Модификация жирнокислотного состава мембран эритроцитов при интоксикации ацетоном Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

гиена и санитария. 2016; 95(8)

DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-782-785_

Оригинальная статья

0 КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016

УДК 613.632:547.284.3]-099-074

Момот Т.В.1,2, КушнероваН.Ф.1, РахманинЮ.А.3

МОДИФИКАЦИЯ ЖИРНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ АЦЕТОНОМ

1 Школа биомедицины Дальневосточного федерального университета, 690950, Владивосток;

2 ФГБУН Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, 690041, Владивосток;

3 ФГБУ «НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава России, 119121, Москва

Представлены результаты исследования влияния интоксикации ацетоном на жирнокислотный состав общих липидов мембран эритроцитов крыс. Ингаляционное воздействие ацетона осуществляли в затравочной камере объемом 100 л, сконструированной по типу камер Б.А. Курляндского с автономной системой очистки и регенерации воздуха, заданных параметров температуры (20-22 °C) и влажности воздуха. Расход пропускаемого через камеру воздуха и аэрозольного ацетона составлял 10 л/мин. Концентрация ацетона в камере поддерживалась на уровне 206 ± 3,9 мг/м3, что соответствует ПДК для паров ацетона в воздухе рабочей зоны. Время воздействия составляло 6 ч на протяжении 3 нед в монотонном режиме, кроме выходных, и определялось исходя из конкретных параметров моделирования условий труда на производстве. Показано, что влияние ацетона сопровождается увеличением количества всех видов насыщенных жирных кислот и снижением ненасыщенных жирных кислот в общих липидах мембран эритроцитов крыс и в составе фос-фолипидных фракций. В составе фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина как основных структурных фосфолипидах биологических мембран отмечалось увеличение пальмитиновой и стеариновой кислот. В ряду жирных кислот семейства n-6 снизилось количество линолевой и арахидоновой кислот. В ряду жирных кислот семейства n-3 снизилось количество линоленовой, эйкозапентаеновой и докозагексаеновой жирных кислот. Перераспределение в мембране эритроцитов жирных кислот в сторону увеличения насыщенных и снижения ненасыщенных жирных кислот предполагает изменение ее физико-химических свойств, проницаемости, лабильности и сложности прохождения эритроцита по микроциркулярному руслу.

Ключевые слова: ацетон; эритроциты; фосфатидилхолин; фосфатидилэтаноламин; насыщенные жирные кислоты; ненасыщенные жирные кислоты.

Для цитирования: Момот Т.В., Кушнерова Н.Ф., Рахманин Ю.А. Модификация жирнокислотного состава мембран эритроцитов при интоксикации ацетоном. Гигиена и санитария. 2016; 95(8): 782-785. DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-782-785

Momot T.V.12, Kushnerova N.F.1, Rakhmanin Yu.A.3

MODIFICATION OF THE PATTERN OF FATTY ACIDS OF ERYTHROCYTES' MEMBRANES DUE TO THE ACETONE INTOXICATION

1Biomedicine School of Far East Federal University, Vladivostok, 690950, Russian Federation;

2A.V. Zhirmunsky Institute of Marine Biology FEB RAS, Vladivostok, 690041, Russian Federation;

3A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, 119121, Russian Federation

