МИКРООРГАНИЗМЛАР ЎСИШИГА ВА ПЛАСТИКЛАРНИ ПАРЧАЛАШ ФАОЛЛИГИГА МИКРОЭЛЕМЕНТЛАР ТАЪСИРИ Текст научной статьи по специальности «Экологические биотехнологии»

МИКРООРГАНИЗМЛАР УСИШИГА ВА ПЛАСТИКЛАРНИ ПАРЧАЛАШ ФАОЛЛИГИГА МИКРОЭЛЕМЕНТЛАР

ТАЪСИРИ

1Сафаров Х.Ш, 2Назиров М.М, 3Алиев З.З, 4Халилов И.М, 5Бобокулов М.Ш,

6Халилова Ф.М

1,23,4,5УзРФА Микробиология институти, Тошкент, Узбекистан, 6Бухоро Давлат

Университети, Бухоро, Узбекистан https://doi.org/10.5281/zenodo.11241581 Аннотация. Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter ludwigii, Enterobacter cloacae ва Rahnella aquatilis каби штаммлари LPEM2 минерал озица мущтида ПЭТ (полиэтилентерефталат) ва ПЭ (полиэтилен) ни парчалаш жараёнига микроэлементлардан Fe, Cu, Mo, Mn ва B таъсири урганилди. Бунда энг юцори биодеградация E. ludwigii штамми Mn2+ катиони таьсирида ПЭТ массасини 0,62 % камайтириши кузатилди. R. аquatilis штаммида Fe2+ катиони таьсирида 0,3%, P. aeruginosa штамми Mn2+ таьсирида 0,51%, P. putida штамми энг куп ПЭТпарчалаши Fe2+ катиони таъсирида 0,32% деградация булганлиги аницланди. Тадцицотда ПЭ нинг энг юцори биодеградация P. putida штамми B3+ ва Mn2+ катионлари таъсирида булганлиги кузатилиб, ПЭ массасини мос равишда, 0,84 % ва 0,41% камайтириши цайд этилган. E.ludwigii штамми Zn2+ катиони таъсирида 0,51% деградация булганлиги аницланди. УБ спектрофотометр натижаларидан олинган маълумотларда, P.putida штамми В3+ катиони цулланилганда назоратга нисбатан (7,18 баробар куп) органик моддалар %осил цилганлиги аницланди. Raquatilis штамми эса Fe2+ ва Mn2+ катионлари тасирида мос равишда 4,25 ва 4,56 марта куп органик моддалар %осил цилиши цайд цилинди.

Калит сузлар: полиэтилен (ПЭ), полиэтилентерефталат (ПЭТ),

микроэлементлар, УВ-спектрофотометр, биопарчаланиш.

Аннотация. Изучено влияние микроэлементов Fe, Cu, Mo, Mn и B на разложение ПЭТ (полиэтилентерефталата) и ПЭ (полиэтилена) в минеральной питательной среде LPEM2 штаммами Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter ludwigii, Enterobacter cloacae и Rahnella aquatilis. Установлено, что штамм E. ludwigii снижает массу ПЭТ на 0,62% под действием катиона Mn2+. Определено, что штамм R aquatilis уменьшает весь ПЭ на 0,3% под влиянием катиона Fe2+, штамм P. aeruginosa - 0,51% под влиянием Mn2+, а штамм P. putida имел наибольшую деградацию ПЭТ под действием катиона Fe2+ - 0,32%. В ходе исследования было отмечено, что наибольшая биодеградация ПЭ происходила под действием катионов B3+ и Mn2+у штамма P. putida, которые снижали массу ПЭ на 0,84% и 0,41% соответственно. Установлено, что штамм E.ludwigii деградирует ПЭ на 0,51% под действием катиона Zn2+. По данным, полученным по результатам УФ-спектрофотометра, установлено, что штамм P. putida продуцирует органических веществ (в 7,18 раза больше), чем контроль, при внесении катиона В3+. Отмечено, что штамм Raquatilis продуцировал в 4,25 и 4,56 раза больше органических веществ под действием катионов Fe2+ и Mn2+ соответственно.

Ключевые слова: полиэтилен (ПЭ), полиэтилентрифталат (ПЭТ), микроэлементы, УФ-спектрофотометр, биодеградация.

