CC BY
328
Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(9)
_DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2016-9-891-894
Оriginal article
0 КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 614.77:553.982]-078
Донерьян Л.Г.1, ВодяноваМ.А.1, ТарасоваЖ.Е.2
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ПОЧВЕННЫЕ ГРИБЫ - ОРГАНИЗМЫ-БИОИНДИКАТОРЫ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВ
1 ФГБУ «Научно-исследовательский институт экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина» Минздрава России, 119121, Москва;
2 ООО «ФАКТОР-МЕД», 142191, Москва, Троицк
В работе рассмотрены методические вопросы оценки почвенной биоты в условиях нефтяного загрязнения. ■Экспериментальными исследованиями установлено, что под воздействием различных уровней нефтяного загрязнения, соответствующих определенным градациям состояния и оптимального изменения микробоценоза дерново-подзолистых почв, происходит преобразование структуры комплекса микромицетов и накопление их токсичных видов, малотипичных для подзолистых почв - в первую очередь, представителей рода Aspergillus (A.niger и A. versicolor), Paecilomyces (P.variotii Bainer), Trichoderma (T.hamatum), фитопатогенов рода Fusarium (F.oxysporum), дематофитов рода Sporothrix (S. schenckii) и темноокрашенных меланинсодержа-щих грибов семейства Dematiaceae. Кроме того, представлены данные по изучению микробоценоза урбано-зема - городской почвы, отличной от зональной, но формирующейся в тех же ландшафтно-климатических условиях, и, следовательно, имеющей тенденцию к аналогичной ответной реакции со стороны населяющих почву микроорганизмов. Выделенный комплекс почвенных микроскопических грибов описан многими авторами как комплекс, характерный для почв мегаполисов. Это позволило предположить авторам данной работы, что в почвах городов увеличение встречаемости патогенных видов микромицетов также возрастает на фоне хронического, постоянно обновляющегося поступления нефтяных углеводородов от разных источников загрязнения. Поскольку изменения в видовом составе микромицетов происходили в соответствии с возрастающей нефтяной нагрузкой, постольку микроскопические почвенные грибы могут быть рекомендованы в качестве организмов-биоиндикаторов нефти. В статье также приведены сведения об отличительных особенностях современного ДНК-метода идентификации почвенных микроскопических грибов и общепринятой в нашей стране методики выделения микромицетов с использованием питательной среды Чапека.
Ключевые слова: микромицеты; микроскопические почвенные грибы; почва; дерновоподзолистая почва; урба-нозем; антропозем; нефть; нефтяные углеводороды; нефтяное загрязнение; биоиндикатор; микробиология; пиросеквенирование.
Для цитирования: Донерьян Л.Г, Водянова М.А., Тарасова Ж.Е. Микроскопические почвенные грибы - организмы-биоиндикаторы нефтезагрязненных почв. Гигиена и санитария. 2016; 95(9): 891-894. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2016-95-9-891-894
Donerian L.G.1, Vodianova M.A.1, Tarasova Zh.E.2
MICROSCOPIC SOIL FUNGI - BIOINDICATORS ORGANISMS CONTAMINATED SOIL
1A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, 119121, Russian Federation; 2LLC "Factor-MED" 142191, Moscow, Troitsk, Russian Federation
In the paper there are considered methodological issues for the evaluation of soil biota in terms of oil pollution. Experimental studies have shown that under the exposure of a various levels of oil pollution meeting certain gradations of the state and optimal alteration in microbocenosis in sod-podzolic soils, there is occurred a transformation of structure of the complex of micromycetes and the accumulation of toxic species, hardly typical for podzolic soils - primarily represantatives of the genus Aspergillus (A.niger and A. versicolor), Paecilomyces (P.variotii Bainer), Trichoderma (T.hamatum), the genus of phytopathogens Fusarium (F.oxysporum), dermatophytes of genus Sporothrix (S. schenckii) and dark-colored melanin containing fungi of Dematiaceae family. Besides that there are presented data on the study of microbiocenosis of the urban soil, the urban soil differed from the zone soil, but shaped in similar landscape and climatic conditions, and therefore having a tendency to a similar response from the side of microorganisms inhabiting the soil. Isolated complex of soil microscopic fungi is described by many authors as a complex, characteristic for soils of megalopolises. This allowed authors of this work to suggest that in urban soils the gain in the occurrence of pathogenic species micromycetes also increases against a background of chronic, continuously renewed inflow of petroleum hydrocarbons from various sources of pollution. Because changes in the species composition of micromycetes occurred in accordance with the increasing load of oil, so far as microscopic soil fungi can be recommended as a bio-indicator organisms for oil. In the article there is also provided information about the distinctive features of modern DNA identification method of soil microscopic fungi and accepted in our country methodology of isolation of micromycetes with the use of a nutrient Czapek medium.