Results of the study of the impact of acetone intoxication on the fatty acids pattern of the general lipids of erythrocytes' membranes in rats are presented. The inhalation exposure of acetone was carried out in the inoculation chamber with the volume of 100 liters. The chamber was designed for the type of B. A. Kurlyandsky with self-contained system of purification and air regeneration and specified parameters of temperature (20-220С) and air humidity. The flow rate of the air and aerosolized acetone passed through the chamber accounted of 10 liters/min. Concentration of acetone in the chamber was sustained at the level of206±3,9 mg/m3 that corresponds to maximum permissible concentration for acetone vapor in the air of a working area. The time of exposure was 6 hours per day for 3 weeks in a monotonous mode, excluding weekend, and was based upon specific parameters of environment simulation in industry. The acetone impact was shown to be accompanied by the gain in the quantity of all kinds of saturated fatty acids and the fall of unsaturated fatty acids in general lipids of erythrocytes ' membranes in rats and in the structure ofphospholipid fractions. In the content of phosphatydilcholine and phosphatydilethanolamine, as a basic structural phospholipids of biological membranes, there was noted the increase in palmitic and stearic acids. In the range offatty acids of the n-6 family the amount of linoleic and arachidonic acids decreased. In the array of fatty acids of the n-3 family the content of linolenic, eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids (n-3 family) declined. Redistribution of fatty acids in the erythrocytes membrane towards to such alteration in quantity as the increasing of saturation and decreasing of the unsaturated fatty acids supposes the change of its physical and chemical properties, permeability, lability and complexity of passing erythrocyte via microcircular channels.

Keywords: acetone; erythrocytes; phosphatidylcholine; phosphatydilethanolamine; saturated fatty acid; unsaturated fatty acid.

For citation: Momot T. V., Kushnerova N.F., Rakhmanin Yu.A. Modification of the pattern of fatty acids of erythrocytes' membranes due to the acetone intoxication. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(8): 782-785. (In Russ.). DOI: 10.18821/00169900-2016-95-8-782-785

For correspondence: Natalia F. Kushnerova, MD, PhD, DSci., professor of the Department of Chemistry and Engineering of Biological Systems of the 1Biomedicine School of Far East Federal University, 690950, Vladivostok, Russian Federation. E-mail: natasha50@mail.ru

Information about authors: Momot T.V., http:Zorcid.org/0000-0003-3873-0343; Kushnerova N.F., http:Zorcid.org/0000-0002-6476-0039 Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Funding. The work was supported by the Ministry of Education and Science of the Russian Federation, project number 1326. Received: 2 February 2016 Accepted: 14 April 2016

Введение

Органические растворители, содержащие ацетон, используют работники различных специальностей: маляры, слесари, монтажники, рабочие химической и бытовой отраслей промышленности. Попадание в организм происходит через органы дыхания в виде аэрозолей, а также частично через кожные покровы [7]. Они проходят через мембраны клеток в связи с хорошей растворимостью в липидах, что обусловливает легкое преодоление гематоэнцефалического барьера. Наряду с молекулярной формой ацетон также присутствует в организме в виде кето-енольных таутомеров, являющихся нуклеофилами, что приводит к образованию токсических метаболитов и формированию токсического гепатита. То есть в качестве основного поражающего агента при интоксикации ксенобиотиком является как сам ксенобиотик, так и продукты его метаболизма в организме. В результате массового образования свободных радикалов токсиканта активизируется процесс оксидативного разрушения липидов, нарушается структурная организация мембран эритроцитов, и, соответственно, развивается тканевая гипоксия. При существенном превышении ПДК в воздушной среде ацетон вызывает легкий наркотический эффект (головокружение, головная боль, слабость, неустойчивость походки) [6]. Длительное его воздействие приводит к появлению нейроповеденческих симптомов, так называемый синдром органических растворителей, который включает изменение личностных характеристик, психолого-эмоциональную неустойчивость, утрату инициативы, ослабление памяти, неспособность сосредоточиться, повышенную утомляемость и др. [9]. При этом развиваются неврологические, гематологические, сердечно-сосудистые нарушения, признаки дисфункции печени, нарушаются метаболические процессы в организме [8]. Потенциальная опасность, исходящая от данного класса органических соединений, делает необходимым углубленное изучение биохимических механизмов действия органических растворителей на организм с целью профилактики и купирования последствий их токсического воздействия. Интерес к исследованию липидной составляющей мембран эритроцитов возник после того, как оказалось, что при химических интоксикациях нарушение липидного гомео-стаза проявляется в изменениях на уровне сывороточных липидов, а также в состоянии процессов липопероксида-ции [3]. Вместе с тем изучение эритроцитов как модели для исследования токсической нагрузки на биомембраны не получило должного развития.