Abstract. The influence of trace elements Fe, Cu, Mo, Mn and B on the decomposition of PET (polyethylene terephthalate) and PE (polyethylene) in the mineral nutrient medium LPEM2 by strains of Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonasputida, Enterobacter ludwigii, Enterobacter cloacae and Rahnella aquatilis was studied. It was found that the E. ludwigii strain reduces the weight of PET by 0.62% under the influence of the Mn2+ cation. It was determined that the R aquatilis strain reduces the entire PET by 0.3% under the influence of the Fe2+ cation, the P. aeruginosa strain - 0.51% under the influence of Mn2+, and the P. putida strain had the greatest degradation of PET under the influence of the Fe2+ cation - 0.32 %. During the study, it was noted that the greatest biodegradation of PE occurred under the influence of B3+ and Mn2+ cations in the P. putida strain, which reduced the weight of PE by 0.84% and 0.41%, respectively. It was found that the E.ludwigii strain degrades PE by 0.51% under the influence of the Zn2+ cation. According to the data obtainedfrom the results of a UV spectrophotometer, it was found that the P. putida strain produces organic substances (7.18 times more) than the control when the B3+ cation is added. It was noted that the R.aquatilis strain produced 4.25 and 4.56 times more organic substances under the influence of Fe2+ andMn2+ cations, respectively.

Keywords: polyethylene (PE), polyethylene triphthalate (PET), trace elements, UV-spectrophotometer, biodegradation.

Полиэтиленнинг биодеградациясида иштрок этувчи микроорганизмлар х,озирги кунгача урганилиб келинмокда. Бунга сабаб анъанавий деградация усуллари билан солиштирганда, биодеградация нархининг арзонлиги, атроф мух,итга захдрли газ ва бирикмалар ажратмаслигидир [1]. ПЭ ни биопарчаланишида куп жихдтдан организмлар томонидан ишлаб чикариладиган ферментларнинг фаоллигига богликдир. Ферментлар фаоллиги уларнинг фаол марказида жойлашган ёки уларни бошка биокимёвий йуллар билан (кофактор сифатида) таъсир килувчи темир, мис, молибден, марганец, калцтй, хлор, натрий, магний, бор, рух, кадмий каби микроэлеменларга богликдир [2]. Айникса рух, темир, марганец металлари ПЭ ни ташки юзасини оксидловчи лакказа, марганец пероксидаза ва лигнин пероксидаза фаоллигини ошириши буйича тадкикотлар бажарилгандир [3]. Суюк азот билан чекланган мух,итда 12 кун давомида етиштирилган ок рангли чиритувчи замбуруг Pleurotus ostreatus га мис (0,5-5 мМ) ёки кадмий (1-5 мМ) кушилиши лакказанинг фаоллигини таъсир килган. Бунда 2 мМ Cd кушилиши фаолликни 18,5 мартага, 1 мМ Cu кушилиши эса фаолликни саккиз мартага оширганлиги аникланган. 12 кундан кейин (Cu) ва (Cd) лакказанинг фаоллигини камайишини курсатган. Ag, Hg, Pb, Zn ва H2O2 каби моддалар лакказа фаоллигини камайишига таъсир килган. Махдллий ферментларга таъсирини урганиш учун тозаланган лакказа ферменти билан Cd, Cu ва Hg металлари инкубация килинган. Натижада Hg кушилиши лакказанинг фаоллигини дарх,ол камайтирди ва шу билан бирга ферментнинг вактинчалик баркарорлигини х,ам пасайтирди, аксинча Cu (0,05-50 мМ) кушилиши эса фермент фаоллигини ва баркарорлигини оширган. Сомондан олинган микроорганизмлар колонизациясининг турли боскичларида олинган лакказа ферментига огир металларнинг таъсири фаркланган [4],[8]. Фенолоксидаза ферментларининг фаоллигига метал ионларининг (Cu 2+ , Zn 2+ , Mg 2+ , Ca 2+) таьсирини куриб чикилган бунда Cu 2+ ва Mg 2+ контсентратсияси мос равишда 10 -3 ва 10 -2 мол/Л дан паст булганда ва ферментнинг фаоллиги энг юкори (182,14% ва 141,02%) булганлиги

кузатилган [5]. Юкоридаги фикрлардан келиб чиккан х,олда ушбу тадкикот ишида ПЭ ва ПЭТ бактериялар ёрдамида биопарчаланишида микроэлементларнинг таъсири урганилди.

