CC BY
14© Коллектив авторов, 2022 https://doi.org/10.29296/24999490-2022-01-04
МИТОХОНДРИИ - ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЕ МИШЕНИ ГЕРОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА У007
И.М. Кветной1, 2, Е.С. Миронова1, 2, Ю.С. Крылова2, А.А. Мыльникова2, Т.С. Зубарева2, Д.О. Леонтьева2, В.О. Полякова2, М.А. Петросян2
1ООО «Ива фарм», Российская Федерация, 190121, Санкт-Петербург, Псковская ул., 17; 2ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ, Российская Федерация, 191036, Санкт-Петербург, Лиговский пр-т, д. 2—4
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Кветной Игорь Моисеевич — руководитель Центра молекулярной биомедицины ФГБУ«Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ; научный консультант ООО «Ива фарм». Профессор, доктор медицинских наук. Тел.: +7(812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-7302-5581
Миронова Екатерина Сергеевна — старший научный сотрудник Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Ведущий специалист ООО «Ива фарм». Кандидат биологических наук. Тел.: +7 (999) 535-95-88. E-mail: katerina.mironova@gerontology.ru. ORCID: 0000-00018134-5104
Крылова Юлия Сергеевна — старший научный сотрудник Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Кандидат медицинских наук. Тел.: +7 (812) 77575-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0002-8698-7904
Мыльникова Анастасия Андреевна — лаборант исследователь Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Тел.: +7(812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-6955-1511
Зубарева Татьяна Станиславовна — старший научный сотрудник Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Кандидат биологических наук. Тел.: +7(812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-9518-2916.
Леонтьева Дарья Олеговна — лаборант-исследователь Центра молекулярной биомедицины ФГБУ«Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Тел.: +7(812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-6981-2531
Полякова Виктория Олеговна — ведущий научный сотрудник Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Профессор, доктор биологических наук. Тел.: +7(812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-8682-9909
Петросян Мария Анатольевна — старший научный сотрудник Центра молекулярной биомедицины ФГБУ «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии» Минздрава РФ. Кандидат биологических наук. Тел.: +7(921) 748-12-12. E-mail: mariya@labpharm.spb.ru. ORCID: 0000-0001-7347-6104
Введение. Окислительный стресс и митохондриальная дисфункция наблюдается фактически при любых заболеваниях, сопровождающихся преждевременным старением. Сигнальные молекулы, продуцируемые митохондриями, могут выступать специфическими мишенями для воздействия фармакологических агентов с целью регуляции процессов клеточного старения, что открывает новые возможности поиска и разработки лекарственных средств для эффективной фармакотерапии возраст-ассоциированных состояний.
Цель исследования. Изучить влияние препарата V007 на экспрессию биомаркеров митохондрий в клетках печени крыс в условиях in vivo для выяснения возможного механизма его геропротекторного действия.
Методы. Молекулярно-биологическими методами проведено изучение экспрессии ключевых митохондриальных белков: Tom70, Tom20, VDAC, DRP1, прохибитина, Parkin, PINK1 в клетках печени крыс молодого и старого возраста в норме и при применении инновационного препарата V007.
Результаты. Полученные данные свидетельствуют о том, что при применении препарата V007 отмечается статистически значимое увеличение экспрессии всех изученных митохондриальных белков в гепатоцитах старых крыс до уровня молодых животных: DRP1 в 1,3раза; Parkin в 1,2раза; PINK1 в 1,2раза; Prohibitin в 1,4раза; Tom 20 в 1,3раза; Tom 70 в 1,2раза; VDAC в 1,2раза. Такое изменение экспрессии митохондриальных белков обусловлено активацией их синтеза и усилением деятельности транспортных систем митохондрий.
Заключение. Препарат V007 обладает общерегуляторным и геропротекторным действием, являясь таргетным фармакологическим средством, регулирующим функции гепатоцитов при старении через нормализацию экспрессии ключевых митохон-дриальных белков.
