CC BY
157
УДК616-001.17-092.9
МОДЕЛИРОВАНИЕ ГЛУБОКОГО ОЖОГА У КРЫСЯТ А. В. Глуткин, В. И. Ковальчук, О. Б. Островская
УО «Гродненский государственный медицинский университет»
Специально разработанным устройством создавали термический ожог кожи горячей жидкостью (вода) 99-100 °С экспозицией 10 сек. Предложенная методика может быть использована для осуществления моделирования термического ожога на крысятах и разработки различных путей коррекции данного патологического состояния.
Ключевые слова: моделирование, термический ожог, крысята.
Введение
Ожоговая травма в современных условиях остаётся актуальной и важной проблемой в структуре детского травматизма. Удельный вес детей среди всех пациентов с термическими травмами варьирует от 13,8 до 75,3%, а летальность достигает 2,4-10% [2]. Данная ситуация в значительной степени объясняется сложностью и многообразием её патогенетических механизмов в детском возрасте, лежащих в основе развития, течения и исхода тяжёлых ожогов, что обуславливает поиск и разработку новых методов диагностики и лечения данной патологии, используя различные варианты её моделирования на лабораторных животных.
Известны различные методики воспроизведения термических ожогов с использованием разнообразных устройств для моделирования ожоговой поверхности у лабораторных животных. Так, используются различные этиологические факторы: нагревательный элемент, состоящий из рукоятки и медного наконечника круглой формы диаметром 2 см и толщиной 1 см [6], с помощью монетки, разогретой над пламенем спиртовки [3], металлической пластиной, нагретой до 100 °С [5], воздействие медной гребёнки, подогретой в воде при 100 °С в течение 5 минут с последующим воздействием на кожу животного 3 минуты [9] и др. Однако известные модели не учитывают анатомо-физиологические особенности детей младшего возраста и этиологию получения термического ожога, поэтому предлагаемые модели нельзя использовать для моделирования термического ожога у крысят. В связи с этим целью нашего исследования является разработка методики моделирования глубокого термического ожога у крысят.
Материалы и методы
Экспериментальное моделирование осуществлялось на беспородных белых крысятах в возрасте 30 суток, со средней массой 55-65 г, п = 7. Все животные содержались в одинаковых условиях вивария, на стандартном пищевом режиме. Все этапы исследования проводились с разрешения комиссии по биомедицинской этике УО «Гродненский государственный медицинский университет» (протокол N° 1 от 11.01.2011).
В операционных условиях лабораторное животное фиксировалось на операционном столе. Тиопентал натрия (50 мг/кг) вводили внутрибрюшинно, затем производили удаление шерсти (выстригание с последующим выбриванием) со спины крысы.
Специально разработанным устройством [7] в течение 10 сек. моделировали глубокий термический ожог кожи горячей жидкостью (вода) 99-100 °С. Ее площадь составляет около 8-9% от всей поверхности тела. Для расчета её значений у крысы использовали формулу, предложенную МееИ [8]: 8 = к □ где 8 - поверхность тела, см2; W - масса тела животного, кг; к - константа Миха (9,46). Материалом для морфологических исследований
были полоски ткани размером 1,5 □ 0,5 см, включающие центральную часть ожоговой раны и её край с прилежащей кожей, на 3 сутки от момента получения ожога, с одновременным выведением крысят из эксперимента (7 особей). Макропрепарат фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине, проводили обезвоживание, парафиновую заливку. Гистологические срезы толщиной 6-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином [1]. Полученные гистологические препараты изучали и фотографировали с помощью микроскопа Leica DM 1000, камерой Panasonic WV-CP 410/6, увеличение камеры в 40 раз.
Результаты исследования
В результате моделирования получались стандартные по площади (около 12 см2) ожоговые раны у экспериментального животного. После нанесения травмы крепили предохранительную камеру [4], которая обеспечивала защиту ожоговой ране от воздействия внешних факторов (рисунок 1).
