CC BY
82
Al
SSM
УДК 616.314.17.001.5-002-08
МОДЕЛИРОВАНИЕ И ЛЕЧЕНИЕ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Е.Н. Жулев, А.В. Кочубейник, Н.Б. Мельникова, Р.Д. Лапшин,
ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия»
Кочубейник Алена Валерьевна - e-mail: kochubeynik@mail.ru
В настоящее время сохраняется тенденция роста воспалительных заболеваний пародонта среди населения. Это в свою очередь является основанием для проведения многочисленных исследований, направленных на разработку и внедрение новых методов диагностики и лечения данного заболевания. Однако исследования, проводимые in vitro, зачастую не способны полностью отразить физиологические процессы, которые происходят при пародонтите. В связи с этим возникает вполне логичная потребность использования в эксперименте лабораторных животных, что позволяет нам получить более достоверные результаты исследований. В данной статье проведен анализ использования различных животных в качестве экспериментальной модели воспалительных заболеваний пародонта. Учитывались сходные и различные с человеческими реакции при пародонтите, особенности строения зубочелюстной системы вида. В итоге нами были оценены перспективы использования отдельных животных для оценки эффективности терапии воспалительных заболеваний пародонта. А также проведена сравнительная оценка методов лечения пародонтита с использованием новых фармацевтических композиций на основе фитата глюкозамина.
Ключевые слова: пародонтит, животные, воспалительные заболевания.
Currently, the trend of growth of inflammatory periodontal diseases among the population. This in turn is the basis for numerous studies aimed at the development and introduction of new methods of diagnosis and treatment of this disease. This is the reason for plenty of different researches, made to find out and to use the new methods in diagnostics and treatment of this disease. But the researches made in vitro usually are not able to completely imitate the physiological processes, when the periodontal diseases take place. That is why we often need to use animals in laboratory experiments to get more reliable results of the research. In this article we have analysis of using different animals as some experimental models of the periodontal inflammatory diseases. We noticed some similarities and differences with human reactions to periodontitis, features of the anatomy of each kind of animals. So we tried to show the perspectives in using some different animals for reviewing the effectiveness of the periodontal inflammatory diseases treatment. As well as a comparative assessment of treatment of periodontitis using new pharmaceutical compositions based on glucosamine phytate.
Key words: periodontal inflammation, animals, periodontal inflammatory diseases.
Модели на животных и клеточных культурах способствуют появлению новых знаний в области биологических наук, в том числе пародонтологии [1, 2, 3]. Хотя культивируемые клетки могут быть использованы для изучения физиологических процессов, которые происходят во время пародонтита, однако не все процессы можно точно воспроизвести in vitro. Среди представителей животного мира грызуны, кролики, свиньи, собаки и приматы используются для моделирования пародонтита, каждый имеет свои преимущества и недостатки [4, 5, 6]. В то время как животные модели обеспечили широкий спектр важных данных, трудно определить, применимы ли выводы к людям. Кроме того, развитие заболевания пародонта у человека зависит от индивидуальных особенностей восприимчивости и устойчивости к микроорганизмам [7, 8, 9, 10, 11]. Удобной и высоко воспроизводимой модели, которая действительно имитирует естественный патогенез забо-
леваний пародонта человека, до сих пор не разработано. Модели на животных используются для оценки этиологических факторов, механизмов патогенеза заболеваний пародонта и периодонта, а также при разработке различных методов лечения [12, 13, 14, 15].
Кролики часто используются для экспериментального моделирования воспалительных заболевания тканей пародонта, оценки репаративных свойств костной ткани [16]. Эта модель может быть эффективно использована для тестирования различных материалов костной пластики [17].
Характеристика микроорганизмов полости рта кроликов показала многочисленные патогенные бактерии, в том числе F. nucleatum, P. heparinolytica, Prevotella spp. , P. micros, S. milleri group, А. israelii, А. haemolyticum, которые так или иначе связанны с заболеваниями пародонта у человека [16]. Кролики используются для проведения индуцированного воспаления пародонта путем создания хирургического дефекта и изучения его регенерации. Однако было выявлено, что данная
NK
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
модель недостаточно адекватна для оценки регенерации периодонтальной связки [17].
Индуцированный пародонтит воспроизводят путем размещения лигатуры либо стоматологического цемента вокруг шейки зубов, что позволяет сохранять и увеличивать микробную биопленку, нарушать целостность эпителия десны, повышать остеокластогенез и убыль костной ткани [18, 19]. Кроме того, потеря костной ткани альвеолярного отростка может быть вызвана введением бактерий ротовой полости человека (например Porphyromonas gingivalis) и некоторых химических веществ (спирт в концентрации 65-75%, кортикостероидные препараты) в различных моделях на животных.