Keywords: micromicetes; microscopic soil fungi, soil, sod-podzolic soil urban soil; anthropogenic soil; oil; petroleum hydrocarbons; oil contamination; bioindicator; microbiology; pyrosequencing.
For citation: Donerian L.G., Vodianova M.A., Tarasova Zh.E. Microscopic soil fungi - bioindicators organisms contaminated soil. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(9): 891-894. (In Russ.). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2016-95-9-891-894
For correspondence: Larisa G. Donerian, MD, PhD, senior researcher of the La,oratory of Soil Hygiene, A.N. Sysin Research Institute of Human Ecology and Environmental Health, Moscow, 119121, Russian Federation. E-mail: dlg54@mail.ru
Information about authors:
Donerian L.G. http://orcid.org/0000-0002-9718-0663; Vodianova M. A. http://orcid.org/0000-0003-3350-5753
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Acknowledgment. The study had no sponsorship.
Received: 16.02.2016
Accepted: 14.04.2016
гиена и санитария. 2016; 95(9)
РРк http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2016-9-891-894_
Оригинальная статья
Введение
В современных условиях, сопровождающихся активным ростом техногенной нагрузки на окружающую среду, особенно актуальными для исследователей-гигиенистов, экологов и специалистов других смежных профессий становится расширение и совершенствование существующих методов оценки состояния среды. Ограниченность числа количественных показателей (предельно допустимые нормативы) при постоянном росте числа новых ксенобиотиков приводит к невозможности дать корректную оценку их воздействия на среду обитания. В связи с этим растет интерес к организмам-биоиндикаторам, по реакции которых представляется возможным отслеживать токсическое действие загрязняющих веществ и даже прогнозировать с их помощью изменения качества окружающей среды. Особое место среди организмов-биоиндикаторов занимают микроскопические почвенные грибы (микромицеты), которые определенным образом реагируют на загрязнение почвы самыми разными токсикантами [1]. Так, например, при изучении качественного состава и коэффициента сходства сообщества микромицетов почвы, загрязненной 2,4,6-тринитротолуолом (ТНТ), установлено, что даже низкие концентрации ТНТ (20 и 50 мг/кг) оказывают токсическое действие на микромицеты почвы, заметно изменяя структуру их сообщества. А при уровне загрязнения 100 и 200 мг/кг изменяется не только структура сообщества, но и наиболее сильно снижаются коэффициенты сходства с незагрязненной почвой [2]. Из источников литературы также известно, что наиболее заметные изменения почвенной микобиоты происходят в районах активной хозяйственной деятельности. Антропогенные ландшафты во многом отличаются от первичных естественных ландшафтов. Для них характерна перестройка обмена и круговорота биофильных химических элементов, водно-теплового баланса, направления почвенных процессов, состава и численности популяций организмов [3].
Среди многочисленных контаминантов антропогенного происхождения, попадающих в окружающую среду, нефть и нефтяные углеводороды (НУВ) занимают одно из приоритетных мест. Их повсеместная распространенность в промышленных регионах оказывает негативное воздействие на почвы, растительность и атмосферный воздух, поверхностные и подземные воды, экологические системы и здоровье населения. Актуальность и несомненная значимость исследований по изучению особенностей влияния нефти на почву изложены в фундаментальных и современных работах [4, 5]. Следует отметить, что в международной практике данное направление также актуально для районов добычи нефти, например исследования различных территорий штата Техас (США) позволили выявить 16 наиболее опасных полициклических ароматических углеводородов (ПАУ), представляющих группу экологически токсичных и стойких химических веществ, входящих в состав добываемой нефти [6].