Ушбу тадкикотнинг максади бактерия штаммлари фаолияти натижасида пластик турларини парчаланишига энг мух,им омиллардан бири булган микроэлементларнинг таъсирини урганишдан иборат.

Тадкикот учун олинган Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter ludwigii, Enterobacter cloacae ва Rahnella aquatilis каби штаммлари ПЭ ва ПЭТ (полиэтилентерефталат) ни парчалаш жараёнига микроэлементлардан Fe2+, Cu2+, Mo2+, Mn2+ ва B3+ таъсири урганилди. ПЭ ва ПЭТ ни 75% этанолда стерилизация килинди ва кейин ламинар боксдаги х,аво окими билан куритилди. Бактериялар купрок биомасса олиш учун олдин озика элементларига бой булган суюк LB Broth (Miller) озика мухитида 3 кун давомида устирилди. Усган биомасса дистилланган сув билан 6000 айланма/дакика центрифуга килиниб ювиб олинди. Сунгра културалар пробиркаларга ПЭ ва ПЭТ парчаси солинган модификацияланган LPEM2 (ASTM G22-76, 1996) озика мух,итида 30 кун давомида 30 oC хдроратли тебратгичда устирилди [6]. Модификацияланган LPEM2 озика мух,ити куйидагича тайёрланади: 900 мл дистилланган сувга NHNO3-1,0 г; MgS047H20-0,7 г; (NH4)2SO4-1,0 г; MgS047H20-0,7 г; микроэлемент-1мл; (100 мл микроэлемент тайёрлаш учун NaCl-0,5 г; ZnSO47H2O -0,2 г; Fe EDDHA-0,2 г; CuSO45H2O-0,2 г; MnSO4H2O -0,1 г.) кушилди. Фосфат буфери учун 100 мл дистилланган сувга KH2PO4 -0,7 г; K2HPO4-0,7 г кушилади; pH-6,5. Назорат сифати LPEM2 озика мух,итига факат ПЭ ва ПЭТ кушилди. Озика мухитлари 20 дакика 121 ° C да автоклав килинди. Озика мухитлари совигандан сунг 900 мл LPEM2 га 100 мл фосфат буфери кушилди. 30 кун усгандан сунг LPEM2 мух,итидан ПЭ ва ПЭТ ажратиб электрон тарозида огирлиги улчанди, културал суюклиги эса органик моддалар х,осил булганлигини аниклаш учун УБ-спектроскопия килинди [7]. УБ-спектрлари Specord 210 UV-Vis (Analytik Jena, Германия)

спектрофотометрида диаметри 1 см ли кварцли кюветларда кайд этилди. Сканерлаш сохдси 190-800 нм, тиркиши 1 нм, тезлиги 5 нм/с.

1-жадвал.

Бактерия штаммларининг ПЭТ массасига таъсири

Микроэлемент кушилган штаммлар Дастлабки ПЭТ уртача массаси (мг) Тажрибадан сунг уртача масса (мг) ПЭТ нинг массаси узгариши (мг) Масса камайиши %