Целью работы явилось исследование фосфолипидного и жирнокислотного состава мембран эритроцитов крыс при интоксикации ацетоном.

Материал и методы

Эксперимент проведен на 2 группах крыс-самцов линии Вистар массой тела 180-200 г. Ингаляционное воздействие ацетона осуществляли в затравочной камере объемом 100 л, сконструированной по типу камер Б.А. Кур-ляндского с автономной системой очистки и регенерации воздуха и заданных параметров температуры (20-22 °С) и влажности воздуха. Расход пропускаемого через камеру воздуха и аэрозольного ацетона составлял не менее 10 л/мин. Концентрация ацетона в камере поддерживалась на уровне ПДК для паров ацетона в воздухе рабочей

Для корреспонденции: Кушнерова Наталья Федоровна, д-р биол. наук, проф. каф. химии и инженерии биологических систем ФГБУН Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, 690041, Владивосток, E-mail: natasha50@mail.ru

Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(8)

_DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-782-785

Original article

зоны (ГОСТ 12.1.007-76). Время воздействия составляло 6 ч на протяжении 3 недель в монотонном режиме, кроме выходных, и определялось исходя из конкретных параметров моделирования условий труда на производстве. В ходе эксперимента были выделены следующие группы по 10 крыс в каждой: 1-я - контроль, 2-я - концентрации ацетона в воздухе 206 ± 3,9 мг/м3. Крыс выводили из эксперимента декапитацией под легким эфирным наркозом с соблюдением правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 1986). Исследование одобрено Комиссией по вопросам этики Тихоокеанского океанологического института им. В.И. Ильичева ДВО РАН.

Кровь для исследований собирали из шейной вены животных в вакуэты с 1% раствором гепарина. Эритроциты выделяли согласно руководству Т.П. Новгородцевой и соавт. [5]. Для получения мембранной массы эритроциты вносили в дистиллированную воду, где происходил их полный гемолиз. Экстракты общих липидов из мембран эритроцитов готовили по методу J. Folch et al. [10]. Фракционное разделение фосфолипидов осуществляли методом двумерной микротонкослойной хроматографии [2, 13]. Использовали следующие системы растворителей [12]: в первом направлении - хлороформ: метанол: аммиак (28%-ный) (65:25:5 или 65:35:5 по объему), во втором -хлороформ: ацетон: метанол: ледяная уксусная кислота: вода (30:40:10:10:5 или 50:20:10:10:5 по объему). Для обнаружения холиносодержащих фосфолипидов (фосфати-дилхолин) использовали реактив Драгендорфа [16]: липи-ды проявлялись в виде оранжевых пятен на желтом фоне. Для обнаружения фосфолипидов, содержащих аминогруппу (фосфатидилэтаноламин), пластинки опрыскивали 5%-ным раствором нингидрина в ацетоне [12] с последующим нагреванием в течение 2-3 мин над парами воды до появления розовых пятен на белом фоне. Для проявления всех фосфолипидных фракций применяли молибдат-ный реактив [14] и реагент на основе малахитового зеленого [15]. При этом липиды проявлялись в виде синих или зеленых пятен на белом фоне. Для определения жирно-кислотного спектра экстракты липидов подвергали мета-нолизу с хлористым ацетилом [1]. Эфиры жирных кислот анализировали на газовом хроматографе «лХМ-2000-05» (Россия) с пламенно-ионизационным детектором. Жирные кислоты идентифицировали двумя способами: путем сравнения удерживаемых объемов в исследуемой смеси и с помощью отечественных стандартных препаратов метиловых эфиров жирных кислот (С16-С24). Количественные данные обрабатывали с использованием статистического пакета Instat 3,0 (GraphPad. Software Inc. USA, 2005) со встроенной процедурой проверки соответствия выборки закону нормального распределения. Для определения статистической значимости различий в зависимости от параметров распределения использовали параметрический /-критерий Стьюдента или непараметрический ^/-критерий Манна-Уитни.