Ключевые слова: митохондрии, митохондриальные белки, старение, препарат V007, геропротекторное действие
MITOCHONDRIA - INTRACELLULAR TARGETS OF GEROPROTECTIVE EFFECT OF V007 I.M. Kvetnoy1,2, E.S. Mironova1,2, Y.S. Krylova2, A.A. Mylnikova2, T.S.
Zubareva2, D.O. Leont'eva2, V.O. Polyakova2, M.A. Petrosyan2
1Iva Pharm LLC, Pskovskaya st., 17, St. Petersburg, 190121, Russian Federation;
2St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology of the Ministry of Health of the Russian Federation, Ligovsky prospect, 2—4, St. Petersburg, 191036, Russian Federation
INFORMATION ABOUT THE AUTHORS
Kvetnoy Igor Moiseevich — Head of the Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation; scientific consultant Iva Pharm LLC. Professor, Doctor of Medical Sciences. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-7302-5581
Mironova Ekaterina Sergeevna — Senior Researcher, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Leading Specialist Iva Pharm LLC. Ph.D. Tel.: +7 (999) 535-95-88. E-mail: katerina.mironova@gerontology.ru. ORCID: 0000-0001-8134-5104
Krylova Yulia Sergeevna — Senior Researcher, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Ph.D. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0002-8698-7904
Mylnikova Anastasia Andreevna — laboratory assistant researcher, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 00000001-6955-1511
Zubareva Tatiana Stanislavovna — Senior Researcher, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Ph.D. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-9518-2916
Leontyeva Daria Olegovna — Research assistant, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 00000001-6981-2531
Polyakova Victoria Olegovna — Leading Research Fellow, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. Professor, Doctor of Biological Sciences. Tel.: +7 (812) 775-75-50. E-mail: info@spbniif.ru. ORCID: 0000-0001-8682-9909
Petrosyan Mariya Anatolievna — Senior Researcher, Center of Molecular Biomedicine, St. Petersburg Research Institute of Phthisiopulmonology, Ministry of Health of the Russian Federation. PhD. Tel.: +7 (921) 748-12-12. E-mail: mariya@labpharm.spb.ru. ORCID: 0000-0001-7347-6104
Introduction. Oxidative stress and mitochondrial dysfunction are observed in virtually any disease associated with premature aging. Signaling molecules produced by mitochondria can act as specific targets for the action of pharmacological agents in order to regulate the processes of cellular aging, which opens up new possibilities for the search and development of drugs for effective pharmacotherapy of age-associated pathologies conditions.
The aim of the study. To study the effect of V007 on the expression of mitochondrial biomarkers in rat liver cells in vivo to elucidate the possible mechanism of its geroprotective action.
Methods. Molecular biological methods were used to study the expression of key mitochondrial proteins: Tom70, Tom20, VDAC, DRP1, prohibitin, Parkin, PINK1 in liver cells of young and old rats in normal conditions and with the use of the innovative drug V007.
Results. The data obtained indicate that when using the V007preparation, there is a statistically significant increase in the expression of all studied mitochondrial proteins in hepatocytes of old rats to the level of young animals: DRP1 by 1.3 times; Parkin 1.2 times; PINK11.2 times; Prohibitin 1.4 times; Tom 201.3 times; Tom 701.2 times; VDAC 1.2 times. This change in the expression of mitochondrial proteins is due to the activation of their synthesis and increased activity of the mitochondrial transport systems.
Conclusion. V007has a general regulatory andgeroprotective effect, being a targeted pharmacological agent that regulates the functions of hepatocytes during aging by normalizing the expression of key mitochondrial proteins.
Key words: mitochondria, mitochondrial proteins, aging, drug V007, geroprotective effect
ВВЕДЕНИЕ
Окислительный стресс и митохондриальная дисфункция наблюдается фактически при любых заболеваниях, сопровождающихся преждевременным старением. Главным источником свободных радикалов и индукторов апоптоза являются митохондрии, что определяет их ведущую роль в процессах клеточного старения. Основной функцией митохондрий является синтез молекул АТФ, воспроизводство которых значительно снижается с увеличением возраста [1-2].