E. cloacae Zn2+ 239,43 238,56 -0,87 0,36 ±0.003

R. aquatilis Zn2+ 289,67 289,06 -0,61 0,21 ±0.005

P. putida Zn2+ 272,87 272,43 -0,44 0,16 ±0.005

P. aeruginosa Zn2+ 305,53 305,2 -0,33 0,108 ±0.004

E. ludwigii Zn2+ 268,5 268,37 -0,13 0,048 ±0.001

P. aeruginosa Fe2+ 298,63 297,63 -1 0,33 ±0.008

P. putida Fe2+ 287,03 286,1 -0,93 0,32 ±0.012

R. aquatilis Fe2+ 239,47 238,73 -0,74 0,309 ±0.003

E. cloacae Fe2+ 265,97 265,23 -0,74 0,28 ±0.009

E. ludwigii Fe2+ 246,6 246,17 -0,43 0,17 ±0.004

E. ludwigii Mo2+ 285,1 284,1 -1,0 0,35 ±0.005

P. putida Mo2+ 216,63 216,13 -0,5 0,23 ±0.008

E. cloacae Mo2+ 277,67 277,13 -0,54 0,19 ±0.004

R. aquatilis Mo2+ 308,97 308,5 -0,47 0,15 ±0.001

P. aeruginosa Mo2+ 278,57 278,3 -0,27 0,096 ±0.007

E. ludwigii Mn2+ 279,3 277,56 -1,74 0,62 ±0.009

P. aeruginosa Mn2+ 277,57 276,16 -1,41 0,51 ±0.003

R. aquatilis Mn2+ 287,47 287,06 -0,41 0,14 ±0.007

E. cloacae Mn2+ 315,63 315,33 -0,3 0,095 ±0.001

P. putida Mn2+ 290,37 290,56 +0,19 +0,06 ±0.003

P. putida B3+ 241,13 240,66 -0,47 0,19 ±0.002

P. aeruginosa B3+ 227,1 226,7 -0,4 0,18 ±0.006

R. aquatilis B3+ 349,43 348,93 -0,5 0,14 ±0.008

E. cloacae B3+ 236,63 236,9 +0,27 0,11 ±0.015

E. ludwigii B3+ 252,67 252,66 -0,01 0,004 ±0.005

1-жадвалдан куриниб турибдики, энг юкори биодеградация E. ludwigii штамми Mn2+ катиони таъсирида ПЭТ массасини 0,62 % га камайтириши кузатилди. Шу вактнинг узида E. ludwigii штамми, Zn2+, Fe2+, Мо2+, B3+ катионларида эса мос равишда 0,048%, 0,17%, 0,35% ва 0,004% га ПЭТ вазнини камайишига олиб келди. R. аquatilis штамми Zn2+, Fe2+, Мо2+, Mn2+, B3+ катионлари тасирида ПЭТ массасини мос равишда 0,21%, 0,309%, 0,15%, 0,14% ва 0,14% га камайтириши кузатилди. P. aeruginosa штамми эса Zn2+, Fe2+, Мо2+, Mn2+, B3+ ПЭТ ни парчалашда мос равишда 0,108%, 0,33%, 0,096%, 0,51% ва 0,18% ни ташкил килганлиги аникланди. Бунда P. aeruginosa штаммини ПЭТ парчалашида Zn2+ катионлари ижобий таъсир килганлиги кайд этилди. P. putida штамми энг куп ПЭТ парчалаши Fe2+ катиони таъсирида х,осил булганлиги ва 0,32% деградация булганлиги аникланди. Долган Zn2+, Мо2+ ва B3+ каби микроэлементларда мос равишда 0,16 %, 0,23%, 0,19% ПЭТ вазни камайганлиги тадкик этилди. Лекин P. putida штамми Mn2+ микроэлементи билан устирилганда ПЭТ ни умуман вазни узгармаганлиги тахлил килинди. E. doacae штаммида эса ПЭТ ни огирлиги энг куп камайганлиги Zn2+ катиони таъсирида х,осил булган булса (0,36%), Mn2+ катионлари таъсирида эса ПЭТ ни энг кам вазни камайганлиги кузатилди. E. doacae штаммини колган Fe2+, Мо2+, B3+ микроэлементлар билан ПЭТ кушиб устирилганда, мос равишда 0,28%, 0,19% ва 0,11% ПЭТ вазни камайганлиги ва биодеградацияга учраганлигини аникланди. Шуни айтиш лозимки, урганилган металлар орасида уртача ПЭТ ни биопарчаланиши марганец (уртача 0,285%) катионлари кушилган озика мух,итида кузатилди.

Чунончи, такрорий 5 марта улчанган баъзи ПЭТ намуналарида масса ошганлиги кузатилди. Бу бактерия изолятларининг метаболитлари ПЭТ га шимилиб ёпишганлиги билан боглик булиши мумкин.

Кейинги тадкикот ишида турли микроэлементлар таъсирида P. aeruginosa, P. putida, R. аquatilis, E. ludwigii ва E. cloacae штаммларининг ПЭ ни биодеградация килиши урганилди (2-жадвал). Бунда, назорат учун културасиз микроэлементлардан фойдаланилди.