Известно, что ингибирующее влияние нефти на почвенную микрофлору обусловлено резким изменением экологических условий (воздушного, гидротермического режима, связыванием нефтью биогенных элементов - Р, N и т.д.), а также прямым воздействием содержащихся в нефти нафтеновых кислот и других токсических углеводородов. Большинство исследований, проведенных в различных биоклиматических зонах, свидетельствуют, что почвенные микроорганизмы отвечают на умеренное углеводородное загрязнение повышением валовой численности и усилением активности [7, 8]. В низких дозах нефть оказывает стимулирующее влияние на рост микроорганизмов и биологическую активность почвы, поскольку выступает в роли доступного органического субстрата [9]. Компоненты нефти, как дополнительный источник энергии, способствуют формированию специфического биоценоза с характерной структурой трофических связей и энергетического обмена, являясь причиной сукцессионных преобразований. Этим могут объясняться самые разнообразные результаты наблюдений за изменением
Для корреспонденции: Донерьян Лариса Григорьевна, ст. науч. сотр. лаб. гигиены почвы ФГБУ НИИ ЭЧ и ГОС им. А.Н. Сысина Минздрава России, кандидат биологических наук, 119121, Москва. E-mail: dlg54@mail.ru
количества микроорганизмов (в частности, почвенных грибов) как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения.
Сильно загрязненные почвы отличаются снижением видового разнообразия и доминированием микроорганизмов, устойчивых к нефтяному воздействию и обладающих углеводородокис-ляющей активностью.
Почвенные грибы обладают мицелиальным строением, а потому имеют огромную адсорбционную поверхность и играют важную роль в формировании почвенного покрова и его функций вследствие способности к образованию больших запасов биомассы. По мнению некоторых авторов [10], почву вообще можно рассматривать как растительно-грибную систему, поскольку почва является корнеобитаемым слоем земной поверхности, в котором происходит взаимное влияние растений и микроорганизмов. Важная роль грибов в почве заключается прежде всего в создании почвенной структуры, синтезе гумусовых веществ, а также специфических физиологически активных веществ, во влиянии на удержание влаги в почве и других физико-химических процессах [11].
Установлено, что некоторые виды микромицетов могут образовывать зоотоксины и соответственно при определенных условиях приводить к токсикозам животных. Кроме того, внимание ученых-микологов и медиков все больше привлекает проблема связи почвенных микроскопических грибов и распространения микозов и аллергических заболеваний человека [12].
Особый интерес к почвенным грибам вызван их способностью к деструкции и детоксикации различных загрязняющих веществ.
Известно об устойчивости к нефтяным углеводородам родов микромицетов - Aspergillus, Fusarium, Paecilomyces, Pénicillium, Trichoderma. Доминирующие в нефтезагрязненных почвах микромицеты в подавляющем большинстве являются условно-патогенными формами, обладающими способностью вызывать различные формы болезней человека и теплокровных животных при внедрении в живой организм. Особенно это касается больных с различными формами иммунодефицитных состояний.
Исследования микробного сообщества загрязненных дерново-подзолистых почв позволили выделить четыре качественно отличных уровня загрязнения. При низком уровне (зона гоме-остаза) с содержанием нефтяных углеводородов до 0,7 мл/кг почвы наблюдаются количественные изменения микробиологических показателей, часто слабо отличимые от контроля. В зоне стресса (0,7-50 мл/кг) возникают первые нарушения в микробном сообществе. При высоком уровне загрязнения (зона резистентности) от 50 до 300 мл/кг (от 4,3 до 25,5%) происходит смена доминирующих форм. Для очень высокого уровня загрязнения (зона репрессии) - более 300 мл/кг (более 25,5%) характерно почти полное подавление развития микроорганизмов в почве и ингибирование микробиологических процессов [13].