Важная роль митохондрий в жизнедеятельности клеток, особенно при их патологии, обусловливает необходимость изучения их функциональной активности. Митохондрии являются активными клеточными органеллами, которые экспрессируют большое количество сигнальных молекул, выполняющих важную регуляторную роль в коммуникации клеток и организма в целом [3].
Сигнальные молекулы, продуцируемые митохондриями, могут выступать специфическими мишенями для воздействия фармакологических агентов с
целью регуляции процессов клеточного старения, что открывает новые возможности поиска и разработки лекарственных средств для эффективной фармакотерапии возраст-ассоциированных состояний.
Препарат V007 относится к лекарственным средствам фармакотерапевтической группы «Метаболи-ки», включает метаболиты: окисленный глутатион и инозин, характеризуемые широким спектром метаболических преобразований, сигнальная и метаболическая активность которых востребована в фармакотерапии нарушений стрессорного, гипоксического или иного характера.
Проведенные ранее исследования и анализ биологической активности препарата V007 позволяют предположить реализацию его регуляторного и лечебного действия через стабилизацию процессов функционирования митохондрий, которые могли нарушится в результате развития в организме стрес-сорного или патологического процесса различной этиологии и патогенеза.
Исходя из изложенного, сформирована панель митохондриальных биомаркеров с учетом их вклада в регуляцию деятельности митохондрий. Панель включала в себя:
1. Tom70 — ключевой белок функционирования митохондрий, отвечает за обеспечение потенциала внутренней мембраны митохондрий [4, 5].
2. Tom20 — ключевой белок функционирования митохондрий, также отвечает за обеспечение потенциала внутренней мембраны митохондрий [6].
3. VDAC — белок, обеспечивающий формирование ионных каналов во внешней мембране митохондрий, запуск апоптоза [7, 8].
4. DRP1 — белок, отвечающий за запуск митохонд-риального деления, участие в механизмах ми-тохондриально-зависимого апоптоза [9, 10].
5. Прохибитин (Prohibitin, PHB) — белок, обеспечивающий регуляцию дыхательной активности митохондрий, стабильность организации и копирования митохондриальной ДНК, защиту клеток от окислительного стресса [11].
6. Parkin protein (Parkin) — белок, отвечающий за аутофагию поврежденных митохондрий, подавление митохондриально-зависимого апоптоза [12, 13].
7. PTEN-индуцированная киназа 1 (PINK1) — белок, обеспечивающий защиту клеток от стресс-индуцированной митохондриальной дисфункции [14, 15].
Цель исследования — изучение влияния препарата V007 на экспрессию биомаркеров митохондрий в клетках печени крыс в условиях in vivo для выяснения возможного механизма его геропротекторного действия.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование проведено на 18 самцах крыс линии Вистар двух возрастных групп (молодые живот-
ные — 4 мес и старые животные — 1S мес). Из животных сформированы 3 экспериментальные группы по 6 крыс в каждой группе, сопоставимых по возрастным характеристикам: 1 группа (n=6) — молодые животные (контроль); 2 группа (n=6) — старые животные; 3 группа (n=6) — введение препарата V007 старым животным.
Животным 3-й группы проводилось ежедневное внутримышечное введение водного раствора препарата V007 в дозе 30 мг/кг 1 раз в сут в течение 7 дней. В качестве растворителя использовали физиологический раствор (Sol. NaCl 0,9%). Объем вводимого вещества составлял 0,2 мл на 250 г массы животного.
Животным 1-й и 2-й групп было проведено ежедневное внутримышечное введение физиологического раствора (Sol. NaCl 0,9%) по схеме введения исследуемого препарата.