Результаты и обсуждение

При изучении количественных характеристик жирных кислот общих липидов эритроцитарных мембран крыс после интоксикации ацетоном следует отметить статистически достоверное увеличение всех видов насыщенных жирных кислот (см. таблицу). Так, в общих липидах эритроцитарных мембран после интоксикации ацетоном количество миристиновой кислоты относительно контрольных значений увеличилось на 24% (p < 0,001), пальмитиновой на 5% (p < 0,05), стеариновой на 15%

дигиена и санитария. 2016; 95(8)

DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-782-785

Оригинальная статья

Влияние интоксикации ацетоном на содержание основных видов жирных кислот в общих липидах, фосфатидилхолине и фосфатидилэтаноламине эритроцитарных мембран крыс (в % от суммы всех жирных кислот, M ± т)

Общие липиды Фосфатидилхолин Фосфатидилэтаноламин

Жирные кислоты 1-я группа 2-я группа 1-я группа 2-я группа 1-я группа 2-я группа

контроль ацетон контроль ацетон контроль ацетон

Миристиновая (14:0) 1,36 ± 0,02 1,68 ± 0,023 1,14 ± 0,03 1,46 ± 0,023 1,19 ± 0,02 1,40 ± 0,023

Пальмитиновая (16:0) 24,87 ± 0,41 26,16 ± 0,421 27,88 ± 0,32 29,08 ± 0,271 29,27 ± 0,40 31,30 ± 0,462

Стеариновая (18:0) 14,10 ± 0,43 16,19 ± 0,382 13,92 ± 0,20 14,58 ± 0,29 18,41 ± 0,33 19,37 ± 0,301

Пальмитолеиновая (16:1) 4,24 ± 0,05 5,00 ± 0,113 2,41 ± 0,03 2,70 ± 0,023 4,16 ± 0,03 4,50 ± 0,043

Олеиновая (18:1) 16,63 ± 0,31 18,06 ± 0,441 19,08 ± 0,27 20,32 ± 0,302 8,29 ± 0,17 9,40 ± 0,153

Линолевая (18:2 п-6) 15,94 ± 0,50 15,20 ± 0,47 19,27 ± 0,46 18,00 ± 0Д81 8,39 ± 0,22 7,11 ± 0,193

Арахидоновая (20:4 п-6) 14,75 ± 0,37 12,04 ± 0,353 11,59 ± 0,38 10,07 ± 0,342 23,24 ± 0,45 20,68 ± 0,423

Линоленовая (18:3 п-3) 1,87 ± 0,02 1,45 ± 0,023 1,22 ± 0,03 1,06 ± 0,032 1,42 ± 0,03 1,30 ± 0,022

Эйкозапентаеновая (20:5 п-3) 1,80 ± 0,02 1,35 ± 0,023 1,18 ± 0,02 1,00 ± 0,013 1,52 ± 0,02 1,41 ± 0,022

Докозагексаеновая (22:6 п-3) 4,44 ± 0,04 2,8 ± 0,033 2,31 ± 0,02 1,73 ± 0,013 4,11 ± 0,03 3,53 ± 0,033

Сумма насыщенных жирных кислот 40 44 43 45 49 52

Сумма ненасыщенных жирных кислот 60 56 57 55 51 48

Индекс насыщенности 0,67 0,79 0,75 0,82 0,96 1,08

Примечание: различия статистически значимы при: 1 -р < 0,05; 2 -р < 0,01; 3 -р <0,001 по сравнению с контролем.

(р < 0,01). При этом сумма насыщенных жирных кислот была в пределах 44% (в контроле - 40%). Также увеличилось количество моноеновых жирных кислот: пальми-толеиновой кислоты на 18% (р < 0,001) и олеиновой кислоты на 9% (р < 0,05). Количество арахидоновой кислоты (семейство п-6) уменьшилось на 18% (р < 0,001). В ряду семейства жирных кислот п-3 отмечалось снижение количества эйкозапентаеновой кислоты на 25% (р < 0,001) и докозагексаеновой кислоты на 35% (р < 0,001).