Материал и методы
В модельных исследованиях использовали городскую почву (урбанозем), отобранную в Центральном административном округе (ЦАО) г. Москвы (район Хамовники). Данная почва отно-
Эффект воздействия различных концентраций нефти на динамику изменения численности грибов, %
Сутки Контроль Концентрации внесенной нефти, г/кг
21 41 82 165 247 412
1-е 0 + 108 + 166 +25 +58 -33 -17
3-и 0 + 19 -8 -27 -43 -54 -62
7-е 0 +42 +5 +31 -5 -58 -63
14-е 0 +6 +33 -7 +13 -7 -20
21-е 0 +56 +22 23 -45 -11 +11
28-е 0 +41 +158 +66 +8 -8 -42
58-е 0 -48 -52 -59 -93 -90 -42
87-е 0 -17 -37 -57 -54 -54 -84
120-е 0 -32 -10 -83 -64 -78 -95
150-е 0 -29 -35 -65 -58 -58 -40
180-е 0 -27 -91 -80 -71 -89 -57
Hygiene & Sanitation (Russian Journal). 2016; 95(9)
_DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2016-9-891-894
Original article
Контроль
Рис. 1. Изменение биоразнообразия основных групп почвенных грибов в урбаноземе под влиянием нефти.
сится к новому классу почв - антропоземов (антропогенно глубоко преобразованных почв), типу урбанозем (преобразованием затронуто более 50 см профиля). Длительность опытов составляла около 6 мес [14].
В настоящее время в мировой практике широко используют различные методы анализа сообществ почвенных микроскопических грибов, одним из которых является пиросеквени-рование, не-электрофоретический метод секвенирования ДНК. С помощью данного метода группой ученых из Республики Корея были определены в общей сложности 372 таксона почв трех островов в Желтом море между Кореей и Китаем, идентифицированы такие группы грибов, как Ascomycota и Basidiomycota. Кроме того, были обнаружены следующие виды сапротрофов: Peltigera neopolydactyla, Paecilomyces sp., Phacopsis huuskonenii и Raffaelea hennebertii [15]. Однако по данным отечественных авторов [11], такие исследования могут показывать весьма существенные отличия в разнообразии и составе идентифицированных таксонов грибов в сравнении с группировками грибов, изолированных из тех же почв на питательных средах. Кроме того, стоимость одного цикла работы прибора (без приготовления библиотек) может составлять от 0,1 до 12 тыс. усл.ед. [16].
Выделение микромицетов проводили по общепринятой в нашей стране методике на среде Чапека с использованием почвенной суспензии; идентификацию видов и принадлежность к условно-патогенным микромицетам - по соответствующим определителям [17, 18].
Результаты и обсуждение
В проведенных экспериментальных исследованиях выявлено, что рост почвенных микромицетов под влиянием доз нефти 41 и 82 г/кг, после некоторых незначительных колебаний численности, на 58-е сутки эксперимента был угнетен и до конца инкубации количество выросших колоний составляло лишь 52-59% от контроля (см. таблицу).
Токсический эффект нефти в образце с концентрацией 165 г/кг проявился уже на 3-и сутки инкубации, когда количество почвенных микромицетов уменьшилось на 43% от контроля. Стойкое выраженное уменьшение количества микроорганизмов (на 54-93%) отмечалось с 58-х суток и до конца эксперимента.
Эффект воздействия нефтяного загрязнения на рост почвенных грибов особенно выражен при концентрациях 247 и 412 г/кг с 3-7-х суток инкубации на 58 и 63% соответственно. Далее некоторое время количество микромицетов не сильно отличалось от контроля, но уже на 58-е сутки в образце с дозой внесенной нефти 247 г/кг и на 28-е сутки в образце с дозой 412 г/кг про-
изошли существенные изменения: стойкое выраженное инги-бирование роста микроскопических грибов наблюдалось весь период до конца инкубации.
Более информативным показателем изменения состояния нефтезагрязненной почвы нам представляется качественный метод - изменение видового состава грибов.