На 8-й день животных выводили из опыта с помощью глубокого ингаляционного наркоза, вскрывали, извлекали фрагменты внутренних органов. Для моле-кулярно-микроскопического анализа были отобраны образцы печени, как органа, клетки которого богаты митохондриями.
Образцы ткани подвергали фиксации параллельно двумя способами: один образец подвергали кри-оконсервации в жидком азоте для иммунофлуорес-центного анализа и в 10% нейтральном забуференном формалине (pH 7,2), с дальнейшим обезвоживанием в спиртах и заливке в парафин согласно стандартной гистологической схеме, для общеморфологического анализа.
Для гистологического исследования готовили срезы толщиной 4—6 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином, по методу Вейгерт Ван-Гизон, а также подвергали PAS-реакции с последующей оценкой в проходящем свете. По результатам гистологического исследования для иммуногисто-химического исследования были отобраны образцы ткани с однотипными морфологическими изменениями, характеризующими каждую группу исследования.
Иммуногистохимическое исследование проводили на криостатных срезах с использованием моно-клональных кроличьих антител к DRP1 (ab 184247, 1:1000, Abcam, UK), PTEN-индуцированной киназе 1 (PINK1) (ab23707, 1:500, Abcam, UK), прохибити-ну (ab75766, 1:500, Abcam, UK), T0M20 (abl86735, 1:50, Abcam, UK), VDAC1 (abl54856, 1:50, Abcam, UK), моноклональных мышиных антител к Parkin (ab77924, 1:500, Abcam, UK) и поликлональных кроличьих антител к TOM70 (PA5-20654, 1:400, Invitrogen, USA).
Для флуоресцентного окрашивания использовали вторичные антитела: антикроличьи конъюги-рованные с Alexa Fluor 350 (A 11046, Thermo Fisher), антикроличьи конъюгированные с Alexa Fluor 405 (ab 175652, Abcam), антикроличьи конъюгированные с Alexa Fluor 430 (A 11064, Thermo Fisher), антимыши-
ные конъюгированные с Alexa Fluor 568 (ab 175473, Abcam), антикроличьи конъюгированные с Alexa Fluor 568 (ab 175471, Abcam), антимышиные конъюгированные с Alexa Fluor 594 (ab 150116, Abcam), антикроличьи конъюгированные с Alexa Fluor 594 (ab 150080, Abcam), антимышиные конъюгированные с Texas Red (ab 6787, Abcam), антикроличьи, конъюгированные с TRITC (T2769, Thermo Fisher).
Все первичные антитела проверены при стандартном контрольном (позитивном и негативном) окрашивании для подбора протокола и титра антител.
Таблица 1
Показатели относительной экспрессии митохондриальных маркеров в гепатоцитах крыс
Table 1
Indicators of the relative expression of mitochondrial markers in the rat hepatocytes
Митохондри-альные маркеры Г руппы сравнения
молодые животные (контроль) старые животные добавление V007
DRP1 68,7±0,5 54,8±1,5* 71,9±3,3**
Parkin 68,6±1,5 55,7±1,9* 67,2±0,2**
PINK1 62,3±2,1 57,8±2,9* 70,4±2,2**
Prohibitin 67,4±0,1 53,2±0,1* 72,0±1,1**
Tom20 72,5±3,9 55,1±3,7* 72,3±2,0**
Tom70 67,4±1,6 61,5±0,5* 72,7±1,5**
VDAC 67,8±1,8 64,5±3,3* 78,3±2,1**
Примечание. * — p<0,05 по сравнению с группой молодых животных (контроль); ** — p<0,05 по сравнению с группой старых животных.
Note. * — p<0.05 compared to the group of young animals (control); ** — p<0.05 compared to the group of old animals.
