CC BY
5
(11,4%), что, по всей вероятности, связано с неодинаковыми возможностями соблюдения гигиенического режима и проведения противоэпидемических мероприятий.
Число заболеваний, перенесенных ребенком в течение года, зависело от численного состава семьи. Так, количество детей, не болевших в течение года, с увеличением семьи понижалось от 53%, если состав семьи не превышал 3 человек, до 30,4% в больших семьях (5 человек и более). Дети, болевшие многократно, в небольших по численности семьях составляли 10%, в больших — 20,8% (в 2 раза больше), что, по всей вероятности, связано с большей контактностью с больными. Достоверных различий в частоте заболеваемости в группах детей с различным доходом на 1 члена семьи выявить не удалось, что указывает на стирание различий между состоянием здоровья детей и бюджетом семьи. Частота перенесенных заболеваний во многом зависела оттого, воспитывается ребенок дома или в дошкольном учреждении. Так, дети первых 3 лет жизни, посещающие дошкольные учреждения, болели в течение года чаще, чем их сверстники, воспитывающиеся дома (X2 = 13,3; Я < < 0,05). Различия в группах детей старше 3 лет недостоверны (X2 = 3,3; Я > 0,05). Основной причиной повышенной заболеваемости детей организованных коллективов является большая контактность с больными сверстниками, чем в семье. Кроме того, определенное значение имеют ранний подъем в утренние часы, ежедневная транспортировка детей в детское учреждение и некоторые другие факторы, которые могут способствовать снижению сопротивляемости организма к ряду заболеваний.
Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют, что увеличению частоты острых заболеваний у детей дошкольного возраста способствуют стесненные жилищные условия, большой численный состав семьи и у детей раннего возраста посещение дошкольного учреждения.
Поступила 2/Ш 1976 г.
УДК 615.917:832.95].07:616.127-008.9:577.16.087.4
Н. Б. Головина
МИКРОСПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ НЕКОТОРЫХ ФЕРМЕНТОВ МИОКАРДА ЖИВОТНЫХ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПЕСТИЦИДА ПРЕПАРАТА 275
Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
В настоящей работе проведено микроспектрофотометрическое исследование активности некоторых окислительных ферментов (сукцинат-.лактатдегидрогеназы и НАД-диафо-разы) в сердечной мышце животных при воздействии нового пестицида В-аминоэтилдитио-карбаминовой кислоты (препарата 275) в токсикологическом эксперименте.
Эксперимент проведен на белых крысах-самцах весом 150—180 г. Материалом служили сердца подопытных и контрольных животных. Активность ферментов в миокарде определяли в остром опыте через 1, 3, 5, 7 и 10-е сутки после однократного воздействия препарата 275 в максимально переносимой дозе (500 мг/кг), в хроническом опыте — после ежедневного введения 4 мг/кг (1-я группа) и 0,4 мг/кг (2-я группа), составивших 1/i0o и ^аооо ДДм соответственно. Животные 3-й группы служили контролем. Животных декапитировали по истечении 3, 6, 10 мес от начала введения пестицида и через 2 мес после прекращения введения его. Кусочки миокарда из стенки левого желудочка контрольных и опытных животных монтировали на один объектодержатель микротома и замораживали углекислотой. Гистохимические реакции проводили на срезах толщиной 10 мкм, полученных в крисстате при температуре — 20°. Сукцинатдегидрогеназу (СДГ) и НАД-диафоразу определяли по методу Нахласа и Зелигмана, лактатдегидрогеназу (ЛДГ) — по методу Гесс, Скарпелли, Пирс (Э. Пирс). Стандартно обработанные срезы ткани миокарда контрольных и опытных животных цитофотометрировали на кадровом сканирующем цитоспектрофотометре по методике, предложенной Ю. Е. Морозовым (Ю. Е. Морозов, 1969, 1970, 1972). Величина зонда в плоскости препарата 1 мкм4, время сканирования — 10 с. В каждой группе проводили 30 измерений. Полученные данные обрабатывали общепринятыми методами вариационной статистики на ЭВМ «НАИРИ». Микроспектрофотометрия давала возможность судить об изменении оптической плотности, связанной с количеством образовавшегося диформа-зана в местах локализации ферментов в условных единицах. По изменению оптической плотности судили о сдвигах в активности ферментов.