Таким образом, очевидно, что усилия, направленные на поиск новых моделей животных, которые лучше представляют воспаление тканей пародонта человека, были бы выгодны для исследователей этой области.
Для проведения исследований были использованы беспородные кролики в количестве 12 особей. Животные были разделены на две группы.
I группа - интактные животные (n=3);
II группа - моделирование пародонтита (n=9).
Исследование проводилось на базе ЦНИЛ ГБОУ ВПО
НижГМА Минздрава России. Основные правила содержания и ухода соответствовали нормативам, данным в руководстве «Guide for care and use of laboratory animals (ILAR publication, 1996, National Academy Press)», Национальном стандарте РФ ГОСТ Р-53434-2009 «Принципы надлежащей лабораторной практики» и согласованы с этическим комитетом при ГБОУ
рис. 1.
Слизистая оболочка в области нижних резцов до эксперимента.
ВПО НижГМА Минздрава России. Индивидуальная масса животных не отличалась более чем на 10% от средней массы животных одного пола. Каждому животному был присвоен индивидуальный номер, в соответствии с которым животному ставилась метка окраской красителями (эозин и метиленовый синий) по разработанным схемам. На этикетке клетки определенного цвета указывали группу, номер животного, метку, код исследования, руководителя.
Хронический генерализованный пародонтит моделировали на кроликах путем введения раствора гидрокортизона в область центральных резцов нижней челюсти.
Всем животным проводилось измерение температуры слизистой оболочки верхней и нижней челюсти в области центральных резцов. Для измерения температуры на нижней и верхней челюстях использовался пирометр (ИК термометр) CEM®ThermoDiagnostics.
После завершения введения гидрокортизона отмечалось наличие гиперемии десневого края резцов нижней челюсти, появление патологической подвижности зубов (рис. 1, 2). А также о наличии воспаления свидетельствовало изменение температуры слизистой оболочки, которая в среднем составила +3,2°С (таблица 1, рис. 3).
таблица 1.
Изменение температуры слизистой оболочки нижней челюсти в области резцов
День интактные Контрольная группа Группа стандартного лечения Группа экспериментального лечения
1-й день 33,7±0,4 33,7±0,4 33,7±0,4 33,7±0,4
13-й день 33,1±0,2 36,3±0,5 36,3±0,3 36,0±0,5
18-й день 33,5±0,3 35,5±0,1 35,б±0,1 33,5±0,4
таблица 2.
Изменение биохимических показателей сыворотки крови при моделировании пародонтита (М±ш)
рис. 2.
Слизистая оболочка в области нижних резцов на 13-й день эксперимента.
Показатели серии 13 дней эксперимента (до лечения) 18 дней эксперимента (5й день лечения)
Кальций, ммоль/л Интактные Контрольная Станд.лечение Эксперимент. лечение 1,59±0,14 2,01±0,29 2,09±0,24 1,88±0,10 1,93±0,61 3,34±0,60* 3,25±0,71* 2,73±0,36*
Фосфор, ммоль/л Интактные Контрольная Станд.лечение Эксперимент. лечение 2,44±0,15 3,88±0,59* 3,75±0,28* 2,52±0,21* 1,93±0,19 2,59±0,29* 2,59±0,29* 2,16±0,06**
Примечание: * - достоверные различия с интактными данными, ** - достоверные различия с контрольной группой, р<0,05.
▲1
5щ
Длительное введение гидрокортизона ацетата вызывало изменение некоторых биохимических показателей плазмы крови животных, так уровень кальция и фосфора достоверно увеличивался по сравнению с интактными животными (таблица 2).
Таким образом, была получена модель воспалительного заболевания пародонта у кроликов для дальнейшего проведения сравнительного анализа схем лечения.
Животные с пародонтитом были разделены на три группы: контрольную, стандартную и экспериментальную. В контрольной группе лечение не проводилось. В стандартной группе лечение проводилось суспензией азитромицина перорально в течение 5 дней и гелем метронидазола (Метрогил дента) местно в течение 13 дней. В экспериментальной группе лечение проводилось суспензией азитромицина перорально в течение пяти дней, суспензией кальция аскорбата перорально, парантерально разработанным раствором препарата фитата глюкозамина и местно стоматологической пленкой в течение 13 дней. Состав пленки включает: желатин, мочевина, глицерин, фитиновая кислота (50% раствор), глюкозамина гидрохлорид, трисамин (трометамол), натрия аскорбат, метилпарабен, вода. Представленные препараты являются фармацевтическими композициями, способными регулировать метаболические процессы, в том числе кальций-фосфорный и ионный баланс в костной и соединительной тканях за счет ингибирова-ния резорбции костной ткани, повысить биодоступность за счет использования соединения фосфора в виде фита-та глюкозамина.