Рис. 1. Относительная площадь экспрессии митохондриальных белков в пече ни крыс
Примечание. * — p<0,05 по сравнению с группой молодых животных (контроль); ** — p<0,05по сравнению с группой старых животных. Fig. 1. Relative area of expression of mitochondrial proteins in the liver of rats Note. * — p<0.05 compared to the group of young animals (control); ** — p<0.05 compared to the group of old animals.
Для оценки результатов иммуногистохимиче-ского окрашивания проводили морфометрическое исследование с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Olympus IX73, цифровой камеры Olympus DP80, персонального компьютера на базе AMD Ryzen 3 3200 G и программного обеспечения CellSens.
Изображения получали в 12bit размере (градиент серого) с использованием технологии псевдоокрашивания. В каждом случае анализировали площадь ткани не менее 1 мм2, с фотофиксацией как минимум 5 полей зрения при увеличении ><100. Проводили измерение относительной площади экспрессии, определяемого методом иммунофлуоресценции, биомаркера к общей площади клеток в поле зрения. Относительную площадь экспрессии выражали в процентах.
Методы описательной статистики включали в себя оценку среднего арифметического значения, стандартного отклонения от среднего значения и статистическую стандартную ошибку выборочного среднего арифметического.
Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием методов непараметрической статистики по причине возникновения необходимости наличия статистических процедур, позволяющих обрабатывать данные из выборок малого объема с переменными, неустановленного вида распределения. Для оценки различий между независимыми выборками использовали U-критерий Манна—Уитни, уровень статистической значимости не превышал значения 0,05 во всех проводимых тестах.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Ткань печени у крыс молодой группы была представлена гистологически нормальной структурой.
Морфологические изменения в ткани печени у крыс старой группы были представлены дистрофическими и дисцирку-ляторными изменениями.
Экспрессия митохондри-альных маркеров статистически значимо снижалась с увеличением возраста крыс. При введении препарата V007 старым животным экспрессия митохондриальных белков возрастала и достигала значений экспрессии у молодых животных (контрольной группы) (табл. 1, рис. 1, 2).
При применении препарата V007 отмечается статистически значимое увеличение экспрессии всех изученных митохондриальных белков в ге-
Рис. 2. Иммунофлуоресцентное окрашивание с антителами к Tom70клеток печени крыс. А — молодые животные (контрольная группа), х 1000; Б — старые животные х 1000; В — введение препарата V007, х 1000. Fig. 2. Immunofluorescent staining with antibodies to Tom70 of liver cells of rats. A — young animals (control group), х 1000; B — old animals, х 1000; C — application of the drug V007, х1000.
патоцитах старых крыс до уровня молодых животных: DRP1 в 1,3 раза; Parkin в 1,2 раза; PINK1 в 1,2 раза; Prohibitin в 1,4 раза; Tom 20 в 1,3 раза; Tom 70 в 1,2 раза; VDAC в 1,2 раза. Такое изменение экспрессии митохондриальных белков обусловлено активацией их синтеза и усилением деятельности транспортных систем митохондрий.
Гепатоциты — клетки, имеющие большой внутриклеточный потенциал для обновления и репарации, в том числе и при активном участии митохондрий. Важным критерием оценки деятельности митохондрий является состояние и потенциал наружной митохондриальной мембраны, основными белками которой являются Tom70 и Tom20, участвующие в транспорте и обеспечивающие потенциал внутренней мембраны для выработки АТФ [16].
Активация работы митохондрий приводит не только к увеличению АТФ, но и нарастанию АФК, вырабатываемой их собственной дыхательной цепью. Аберрантные митохондрии удаляются с помощью селективной формы аутофагии, называемой ми-тофагией, которая является важнейшим механизмом контроля качества митохондрий. Контроль качества митохондрий регулируется системой PINK1/Parkin, которая действует как датчик качества митохондрий и активируется после изменения мембранного потенциала митохондрий вновь взаимодействуя с Tom70
[17].