Микромицетный комплекс исходного урбанозема состоял из следующих видов: Penicillium (P.simplicissimum, miczynskii), Acremonium (A.strictum, A.verticillium), Mucor hiemalis, Trichoderma hamatum, Chaetomium sp., Gliocladium catenulatum и МТМ (рис. 1).
Все изученные концентрации нефти (от низкого и среднего до высокого уровня загрязнения) оказались губительными для Penicillium sp. и Chaetomium sp. и способствовали появлению в посевах условно-патогенных микромицетов Paecilomyces vari-otii Bainer и Fusarium oxysporum.
Начиная с концентрации внесенной нефти 50 мл/кг, увеличивалось обилие и частота встречаемости Dematiaceae spp., безусловных представителей антропогенно-загрязненных почв и уменьшалось количество доминирующих в незагрязненной почве аборигенных родов Penicillium и Acremonium.
В образце с концентрацией нефти 100 мл/кг было обнаружено появление микромицетов Aspergillus niger, Aspergillus versicolor и Sporothrix schenckii, количество которых возрастало в почвах с большими концентрациями нефти, и при максимальной нагрузке они полностью вытесняли остальные виды.
Проводя анализ состояния почвенного сообщества микроскопических грибов и его разнообразия во всех экспериментах, подсчитывали индекс Шеннона (Н). Эта величина отражает ви-
Контроль
S- 21
-е-
Щ
к
s ^
я о.
X
s
X
о
41 82 165 247 412
0,59
1,68
0,96
1,17 1,27
0,45
0,32
0,5 1 1,5
Индекс Шеннона
Рис. 2. Индекс Шеннона.
гиена и санитария. 2016; 95(9)
DOI: http://dx.doi.org/10.1882/0016-9900-2016-9-891-894_
Оригинальная статья
довое богатство исследуемого образца. H в исследуемых почвах колебался в зависимости от того, как появлялись или убывали основные группы почвенных грибов под влиянием различных концентраций нефти. К концу эксперимента в образцах почв с дозовой нагрузкой нефтью 50 мл/кг и выше Н уменьшался, а в образцах с концентрациями 100-500 мл/кг - приближался к нулю, что указывало на то, что в почвенном сообществе остались жизнеспособными лишь некоторые группы устойчивых к нефти микроскопических грибов (рис. 2).
Исследования по изучению биоразнообразия почвенных грибов в модельных почвах, позволили выделить комплекс наиболее часто встречающихся: представители Aspergillus (A. niger и A. versicolor), Paecilomyces (P. variotii Bainer), Trichoderma (T. hamatum), Fusarium (F. oxysporum), Sporothrix (S. schenckii) и Dematiaceae spp.
Заключение
Проведенные микробиологические исследования показали, что под воздействием нефти происходит изменение структуры комплекса микромицетов и накопление их токсичных видов, малотипичных для подзолистых почв - в первую очередь представителей рода Aspergillus (A. niger и A. versicolor), Paecilomyces (P. variotii Bainer), Trichoderma (T. hamatum), фитопатогенов рода Fusarium (F. oxysporum), дематофитов рода Sporothrix (S. schenckii) и темноокрашенных меланинсодержащих грибов семейства Dematiaceae. Это представители условно-патогенных микромицетов, которые могут вызывать спорадические микозы, алиментарные токсикозы, аллергические реакции типа бронхиальной астмы, сенной лихорадки, заболеваний кожи и подкожной клетчатки и т.п.
Появляясь в микробиологических посевах даже при малом уровне загрязнения в небольшом количестве, с повышением дозы нефти в почве эти виды микромицетов становятся доминирующими и нередко единственными представителями почвенных микроскопических грибов. Абсолютными «хозяевами» почвенной системы эти виды микромицетов становятся тогда, когда аборигенное сообщество погибает, не выдерживая нефтяного пресса.