V
Рисунок 1 - Предохранительная камера, фиксируемая на экспериментальном животном
Результаты морфологического исследования показали, что через 3 суток после ожога на коже спины у крысят наблюдается рана прямоугольной формы размером около 2,7 □ 4,0 см с неровными краями. Её поверхность покрыта струпом с выступающими волосяными стержнями, иногда преимущественно в её центре имеются участки размягчения и отслоения струпа со скоплением под ними серозно-гнойного экссудата, у одного животного часть поверхности раны (до 1/4 площади) была лишена струпа.
Изучение гистологических препаратов показывает, что на большинстве участков раневой поверхности наблюдается коагуляционный некроз всех слоев кожи, а также волокон подкожной мышцы, проксимальнее которой располагается зона отека и воспалительной инфильтрации. Вместе с этим, непосредственно у края раны некроз захватывает только эпидермис и сетчатый слой дермы, а в центральных областях раневой поверхности некроти-зированы все ткани до уровня поверхностных слоев подлежащих мышц включительно.
Цитоплазма клеток базального и шиповатого слоёв эпидермиса оксифильна, ядра пикнотичны, также как и в клетках волосяных фолликулов. В матриксе анагенных
Оригинальные исследован и
я
фолликулов отсутствуют митотические фигуры. Ядра клеток сальных желез гиперхромны или резко отечны, цитоплазма оксифильна, вакуолизирована. Коллагеновые пучки дермы набухшие, окрашены резко оксифильно, между ними лежат пикнотичные ядра фибробластов (рисунок 2.). В сосудах подкожной жировой клетчатки наблюдаются стаз эритроцитов или тромбозы, нередко кровоизлияния в подкожную жировую прослойку. Мышечные волокна подкожной мышцы лишены ядер (или ядра-тени), почти во всех их длине наблюдаются контрактур-ные изменения миофибрилл или очаги глыбчатого распада цитоплазмы. Наблюдается отек, а также круглокле-точная и нейтрофильная инфильтрация рыхлой соединительной ткани, лежащей под подкожной мышцей. Зона реактивного воспаления (лейкоцитарный вал) на большей части раневой поверхности располагается в поверхностных слоях подлежащих мышц, в центральных участках раны демаркационная зона проходит между поверхностными и глубокими слоями подлежащих мышц (рисунок 3). В данной зоне наблюдается обильная круглок-леточная инфильтрация (макрофаги, лимфоциты), нередко встречаются нейтрофильные лейкоциты. Между клетками инфильтрата располагаются фрагменты мышечных волокон с отечными ядрами и гомогенной цитоплазмой. Мышечные волокна, лежащие глубже зоны воспалительной инфильтрации, имеют обычную структуру.
Из рисунка 4 видно, что под струпом на границе с нормальной по строению тканью наблюдаются эпидер-мальные разрастания, источником которых служат сохранившиеся проксимальные отделы волосяных фолликулов и сальные железы.
Рисунок 3 - Зона воспалительной инфильтрации, 3 сутки после ожога. Окраска гематоксилином и эозином. Об. □ 10
Рисунок 2 - Коагуляционный некроз всех слоев кожи, 3 сутки после ожога.
Окраска гематоксилином и эозином. Об. □ 10
Выводы
Таким образом, в результате воздействия горячей жидкости (вода) температурой 99-100 °С в течение 10 сек. с помощью специально разработанного устройства у крысят возникает глубокий ожог кожи спины заданной величины около 12 см2, что составляет около 8-9% от общей площади животного. На 3 сутки от момента развития ожога отмечаются образования струпа с участками размягчения, а также и его отслоение со скоплением под ними серозно-гнойного экссудата. Морфологический анализ показывает, что наблюдается коагуляционный некроз всех слоев кожи, но у края раны некроз захватывает только эпидермис и сетчатый слой дермы, а в центре раневой поверхности некротизированы все ткани до уровня поверхностных слоев подлежащих мышц
Рисунок 4 - Край ожоговой раны, через 3 суток после ожога.