Цитофотометрическое исследование активности ферментов при остром воздействии препарата 275 показало, что активность СДГ в 1-е сутки снижалась и составляла 36,2'^=
— 0,5 ед. опт. пл., контроль — 39,17 ^ 0,32 ед. опт. пл. (Я < 0,05), на 3-й сутки — 35,8J=t ± 0,43 ед. опт. пл., контроль — 39,8 ± 0,38 ед. опт. пл. (Я < 0,01), на 5-е сутки — 35,25 ± ± 0,22 ед. опт. пл., контроль — 39,83 ± 0,31 ед. опт. пл. (Я < 0,001).
Наибольшего снижения активность СДГ достигала к концу 7-х суток — 35,25 —
— 0,22 ед. опт. пл., контроль — 40,57 и 0,44 ед. опт. пл. (Я < 0,001), к окончанию 10-х суток активность оставалась пониженной — 36,6 :£: 0,44 ед. опт. пл., контроль — 40,34 ^ ± 0,52 ед. опт. пл. (Я < 0,001). Активность НАД-диафоразы в 1-е сутки по сравнению с
контролем несколько повышалась (опыт 34,03 ^ 0,51 ед. опт. пл., контроль 33,76 ^ 0,26 ед. опт. пл.; Р < 0,05). С конца 3-х суток активность фермента снижалась до 30,6 ± 0,76 ед. опт. пл., контроль — 34,04 ^ 0,4 ед. опт. пл. (Р < 0,001), на 5-е сутки —
33.6 0,47 ед. опт. пл., контроль — 35,43 ± 0,41 ед. опт. пл. (Р < 0,01), на 7-е сутки — 33,55 ^ 0,88 ед. опт. пл., контроль — 35,5 ± 0,56 ед. опт. пл. (Р > 0,05). В конце 10-х суток активность была выше, чем в контроле, — 37,5 ± 0,53 ед. опт. пл. (контроль 35,5 — — 0,4 ед. опт. пл.; Р < 0,05). Активность ЛДГ во все сроки острого опыта превышала контрольные уровни, достигая наибольшего повышения в конце 3-х суток (38,3 0,4 ед. опт. пл., контроль 29,4 — 0,2 ед. опт. пл.; Р < 0,001), незначительно снижалась в последующие сроки и составляла на 5-е сутки 41,8 — 0,5 ед. опт. пл., контроль — 32,8 ^ 0,4 ед. опт. пл. (Р < 0,001), на 7-е сутки 35,7 0,47 ед. опт. пл., контроль — 27,2 =ь ^ 0,4 ед. опт. пл. (Р < 0,001), на 10-е сутки 39,8 2= 0,56 ед. опт. пл., контроль —
35.7 ± 0,47 ед. опт. пл. (Р < 0,01).