Скрининговые исследования почв г. Москвы (по административным округам) позволили подтвердить результаты модельных опытов и отметить, что обилие условно-патогенных видов почвенных грибов (Aspergillus, Paecilomyices, Trichoderma, Fusarium, Dematiaceae spp.) в микробиологическом сообществе городских почв увеличивалось в зависимости от содержания в них нефтяных углеводородов. Данный комплекс выделялся в основном из почв промышленных и в меньшей степени селитебных зон, на территориях которых и были отобраны образцы почв.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Литература (п.п. 6, 15 см. References)
1. Александрова Е.Ю. Биоиндикационная оценка качества городской среды. Проблемы развития территории. 2015; (5): 170-8.
2. Кормильцева И.П., Яковлева Г.Ю., Захарова Н.Г., Куриненко Б.М. Структура сообщества микромицетов чернозема выщелоченного при загрязнении 2,4,6-тринитротолуолом. Ученые записки Казанского университета. Серия: естественные науки. 2011; 153(1): 161-7.
3. Сумина О.И., Власов Д.Ю., Долгова Л.Л., Сафронова Е.В. Особенности формирования сообществ микромицетов в зарастающих песчаных карьерах севера Западной Сибири. Вестник Санкт-Петербургского университета. Серия 3. Биология. 2010; (2): 84-90.
4. Звягинцев Д.Г., Гузев В.С., Левин С.В., Селецкий Г.И., Оборин А.А. Диагностические признаки различных уровней загрязнения почвы нефтью. Почвоведение. 1989; (1): 72-7.
5. Узких О.С., Хомяков Д.М., Донерьян Л.Г. Чувствительность биологических показателей к уровням нефтяного загрязнения на различных типах почв. Защита окружающей среды в нефтегазовом комплексе. 2009; (3): 16-20.
7. Мурзаков Б.Г. Экологическая биотехнология для нефтегазового комплекса. М.; 2005.
8. Шеметов В.Ю., Матыцын В.И., Игнатенко Е.А. Нефтесорбенты для сбора плавающей нефти с водных поверхностей и ликвидации последствий загрязнения почвогрунтов. М.: ВНИИОЭНГ; 1991.
9. Киреева Н.А., Водопьянов В.В., Мифтахова А.М. Биологическая активность нефтезагрязненных почв. Уфа: Издательство «Гилем»; 2001.
10. Заварзин Г.А. Лекции по природоведческой микробиологии. М.: Наука; 2003.
11. Марфенина О.Е. Антропогенная экология почвенных грибов. М.: Медицина для всех; 2005.
12. Киреева Н.А., Рафикова Г.Ф. Развитие потенциально патогенных видов микроскопических грибов при нефтяном загрязнении почвы. Успехи медицинской микологии. 2007; 9(2): 49-51.
13. Звягинцев Д.Г., ред. Микроорганизмы и охрана почв. М.: Издательство Московского университета; 1989: 129-49.
14. Тарасова Ж.Е. Гигиеническая оценка влияния нефти на почвенный микробоценоз и самоочищающую способность почвы: Дисс. ... канд. мед. наук. М.; 2006.
16. Краснов Я.М., Гусева Н.П., Шарапова Н.А., Черкасов А.В. Современные методы секвенирования ДНК (обзор). Проблемы особо опасных инфекций. 2014; (2): 73-9.
17. Кириленко Т.С. Атлас родов почвенных грибов (Ascomycetes и Fungi Imperfecti). Киев: Наукова думка; 1977.
18. Кулько А.Б. Атлас условно-патогенных грибов рода Aspergillus — возбудителей бронхолегочных инфекций. М.; 2012.