Окраска гематоксилином и эозином. Об. □ 4
Таким образом, предложенная методика может быть использована для осуществления моделирования глубокого термического ожога на крысятах и разработки различных путей коррекции данного патологического состояния.
Список использованной литературы
1. Волкова, О.В.Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий. - 2-е изд. - М.: Медицина, 1982. - 304 с.
2. Летальность при термических поражениях у детей: состояние, причины и пути её снижения / Л.И. Будкевич [и др.] // Рос. вест. перенатол. и педиатр. - 2004. - Том 49, № 4. - С. 51-54.
3. Маханьков, О. Динамика морфологических изменений ожоговой раны кожи после аппликации с экстрактом эмбриональной ткани печени и воздействие низкоинтенсивного лазерного излучения (экспериментальное исследование) / О. Маханьков, В. Су-меркина // Вестник ОГУ - 2006. - № 12. - С. 143-145.
4. Предохранительная камера для экспериментального исследования ожоговой раны у лабораторного животного: пат. 7926 Респ. Беларусь, А.В. Глуткин, Т.В. Кова льчук, В.И. Ков альчук ; заявитель Гродн. гос. мед. ун-т - № и 20110577 ; заявл. 15.07.11 ; опубл. 28.02.12. // Афщыйны бюл. / Нац. цэнтр штэлектуал. улас-насщ. - 2012. - № 1. - С. 256-257.
5. Сравн ительное изучение п роцесса за живления ожоговой раны, показателей иммун итета и па томорфологии лимфоидных органов у крыс с ожоговой болезнью при трансплантации культи вированн ых а ллофибробла стов / Ш.Х. Мам адалиев [и д р.] // Вес. экстренной мед. - 2009. - № 2. - С. 61-65.
6. Устройство для моделирования ожоговой поверхности у лаб ораторных жив отных: пат. 66 98 Респ. Бела русь, В.Д . Мела-мед, П.С. Бурыкин, А.В. Киркицкий ; заявитель Гродн. гос. мед.
Оригинальные исследования
ун-т - № и 20100277 ; заявл. 19.03.10 ; опубл. 30.10.10. // Аф> цыйны бюл. / Нац. цэнтр штэлектуал. уласнасщ. - 2010. - № 5. -С. 242.
7. Устройство для модели рования ожогов ой ран ы у лаб ора-торного животного: пат. 7927 Респ. Беларусь, А.В. Глуткин, Т.В. Ковальчук, В.И. Ковальчук ; заявитель Гродн. гос. мед. ун-т - № и 20110576 ; заявл. 15.07.11 ; опубл. 28.02.12. // Афщыйны бюл. /
Нац. цэнтр штэлектуал. уласнасщ. - 2012. - № 1. - С. 256.
8. Gilpin, D.A. Calculation of a new Meeh constant and experimental determination of burn size / D.A. Gilpin // Burns. -1996. - Vol. 22, № 8. - P. 607-611.
9. T he Hemeostatic Efficacy of ANKAFERD after Excision of Full Thickness Burns: A Comparative Experimental Study in Rats / Y. Coban [et al.] // Surgical Science. - 2011. - № 2. - P. 16-21.
Modeling of deep burn in infant rats A.V. Hlutkin, V.I. Kovalchuk, O.B. Ostrovskaya EE «Grodno State Medical University»
Using a specially developed device a thermal skin burn was created by the 10-second exposure to hot liquid (water, t 99-100 °C). The offered technique can be used for modeling thermal burn in infant rats for the development of various ways of correction of this pathological condition. Key words: modeling, thermal burn, infant rats.
Поступила 30.05.2012
ПЛАН
проведения конференций в 2012 году (III - IV квартал) в УО «Гродненский государственный медицинский университет»
№ п/п Наименование темы, вид мероприятия (выставка, конгресс, симпозиум, конференция, совещание, семинар) Организатор (тел., факс, e-mail) Место и срок проведения
1 Областная конференция «Разработка и внедрение импортозамещающих технологий хирургического лечения генитального пролапса и недержания мочи у женщин». Кафедра хирургических болезней № 2 с курсом урологии, Нечипоренко Н.А. тел. (0152) 43 14 91; факс: (0152) 43 53 41 e-mail:nechiporenko nik@mail.ru УО «ГрГМУ», сентябрь 2012 г.
