CC BY
17
B. М. Гугушвили // Актуальные вопросы ветеринарной фармакологии : материалы Междунар. науч.-практ. конф. КубГАУ, КНИВИ РАСХН, 19-20 апр. 2012 г. - Краснодар, 2012. -
C.72-74.
2. Кощаев, А. Г. Коррекция иммунитета телок в период полового созревания / А. Г. Кощаев, В. М. Гугушвили // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. -Оренбург, 2015. № 6(56) - С. 105-107.
3. КощаевА. Г. Неспецифические факторы защиты организма телят / А. Г. Кощаев, В. М. Гугушвили // Fundamental and applied sciences today IX: Proceedings of the Conference. North Charleston, 12-13.09.2016, V. 1 - North Charleston, SC, USA : Create Space, 2016. - P. 5-7.
УДК 579.6
МОДИФИКАЦИЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ MODIFICATION OF DIFFERENTIAL-DIAGNOSTIC EDIUM FOR DETECTION AND DIFFERENTIATION OF ENTEROBACTERIA
Ермаков Владимир Викторович, канд. биол. наук
Датченко Оксана Олеговна, канд. биол. наук
ФГБОУ ВО Самарская ГСХА, Российская Федерация, г. Самара
Ermakov Vladimir Victorovich, Cand. Biol. Sci.
Datchenko Oksana Olegovna, Cand. Biol. Sci.
Samara State Agricultural Academy, Samara, Russian Federation
Аннотация: Модифицированный вариант коммерческой дифференциально-диагностической среды лактозного агара Дригальского позволяет уменьшить время, необходимое для выделения и дифференциации кишечных изолятов энтеробактерий, выделенных от различных видов животных. В результате сокращается время, необходимое для идентификации энтеробакте-рий в ходе диагностики кишечных инфекций или при проведе-
нии санитарно-бактериологического исследования различных объектов окружающей среды.
Ключевые слова: дифференциально-диагностические питательные среды; энтеробактерии.
Abstract: The modified variant of the commercial differential diagnostic medium of Drigalsky lactose agar allows to reduce the time necessary for isolation and differentiation of intestinal isolates of enterobacteria isolated from various animal species. As a result, the time needed to identify entero-bacteria during the diagnosis of intestinal infections or when conducting sanitary-bacteriological studies of various environmental objects is shortened.
Key words: differential-diagnostic nutrient media; enterobac-
teria.
Энтеробактерии устойчивы к стресс факторам как естественного, так и антропогенного происхождения. В следствие этого, они быстро адаптируются к постоянно изменяющимся условиям окружающей среды. При этом в микробиотопах окружающей среды находится свыше сотни условно-патогенных и патогенных энтеробактерий. Энтеробактерии являются этиологическим фактором развития незаразной и инфекционной патологии желудочно-кишечного тракта [1, 2, 3]. В результате снижается продуктивность животного, качество сырья и продукции, животноводство несёт огромные экономические потери. Развитию инфекций способствует наличие у изолятов энтеробактерий факторов вирулентности, персистенции и антибиотикорезистентно-сти. Патогенные и условно-патогенные энтеробактерии, представители резидентной и транзиторной микрофлоры макроорганизма, оказывали болезнетворное воздействие на организм, изученных нами хорьков, кошек и собак [4, 5].
В связи с этим совершенствование средств выявления и дифференциации энтеробактерий, в частности модификация питательных сред для выделения патогенных и условно-патогенных изолятов энтеробактерий и изучение комплекса их биологических свойств является крайне актуальным и практически значимым. В связи с этим мы провели исследование по модификации рецептуры коммерческой питательной среды для
выделения и дифференциации энтеробактерий, выделенных от различных видов животных.
Цель исследования — повышение эффективности дифференциально-диагностической питательной среды лактозного агара Дригальского, предназначенной для выделения и дифференциации энтеробактерий. Исходя из цели исследования, были поставлены следующие задачи — модифицировать рецептуру коммерческой питательной среды для выделения и дифференциации энтеробактерий; выделить от различных видов животных и идентифицировать изоляты энтеробактерий; изучить морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, серологических свойств микроорганизмов; выявление факторов патогенности и персистенции микроорганизмов.