В связи с тем, что основными структурными компонентами биологических мембран являются фосфолипи-ды (в мембране эритроцитов до 65%), то мы выделили из общих липидов методом тонкослойной хроматографии фракцию фосфатидилхолина (локализован преимущественно в наружном монослое биомембран) и фосфа-тидилэтаноламина (локализован преимущественно во внутреннем монослое биомембран). При исследовании жирнокислотного спектра в составе фосфатидилхолина мембран эритроцитов крыс отмечалось достоверное увеличение миристиновой кислоты на 28% (р < 0,001). В то же время количество пальмитиновой и стеариновой кислот выросло в среднем на 4-5% (р < 0,05). Сумма насыщенных жирных кислот была в пределах 45% (в контроле -43%). Сумма ненасыщенных жирных кислот снизилась и составляла 56% (в контроле - 60%). Индекс насыщенности вырос до 0,79 против 0,67 в контроле. В ряду мо-ноеновых жирных кислот следует отметить увеличение пальмитолеиновой кислоты на 12% (р < 0,001) и олеиновой кислоты на 7% (р < 0,01). В ряду жирных кислот семейства п-6 отмечалось снижение линолевой кислоты на 7% (р < 0,05) и арахидоновой кислоты на 13% (р < 0,01). В ряду жирных кислот семейства п-3 снизилось количество линоленовой и эйкозапентаеновой кислот в среднем на 13-15% (р < 0,01-0,001). При этом количество докозагексаеновой жирной кислоты снизилось на 25% (р < 0,001). Сумма ненасыщенных жирных кислот уменьшилась до 55% (в контроле - 57%), что обусловило увеличение индекса насыщенности до 0,82 (в контроле - 0,75).

При изучении жирнокислотного состава фосфатиди-лэтаноламина после интоксикации крыс ацетоном отмечалась аналогичная направленность изменений относительно контроля, как и в составе фосфатидилхолина, но

степень их выраженности различалась. Так, количество миристиновой кислоты увеличилось на 18% (р < 0,001), а пальмитиновой и стеариновой кислот - в среднем на 5-7% (р < 0,05-0,01). Также увеличилось количество моноеновых жирных кислот: пальмитолеиновой кислоты - на 8% (р < 0,001), олеиновой кислоты - на 13% (р < 0,001). В то же время количество полиненасыщенных жирных кислот снизилось. Среди кислот семейства п-6 следует отметить снижение линолевой кислоты на 15% (р < 0,001) и арахидоновой кислоты на 11% (р < 0,001). В ряду жирных кислот семейства п-3 заметно снижение количества лино-леновой кислоты на 8% (р < 0,01), эйкозапентаеновой кислоты на 7% (р < 0,01) и докозагексаеновой кислоты на 14% (р < 0,001). Сумма насыщенных жирных кислот в фосфа-тидилэтаноламине после интоксикации ацетоном составляла 52% (в контроле 49%), а сумма ненасыщенных жирных кислот - 48% (в контроле 51%). Это обусловило рост индекса насыщенности до 1,08 (в контроле 0,96). Таким образом, воздействие ацетона сопровождается рассогласованием жирнокислотной составляющей общих липидов мембран эритроцитов, а также фосфолипидных фракций, в частности, фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина.

Мы проанализировали изменения количественных характеристик жирных кислот в составе фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина с учетом их преимущественного расположения в мембране эритроцитов. Оказалось, что в фосфатидилэтаноламине, образующем внутренний монослой, в наружном монослое (фосфатидилхолин) больше миристиновой и пальмитолеиновой жирных кислот при одновременном более значительном снижении арахидоновой, линоленовой, эйкозапентаеновой и докоза-гексаеновой жирных кислот. То есть воздействие ацетона сопровождается преимущественным поражением наружного монослоя клеточной мембраны эритроцитов.