2 Межвузовская конференция офтальмологов, посвященная 50-летию кафедры. Кафедра офтальмологии тел. (0152) 43 04 37; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: ophthalmology@grsmu.by УО «ГрГМУ», сентябрь 2012 г.
3 Республиканская научно-практическая конференция «Современные проблемы реабилитации и спортивной медицины», посвященная 50-летию кафедры медицинской реабилитации и немедикаментозной терапии. Кафедра медреабилитации и немедикаментозной терапии тел. (0152) 74 54 88; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: pirogovalar@rambler.ru УО «ГрГМУ», октябрь 2012 г.
4 Республиканская научно-практическая конференция с международным участием «Актуальные проблемы хирургии». Кафедра хирургических болезней № 1 тел. (0152) 43 56 97 факс: (0152) 43 53 41 e-mail: hir@grsmu.by УО «ГрГМУ», октябрь 2012 г.
5 Научно-методическая конференция «Пути усовершенствования учебного процесса. Самостоятельная работа студентов как форма личностно-ориентированного обучения и способ повы-шения творческой активности студентов» (вузовская). Учебно-методический отдел тел. (0152) 43 54 09; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: umo@grsmu.by УО «ГрГМУ», октябрь 2012 г.
6 Республиканская конференция «Актуальные вопросы медикаментозной терапии внутренних заболеваний» Кафедра госпитальной терапии Тел. (0152) 95 13 62; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: pyrochkin@grsmu.by УО «ГрГМУ», октябрь 2012г.
7 Конференция «Актуальные вопросы инфекционной и смежной патологии», посвященная 50-летию кафедры инфекционных болезней с курсом детских инфекций. Кафедра инфекционных болезней с курсом детских инфекций, Цыркунов В.М. тел. (0152) 43 42 86; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: tvm111@mail.ru УО «ГрГМУ», 19 октября 2012 г.
8 XXII Республиканская научная конференция по истории медицины и фармации. Белорусское научное общество историков медицины и фармации, УО «ГрГМУ» тел. (0152) 43 54 59; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: medsestrgrodno@grsmu.by УО «ГрГМУ», октябрь 2012
9 VIII съезд специалистов клинической лабораторной диагностики Республики Беларусь Управление здравоохранения Гродненского облисполкома УО «ГрГМУ» ноябрь 2012
10 Международный семинар «Инновационные технологии в проблемах аудиологии». Кафедра оториноларингологии, стоматологии тел. (0152) 43 53 38; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: khorov@mail.ru УО «ГрГМУ», 18-20 ноября 2012 г.
11 XII Республиканская студенческая научно-практическая конференция «Язык. Общество. Медицина». Кафедра русского и белоругекого языков тел. (0152) 41 40 97 факс: (0152) 43 53 41 e-mail: rusbel@grsmu.by УО «ГрГМУ», ноябрь 2012 г.
12 Межвузовский научно-практический семинар преподавателей «Формирование межкультурной компетенции в сфере научного общения». Кафедра русского и белорусского языков тел. (0152) 41 40 97; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: rusbel@grsmu.by УО «ГрГМУ», ноябрь 2012 г.
13 Научно-практический семинар для преподавателей «Инновационные технологии в преподавании русского и белорусского языков». Кафедра русского и белоругекого языков тел. (0152) 41 40 97; факс: (0152) 43 53 41 e-mail: rusbel@grsmu.by УО «ГрГМУ», ноябрь 2012 г.
14 Ежегодная итоговая научная конференция УО «Гродненский государственный медицинский университет» ЦНИЛ. тел. 8 (0152) 75 46 77; факс: (0152) 43 53 41 е-mail: finnir@grsmu.by УО «ГрГМУ», декабрь 2012 г.