Методика. Объектом для исследования была модифицированная нами дифференциально-диагностическая коммерческая питательная среда, предназначенная для выделения и дифференциации патогенных и условно-патогенных энтеробакте-рий, а также для проведения санитарно-бактериологического исследования. Материалом для исследования являлись 253 изо-лятов бактерий, выделенных из кишечного микробиотопа различных видов животных. Сельскохозяйственные животные: коровы, овцы, козы, свиньи, лошади, птица (куры и гуси). Дикие животные: кабаны, лоси, лисы. Зоопарковые животные: пони, верблюд. Домашние животные: кошки и коты, собаки, хорьки, шиншиллы. Исследование проводили в период с 2010 по 2017 гг.
Суспензию биоматериала для получения роста культур бактерий высевали на дифференциально-диагностические и селективно-элективные питательные среды. Суспензию материала распределяли одноразовым стерильным микробиологическим г-образным шпателем по поверхности среды в чашке Петри и инкубировали в термостате при 25-300С, 370С 48-72 ч [6].
Определение факторов патогенности, биохимические и серологические свойства, факторов персистенции, способность к образованию биоплёнок энтеробактерий проводили по общепринятым методам. Результаты исследований обрабатывали статистически по общепринятой методике с использованием компьютерной программе Microsoft Excel.
Результаты исследований и их обсуждение. Время появления колоний кишечных изолятов энтеробактерий (эшерихий, сальмонелл, иерсиний, цитробактера, клебсиелл, сераций, энтерококков, энтеробактера, шигелл) и возможность их идентификации зависит от рецептуры и селективного индикаторного компонента, содержащегося в питательной среде. Мы изменили рецептуру и заменили селективный компонент в коммерческой дифференциально-диагностической питательной среде, предназначенной для выделения и дифференциации патогенных и условно-патогенных энтеробактерий, а также для проведения са-нитарно-бактериологического исследования. Среда может быть использована также для проведения ONPG-теста (теста для выявления бактерий со скрытой способностью ферментировать лактозу, что является дифференциальным признаком представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда может разливаться в чашки Петри, столбиком в пробирки и использоваться для приготовления скошенного агара.
В ходе исследования были выделены 130 кишечных изолятов энтеробактерий от сельскохозяйственных животных — коровы, овцы, козы, свиньи, лошади, птица (куры и гуси). У диких животных (кабаны, лоси, лисы) было выделено 35 кишечных изолятов, а от зоопарковых животных (пони, верблюд) — 23 кишечных изолятов энтеробактерий. Среди энтеробактерий, выделенных из кишечного микробиотопа домашних животных (кошки и коты, собаки, хорьки, шиншиллы), было получено 65 кишечных изолятов.
В ходе культивирования кишечных изолятов микроорганизмов на питательных средах были получены чистые культура энтеробактерий, характеризующиеся определёнными биологическими свойствами. Среди резидентных энтеробактерий от сельскохозяйственных и домашних животных были выделены представители рода Escherichia coli 5,43х104±0,82, Serratia marcescens 3,55х105±0,13. Среди транзиторных энтеробактерий выделены Citrobacter freundii 2,37х104±0,53, Kluyvera cryocrescens 2,75х104±0,15, Providencia alcallifaciens 3,74х104±0,13, Proteus vulgaris 3,59х103±0,61, Morganella morganii 4,72х103±0,23, Hafnia alvei 4,78х104±0,47, Erwinia
amylovora 3,28х104±0,16, Enterobacter cloacae 4,54х104±0,26, Klebsiella oxytoca 3,47х104±0,68, Yersinia enterocolitica 1,36х103±0,12, Salmonella enteritidis 2,54х103±0,26.