Лечение с применением препарата фитата глюкозамина корригировало вызванные глюкокортикоидом изменения в костной системе кроликов (рис. 4, 5). В плазме крови уменьшалось количество фосфора и кальция по сравнению с контрольной группой и группой традиционного лечения (таблица 2).
Таким образом, применение препарата фитата глюкозамина корригировало вызванные длительным введением гидрокортизона ацетата изменения в костной системе кроликов. В сыворотке крови уменьшалось количество фосфора и кальция крови по сравнению с контрольной группой и группой традиционного лечения, что свидетельствует о стимулировании процессов регенерации костной ткани [20, 21].
Однако до сегодняшнего дня нет однозначного ответа на вопрос о правомерности полной экстраполяции результатов экспериментальных данных, полученных у лабораторных животных, на человека [22]. В экспериментах достаточно часто используются линейные животные, которые могут иметь нестандартные реакции на введение того или иного препарата. А также линейные животные больше подвержены инфицированию. Необходимо учитывать видовую чувствительность к фармакологическим препаратам. По данным Г.Н. Красовского с соавт. кролики имеют низкий коэффициент различия чувствительности к лекарственным препаратам, что позволит использовать результаты эксперимента для дальнейшего практического применения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Армитаж Д.С. Классификация заболеваний пародонта - вечная дилемма. Пародонтология. 2005. Вып. 4. С. 13-28.
Armitazh D.S. Klassifikacija zabolevanij parodonta - vechnaja dilemma. Parodontologija. 2005. Vip. 4. S. 13-28.
2. Грудянов А.И., Фролова О.А. Основные направления научных исследований и новые клинические методики в области пародонтологии в нашей стране и за рубежом. Маэстро стоматологии. 2008. № 4 (32). С. 56-60.
Grudjanov A.I., Frolova O.A Osnovnye napravlenija nauchnyh issledovanij i novye klinicheskie metodiki v oblasti parodontologii v nashej strane i za rubezhom. Majestro stomatologii. 2008. № 4 (32). S. 56-60.
3. Helieh S. Oz, David A. Puleo. Animal models for periodontal disease. Journal of Biomedicine and Biotechnology. http://dx.doi.org/10.1155/2011/754857
4. Adams R.A., Zander H.A., Polson A.M. Interproximal and buccal cell populations apical to the sulcus before and during experimental periodontitis in squirrel monkeys. J Periodontol.1981. Aug. Vol. 52 (8). Р. 416-419.
5. Dannan A., Alkattan F. Animal models in periodontal research: a mini-review of literature. The Internet Journal of Veterinary Medicine. Vol. 5. № 1.
6. Schou S., Holmstrup P., Kornman K.S. Non-human primates used in studies of periodontal disease pathogenesis: a review of the literature. J Periodontol. 1993. Jun. Vol. 64 (6). Р. 497-508.
7. Горбатова А.С. Роль и место феномена повреждения в патогенезе заболеваний пародонта. Пародонтология. 2003. № 4. С. 19-20.
Gorbatova, A.S. Rol' i mesto fenomena povrezhdenija v patogeneze zabolevanij parodonta. Parodontologija. 2003. № 4. S. 19-20.
8. Грудянов, А.И. Заболевания пародонта. М.: Издательство «Медицинское информационное агентство», 2009. 336 с.
Grudjanov A.I. Zabolevanija parodonta. M.: «Medicinskoe informacionnoe agentstvo», 2009. 336 s.
NK
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
9. Грудянов А.И., Овчинникова В.В. Профилактика воспалительных заболеваний пародонта. М.: Мединформагенство МИА, 2007. 79 с.
Grudjanov A.I., Ovchinnikova V.V. Profilaktika vospalitel'nyh zabolevanij parodonta. M.: Medinformagenstvo MIA, 2007. 79 s.
10. Каргальцева Н.М. и др. Микроскопическое исследование десневых карманов. Институт стоматологии. 2001 № 2 (11). С. 61-62.
Kargal'ceva N.M. i dr. Mikroskopicheskoe issledovanie desnevyh karmanov. Institut stomatologii. 2001. № 2 (11). S. 61-62.
11. Саркисян В.М. и др. Морфологические особенности десен разных биотипов. Пародонтология. 2012. № 1 (62). С. 26-29.
Sarkisjan V.M. i dr. Morfologicheskie osobennosti desen raznyh biotipov. Parodontologija. 2012. № 1 (62). S. 26-29.
12. Мюллер Х.-П. Пародонтология. Львов: ГалДент, 2004. 256 с.
Mjuller H.-P. Parodontologija. L'vov: GalDent, 2004. 256s.
13. Жулев Е.Н. Клиника, диагностика и ортопедическое лечение заболеваний пародонта. Н. Новгород: Изд. НГМА, 2003. 223 с.
Zhulev E.N. Klinika, diagnostika i ortopedicheskoe lechenie zabolevanij parodonta. N. Novgorod: Izd. NGMA, 2003. 223 s.