VDAC 1, формирующий ионные каналы во внешней мембране митохондрий, крайне динамический белок, имеющий различные конформации и изоформы. VDAC1 способствует высокой проницаемости мембраны для митохондриальных белков с различным потенциалом действия [18]. При применении препарата V007 также отмечено усиление экспрессии данного белка.
Функцией DRP1 является регуляция конформации мембраны путем олигомеризации, с разрывом митохондриальной мембраны при митофагии [19].
Достоверное повышение Prohibitin согласуется с изменениями экспрессии других митохондриаль-ных белков, так как он выступает в качестве шапе-рона белков дыхательной цепи и структурного каркаса митохондрий [20]. Повышение его экспрессии свидетельствует об активности процессов синтеза АТФ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Полученные данные свидетельствуют о том, что препарат V007 обладает общерегуляторным и геро-протекторным действием, являясь таргетным фармакологическим средством, регулирующим функции гепатоцитов через нормализацию экспрессии ключевых митохондриальных белков.
Дальнейшее изучение препарата V007 позволит детализировать представления о его таргетном действии на клеточном уровне, дополнительно верифицировать внутриклеточные и межтканевые сигнальные молекулы, которые могут явиться мишенями его фармакологического действия при возраст-ассо-
циированных заболеваниях.
* * *
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest
The authors declare no conflict of interest.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Jang J.Y., Blum A., Liu J., Finkel T. The role of mitochondria in aging. J. Clin. Invest. 2018; 128 (9): 3662-70. https://doi.org/10.1172/ JCI120842.
2. Son J.M., Lee C. Mitochondria: multifac-eted regulators of aging. BMB Rep. 2019; 52 (1): 13-23. https://doi.org/10.5483/BM-BRep.2019.52.1.300.
3. Rose G., Santoro A., Salvioli S. Mitochondria and mitochondria-induced signalling molecules as longevity determinants. Mech Ageing Dev. 2017; 165 (Pt B): 115-28. https://doi.org/10.10Wj.mad.2016.12.002,
4. Wang P., Wang D., Yang Y., Hou J., Wan J., Ran F., Dai X., Zhou P., Yang Y. Tom70 protects against diabetic cardiomyopathy through its antioxidant and antiapoptotic properties. Hypertens Res. 2020; 43 (10): 1047-56. https://doi.org/10.1038/s41440-020-0518-x.
5. Hira S., Packialakshmi B., Tang E., Zhou X. Dexamethasone upregulates mitochondrial Tom20, Tom70, and MnSOD through SGK1 in the kidney cells. J. Physiol Biochem. 2021; 77 (1): 1-11. https://doi.org/10.1007/ s13105-020-00773-x.
Di Maio R. , Barrett P.J., Hoffman E.K., Barrett C.W., Zharikov A., Borah A., Hu X., McCoy J., Chu Ch.T., Burton E.A., Hastings T.G. , Greenamyre T. a-Synuclein binds to T0M20 and inhibits mitochondrial protein import in Parkinson's disease. J. Sci Transl Med. 2016; 8 (342): 342ra78. https://doi.org/10.1126/ scitranslmed.aaf3634. Fang D., Maldonado E.N. VDAC Regulation: A Mitochondrial Target to Stop Cell Proliferation. Adv. Cancer Res. 2018; 138: 41-69. https://doi.org/10.1016/ bs.acr.2018.02.002.
8. Shoshan-Barmatz V., Shteinfer-Kuzmine A., Verma A. VDAC1 at the Intersection of Cell Metabolism, Apoptosis, and Diseases. Biomolecules. 2020; 10 (11): 1485. https:// doi.org/10.3390/biom10111485.
9. Tian L., Neuber-Hess M., Mewburn J., Dasgupta A., Dunham-Snary K., Wu D. Ischemia-induced Drp1 and Fis1-mediated mitochondrial fission and right ventricular dysfunction in pulmonary hypertension.