2-жадвал

Бактерия штаммларининг ПЭ массасига таъсири

Микроэлемент кушилган штаммлар Дастлабки ПЭ уртача массаи (мг) Тажрибадан сунг уртача масса (мг) ПЭ нинг массаси узгариши (мг) Масса узгариши %

E. ludwigii Zn2+ 98,5 98 0,5 0,51 ±0.002

R. aquatilis Zn2+ 52,93 52,83 0,1 0,19 ±0.004

P. putida Zn2+ 106,17 106,3 0,13 0,12 ±0.003

E. cloacae Zn2+ 114,23 114,66 0,43 0,37 ±0.001

P. aeruginosa Zn2+ 88,2 88,6 +0,4 +0,45 ±0.005

R. aquatilis Mo2+ 41,67 41,5 0,16 0,4 ±0.009

E. ludwigii Mo2+ 51,6 51,5 0,1 0,19 ±0.014

P. aeruginosa Mo2+ 111,3 111,36 0,07 0,06 ±0.001

E. cloacae Mo2+ 111,2 111,26 0,07 0,06 ±0.001

P. putida Mo2+ 71,1 71,33 0,23 0,33 ±0.006

P. putida Mn2+ 90,33 89,96 0,37 0,41 ±0.003

E. cloacae Mn2+ 87,13 87,13 0 0

E. ludwigii Mn2+ 104,5 104,5 0 0

R. aquatilis Mn2+ 98,13 98,2 0,07 0,07 ±0.008

P. aeruginosa Mn2+ 105,27 105,46 0,2 0,19 ±0.004

P. putida B3+ 94,8 94 0,8 0,84 ±0.004

E. cloacae B3+ 103,6 103,4 0,2 0,19 ±0.007

E. ludwigii B3+ 103,23 103,3 0,07 0,06 ±0.006

R. aquatilis B3+ 102,07 102,36 0,3 0,29 ±0.019

P. aeruginosa B3+ 89,73 90,03 0,3 0,33 ±0.003

E. cloacae Fe2+ 94,33 94,2 0,13 0,14 ±0.004

P. aeruginosa Fe2+ 102,8 102,7 0,1 0,1 ±0.007

R. aquatilis Fe2+ 94,47 94,4 0,07 0,07 ±0.005

E. ludwigii Fe2+ 107,8 107,9 0,1 0,09 ±0.008

P. putida Fe2+ 78,73 79,03 0,3 0,38 ±0.006

2-жадвалдан куриниб турибдики, энг юкори биодеградация P. putida штамми B3+ катиони тасирида ПЭ массасини 0,84 % камайтириши кузатилди. Шу вактнинг узида P. putida штамми Zn2+, Fe2+, Мо2+, Mn2+ катионларида эса мос равишда 0,12%, 0,38%, 0,33% ва 0,41% ПЭ вазнини камайишига олиб келди. R aquatilis штамми Zn2+, Fe2+, Мо2+, Mn2+, B3+ катионлари тасирида ПЭ массасини мос равишда 0,19%, 0,07%, 0,4%, 0,07% ва 0,29% га камайтириши кузатилди. P. aeruginosa штамми эса Fe2+, Мо2+, Mn2+, B3+ ПЭТ ни парчалашда мос равишда 0,1%, 0,06%, 0,19% ва 0,33% ни ташкил килганлиги кузатилди. Бунда P. aeruginosa штаммини ПЭ парчалашида Zn2+ катионлари умуман таъсир килмаганлиги кайд этилди. E. ludwigii штамми энг куп ПЭ парчалаши Zn2+ катиони таъсирида х,осил булганлиги ва 0,51% деградация булганлиги аникланди. Долган Fe2+, Мо2+ ва B3+ каби микроэлементларда мос равишда 0,09%, 0,19%, 0,06% га ПЭ вазни камайганлиги кузатилди. Лекин E. ludwigii штамми Mn2+ микроэлементи билан устирилганда ПЭ ни умуман вазни узгармаганлиги тахлил килинди. E. cloacae штаммида эса ПЭ ни огирлиги энг куп камайганлиги Zn2+ катиони таъсирида х,осил булган булса (0,37%), Mn2+ катионлари таъсирида эса ПЭ ни вазни камаймаганлиги кузатилди. E. cloacae

штаммини колган Fe2+, Mo2+, B3+ микроэлементлар билан ПЭ кушиб устирилганда, мос равишда 0,14%, 0,06% ва 0,19% ПЭ вазни камайганлиги ва биодеградацияга учраганлигини аникланди. Шуни айтиш лозимки, урганилган металлар орасида уртача ПЭ ни биопарчаланиши B3+ (уртача 0,342%) катионлари кушилган озика мухитида кузатилди.