Сравнительный анализ активности ферментов при хроническом воздействии пестицида показал, что большее изменение ее отмечено в группе животных, получавших УщЛД^. Наибольшего снижения активность СДГ в миокарде у этой группы достигала в 3 мес — 30,7 0,45 ед. опт. пл., при дозе 1/гоооДД&о— 3М1 — °.7 ед. опт. пл., контроль — 37,01 ± =£ 0,45 ед. опт. пл. (Р < 0,001; Р2 < 0,002). К 6 мес в 1-й группе активность СДГ несколько повысилась по сравнению с предыдущим сроком (35,3 ± 0,56 ед. опт. пл.), однако разница с контролем оказалась достоверной. Во 2-й группе в этот срок отмечено наибольшее снижение активности фермента — 35,2 0,54 ед. опт. пл., контроль — 38,8 — 0,48 ед. опт. пл. (Р,< 0,01). В 10 мес активность в 1-й и 2-й группах составила соответственно 31,25 — 0,56 и 35,38 0,36 ед. опт. пл., контроль — 37,5 ± 0,75 ед. опт. пл. (Рх< 0,01; Р2 < 0,02). Активность НАД-диафоразы в миокарде животных 1-й и 2-й групп снижалась в 3 мес и составляла соответственно 27,9 2= 0,61 и 29,7 — 0,4 ед. опт. пл., контроль — 31,0 ± 0,5 ед. опт. пл. (Р, < 0,001; Р2 = 0,05), в 6 мес — 25,23 =£ 0,86 и 27,6 ^ 0,4 ед. опт. пл., контроль — 29,74 0,56 ед. опт. пл. (Р,(1 < 0,001). К концу 10-ме-сячного воздействия активность фермента в 1-й группе повысилась по сравнению с контролем и составила 31,0 ± 0,8 ед. опт. пл., контроль — 30,1 0,51 ед. опт. пл. (Р > 0,05), во 2-й группе оставалась сниженной — 29,55 0,34 ед. опт. пл. (Р > 0,05). Активность ЛДГ во все сроки хронического воздействия пестицида в 1-й и 2-й группах превышала контроль и составила соответственно в 3 мес 33,8 0,88 и 28,25 — 0,37 ед. опт. пл., контроль — 26,8 =±: 0,43 ед. опт. пл. (Рх < 0,001; Рг < 0,01), в 6 мес — 29,6 ± 0,4 и 28,75 ±
0,38 ед. опт. пл., контроль — 24,9 ± 0,45 ед. опт. пл. (Рь а < 0,001), в 10 мес — 31,9 ^ 0,39 и 29,3 0,23 ед. опт. пл., контроль — 26,0 ± 0,4 ед. опт. пл. (Р1(2 < 0,001).
Через 2 мес после прекращения введения пестицида у животных 1-й группы сохранялось снижение активности СДГ — 33,58 ± 0,42 ед. опт. пл., контроль — 36,12= ^ 0,67 ед. опт. пл. (Р < 0,002), оставалась повышенной ЛДГ (опыт 29,7 ± 0,41 ед. опт. пл., контроль—23,5^0,4 ед. опт. пл.; Р < 0,001). У животных 2-й группы изменение активности ферментов по сравнению с контролем оказалось недостоверным.
Таким образом, результаты количественного гистохимического исследования окислительных ферментов в остром и хроническом опыте показали снижение активности СДГ и НАД-диафоразы, что свидетельствует об угнетении окнслнтельных ^процессов в цикле Кребса. Больше снижалась активность СДГ, имеющая непосредственное отношение к энергетическим запасам миокарда. Нарушение процессов аэробного окисления приводит к повышению анаэробной фазы в метаболизме мышечной клетки, на что указывает повышение активности ЛДГ. —
Примененный нами метод количественного гистохимического изучения активности ферментов позволил проследить динамику содержания ферментов в остром и хроническом эксперименте. Важным, на наш взгляд, является то, что этот метод позволил выявить зависимость изменения активности от дозы вводимого пестицида, в том числе при действии очень небольших доз. Учитывая, что в последние годы в гигиенических исследованиях делается акцент на изучение факторов малой интенсивности, этот чувствительный метод может найти широкое применение.
ЛИТЕРАТУРА. Морозов Ю. Е. и др. — «Бюлл. экспер. биол.», 1969, № 1, с. 97—99.—Он ж е. — «Цитология», 1970, №5, с. 690—693. — О н же.— «Бюлл. экспер. биол.», 1972, № 7, с. 100—103. — П и р с Э. Гистохимия. М., 1962.
Поступил« 8/У1 1976 г.