Reference s
1. Aleksandrova E.Yu. Bioindication assessment of urban environment quality. Problemy razvitiya territorii. 2015; (5): 170-8. (in Russian)
2. Kormil'tseva I.P., Yakovleva G.Yu., Zakharova N.G., Kurinenko B.M. Community structure mikromitcetov leached chernozem at pollution 2,4,6-trinitrotoluene. Uchenye zapiski Kazanskogo universiteta. Seriya: estestvennye nauki. 2011; 153(1): 161-7. (in Russian)
3. Sumina O.I., Vlasov D.Yu., Dolgova L.L., Safronova E.V. Features of formation mikromitcetov communities overgrown sand quarries north of Western Siberia. Vestnik Sankt-Peterburgskogo universiteta. Seriya 3. Biologiya. 2010; (2): 84-90. (in Russian)
4. Zvyagintsev D.G., Guzev V.S., Levin S.V., Seletskiy G.I., Oborin A.A. The diagnostic features of the various levels of soil contamination by oil. Pochvovedenie. 1989; (1): 72-7. (in Russian)
5. Uzkikh O.S., Khomyakov D.M., Doner'yan L.G. The sensitivity of the biological indicators to the levels of oil pollution on different soil types. Zashchita okruzhayushchey sredy v neftegazovom komplek.se. 2009; (3): 16-20. (in Russian)
6. Bojes H.K., Pope P.G. Characterization of EPA's 16 priority pollutant polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in tank bottom solids and associated contaminated soils at oil exploration and production sites in Texas. Regul. Toxicol. Pharmacol. 2007; 47(3): 288-95.
7. Murzakov B.G. Environmental Biotechnology for the Oil and Gas Industry [Ekologicheskaya biotekhnologiya dlya neftegazovogo kompleksa]. Moscow; 2005. (in Russian)
8. Shemetov V.Yu., Matytsyn V.I., Ignatenko E.A. Oil Sorbent for the Collection of Floating Oil from Water Surfaces and Elimination of Consequences of Soil Contamination [Neftesorbenty dlya sbora plavayushchey nefti s vodnykh poverkhnostey i likvidatsii posledstviy zagryazneniya po-chvogruntov]. Moscow: VNIIOENG; 1991. (in Russian)
9. Kireeva N.A., Vodop'yanov V.V., Miftakhova A.M. The Biological Activity of Oil-Contaminated Soil [Biologicheskaya aktivnost' neftezagry-aznennykh pochv]. Ufa: Izdatel'stvo «Gilem»; 2001. (in Russian)
10. Zavarzin G.A. Lectures on Natural Sciences of Microbiology [Lektsii po prirodovedcheskoy mikrobiologii]. Moscow: Nauka; 2003. (in Russian)
11. Marfenina O.E. Anthropogenic Ecology of Soil Fungi [Antropogennaya ekologiya pochvennykh gribov]. Moscow: Meditsina dlya vsekh; 2005. (in Russian)
12. Kireeva N.A., Rafikova G.F. The development of potentially pathogenic species of microscopic fungi at oil contamination of the soil. Uspekhi meditsinskoy mikologii. 2007; 9(2): 49-51. (in Russian)
13. Zvyagintsev D.G., ed. Microorganisms and Soil Protection [Mikroorga-nizmy i okhrana pochv]. Moscow: Izdatel'stvo Moskovskogo universite-ta; 1989: 129-49. (in Russian)
14. Tarasova Zh.E. Hygienic Estimation of the Impact of Oil on the Soil Mi-crobiocenosis and Self-Cleaning Capacity of the Soil: Diss. Moscow; 2006. (in Russian)
15. Lim Y.W., Kim B.K., Kim C., Jung H.S., Kim B.S., Lee J.H. Assessment of soil fungal communities using pyrosequencing. J. Microbiol. 2010; 48(3): 284-9.
16. Krasnov Ya.M., Guseva N.P., Sharapova N.A., Cherkasov A.V. Modern methods of DNA sequencing (review). Problemy osobo opasnykh in-fektsiy. 2014; (2): 73-9. (in Russian)
17. Kirilenko T.S. Soil Fungi Genera Atlas (Ascomycetes and Fungi Imper-fecti) [Atlas rodov pochvennykh gribov (Ascomycetes i Fungi Imperfec-ti)]. Kiev: Naukova dumka; 1977. (in Russian)
18. Kul'ko A.B. Atlas Opportunistic Fungi of the Genus Aspergillus — Pathogens of Bronchopulmonary Infections [Atlas uslovno-patogennykh gribov roda Aspergillus — vozbuditeley bronkholegochnykh infektsiy]. Moscow; 2012. (in Russian)
Поступила 16.02.16 Принята к печати 14.04.16
