739.
21. Tajima F. Statistical methods to test for nucleotide mutation hypothesis by DNA polymorphism // Genetics. 1989. V. 123. P. 585-595.
БЛАГОДАРНОСТИ:
Автор выражает искреннюю благодарность В.П. Васильеву и Е.Д. Васильевой за предоставленный материал для молекулярно-генетического анализа, М.В. Холодовой и сотрудникам кабинета молекулярной диагностики ИПЭЭ РАН за помощь в проведении молекулярно-генетических исследований.
Исследования бычковых рыб проводятся при финансовой поддержке РФФИ (проект № 10-04-00339).
Поступила в редакцию 15 мая 2013 г.
Medvedev D.A. MOLECULAR PHYLOGENY AND SOME PECULIARITIES OF FORMATION OF GENETIC DIVERSITY OF SARMATIAN GROUP OF GOBY FISHES (GOBIIDAE)
Phylogenetic structure of the genus Neogobius is studied by analyzing of the variability of cytochrome b. Significant differences in the level of divergence between the Black Sea and the Caspian population of N. fluviatilis and N. melanostomus are showed. As the main reason for the formation of the observed
3048
pattern of divergence a series of geomorphic change of the Pon- Key words: phylogeography; cytochrome b; Ponto-Caspian;
to-Caspian basin is considered. Neogobius.
УДК 574.34 (б39.2.09)
ИЗМЕНЕНИЕ РАЗМЕРНО-ВОЗРАСТНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК ПОПУЛЯЦИИ ЛЕЩА В РЕЗУЛЬТАТЕ ИНТЕНСИВНОЙ ИНВАЗИИ LIGULA INTESTINALIS
© А.И. Новак, М.Д. Новак
Ключевые слова: Волжский бассейн; популяционные характеристики; паразиты рыб; Ligula intestinalis; биохимические исследования.
Количественный анализ возрастной структуры популяции леща в Волжском бассейне свидетельствует о равномерном уменьшении его численности, постепенно проявляющейся начиная с шести-семи лет. Численность взрослых лещей (6 лет и старше) уменьшается на 48,2 % по сравнению с младшими возрастными группами. В природных очагах лигулеза этот показатель достигает 65-71,8 %. Сравнение размерно-весовых показателей зараженных и неинвазированных экземпляров леща одного возраста показывает уменьшение массы почти на 35 %, длины - на 11 %. При интенсивной инвазии L. intestinalis содержание белка в мышцах уменьшается на 24,3 %, жира - на 20 %, энергетическая ценность снижается на 18,6 %.
ВВЕДЕНИЕ
Цикл развития ремнецов Ligula intestinalis включает окончательного и двух промежуточных хозяев. Взрослые гельминты паразитируют в кишечнике различных рыбоядных птиц: преимущественно чаек, реже - уток, крачек, поганок. Процеркоиды развиваются в полости тела веслоногих рачков (Cyclops strenuous, Acanthocyclops bicuspidatus, A. viridis, Mesocyclops oi-thonoides, Eudiaptomus gracilis, E. graciloides). Плеро-церкоиды L. intestinalis регистрируются у различных видов рыб семейства карповых. Инвазированная рыба сосредоточивается, главным образом, в мелководных участках водоемов, поэтому становится доступной для поедания дефинитивными хозяевами [4].
Наиболее выраженное негативное воздействие на организм хозяина L. intestinalis оказывают в фазе пле-роцеркоида. Патологическое влияние лигул проявляется в нарушении роста и развития рыб, уменьшении размеров селезенки, жировой дистрофии печени, вакуолизации гепатоцитов, снижении плодовитости [1, 2, 5], потере питательной ценности продукции [3].
Настоящее исследование выполнено с целью оценки влияния инвазии L. intestinalis на популяционные характеристики леща в Волжском бассейне и последующей разработки рекомендаций по освоению рыбных ресурсов с учетом особенностей распространения ремнецов.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В различных местах промысла на костромском участке Горьковского водохранилища, Костромском разливе, Галичском и Чухломском озерах проводили ихтиологические исследования: определение видов рыб, измерение длины, массы тела, возраста. Возраст рыб до трех лет устанавливали по чешуе, старше трех лет - по числу колец на срезе первого луча спинного плавника.
В условиях лаборатории проводили полное гельминтологическое вскрытие рыбы по К.И. Скрябину. По особенностям морфологии и локализации определяли виды, экстенсивность (ЭИ) и интенсивность (ИИ) инвазии.
Биохимические исследования: для оценки содержания белка в мышцах использовали рефрактометрический метод, жира - метод Сокслета. Определение энергетической ценности рыбной продукции проводили на основании учета количества белков, жиров, углеводов в 100 г мышечной ткани рыбы.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Исследования начаты в 1999 г. в соответствии с постановлением администрации Костромской области от 11 мая 1999 г. № 215 «О ходе реализации программы развития рыбного хозяйства Костромской области на 1996-2000 годы» для разработки научно обоснованных рекомендаций по рациональному использованию рыбных ресурсов на костромском участке Горьковского водохранилища.
В 1999-2000 гг. на костромском участке Горьковского водохранилища средний уровень зараженности плероцеркоидами L. intestinalis составлял: у леща -13,8 ± 0,21 % (573 из 4159), густеры - 5,2 ± 0,42 % (8 из 154), синца - 4,5 ± 0,69 % (2 из 44).
Лещ (Abramis brama) в Горьковском водохранилище является доминирующим видом рыб, у него отмечен наиболее высокий уровень инвазии плероцеркои-дами L. intestinalis с вариациями зараженности по участкам промысла: «Устье р. Стежера - граница с Ивановской областью» - 17,8 ± 1,64 %; «Устье р. Сунжа» -19,6 ± 0,53 %, «Козловы горы - Пушкино» - 15,7 ± ± 0,85 %; «г. Волгореченск - о. Трубинский» - 12,9 ± ± 0,63 %; «ЛЭП - Чернопенье» - 12,5 ± 1,47 %.
У 356 экземпляров лещей с показателями интенсивности инвазии 2-3 экз. L. intestinalis отмечены деформация и смещение плавательного пузыря, дистро-
3049