J. Mol. Med. 2017; 95: 381-93. https://doi. org/10.1007/s00109-017-1522-8.
10. Jin J., Wei X.-X., Zhi X.-L., Wang X.-H., Meng D. Drp1-dependent mitochondrial fission in cardiovascular disease. Acta Pharmacol Sin. 2020; 42 (5): 655-64. https://doi. org/10.1038/s41401-020-00518-y.
11. Chowdhury D., Kumar D., Sarma P., Tangutur A., Pal Bhadra M. PHB in Cardiovascular and Other Diseases: Present Knowledge and Implications. Curr Drug Targets. 2017; 18 (16): 1836-51. https:// doi.org/10.2174/138945011766616082416 1225.
12. Da Costa C.A., Duplan E., Rouland L., Checler F. The transcription factor function of Parkin: breaking the dogma. Front Neu-rosci. 2018; 12: 965. https://doi.org/10.3389/ fnins.2018.00965.
13. Gladkova C., Maslen S.L., Skehel J.M., Komander D. Mechanism of Parkin activation by PINK1. Nature. 2018; 559: 410-4. https://doi.org/10.1038/s41586-018-0224-x.
14. Heo J.M., Ordureau A., Paulo J.A., Rinehart J., Harper J.W. The PINK1-PARKIN mitochondrial ubiquitylation pathway drives a program of OPTN/NDP52 recruitment and TBK1 activation to promote mitophagy. Mol. Cell. 2015; 60: 7-20. https://doi. org/10.1016/j.molcel.2015.08.016.
15. Sekine S., Youle R.J. PINK1 import regulation; a fine system to convey mitochondrial stress to the cytosol. BMC Biol. 2018; 16 (1): 2. https://doi.org/10.1186/s12915-017-0470-7.
16. Lazarou M., Jin S.M., Kane L.A., Youle R.J. Role of PINK1 binding to the TOM complex and alternate intracellular mem-
branes in recruitment and activation of the E3 ligase Parkin. Dev. Cell. 2012; 22: 320-33. https://doi.org/10.1016/j.dev-cel.2011.12.014.
17. Quinn P., Moreira P., Ambrösio A., Alves C. PINK1/PARKIN signalling in neurodegeneration and neuroinflammation. Acta Neuro-pathol Commun. 2020; 8 (1): 189. https:// doi.org/10.1186/s40478-020-01062-w.
18. Shoshan-Barmatz V., Maldonado E.N., Krelin Y. VDAC1 at the crossroads of cell metabolism, apoptosis and cell stress. Cell Stress. 2017; 1: 11-36. https://doi. org/10.15698/cst2017.10.104.
19. Osellame L.D. Cooperative and independent roles of the Drp1 adaptors Mff, MiD49 and MiD51 in mitochondrial fission. J. Cell Sci. 2016; 129: 2170-81. https://doi. org/10.1242/jcs.185165.
20. Cooper H.A., Eguchi S. Inhibition of mito-chondrial fission as a novel therapeutic strategy to reduce mortality upon myocardial infarction. Clin. Sci. 2018; 132: 2163-7. https://doi.org/10.1042/CS20180671.
Для цитирования: Кветной И.М., Миронова Е.С., Крылова Ю.С., Мыльникова А.А., Зубарева Т.С., Леонтьева Д.О., Полякова В.О., Петросян М.А. Митохондрии - внутриклеточные мишени геропротекторного действия препарата V007. Молекулярная медицина. 2022; 20 (1): 25-30. https://doi.org/10.29296/24999490-2022-01-04
Поступила 21 ноября 2021 г.
For citation: Kvetnoy I.M., Mironova E.S., Krylova Y.S., Mylnikova A.A., Zubareva T.S., Leont'eva D.O., Polyakova V.O., Petrosyan M.A. Mitochondria - intracellular targets of geroprotective effect of V007. Molekulyarnaya meditsina. 2022; 20 (1): 25-30 (in Russian). https://doi. org/10.29296/24999490-2022-01-04