В ранее проведенных нами работах [4] было показано, что интоксикация крыс ацетоном сопровождалась снижением осмотической устойчивости эритроцитов к гемолитическому агенту (№С1). То есть модификация жирнокис-лотного состава общих липидов мембран эритроцитов и фосфолипидных фракций, являющихся основными структурными компонентами мембран, по-видимому, обусловила снижение этого показателя.

Выводы

1. Влияние ацетона вызывает рассогласование жирно-кислотного состава как общих липидов мембран эритроцитов крыс, так и фосфолипидных фракций (фосфатидил-холин, фосфатидилэтаноламин), входящих в их состав.

2. Модификация жирнокислотного состава в фосфати-дилхолине и фосфатидилэтаноламине свидетельствует о появлении измененных молекулярных видов фосфолипи-дов при интоксикации ацетоном.

3. Перераспределение жирных кислот в общих липи-дах, фосфатидилхолине и фосфатидилэтаноламине мембран эритроцитов крыс в сторону увеличения содержания насыщенных жирных кислот и снижения содержания полиненасыщенных жирных кислот предполагает изменение физико-химических и биологических свойств клеточных мембран.

Финансирование. Работа поддержана Министерством образования и науки РФ, проект № 1326.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Литература (п.п. 9-16 см. References)

1. Берчфилд Г., Сторрс Э. Газовая хроматография в биохимии. Перевод с английского. М.: Мир; 1964.

2. Кейтс М. Техникалипидологии. Перевод с английского. М.: Мир; 1975.

3. Кушнерова Н.Ф., Рахманин Ю.А. Влияние интоксикации оксидами азота на метаболические реакции печени и профилактика поражений. Гигиена и санитария. 2008; (1): 70-3.

4. Кушнерова Н.Ф., Фоменко С.Е., Кушнерова Т.В., Другова Е.С. Влияние ацетона на физиологические и биохимические показатели эритроцитов крыс и их коррекция экстрактом из калины (Viburnum sargentii). Наркология. 2010; (2): 48-54.

5. Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Янькова В.И. Руководство по методам исследования параметров системы «Перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» в биологических жидкостях. Владивосток: Издательство Дальневосточного университета; 2003.

6. Нужный В.П., Савчук С.А. Токсичность алкогольных напитков и ацетона. Токсикологический вестник. 2005; (6): 35-40.

7. Рахманин Ю.А. Физические факторы в экологии человека и гигиене окружающей среды. Гигиена и санитария. 2009; (5): 4-7.

8. Тарасова Л.А., Сорокина Н.С., Лобанова Е.А. Клинико-патоге-нетические аспекты хронического воздействия органических растворителей. Медицина труда и промышленная экология. 1997; (3): 6-9.

Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(8)

_DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-8-785-789

Оriginal article

References

1. Burchfield H.P., Storrs E.E. Biochemical Applications of Gas Chromatography. New York: Academic Press; 1962.

2. Kates M. Techniques of Lipidology. New York; 1972.

3. Kushnerova N.F., Rakhmanin Yu.A. Influence of intoxication nitrogen oxides on metabolic reactions of a liver and prevention of defeats. Gigiena i sanitariya. 2008; (1): 70-3. (in Russian)

4. Kushnerova N.F., Fomenko S.E., Kushnerova T.V., Drugova E.S. Influence of acetone on physiological and biochemical indicators of erythrocytes of rats and their correction by extract from a guelder-rose (Viburnum sargentii). Narkologiya. 2010; (2): 48-54. (in Russian)

5. Novgorodtseva T.P., Endakova E.A., Yan'kova V.I. Guide System Parameters Research Methods «Lipid Peroxidation - Antioxidant Protection» in the Biological Fluids [Rukovodstvo po metodam issledovaniya parametrov sistemy «Perekisnoe okislenie lipidov - antioksidantnaya zashchita» v biologicheskikh zhidkostyakh]. Vladivostok: Izdatel'stvo Dal'nevostochnogo universiteta; 2003. (in Russian)