УБ спектрофотометр натижаларидан олинган маълумотларни математик MathCAD дастурида х,исобланганда, агар назорат вариантида (бактериясиз озика мух,итига солинган ПЭ) ПЭ парчаланишини органик бирикмаларни 1 га тенг деб х,исобласак, маълум бир тулкин узунликлардаги фоизлар назоратга нисбатан неча баробар куп ПЭ парчаланиш мах,сулотлари эканлигини билдиради.

3-жадвал

Бактерия штаммларини таъсирида ПЭ парчаланишида х,осил булган органик моддалар УБ-спектроскопияси

Микроэле-элементлар Назорат културасиз кулланилган бактерия штаммлари

P.aeruginosa P.putida E.ludwigii E.cloacae R.aquatili s

Zn2+ 1 1,57 2,86 3,71 1,43 1,43

Fe2+ 1 1,81 1,54 2,35 1,25 4,25

Mo2+ 1 3,31 1,68 2,54 2,14 2,14

Mn2+ 1 2,95 4,31 0,41 0,12 4,56

B3+ 1 1,49 7,18 1,87 2,01 2,01

Тажрибада кулланилган бактерия штаммлари орасида 190 ва 550 нм тулкин узунликлари оралигида контролга нисбатан энг юкори парчаланиш P.putida бактерия штамми В3+ катиони кулланилганда (7,18 баробар куп) органик моддалар х,осил килганлиги аникланди. Мазкур штамм Mn2+ катиони кулланилганда 4,31 баробар куп органик моддалар х,осил килган. R.aquatilis штамми эса Fe2+ ва Mn2+ катионлари тасирида мос равишда 4,25 ва 4,56 марта куп органик моддалар х,осил килиши кайд килинди (3-жадвал).

Шундай килиб, бактериялар ёрдамида пластикларни парчалашида микроэлементлар таъсири борлиги аникланди. Турли микроорганизмлар усиш даврида турлича микдорда метаболитлар х,осил килиши натижасида, бу метаболитларни ПЭ деградацияси учун микроэлементлар х,ар хил таъсир килиши туфайли пластикларни парчаланиши х,ам фаркланишини курсатди. Бу микроэлементлар пластикларни парчаланишида иштирок этувчи ферментларнинг фаол марказида булиши ёки кофактор сифатида иштирок этиши натижасида пластикларни тезрок оксидланиши х,исобига фаол парчаланишига олиб келиши мумкин.

REFERENCES

1. Patrick L. (2006) Lead Toxicity, a review of the literature. Part I: Exposure, Evaluation, and treatment// Altern. Med. Rev., 11(1). P. 2-22.

2. Knezevic А, Biljana Blazekovic, Marija Kindl, Jelena Vladic, Agnieszka D Lower Nedza, Adelheid H Brantner. (2014) Acetylcholinesterase inhibitory, antioxidant and phytochemical properties of selected medicinal plants of the Lamiaceae family. J Molecules P 767-782 Publisher MDPI.

3. Mohanan N, Montazer Z, Sharma PK, Levin DB. Microbial and Enzymatic Degradation of Synthetic Plastics. Front Microbiol. 2020 Nov 26;11:580709. doi: 10.3389/fmicb.2020.580709. PMID: 33324366; PMCID: PMC7726165.

4. Petr Baldrian, Jiri Gabriel. (2002) Copper and cadmium increase laccase activity in Pleurotus ostreatus// FEMS Microbiology Letters. Volume 206, Issue 1, 2. P. 69-74. https://doi.org/10.1016/S0378-1097(01)00519-5.

5. Yanfang Lv, Qianqian Liang, Ying Li, Xuepeng Li, Xinxin Liu, Defu Zhang, Jianrong Li. Effects of metal ions on activity and structure of phenoloxidase in Penaeus vannamei. International Journal of Biological Macromolecules,(2021), P.207-215, ISSN 0141-8130, https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2021.01.112.

6. Talkad M. S., Maria S., Raj A. and Javed A. Microbial Degradation of Plastic (LDPE) & domestic waste by induced mutations in Pseudomanas putida International//Journal of Ethics in Engineering & Management Education (2014). 1(5). P. 2348-4748.

7. Mahdiyah D., Mukti B. H. Isolation of Polyethylene Plastic Degrading-Bacteria Biosci. Inter. (2013). 2(3) P. 29-32.

8. Gaetke L.M., Chow C.K. (2003) Copper toxicity, oxidative stress, and antioxidant nutrients// Toxicology J., 189. P. 147-163.