У зоопарковых и диких животных были выделены Escherichia coli 4,77х104±0,38, Serratia marcescens 4,06х105±0,16. Среди энтерококков (Enterococcus spp. 5,35х108±0,73) было дифференцировано несколько видов: Среди транзиторных энтеробактерий выделены Citrobacter freundii 3,16х104±0,42, Kluyvera cryocres-cens 3,12х104±0,36, Providencia alcallifaciens 3,82х104±0,35, Proteus vulgaris 4,37х103±0,53, Morganella morganii 4,62х103±0,24, Hafnia alvei 4,19х104±0,67, Erwinia amylovora 3,66х104±0,64, Enterobacter cloacae 5,12х104±0,32, Klebsiella oxytoca 2,84х104±0,37, Yersinia enterocolitica 1,28х103±0,32, Salmonella enteritidis 2,83х103±0,33.
Выводы. Модифицированный вариант коммерческой дифференциально-диагностической среды лактозного агара Дригальского позволяет уменьшить время, необходимое для выделения и дифференциации кишечных изолятов энтеробактерий, выделенных от различных видов животных. В результате сокращается время, необходимое для идентификации энтеробакте-рий в ходе диагностики кишечных инфекций или при проведении санитарно-бактериологического исследования различных объектов окружающей среды.
Список литературы
1. Ермаков, В.В. Микрофлора кошек и собак в условиях Самарской области. / В.В. Ермаков // Актуальные задачи ветеринарии, медицины и биотехнологии в современных условиях и способы их решения. Материалы Региональной научно-практической межвузовской конференции. ГНУ Самарская научно-исследовательская ветеринарная станция РАСХН. Самара, 2013. - С. 103-112.
2. Ермаков, В.В. Резидентная и транзиторная микрофлора бродячих кошек и собак в условиях Самарской области. / В.В. Ермаков // Известия Самарской ГСХА. - 2013. - №1. - С. 15-19.
3. Ермаков, В.В.. Медведева А.Р., Черкасова А.П. Микрофлора бродячих кошек и собак в условиях Самарской области /
В.В. Ермаков, А.Р. Медведева, А.П. Черкасова // Достижения науки агропромышленному комплексу. Сборник научных трудов. Самара, 2014. - С. 210-213.
4. Ермаков, В.В. Микроорганизмы, осложняющие течение панлейкопении у кошек в условиях Самарской области. / В.В. Ермаков // Известия Самарской ГСХА. - 2015. - № 1. - С. 50-56.
5. Ермаков, В.В. Биологические свойства представителей микробиоценоза домашних кошек и собак в г. Самара. / В.В. Ермаков // Актуальные проблемы аграрной науки и пути их решения. Сборник научных трудов. Кинель, 2016. - С. 194-198.
6. Ермаков, В. В. Одноразовый стерильный микробиологический г-образный шпатель / патент на полезную модель RUS 163 081 11.01.2016
УДК 636.22/.28:579.6:579.26
ДЕЙСТВИЕ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ И ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В УСЛОВИЯХ САМАРСКОЙ ОБЛАСТИ EFFECT OF OPPORTUNISTIC AND PATHOGENIC MICROORGANISMS IN CATTLE IN THE CONDITIONS OF THE SAMARA REGION
Ермаков Владимир Викторович, канд. биол. наук,
Курлыкова Юлия Александровна, канд. биол. наук
ФГБОУ ВО Самарская ГСХА, Российская Федерация, г. Самара
Ermakov Vladimir Victorovich, Cand. Biol. Sci.
Kurlykova Julia Alexandrovna, Cand. Biol. Sci.
Samara State Agricultural Academy, Samara, Russian Federation
Аннотация: видовой состав микробиоценоза желудочно-кишечного тракта породистых и помесных Fi коров состоял из резидентных Enterococcus faecalis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus delbrueckii, Escherichia coli, Serratia marcescensи тран-зиторных Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae, Yersinia ente-rocolitica, Salmonella enteritidis микроорганизмов. Все выделенные нами культуры микроорганизмов обладали специфическими