6. Nuzhnyy V.P., Savchuk S.A. The toxicity of alcohol and acetone. Toksikologicheskiy vestnik. 2005; (6): 35-40. (in Russian)

7. Rakhmanin Yu.A. Physical factors in ecology of the person and hygiene of environment. Gigiena i sanitariya. 2009; (5): 4-7. (in Russian)

8. Tarasova L.A., Sorokina N.S., Lobanova E.A. Clinico-pathogenetic aspects of chronic exposure to organic solvents. Meditsina truda i promyshlennaya ekologiya. 1997; (3): 6-9. (in Russian)

9. Dick F.D. Solvent neurotoxicity. Occup. Environ. Med. 2006; 63(3): 221-6.

10. Folch J., Less M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem. 1957; 226(1): 497-509.

11. Kabarowski H.S., Xu Y., Witte O.N. Lysophosphatidylcholine as a ligand for immunoregulation. Biochem. Pharmacol. 2002; 64(2): 161-7.

12. Rouser G., Kritchevsky G., Yamamoto A. Column chromatographic and associated procedures for separation and determination of phosphatides and glicolipids. In: Marinetti G.V., ed. Lipid Chromatographic Analysis. New York: Marcel Dekker; 1967: 99162.

13. Svetashev V.I., Vaskovsky V.E. A simplified technique for thin-layer microchromatography of lipids. J. Chromatogr. 1972; 67(2): 376-8.

14. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y., Vasenden I.M. A universal reagent for phospholid analysis. J. Chromatogr. 1975; 114(1): 129-41.

15. Vaskovsky V.E., Latyshev N.A. Modified Jungnickel's reagent for detecting phospholipids and other phosphorus compounds on thin-layer chromatograms. J. Chromatogr. 1975; 115(1): 246-9.

16. Wagner H., Horhammer L., Wolff F. Thin-layer chromatography of phosphatides and glycolipides. Biochem. Z. 1961; 334: 175-84.

Поступила 2.02.16 Принята к печати 14.04.16

О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016

УДК 613.777:632.95]-078

Алешня В.В., Журавлёв П.В., Панасовец О.П.

ИЗУЧЕНИЕ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ УСЛОВИЯХ ДЕЙСТВИЯ ПЕСТИЦИДОВ НА МИКРООРГАНИЗМЫ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКУЮ БЕЗОПАСНОСТЬ ВОДОЕМА

ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора, 344010, Ростов-на-Дону

В статье представлены экспериментальные данные о влиянии пестицидов (ордрама, динитроортокрезола и хлорофоса) в концентрациях от 0,01 до 10 мг/л на санитарно-показательную (ОМЧ, общие колиформные бактерии (ОКБ), E. coli, E. faecalis), потенциально патогенную (Ps. aeruginosa) и патогенную (S. derby) микрофлору речной воды. В качестве тест-культур использовали выделенные из водоема и музейные штаммы микроорганизмов. В связи с тем, что скорость разложения пестицидов в воде нарастает в прямой зависимости от степени ее биологического загрязнения, опыты проведены с речной водой: нативной и стерилизованной методом автоклавирования. Выявлены видовые и штаммовые различия в реакции микроорганизмов на действие ядохимикатов. Избирательность действия ордрама в концентрации от 0,1 до 10 мг/л на сальмонеллы, а хлорофоса в концентрации 10 мг/л на сальмонеллы и E. coli выражается в стимуляции размножения указанных бактерий. Динитроортокрезол в концентрациях 10 и 1 мг/л вызывает размножение синегнойных палочек и угнетает рост ОКБ и E. coli, в концентрации 0,1 мг/л препарат стимулирует жизнеспособность всех изученных микроорганизмов. Установлено, что при попадании в водоем пестициды вызывают изменение биоценоза в речной воде и нарушают процессы бактериального самоочищения. В условиях загрязнения пести-