14. Жулев Е.Н. Клиника, диагностика и ортопедическое лечение заболеваний пародонта. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2005. 320 с.
Zhulev E.N. Klinika, diagnostika i ortopedicheskoe lechenie zabolevanij parodonta. N.Novgorod: Izd-vo NGMA, 2005. 320 s.
15. Жулев Е.Н., Щепетнова Е.Е., Саакян М.Ю. и др. Особенности ортопедического лечения хронического генерализованного пародонтита. Маэстро стоматологии. 2012. № 46. С. 48-51.
Zhulev E.N., Shhepetnova E.E., M.Ju. Saakjan i dr. Osobennosti ortopedicheskogo lechenija hronicheskogo generalizovannogo parodontita. Majestro stomatologii. 2012. № 46. S. 48-51.
16. Tyrrell K.L., Citron D.M., Jenkins J.R. Periodontal bacteria In rabbit mandibular and maxillary abscesses. Journal of Clinical Microbiology. 2002. Vol. 40. Р. 1044-1047.
17. Oortgiesen D.A.W., Meijer G.J., Bronckers A.L. et al. Fenestration defects in the rabbit jaw: an inadequate model for studying periodontal regeneration. Tissue Engineering C. 2010. Vol. 16. Р. 133-140.
18. Щербакова Д.С. и др. Действие антисептиков на бактериальные биопленки у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта. Пародонтология. 2012. № 4 (61). С. 65-69.
Shherbakova D.S. i dr. Dejstvie antiseptikov na bakterial'nye bioplenki u pacientov s vospalitel'nymi zabolevanijami parodonta. Parodontologija. 2012. № 4 (61). S. 65-69.
19. Зорина О.А., Кулаков А.А., Грудянов А.И. Микробиоценоз полости рта в норме и при воспалительных заболеваниях пародонта. Стоматология. 2011. № 1. С. 73-78.
Zorina O.A., KulakovA.A., GrudjanovA.I. Mikrobiocenozpolostirta v norme ipri vospalitel'nyh zabolevanijah parodonta. Stomatologija. 2011. № 1. S. 73-78.
20. Соболев Л.А. и др. Клинико-лабороторные походы к оптимизации лечения пародонтитов. Стоматология. 2010. № 6. С. 28-30.
Soboleva L.A. i dr. Kliniko-laborotornye pohody k optimizacii lechenija parodontitov. Stomatologija. 2010. № 6. S. 28-30.
21. Непомнящая Н.В. Повышение эффективности лечения хронического генерализованного пародонтита (клинико-биохимическое исследование): дис. ... канд. мед. наук.: 14.01.14 / Непомнящая Наталья Викторовна. Самара, 2009. 170 с.
Nepomnjashhaja N.V. Povyshenie jeffektivnosti lechenija hronicheskogo generalizovannogo parodontita (kliniko-biohimicheskoe issledovanie): dis. ... kand.med.nauk.: 14.01.14 / Nepomnjashhaja Natal'ja Viktorovna. Samara, 2009. 170 s.
22. Красовский Г.Н., Рахманин Ю.А., Егорова Н.А. Экстраполяция токсикологических данных с животных на человека. М.: ОАО «Издательство "Медицина"», 2009. 208 с.
Krasovskiy G.N., Rakhmanin Yu.A., Yegorova N.A. Ekstrapolyatsiya toksikologicheskikh dannykh s zhivotnykh na cheloveka. M.: OAO «Izdatelstvo "Medtsina"», 2009. 208 s.
УДК 616.716.8-007-053.1-08
НОВЫЙ СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ВРОЖДЕННЫХ И ПРИОБРЕТЕННЫХ АНОМАЛИЙ ЧЕЛЮСТЕЙ
СЮ. Иванов, А.А. Мураев, Н.Л. Короткова, Е.В. Сидорова, М.ф. До,
ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия»
Сидорова Елена Викторовна - e-mail: nn.elenasidorova@gmail.com
Аномалии развития челюстей - часто встречающаяся патология, связанная с диспропорциями развития верхней и нижней челюсти. Для оптимизации хирургического этапа лечения предложен новый способ оперативного лечения, исключающий применение прикусного шаблона для позиционирования челюстей. Способ предполагает маркировку скелетных точек-ориентиров: точки №, точки А и В, костных меток в области вторых моляров верхней челюсти. В процессе операции указанные точки используются для позиционирования двучелюстного комплекса в трех плоскостях. Разработанный способ уменьшает время проведения операции, обеспечивает правильное позиционирование фрагментов верхней и нижней челюсти, помогает избежать послеоперационной деформации концевого отдела носа и верхней губы.
Ключевые слова: ортогнатическая операция, хирургическое лечение, аномалии развития челюстей, макрогнатия, микрогнатия.
